Microbiota cailor aeriene superioare :

LP 12. Identificarea streptococilor hemolitici.

Examenul bacteriologic al exsudatului faringian

Obiective. La sfritul lucrrii practice studenii vor fi capabili s:

1) descrie etapele de identificarea a streptococilor hemolitici; 2) prezinte modalitile de prelevare al exsudatului faringian;3) precizeze care sunt agenii etiologici implicai n producerea anginelor;4) prezinte etapele examenului bacteriologic al exsudatului faringianIdentificarea streptococilor hemoliticiA. Identificarea prezumptiv1. Caractere microscopice coci Gram-pozitivi, sferici dispui predominant n lanuri lungi, izolat sau n perechi (n special n cazul frotiurilor din mediile lichide i produse patologice) 2. Caractere de cultur

pretenioi nutritiv, facultativ anaerobi

colonii mari nconjurate de o zon clar de hemoliz apar n cazul grupelor A, C, G

tulpinile care nu produc streptolizin S formeaz colonii -hemolitice n aerobioz i hemolitice n anaerobioz.3. Teste biochimice 1.Testul catalazei difereniaz streptococii de stafilococi.2. S.pyogenes i S agalactiae pot fi difereniai ntre ei i de steptococii nonA- nonB prin2.1 Testul de sensibilitate la bacitracin i la asociaia sulfametoxazol trimetoprim

Testarea sensibilitatii laGrup AGrup B

Non grup A si B

( C,G,F)

Bacitracinsensibilrezistentrezistent

sulfametoxazol trimetoprimrezistent rezistentsensibil

2.2 Testul CAMP- pentru identificarea S.agalacitae, S canis, S porcinusPrincipiu - majoritatea streptococilor de grup B produc o protein difuzibil (factorul CAMP) care acioneaz sinergic cu B lizina stafilococic i determin liza complet a hematiilor din mediul de cultur.B. Identificarea definitiv1. Identificare antigenic (depistarea polizaharidului C parietal, prin teste de aglutinare: coaglutinare sau latexaglutinare) folosind cultura. Examenul bacteriologic al exsudatului faringian

(examenul de rutin al exsudatului faringian vizeaz evidenierea streptococilor beta hemolitici)1.Microbiota indigen a cilor aeriene superioare :- orofaringele cuprinde mai mult de 200 de specii diferite; dintre facultativii anaerobi cei mai frecveni sunt streptococii viridans.3. Etiologia anginelor: Viral n 70% din cazuri

Bacterian (30%):S. pyogenes, Streptococi grup C si G,

C. diphtheriae,

Arcanobacterium haemolyticum,

Neisseria gonorrhoeae.4. Recoltarea exsudatelor faringiene:

-Materiale necesare: tampon steril, apstor de limb, surs de lumin, masc.-Indicaii: diagnosticul faringitelor streptococice, diagnosticul altor angine bacteriene, confirmarea suspiciunii de difterie, depistarea portajului S. pyogenes, C. diphtheriae. -Transportul i conservarea: tamponul faringian trebuie prelucrat n maxim 3 ore de la prelevare. Dac se temporizeaz prelucrarea este necesar folosirea unui mediu de transport. 5. Metode rapide- nlocuiesc cultura doar cnd rezultatul este pozitiv; -depistare antigenului parietal de grup A direct n produs patologic (pentru S. pyogenes direct n tamponul faringian)6. Cultivarea:

Se descarc tamponul pe geloz snge i se epuizeaz cu ansa n cele 4 cadrane apoi se secioneaz mediul pentru a crea condiii microaerofile.Incubare: 24 ore la 37 CCitirea culturilor: se urmresc coloniile hemolitice (colonii mici nconjurate de o zon larg de hemoliz clar).7. Identificarea streptococilor hemolitici ( A, C, G)8. Antibiograma : S. pyogenes i-a pstrat nemodificat sensibilitatea la penicilin. Antibiograma se face pentru testarea sensibilitii la macrolide i clindamicin doar pentru pacienii cu sensibilizare la penicilin. Comunicarea rezultatului:

prezent streptococ hemolitic grup A sau C sau G absent streptococ hemolitic.n sal se gsesc:

1. Cultura steptococ beta hemolitic pe geloz snge

2. Testul de sensibilitate la Bacitracina i Biseptol.3. Frotiuri cultur streptococ

4. Testul catalazei: apa oxigenat, lame, beioare, pipetPAGE 1