PREFA Bolile micotice sunt produse de microorganisme ncadrate sistematic n regnul Fungi sau Ciuperci. Unii dintre fungi sunt implicai, att prin multiplicarea i dezvoltarea lor, ct i prin produsele lor de metabolism. Peste 300 de specii de micete au fost gsite a fi patogene pentru om i animale. Importana bolilor micotice rezid din faptul c ele sunt relativ frecvente la om i animale, unele se constituie n adevrate zoonoze, cheltuielile cu profilaxia i combaterea sunt mari, diagnosticul nu este facil iar rezultatele terapeutice nu sunt ntotdeauna cele scontate. n plus, att n domeniul medical ct i cel veterinar exist o penurie de specialiti. Cartea Boli micotice se vrea un ndreptar pentru medicii veterinari i umani care lucreaz n domeniul micologiei i bolilor micotice i o surs de cunotine pentru studeni. Iniiativa scrierii acestei lucrri a pornit din necesitatea sintetizrii cunotinelor actuale, n urma derulrii unui grant CNCSIS i a introducerii n curricula Facultii de Medicin Veterinar din Timioara a disciplinei Boli micotice. In prima parte a acestei cri sunt prezentate noiuni generale i de taxonomie a fungilor, cu specificarea unor incertitudini n clasificarea lor. Apoi, cititorul poate descoperi care sunt principiile de diagnostic, care este reacia imun a organismelor la invazia de ctre micete, cum trebuie tratate micozele i care sunt substanele antimicotice i n ce condiii epidemiologice se declaneaz boala. n partea a doua a Bolilor micotice sunt prezentate cele mai importante micoze, dup o structur relativ clasic, la om i la animale. Fr a avea pretenia unui demers exhaustiv, cartea, care este ngemnare de entuziasm i experien, se vrea o contribuie la dezvoltarea micologiei i la formarea de specialiti n acest domeniu, destul de vitregit, al tiinelor medicale. Prof. univ.dr. Gheorghe Drbu

1

NOIUNI INTRODUCTIVE Ciupercile (fungii) sunt omniprezente n mediul nconjurtor. Dintre miile de specii diferite de fungi, doar o parte dintre acestea pot cauza boli la animale. Marea majoritate sunt organisme ale solului sau patogeni ai plantelor; la animale, au fost nregistrate peste 300 de specii patogene. Prin termenul de fung se nelege o grupare de structuri biotice eucariote, imobile, unicelulare sau organizate n structuri pluricelulare. Micromiceii, ciupercile microscopice, reprezint elementul de diagnostic al clinicianului uman i veterinar ; acestea sunt structuri capabile s manifeste o puternic i extins aciune patogen, att prin colonizarea substraturilor alimentare i furajere pe care le depreciaz sau crora le confer un grad nalt de toxicitate, ct i prin afectarea direct a organismelor omului i animalelor, declannd stri morbide specifice (micoze), a cror evoluie este, de cele mai multe ori, trenant i rebel la tratament. Termenul uzual de ciuperci (macromicei) nu reprezint obiectul micologiei medicale propriu-zise, dei, tangenial ele suscit atenia medicului patolog, prin unele toxine implicate fortuit n declanarea unor intoxicaii grave la persoanele care au consumat exemplare din specii necomestibile (Coman i Mare, 1993). n cea mai mare parte, micromiceii sunt organisme saprobiote, rspndite n toate mediile naturale (sol, aer, ap) n care se pot dezvolta sau n care se pot conserva timp ndelungat, dac nu gsesc condiii favorabile de multiplicare. Atunci cnd este posibil dezvoltarea acestor organisme, le regsim fie sub form de levur (unicelular), fie sub form de mucegai (multicelular-filamentos) sau sub ambele forme. Spre deosebire de speciile saprobiote, cele patogene nu sunt att de numeroase, dar pot parazita organismele vii (plante, insecte, peti, reptile, psri, mamifere, om) provocnd boli a cror gravitate depete uneori pe aceea cauzat de bacterii sau virusuri. ntre aceste dou categorii de micromicei exist numeroase forme de trecere, intermediare ; unele, considerate ca fiind parazite, pot tri n anumite faze ale dezvoltrii lor ca saprobiote, iar altele, recunoscute ca saprobiote pot deveni n anumite condiii patogene, dac ntlnesc o gazd convenabil. Ciupercile inferioare, primitive sunt formate din nucleu i citoplasm, fiind lipsite de perete celular exterior. Deoarece parazitismul este strict intracelular, celula gazd preia funcia de aprare a peretelui celular, i astfel, se explic, morfologia simpl a ciupercilor inferioare. Ciupercile microscopice prezint un aparat vegetativ denumit miceliu sau tal a crui structur variaz ca dimensiune i form, n funcie de gradul de evoluie al micromiceilor. Aparatul micelian al micromiceilor este alctuit din elemente tubulare denumite hife, situaie n care miceliul poart numele de tal filamentos, sau, talul poate fi alctuit dintr-o succesiune de elemente sferice, care prin burjeonare (nmugurire) asigur alungirea lui i, n acest caz, aparatul vegetativ este un pseudomiceliu (acest tip de miceliu este ntlnit la levuri. Miceliul, reprezentat de o celul mare, cu numeroase ramificaii gimnoplastul alctuit din citoplasm, nuclei i membran rudimentar, situeaz micromiceii pe o treapt superioar. Asocierea de gimnoplati ntr-o unitate comun d natere la plasmodiu. Aparatul vegetativ al ascomicetelor este un dermatoplast care conine celule cu nucleu adevrat i citoplasm, dar i cu o membran mai solid i mai bine conturat (Chermette i Bussieras, 1993). La micromiceii din subncrengtura Zigomycotina se remarc o form superioar de organizare : aparatul vegetativ este format dintr-o mas de filamente (hife) neseptate, multinucleate care reprezint sifonoplastul. La micromiceii superiori din subncrengtura Basidiomycotina, aparatul vegetativ este pluricelular sau septat, filamentele simple sau puternic ramificate prezint un numr mare de septe transversale. Septele (pereii 2

transversali) reprezint caracteristica micromiceilor superiori. Aceste septe delimiteaz celule uni-, bi- sau plurinucleate, dei, sunt prezente i orificiile prin care se asigur continuitatea citoplasmei n masa micelian. Filamentele miceliene reprezint unitatea de baz pe care se dezvolt elementele de nmulire, de rezisten n mediu i de rspndire. Cromogeneza miceliului, respectiv a hifelor, este o trstur ntlnit doar la unele specii (ex. genul Fusarium), n timp ce filamentele i corpii sporiferi ai altor specii sunt incolore, aspect ce poate servi drept criteriu de clasificare. Plectenchimele sunt rezultatul mbinrii filamentelor miceliene care alctuiesc talul ntr-o structur ce are aspectul de estur sau de false esuturi. Dac estura este foarte strns i dens, ea se numete paraplectenchim sau pseudoparenchim, iar dac filamentele dau natere unei structuri laxe, cu spaii interhifale, atunci rezult un prosoplectenchim. La specia Claviceps purpureea, se observ la exterior un paraplectenchim, iar la interior se remarc un prosoplectenchim. Morfologia talului i aspectul cultural al micromiceilor ne permit divizarea acestora n dou tipuri : fungi filamentoi (hifomicei) al cror tal este filamentos ; fungi levuriformi cu talul reprezentat de un pseudomiceliu. ntre aceste dou forme distincte exist fungii dimorfici. Fungii dimorfici sunt capabili s se prezinte sub dou forme morfologice. De exemplu, la 37oC, n medii mbogite sau in vitro, Blastomyces dermatidis se dezvolt ca o levur, iar la 30oC crete ca un mucegai. Caracterul unic al speciei Coccidioides immitis rezid din formarea, n esuturi sau n culturi meninute la temperaturi de 37oC, a unor sferule ce conin endospori. O alt manifestare a dezvoltrii fungice n esuturi este prezena unor granule ce reprezint mase organizate de hife ntr-o matrice cristalin sau amorf. Aceste granule sunt caracteristice infeciei micotice cunoscut sub denumirea de micetoame i ele sunt rezultatul interaciunii dintre esutul gazdei i fung. Compartimentarea miceliului reprezint un aspect morfologic care mparte micromiceii n dou categorii: sifomicei - cu filamentul neseptat (sifonoplast) ; septomicei cu filamente septate i cu o structur sinciial, fiecare sept fiind perforat de un por prin care citoplasma circul liber. Aceast structur sinciial este o trstur comun a fungilor filamentoi, n timp ce levurile sunt structuri unicelulare, asemntoare bacteriilor, att n privina aspectului cultural, ct i n cmpul microscopic (Chermette i Bussieras, 1993). Numeroase specii de fungi au fost considerate a fi patogene. n prezent, prin folosirea antibioticelor cu spectru larg sau prin aplicarea unei corticoterapii de lung durat, acompaniate cu metode moderne de diagnostic, muli fungi care au fost considerai contaminani s-au dovedit a fi patogeni. n diferenierea fungilor patogeni de cei contaminani concur mai muli factori: sursa de unde a fost izolat fungul, numrul de colonii izolate, specia, posibilitatea izolrii fungului n mod repetat, i, cel mai relevant aspect, evidenierea elementului fungic n esut. Un fung izolat dintr-o biopsie poate fi considerat patogen fa de acelai fung izolat de la suprafaa pielii, unde poate fi un contaminant aeropurtat (Scott i col., 1995). Numrul coloniilor izolate ar trebui s influeneze decizia dac un organism este contaminant sau patogen. O colonie izolat de Aspergillus poate rezulta dintr-o conidie aeropurtat, n timp ce o plac Petri plin de Aspergillus poate reprezenta un patogen.

