cursc complet microbiologie
TRANSCRIPT
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
1/235
1
Mulumiri
Doresc s mulumesc urmtorilor elevi pentru contribuiile aduse la realizarea acestuicurs: Cndlu Florentina (Bordetella pertussis), Chilug Narcis-Constantin i Papuc Gabriel-
Marius (Mycoplasmele), Hnceanu Andreea (Loa loa), Hiliianu Mihaela (Schistosoma), PonorMircea (Haemophilus influenzae), Ragea Daniela (Virusul Epstein-Barr), Sncu Simona Elena(Virusul Papilloma Uman).
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
2/235
2
CuprinsPartea I Noiuni generale....................................................................................................................... 3
Curs 1 Generaliti Virusologie, bacteriologie i parazitologie........................................................... 4
Cursul 2 Noiuni de epidemiologie..................................................................................................... 13
Cursul 3 Mijloace de aprare ale organismului uman......................................................................... 30
PARTEA II. VIRUSOLOGIE.................................................................................................................... 47
CURS 4 Virusologieparte general.................................................................................................. 48
Curs 5 Virusologiepartea special................................................................................................... 64
PARTEA III. BACTERIOLOGIE.............................................................................................................. 82
CURS 6 Bacteriologiepartea general............................................................................................. 83
CURS 7 Bacteriologiepartea special cocii patogeni i cocobacilii............................................... 110
CURS 8 Bacteriologiepartea special bacilii patogeni ................................................................. 125Curs 9 Alte tipuri de bacterii ............................................................................................................ 149
Curs 10 Infeciile nosocomiale......................................................................................................... 156
PARTEA IV. MICOLOGIE .................................................................................................................... 159
Curs 11 Micologie ............................................................................................................................ 160
PARTEA V. PARAZITOLOGIE ............................................................................................................. 173
Curs 12: Noiuni generale de parazitologie....................................................................................... 174
Curs 13 Protozoologie...................................................................................................................... 179
Curs 14 Helmintologie ..................................................................................................................... 195
Curs 15 Artropode parazite .............................................................................................................. 215
PARTEA VI. INFECII ALE SISTEMELOR DE ORGANE...................................................................... 221
Bibliografie .......................................................................................................................................... 234
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
3/235
3
Partea I Noiuni generale
Curs 1 Generaliti Virusologie, bacteriologie iparazitologie
Cursul 2 Noiuni de epidemiologie
Cursul 3 Mijloace de aprare ale organismului uman
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
4/235
4
Curs 1 Generaliti Virusologie,
bacteriologie i parazitologie
Obiectul de studiu al acestei discipline l reprezint organismele care provoac daunesntii omului. Din aceast categorie fac parte virusurile, bacteriile si paraziii.
Virusurile sunt entiti infecioase acelulare, reprezentate de complexe macromolecularealctuite din subuniti repetitive (fig. 1.1). Au alctuirea cea mai simpl, din cauza creia, niciastzi nu exist o prere unic privind ncadrarea lor n lumea vie. Virusurile sunt strictdependente de gazda parazitat, neputndu-se multiplica n afara ei din cauza absenei unuisistem enzimatic care s replice materialul genetic. Astfel, toate virusurile sunt parazite.
Bacteriile sunt organisme unicelulare, de tip procariot (materialul genetic nu estedelimitat de o membran), al cror mod de via este saprofit sau parazit (fig. 1.2). Bacteriile
saprofite consum substana organic moart aflat n descompunere, realiznd transformareaorganicului n mineral. Bacteriile parazite se hrnesc pe seama unui organism gazd viu.
Termenul de parazitface referire la un organism ce triete pe seama altui organism. ncazul de fa, n aceast categorie sunt inclui fungii parazii, proto zoarele parazite, viermii
parazii si artropodele parazite. Fungii sunt organisme eucariote (materialul genetic este delimitat de o membran
nuclear), heterotrofe, al cror corp este alctuit din hife (filamente lungi uni- sau pluricelulare)i se numetemiceliu (fig. 1.3).
Protozoarele sunt organisme animale unicelulare de tip eucariot (fig. 1.4). Triesc nmediu umed sau acvatic, pot fi libere sau parazite. Se nmulesc att sexuat, ct i asexuat.
Viermii sunt organisme eucariote pluricelulare, nevertebrate, lipsite de picioare, cucorpul lunguie i cu tegumentul lucios, ce se gsesc de obicei n mediul umed (fig. 1.5). Cei
parazii prezint o serie de adaptri: dein structuri cu care se fixeaz n corpul gazdei, producsubstane care s-i protejeze de enzimele secretate de aceasta, au bine dezvoltat aparatul digestivi reproductor.
Artropodelesunt organisme animale eucariote pluricelulare, nevertebrate, al cror corpeste segmentat i protejat de un exoschelet chitinizat (crustaceele, scorpionii, pianjenii,miriapodele, insectele) (fig. 1.6).
Multe dintre aceste organisme nu pot fi observate cu ochiul liber, avnd dimensiuni foartemici, motiv pentru care se i numesc microorganisme.
MICROBIOLOGIA (gr. mikros =mic, bios=via, logos=tiin) este tiina care seocup cu studiul celor mai mici organisme ce pot fi observate doar cu ajutorul microscopului,denumite n sens larg microbi. Obiectul de studiu al microbiologiei l reprezintmicroorganismele, grup heterogen ce are n comun dimensiunile microscopice, organizarea, ngeneral, unicelular i structura intern relativ simpl.
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
5/235
5
n acest grup al microorganismelor sunt incluse: bacteriile, fungii microscopici, unelealge, protozoarele i virusurile.
Figura 1.1 Virusul H1N1(http://news-frist.blogspot.com/2009/08/predicting-future-
course-of-h1n1-virus.html)
Figura 1.2 BacterieShigella dysenteriae(higieneialiments.blogspot.com)
Figura 1.3 Candida albicanscandidoza(http://en.wikipedia.org/wiki/Candida_(fungus))
Figura 1.4. ProtozoarGiardia intestinalis(http://www.avianbiotech.com/diseases/Giardia.htm)
Figura 1.5. Taenia soliumteniaza(http://www.human-healths.com/tag/fish-tapeworm)
Figura 1.6. Ixodes ricinuscpua(http://en.wikipedia.org/wiki/File:Ixodes.ricinus.searching.jpg)
http://news-frist.blogspot.com/2009/08/predicting-future-course-of-h1n1-virus.htmlhttp://news-frist.blogspot.com/2009/08/predicting-future-course-of-h1n1-virus.htmlhttp://news-frist.blogspot.com/2009/08/predicting-future-course-of-h1n1-virus.htmlhttp://news-frist.blogspot.com/2009/08/predicting-future-course-of-h1n1-virus.htmlhttps://www.google.ro/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=&url=http%3A%2F%2Fhigieneialiments.blogspot.com%2F2011_04_01_archive.html&ei=AL7NVe-xCsj_UMzknogD&psig=AFQjCNFTb4qFIkl3aYkqZKzTal0M0vaTWQ&ust=1439633280662437https://www.google.ro/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=&url=http%3A%2F%2Fhigieneialiments.blogspot.com%2F2011_04_01_archive.html&ei=AL7NVe-xCsj_UMzknogD&psig=AFQjCNFTb4qFIkl3aYkqZKzTal0M0vaTWQ&ust=1439633280662437http://en.wikipedia.org/wiki/Candida_(fungus)http://en.wikipedia.org/wiki/Candida_(fungus)http://en.wikipedia.org/wiki/Candida_(fungus)http://www.avianbiotech.com/diseases/Giardia.htmhttp://www.avianbiotech.com/diseases/Giardia.htmhttp://www.avianbiotech.com/diseases/Giardia.htmhttp://www.human-healths.com/tag/fish-tapewormhttp://www.human-healths.com/tag/fish-tapewormhttp://www.human-healths.com/tag/fish-tapewormhttp://en.wikipedia.org/wiki/File:Ixodes.ricinus.searching.jpghttp://en.wikipedia.org/wiki/File:Ixodes.ricinus.searching.jpghttp://en.wikipedia.org/wiki/File:Ixodes.ricinus.searching.jpghttp://en.wikipedia.org/wiki/File:Ixodes.ricinus.searching.jpghttp://www.human-healths.com/tag/fish-tapewormhttp://www.avianbiotech.com/diseases/Giardia.htmhttp://en.wikipedia.org/wiki/Candida_(fungus)https://www.google.ro/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=&url=http%3A%2F%2Fhigieneialiments.blogspot.com%2F2011_04_01_archive.html&ei=AL7NVe-xCsj_UMzknogD&psig=AFQjCNFTb4qFIkl3aYkqZKzTal0M0vaTWQ&ust=1439633280662437http://news-frist.blogspot.com/2009/08/predicting-future-course-of-h1n1-virus.htmlhttp://news-frist.blogspot.com/2009/08/predicting-future-course-of-h1n1-virus.html -
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
6/235
6
Istoricul dezvoltrii microbiologiei ca tiinDenumirea i clasificarea microorganismelor
n 1735, Karl von Linn (fig. 1.7.)pune bazele taxonomiei. Taxonomia reprezint tiinacare se ocup cu studiul clasificrii organismelor. Astfel, dezvolt sistemul nomenclaturii binarece const n denumirea fiecrui organism prin dou nume latinizate sau cu origine greceasc.Primul nume reprezint genul i se scrie cu majuscul, al doilea specia sau epitetul i se scrie culiter mic.
Spre exemplu, Staphylococcus aureus este o bacterie foarte rspndit. Staphylococcuseste genul i aureus specia. n acest caz, genul face referire la forma i dispunerea celulelor,adicstaphylosnseamn grup, grmad, iar coccussfer. Cu alte cuvinte, aceast bacterie estesferic, iar celulele sunt dispuse grupat. Aureusface referire la huloul auriu care se formeaz n
jurul celulelor.Uneori, organismul poate fi definit dup un cercettor, spre exemplu Escherichia coli sau
bacilul coli este denumit dup cercettorul Theodor Escherich. Specia coli face referire la loculunde triete microorganismul, adic n colon.
Organismele au fost iniial clasificate n 2 regnuri: Plantae i Animalia, nainte de a fidescoperite microorganismele. Cnd s-a demonstrat clar existena acestora, acest sistem n douregnuri nu a mai corespuns realitii.
Carl Woese dezvolt un nou sistem de clasificare ce grupeaz organismele n funcie decaracteristicile moleculare ale acestora i deci de cele celulare. Totui, oamenii de tiin au czutde acord asupra acestui sistem abia n 1978 i, doisprezece ani mai trziu, a fost publicat noulsistem. Woese mparte organismele n 3 grupe mari, denumite domenii. Un domeniu este maicuprinztor dect regnul. Aceste domenii sunt:
Eubacteria:bacterii care prezint perete peptidoglicanic.Archaea:procariote care nu prezint perete peptidoglicanic. Eucarya:organisme care au materialul genetic delimitat de o membran nuclear i sunt
grupate n urmtoarele regnuri:Protista (acesta nc se mai modific): alge, protozoare, mucegaiuri unicelulare;Fungi: drojdii, mucegaiuri pluricelulare i ciuperci;Plantae: muchi, ferigi,alge, gimnosperme, angiosperme;Animalia: spongieri, celenterate, molute, viermi, artropode (insecte, crustacee,
pianjeni, etc.) i vertebrate (ciclostomi, peti, amfibieni, reptile, psri i
mamifere).
Studiul microorganismelorn 1590, Zacharias Janssen pune la punct primul microscop n Middleburg, Olanda.
