7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

1/17

MICROSCOPIE

ELECTRONICA

1

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

2/17

puterea cea mai mare de rezoluie

a unui microscop optic = 0,2

2

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

3/17

Principiul M.E.

1924 De Broglie - comportareadualist unda - corpuscul a

particulelor ncrcate electric .

D = / N x sin

=h /M * v

3

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

4/17

4

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

5/17

Microscopul electronic detransmisie

5

tunul electronic estesursa electronilor deinalta energie, lentile

electromagnetice, camera in care se

introduce preparatul lentila proiector ecranul fluorescent pe

care se formeazaimaginea.

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

6/17

Principiul MET

Electronii care strbat preparatul suntdeviai n funcie de grosimea idensitatea preparatuluistructurile mai dense vor produce ungrad mai mare de dispersie a

electronilor zone electronodense,

mai ntunecatestructurile mai subiri vor permite o

treceremai uoar a electronilor

zone electronoclare6

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

7/17

Interactiunea electroni-preparat

7

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

8/17

Caracteristicile M.E.

Puterea de mrirePuterea de rezolutie

Puterea maxima de marire utilaeste de aproximativ 1 milion de ori.

8

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

9/17

Caracteristicile M.E.

Puterea de rezoluie Teoretic, puterea maxima de

rezolutie=1- 2 .

1 = 10-10 mPractic , puterea de rezolutie este

de 1/ 10 din grosimea sectiuniiexaminate ~ 60 .

9

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

10/17

Caracteristicile M.E.

Numai pentru preparatulmicroscopic permanent!

Imaginea finala este

MONOCROMA

zone electronodense si

electronoclare10

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

11/17

11

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

12/17

ETAPE

Recoltare FixareDeshidratareClarificare

Impregnare

IncluzieSectionareDiferentierea

structurilor prin

contrastareMontare pe

grila12

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

13/17

Criterii pentru aprecierea uneiimagini corecte

Absena spaiilor astructurate Continuitatea membranelor Aspectul particular al unor organiteAspectul general este acelai de fiecare

dat, indiferent de fixatorul sau metoda

folosit

13

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

14/17

MICROSCOAPE ELECTRONICE

Microscopul electronic cu baleiaj sauscanning. imagini tridimensionale ale suprafetelor

celulelor, tesuturilor sau chiar a organeloracelai principiu al interaciunii cu un

fascicul de electroni importani pentru obinerea imaginii sunt

electronii reflectai pe suprafaapreparatului

14

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

15/17

MICROSCOPIE DE BALEIAJ

15

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

16/17

Ingheare - fracturare

Permite vizualizarea suprafeelor

rezultate prin clivajul anumitor structuri

(ex: clivajul membranei celulare)se realizeaz un mulaj metalic sau de

carbon

16

7/31/2019 LP 3 - Microscopie electronica

17/17

Ingheare - fracturare

17