3

CARACTERELE GENERALE ALE MICROMICEILOR STRUCTUR Unitatea funcional a micromiceilor este celula, caracterizat printr-o compoziie specific, aspect ce i asigur particularitate n lumea vieuitoarelor microscopice. Ca structur, ea prezint: nucleu; citoplasm; membran extern; organite citoplasmatice - ribozomi, reticul endoplasmic, mitocondrii, aparat Golgi. Nucleul prezint la micromicei dimensiuni variabile, de la 0,75 m la Tenturia inaequalis, pn la 20m n cazul nucleilor din ascele de Peziza rutilans (Mititiuc, 1995). Forma acestora este, de regul, sferic sau ovoid i prezint o membran nuclear dubl. Numrul cromozomilor din celulele micromiceilor este redus, dar variabil n funcie de specie i de faza dezvoltrii ontogenetice. n citoplasma Plasmodioplioraceaelor, al cror aparat micelian este un plasmodiu (asociere de gimnoplati) se ntlnete un numr mare de nuclei, ca de altfel i n sifonoplastul oomnicetelor format din filamente neseptate. n schimb, celulele care formeaz aparatul vegetativ primar, haploid, al ascomicetelor conin doar un singur nucleu, iar micromiceii din subncrengtura Basidiomycotina conin celule binucleate (Coman i Mare, 2000). Citoplasma. n funcie de diferii factori (specie, vrst, compoziia mediului, condiiile de cultivare) se difereniaz structura, compoziia chimic i capacitatea funcional ale acestui constituient celular. n structura citoplasmei se disting: plasmalema, o membran lipoproteic fin ce vine n contact cu peretele celular; hialoplasma, care reprezint dedublarea ctre interior a plasmalemei; citoplasma propriu-zis n care se gsesc toate componentele celulare i unde se produc complicatele procese de metabolism, care presupun reacii de sintez i dezintegrare, precum i tezaurizarea unor elemente cu rol trofic. Aminoacizii, substanele proteice, lipidele, glicogenul, acizii organici, enzimele, acizii ribonucleici sunt constituieni chimici ai citoplasmei. n funcie de vrst i de cantitile de substane acumulate structura citoplasmei poate fi hialin, omogen sau granular. La celulele tinere, aflate n perioada multiplicrii logaritmice, citoplasma este uniform i omogen, ns, pe msur ce acestea mbtrnesc, n citoplasm se formeaz i se acumuleaz vacuole, granule metacromatice care conin diverse substane rezultate din metabolism i care-i imprim, n cele din urm, un aspect granular specific (Coman i Mare, 2000). Peretele celular al micromiceilor, n cele mai multe cazuri, rigid, posed funcii protectoare. n structura acestuia intr substane proteice, acizi grai, micoceluloz, hemiceluloz, chitin, acizi organici superiori, polizaharide complexe. Grosimea peretelui celular este variabil. Ciupercile inferioare cunoscute i sub numele de gimnoplaste sunt lipsite de perete celular sau acesta este doar schiat, n timp ce la micromiceii evoluai se ntlnete un perete extern bine conturat, a crui grosime poate atinge un micrometru. ECOLOGIE Micromiceii sunt organisme puin pretenioase, cu exigene ecologice restrnse, ceea ce le confer un caracter ubicuitar, ei fiind capabili s se dezvolte pe cele mai diverse substraturi vii i inerte i n cele mai diferite biotopuri. Lipsindu-le clorofila din registrul metabolic, ei sunt tributari unor surse de carbon organic, fr de care procesele vitale nu ar putea fi nici iniiate i nici desfurate (Coman i Mare, 2000). Sursa de energie i posibilitile de acces la substratul nutritiv reprezint criterii de clasificare ale ciupercile microscopice. Acestea pot opta pentru una din urmtoarele posibiliti: saprobioz (ciupercile utilizeaz n scop trofic substanele organice devitalizate); 4

parazitism (ciupercile exploateaz organismele vii - plante i animale - pentru realizarea dezideratelor ontogenetice); simbioz (ciupercile i procur substanele organice prin intermediul unor organisme care conin clorofil - algele - i cu care micromiceii realizeaz un coparteneriat trofico-habitual cunoscut sub numele de licheni (Zarnea, 1994). n general, cele mai multe specii de micromicei pot fi cultivate uor n condiii de laborator, pe medii uzuale, pe care acestea i dezvolt caracterele fenotipice, prin coroborarea crora pot fi identificai i ncadrai taxonomic. Unele specii sunt mai pretenioase, ele reclamnd exigene ecologice particulare (temperatur, umiditate, grad de aeraie, etc.), precum i, medii speciale de cultivare, care conin factori trofici importani pentru consonana lor metabolic. Mediile folosite pentru cultivarea micromiceilor pot fi naturale, cnd substanele nutritive sunt asigurate n totalitate de plantele ca atare (tulpini, frunze, fructe, semine) i artificiale, cnd toate elementele energetice i plastice, inclusiv factorii de cretere i elementele minerale sunt procurate n exclusivitate prin ingredientele reetelor folosite (Coman i Mare, 2000). n funcie de echipamentul enzimatic implicat n metabolismul trofinelor, ciupercile microscopice pot fi clasificate din acest punct de vedere n trei categorii: monofage, oligofage i polifage. n clasa ciupercilor polifage este inclus majoritatea speciilor saprobiote, dar i cele facultativ parazite i facultativ saprobiote. Micromiceii parazii obligatorii, monofagi, dispun de un sistem enzimatic redus, dar puternic specializat i adaptat strict la compoziia chimic a unei specii de plante sau animale, aa cum ar fi Trichophyton megnini, ce paraziteaz la om. Micromiceii facultativ parazii duc o via preponderent saprobiot, dar pot n anumite condiii s se dezvolte pe esuturile vii ale plantelor i animalelor, crora le produc diferite stri de suferin. n aceast categorie pot fi incluse specii aparinnd genurilor Alternaria, Candida, Fusarium, Mucor. Micromiceii facultativ saprobioi triesc obinuit i se hrnesc pe esuturile vii, dar n mod accidental, ei se pot adapta i pe substraturi organice lipsite de viat, aa cum sunt speciile din genul Sclerotinia. Majoritatea ciupercilor care determin afeciuni la mamifere, psri i peti sunt saprobiote, ele devenind doar ocazional parazite. Saprobioza se desfoar n mediul exterior - exosaprobioza - sau chiar pe om sau animale, fie pe suprafaa pielii - episaprobioz (Malassezia spp.) - fie n tubul digestiv - endosaprobioz (Candida albicans) (Drbu, 2004). Ciupercile saprobiote triesc n marea lor majoritate n sol i sunt implicate n procesele de autopurificare ale acestuia, de integrare n circuitul biologic al substanelor organice, indiferent dac natura acestora este vegetal sau animal (Coman i Mare, 2000). NMULIRE nmulirea micromiceilor este un proces extrem de important pentru c el contribuie esenial la meninerea distribuiei lor n biotopuri specifice. nmulirea micromiceilor se poate face asexuat i sexuat. n funcie de caracterele reproductive, speciile de micromicei pot fi: holocarpice - se caracterizeaz prin faptul c aparatul vegetativ ia natere din zoospori, crete i se dezvolt, ndeplinind funcii complexe de troficitate; ulterior, el se transform n totalitate n organe de nmulire, dnd natere la zoospori, care la rndul lor vor genera aparatul micelian i ciclul dobndete n acest mod regim de repetabilitate; eucarpice - se caracterizeaz prin faptul c aparatul micelian se difereniaz net de organele de nmulire. Ele pot coexista n acelai timp la un individ, care se poate nmuli, att asexuat prin fragmentarea miceliului sau prin modificarea unor pri ale acestuia, ct i sexuat prin sporii de reproducere rezultai n urma unui proces de meioz (spori meiotici). La micromicei, nmulirea asexuat se poate realiza n 5

dou moduri: fie prin poriuni de miceliu, fie prin spori de vegetaie aprui consecutiv mitozei (spori mitotici). nmulirea vegetativ se realizeaz prin sporii mitotici care pot fi interni (endogeni, endospori) sau externi (exogeni, ectospori, conidii). Sporii endogeni iau natere n organe speciale, care la rndul lor se formeaz pe unele ramificaii ale miceliului, fiind distincte de acesta, aa cum se poate observa foarte bine la speciile genului Mucor. Geneza endosporilor are loc deci n interiorul unor vezicule numite sporociti sau sporangi, formaiuni plasate n segmentul distal al filamentelor sporocistofore (structuri talice septate doar terminal, un perete transversal realiznd disjuncia ntre filament i sporange). n unele cazuri, filamentul sporangiofor poate prezenta o dilataie terminal (columela) pe care se edific sporocistul. Spori endogeni pot fi considerai i ascosporii, avnd n vedere plasarea lor n interiorul ascelor, dei sunt rezultatul unui proces meiotic. Sporii exogeni (exosporii) sunt rezultatul elementelor conidiogene talice care suport transformri parietale i nucleare, ce au ca finalitate apariia conidiilor. n funcie de modul de formare, conidiile au fost mprite n dou categorii: conidii talice, care apar prin metamorfoza elementelor conidiogene n totalitate (artroconidii ntlnite la Geotrichum, Coccidioides i Trichosporon, macro- i microaleurii ntlnite la dermatofii); conidii blastice reprezentate de formaiuni ce iau natere din celula conidiogen printr-un proces de burjeonare (blastoconidii la Candida spp., simpoduloconidii la Sporothrix, poroconidii la Alternaria, fialoconidii la Aspergillus, aneloconidii la Scopulariopsis). nmulirea sexuat se desfoar n mod particular, din ambele perspective, att a procesului n sine, ct i a organelor implicate. Fecundaia la aceste microorganisme se deruleaz stadial, ntr-o prim faz are loc fuzionarea materialului citoplasmatic din cele dou celule de sex diferit (plasmogamia), pentru ca apoi, ntr-o urmtoare etap s se produc fuzionarea nucleilor (cariogamia). Alternana celor dou faze, haploid i diploid, precum i, distana n timp care le separ, difer n funcie de nivelul evolutiv al micromiceilor. n cazul ciupercilor inferioare, faza diploid este extrem de scurt, zigotul apare foarte repede, pentru ca tot att de repede s se produc i reducia meiotic, cu revenirea la haploidie. La ciupercile evoluate (ascomycete i basidiomycete), plasmogamia este succedat de cariogamie la un interval mare de timp, suficient pentru a se contura o a treia faz, caracterizat prin prezena a doi nuclei n celul (dicariofaza). In funcie de rolul biologic i de rezistena lor la factorii ambientali, sporii pot fi grupai n dou categorii: sporii de nmulire (vegetativi sau mitotici i sexuali sau meiotici) aparin, de regul, fazei haploide i nu prezint rezisten mare n mediu. Ei sunt programai genetic s germineze rapid i s regenereze aparatul micelian. Sporii de nmulire vegetativ reprezint elementele din prima linie de supravieuire a micromiceilor, care asigur continuitatea lor n timp. Sporii sexuali sunt de patru categorii: oospori, zigospori, ascospori i basidiospori. sporii de rezisten (clamidosporii) sunt programai genetic s asigure prin structura lor persistena n timp a speciei. Ei sunt mai puin numeroi dect sporii de nmulire vegetativ i nu dispun de structuri genetice care s le asigure o germinare rapid. Clamidosporii sunt structuri morfologice sferice, netede sau cu un relief neregulat, cu peretele ngroat i citoplasma condensat, refringent, ce apar pe traiectul filamentelor miceliene putnd fi plasai terminal, lateral sau intercalar. Spre deosebire de sporii de nmulire, clamidosporii nu dispun de un mecanism propriu de dehiscen, care s le permit desprinderea de tal n momentul 6