Microscopul lui Janssen consta din 3 tuburi (fig. 1.8). Unul dintre ele se gsea la exterior i leconinea pe celelalte dou. La ambele capete ale tuburilor interioare se gseau lentile utilizate
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
7/235
7
pentru amplificarea imaginii. Modelul lui Janssen putea permite ajustarea imaginii prin rsucireatuburilor interne. Astfel, imaginile puteau fi vzute de 3 sau 9 ori mai mari dect erau n realitate.
n 1665, Robert Hooke, un cercettor englez, popularizeaz utilizarea microscopului(fig. 1.10) prin observarea unei seciuni prin plut, n care se puteau distinge cmrue mici, pecare le numete celule. Descoperirea lui duce la dezvoltarea teoriei celulare n secolul XIX de
ctre Mathias Schleiden, Theodor Schwann i Rudolf Virchow. Teoria celular susine c toateorganismele vii au corpul format din celule.
Experimentele lui Hooke l-au inspirat pe olandezul Antonie van Leeuwenhoek (1632-1723) s exploreze lumea microscopic (fig. 1.9). A mbuntit microscopul lui Hooke,
putndu-se ajusta mai eficient mrirea imaginilor. Lentilele confecionate de acesta aveaucapacitatea de a mri imaginea ntre 30 i 266 ori. Leeuwenhoek a putut observamicroorganisme, pe care le-a i descris cu deosebit precizie(fig. 1.11). Din desenele sale, reiesefoarte clar c a observat streptococi, bacili i, de asemenea, protozoare ( Vorticella, Volvox,
Euglena). n 1681, public descrierea unor populaii mari din ceea ce se va numi mai trziu
Giardia lamblia. Indivizii au fost descrii din propriile sale materii fecale. Dei vanLeeuvenhoek a descris levuri, primele ilustraii ale fungilor microscopici au fost publicate deRobert Hooke n 1667.
Deoarece, n aceast perioad nu s-au fcut conexiuni ntre microorganismele descrise ifermentaie sau boli, observaiile fcute de aceti cercettori au avut un impact redus asupraomenirii. Anterior, Cicero i Fracastorius au sugerat c apariia febrei ar putea fi determinat deanimale minuscule, denumite generic contagium vivum, dar de atunci au trecut cteva secole
pn cnd a fost acceptat rolul microorganismelor n producerea bolilor. Teoria conform creia viaa apare de novo din obiecte neanimate a rezistat din Evul
Mediu pn la nceputul secolului al XX-lea. Van Helmont chiar propunea o reet de producere
a oarecilor. Ct de mult a fost nrdcinat aceast idee n mintea oamenilor poate fi evideniatprin faptul c H. Charlton Bastian, unul dintre cei mai importani susintori ai teoriei, a murit n1915, convins c avea dreptate.
n secolul al XVIII-lea, Lazzaro Spallanzani (Italia) dovedete c prin fierbereprelungit, microorganismele dispar i nu mai reapar dac vasul este nchis ermetic. Acestadescoper existena bacteriilor patogene i a celor anaerobe. Cu toate acestea, descoperirile salenu au dus la anularea teoriei generaiei spontane.
Pn n a doua jumtate a secolului al XIX-lea, s-au realizat doar cercetri privind formai structura microorganismelor. Louis Pasteur (1822-1895) (fig. 1.12) este considerat printelemicrobiologiei. Studiile sale au demonstrat clar falsitatea teoriei generaiei spontane. Dar chiari cu astfel de argumente, aceast teorie a mai continuat s supravieuiasc. Cercetrile saleasupra fermentaiei au artat natura biologic a procesului, specificitatea procesului (unmicroorganism are rol ntr-un anumit tip de fermentaie) i natura biologic a bolilor buturilorfermentate. A introdus procedeul de pasteurizare (nclzirea la 56 C previne multiplicareamicroorganismelor). De asemenea, introduce problema prevenirii infeciilor prin vaccinare.Descoper vaccinul antiholeric aviar, vaccinul anticrbunos, antirabic. Alturi de Robert Koch
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
8/235
8
(fig. 1.14), este considerat fondatorul bacteriologiei medicale. Acesta din urm a devenitcunoscut dupa izolarea bacilului antraxului, bacilului tuberculozei si a vibrionului holeric. n1905 primete premiul Nobel pentru Medicin i Fiziologie datorit descoperirilor asupratuberculozei. Dup ce Casimir Davainedemonstreaz modul de transmitere direct a antraxuluintre vite, Koch studiaz bacilul antraxului mai detaliat. Pune la punct o serie de metode de
purificare a bacteriei din snge i de cretere a unor culturi pure. Descoper cauza izbucniriifocarelor de antrax ca fiind rezistena timp ndelungat, n sol, a endosporilor. Introducesterilizarea instrumentelor chirurgicale cu ajutorul temperaturilor ridicate. mbuntetemetodele de cultivare a bacteriilor i de colorare, putnd astfel descoperi bacteria responsabil de
producerea tuberculozei. La mijlocul secolului al XIX-lea 1 din 7 decese era datorat acestei boli.Studiaz in Egipt holera si identific microorganismul responsabil de aceast boal, fr a puteademonstra existena lui. Probabil la fel de importante ca i studiile asupra tuberculozei, sunt
postulatele sale care stabilesc criteriile dup care un organism poate fi considerat cauz a uneiboli. Acesta trebuie:
s fie identificat n toate cazurile examinates fie preparat si meninut intr-o cultur purs fie capabil s produc infecia, chiar i dup cultivri repetate s fie izolat de la un animal inoculat i cultivat din nou. Ilia Mecinikov, contemporan cu Pasteur i Koch realizeaz numeroase cercetri n
imunologie, demonstrnd nsemntatea reaciilor celulare n aprarea organismului. Dimitrie I. Ivanovski (1869-1920) descoper virusul mozaicului tutunului (VMT) i
ncepe dezvoltarea unei noi tiine microbiologice - virusologia. Experienele lui Ivanovski suntconfirmate de Martinus Beijerinck, considerat adevratul fondator al virusologiei.VIRUSOLOGIA (lat. virus- otrav) este tiina care se ocup cu studiul virusurilor.
Dezvoltarea microbiologiei a fost posibil datorit progreselor realizate n mbuntireamicroscopului, dar i n cultivarea microorganismelor. Introducerea coloraiei a fost una dintreetapele importante n progresul acestei tiine. Ferdinand Cohn, botanist german, a utilizat, ncercetarea sa, colorani vegetali, de tipul carminului sau hematoxilinei. Deja la 1877, RobertKoch utiliza albatrul de metil pentru evidenierea bacteriilor, iar prin fixarea colorantului cuajutorul cldurii, a putut colora bacilul tuberculozei. n 1884, pato logul danez, Hans ChristianGram, introduce faimoasa coloraie care i poart numele.
n ceea ce privete mediile de cultur, Pasteur a introdus primul mediu semi-sintetic careconinea sruri de amoniu, pulbere de drojdie i zahr. Anterior acestuia, pentru creterea
bacteriilor a fost utilizat bulionul de carne, care se folosete i n prezent. Pentru cretereafungilor a fost introdus mediul cartof-dextroz-agar. Ferdinand Cohn propune ideea de mediu de
baz, la care se pot aduga alte substane, n funcie de necesiti. Mediile iniiale erau lichide,abia n 1882 a fost introdus gelatina i agarul, fapt ce a permis rspndirea utilizrii mediilorsolide.
Un element banal, dar care a revoluionat microbiologia, a fost reprezentat de plcilePetri (fig. 1.13). Introducerea acestora de ctre Petri, un asistent al lui Koch, a uurat foarte mult
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
9/235
9
cultivarea microorganismelor. Studiul gangrenei gazoase, n primul rzboi mondial, a stimulatproducerea vaselor pentru creterea bacteriilor anaerobe.
Apariia, dup rzboi, a centrelor de producere industrial a mediilor de cultur a uuratactivitatea de cercetare a microbiologilor, nemaifiind nevoii s-i le produc singuri. La
prepararea mediilor s-a adugat i dezvoltarea metodelor de sterilizare (introducerea, n 1884, a
autoclavului de ctre Chamberland, coleg cu Pasteur), fapt ce permitea izolarea i cultivareabacteriilor, reducnd riscul contaminrii.
Microbiologia a evoluat rapid dup aceast perioad, studiul bacteriilor perminddescifrarea codului genetic, a mecanismelor sintezei proteice, a mecanismele reglrii celulare etc.
Studiile realizate pe Escherichia coli au permis dezvoltarea unor noi tiine, cum ar fibiotehnolgiile microbiene, ingineria genetic.
Distrugerea microorganismelorEforturi imense au fost depuse spre sfritul secolului al XVIII -lea n dezvoltarea
tehnicilor antiseptice. Acestea au nceput cu un raport al medicului maghiar Ignaz Semmelweisprivind scderea considerabil a numrului de cazuri de febr postnatal, atunci cnd s-au utilizattehnici antiseptice. Dei a realizat o documentare serioas, studiul a fost prezentat ntr-o manier
pompoas i egocentric, ceea ce i-a garantat eecul.Joseph Lister (1827-1912), chirurg englez, a dezvoltat una dintre cele mai importante
tehnici antiseptice (fig. 1.15). n timpul operaiei, pacientul era pulverizat cu acid carbolic, apoirana era bandajat cu pansamente mbibate n acelai acid. Numrul de infecii a sczut netcomparativ cu operaiile fr metode antiseptice. Acidul carbolic sau fenolul a fost unul dintre
primele antiseptice utilizate. Ca urmare a modului organizat i tiinific de redactare a lucrrii ncare prezenta rezultatele sale, tehnica introdus de el a avut un impact major n chirurgie.
Paul Ehrlich (1854-1915), chirurg german, a pus bazele utilizrii medicamentelor, nvederea omorrii microorganismelor deja ptrunse n corp. Lucrnd pe Treponema pallidum, atestat mai multe substane care ar fi putut distruge agentul cauzator al sifilisului. mpreun cuSahachiro Hata (fig. 1.16) a identificat arsfenamina, compusul 606, denumit apoi, Salvarsan, n1908, primete premiul Nobel pentru sintetizarea acestui medicament.
Oamenii de tiin s-au folosit de nceputul pus de Ehrlich pentru a gsi medicamente cepot vindeca pacienii infectai. Una dintre cele mai mari realizri a venit n anul 1929, cndAlexander Fleming (fig. 1.17) descoper Penicillium notatum, organismul care sintetizeaz
penicilina, substan inhibitoare pentru foarte multe bacterii. Fleming cultiva Staphylococcusaureus n laborator. Deasemenea, fcea experimente pe mucegaiul Penicillium notatum. Accidental, culturile de Staphylococcus aureus au fost contaminate cu P. notatum, ducnd lamoartea bacteriilor. Penicilina a devenit unul dintre primele antibiotice, dar a putut fi utilizatabia n 1940, deoarece nu se gsiser metode de a o face stabil.
n ceea ce privete microbiologia n Romnia, cei mai importani cercettori au fost:Victor Babe (1854-1926) (fig. 1.18). Acesta descoper un sporozoar parazit al
cpuelor, numit Babesia, ce provoac o boal rar si grav, numita babesioza. Demonstreaz
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
10/235
10
pentru prima dat existena bacilului tuberculozei n urina bolnavilor infectai. De asemenea,descoper incluziunile citoplasmatice prezente n celulele nervoase, n cazul turbrii, denumiteulterior corpusculii Babe-Negri.
Babe a fost unul dintre iniiatorii utilizrii serului n tratamente i a fost primul care aintrodus vaccinarea antirabic n Romnia.
De asemenea, descoper incluziunile metacromatice (metacromatic- referitor la esuturi, acror elemente se coloreaz diferit, cu acelai colorant), prezente n citoplasma unor bacteriiGram pozitive (bacilul difteric), numite corpusculii Babe-Ernst.
