Aran

jare

Pow

erPo

int:

Ant

onel

-Aur

el Il

ie

LISTA COLABORATORILOR

Catedra de Microbiologie, U.M.F. Gr. T. Popa Iai DANIELA BOSNEA ef de lucrri universitar, doctor medic DUMITRU BUIUC Profesor universitar, doctor medic GABRIELA COMAN Profesor universitar, doctor medic MARIA DAN Preparator universitar, medic OLIVIA DORNEANU ef de lucrri universitar, doctor medic ROXANA FILIP ef de lucrri universitar, doctor medic DRAGO FLOREA Asistent universitar, medic LUMINIA SMARANDA IANCU Confereniar universitar, doctor medic CARMEN PNZARU Confereniar universitar, doctor medic IRINA POPOVICI Preparator universitar, medic ANA VORNICU Preparator universitar, medic

Fig. 2-1:

Coloraia Gram

Principiu: Dup colorare cu violet de metil i mordanare cu soluie iodo-iodurat (Lugol) unele bacterii rezist la decolorarea cu alcool i rmn violete (sunt grampozitive), altele se decoloreaz i le putem recolora n rou cu fucsin (sunt gramnegative). Comportamentul diferit al bacteriilor n coloraia Gram l numim afinitate tinctorial.

Indicaii: aspectul morfotinctorial al bacteriilor n coloraia diferenial Gram este caracter taxonomic primar util pentru clasificarea preliminar a bacteriilor urmrii partea dreapt a figurii).

Procedura (urmrii partea stng a figurii): A. Colorare un minut cu soluie 0,2% violet de metil. Splare cu

ap de robinet. B. Mordanare 2 minute cu soluie Lugol. C. Decolorarea cu alcool-aceton este timpul cheie al coloraiei.

Alcoolul decoloreaz rapid. Adaosul de aceton n proporie de 1/3 face reactivul mai uor de manipulat i permite decolorarea (diferenierea) optim n 5 secunde pentru frotiurile subiri (e.g. din culturi) i 10-15 secunde pentru cele mai groase (e.g. din prelevate patologice).

D. Recolorare cu fucsin fenicat Ziehl diluat 1/10.

Fig. 2-2: Controlul de calitate

al coloraiei Gram Utilizm un frotiu efectuat dintr-o suspensie cu densi-tatea 3 Mc Farland din cultura peste noapte pe agar nutritiv a Escherichia coli ATCC 25922 i Bacillus megaterium.

a. Frotiu martor corect difereniat: bacilli gram-negativi i gram-pozitivi. b. Frotiu martor insuficient difereniat: numai bacilli gram-pozitivi (subdecolorat). c. Frotiu martor supradecolorat: numai bacili gramnegativi. d. Frotiu din produs patologic corect difereniat: leucocite roii i coci gram-pozitivi.

Fig. 2-3: Coloraia Ziehl-Neelsen

Principiu: bacilii al cror perete are asociat peptido-glicanului acizi micolici cu caten lung i micozide se coloreaz numai n condiii speciale (la cald cu soluie concentrat de fucsin fenicat) i rezist la decolorarea cu soluii de acizi minerali i alcool. Ca atare, i numim bacilli acido-alcoolo-rezisteni (baar).

Indicaii: diferenierea baar de bacteriile neacido-rezisten-te (urmrii partea dreapt a figurii).

Procedura (urmrii partea stng a figurii).

A. Colorare cu fucsin fenicat Ziehl, la cald. La sfritul acestui timp toate bacteriile apar colorate n rou.

B. Diferenierea cu soluie 3% acid clorhidric n alcool de 960, evideniaz bacilii acido-alcoolo-rezisteni, care rmn colorai n rou. Bacteriile neacido-alcoolo-rezistente nu rezist la decolorarea cu acest amestec acid-alcool.

C. Recolorarea cu albastru de metilen evideniaz bacte-riile neacido-alcoolo-rezistente.

La sfritul acestui timp, bacilii acido-alcoolo-rezisteni apar colorai n rou, iar celelalte bacterii i celulele n albastru.