desvririi dezvoltrii lor. Fiind forme de rezisten derivate din elemente vegetative i putem asemna, din punct de vedere funcional, cu sporii bacterieni, care ndeplinesc pentru speciile respective, acelai rol (Coman i Mare, 2000). Majoritatea ciupercilor prezint ambele posibiliti de formare a sporilor - sexuat i asexuat - n funcie de mediul n care se afl (Stoenescu i Perianu, 1987). NCADRAREA TAXONOMIC A MICROMICEILOR ncercri de ncadrare a micromiceilor ntr-o schem taxonomic obiectiv, care s permit identificarea lor rapid, evitnd confuziile i erorile, dar mai ales suprapunerile au fost realizate de numeroi autori, de-a lungul anilor (Chermette i Bussieras, 1993; Esser i Lemke, 1995; Scott i col., 1995; Coman i Mare, 2000). Micromiceii sunt reprezentai n sistematic de o nsemntate de genuri i specii, fiecare individualizate prin particulariti morfologice, eco-fiziologice i de patogenitate. Fungii, organisme eucariote aclorofile care se pot dezvolta sub form de drojdie (unicelular), mucegai (multicelular filamentos) sau sub ambele forme, se difereniaz de organismele ce alctuiesc regnul Protista prin dou trsturi eseniale: lipsa clorofilei i structura peretelui celular (chitin, chitosan, glucan, manan). Taxonomia fungilor a cunoscut n ultimii ani o dinamic exploziv, pornind de la tradiionala identificare i clasificare, i, culminnd cu tendina actual, novatoare, care nu accept ncorsetarea lumii vii n abloane convenionale, speculative. Vechea sistematic clasific fungii dup mai multe criterii: posibilitatea de a produce spori i conidii, mrimea i forma conidiilor, tipul de hife i caracteristicile macroscopice (culoarea i textura coloniei) i, uneori, dup caracteristicile fiziologice. Un filament vegetiv unic reprezint o hif, un ansamblu de hife constituie un miceliu. Hifele sunt septate dac prezint diviziuni ntre celule sau sunt neseptate dac au mai muli nuclei ntro celul. Termenul de conidie se folosete doar pentru a desemna elementul de nmulire asexuat. Un conidiofor reprezint un miceliu simplu sau ramificat care poart conidii sau celule conidiogene. O celul conidiogen este o celul fungic ce va da natere la o conidie (Scott i col., 1995). Taxonomitii moderni au renunat la stilul cvasisimplist de ncadrare. Ei apreciaz n clasificarea micromiceilor, caracteristicile nmulirii sexuate i recurg la metode biochimice i imunologice de identificare a speciilor de fungi. O lung perioad de timp, fungii au fost considerai o subncrengtur, subsecvent ncrengturii Thallophyta din regnul vegetal. n prezent, domeniul fungilor este recunoscut, ca unul dintre cele cinci regnuri ale lumii vii : Monera; Protista; Fungi; Plantae; Animalia. Esser i Lemke, 1995 (cit. de Coman, 2000) precizeaz dou ncrengturi ale acestui regn special, Fungi: Pseudomycota, care cuprinde i microorganismele din subncrengtura Mastigomycotina, al cror filament neseptat (sifonoplastul) este limitat la exterior de un perete celulozic, lipsit total de chitin. nmulirea se realizeaz sexuat prin oospori i asexuat prin zoospori; 7

Eumycota, care cuprinde grupuri mari de micromicei grupai n patru subncrengturi. Chermette i Bussieras (1993) consider c subncrengtura Mastigomycotina nu mai poate constitui o diviziune taxonomic (phylum) a regnului Fungi; ea trebuie inclus mai curnd n regnul Protista, deoarece multiplicarea asexuat este mediat de endospori flagelai mobili (zoospori), iar diviziunea mitotic implic prezena centriolilor. Coman i Mare (2000) mprtesc opinia autorilor francezi dar, din raiuni etiopatogenetice, includ microorganismele din subncrengtura Mastigomycotina ca uniti taxonomice ale ncrengturii Pseudomycota. Cele patru subncrengturi acceptate ca diviziuni taxonomice ale ncrengturii Eumycota sunt : Zygomycotina caracterizat prin multiplicare sexuat prin zigospori; Ascomycotina multiplicarea sexuat se realizeaz prin ascospori; Basidiomycotina bazidiosporii sunt elementele de multiplicare sexuat; Deuteromycotina multiplicarea sexuat este nc o incertitudine, motiv pentru care aceti fungi sunt denumii imperfeci. Pe msur ce nmuirea sexuat este decelat i la speciile de fungi imperfeci, acestea sunt redistribuite n registrul taxonomic adecvat, pe baza particularitilor morfologice ale sporului sexuat identificat (zigospor, ascospor, bazidiospor). Aceasta este explicaia existenei unor micei cu dou denumiri de specie, dintre care una, cu referire la forma anamorf (asexuat, imperfect) i cealalt, la forma telomorf (sexuat, perfect) de exemplu: Aspergillus nidulans i Emericella nidulans. CLASIFICARE I PRINCIPII DE DIAGNOSTIC N BOLILE MICOTICE Bolile produse de micromicei au o frecven destul de mare att la om, ct i la animale. Evoluia acestor afeciuni poate fi benign, situaie n care gazdei receptive nu i este afectat starea general, astfel c, ele sunt, de cele mai multe ori i pentru foarte lung vreme, ignorate sau acceptate. Exist ns i forme grave de exprimare clinic a micozelor, care pot afecta prin evoluia lor, nsi viaa subiectului bolnav (n mod deosebit copiii i tineretul mamiferelor), context n care diagnosticul trebuie stabilit rapid i precis. Aproape toate aceste afeciuni cu rspndire cosmopolit au importan zoonotic (Coman i Mare, 2000). Pentru o corect comprehensiune a metodelor i principiilor de diagnostic al bolilor micotice este oportuna precizarea urmtoarelor elemente: Alergozele sunt boli provocate de sporii sau de fragmentele desprinse din miceliu, care prin deshidratare se transform n particule foarte fine i ptrunznd n organism, l sensibilizeaz, pregtind terenul pentru declanarea unor stri alergice grave. Micotoxicozele sunt boli produse de micotoxine, substane pe care fungii toxigeni le elaboreaz, i care pot s ajung n organismul omului i al animalelor odat cu alimentele sau furajele contaminate. Termenul generic de micotoxicoz definea i definete i astzi, pentru cei mai puin documentai, toate strile morbide produse de micotoxine. Astzi, noiunea a devenit desuet ntruct cercetarea tiinific a permis acumularea de informaii suficiente, pentru c cel puin unele micotoxicoze s dobndeasc statutul unor boli independente, deoarece sunt bine exprimate clinic i morfopatologic: aflatoxicoza, ochratoxicoza, trichotecenoza. Micozele sunt boli produse de tulpinile virulente ale micromiceilor (fungilor) care se multiplic, fie n interiorul organismului (micoze viscerale), fie pe esuturile de raport ale acestuia cu mediul (micoze cutanate). Micozele cutanate sunt grupate n dou mari entiti patogene: dermatofitoze i dermatomicoze. 8