Ioan Cantacuzino (fig. 1.19) realizeaz studii n domeniul bacteriologiei, imunologiei,epidemiologiei. A fcut cercetri la Paris, alturi de Ilia Mecinikov. Descoperirile sale au fostimportante n tratarea holerei, tifosului exantematic, tuberculozei i scarlatinei. Ca discipol al luiMecinikov, s-a preocupat de studiul aprrii organismului. n timpul primului rzboi mondial, afost eful echipei de combatere a epidemiei de tifos.
Ali microbiologi romni care au adus contribuii importante au fost: Constantin
Levaditi, Constantin Ionescu-Mihieti, Mihai Ciuc, Dumitru Combiescu, tefan S.Nicolau(fondatorul colii romneti de virusologie).
Figura 1.7. Karl von Linn(http://www.pandasthumb.org/archives/-
2007/05/happy_linnaeus.html)
Figura 1.8. Microscopul fabricat de ZachariasJenssen
(http://theojanssen.ca/documents/Janssen/-Zacharias%20Janssen/Zacharias_Janssen.htm)
Figura 1.9. Microscopul fabricat de Antonie vanLeeuwenhoek
(http://www.instructables.com/id/Cardboard-van-Leeuwenhoek-microscope/step2/The-lens /)
http://www.pandasthumb.org/archives/-2007/05/happy_linnaeus.htmlhttp://www.pandasthumb.org/archives/-2007/05/happy_linnaeus.htmlhttp://www.pandasthumb.org/archives/-2007/05/happy_linnaeus.htmlhttp://www.pandasthumb.org/archives/-2007/05/happy_linnaeus.htmlhttp://theojanssen.ca/documents/Janssen/-Zacharias%20Janssen/Zacharias_Janssen.htmhttp://theojanssen.ca/documents/Janssen/-Zacharias%20Janssen/Zacharias_Janssen.htmhttp://theojanssen.ca/documents/Janssen/-Zacharias%20Janssen/Zacharias_Janssen.htmhttp://theojanssen.ca/documents/Janssen/-Zacharias%20Janssen/Zacharias_Janssen.htmhttp://www.instructables.com/id/Cardboard-van-Leeuwenhoek-microscope/step2/The-lens/http://www.instructables.com/id/Cardboard-van-Leeuwenhoek-microscope/step2/The-lens/http://www.instructables.com/id/Cardboard-van-Leeuwenhoek-microscope/step2/The-lens/http://www.instructables.com/id/Cardboard-van-Leeuwenhoek-microscope/step2/The-lens/http://www.instructables.com/id/Cardboard-van-Leeuwenhoek-microscope/step2/The-lens/http://www.instructables.com/id/Cardboard-van-Leeuwenhoek-microscope/step2/The-lens/http://www.instructables.com/id/Cardboard-van-Leeuwenhoek-microscope/step2/The-lens/http://theojanssen.ca/documents/Janssen/-Zacharias%20Janssen/Zacharias_Janssen.htmhttp://theojanssen.ca/documents/Janssen/-Zacharias%20Janssen/Zacharias_Janssen.htmhttp://www.pandasthumb.org/archives/-2007/05/happy_linnaeus.htmlhttp://www.pandasthumb.org/archives/-2007/05/happy_linnaeus.html -
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
11/235
11
Figura 1.10. Microscopul fabricat de RobertHooke
(http://www.ssplprints.com/image/91077/hookes-compound-microscope-and-its-illuminating-system-
1665)
Figura 1.12. Microbiologul francez Louis Pasteur(https://en.wikipedia.org/wiki/Louis_Pasteur)
Figura 1.13. Plac Petri pentru cultivareamicroorganismelor pe medii solide(http://www.800ezmicrocart.com/mediapro25petridishes.aspx)
Figura 1.11. Desenele realizate de
Leeuwenhoek dup observaiile lamicroscop(http://www.vanleeuwenhoek.com/His-Microscopic-World.htm)
Figura 1.14. Microbiologul Robert Koch(http://www.myinterestingfacts.com/robert-koch-facts/)
Figura 1.15. Pulverizatorul cu fenol al lui JosephLister
(http://www.cosmeticsandskin.com/ded/vapourisers.php)
http://www.ssplprints.com/image/91077/hookes-compound-microscope-and-its-illuminating-system-1665http://www.ssplprints.com/image/91077/hookes-compound-microscope-and-its-illuminating-system-1665http://www.ssplprints.com/image/91077/hookes-compound-microscope-and-its-illuminating-system-1665http://www.ssplprints.com/image/91077/hookes-compound-microscope-and-its-illuminating-system-1665http://www.ssplprints.com/image/91077/hookes-compound-microscope-and-its-illuminating-system-1665https://en.wikipedia.org/wiki/Louis_Pasteurhttps://en.wikipedia.org/wiki/Louis_Pasteurhttps://en.wikipedia.org/wiki/Louis_Pasteurhttp://www.800ezmicrocart.com/mediapro25petridishes.aspxhttp://www.800ezmicrocart.com/mediapro25petridishes.aspxhttp://www.800ezmicrocart.com/mediapro25petridishes.aspxhttp://www.vanleeuwenhoek.com/His-Microscopic-World.htmhttp://www.vanleeuwenhoek.com/His-Microscopic-World.htmhttp://www.vanleeuwenhoek.com/His-Microscopic-World.htmhttp://www.vanleeuwenhoek.com/His-Microscopic-World.htmhttp://www.myinterestingfacts.com/robert-koch-facts/http://www.myinterestingfacts.com/robert-koch-facts/http://www.myinterestingfacts.com/robert-koch-facts/http://www.cosmeticsandskin.com/ded/vapourisers.phphttp://www.cosmeticsandskin.com/ded/vapourisers.phphttp://www.cosmeticsandskin.com/ded/vapourisers.phphttp://www.cosmeticsandskin.com/ded/vapourisers.phphttp://www.myinterestingfacts.com/robert-koch-facts/http://www.vanleeuwenhoek.com/His-Microscopic-World.htmhttp://www.vanleeuwenhoek.com/His-Microscopic-World.htmhttp://www.800ezmicrocart.com/mediapro25petridishes.aspxhttps://en.wikipedia.org/wiki/Louis_Pasteurhttp://www.ssplprints.com/image/91077/hookes-compound-microscope-and-its-illuminating-system-1665http://www.ssplprints.com/image/91077/hookes-compound-microscope-and-its-illuminating-system-1665http://www.ssplprints.com/image/91077/hookes-compound-microscope-and-its-illuminating-system-1665 -
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
12/235
12
Figura 1.16. Paul Ehrlich i Sahachiro Hata descoperitorii arsfenaminei (Salvarsan)
(http://fineartamerica.com/art/all/paul+ehrlich/canvas+prints)
Figura 1.17. Alexander Flemigdescoperitorulprimului antibiotic - penicilina
(http://www.fameimages.com/alexander-fleming)
Figura 1.18. Microbiologul romn VictorBabe
(https://en.wikipedia.org/wiki/Victor_Babe%C8%99)
Figura 1.19. Cercettorul romn Ioan Cantacuzino(https://ro.wikipedia.org/wiki/Ion_Cantacuzino)
http://fineartamerica.com/art/all/paul+ehrlich/canvas+printshttp://fineartamerica.com/art/all/paul+ehrlich/canvas+printshttp://fineartamerica.com/art/all/paul+ehrlich/canvas+printshttp://www.fameimages.com/alexander-fleminghttp://www.fameimages.com/alexander-fleminghttp://www.fameimages.com/alexander-fleminghttps://en.wikipedia.org/wiki/Victor_Babe%C8%99https://en.wikipedia.org/wiki/Victor_Babe%C8%99https://en.wikipedia.org/wiki/Victor_Babe%C8%99https://ro.wikipedia.org/wiki/Ion_Cantacuzinohttps://ro.wikipedia.org/wiki/Ion_Cantacuzinohttps://ro.wikipedia.org/wiki/Ion_Cantacuzinohttps://ro.wikipedia.org/wiki/Ion_Cantacuzinohttps://en.wikipedia.org/wiki/Victor_Babe%C8%99http://www.fameimages.com/alexander-fleminghttp://fineartamerica.com/art/all/paul+ehrlich/canvas+prints -
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
13/235
13
Cursul 2 Noiuni de epidemiologie
n cursul acesta vom urmri mai multe aspecte, i anume: Interaciunea dintre gazd i patogen sau epidemiologia n sensul strict;Recoltarea probelor biologice i aspecte generale privind diagnosticul de laborator;Principii de sterilizare i dezinfecie.
1.
Interciunea patogen-gazdEpidemiologiase ocup cu studiul distribuiei i a factorilor determinani ai bolilor ntr-o
populaie. Cuvntul provine din grecescul epi deasupra, pe, i demos populaie.Epidemiologistul este cercettorul specializat n identificarea i prevenirea bolilor ntr-o
populaie dat. Acesta are n vedere etiologia (cauza) bolii i ncearc s previn i s controlezerspndirea bolilor.
Epidemiologia este considerat ramur a microbiologiei, deoarece microorganismele suntcele care provoac majoritatea bolilor. Poate fi considerat i ramur a ecologiei , datoritrelaiilor care se stabilesc ntre patogeni, gazd i mediu.
Noiunile cele mai importante legate de epidemiologia infeciilor sunt: morbiditatea:numrul de mbolnvirila un numr dat de locuitori(10.000, 100.000);incidena: numrul de mbolnviri noi ntr-o perioad dat de timp (anual, semestrial,sezonier, etc.);prevalena: numr de infecii la un moment dat ntr-o colectivitate;mortalitate:numrul deceselor printr-o anumit infecie raportatla un anumit numr delocuitori;
letalitate:numrul de decese raportat la numrul de persoane infectate; index de manifestare: numrul de boli aparente clinic raportat la numrul total de
persoane infectate.
1.1.Clasificarea infeciilorA. n funcie de spaiu i timp, infeciile apar: sporadic: cazuri izolate necorelate n timp i spaiu; acestea nu reprezint un pericol
pentru populaie.endemic: cazuri regulate ca frecven, limitate n spaiu i nelimitate n timp. Numrul de
persoane care contracteaz boala i severitatea ei sunt att de reduse , nct nu reprezinto problem de sntate public.epidemic: cazuri numeroase ce apar ntr-un timp scurt i ntr-o zon geograficlimitat (holer, febr tifoid, cium); aceasta duce la creterea mortalitii i amorbiditii. Reprezinto problem de sntate public.pandemic: cazuri foarte numeroase ntr-o perioad de timp fr limite geografice (pandemiile de grip, SIDA).
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
14/235
14
Epidemiile pot aprea, n funcie de surs, n 2 categorii: epidemii ce au o surs comun:un numr mare de persoane se mbolnvete brusc de laaceeai surs. Aceste epidemii sunt atribuite unei surse de ap contaminate sau unor alimenteimpropriu preparate. Spre exemplu, holera sau toxiinfeciile alimentare aprute princonsumarea unor alimente de la o cantin. Numrul infeciilor scade brusc, dac sursa este
eliminat.epidemii propagate:apar prin transmiterea de la o persoan la alta. Agentul cauzator al boliitrece de la o persoan infectat la una sntoas. Numrul de cazuri noi apare ma i lent, iarlimitarea mbolnvirilor este mai greu de realizat.
B. Un alt criteriu de clasificare al infeciilor l reprezint simptomatologia acestora sauorganul afectat (Tabelul 1).
Tabelul 1. Clasificarea clinic a infeciilorClasificarea Exemple de infeciiBoli diareice Secretorii
InvaziveBoli respiratorii Ale tractului respirator superior
Ale tractului respirator inferiorInfecii ale SNC Meningite
EncefaliteAbcese
Infecii cardiovasculare EndocarditeMiocarditeVasculite
Septicemie Diseminat
C.
Agentul cauzator al infeciei poate fi utilizat ca un al treilea criteriu de clasificare. ntabelul 2 este rezumat aceast clasificare.