Fig. 3-1: Haemophilus influenzae: colonii satelite striului de Staphylococcus aureus pe agar snge (2x). H. influenzae formeaz colonii transparente de aproximativ 2 mm lng stria de stafilococ i din ce n ce mai mici pn la punctiforme pe msur ce se distaneaz de S. aureus care sintetizeaz factor V.

Haemophilus influenzae

Controlul de calitate Pentru controlul de calitate al sterilizrii la autoclav folosim un test bilogic. Fiole cu spori de Bacillus stearo-termophilus, n concentraie de 106/ml bulion nutritiv glucozat i cu un indicator de pH, sunt folosite n ambalajele de la diferite nivele ale incintei de sterilizare. Dup sterilizare, fiolele sunt incubate 48 ore la 570 C. Dac sterilizarea a fost eficient sporii sunt omori. Fiola cu mediul virat n galben semnific steri-lizarea ineficient, sporii rmn viabili, germineaz i genereaz o cultur care fermenteaz glucoza, acidific i vireaz mediul de cultur n galben.

Fig. 7-1

Fig. 7-2: Detectarea rapid a beta-lactamazelor prin testul cromogen cu nitrocefin: rondelele impregnate cu nitrocefin (cefalosporin colorat n galben) i modific culoarea n rou dac tulpina testat este productoare de enzim.

Testul cromogen cu nitrocefin

Fig. 8-1: Staphylococcus aureus - n prob de puroi de la un copil cu osteomielit. Frotiu colorat Gram (1000x). Coci sferici gram-pozitivi (0,5-1,0 micrometri), civa gram la limit, aezai izolai, n perechi i predominant n grmezi neregulate, dispui extracelular, dar i n polimorfonucleare.

Staphylococcus aureus

Fig. 8-2: Staphylococcus aureus. Frotiu din cultur de 24 ore n me-diu lichid. Coloraia Gram (1000x). Coci sferici gram-pozitivi, civa gram la limit, aezai izolai, n diplo i predominant n grmezi neregulate asemntoare ciorchi-nilor de strugure.

Stafilococi

Fig. 8-3: Stafilococi n cultur de 24 ore pe agar cu 5% snge de berbec (2x). Coloniile mari netede, cremoase, pigmentate n galben citrin i -hemolitice aparin Staphylococcus aureus; coloniile pitice, opace, nepigmentate, nehemolitice aparin Staphylococcus epidermidis.

Fig. 8-4: Furuncul al cefei.

Fig. 8-5: Sindromul pielii oprite (Ritter). Epidermoliz necrotic. Rash-ul tegumentar generalizat i descuamarea pe zone ntinse realizeaz aspectul de "piele oprit".

Sindromul Ritter

Fig. 9-1: Cultur de 24 ore pe agar cu 5% snge de berbec a unei tulpini de streptococ -hemolitic, Streptococcus pyogenes (1/1). Acest coc gram-pozitiv formeaz colonii mici cu diametrul de 1 mm, nepigmentate, opace, nconjurate de o zon larg de hemoliz clar, complet.

Fig. 9-1bis: Streptococcus pyogenes - tipurile de colonii: a. Tulpinile capsulate formeaz colonii mucoide cu tendin la confluare. b. Prin liza acidului hialuronic capsular coloniile ncep s se turteasc. c. Colonii turtite, cu suprafaa mamelonat, contur neregulat (matt). d. Tulpinile necapsulate formeaz colonii mici, rotunde, opace (glossy).

Fig. 9-2: Cultura pe agar cu 5% snge de berbec (1/1) a unui streptococ -hemolitic: streptococ viridans ce culti-v sub forma coloniilor mici (aprox. 1mm), nepigmenta-te, opace, nconjurate de o zon de liz parial a he-mat i i lor ce determin "nverzirea" mediului (-hemoliz).

Fig. 9-3: Frotiu din cultura de 24 ore n bulion glucozat a unei tulpini de Streptococcus pyogenes. Coloraia Gram: coci sferici gram-pozitivi aezai n lanuri lungi.