Dermatofitoza reprezint infecia esuturilor cheratinizate (ghearelor, prului, stratului cornos) cauzat de specii ale genurilor Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton. Dermatofiii sunt singurii fungi care pot invada esuturile cheratinizate i pot s se menin la locul de invazie. Dermatomicoza reprezint infecia fungic a prului, ghearelor, pielii, cauzat de un nedermatofit, un fungus neclasificat n genul Microsporum, Trichophyton sau Epidermophyton. Dermatopatiile pruriginoase ofer condiii favorabile pentru multiplicarea fungilor saprofii existeni n pielea aparent sntoas: genurile Alternaria, Aspergillus, Botrytis, Trichoderma, Fusarium. Aceti fungi apar pe frotiurile efectuate din pielea lezat, fr ca ei s fi avut ntr-adevr un rol patogen (Philipot i Berry, 1994). Pentru a stabili c fungii au avut cel puin un rol secundar n producerea leziunilor, pe frotiu trebuie s apar elemente ale rspunsului inflamator, constnd n prezena de macrofage cu elemente miceliene fagocitate. Dermatomicoza i dermatofitoza sunt entiti clinice diferite. Totui, fungii nu sunt nici pe departe o cauz att de obinuit a bolilor de piele aa cum se crede. Multe dermatopatii nespecifice, pruriginoase i nepruriginoase, sunt diagnosticate ca dermatomicoze din cauza probelor inadecvate. Muli medici folosesc incorect termenul ciuperci de iarb (grass fungus) pentru aceste probleme, n ciuda faptului c implic dermatita de contact, alergia sau ali factori etiologici dect fungii. Pe de alt parte, multe adevrate infecii fungice probabil c nu sunt diagnosticate corect din cauza variabilitii de prezentri clinice (Scott i col., 1995). n medicina uman nu exist o clasificare pe deplin acceptat a micozelor cutanate (Feier, 1998). Pentru uzul studenilor i al medicilor de medicin general se consider util o clasificare bazat pe tipul agentului etiologic, nivelul de invazie i tabloul clinic dominant. Se disting astfel urmtoarele entiti: dermatofitoze, candidoze cutaneo-mucoase, tinea versicolor (pitiriazisul versicolor). Micozele sistemice (interne, viscerale) sunt afeciunile n care fungii se multiplic i invadeaz organele interne, sistemul nervos central, oasele, etc. Scott i col. (1995) propun o alt clasificare a bolilor micotice la animale. Autorii mpart micozele n trei categorii: micoze superficiale, micoze subcutanate i micoze sistemice. 1. Micozele superficiale sunt infecii fungice care implic straturile superficiale ale pielii, prul, ghearele. Organismele implicate n etiologia acestor micoze sunt: Dermatofiii (Microsporum, Trichophyton); Ali fungi (Candida, Malassezia Pityosporum) care pot produce, de asemenea, micoze superficiale. 2. Micozele subcutanate sunt infecii fungice care au invadat esuturile viabile ale pielii: Micetomul actinomicotic i eumicotic; Zigomicoza; Sporotricoza; Rinosporidioza; Alternarioza; Feohifomicoza (cromomicoza); Pitioza (oomicoza). 3. Micozele sistemice sunt infecii fungice ale organelor interne care se pot rspndi secundar pe piele: Blastomicoza; Coccidioidomicoza; Criptococoza; 9

Histoplasmoza; Aspergiloza; Prototecoza; Pecilomicoza. Micozele profunde sau cele sistemice au de regul evoluii severe, dramatice i numai un tratament prompt i energic poate oferi subiectului ansa supravieuirii. Micozele superficiale nu pericliteaz n general viaa pacientului, dar creeaz de cele mai multe ori disconfort fiziologic sau chiar psihic, ele avnd un agasant caracter recidivant. O banal dermatomicoz n regiunea cervical sau a spaiului interdigital poate trena sptmni sau luni de zile, cu remiteri pasagere i recderi care pot genera complexe de frustrare persoanelor cu labilitate neuropsihic. Indiferent de criteriul adoptat n clasificarea micozelor, de genul i specia de fung responsabil de apariia bolii, de toposul leziunilor, diagnosticul acestor afeciuni de natur micotic rmne, i n prezent, un subiect care pune la ncercare, deopotriv, profesionalismul clinicianului uman i veterinar. Izolarea i identificarea agentului cauzal, recunoaterea i precizarea mecanismelor patogene care au determinat o reacie din partea gazdei, i, n final, apariia bolii reprezint etape eseniale ale diagnosticului etiopatogenetic n bolile micotice. Importana acestui tip de diagnostic are ecou n stabilirea conduitei terapeutice, a prognosticului i a unor msuri adecvate de profilaxie. Pe de alt parte, exprimarea clinic a micozelor, extrem de variat, att ca manifestare, ct i ca interes pentru toate formele superior organizate ale materiei vii, de la insecte pn la mamifere, nu ne permit stabilirea unui protocol standard n diagnosticul i terapia bolilor micotice. Respectarea unor etape eseniale se impune, totui, n reuita unui diagnostic corect: anamneza; ancheta epidemiologic; examenul clinic general i examen dermatologic; prelevarea probelor, inclusiv practicarea de biopsii; vizualizarea materialului biologic recoltat, ntr-o camer obscur, cu ajutorul lmpilor generatoare de radiaii ultraviolete; examenul direct al probelor la microscopul optic; izolarea agentului patogen prin nsmnarea probelor suspecte pe medii de cultur uzuale i selective; testarea patogenitii agentului fungic identificat (proba biologic). Fia de diagnostic a animalelor bolnave i a pacienilor umani se va ntocmi n spaii special destinate acestui scop i care se gsesc n incinta clinicilor universitare, spitalelor, cabinetelor particulare, dar i n fermele de animale. Coroborarea informaiilor anamnetice cu rezultatele investigaiilor epidemiologice va fi ncununat cu observaiile examenului clinic obiectiv care respect metodele generale de semiologie. ntr-o etap ulterioar, examenul clinic va fi completat cu precizarea leziunilor presupuse a fi de natur micotic. Probele biologice suspecte de a fi contaminate cu micromicei (fire de pr, celule descuamate, detritusuri tegumentare, unghii, cruste, snge, secreii, exsudate, sput, lapte, urin) vor fi recoltate, dup caz, i supuse examenelor ulterioare. Examenul microscopic direct al materialului patogen ofer date orientative n stabilirea diagnosticului, ca de altfel, i examenul clinic obiectiv, pe care l completeaz. Pentru confirmarea diagnosticului i stabilirea unei conduite terapeutice eficiente, precum i pentru instituirea unui program complex de profilaxie sunt necesare izolarea agentului cauzal al bolii i identificarea lui. n acest scop, se apeleaz la examene de laborator care presupun vizualizarea materialului biologic n lumina ultraviolet (n situiile n care acest examen este posibil), nsmnri ale probelor suspecte pe medii de cultur, i, eventual, reproducerea experimental a bolii prin teste biologice efectuate pe animale de experien. 10

Izolarea fungilor din materialul patologic, n afara faptului c este, conform postulatelor lui Koch, o etap obligatorie n precizarea diagnosticului, ofer, n plus, posibilitatea identificrii agentului etiologic i stabilirea patogenitii, a sensibilitii sale la diferite chimioterapice. Pentru identificarea i ncadrarea taxonomic a fungilor izolai se coroboreaz aspectele culturale ale acestora cu particularitile lor morfo-structurale i biochimice. EPIDEMIOLOGIA MICOZELOR Fungii sunt implicai n mbolnvirile oamenilor i animalelor att prin multiplicarea i dezvoltarea lor, ct i prin produsele lor de metabolism. Trecerea de la via saprobiot la cea parazit le confer ciupercilor care au aceast caracteristic calitatea de micete oportuniste i deci, patogene, n anumite circumstane (Drbu, 2002). Aceste circumstane sunt legate de: umezeala crescut i mediul exterior bogat n substane organice, care favorizeaz dezvoltarea i proliferarea fungilor; crearea condiiilor propice pentru inhalarea fungilor (agitarea aternutului murdar, atmosfer nchis etc.); deficite imunitare: ereditare (imunodeficiena sever a mnjilor de ras Pur snge Arab), imunosupresia terapeutic (corticoterapie) sau viral (virusurile leucozei la pisic i SIDA la om); predispoziii particulare legate de structura anatomic (structura aparatului respirator la psri favorabil aspergilozei). Consecina epidemiologic a acestor caracteristici ale ciupercilor oportuniste este difuzibilitatea lor mai redus. Micozele determinate de ele sunt adesea sporadice sau enzotice i foarte rar epizootice (mai ales n fermele de psri, unde aspergiloza i candidoza pot difuza rapid n efectivele mari). Unele micotoxicoze pot cpta o alur epidemic atunci cnd se ntrunesc condiii favorabile, dei, n acest caz, nu este vorba de o contagiozitate propriu-zis, ci de consumul acelorai nutreuri contaminate (Mitroiu, 1976). Ciupercile obligatoriu parazite sunt integrate, n cea mai mare parte, n categoria dermatomicetelor. Ele nu se dezvolt n mediu, ci doar pot supravieui i se pot transmite la organismele vii prin contagiune direct sau indirect. n efectivele mari, boala poate lua un caracter epidemic. O mai mic parte dintre dermatomicete - geofile - se dezvolt pe sol i, cu totul ocazional, pot determina dermatomicoze. Sursele de parazii Elementele infectante pentru mamifere i psri sunt reprezentate att de spori, ct i de formele vegetative. Sursele de parazii pot fi autogene i alogene. Infecia autogen are ca surs ciupercile endo- sau episaprobiote, care se gsesc n organismul animal i care nu au determinat nici un simptom datorit echilibrului dinamic stabilit ntre gazd i parazit. n momentul n care echilibrul se rupe, ciupercile devin virulente i se dezvolt masiv. Se citeaz n acest sens candidoza, histoplasmoza, aspergiloza. n cazul dermatomicozelor superficiale, ciupercile saprobiote (Malassezia, C. albicans, dermatofiii zoofili sau antropofili) se gsesc n mod obinuit pe pielea animalului gazd. Conductul auditiv extern adpostete n mod obinuit M. pachydermatis la cine i pisic n procente ce merg pn la 50, la animalele sntoase i pn la 70 la cele cu otit extern (Chermette i Bussieras, 1993). n tubul digestiv, C. albicans i Geotrichum se pot identifica la purttorii asimptomatici. Levurile din genul Candida au fost izolate, de altfel i din aparatul respirator al diverselor specii de mamifere i psri. Infecia alogen pornete de la o surs exterioar organismului. Sursa de parazii este reprezentat, fie de animalele bolnave, fie de mediul exterior. Introducerea unui animal infectat cu micete ntr-un efectiv sntos va determina rspndirea rapid, prin contagiu 11