Tabelul 2. Clasificarea microbiologic a bolilor infecioase Clasificarea OrganismBacterian Gram-pozitiv
Gram-negativViral Ribovirus
DezoxiribovirusCu anvelop sau fr
Fungic DiseminatLocalizat
Parazitic ProtozoarVierme
cestodnemaod
Prionic protein
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
15/235
15
1.2.Rezervorul de germeniRezervorul reprezint locul n care microorganismele pot s-i menin capacitatea
infecioas. Acestea includ organismul uman, animal, anumite medii nevii i obiecte (Tabelul 3). Rezervorul uman reprezint principalul rezervor viu de germeni. Importani sunt
purttorii sntoicare reprezint surse oculte de infecie pentru persoanele din jurul lor.
Purttorii sntoi sunt acei indivizi la care germenii se multiplic la poarta de intrare frs produc manifestri clinice i nici imunologice. Nu trebuie confundat starea de
purttor sntos cu cea de purttor aparent sntos la care semnele clinice sunt minimesau absente, dar sunt prezente semnele biologie i imunologice (purttori de virushepatitic B). Rezervorul uman joac un rol important n rspndirea multor infecii:streptococice, febra tifoid, difteria, gonoreea, sifilisul, poliomielita, hepatita, SIDA etc.
Rezervorul animal . Att animalele slbatice, ct i cele domestice pot constitui sursamultor infecii. Bolile comune omului i animalelor se numesc antropozoonoze.Transmiterea poate avea loc prin contactul direct cu animalul infectat, prin contactul
cu unele produse animale (piei, blnuri - crbune pumonar), consumul de carneinfectat (crbune intestinal), muctura animalelor (rabie), neptura unor insecte(malaria) etc.
Rezervoarele neanimate. Apa i solul. Solul este sursa infeciilor produse de unii fungiipatogeni, precum i de sporii bacteriilor strict anaerobe (spori de bacil tetanic ibotulinic). Apa se contamineaz de la materiile fecale ale omului i animalelor.Tabelul 3. Clasificarea organismelor infecioase, pe baza rezervorului natural
Rezervorul Microorganisme tipiceUman Treponema pallidum, Neisseria gonorrhoeae, HIV, virusul
hepatitei B i C, Shigella, Salmonella typhi
Animal Rabia, Yersinia pestis, Leptospira, Brucella, SalmonellanontifoidSolul Histoplasma capsulatum, Clostridium tetani, Clostridium
botulinum
Apa Legionella, Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium marinum,Vibrio cholerae
1.3.Transmiterea agenilor infecioiAgenii infecioi se transmit, n general,prin 3 modaliti:Transmi terea prin contact a agentului infecios este posibil de la omul bolnav la cel
sntos prin: contact directprin atingere (rujeol, varicel, variol etc.), srut (hepatitaB), contact sexual (sifilis, gonoree, SIDA etc.),contact i ndir ect prin obiecte care au venit n contact cu bolnavul, ca, de
pild, batiste, lenjerie, vesel, termometre, siringi infectate etc.,picturile lui Pflggepe care bolnavul le rspndete n timpul strnutuluii a tusei (virusurile gripale, paragripale etc.).
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
16/235
16
Transmiterea prin ap sau alimente contaminate: hidric (salmonelle, shigelle),alimentar(botulism, toxiinfecii alimentare).Transmi terea prin vectori. Cei mai importani vectori sunt artropodele. Unele dintre ele,ca de pild mutele, sunt vectori mecanicicare transport agenii infecioi dintr-un loc naltul. Vector ii biologici sunt cei care particip activ la transmiterea agentului infecios.
Astfel, unele artropode inger agentul infecios n timp ce sug sngele persoanei infectate(de pild, narul anofel, care transmite malaria), gzduind o parte a ciclului evolutiv alacestuia i transmindu-l prin neptur altei persoane.Transmiterea perinatal.Are loc de la mam la ft, n timpul sarcinii sau la natere.
1.4.Etapele infectrii gazdei de ctre agentul patogenn orice infecie au loc urmtoarele evenimente: contaminarea (ntlnirea cu agentul infecios),ptrunderea i multiplicarea n organismul gazd prin eludarea rezistenei
antiinfecioase, producerea leziunilor morfologice i funcionale, datorate n parte aciunii directe aagentului infecios i cel mai frecvent, reaciilor de aprare al e organismului,deznodmntul infeciei, care poate fi vindecarea cu sau fr sechele, exitusul saucoexistena pe timp ndelungat a celor doi parteneri ai infeciei: agentul infecios iorganismul.n majoritatea infeciilor, evenimentele descrise mai sus se petrec consecutiv, ntr-o
perioad limitat de timp. n infeciile produse de germenii condiionat i accidental patogeni,contaminarea, ptrunderea i chiar i colonizarea (multiplicarea la locul de intrare) se petrec cumult timp nainte ca infecia s se declaneze. Durata intervalului pn la producerea acesteia
depinde n mare msur de statusul imunitar ale gazdei , care poate permite sau nu producereaunei infecii cu aceti germeni. Aceste etape sunt nsoite de mecanismele de ap rareantiinfecioas ale gazdei;ceea ce deosebete agenii infecioi estemaniera n care sunt capabilis eludeze aceste mecanisme.
ContaminareaPrima ntlnire a organismului cu microbii se produce n momentul naterii; ftul
viaa intrauterin este steril din punct de vedere microbiologic este aprat de membranelefetale, iar placenta permite ptrunderea unui numr foarte redus de microorgansime din circulaiamamei: virusul rubeolic, rujeolic, HIV, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii.
n timpul naterii,nou-nscutul vine n contact cu microorganismele prezente n canalulvaginal i pe pielea mamei. El nu este expus acestei contaminri total neprotejat , ci motenetede la mam, pe cale sanguin, un repertoriu bogat de anticorpi, la care se adaug cei dincolostruli laptele matern. Acetia i asigur o protecie relativ fa de infecii ,pn cnd va ncepe s-idezvolte propriile mecansime de aprare antiinfecioas.
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
17/235
17
Dintre microorgansimele cu care organismul vine n contact pe parcursul existenei sale, o parte vor disprea de pe suprafaa organismului, o parte vor coloniza pielea i mucoaselei doar o mic parte vor produce infecii propriu -zise.
Contaminarea poate fi endo i exogen.Infeciile exogene sunt cele care rezult n urma contactului cu agentul infecios din
mediul nconjurtor. Agenii infecioi pot contamina organismul n cele mai variate mprejurri:pe cale alimentar,respiratorie,contact sexual,manevre medicale,
promiscuitatea cu animalele,mucturile de insecte etc.Modul de contaminare sugereaz aproape ntotdeauna i posibilitile de prevenire
nespecifice ale infeciei. n infeciile exogene produse de germenii nalt patogeni, timpul care
trece de la contaminare pn la apariia simptomatologiei clinice este n g eneral bine definit(perioada de incubaie).Infeciile endogene rezult n urma contaminrii cu germeni de pe suprafaa mucoaselor
i a pielii. Aceste microorgansime produc infecii, dac traverseaz barierele anatomice iptrund n esuturi (E.coli). Pe de alt parte, ageni infecioi din flora normal a organismului,care nu produc infecii la individul sntos, le vor produce la indivizi cu deficiene imune (supuiunui tratament imunosupresor, cu deficiene imune genetice, cu deficiene imune dobndite). nambele situaii, contaminarea are loc cu mult nainte de producerea infeciei propriu -zise.
Ptrunderea n zone anatomice care sunt n relaie direct cu exteriorul (tubul digestiv, cile
respiratorii, cile urinare, cile genitale, conjunctiva, etc.) - fr traversarea barierelorepiteliale. Ex. de microrgansime: V. cholerae (holera), C.diphteriae, E.coli (infeciileurinare) etc.
n esuturile profunde - cu trecerea microorganismelor prin barierele anatomicereprezentate de piele i mucoase. Unele microorganisme pot trece direct prin pieleaintact, cum sunt leptospirele i unii viermi, spre exemplu: filariile, iar altele pot traversaepiteliul mucoasei respiratorii, digestive, a tractului genitourinar i conjunctiva.
direct n snge sau n esuturile profunde, prin leziuni traumatice,
muctura unor animale (virusul rabic,Pasteurella multocida), nepturile unor insecte (Plasmodium falciarum) diverse acte medicale efectuate fr respectarea normelor de asepsie (HIV, virusul
hepatitei B, etc.).Multiplicarea
Numrul de microorgansime care ptrund n organism (mrimea inoculului) este n modobinuit prea mic pentru a produce simptome. Agenii infecioi trebuie s nving mecanismele
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
18/235
18
de aprare antiinfecioas ale gazdei i s se nmuleasc la un nivel corespunztor, pentru caprezena lor n organism s se fac simit. n general, microorganismele se multiplic mai ncetin vivodect in vitro, tocmai din cauza reaciilor de aprare pe care le declaneaz. Intervalul -de la ptrunderea agentului infecios pn la apariia simptomatologiei clinice se numeteperioad de incubaie.
n funcie de durata acesteia, infeciile pot fi: cu perioad de incubaie scurt, de 1-7 zile (toxinfecii alimentare, meningite, difterie,gonoree etc.);cu incubaie medie, de 8-21 de zile(febra tifoid, tetanus etc.);cu incubaie lung, de zeci de zile(hepatita B, 60-180 de zile);cu incubaiefoar te lung, de anide zile (tuberculoz, SIDA, lepr etc.).Bolile infecioase ciclice (cu evoluie regulat), ca de pild: rujeola, rubeola, varicela,
variola etc., au o perioad fix de incubaie.Un aspect foarte important, determinant n evoluia infeciei, este sediul multiplicrii
microorgansimelor: extra- sau intracelular. Microorgansimele cu habitat extraclelular suntsupuse aciunii complementului, lizozimului, anticorpilor, fagocitozei etc., pe cnd cele cuhabitat intracelular sunt protejate de aceti factori. Eliminarea lor din organism se face prindistrugerea celulelor n care se afl, ceea ce atrage dup sine , producerea unor leziuni tisulare.
Localizarea infecieiUn proces infecios poate fi localizat atunci cnd germenii se multiplic ntr-o zon
relativ limitat a organismului (abces sau furuncul).Infecia se poate propaga de la poarta de intrare prin continguitate din aproape n aproape
i prin diseminare la distan pe cale sanguin sau/i limfatic. n cel din urm caz, rezultinfecia sistemicsaugeneralizat. Dintr-un proces infecios localizat, germenii pot fi vehiculai
de snge sau limf la diferite organe, iniiind o localizare secundar.Un aspect particular al diseminrii microbilor n organism este transpor tul mediat
celular i translocarea. Transportul mediat celular este modalitatea pe care o folosescmicroorganismele care rezist digestiei intracelulare a fagocitelor (de exemplu, chlamydiile,gonococii etc.). Ele se vor nmuli n aceste celule i vor fi vehiculate la distan. Translocareaeste proprietatea unor germeni de a traversa un epiteliu pentru a ajunge n circulaie (de exemplu,
bacilul tific este translocat de ctre celulele epiteliale ale mucoasei digestive i ajunge ncirculaie).
Prezena bacteriilor n snge se numete bacteriemie, iar multiplicarea lor n sngesepticemie.
Toxemia este prezena n snge a unei toxine secretate sau eliberate de microb , fie nafara organismului (toxina botulinic prezent n conserve), fie n organism (endotoxina
bacteriilor gram-negative cnd se produce o liz masiv a acestora n snge).