Fig. 9-4: Impetigo contagiosa. Faa este unul din sediile de elecie. La acest copil observm prezena leziunilor multiple aflate n diferite stadii evolutive: vezicule, pustule, cruste galbene,"melicerice". Denumirea popular a bolii este aceea de "bube dulci".

Fig. 9-5: Streptococcus pyogenes. Frotiu din puroi obinut dup detaarea unei cruste melicerice. Coloraia Gram (1000x). Sunt prezente celule inflamatorii i coci sferici gram-pozitivi ce formeaz o pereche i trei lanuri.

Fig. 9-6: Testul sensibilitii la bacitracin i sulfametoxazol-trimetoprim: tulpina de strep-tococ -hemolitic prezentat este sensibil la bacitracin (B) i rezistent la sulfame-toxazol-trimetoprim (SXT), deci este streptococ de grup A.

Fig. 9-7: Testul sensibilitii la bacitracin i sulfametoxazol-trimetopriml: tulpina de strep-tococ -hemolitic testat este rezistent la bacitracin i sensibil la sulfametoxazol-trimetoprim. Este un strepto-coc beta-hemolitic non-grup A.

Fig. 9-8: Testul CAMP pentru identificarea prezumtiv a streptococului de grup B, Streptococcus agalactiae. Activitatea -hemolizinei produs de Staphylococcus aureus este potenat de proteina extracelular (factor CAMP) produs de streptococul de grup B. Aceast zon este uor observat pe agar cu 5% snge de berbec, dup incubare peste noapte (aspect n "vrf de sgeat").

Fig. 9-9: Streptococcus pneumoniae, cultur pe agar cu 5% snge de berbec (1/1): -hemoliz dup 24 ore de incubare n atmosfer cu 5% bioxid de carbon. Coloniile sunt gri-opace, foarte mici (0,5 mm), alfa-hemolitice cu deprimare central.

Fig. 9-10: Streptococcus pneumoniae, cultur pe agar snge cu 5% snge de berbec, dup 24 ore de incubare n atmosfer cu 5% bioxid de carbon (3x). n aceast imagine de detaliu observm foarte bine aspectul caracteristic al coloniei de pneumococ, respectiv de colonie crateriform datorit autolizei enzimatice.

Fig. 9-11: Frotiu din sput. Coloraia Gram (100x). Observm foarte numeroase polimorfonucleare, fibrin i dou celule bronice tinere. Scorul Q de calitate pentru aceast prob este +3.

Fig. 9-12: Frotiu din sputa aceluiai bolnav cu pneumonie pneumococic. Coloraie Gram (1000x). Observm c singurele bacterii prezente, numeroi diplococi ovali gram-pozitivi (mai mult de 10 perechi/cmp), sunt asociate cu polimorfonucleare i fibrin, "mesagerii leziunii". Sputocultura cantitativ a izolat, n concentraie de peste 106 UFC/ml, o tulpin de Streptococcus pneumoniae.

Fig. 9-13: Frotiu din sputa unui pacient cu pneumonie. Coloraie Gram (100x). Observm numeroase celule epiteliale scuamoase (mai mult de 25) i polimorfonucleare (mai mult de 25), absena fibrinei. Scorul Q de calitate este zero.

Fig. 9-14: Prob de sput incorect prelevat. Coloraie Gram (1000x). Scorul Q de calitate mai mic dect unu. Observai foarte numeroi coci gram-pozitivi n lanuri i perechi asociai unei celule epiteliale scuamoase. Sunt bacterii de contaminare orofaringian.

Fig. 9-15: Streptococcus pneumoniae, testul sensibili-tii la optochin. Sensibilitatea la etilhidro-cuprein (optochin) diferen-iaz pneumococul de ali streptococi viridans. Prezena unei zone de inhibiie mai mari sau egal cu 14 mm n jurul discului cu 5 micrograme de optochin identific prezumtiv pneumococul.

