Metode de sterilizare in microbiologie

Forma vegetativa a unei bacterii reprezinta forma capabila sa se multiplice si sa produca boala.

Sporul bacterian reprezinta forma de rezistenta a bacteriilor la conditiile nefavorabile de mediu

In conditii nefavorabile forma vegetativa a bacteriei trece in forma de rezistenta prin procesul de sporulare, iar cand are din nou conditii prielnice pierde invelisurile si revine la forma vegetativa prin procesul de germinare.

Din punct de vedere al patologiei umane sunt implicate doua genuri bacteriene sporulate: Genul Bacillus(B. anthracis) si Genul Clostridium(C. tetani, C. botulini)

Metodele de sterilizare tin cont de posibilitatea prezentei tulpinilor sporulate, motiv pentru care temperatura si intervalul de timp necesar trebuie adaptate in functie de acestea.

Ce este sterilizarea?

Sterilizareareprezintaunprocescendeprteaz i distrugetoate microorganismele dintr-un mediu sau din interiorul unui obiect cu ajutorul unui agent chimic sau printr-un proces fizic.

Clasificarea metodelor de sterilizare:Metode care utilizeaz ageni fizici: cldura ( uscat, umed), radiaii UV, filtrarea, ultrasunetele.

Metode care utilizeaz ageni chimici: substane antiseptice, substane dezinfectante.

Metode care utilizeaz cldura uscat: incinerarea, nclzirea la rou, flambarea, sterilizarea cu ajutorul aerului cald.

Metode care utilizeaz cldura umed: fierberea, pasteurizarea, tindalizarea, autoclavarea

Sterilizarea prin intermediul radiatiilor:

Radiatiile sunt ionizante (X, gamma) si neionizante (UV): efcte bactericide prin ruperea legaturilor de hidrogen, oxidarea dublelor legaturi din structura microorganismelor.

In microbiologie se utilizeaza lampi germicide ce produc radiatii UV

Radiatiile ionizante se utilizeaza in sterilizari industriale: alimente, medicamente, seringi de unica utilizare etc.

Metode de sterilizare prin caldura:

1. Caldura uscata:

-Incinerarea

-Incalzirea la rosu

-Flambarea

-Sterilizarea cu aer cald

Incinerarea Incinerarea const n arderea materialului biologic n cuptoare speciale sau crematorii. Prin aceast metod sunt distruse cadavrele animalelor scoase din exploatare ca i vata i tifoanele infectate.

nclzirea la rou

nclzirea la rou este folosit pentruansele bacteriologice care suntmeninute n flacra becului de gaz pn la rou, mai nti la bazaflcrii, apoi la vrf. Ansa se sterilizeaz obligatoriu nainte idup utilizare.

Flambarea Flambarea const n trecerea prin flacra becului de gaz de cteva ori a obiectului care se sterilizeaz- lame de sticl, pipete gradate, pipete Pasteur, nainte de sterilizare iar ansa i gtul eprubetelor i baloanelor nainte i dup utilizare.

Sterilizarea cu aer supraincalzitinetuva(cuptorul Pasteur =Poupinel)

Se face in cuptorul Pasteur (sau Poupinel)

Sterilizarea se realizeaza la 180C timp de o ora,sau la 160C 2h, determinind carbonizarea microorganismelor, forme vegetative sau spori. Temperatura de 180C este necesara deoarece caldura uscata are o putere redusa de patrundere.

Se aplica pentru obiecte din sticla si portelan(nu obiectelor cu parti metalice, a celor din cauciuc, lichide)

Caldura umeda: 1. fierberea 2. pasteurizarea 3. tindalizarea 4.sterilizarea prin vapori sub presiune (autoclavare)

Fierberea = este considerata sterilizare incompleta deoarece actioneaza prin denaturare asupra formelor vegetative dar nu si asupra sporilor.

Timpul de sterilizare este de minimum 30min.la 100C, din momentul inceperii fierberii.

Se foloseste pentru sterilizarea instrumentelor ce se utilizeaza imediat.

Tindalizarea=sterilizare fractionata sau discontinua.

Se incalzesc produsele in baia de apa consecutiv 3-8 zile, timp de 1-3 ore intre 60-100C. Intre incalziri materialul este pastrat la 4C. Metoda este aplicata in special pt lichidele care peste 100C se altereaza ( unele medii de cultura

AutoclavareaSterilizare prin vapori de apa sub presiune.

Caldura umeda sub presiune fiind mai penetranta, este cea mai sigura metoda de sterilizare.

Ridicand presiunea vaporilor de apa la 1 atm., se realizeaza o temp. de 120C care in 30 min. distruge atat formele vegetative cat si sporii.

In autoclav se sterilizeaza medii de cultura, material infectios, obiecte de cauciuc, aparate de filtrat, caserole cu material chirurgical, etc.

Nu se sterilizeaza lichide alterabile la peste 100C.

Presiunea interioara folosita este de -0,5 atm-115C -1 atm-121C -2 atm-134C In microbiologie:121C in 15-30 min.

Autoclave