direct sau indirect, a micozei respective. Astfel, se pot transmite unele micoze externe precum tricofiia, microsporia i unele micoze interne (aspergiloza). Sursa animal de micete este cu att mai periculoas cu ct infecia este asimptomatic i nu se iau msurile de protecie corespunztoare. Acelai lucru se ntmpl i n cazul infeciei umane cu micete, cinii i pisicile, purttori inapareni de parazii, putnd reprezenta o surs important pentru om (Drbu, 2002). Ciupercile saprobiote, care triesc i se multiplic n mod normal n mediu (sol, vegetale etc.), n anumite condiii, pot constitui surse de parazii i se pot adapta la viaa parazitar. Este cazul lui Microsporum gypseum, Histoplasma capsulatum etc. Pe de alt parte, n mediu se pot gsi forme de rezisten ale unor ciuperci parazite care pot supravieui i pot constitui surse de infecie. Aa se comport muli din agenii etiologici ai dermatomicozelor. Sursele de infecie n tricofiie sunt reprezentate, pe lng animalele bolnave i purttoare, de pieile, lna si prul provenite de la aceste animale. Cu ct leziunile tricofitice sunt mai extinse i contactul dintre animale mai strns, cu att posibilitile de infecie sunt mai mari. Pieile contaminate sunt cu att mai importante ca surs cu ct pot transmite infecia mai la distan prin comercializare sub form brut. Localizarea extern a leziunilor tricofitice favorizeaz rspndirea produselor patologice n mediul extern, constituind surse secundare de infecie. Crustele desprinse i sporii sunt uor rspndii de vnt, favoriznd rspndirea surselor de infecie (Mitroiu, 1976). Bolile cu origine teluric sunt produse de ciupercile saprobiote propriu-zise, care se dezvolt i se multiplic n mediu. Aa este cazul mucormicozelor, aspergilozelor, speciilor geofile ale dermatomicetelor, sporotrichozei etc. Aspergillus triete foarte bine pe furajele i paiele murdrite. Histoplasma capsulatum farciminosum, agentul etiologic al limfangitei epizootice ecvine, contamineaz mediul prin puroiul care se scurge din leziuni; dei nu a fost demonstrat, nu este exclus nici dezvoltarea ca saprobiot n mediul exterior (Chermette i Bussieras, 1993). n acelai timp, Histoplasma capsulatum capsulatum care afecteaz mai multe specii de mamifere (cini, pisici, cabaline, bovine, porcine, mici roztoare, carnivore slbatice) i omul, se gsete frecvent n solurile bogate n substane organice. Un rol important ca surs de infecie l au instalaiile avicole abandonate, excrementele psrilor fiind un mediu bun pentru proliferarea saprobiotic a acestei ciuperci. Cryptococcus neoformans este singura dintre speciile genului, care utilizeaz creatinina din urina psrilor. De aceea, fecalele de porumbel reprezint un mediu favorabil pentru multiplicarea micetelor; proliferarea este att de rapid nct se ajunge la 6x102 celule/ml dup ce stau 3 sptmni pe sol (Chermette i Bussieras, l993). Posibil ca i alte excremente s aib un rol n multiplicarea saprobiot, dar cele de pui de gin reprezint un mediu inadecvat datorit alcalinitii ridicate. Specii variate de ciuperci, n principal cele din ordinul Mucorales i din genul Aspergillus, paraziteaz tractusul genital feminin, placenta i uneori fetusul, provocnd avorturi. Avortul micotic are ca surs de infecie ciupercile saprobiote ce se gsesc n cantiti mari pe sol, pe furajele murdrite i pe siloz, pe de o parte i endosaprobiotele (Candida sp., Geotrichum sp.), pe de alt parte. Mamitele micotice au la origine cele mai diverse specii de fungi. Ei pot fi luai de pe sol, o dat cu alimentele, de pe excremente. din ap etc., deci din mediul exterior. O alt surs este reprezentat de bovinele cu mamite (criptococoz), animalele purttoare ale unor ciuperci endo- sau episaprobiote (Candida spp, Geotrichum, Trichosporon). Potenialul biotic Larga rspndire a ciupercilor, att a celor parazite (pe plante, animale i om), ct i a celor saprobiote, demonstreaz o bun adaptare a acestora la variatele condiii din mediul extern i de la locul de parazitare.

12

n general, se consider c rezistena ciupercilor n mediu este foarte mare. Exist limite minime i maxime, dar i un optim de temperatur pentru dezvoltarea micetelor. Aceste limite variaz de la un gen la altul, de la o specie la alta. Pentru majoritatea fungilor, temperatura minim este de OC, iar cea maxim de 60C. n afara acestor limite, ciupercile nu se dezvolt. Temperatura optim de dezvoltare a micetelor este cuprins ntre 20C i 30C. Dermatomicetele au limite de temperatur i mai strnse. Dezvoltarea micetelor n mediu este legat i de gradul de umiditate. Se accept c umiditatea pe straturile nutritive trebuie s fie de 75-80%, iar n aer de 15%. Oxigenul este un factor indispensabil vieii i dezvoltrii micetelor. Lipsa lui duce la moartea ciupercilor. Umiditatea, temperatura i oxigenul sunt realizate, n general, n mediul exterior i ciupercile saprobiote se pot dezvolta. n perioadele mai vitrege, parazitul i-a adaptat mijloacele de supravieuire, existnd forme de rezisten ale acestora (Drbu, 2002). La rndul lor, ciupercile patogene s-au adaptat pe organismele gazd pe care se nmulesc i se dezvolt i i-au creat forme de rezisten n mediul exterior. Ciupercile saprobiote, pentru a supravieui, s-au adaptat la medii foarte variate. Exosaprobiotele triesc, n mod obinuit, n mediul exterior, unde se hrnesc cu materie organic moart dar, n anumite condiii, pot ptrunde n organismul gazd, devenind patogene (Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis etc.) Alte ciuperci s-au adaptat la viaa endosaprobiot. Ele triesc, n mod obinuit, n organismele animale, fr a fi patogene, dar, n anumite condiii, pot deveni parazite i patogene. Este cazul micetelor Candida albicans, care colonizeaz tubul digestiv i vaginul. Tocmai datorit faptului c ele se regsesc n mod obinuit n organism, este greu de stabilit o relaie de cauzalitate ntre leziunile produse i agentul cauzal. De aceea, ele pot fi tratate cu mai puin atenie, scpnd controlului parazitologic. Episaprobiotele triesc pe tegument sau pe mucoasele externe fr a produce modificri. Ele (Malassezia furfur; Candida spp. cu excepia C. albicans, care este ntotdeauna patogen pe piele) pot deveni patogene n anumite circumstane. Prezena unor forme morfologice variate, n funcie de mediul de dezvoltare, reprezint o strategie de supravieuire a micetelor. Astfel, Histoplasma capsulatum n viaa parazitar dezvolt forme exclusiv levurice, n timp ce n viaa saprobiot se dezvolt forme filamentoase cu aleuriospori. Micetele patogene s-au adaptat treptat la viaa parazitar, pornind de la viaa saprobiot. De aici i capacitatea lor de a supravieui mult timp n afara organismelor gazd. Adaptarea la viaa parazitar, dei este un mod superior de existen, a presupus unele adaptri precum: tolerarea temperaturii organismului gazd, existena unor enzime care s digere noul substrat nutritiv oferit, modificri morfofiziologice, modificri genetice etc. (Euzeby, 1992). Att n mediu, dar i pe/sau n organismele gazd, micetele rezist foarte mult timp. Dermatomicetele persist ntr-o leziune cel puin dou luni, dup care se produc alte leziuni nct procesul se poate generaliza i, astfel, longevitatea infeciei este de ordinul anilor (T. mentagrophytes i menine infectivitatea n materialul infecios ntre 18 luni i 5 ani, Sparkes, 2005). Datorit rezistenei ridicate a parazitului, micetele pot s persiste i s fie difuzate n mediu. Localizarea extern n dermatomicoze este un factor important n rspndirea produselor patologice (cruste, pr, ln, scuame etc.) cu spori n mediu de ctre curenii de aer. n plus, pruritul care nsoete de multe ori dermatomicozele favorizeaz, prin grataj, desprinderea crustelor i diseminarea infeciei. Rezistena mare a sporilor asigur o persisten a acestei surse de infecie (Mitroiu, 1976). Astfel, sporii de T. verrucosum i pstreaz puterea infectant i dup patru ani. Pieile obinute de la animalele parazitate, prin transportul lor la mari distane, asigur difuzarea infeciei micotice n spaii geografice foarte largi.