Fig. 9-16: Streptococcus pneumoniae, depistarea polizaharidului capsular prin latexaglutinare n LCR: proba pozitiv (stnga), proba negativ (dreapta).

Fig. 10-1: Frotiu din puroi uretral. Coloraia cu albastru de metilen (1000x). Gonococi: coci de 0,6-1micrometri dispui n perechi cu feele adiacente aplatizate ("boabe de cafea"), situai intra i extracelular.

Fig. 10-2: Frotiu din sedimentul unui LCR. Coloraia Gram(1000x). Meningococi: coci gram-negativi aezai n diplo cu aspectul "boabelor de cafea" asociai polimorfonuclearelor.

Fig. 10-3: Copil, n vrst de 1 an i 2 luni cu meningit meningococic, aflat n a 12-a zi de boal. Stare general grav; observm privirea "n apus de soare". Sunt vizibile arii largi de necroz i gangren, ct i leziuni mici peteiale.

Fig. 10-4: Meningococcemie cu meningit la un copil de 8 ani. Erupie hemoragic generalizat.

Fig. 11-1: Enterobacteriaceae. Frotiu din cultur colorat Gram (1000x). Bacili gram-negativi drepi, cu capete rotunjite, fr aezare caracteristic.

Fig. 11-2: Klebsiella pneumoniae. Frotiu din amprenta splinei unui oarece injectat experimental. Coloraia Gram (1000x). Printre celulele splenice sunt prezeni bacili gram-negativi capsulai.

Fig. 11-3: Aspectul mucoid al culturii de Klebsiella pneumoniae pe mediul MacConkey.

Fig. 11-4: Aspectul invaziv al unei culturi de Proteus mirabilis. Inocul depus n centrul plcii Petri. Observai vlurile concentrice de invadare a suprafeei mediului de cultur.

Fig. 11-5: Aspectul difereniat al coloniilor de bacili gram-negativi pe mediul diferenial MacConkey: coloniile lactozo-pozitive apar colorate n rozrou, coloniile lactozo-negative apar necolorate.

Fig. 11-6: Coprocultur pe mediul Hektoen: coloniile lactozo-pozitive (coliformi) sunt inhibate la locul de depunere a produsului; coloniile lactozo-negative, favorizate n dezvoltare, se difereniaz n productoare sau neproductoare de hidrogen sulfurat (respectiv cu sau fr centru de culoare neagr).

Fig. 11-7: Tipul difereniat de adezivitate pe culturi de celule HEp-2 a trei patotipuri diareigene de Escherichia coli. Aderena de tip localizat la tulpinile ECEP.

Fig. 11-8: Tipul difereniat de adezivitate pe culturi de celule HEp-2 a trei patotipuri diareigene de Escherichia coli. Aderena de tip agregativ la tulpinile ECEAg.

Fig. 11-9: Tipul difereniat de adezivitate pe culturi de celule HEp-2 a trei patotipuri diareigene de Escherichia coli. Aderena de tip difuz la tulpinile ECAD.

Fig. 11-10: Bubon pestos: ganglioni inghinali mrii de volum.

Fig. 11-11: Yersinia pestis. Coloraia Leishman (cu albastru de toluidin) (1000x). Aspirat din bubon. Numeroi bacili colorai caracteristic bipolar, ceea ce i face uor de confundat cu un bacil sporulat, alturi de numeroase limfocite.

Fig. 11-11bis: Yersinia pestis. Coloraia Gram (x1250). Aspirat din bubon. Numeroi bacili gram-negativi, pleomorfi, de 0,5-0,8 microni/1-3 microni i colorai bipolar i limfocite.

Fig. 11-12: Fenomenul Dienes folosit n studii epidemiologice: prezena unei delimitri lineare n cazul unor tulpini diferite de Proteus mirabilis cu cretere invaziv. Urmrii sgeile.

Fig. 12-1: Campylobacter jejuni, frotiu din scaun diareic colorat cu albastru de metilen: polimorfonucleare, civa coci, bacili mici palid colorai n albastru, n form de virgul i sub forma "aripilor de pescru n zbor".

