(1) Notiuni de microscopie optica

Notiuni de microscopie optica

Microscopul optic (microscopul fotonic cu fond clar) (MO)Microscopul este un aparat optic care utilizeaza radiatiile luminoase si da o imagine inversata si mult marita, virtuala sau reala, a obiectelor preparate intr-un mod adecvat.

Microscopul este format dintr-un dispozitiv sau sistem optic si dintr-o parte mecanica care alcatuieste stativul cu partile sale constitutive si anexele sale.

Observati figura:http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/3/3a/Optical_microscope_nikon_alphaphot.jpgPentru microscopul din imaginea din link-ul de mai sus:

(1) oculare(2) revolver (contine obiectivele)(3) obiective(4) macroviza(5) microviza(6) masa (platina) microscopului(7) sursa de lumina: bec electric (sursa de lumina artificiala) sau oglinda mobila (primeste

lumina naturala sau artificiala)(8) condensator (condensor) si diafragma iris(9) carul mobil (dispozitivul de deplasare al lamei)

Modul de formare a imaginii la MO• Obiectivul formeaza in partea superioara a tubului microscopului o imagine reala, rasturnata

si marita a preparatului microscopic;

• Ocularul preia imaginea formata de obiectiv si ofera celui care examineaza la microscop o imagine finala, care este o imagine virtuala, rasturnata si mult marita.

Pe obiective este notata puterea lor de marire si apertura numerica. Puterea de marire a obiectivelor variaza intre 4× si 100×, iar apertura numerica variaza intre 0,10 si 1,25. Pentru puteri de marire mari se folosesc obiective cu imersie, in acest caz intre obiectiv si preparat se interpune un lichid (ex. ulei de imersie, glicerina sau apa) avand un indice de refractie apropiat de al sticlei realizand o legatura omogena intre obiectiv si preparat.

Puterea de mărire a MO = produsul dintre puterea de marire a obiectivului si cea a ocularului.Puterea de marire maxima este: obiectiv 100× × ocular 15× = 1500

Puterea de rezoluţie a MO: puterea de rezolutie (puterea de a pune în evidenţă) este data de distanta minima necesara dintre doua puncte pentru ca sa fie vazute separat; puterea de rezolutie variaza invers proportional cu distanta dintre puncte. (a se vedea calculul bazat pe formula lui Abbé din Lp “Notiuni de microscopie electronica”)

Unitati de masura folosite in mod curent in microscopie : μm = 10-6 mnm = 10-9 mÅ = 10-10 m

1 μm = 103 nm = 104 Å

1

(1) Notiuni de microscopie optica

Microscopul cu camp intunecatUn disc opac este plasat sub lentilele condensorului, astfel incat doar lumina laterala ajunge la ochiul privitorului. In loc sa treaca prin preparat, lumina este reflectata de particulele din preparatul microscopic. Campul din jurul probei (unde nu exista particule care sa imprastie lumina) ramane in general intunecat.http://en.wikipedia.org/wiki/File:Dark_Field_Microscope.pnghttp://www.bing.com/images/search?q=dark+field+microscope+treponema&view=detail&id=187E25A3ED22C11EDD7176C0AF7DC85A08E264F2&first=0&FORM=IDFRIR(imaginea din link-ul de mai sus arata agenul patogen al sifilisului Treponema pallidum)

Microscopul cu contrast de fazăLumina care trece prin medii cu indici de refractie diferiti1 isi modifica directia si viteza, microscopul cu contrast de faza foloseste mijloace optice pentru a transforma aceste diferente in diferente de intensitate luminoasa. Structurile cu indici de refractie mai mari decat ai zonelor vecine apar intunecate, in timp ce structurile ai caror indici de refractie sunt mai mici apar mai clare in campul microscopic.Microscopul cu contrast de faza are o importanta deosebita, facand posibil studiul celulelor vii (nefixate si necolorate).http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/7/7e/Cheek_cell_phase_contrast.jpg(imaginea arata o celula epiteliala din mucoasa bucala in microscopie cu contrast de faza)

Microscopul cu interferenţă

1Indicele de refractie este o masura a densitatii optice a unei structuri, respectiv a vitezei cu care este traversata de unda luminoasa.

2

(1) Notiuni de microscopie optica

Microscopul cu interferenta clasic mai foloseste inca o raza de lumina care nu traverseaza tesutul analizat, dar interfera cu raza provenita de la sursa de lumina. Ofera informatii utile in detectarea densitatii obiectului analizat.

Microscopul de tip NomarskiEste un tip modificat al microscopului cu contrast de faza, oferind imagini pseudo-tridimensionale.http://www.bing.com/images/search?q=normaski+nematode&view=detail&id=71675012AE8D59C02296EAA24509C9E4AB5298BD&first=0&FORM=IDFRIR(in imaginea din link-ul de mai sus este nematodul Caenorhabditis elegans)

Microscopul ranversatSe foloseste pentru a studia celule din flacoane sau placi Petri. Obiectivele sunt sub masuta, sursa de lumina este situata deasupra.http://www.labshop.ro/Optic/Microscoape%20inverse.html

3