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
19/235
19
Producerea leziunilor morfologice i funcionale Alterri organice i funcionale datorate agenilor infecioi
Alterri mecanice. Obstruciile mecanice se datoreaz reaciei inflamatorii a gazdei carspuns la prezena microorganismului. Orice organ tubular poate fi obstruat n anumiteinfecii, uneori cu urmri nefaste:
-
obstrucia cilor respiratorii - n difterie.- ptrunderea germenilor dintr-o infecie a urechii medii la meninge poate duce la
dilatarea ventriculilor cerebrali prin obstruarea circulaiei LCR.- n infeciile parazitare. Dac agenii infecioi au dimensiuni mari i sunt n numr
suficient, ei pot obstruciona unele ci anatomice vitale. (Ascaris lumbricoidespoate obstrua un canalicul biliar, iar dac se gsete n numr mare produce unghem care obstrueaz tubul digestiv)
Distrugere celular. Bacteriile distrug celulele prin toxinelepe care le secret. Acesteaacioneaz, fie n apropierea porii de intrare (Shigella), fie la distan de locul unde sunt
produse (Corynebacterium diphteriae). La aciunea toxinelor se mai adaug cea a enzimelorhemolitice i leucolitice. Virusurile cu efect citopatogen produc liza celulelor n care senmulesc.Alterri farmacodinamice ale metabolismului. Toxina tetanic modific metabolismulcelulelor motoare ducnd la paralizii spastice, iar cea botulinic interfereaz eliberarea deacetilcolin la nivelul sinapselor colinergice, rezultatul fiind paralizia flasc. n ambelecazuri, moartea se produce prin paralizia muchilor respiratori. Toxina holeric cretenivelul de AMP-ciclic n celulele epiteliului intestinal, ceea ce are ca rezultat, eliminareaunor cantiti mari de ap n intestin cu producerea consecutiv a diareei. Moartea survine
prin deshidratare.
Alterridatorate reaciilor de aprare antiinfecioas Puroiul: un amestec de leucocite vii i distruse, bacterii i un exudat . El rezult n urmamigrrii rapide a leucocitelor n focarul infecios, stimulate de substane chemotactice ,
produse chiar de bacterii, dar i de esuturi sau leucocite. Dup distrugerea lor, leucociteleelibereaz n jur hidrolaze puternice din granulaiile lizozomale. Aceste enzime lezeazesuturile nvecinate, extinznd zona afectat.Abcesul. Cnd puroiul se constituie ntr-ocolecie, vorbim de un abces. De exemplu, furunculul se produce prin obstrucia unei glandesebacee, ceea ce ofer stafilococului auriu, prezent n mod normal pe piele, oportunitatea de ase nmuli eficient i de a produce infecia. Localizarea unui abces este esenial pentru
prognostic. Astfel, furunculele cutanate sunt dureroase, dar prognosticul nu este grav ngeneral, pe cnd localizarea unui abces la nivel cerebral este fatal. Pacienii cu deficienegenetice ale funciilor leucocitare sufer de infecii purulente recurente, chiar i ncondiiile unui tratament corect cu antibiotice.Reacia de faz acut. Prezena bacteriilor n esuturi elicit o reacie generalizat,cunoscut sub denumirea de rspuns de faz acut i care este un mecanism al rezisteneiantiinfeciose naturale. Dac intensitatea acestei reacii depsete nivelul fiziologic, ea
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
20/235
20
determin tulburri foarte grave. Bacteriile induc secreia IL-1, care acioneaz asupracentrului termoreglrii, rezultatul fiind febra. IL-1 stimuleaz, de asemenea, sinteza unorsubstane numite prostaglandine,care i ele acioneaz asupra centrului termoreglrii i suntresponsabile de starea general de disconfortpe care o resimim n timpul unei infecii.Endotoxinele bacteriilor gram-negative pot induce i ele rspunsul de faz acut. n doze
mici, endotoxinele produc febr i mobilizeaz unele mecansime de aprareantiinfecioas. n cantiti mari, ele induc ocul endotoxic i coagularea intravasculardiseminat.Rspunsul umoral (formarea de anticorpi specifici). n circulaie i n esuturi, anticorpii secombin cu agenii infecioi sau cu unele produse ale acestora (toxine, enzime etc.) . Acestecomplexe antigen-anticorp vor induce, n mod normal, un rspuns inflamator prinintermediul sistemului complement, n scopul eliminrii agenilor nfectioi sau aneutralizrii produilor lor toxici. Acest rspuns nu are ntotdeauna un efect protector. Lapersoane cu predispoziie alergic este posibil sensibilizarea organismului fa de
anumite antigene bacteriene, ceea ce duce la instalarea unor stri de hipersensibilitatemediate umoral (de tip I, II sau III). Astfel, de pild, sunt foarte bine cunoscute mecanismeleumorale prin care se produc complicaiile alergice poststreptococice cum sunt carditareumatismal (HS de tip II) i glomerulonefrita acut (HS de tip III). Rspunsul celular, mediat de limfocitele T citotoxice i macrofage, poate depi nintensitate limitele fiziologice, fiind asociat cu inflamaia cronic. Acest aspect se ntlnetemai frecvent n infeciile cu germeni cu habitat predominant intracelular (tuberculoz, lepr)i cu virusuri.
1.5.Etapele evoluiei unei boli infecioase
perioada de incubaie: intervalul de timp care trece de la ptrunderea microbului norganism pn la apariia primelor simptome.debutul boli ireprezint apariia primelor simptome i poate fi brusc sau insidios. perioada de stare. n aceast perioad se manifest semnele clinice i paraclinicecaracteristice bolii.perioada de convalescen n care se refac leziuni i se restabilesc funciile perturbate.Aceast perioada este important deoarece acum pot aprea recderi, complicaii saucronicizarea infeciei. n cazul unei evoluii favorabile se produce vindecareacu sau frsechele. n cazuri nefavorabile, boala evolueaz spre exitussau spre cronicizare.
1.6.Manifestrile clinice ale infecieiManifestrile clinice ale infeciei sunt multiple, fiind influenate de o serie de variabile:factor ii genetici ai gazdeii ai agenilor infecioi,doza infectant,calea de ptrundere,factori i de patogenitate ai microbilor,
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
21/235
21
rezistena antiinfecioas a gazdei,considerente anatomice,factori i de mediu i de ali factori pn n prezent necunoscui.
Unele infecii au, n general, acelai tablou clinic la majoritatea indivizilor (holer,cium, dizenterie, rabie etc.).
Alteori, evoluia este diferit, n funcie de rezistena individului i patogenitateaagentului infecios. Astfel, la unii indivizi, infecia poate fi urmat de starea de boal, decievolueaz cu manifestri clinice;la cei la care organismul este capabil s -i mobilizeze rapid ieficient mijloacele de aprare, infecia va rmneinaparent, determinnd doar modificriimunologice decelabile prin teste de laborator. ntre aceste dou extreme exist diferite nuane,care pot fi reprezentate sub forma unui iceberg.
Dup aspectul evolutiv, infeciile sunt :Infeciile acute: evolueaz ntr-un timp limitat, rezultatul fiind n general vindecarea.Exemple: bolile infecto-contagioase ale copilriei (rujeol, varicel, rubeol, oreion etc.).
n infeciile cronice: agentul patogen acioneaz timp ndelungat n organism. Elerezult, fie din cronicizarea unei infecii acute (hepatita B), fie n urma infeciei cugermeni care dau boli cu evoluie cronic (tuberculoz, sifilis, lepr etc.).Infeciile latente: agentul infecios se gsete n organism pentru o perioad ndelungat,se nmuleste intermitent i produce recidive (infecia herpetic).Infeciile lente:afecteaz ncet i progresiv sistemul nervos central. Unele sunt de naturviral, ca, de exemplu, panencefalita subacut sclerozant,produs de virusul rujeolic.
2. Recoltarea probelor biologice i aspecte generale privind diagnosticul de laborator
2.1.Recoltarea probelor biologice
Recoltarea corect a probelor este cel mai important pas n identificarea agentuluiresponsabil de o boal infecioas. Colectarea inadecvat poate determina eecul izolriimicroorganismului sau imposibilitatea de interpretare a rezultatelor, ca urmare a contaminrii
probelor.Concepte de baz privind recoltarea microbiologic:
a. Colectarea probei se face exact din locul infeciei, evitndu -se contaminarea de laesuturile sau secreiile din jur.
b. Colectarea probei trebuie realizat la timpul potrivit din zi (spre exemplu, colectarea
sputei dimineaa, nainte de mas).
c. Colectarea unei cantiti suficiente de material. Utilizarea de recipiente adecvate: sterile,etane. Utilizarea de medii de transport adecvate. A se verifica data de expirare nainte deutilizarea lor.
d. Ori de cte ori este posibil, colectarea probelor se face anterio r administrrii unuitratament antimicrobial.
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
22/235
22
e. Notarea corect a probelor i completarea fielor necesare analizei. Este necesarspecificarea sursei de colectare. Spre exemplu: leziune, membrul inferior, stng.
f. Reducerea la minim a timpului de transport. Meninerea unui mediu adecvat ntrecolectare i transport.
g.
Decontaminarea pielii, dac este posibil. Utilizarea de alcool 70-95% i 2% clorhexidin
sau 1-2% tinctur de iod. Este nevoie de meninerea substanei dezinfectante timp de 2minute.
h. Petru realizarea mai multor teste este nevoie de asigurarea mediilor potrivite pentrutransport, n funcie de microorganismele suspectate (virus, bacterie aerob sau anaerobetc).
2.2.Aspecte generale privind diagnosticul de laboratorPrin diagnosticul medical microbiologic se identific etiologia infeciilor. Procedurile de
laborator utilizate n cazul infeciilor includ:1. Identificarea morfologic a agentului infecios pe frotiuri (microscop optic i electronic).
2.
Izolarea prin cultivare i identificarea agentului patogen.3. Detectarea antigenelor prin metode imunoenzimatice sau prin imunofluorescente (vezicursul 3).
4. Identificarea ADN-ului prin hibridizri ADN-ADN sau ADN-ARN.5. Identificarea ADN-ului prin PCR i electroforez.6. Identificarea anticorpilor sau a celulelor imunitare mpotriva agentului infecios.
n domeniul bolilor infecioase, rezultatele testelor de laborator depind foarte mult decalitatea specimenelor, de atenia recoltrii, de profesionalismul tehnic i de experiena
personalului de laborator. Dei medicul trebuie s aib competenele necesare pentru a realizacteva teste microbiologice simple, tehnicile de laborator mai complexe sunt lsate pe seama
microbiologilor i a tehnicienilor. Medicul specializat pe boli infecto-contagioase trebuie s tiecnd se recolteaz probele, ce investigaii de laborator s cear i cum s interpreteze rezultatele.
Comunicarea dintre medic i microbiolog. Diagnosticul microbiologic vizeazcaracterizarea a mii de ageni asociai cu bolile infecioase. Tehnicile utilizate pentrucaracterizarea diverilor ageni infecioi variaz mult, n funcie de manifestrile clinice i detipul de agent presupus (virus, bacterie, fung, ali parazii). Deoarece printr-o singur analiz nueste posibil izolarea i caracterizarea tuturor potenialilor patogeni, informaiile clinice suntmult mai importante dect n cazul analizelor hematologice sau chimice. Clinicianul trebuie s
pun un diagnostic prezumtiv, nu s atepte mai nti rezultatele de laborator. Atunci cnd cereanalizele de laborator, trebuie s informeze microbiologul despre acest diagnostic iniial.Etichetarea corect a specimenelor trimise spre analiz trebuie s includ datele de identificareale pacientului, date clinice, testele cerute i datele de contact corecte ale medicului clinician.