Fig. 12-2: Helicobacter pylori n fragment de biopsie gastric. Coloraia Gram (1000x). Aspect caracteristic de bacterie spiralat.

Fig. 12-3: Testul ureazei. Detectarea prezenei ureazei produs de Helicobacter pylori prin plasarea fragmentului biopsic ntr-un mediu tamponat cu 2% uree i rou fenol drept indicator de pH. Test pozitiv (stnga): ureaza scindeaz ureea cu producere de ioni de amoniu care alcalinizeaz mediul. Roul fenol n mediu alcalin vireaz n roz-rou. Test negativ dreapta, culoarea mediului neschimbat (galben).

Fig. 13-1: Pseudomonas aeruginosa, frotiu din cultura de 24 ore pe agar snge. Coloraia Gram (1000x). Bacili gram-negativi fini (0,3 - 0,5micrometrii/1,5 - 3 micrometri) dispui izolai sau n perechi.

Fig. 13-2: Pseudomonas aeruginosa: cultura de 48 ore pe agar nutritiv (1/1) evideniaz pigmentogeneza, respectiv eliberarea de pigmen i difuzibil i, piocianina i pioverdina ce dau culturii i progresiv mediului culoarea verde strlucitoare.

Pseudomonas aeruginosa

Fig. 13-3: Pseudomonas aeruginosa, cultura de 24 ore pe agar cu 5% snge de berbec (1/1). Colonii mari cu diametrul de 3 mm, rotunde, netede i hemolitice.

14-1: Frotiu din sputa unui pacient cu pneumonie. Coloraia Gram (1000x). Haemophilus influenzae: cocobacili i bacili gram-negativi fini, scuri, drepi asociai semnificativ cu polimorfonucleare.

Fig. 14-2: Frotiu din sput (n caset 1000x). Haemophilus influenzae. Celule inflamatorii, fibrin, cocobacili numeroi cu tendina de a se aeza "n bancuri de peti".

Fig. 16-1: Corynebacterium diphtheriae. Frotiu de cultur de 24 ore pe mediul Leffler. Coloraia Gram, cu prelungirea decolorrii (1000x). Bacili gram-pozitivi la limit, cu incluzii de volutin dispuse bipolar, violete pe fondul rou al citoplasmei bacilului; dispui n litere chinezeti i palisade.

Fig. 16-2: Corynebacterium diphtheriae, cultur de 48 ore pe mediul Tinsdale (1/1): colonii mici, negru-cenuii, cu halou cafeniu bine delimitat. Acest mediu selectiv care conine telurit de potasiu i cistin, difereniaz grupul Corynebacterium diphtheriae de alte specii ale genului care sunt inhibate cantitativ sau dac apar, sunt lipsite de halou.

Fig. 16-3: Difterie. Aspectul faringelui: fals membran la nivelul amigdalelor congestive.

Fig. 16-4: Producerea crupului difteric: falsele membrane coboar de la nivelul faringelui pn la laringe.

Fig. 16-5: Difterie: edem masiv al gtului (gt proconsular) i scurgere nasal sero-sanguinolent.

Fig. 16-6: Listeria monocytogenes. Frotiu din cultur de 24 ore n bulion tripticaz soia. Coloraie Gram (1000x). Se observ bacilii gram-pozitivi (0,4-0,8 micrometri/0,5 -2 micrometri) scuri, drepi, cu capetele rotunjite, dispui izolai, n litere unghiulare i n palisade.

16-7: Listeria monocytogenes: cultur de 72 ore pe agar cu 5% snge de berbec (1/1): colonii mici de 1 mm, rotunde, transparente, cu aspectul picturilor de rou, nconjurate de -hemoliz difuz.

Fig. 16-8: Lsteria monocytogenes. Cultur de 72 ore pe agar cu 5% snge de berbec (x3). n aceast imagine de detaliu observm mai bine caracterul difuz al zonei nguste de beta-hemoliz.