13

Unele micete i-au constituit mijloace de penetrare i aprare cu totul deosebite, ca n cazul lui Cryptococcus neoformans. Acest fung prezint o capsul care are rol n ptrunderea n esuturi i protejarea fa de fagocite, lucru nentlnit la alte levuri. Dezvoltarea unor organe perforatoare de ctre unele dermatomicete pentru a invada firele de pr este o adaptare la viaa parazitar. Este cazul ciupercilor Microsporum canis, T. verrucosum, T. mentagrophytes, Epidermophyton floccosum. Hifele acestor micete fie ridic celulele cuticulei i ptrund n interiorul tijei firului de pr, fie emit prelungiri ovalare sau cuneiforme cu rol perforator sau intervin ambele modaliti de invazie pilar (Cojocaru, 1979). Fungii se multiplic i se disperseaz prin intermediul sporilor. nmulirea poate avea loc att asexuat, prin multiplicarea vegetativ, ct i sexuat, prin fecundaie. Astfel, pot rezulta att spori imperfeci sau direci, ct i spori perfeci sau meiotici. Varietatea mare de modaliti de nmulire sexuat (heterogamie, homogamie, modaliti diferite de fecundare etc.) i asexuat (spori interni, spori externi etc.) reprezint o strategie de supravieuire a micetelor n vederea perpeturii speciilor. Dificultile n stabilirea diagnosticului, mai ales n avorturile micotice, diagnosticul greit, mai ales cnd este vorba de ciuperci oportuniste (limita dintre patogen i nepatogeni fiind greu de stabilit), terapia inadecvat sau greit aplicat sunt la originea perpeturii i persistenei infeciilor micotice (Van Cutsem i Rochette, l99l ). Existena de purttori asimptomatici face greu controlul micozelor, crescnd, astfel, posibilitile de difuzare a acestora n efectivele de animale. Cazurile de evoluii oculte ajung pn la 35% la pisicile parazitate cu M. canis. Purttorii aparent sntoi reprezint, n acest fel, o surs de infecie, mai ales, n timpul expoziiilor (Quaife i Womar, 1982). Modaliti de transmitere a infeciei Transmiterea agenilor micotici presupune existena unui animal surs, care s elimine elemente infestante, i a unui animal receptiv la boal. Transmiterea infeciilor micotice se poate realiza att prin contact direct (animal-animal), ct i prin intermediul unor surse indirecte. Sursele indirecte sunt reprezentate de: oameni, animale, obiecte, instrumente, furaje, aternut, vehicule, vectori biotici i abiotici (Vior, 1999). Transmiterea direct presupune un contact strns ntre animale. Localizarea extern a unor micoze face posibil transmiterea lor mai uoar prin contact direct. Infecia se realizeaz cu att mai uor cu ct leziunile au o extindere ridicat i densitatea animalelor este mare pe unitatea de suprafa. In plus, prezena leziunilor externe favorizeaz apariia unor surse secundare de infecie, cu posibilitatea diseminrii rapide a micozei n efectivele de animale. Astfel, aceste micoze, cu evoluie endemic sau chiar epidemic, determin o morbiditate mare. Contagiunea se poate realiza, n cazul limfangitei epizootice equine (Histoplasma capsulatum farciminosum), prin contactul animalului sntos cu plcile cutanate cu puroi ale animalului bolnav. Cu toate c inoculrile experimentale nu au dat rezultate constante, aceast modalitate de infecie este considerat a fi important. Transmiterea malaseziozei presupune, de asemenea, un contact strns. Mama poate fi o surs de infecie pentru nou nscut, nc din primele zile de via (Drbu, 2002). n tricofiie, transmiterea este de multe ori realizat prin contact direct, mai ales la vieii crescui n stabulaie i, mai puin, la pune. Transmiterea indirect se realizeaz prin intermediul aternutului, ustensilelor de grajd, furajelor, apei etc. Omul reprezint un agent important de diseminare a epidemiei n efectivele de animale. Ectoparaziii, precum mutele, pduchii, acarienii etc. au un rol n transmiterea dermatomicozelor bovine (Euzeby, 1992). Cile de infecie variaz cu tipul de ciuperc i sursa de infecie. Majoritatea micetelor se pot transmite pe mai multe ci. Calea respiratorie este frecvent pentru acei fungi care se localizeaz n cile respiratorii superioare sau n bronhii i alveole. Pe aceast cale se pot transmite mucormicozele, aspergiloza, blastomicoza, criptococoza, geotrichoza, pneumocistoza. Calea respiratorie 14

este cea mai important pentru genurile Aspergillus i Cryptococcus, conidiile fiind prezente n suspensie n aerul atmosferic. Pe aceast cale se realizeaz infecia n pneumocistoz i concidioidomicoz, prin inhalarea sporilor (artroconidii). Infecia experimental a oarecilor cu Pneumocystis carinii se poate realiza pe cale intranazal cu broiaje din pulmoni infectai (Furuta i col., 1985). Candidoza i sporotrichoza se transmit i pe cale aerian, dar mai rar. Calea digestiv este important n mucormicoze, aspergiloz, candidoz, trichosporonoz (Trichosporon beigelii), prototecoz, micetele fiind ingerate o dat cu apa i cu furajele. Pe cale cutanat are loc infestarea n dermatomicoze, dar i n alte micoze precum limfangita epizootic equin, histoplasmoz, criptococoz, malasezioz, sporotrichoz, coccidioidomicoz. Infecia pornete fie de la un animal bolnav cu care se vine n contact, fie de la mediul contaminat. n mediu se pot gsi forme de rezisten a unor micete patogene sau micete geofile. Histoplasma capsulatum farciminosum se poate transmite prin intermediul harnaamentelor, dar i vectorilor animai care pot transporta i disemina cu piesele lor bucale elementele infestante. n sporotrichoz pentru a putea traversa pielea, micetele au nevoie de o soluie de continuitate (zgrietur, excoriaie). Infecia se poate realiza n aceast micoz i prin muctura de obolan sau prin muctura i zgrietura de pisic (Chermette i Bussieras, 1993). Odat ptruns prin piele, micetul invadeaz esutul subcutanat i limfatic, putnd ajunge n limfonodurile regionale i, de aici, pe cale limfatic, difuzeaz n toate organele corpului (Nesbitt, 1986). Mai rar, infeciile micotice se pot realiza pe calea canalului mamar (aspergiloz, criptococoz), pe cale ocular sau ombilical (micei din ordinul Mucorales). Calea venerian a fost semnalat n candidoza uman. Diseminarea sanguin este posibil n aspergiloz, candidoz, criptococoz. Receptivitate - cauze favorizante n general, att animalele de interes economic, ct i cele de companie, sunt receptive la infecia cu micete. Receptivitatea la infeciile micotice i la aciunea micotoxinelor este condiionat de factori extrinseci i intrinseci, precum: specia, rasa, vrsta i sexul animalului, factori ce in de individ, starea fiziologic, condiii de via etc. Specia. Aspergiloza rino-sinusal este mai frecvent la cine, n timp ce aspergiloza pulmonar este specific pisicii. Hamsterul auriu este mai sensibil la micozele profunde. Omul este aproape singura specie care face microsporia cu M. audouinii (Euzeby, 1992). Dermatomicozele sunt mai rar ntlnite la porcine i ovine. Limfangita epizootic produs de Histoplasma capsulatum farciminosum este ntlnit doar la cal. Pisicile sunt mai rezistente la blastomicoz dect cinii. Malassezia pachydermatis este mai frecvent la cine i pisic. La coccidioidomicoz par mai receptivi cinii, cu toate c toate animalele cu snge cald, ct i anumite reptile, fac experimental boala (Chermette i Bussieras, 1993). Rasa de cini Ciobnesc german este mai receptiv la infecia cu Aspergillus, fcnd forma diseminat cu Aspergilius terreus. Rasele de pisici Persan, Siamez i Angora sunt mai receptive la dermatomicoze. Din contr, la microsporie mai receptive par a fi pisicile din rasa comun la care incidena atinge 96%, fa de pisicile de ras la care incidena este de 3,5% (Lungu i col., 1982). Unele linii de pisici sunt predispuse genetic la infecia cu Microsporum canis, ceea ce explic persistena infeciei (De Boer i Moriello, 1993). Rasa West Highland White Terrier este predispus genetic la infecia cu M. pachydermatis, n timp ce rasa Collie este foarte receptiv la prototecoz (Prototheca zopfii). Coccidioidomicoza este ntlnit mai des la rasele cu prul pigmentat dect la rasele cu pr alb. Rasa de iepuri Angora este mai receptiv la dermatomicoze, datorit blnii sale i, probabil, ca urmare a traumatismelor cutanate date de depilrile frecvente i care reprezint pori de intrare. 15

Vrsta. Micozele produse de ciupercile din genurile Trichophyton i Microsporum sunt boli ale tineretului, cu toate c se pot mbolnvi i animalele adulte. i mai frapant este cazul microsporiei umane, produs de M. audouinii, care este ntlnit exclusiv la copii naintea pubertii, probabil, datorit apariiei n sebum, la pubertate, a acizilor grai saturai cu proprieti antifungice. Candidoza cu C. albicans este n mod regulat mai sever la tineret dect la adulte (Euzeby, 1992). Microsporia la carnivore apare cu frecven crescut la vrsta de 1-3 ani (uteu i Cozma, 1998). Sexul, n general, are mai puin influen asupra receptivitii n micoze. Totui, la infecia cu Coccidioides immitis, masculii sunt mai receptivi dect femelele. La om, se pare c fetele sunt mai receptive la microsporia de origine animal dect bieii. La bovine, masculii sunt mai rezisteni la infecia tricofitic datorit hormonilor androgeni care intervin n compoziia firelor de pr i asupra pielii (uteu i Dulceanu, 2001). Factorii dependeni de individ sunt foarte importani n stabilirea relaiei gazd-parazit. n condiii fiziologice normale, organismele se apr prin mijloace specifice. Astfel, bariera cutanat opune rezisten infeciei micotice prin stratul acid al pielii, prin acizii grai polinesaturai din filmul hidrolipidic superficial al pielii i prin descuamarea permanent, care are drept urmare ndeprtarea parazitului. Utilizarea frecvent a substanelor alcaline, degresarea pielii prin splare i mbibaia apoas a stratului cornos duc la creterea receptivitii n dermatomicoze. Factorii extrinseci sunt n legtur cu starea de sntate, condiiile de ntreinere i de mediu, medicaia prelungit etc. Unele afeciuni locale pot reprezenta factori predispozani pentru izbucnirea unor micoze. Astfel, aspergiloza pulmonar apare foarte rar ca afeciune primar, ea grefndu-se pe leziunile produse de cancer i tuberculoz. Afeciunile cavitilor nazale i sinusurilor frontale (infecii bacteriene), traumatismele (fracturi, intervenii chirurgicale) pot fi la baza apariiei aspergilozei. Tricofiia apare mai rar la ovine: unele leziuni cutanate, precum cele din ectima contagioas, predispun animalele la infecie. Bolile caectizante (diabet, cancer, tuberculoz) sunt la baza apariiei unor micoze oportuniste, care se dezvolt atunci cnd rezistena organismului scade. Este cazul micetelor din ordinul Mucorales, Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Alternaria alternata, Pneumocystis carinii etc. Imunodepresiile sunt implicate n apariia majoritii micozelor (mucormicoze, aspergiloz, dermatomicoze, blastomicoz, candidoz, trichosporonoz, criptococoz, malasezioz, sporotrichoz, coccidioidomicoz, pneumocistoz etc.). Pielea i mucoasele reprezint bariere fiziologice ce protejeaz organismul de agenii patogeni, inclusiv de micete. Integritatea acestor bariere se afl ntr-un echilibru dinamic. De exemplu, pentru meninerea homeostaziei cutanate intervin: pH-ul cutanat, secreiile glandelor sebacee i sudoripare, corneocitele, anticorpii etc. Dezechilibrele aprute n mijloacele de protecie natural genereaz imunodeficiene ce pot fi la baza apariiei micozelor. La pisic, deficienele imunologice pot fi determinate de virusuri (FeLV, FIV), parazii (Toxoplasma gondii), endocrinopatii (diabet zaharat), neoplazii (limfosarcom), medicamente (citotoxice, corticosteroizi) (Hubert i col., 1993). n pneumocistoz sunt importante imunodeficienele care vizeaz imunitatea celular. Pneumocistoza apare frecvent la oamenii cu SIDA, la mnjii afectai de sindromul imunodeficienei severe combinate (SCID), la oarecii nuzi (cu genom nu/nu) sau SCID (genotip scid/scid). La oamenii bolnavi de SIDA, coccidioidomicoza poate fi foarte grav. La pisicile cu FIV i FeLV, incidena parazitismului cu Cryptococcus neoformans este mai mare dect la pisicile sntoase (Scott i col., 1995). Integritatea barierei cutanate. La animalele sntoase, gazda rspunde la invazia micotic prin mecanisme nespecifice (fagocitoz prin polimorfonucleare neutrofile) i mecanisme specifice mediate celular (producere de limfokine prin limfocitele T activate). Este stimulat astfel fagocitoza prin macrofage i multiplicarea celulelor bazale ale epidermei. 16