Multe dintre microorganismele patogene se nmulesc lent, iar izolarea i identificarea lorpoate dura zile sau chiar sptmni. Tratamentul optim nu poate fi aplicat n lipsa diagnosticuluimicrobiologic. Dup recoltarea i trimiterea probelor spre laborator, medicul recomand
pacientului nceperea tratamentului pentru presupusul diagnostic. Recomand, n general, un
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
23/235
23
medicament cu spectru mai larg. n funcie de rezultatele de laborator, tratamentul poate fimeninut sau modificat. Clinicianul este inut la curent cu evoluia testelor de laborator pentru ca,eventual, s modifice tratamentul mai repede.
n laborator, se examineaz la microscop material proaspt necolorat sau material fixat icolorat i se cultiv microorganismele n condiii optime, n funcie de informaiile clinice
primite. Microorganismele izolate pot fi testate antimicrobial pentru a se decide medicaiaoptim. Microorganismele izolate din zone ale corpului, n mod normal sterile, au importanclinic. Orice microorganism recoltat din snge, LCR, lichid sinovial sau pleural este importantn diagnosticare. n mod contrar, multe zone ale corpului au o microbiot normal, care poate fimodificat endogen sau exogen. Identificarea de microorganisme potenial patogene, din tractulrespirator, gastro-intestinal, urinar, din rni sau din piele, trebuie privit n contextul microbiotei.Interpretarea rezultatelor are n vedere corelarea datelor microbiologice cu informaiile clinice.
Aspectele mai detaliate privind diagnosticul de laborator sunt tratate n capitoleleurmtoare.
3.
Principii de sterilizare i dezinfecieSterilizareaeste definit ca fiind omorrea sau ndeprtarea tuturor microorganismelor i
virusurilor de pe un obiect sau produs.Dezinfeciareprezint ndeprtarea patogenilor de pe obiecte sau de pe tegument.Termenul asepsie acoper toate msurile luate n vederea prevenirii contaminrii
obiectelor sau leziunilor.n dezinfecie i sterilizare se utilizeaz att ageni chimici, ct i fizici. O msur a
eficacitii acestui proces o reprezint valoarea D, care exprim timpul necesar reducerii cu pnla 90% a numrului de microorganisme.
Agenii pentru sterilizare sunt:aerul cald uscat (180C, 30 minute; 160C, 120 minute);aerul cald umed (121C, 15 minute, o presiune atmosferic; 134C, 3 minute, 2atmosfere);razele sunt utilizate n radiosterilizare.Dezinfecia este realizat, de obicei, cu ajutorul agenilor chimici, dintre care cei mai
importani sunt: aldehidele, alcoolii, fenolii, halogenii i surfactanii (detergenii).
Termeni i noiuni generale
Sterilizarea reprezint omorrea tuturor microorganismelor i virusurilor sau completa loreliminare de pe un material, cu o ct mai mare precizie. Un obiect, sterilizat i mpachetat astfelnct s nu fie contaminat, este numit steril. Metodele standard de sterilizare cu aplicaii medicalesunt capabile s provoace distrugeri iremediabile microorganismelor patogene, precum bacterii,
protozoare, fungi, viermi (inclusiv ou). Proceduri speciale sunt necesare pentru inactivareaprionilor (ex. autoclavarea: 121C timp de 4 ore i 30 minute). Descoperirile din ultimii aniindic faptul c arheobacteriile hipertermofile rezist la temperaturi de peste 100C i la
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
24/235
24
autoclavare la 121C, timp de o or. Aceste forme de via extreme, alturi de prioni, nu pot fidistruse prin metode standard de sterilizare.
Dezinfecia este un tratament orientat ctre prevenirea transmiterii anumitormicroorganisme. Scopul procedurilor de dezinfecie este acela de a face un obiect incapabil srspndeasc microorganisme.
Conservarea este un termen general ce face referire la msurile adoptate n vedereaprevenirii sporulrii microorganismelor pe diferite produse (farmaceutice, medicamente).
Decontaminareareprezint ndeprtarea sau reducerea numrului de microorganisme depe un obiect.
Scopul msurilor i tehnicilor aseptice este acela de a preveni contaminarea microbian aobiectelor i leziunilor. Msurile aseptice implic utilizarea unor ageni chimici care s acionezecontra patogenilor din sau de pe esuturi.
Mecanisme de aciuneCnd microorganismele sunt distruse prin cldur, proteinele lor (enzimele) sunt
denaturate ireversibil. Radiaiile ionizante duc la formarea unor grupe reactive ce distrug ADN-ul i proteinele. Expunerea la radiaii UV modific structural ADN -ul (dimeri timinici),mpiedicnd replicarea. Aceste distrugeri pot fi reparate pn ntr-un anumit punct prinexpunerea la lumin (fotoreactivare). Majoritatea agenilor chimici (alcooli, fenoli, aldehide,metale grele, oxidani) denatureaz proteinele ireversibil. Surfactanii (amfoterici i cationii)
atac membrana citoplasmatic. Derivaii acridinici se leag de ADN, prevenindreplicarea i transcripia.
A. Metode fizice de sterilizare i dezinfecie I.
ClduraAplicarea cldurii este o metod simpl, ieftin i eficient de distrugere a patogenilor.
Metodele ce utilizeaz cldura variaz, n funcie de necesiti. Pasteurizarea (fig. 2.1). Aceasta este un tratament antimicrobian utilizat pentru alimentelen form lichid:
La temperaturi joase: 61,5 C, 30 minute; 71 C, 15 secunde;La temperaturi ridicate: expunerea cteva secunde la 80-85 C;
Ultrapasteurizarea: nclzirea la 150 C timp de 2 secunde jumtate ntr-un containerpresurizat, cu aburi.
Dezinfecia. Aplicarea unor temperaturi mai sczute dect cele necesare sterilizrii. Dereinut! Fierberea instrumentelor, acelor, seringilor, etc. nu constituie sterilizare. Muli
spori bacterieni nu sunt distrui prin aceast metod .
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
25/235
25
Sterilizarea prin cldur uscat (fig. 2.2). Valorile recomandate pentru sterlizarea la caldsunt: 180C timp de 30 minute, 160C timp de 120 minute, n timp ce, obiectele pentrusterilizat trebuie s ating aceste temperaturi pe toat durata procesului. Sterilizarea prin cldur umed (Fig. 2.3). Autoclavele presurizate i saturate n aburisunt utilizate pentru urmtoarele valori:
121 C, 15 minute, o atmosfer;134 C, 3 minute, 2 atmosfere.
II. RadiaiileRadiaiile nonionizante. Razele UV (280200 nm) reprezint un tip de raze nonionizantecare sunt rapid absorbite de ctre o varietate de materiale. Razele UV sunt astfel folositedoar pentru a reduce patogenii aflai n aer (teatre chirurgicale, diferite echipamente) i
pentru dezinfecia suprafeelor netede (fig. 2.4).Radiaiile ionizante.Sunt utilizate dou tipuri:
Radiaiile gamma constau n unde electromagnetice produse prin dezintegrare
nuclear (radioizotopul Co 60).Radiaiile corpusculare constau n electroni produi de generatoare i acceleraipentru a le crete nivelul energetic.
Echipamentele de radiosterilizare sunt scumpe. La scar larg, astfel de echipamente suntutilizate doar pentru sterilizarea bandajelor, materialelor pentru suturi, echipamente medicale din
plastic i farmaceuticele sensibile la cldur. Doza necesar depinde de nivelul de contaminare ide ct de sensibile sunt microorganismele la radiaii.
III. FiltrareaLichidele i gazele pot fi sterilizate i prin filtrare (fig. 2 .5). Majoritatea filtrelor
disponibile rein doar bacteriile i fungii, dar cu ajutorul filtrelor ultrafine, pot fi reinute virusuri
i chiar molecule mari. Datorit porilor de dimensiuni mici, filtrele membranare permit reinereadiferitelor particule. Cel mai bine cunoscut tip de filtru este acela din coloizi organici. Acestemateriale pot fi procesate, astfel nct se obin straturi filtratoare foarte subiri, cu dimensiunile
porilor calibrate. n filtrele obinuite ca grosime, lichidele sunt trecute printr-un material fibros(azbest). Eficacitatea acestui tip de filtru se bazeaz pe adsorbie. Datorit posibilelor efectetoxice, sunt scoase din uz.
B. Metode chimice de sterilizare i dezinfecie I. Etilen oxid (fig. 2.6). Acest gaz reactiv este inflambil, toxic i puternic iritant al
mucoaselor. Etilen oxidul poate fi utilizat pentru sterilizarea la temperaturi joase (20-60C). Gazul are o capacitate mare de penetrare i poate trece prin unele folii de plastic. Undezavantaj l reprezint faptul c nu poate distruge microorganismele uscate i necesitun nivel relativ de umiditate n camera de sterilizare, de 40-90%. Etilen oxidul secomercializeaz sub form de soluii n plastic, cauciuc i materiale similare. Itemiisterilizai necesit o perioad pn este ndepratat etilen oxidul total de pe suprafaa lor.
II. Aldehidele. Formaldehida este cea mai important dintre acestea. Poate fi utilizaz naparate speciale de sterilizare. Utilizarea sa principaleste n dezinfecie. Formaldehida
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
26/235
26
este un gaz solubil n ap. Este iritant al mucoaselor; contactul cu pielea poate produceinflamaii sau eczeme alergice. Areun spectru larg de aciune asupra bacteriilor, fungilori virusurilor. La concentraii ridicate, poate distruge i sporii. Aceast substan esteutilizat ca dezinfectant al suprafeelor i obiectelor, la o concentraie de 0,5 -5%. ntrecut, era utilizat sub form gazoas pentru a dezinfecta aerul din ncperi (5g/m 3).
Mecanismul de aciune se bazeaz pe denaturarea proteinelor. O alt aldehid utilizat ndezinfecii este glutaraldehida.
III.
Alcooli.Tipul de alcool utilizat n dezinfecii este etanolul (80%), propanolul (60%) iizopropanolul (70%). Alcooli sunt eficeni mpotriva bacteriilor i fungilor, mai puinmpotriva virusurilor. Nu pot distruge sporii bacterieni. Datorit aciunii rapide i a
ptrunderii bune n piele, sunt utilizai n dezinfecia igienic i chirurgical a pielii, maiales a minilor. Un dezavantaj l reprezint faptul c nu au un efect ndelungat. Alcoolidentaureaz proteinele.
IV. Fenolii. Chirurgul britanic, Joseph Lister, a fost primul care a utilizat fenolul n medicin.
Astzi, derivaii fenolului sunt nlocuii cu grupri organice i/sau halogeni (alchilai,arilai, fenoli halogenai). O caracteristic comun a substanelor fenolice este slabaaciune asupra sporilor i virusurilor. Fenolii denatureaz proteine. Ei se leag demateriale organice destul de de slab, fiind potrivii pentru dezinfecia excreiilor.
V. Halogenii. Clorul, iodul i derivai ai acestor halogeni sunt potrivii ca dezinfectani.Clorul i iodul au un efect microbicidal general i distrug sporii.
Clorul denatureaz proteinele prin legarea de gurprile amino libere. Acidulhipocloros, pe de alt parte, este produs sub form de soluii apoase, apoi sedesface nacid clorhidric i oxigen, acionnd ca un agent oxidant. Clorul esteutilizat pentru dezinfectarea apei de but, a apei din piscine (0,5 mg/l).
Hipoclorura de var (clorura de var) poate fi utilizat ca dezinfectant nespecific alexcrementelor. Cloraminele sunt compui organici ai clorului care desfac clorul nsoluie apoas. Sunt utilizai n curarea i splarea produselor i dezinfeciaexcrementelor.Iodul are proprieti similare cu ale clorului. Cele mai importante preparate pe
baz de iod sunt soluiile de iod i iodur de potasiu n alcool (tinctura de iod),utilizate pentru dezinfecia pielii i a leziunilor mici. Iodoforii sunt complexe aleiodului cu surfactani (polivinilpirolidona). Iodoforii au efecte mai puin iritantedect iodul pur, dar au i efecte mai slabe germicide.