Fig. 16-9: Listeria monocytogenes. Cultur de 24 ore pe mediul selectiv PALCAM (1/1). Selectivitatea este dat de polimixin, acroflavin, clorur de litiu, ceftazidim, esculin, manitol. Coloniile sunt negre sau cenuii inconjurate de un halou brun-nchis.

Fig. 17-1: Bacillus anthracis. Frotiu din amprenta de splin a oarecelui decedat dup 48 ore de la inocularea suspensiei bacteriene. Coloraie cu albastru de metilen policrom (1000x). Bacillus anthracis i celulele splenice apar colorai n albastru, iar capsula colorat metacromatic n roz.

Fig. 17-2: Bacillus anthracis. Frotiu din cultura de 48 ore pe agar nutritiv. coloraie Gram (1000x). Bacili gram-pozitivi mari (0,9 micrometri/3-8micrometri) aezai n lanuri arcuite, sporulai, cu spor oval situat central i care nu deformeaz corpul bacteriei.

Fig. 17-3: Bacillus anthracis. Cultur de 24 ore pe agar nutritiv (1/1): colonii mari de 3 mm, aplatizate, de tip R.

Fig. 17-4: Bacillus anthracis, detaliu al unei culturi de 24 ore pe agar nutritiv (x3). Aspectul de "cap de meduz": periferia coloniei examinat cu lupa apare nconjurat de prelungiri laterale ondulate precum uviele de pr.

Fig. 17-5: Cultur de 24 ore pe agar cu 5% snge de berbec(1/1). Coloniile mari, rugoase, alb-cenuii, turtite, nehemolitice aparin Bacillus anthracis (jos); coloniile cu morfologie asemn-toare, dar nconjurate de o zon larg de beta-hemoliz aparin Bacillus cereus (sus).

Fig. 17-6: Bacillus anthracis - cultur de 24 ore pe agar cu 5% snge de berbec (x3). n aceast imagine de detaliu observm coloniile mari cu diametrul de 5 mm, alb-cenuii, rugoase, cu aspect de "sticl pisat".

Fig. 17-7: Crbune cutanat: forma buloas.

Fig. 17-8: Crbune cutanat: n regiunea cervico-lateral pe o zon congestiv i edemaiat este prezent o leziune necrotic acoperit de o crust neagr.

Antraxul

Fig. 17-9: Bacillus cereus. Cultura de 24 ore pe mediul Nagler. Sub aciunea lecitinazei produs de Bacillus cereus mediul cu glbenu de ou (lecitovitelina) este opacifiat.

Fig. 17-10: Clostridium spp. Frotiu din cultura de 96 ore n bulion VF. Coloraia Gram (1000x): bacili gram-pozitivi cu dimensiunea de 0,5 micro-metri / 1,3 micrometri cu spor oval subterminal i care deformeaz corpul bacteriei.

Fig. 17-11: Clostridium tetani. Frotiu din cultura de 96 ore n mediul VF. Coloraia Gram (1000x): bacili gram-pozitivi (la limit) cu dimensiuni de 1,5 micrometri/2 micrometri, sporu-lai, cu sporul sferic situat terminal.

Fig. 17-12: Clostridium perfringens. Frotiu din cultura de 24 ore pe mediul VF. Coloraia Gram (1000x). Bacili gram pozitivi mari (5 micrometri/1 microme-tru), drepi, cu capete rotunjite i care nu sporuleaz pe mediile i n condiiile uzuale de laborator.

Fig. 17-13: Clostridium tetani - cultura de 72 ore pe agar cu 5% snge de berbec (x3): colonii rizoide, turtite, cenuiu-transparente, margini neregulate cu tendin invaziv.

Fig. 17-14: Clostridium perfringens. Cultura de 48 ore pe agar cu 5% snge de berbec (1/1). Observm colonii rotunde cu margini regulate, nconjurate de o zon intern de hemoliz complet datorat -toxinei i o zon extern mai larg de hemoliz incomplet datorat -toxinei.