Micetele sunt, astfel, fie distruse prin aciune direct, fie mecanic, deci indirect, prin eliminarea de scuame (Lehman, 1985). Alterarea mecanismelor cutanate de aprare permite multiplicarea dermatomicetelor i trecerea de la viaa saprobiot la cea parazitar. Astfel, pentru Malassezia pachidermatis infestaia este favorizat de: producia excesiv de sebum i cerumen, umiditatea excesiv a pielii, ruperea barierei epidermice, prezena pliurilor cutanate. Aceste modificri pot fi urmarea atopiei, piodermitei, demodicozei, hipotiroidiei, tulburrilor de cheratinizare etc. (Scott i col., 1995; Carlotti i Laffort-Dassot, 1996). In plus, M. pachidermatis poate produce lipaze care modific filmul lipidic cutanat. Displazia epidermic la rasa West Highland White Terrier poate fi urmarea unei predispoziii genetice care se traduce printrun slab rspuns al limfocitelor T fa de levuri (Scott i col., 1995). Terapia prelungit cu antibiotice, imunodepresoare i corticoizi favorizeaz apariia micozelor. Antibioticele administrate necontrolat au o aciune iritant asupra pielii i mucoaselor, supreseaz flora intestinal, inhib fagocitoza i elaborarea anticorpilor, permind astfel grefarea i dezvoltarea micetelor. De exemplu, administrarea tetraciclinelor, pe cale oral, este la originea distrugerii bacteriilor sintetizatoare de vitamin B2, iar carena acesteia favorizeaz dezvoltarea Candidei aibicans (Drbu, 1995). Bolile intercurente, tulburrile metabolice i endocriniene favorizeaz infecia micotic i diseminarea micetelor n organism. Carenele alimentare, precum cele n vitaminele A, C i E, cresc receptivitatea animalelor la dermatomicoze. Unele micete (Aspergillus spp., Candida spp., dermatofiii) utilizeaz fierul. Lipsa acestui element poate fi defavorabil dezvoltrii lor, dar, n acelai timp poate fi favorabil lui Rhizopus oryzae (Euzeby, 1992). Levurile de Saccharomycopsis guttulatus pot fi gsite, n mod obinuit, alturi de alte micete i microbi ce alctuiesc flora intestinal normal la iepure. n cazul unor deficiene alimentare cantitative i calitative, schimbri brute ale alimentaiei dar i datorit creterii temperaturii n adposturi, transportului i altor factori stresani, are loc o multiplicare rapid a levurilor cu declanarea clinic a sacaromicozei (Drbu, 1996). Configuraia anatomic. Prezena pliurilor cutanate, complexitatea i lungimea cavitilor nazale (la cini), pungile guturale (la cal), prestomacele (la rumegtoare), esutul angular nevascularizat (la pisic) sunt particulariti anatomice ce pot influena infecia micotic. Corpii strini pot leza mucoasa digestiv i nazal pe care se dezvolt numeroase specii de ciuperci oportuniste, care se gsesc n mod normal, dar nu sunt patogene dect n anumite circumstane. Spunurile acide favorizeaz, de asemenea, dezvoltarea micetelor, n spe micozele cutanate. Condiiile climatice i sezonul. Cldura i umiditatea crescute favorizeaz dezvoltarea ciupercilor saprobiote geofile (Aspergillus, Candida, Cryptococcus, Sporothrix, Coccidioides etc.). Epidemii de tricofiie pot apare la vieii supui ngrrii, mai ales dac umiditatea i cldura sunt crescute n adposturi i mai ales iarna. Limfangita epizootic equin este ntlnit vara, n zonele temperate, iar n zonele tropicale, dup sezoanele ploioase. Dezvoltarea micetelor poate avea loc pe furaje i alimente, pe care le folosesc drept substrat, n condiiile n care este asigurat oxigenul iar umiditatea i temperatura sunt optime. Micetele se pot dezvolta pe plantele din cmp, i ele pot fi consumate de ctre animale Ia pune, sau n adposturile de furaje. n acest ultim caz, micetele se pot dezvolta pe boabele de cereale, finuri, paie, reziduuri industriale, rdcinoase, nutreuri nsilozate etc., dac ofer substrat nutritiv corespunztor i pot produce la animale micoze sau micotoxicoze de grajd. Condiiile climatice din anul respectiv pot favoriza sau nu dezvoltarea micetelor; este vorba n primul rnd de umiditate i temperatur. Oxigenul, de asemenea, poate avea un rol important, micetele fiind aerobe. Presarea insuficient a

17

nutreurilor nsilozate, cu rmnerea unor spaii cu aer, poate duce la dezvoltarea micetelor n silozuri. Toxicitatea furajelor dureaz mai muli ani. Micotoxinele nu pot fi nlturate de pe furaje nici cu ageni chimici, nici prin splare. Mai mult, aceeai micotoxin (aflatoxina) poate fi produs de specii din genuri diferite (Penicilium i Aspergillus), crescnd concentraia acesteia n furaje (Stoenescu i Perianu, 1987). Excesul de umiditate pe piele, acumularea de cerumen sau sebum, folosirea unor substane sau bile care modific pH-ul pielii sensibilizeaz organismul i crete receptivitatea fa de dermatomicete. Modul de via i condiiile de cretere. Suprapopularea, prin contactul mai intim ntre animale, favorizeaz transmiterea micetelor. Creterea n stabulaie liber, pentru animalele de interes economic, n canise, pentru animalele de companie, expoziiile, concursurile etc. sunt modaliti i prilejuri de contractare a bolilor micotice. Harnaamentele, zgrzile, ustensilele de pansaj, dac sunt folosite pentru mai multe animale, pot favoriza transmiterea micozelor. Creterea pe aternut vegetal i alimentaia cu furaje mucegite favorizeaz contractarea aspergilozei. Cinii care triesc n apropierea lacurilor, blilor, cursurilor de ap, cu zone inundabile bogate n vegetaie n descompunere, au condiii propice pentru a contracta blastomicoz. n canisele unde condiiile de ntreinere sunt precare (cu aternut murdrit cu urin i fecale, alimentaie deficitar), datorit iritaiei pielii, cinii se ling, pielea se macereaz, mai ales la pliuri, i favorizeaz apariia i evoluia candidozelor. Infestarea cu Cryptococcus neoformans este favorizat de contaminarea mediului cu excremente de psri (porumbei, rae) care constituie un remediu favorabil pentru multiplicarea acestui parazit. Oamenii care manipuleaz solul i vegetalele (grdinari, forestieri etc.) prezint un risc mai mare de contaminare cu Sporothrix schenckii dect alte categorii sociale, sporotrichoza constituindu-se ca o boal rural (Drbu, 2002). Importana social Muli dintre agenii etiologici ai dermatomicozelor se transmit la om (tabelul 1). Dei contactul animal-om este mai puin frecvent dect contactul om-animal, aceast modalitate de infecie a omului nu trebuie neglijat. Dintre mamifere, animalele de companie (cini, pisici, cobai, hamsteri etc.), oarecii i obolanii au o importan mai mare n transmiterea unor micoze la om.

Tabelul 1 Dermatomicetele ce produc zoonoze (dup Chermette, 1991) 18

Specia de dermatomicet Microsporum canis M.equinum M.persicolor M. gypseum M.audouinii Trichophyton mentagrophytes T. erinacei T.verrucosum T. equinum var. equinum T. equinum var. autotrophicum T. gallinae T. quinckeanum T. simii T. rubrum

Cine +++ + ++ rarisim ++ + + +

Pisic Iepure ++++ + + + + + + + + ++

Roztoar e +

Om ++++ + + + ++

Sursa principal Pisic, Cine Equidee Roztoare, Microtine Sol (saprofitism) Om Roztoare, Muride, toate sp. Arici Bovine, Ovine Equidee Equidee Psri, Galiforme Roztoare, Muride Maimue, Psri Om