VI. Oxidanii.Acest grup include ozonul, peroxidul de hidrogen, permanganat de potasiu iacidul peracetic. Majoritatea sunt utilizai ca antiseptici moderai ai mucoaselor, pielii saurnilor.
VII.
Surfactanii. Aceste substane (cunoscute i ca ageni activi de suprafa, tenside saudetergeni) includ detergenii anionici,cationici sau amfoterici, dintre care cei cationici iamfoterici sunt cei mai eficieni. Efectele bactericide ale acestor substane sunt doarmoderate. Nu au efect asupra bacilului Koch (cu excepia amfotensidelor), sporilor sau
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
27/235
27
virusurilor necapsulate. Eficacitatea lor este bun mpotriva bacteriilor Gram-pozitive,dar mai slab asupra bacteriilor Gram-negative. Avantajele includ nivelul sczut detoxicitate, lipsa mirosului, tolerana bn a pielii i efectul curitor.
C. Dezinfecia practicScopul dezinfeciei chirurgicale a minilor este acela de a ndeprta ct mai multe
microorganisme. Procedura este aplicat dup splarea puternic a minilor. Utilizarea alcooluluieste cea mai potrivit n astfel de cazuri, cu toate c nu are efect sporicid. Al cooli sun astfelcombinai cu ali dezinfectani (compuii amoniului). Mai pot fi utilizai iodoforii.
Scopul dezinfeciei igienice a minilor este acela de a cura minile contaminate cupatogeni. i n acest caz, alcooli sunt principalii ageni folosii. Alcoolii i compuii iodului sepreteaz pentru dezinfectarea pielii pacienilor n vederea pregtirii pentru operaii sau injecii.
Agenii cu miros puternic sunt opiunea logic pentru dezinfecia excreiilor (fecale,sput, urin etc.). Nu este necesar distrugerea sporilor. n acest caz, sunt utilizate preparatelefenolice. Canalizrile contaminate ale spitalelor pot fi dezinfectate termic (80-100C), dac este
necesar.Dezinfecia suprafeelor este o parte important a igienii spitalelor. Combinaia ntrecurenie i dezinfecie este foarte eficient. Agenii corespunztori includ derivai ai aldehidelori fenolilor n combinaie cu surfactanii.
Dezinfecia instrumentelor este utilizat doar pentru ustensilele ce nu cauzeaz leziunimucoaselor i pielii (ex. instrumente dentare utilizate n lucrul pe substana dur a dintelui). Aceste pregtiri trebuie s aib i un efect curitor. Dezinfecia lenjeriei poate fi realizat prinsubstane chimice sau n combinaie cu tratamente termice. Substanele utilizate includ derivai aifenolilor, aldehide i clor, precum i i compui surfactani. Dezinfecia trebuie s aib loc ntimpul splrii.
Clorul este agentul ales pentru dezinfecia apei potabile i a celei din piscine. Este uorde dozat, acioneaz rapid i are un spectru larg de aciune. Nivelul recomandat al concentraiei
pentru apa de but este de 0,1-0,3 mg/l, iar pentru apa din piscine 0,5 mg/l.Dezinfecia final a unei ncperi este procedura aplicat n spital dup finalizarea
tratamentului unui pacient infectat i se aplic ncperii, ct i mobilierului. Evaporarea iatomizarea formaldehidei (5g/m3), metoda preferabil, necesit o perioad de expunere de 6 ore.Aceast procedur este acum nlocuit cu metode ce implic dezinfecia de suprafa i prin
pulverizarea de produse coninnd formaldehid. Dezinfecia din spitale este important nprevenirea circulaiei infeciilor ntre pacienii aceluiai spital. Procedura trebuie s fie notatpentru fiecare caz n parte.
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
28/235
28
Figura 2.1 Schema procesului de pasteurizare
(http://knowledgeofhealth.com/unclean-food-milking-the-public-part1/)
Figura 4.2 Etuvasterilizare cu cldur uscat
(http://www.medicalexpert.ro/etuve-termostat.html)
Figura 2.3 Autoclavulsterilizare cu cldurumed(http://www.fairdealtraders.com/autoclave.php )
Figura 2.4 Lampa UV(http://halmapr.com/news/hanovia/page/9/ )
http://knowledgeofhealth.com/unclean-food-milking-the-public-part1/http://knowledgeofhealth.com/unclean-food-milking-the-public-part1/http://knowledgeofhealth.com/unclean-food-milking-the-public-part1/http://knowledgeofhealth.com/unclean-food-milking-the-public-part1/http://www.medicalexpert.ro/etuve-termostat.htmlhttp://www.medicalexpert.ro/etuve-termostat.htmlhttp://www.medicalexpert.ro/etuve-termostat.htmlhttp://www.medicalexpert.ro/etuve-termostat.htmlhttp://www.fairdealtraders.com/autoclave.phphttp://www.fairdealtraders.com/autoclave.phphttp://www.fairdealtraders.com/autoclave.phphttp://halmapr.com/news/hanovia/page/9/http://halmapr.com/news/hanovia/page/9/http://halmapr.com/news/hanovia/page/9/http://halmapr.com/news/hanovia/page/9/http://www.fairdealtraders.com/autoclave.phphttp://www.medicalexpert.ro/etuve-termostat.htmlhttp://www.medicalexpert.ro/etuve-termostat.htmlhttp://knowledgeofhealth.com/unclean-food-milking-the-public-part1/http://knowledgeofhealth.com/unclean-food-milking-the-public-part1/ -
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
29/235
29
Figura 2.5 Filtre microbiologice(https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbran
d-water-testing-membrane-filters-47mm-sterile/09719555 )
Figura 2.6 Sterilizator cu etilen oxid(http://www.alibaba.com/product-detail/Ethylene-
Oxide-Sterilizer_12251148/showimage.html )
https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-water-testing-membrane-filters-47mm-sterile/09719555https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-water-testing-membrane-filters-47mm-sterile/09719555https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-water-testing-membrane-filters-47mm-sterile/09719555https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-water-testing-membrane-filters-47mm-sterile/09719555https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-water-testing-membrane-filters-47mm-sterile/09719555http://www.alibaba.com/product-detail/Ethylene-Oxide-Sterilizer_12251148/showimage.htmlhttp://www.alibaba.com/product-detail/Ethylene-Oxide-Sterilizer_12251148/showimage.htmlhttp://www.alibaba.com/product-detail/Ethylene-Oxide-Sterilizer_12251148/showimage.htmlhttp://www.alibaba.com/product-detail/Ethylene-Oxide-Sterilizer_12251148/showimage.htmlhttp://www.alibaba.com/product-detail/Ethylene-Oxide-Sterilizer_12251148/showimage.htmlhttp://www.alibaba.com/product-detail/Ethylene-Oxide-Sterilizer_12251148/showimage.htmlhttps://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-water-testing-membrane-filters-47mm-sterile/09719555https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-water-testing-membrane-filters-47mm-sterile/09719555https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-water-testing-membrane-filters-47mm-sterile/09719555 -
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
30/235
30
Cursul 3 Mijloace de aprare ale
organismului uman
Corpul nostru este expus continuu la bacterii, virusuri, fungi i parazii. n mod normal,toi acetia se gsesc, n procente variabile, n piele, cavitatea bucal, cile respiratorii, tractuldigestiv, la nivelul conjunctivei sau n tractul urinar. Dac ptrund n esuturile profunde, multedintre aceste microorganisme pot produce perturbri grave ale funciilor organismului sau chiarmoartea. n plus, suntem expui uneori i la microorganisme obligatoriu patogene, care produc
boli de tipul: pneumoniilor, infeciilor streptococice, meningitelor, febrei tifoide.Organismul prezint un sistem de mecanisme care combat infeciile i agenii toxici.
Acest sistem cuprinde (Fig. 3.1.):mecanisme nespecifice (nnscute);
mecansime specifice (dobndite).
Figura 3.1. Imunitatea nnscut i dobndit(dup Burmester i Pezzutto, 2003)
1. Mecanismele nespecifice
Imunitatea nnscut se refer la rezistena prezent la natere, nefiind dobndit princontact cu o particul strin (antigen). Este caracteristic tuturor indivizilor dintr-o specie i
include:barierele fiziologice prezente la porile de intraremecanismele nespecifice ale sistemului imunitar:
fagocitemediatori ai inflamaieicomponente ale sistemului complementcelulele NK (asasini naturali).
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
31/235
31
Figura 3.2. Originea elementelor figurate ale sngelui (dup Burmester i Pezzutto, 2003)
Figura 3.3.Deplasarea neutrofilelor prin pereii capilarelor prin diapedez i cu ajutorulchemotaxiei spre locul infeciei(dup Guyton i Hall, 2006)
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
32/235
32
1.1. Barierele fiziologice prezente la porile de intrare
Pielea. Puine microorganisme sunt capabile s ptrund prin pielea intact, dar multe potptrunde i se pot localiza n glandele sebacee, sudorale sau n foliculii piloi. Transpiraia i
sebumulca urmare a pH-ului acid i a unor substane (mai ales acizi grai) au proprietiantimicrobiene. n piele este prezent lizozimul, o enzim care degradeaz peretele celular
bacterian i poate oferi o protecie parial. Lizozimul este prezent i n lacrimi, n secreiilerespiratorii i ale cervixului uterin. Pielea produce diverse substane antimicrobiene, printrecare i o protein, numit psoriazina. Membranele mucoase. n tractul respirator se afl o pelicul de mucus care este deplasatcontinuu de ctre cili spre faringe. Bacteriile tind s se lipeasc de acest film mucos. n plus,acesta mai conine lizozim i alte substane antimicrobiene. Pentru unele microorgansime,
prima etap n infecie este ataarea la suprafaa celulelor epiteliale prin proteine adezive de
suprafa (pilii gonococilor sau ai bacilului coli). Dac aceste celule prezint legate IgA unmecanism de rezisten al gazdei ataarea bacteriei poate fi prevenit. Microorganismulpoate depi mecanismul prin distrugerea anticorpului de ctre o proteaz. Cndmicroorganismele ptrund prin membranele mucoase, tind s fie preluate de fagocite itransportate prin vasele limfatice spre ganglioni. Fagocitele acioneaz ca bariere nrspndirea infeciilor. Mucusul i cilii din tractul respirator sunt completai de macrofagelealveolare. De asemenea, vibrizele din narine i reflexul de tuse previn aspirarea agenilor
patogeni. n tractul gastro-intestinal intervin: saliva cu enzime hidrolitice, aciditatea gastric,enzimele proteolitice i macrofagele enterice. Microflora constant din membranele mucoasese opune i ea adeziunii agenilor patogeni (aa numita interferen bacterian). Spre
exemplu, lactobacilii din vagin menin un pH acid, care inhib levurile, bacteriile anaerobe igram-negative.
1.2. Mecanismele imunitii nnscute
Rspunsul iniial la atacul patogenilor este reprezentat de activarea fagocitelor i asistemului complement prin ci alternative. Urmtoarea linie defensiv este reprezentat deeliberarea de citokine i de ali mediatori care declaneaz rspunsul inflamator. Acesta se
produce rapid i are rolul de a limita rspndirea infeciei pn cnd este iniiat un rspunsspecific. Totui, unele microorganisme au dezvoltat modaliti de a depi aceste bariere. Spreexemplu, bacteriile (pneumococii) care au capsule bogate n polizaharide pot evita fagocitoza, iarunele virusuri (poxvirusurile) produc omologi ai receptorilor pentru citokine, care funcioneazca antagoniti pentru citokine. Aceste mecanisme ncetinesc rspunsul imun, suficient pentru a
permite microorganismului s gseasc o ni de ptrundere.