Fig. 17-15: Coloan de geloz moale n tuburi Weinberg cu evidenierea unei clostridii mobile ce formeaz colonii cu aspect pufos i a unei clostridii imobile (Clostridium perfringens) ce formeaz colonii lenticulare (urmrii sgeile).

Fig. 17-16: Clostridium perfringens - testul de neutralizare a -toxinei. Utilizm agar nutritiv cu 5% glbenu de ou. Linia albastr divide placa n 2 sectoare: n jumtatea dreapt epuizm antitoxina Clostridium perfrin-gens. Depunem n 2 striuri martorul pozitiv i tulpina de testat. Observm c n jum-tatea dreapt pentru ambele tulpini, -toxina a fost neutra-lizat.

Fig. 18-1: Actinomicoz: "granule de sulf" prezente n lichidul pleural ntr-un caz de actinomicoz pulmonar". Puroi fluid cu grunji galbeni de 0,2/1mm, ce reprezint colonii ale actinomicetului infectant.

Fig. 18-2: Actynomices. Frotiu din cultura n anaerobioz a unor "granule de sulf". Coloraie Gram (x1000). Observm bacilii gram-pozitivi ramificai ce se fragmenteaz n forme cocoide i bacilare.

Fig. 18-3: Cultur de 5 zile pe mediul Wilkins-Chalgren cu 5% snge de berbec (4x): Prevotella intermedia colonia neagr, Bacteroides ureolyticus cooloniile glbui, Fusobacterium nucleatum coloniile alb-cenuii opalescente.

Fig. 18-4: Asociaia fuso-spirochetozic. Angina Vincent. Coloraia Gram (1000x): numeroi baciligram-negativi fusiformi (Fusobacterium), spirochete (Treponema vincenti) i polinucleare.

Mycobacterium tuberculosis

Fig. 19-1: Mycobacterium tuberculosis - frotiu din prob de sput concentrat i decontaminat. Coloraia Ziehl-Neelsen (1000x): bacili fini (0,2 - 0,6/1 10 micrometri), drepi sau uor ncurbai, cu aspect de litere unghiulare, colorai n rou. Celulele inflamatorii i bacteriile neacido-rezistente sunt colorate n albastru.

Mycobacterium tuberculosis

!Fig. 19-2: Frotiu din cultura de Mycobacterium tuberculosis n mediul lichid (Middlebrooke). Coloraia Ziehl-Neelsen (1000x): observm dispoziia bacilului acido-rezistent n corzi flexuoase datorat cordfactorului.

Mycobacterium tuberculosis

!Fig. 19-3: Mycobacterium tuberculosis, cultur de 4 sptmni pe mediul Lwestein-Jensen: cretere eugonic, colonii rugoase uscate, conopidiforme, de culoare bej.

Micobacterii atipice

!

Fig. 19-4: Micobacterii fotocromogene, de la stnga la dreapta: M. marinum; M. kansasii; M. simiae. Cultura de 3 sptmni pe mediul Lwestein-Jensen: colonii glbui, rotunde, "S", cu tendin la cretere rugoas (centru).

Micobacterii atipice

Fig. 19-5: Micobacterii scotocromogene (M. gordonae, M. flavescens). Cultura de 14 zile pe mediul Lwestein-Jensen: colonii galben-portocalii, "S", cu aspect untos n eprubeta stng (M. gordonae).

Micobacterii atipice

!

Fig. 19-6: Micobaterii cu cretere rapid, cultur pe mediul Lwestein-Jensen. Primele colonii observate dup 6 zile. Fotografiile culturilor n vrst de 8 zile: Mycobacterium chelonae (stnga)

colonii "R" glbui, cretere luxuriant n subcultur;

Mycobacterium fortuitum (dreapta) colonii "S" glbui i cretere eugonic n subcultur.