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
33/235
33
1.2.1. Fagocitele
Neutrofilele i macrofagele tisulare sunt principalele care atac i distrug bacteriile,virusurile i ali ageni patogeni. Neutrofilele sunt celule mature care atac i distrug bacterii,chiar n sngele circulant. n mod contrar, macrofagele tisulare sunt iniial monocite sanguine, cu
activitate limitat. Odat ajunse n esuturi, i mresc volumul, uneori de peste 5 ori, devinmacrofage tisulare, capabile s lupte cu agenii infecioi intratisulari. Neutrofilele i monocitelese pot ngusta i trece prin porii capilarelor, proces numit diapedez. n spaiile interstiiale sedeplaseaz prin micri amiboide.
Leucocitele sunt atrase ctre zonele infectate prin chemotaxie. Cnd un esut seinflameaz, sunt produse peste o duzin de substane diferite care declaneaz chemotaxialeucocitelor. Aceste substane includ: toxine virale i bacteriene, resturi ale esuturilor distruse, oserie de produi de reacie ai sistemului complement, substane rezultate n urma coagulrilor dinzonele inflamate. Chemotaxia depinde de gradientul concentraiei substanelor chemotactice.
Concentraia este mai mare n apropierea sursei, fapt ce direcioneaz micrile leucocitelor.Chemotaxia este eficient pe o raz de 100 m. Astfel, dat fiind c nici o zon dintr-un esut nueste la o distan mai mare de 50 m fa de un capilar, semnalul chimic poate atrage rapidlecucocitele.
Fagocitoza. Cea mai important funcie a neutrofilelor i macrofagelor tisulare estefagocitoza, capacitatea de a ingera substane strine. Fagocitoza este un proces selectiv, altfel s -ar distruge celule sntoase ale organismului. Selecia se bazeaz pe trei criterii:
structurile sntoase din organism au suprafaa neted. Activitatea fagocitelor va cretecu ct structurile cu care intr n contact sunt mai abrazive. structurile sntoase prezint un nveli proteic care va respinge fagocitele. Structurile
mbtrnite sau strine nu au aceste nveliuri i vor fi recunoscute de ctre fagocite. sistemul imunitar produce anticorpi. Acetia se leag la suprafaa microorganismelor, iar
prin intermediul lor, fagocitele vor distruge microorganismele.Neutrofilele sunt deja mature cnd ptrund n esuturi i pot distruge microorganismele
imediat. O singur neutrofil poate fagocita ntre 3 i 20 de bacterii. Macrofagele tisulare suntmult mai puternice, fiind capabile s distrug pn la 100 de bacterii. De asemenea, pot digera i
particule mai mari, chiar hematii ntregi sau parazii ai malariei. n plus, pot elibera produiidegradai i astfel supravieuiesc cteva luni. Odat ingerate, majoritatea particulelor suntdistruse de ctre enzimele intracelulare. Veziculele de fagocitoz fuzioneaz cu lizozomi, acetiaelibernd enzime care degradeaz particulele nglobate. Att lizozomii neutrofilelor, ct i aimacrofagelor, conin enzime proteolitice. n schimb, doar lizozomii macrofagelor conin i lipazecare pot distruge nveliul bacilului tuberculozei.
Aceste leucocite mai conin i ali ageni bactericizi care sunt eficieni atunci cndaciunea lizozomilor eueaz. Printre acetia se numr agenii oxidani (superoxidul, apaoxigenat, ionii hidroxil) din membrana fagosomilor sau a peroxizomilor i hipocloritul, a crui
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
34/235
34
formare este catalizat de enzimele lizozomilor. Exist i bacterii care pot scpa acestorsubstane, spre exemplu bacilul tuberculozei.
Sistemul reticulo-endotelial. O parte dintre monocitele care ptrund n esuturi devinmacrofage tisulare, iar restul rmn ataate de esut luni sau chiar ani. Au aceeai capacitateimunologic ca i a macrofagelor mobile. Dac sunt stimulate, se desprind din esut, devin
mobile i rsound corespunztor la procesul inflamator. Astfel, corpul are un sistem monocite -macrofage, rspndit aproape n toate esuturile. Totalitatea monocitelor, macrofagelor mobile,macrofagelor ataate i a unor celule epiteliale specializate din esutul hematopoietic formeazsistemul reticulo-endotelial. Deoarece acest sistem este mai bine cunoscut sub denumirea dereticulo-endotelial dect de monocite-macrofage, trebuie reinut ca un sistem fagocitargeneralizat localizat n toate esuturile, mai ales n zonele care intr n contact cu o cantitate marede substane strine. Astfel, n piele macrofagele se numesc histiocite. n ganglionii limfatici,macrofagele se gsesc n sinusurile limfatice (capilare) i cur limfa. n plmni, macrofagelese localizeaz n alveole i poart denumirea de macrofage alveolare. Dac particulele ajunse n
plmni au dimensiuni mici, pot fi degradate de ctre macrofage. Dac dimensiunile sunt preamari, celula fagocitar devine gigantic i nconjoar, ca o capsul, particula, pn cnd, daceste posibil, o va putea degrada. Astfel de capsule se formeaz n jurul bacilului tuberculozei,
particulelor de siliciu sau a particulelor de carbon. n ficat macrofagele se numesc celuleKupffer. Acestea cur sngele portal care ajunge la ficat de la intestine. n splin i n mduvaosoas se gsesc macrofage care cur sngele, n cazul n care ptrund microorganisme pn laacest nivel. n splin, tot prin fagocitoz sunt degradate i hematiile mbtrnite.
1.2.2.
InflamaiaCnd esuturile sunt lezate, fie din cauza bacteriilor, a traumelor, a substanelor toxice, a
temperaturilor ridicate, elibereaz o serie de substane i determin transformri secundare aleesutului sntos din jur. Acest complex de transformri se numete inflamaie. n timpulinflamaiei, apar urmtoarele transformri:
vasodilataie local, cu exces de snge n zona respectiv creterea permeabilitii capilarelor, ceea ce duce la acumularea de lichid n spaiileinterstiialecoagularea lichidului din spaiile interstiiale, ca urmare a excesului de fibrinogen eliberatdin capilaremobilizarea unui numr crescut de granulocite i monocite n zona afectatcreterea n volum a celulelor din esutul afectat. Dintre substanele care produc aceste reacii se numr: histamina, bradichinina,
serotonina, prostaglandinele, produi ai sistemului complement i limfokine (eliberate delimfocitele T). Aceste substane activeaz sistemul reticulo-endotelial i, n cteva ore,macrofagele ncep s digere esutul distrus. Uneori, pot s distrug i celule sntoase.
Efectul de delimitare al inflamaiei. Unul dintre primele rezultate ale inflamaiei estedelimitarea ariei afectate de restul esutului. Spaiile interstiiale i vasele limfatice din zona
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
35/235
35
inflamat sunt blocate prin cheaguri de fibrin. Acest proces ncetinete rspndirea bacteriilorsau a substanelor toxice. Spre exemplu, cnd stafilococii ptrund n esuturi, elibereaz toxinecelulare extrem de puternice. Ca urmare, inflamaia se produce rapid mai rapid dect se potmultiplica i rspndi patogenii. Astfel, infeciile stafilococice sunt bine delimitate. n schimb, streptococii nu determin distrugeri locale puternice. Procesul de delimitare al infeciei este mai
ncetinit, iar streptococii se pot rspndi. Ca rezultat, infeciile streptococice au o tendina maimare de a disemina i produc deces mai frecvent dect stafilococii.
Rspunsul macrofagelor i neutrofilelor n timpul inflamaiei. n cteva minute de ladeclanarea inflamaiei, macrofagele deja prezente n esut ncep fagocitoza. n momentulactivrii, i mresc volumul, apoi se desprind din locul n care sunt ataate i devin mobile.
Numrul macrofagelor astfel activate nu este mare, dar este vital.Urmtoarea linie defensiv este reprezentat de neutrofile. Acestea pot invada aria
inflamat ca urmare a produilor eliberai aici i care determin urmtoarele procese (Fig. 3.3.):marginaia: alterarea suprafeei interne a capilarelor din zona inflamat i ataarea
neutrofilelor de endoteliul acestoradiapedeza: slbirea legturilor intercelulare din endoteliul capilarelor i venulelor,formarea de pori prin care neutrofilele ajung n zona inflamatchemotaxia: atragerea neutrofilelor n zona inflamat.Astfel, n cteva ore, zona inflamat este invadat de neutrofile.Produi ai inflamaiei, ajuni n circulaia sanguin, determin activarea mduvei osoase.
Aceasta va mobiliza i sintetiza neutrofile. Numrul neutrofilelor poate crete n cteva ore pnla 1500025000 (de la 4000 5000, n mod normal), proces numit neutrofilie. Monocitele dindepozite sunt reduse, iar sinteza lor dureaz mai mult. Astfel, noi macrofage vor putea ajuta ladistrugerea invadatorilor doar n cteva zile sau chiar sptmni. De asemenea, mduva osoas
ncepe s produc o cantitate mai mare i de granulocite. Formarea puroiului. Cnd macrofagele i neutrofilele ingereaz mari cantiti de
microorganisme, la un moment dat vor muri. Dup cteva zile din momentul nceperiiinflamaiei, se formeaz o cavitate n zona afectat. Aici se gsesc procente diferite de esutnecrozat, macrofage i neutrofile moarte i licid interstiial. Acest amestec este cunoscut subdenumirea de puroi. Dup ce inflamaia a fost stopat, celulele moarte i esutul necrotic seautolizeaz, n cteva zile. Produii rezultai sunt absorbii de esutul din jur i de ctre limf.
1.2.3. Sistemul complementAcest sistem completeaz aciunea anticorpilor. Este alctuit din aproximativ 20 proteine,
multe dintre ele fiind proenzime. Aceste proteine reprezint 5% din totalul proteinelorplasmatice. Principalele structuri ale sistemului sunt 11 proteine (C1-C9, B i D), prezente nmod normal n snge, dar care pot ajunge i n spaiile interstiiale. Aceste proenzime suntnormal inactive, dar se pot activa prin 2 ci:
calea clasic: este iniiat de prezena a cel puin dou complexe antigen -anticorp.
-
7/25/2019 Cursc Complet Microbiologie
36/235
36
calea alternativ: activarea se produce prin aciunea produilor derivai dinmicroorganisme, endotoxine, polizaharide sau IgA agreagate.Activarea duce la formarea a numeroi produi, unii dintre acetia avnd efecte
importante n prevenirea distrugerilor tisulare determinate de microorgansime sau toxine. Printrecele mai importante efecte se numr:
Opsonizarea i fagocitoza. Unul dintre produi (C3b) activeaz fagocitoza, stimulndatt macrofagele, ct i neutrofilele. Determin aceste celule s ingereze bac teriile lasuprafaa crora sunt ataai anticorpi. Acest proces se numete opsonizare.Liza. Unul dintre cei mai importani produi ai sistemului complement este complexullitic, o combinaie de mai muli factori care determin distrugerea membraneimicroorganismului invadator.Aglutinare. Produii complementului modific suprafaa microorganismelor,determinndu-le s adere unele la altele, astfel iniiindu -se aglutinarea.Neutralizarea virusurilor.Enzimele complementului i ali produi pot ataca structurile
unor virusuri i i fac nonviruleni. Chemotaxia. Fragmentul C5a iniiaz chemotaxia neutrofilelor i macrofagelor,determinndu-le s migreze n numr mare n zona unde se afl antigenul. Activarea bazofilelor i mastocitelor. Fragmentele C3a, C4a i C5a activeaz acestecelule, determinndu-le s eliberze histamin, heparin i alte substane n lichidelelocale. Aceste substane determin creterea debitului sanguin, eliberarea de ser i
proteine plasmatice care ajut la imobilizarea patogenilor.Efecte inflamatorii. n plus la efectele determinate de mastocite i bazofile, prod