Mycobacterium leprae

!Fig. 19-7: n partea stng desen: Mycobacterium leprae, bacil acido-rezistent dispus n aglomerri compacte de bacili aliniai paralel i cap la cap, numite "globi". n dreapta: frotiu din raclatul unei leziuni ulcerate de lepr lepromatoas; coloraia Ziehl-Neelsen modificat (1000x): bacili acido-rezisteni intra i extra celulari dispui n "globi leproi".

Mycobacterium leprae

!Fig. 19-8: Lepra tuberculoid: stnga: macul la nivelul obrazului stng; dreapta: zone depigmentate la nivelul toracelui. n aceste zone, srace n bacili, neulcerate i puin contagioase, sunt prezente tulburri de tip nevritic (anestezii).

Mycobacterium leprae

!Fig. 19-9: Lepra lepromatoas: leziuni granulomatoase distructive ce invadeaz tegumentul.

!Fig. 19-9bis: Lepra lepromatoas: facies leonin.

Fig. 20-1: Treponema pallidum. Examen microscopic pe fond negru din exsudatul unui ancru sifilitic (x1000). Sunt prezente n cmp ase treponeme delicate, hematii i n partea dreapta jos un leucocit.

Treponema pallidum

Fig. 20-2: ancru sifilitic al penisului: ulceraie delimitat net, cu suprafaa lucioas i baza indurat (ancru tare).

ancru sifilitic

Fig. 20-3: Leziuni eruptive ale sifilisului secundar.

Sifilis secundar

Fif. 20-4: Sifilis teriar: gome sifilitice.

Fig. 20-5: Pian: ancru de inoculare.

Fig. 20-6: Borrelia recurrentis pe frotiu din snge n cursul unui puseu febril la un pacient cu febr recurent. Printre hematii, alturi de un limfocit, observm 3 spirochete groase (diametrul 0,2-0,5 micrometri i 8-30 micrometri lungime) cu 3-10 spire laxe. Celelalte specii ale genului prezint aceeai morfologie.

Fig. 20-7: Leptospira icterrohae-morrhagiae: examenul microscopic pe fond negru al preparatului efectuat din mediul Stuart eviden-iaz o spirochet fin cu diametrul de 0,1microni i lungimea 15 microni, cu spire regulate, strnse i capete n crlig.

Fig. 21-1: Mycoplasma pneumoniae. Electronomicrografie: mucoasa bron-ic i corpi de forma unei rachete de tenis ce au poriunea terminal asemntoare unei trompe, care reprezint un bacil eloctronodens. O micoplasm ce ader la suprafaa mucoasei.

Fig. 21-1bis: Mycoplasma pneumoniae, proteina P1 i funcia de adezin. Electronomicrofotografie: Mycoplasma pneumoniae ader la suprafaa unei celule epiteliale (136.000x).

Mycoplasma pneumoniae

Fig. 28-1: Aspectul erupiei n rujeol. Observai erupia maculo-papular generalizat i aspectul faciesului plngre.

Rujeol

Fig. 32-1: Herpes labial n stadiul eruptiv veziculos: vezicule situate peribucal pe o zon de eritem cutanat, unele aglomerate n buchet.

Herpes labial

Fig. 32-2: Herpes genital. Observai la veziculele situate pe prepu, pe un pat eritematos.

Herpes genital

Fig. 32-3: Aspectul erupiei n varicel. Copil n a 3-a zi de la debut , aspect polimorf, cu ele-mentele eruptive n diferite stadii evolutive: papule, vezicule (picturi de rou), cruste.

Varicela

Fig. 32-4: Herpes zoster; erupia vezicular pe fond eritematos corespunde unui dermatom. n imagine dermatomul unui nerv spinal.

Herpes zoster

Variol

Fig. 33-1: Aspectul erupiei n variol. Observai dispoziia centrifug a ele-mentelor eruptive aflate n stadiul de pustul. n cavitatea bucal, la nivelul bolii palatine observm 3 pustule.

Fig. 40-1: Hemocultur n mediu difazic. Urmrii panta agarizat la nivelul creia sunt prezente numeroase colonii i liza hematiilor n mediu lichid, semn al multiplicrii bacteriene.