+++

+++ + +++ + + + + ++++ +

+ rarisim

+

+

Legend: frecvena (+ rar; +++++ foarte frecvent) n mediul urban o prim surs de infecie pentru om este reprezentat de cini, pisici i alte animale de companie, acestea putnd transmite Microsporum canis, mai ales, dar i Trichophyton mentagrophytes. Se citeaz, astfel, transmiterea microsporiei de la o pisic la toi cei ase membri ai unei familii (Evolceanu i col., 1986). Pisicile prezint o importan cu att mai mare cu ct, n multe cazuri, ele sunt purttoare asimptomatice, greu de depistat i nu li se acord, din aceast cauz, importana cuvenit. Aceste micoze pot fi contractate de om i prin achiziionarea n familie a unor pisici fr stpn i care pot fi purttoare de micete. Adoptarea de cini fr stpn, dac nu au fost deparazitai iniial, poate constitui o modalitate de transmitere a micozelor la om. Hamsterul, cobaiul, iepurii sunt specii ce pot transmite microsporia la om, cu att mai mult cu ct ele, mai rar, sunt luate n considerare. M. canis afecteaz att adulii, ct i copiii, dar nu este transmisibil de la om la om spre deosebire de M. audouini (Euzeby, 1992). M. gypseum i M. nanum, dermatofii geofili, sunt patogeni att pentru animale, ct i pentru om. Ei nu sunt adevrate micete ce produc zoonoze ntruct att la om, ct i la animale, infecia se realizeaz pornind de la mediul exterior. Transmiterea direct animalom este ndoielnic (Chermette i Bussieras, 1993). M. equinum, T. mentagrophytes i, mai rar, T. equinum se pot transmite de la cabaline la om, mai ales la cei care practic sporturi ecvestre. oarecii i obolanii pot transmite favusul murin (Trichophyton quinckeanum), dar afeciunea este foarte rar. n zonele rurale, 80% din tricofiia ntlnit la om este de origine animal (Zouari, 1979). T. verrucosum este agentul etiologic principal al tricofiiei taurinelor. Pornind, n principal, de la viei, boala poate fi transmis cu uurin la om, mai ales, la cei care, datorit meseriei, vin n contact cu acetia (veterinari, cresctori de animale etc.). T. mentagrophytes, de origine murin, poate fi transmis la om i prin intermediul altor animale receptive (cini, pisici, cai, porci, animale de laborator). Spre deosebire de 19

leziunile date de T. verrucosum, cele produse de T. rnentagrophytes au tendina de vindecare spontan la om. Infestarea, pornind de la specii mai puin frecvente - M. persicolor, T. erinacei - se realizeaz fie prin contactul accidental cu animale slbatice (roztoare, arici), n special al vntorilor, fie prin intermediul cinilor de vntoare care s-au infestat de la vnat. Psrile transmit n mod cu totul excepional dermatomicozele. Se citeaz cazuri rare de favus al pielii glabre la om, produs de T. gallinae, contractat de la gini (Evolceanu i col., 1986). Totui, M. persicolor infesteaz cu totul ocazional cinii, pornind de la roztoarele slbatice i, este puin probabil, ca infecia s se realizeze la om avnd ca surs cinele (Porteli, 1999). Coccidioidomicoza (Febra de California) poate fi contractat n primul rnd de la roztoarele slbatice i de la cini, specii la care s-au izolat fungii (Ivana, 1988). Transmiterea la om se realizeaz, pe cale respiratorie, prin inhalarea prafului contaminat cu clamidiospori. Fac boala mai ales agricultorii n timpul verilor secetoase, cu mult praf. Transmiterea direct de la animale la om nu a fost demonstrat, boala fiind considerat o saprozoonoz, oamenii i animalele contribuind la contaminarea solului. n mod asemntor, deci pe cale respiratorie, prin inhalarea prafului cu spori poate fi contractat criptococoza. Un rol important n epidemiologia bolii l au psrile, n special porumbeii i raele (dar nu ginile), n excrementele crora ciuperca Cryptococcus neoformans se dezvolt foarte bine (utiliznd creatinina prezent n urina acestor psri). Boala a fost observat la cei care lucreaz la demolarea cldirilor (Ivana, 1988). RSPUNSUL IMUN N MICOZE Rspunsul imun al organismului n cazul agresrii sale de ctre micromicei este diferit n funcie de tipul de fung infectant, de reactivitatea gazdei i de esutul afectat. Rspunsul imun nespecific Prezena florei comensale pe piele reprezint un mecanism important de aprare imunitar nespecific. Pe lng speciile din genul Malassezia, exist o serie de populaii rezidente a altor organisme, n special bacterii, care includ n primul rnd Staphylococcus spp., urmate de Pseudomonas aeruginosa, Proteus spp., Candida spp., Aspergillus spp. i Streptococcus spp. Toat aceast flor duce o lupt pentru nutrieni i spaiu, limitndu-se astfel, mrimea populaiilor din fiecare grup i, implicit, i posibilitatea altor populaii de ageni patogeni de a coloniza pielea. Fenomenul fiziologic de exfoliere constant a celulelor de la nivelul epidermului atrage dup sine i eliminarea microorganismelor comensale. La locul inflamaiilor, pielea are o rat de exfoliere mai rapid, eliminndu-se n acest fel, o mare parte din celule infectate. Ali factori implicai n rspunsul imun nespecific sunt: lipidele de pe piele, care acioneaz ca un fungistatic pentru majoritatea dermatofiilor; proteinele fungicide din epiderm; efectul inhibitor al transferinelor nesaturate asupra diverilor fungi. Rspunsul imun specific n cazul micozelor superficiale produse de unii dermatofii (Trichophyton rubrum), organismul dezvolt o reacie inflamatorie de mic intensitate, ce genereaz slabe impulsuri imune, infeciile avnd caracter cronic sau recidivant (Pereianu i Saragea, 1996). Trenarea infeciei produs de T. rubrum are la baz elaborarea de ctre dermatofit a unor factori inhibitori limfocitari, care afecteaz n mod serios imunitatea celular (Mc. Gregor, 1990). Nu acelai fenomen se ntmpl n cazul infeciilor cu Trichophyton verrucosum care determin un rspuns inflamator acut, urmat de vindecare i de o rezisten solid la 20

reinfecie. Din aceste considerente a fost posibil realizarea unui vaccin utilizabil n prevenia i terapia tricofiiei taurinelor (Decun i col., 1999). Limfocitele T sensibilizate reprezint factorul esenial n aprarea imunologic deoarece s-a observat c apariia inflamaiei este concomitent cu dezvoltarea hipersensibilitii cutanate de tip ntrziat la tricofiin (agent revelator). Factorii inhibitori limfocitari produi de Trichophyton rubrum i de Trichophyton mentagrophytes i Epidermophyton floccosum vizeaz limfocitele care exprim antigenul HLA-DR i nu celula prezentatoare de antigen (n particular celula Langerhans dermic). Astfel se explic imposibilitatea eliminrii dermatofiilor din piele chiar n prezena unor rspunsuri celulare normale la antigenele lor. n cazul subiecilor cu imunitatea celular alterat (SIDA, sindrom Cushing, boli limfoproliferative), susceptibilitatea la infecii de tipul dermatofitozelor este mult crescut, ceea ce indic faptul c factorii imunologici celulari ai macroorganismului influeneaz i particularizeaz evoluia afeciunii. Celulele fagocitare (neutrofilele i monocitele) dei pot distruge conidiile dermatofiilor, nu sunt eficiente n combaterea infeciilor fungice de acest tip, deoarece celulele dermatofitice elaboreaz catalaz - un factor enzimatic ce le sustrage de sub aciunea litic a mieloperoxidazei fagocitelor. De asemenea, factorii umorali specifici - anticorpii antidermatofii - au un rol nesemnificativ n protecia mpotriva infeciei deoarece niveluri crescute de anticorpi nu se coreleaz cu rezoluia bolii, ci sugereaz cronicitatea acesteia ca n cazul IgE (Pereianu i Saragea, 1996). Este posibil ca dermatofiii s posede un mozaic de antigene, unele mai imunogene i astfel sinteza de anticorpi s fie direcionat doar spre acestea. Deoarece nivelul crescut de anticorpi nu are efect protector, se poate emite ipoteza c antigenele mai imunogene nu sunt factorii de virulen ai micromiceilor dermatofii, ci alte molecule parietale de suprafa. Factorii de patogenitate ce asigur persistena infeciei ar putea avea o structur steric slab imunogen sau epitopii acestora sunt mascai i nu pot fi reperai de sistemul imun. Timp ndelungat rspunsul imun n dermatofitozele produse de speciile genului Microsporum a reprezentat subiect de contradicii bibliografice. Sistemul imun cutanat pune n joc o serie de celule (cheratinocite, celule endoteliale capilare, celule Langerhans, limfocite T epidermice) care intervin direct n aprare sau prin intermediul citokinelor ( Trziu i col., 2000). Antigenele strine intrate n epiderm induc producerea de citokine (de ctre cheratinocite) care atrag celulele inflamatorii (PMN i macrofagele). n paralel, celulele Langerhans capteaz antigenele, le expun la suprafaa lor cu molecule din complexul major de histocompatibilitate din clasa II, migreaz n esuturile limfoide locale, unde interacioneaz cu limfocitele T precursoare, provocnd expansiunea lor clonal. Limfocitele T activate migreaz spre derm i epiderm, unde iniiaz un rspuns celular eficient mpotriva microorganismelor patogene (Rpuntean, 1997). Rspunsul imun mediat celular pare a fi determinant n eliminarea fungilor i n procesul de vindecare. Att la om, ct i la animale, rezoluia unei infecii acute este nsoit de o stare de hipersensibilitate ntrziat (Prelaud, 1997). Rspunsul imun n micozele respiratorii este mediat celular prin limfocitele T. Acestea produc limfokine care activeaz macrofagele, ce vor participa alturi de neutrofile la distrugerea fungilor. n cazul SIDA, deficitul marcat de limfocite T helper lipsete organismul de principala strategie defensiv mpotriva microorganismelor. n funcie de depleia limfocitar T se realizeaz i o ealonare a interveniei microorganismelor patogene la subiecii HIV pozitivi. Cnd numrul de limfocite T CD4 depete valoarea de 400/mmc, atunci sunt frecvente infeciile cu germeni piogeni; la valori cuprinse ntre 200-400 apare tuberculoza, ntre 100-200 sunt frecvente pneumocistoza, toxoplasmoza i criptococoza, la 50-100 evolueaz aspergiloza, iar la valori care coboar sub 50/mmc sunt comune infeciile cu micobacterii atipice i citomegalovirus (Danker i col., 1999).

21

Candida albicans este o levur frecvent implicat n infeciile superficiale ale pielii i ale mucoaselor, dar i n infecii sistemice grave. Candidozele cutaneo-mucoase sunt ntlnite la subieci cu un deficit funcional al limfocitelor T, iar cele sistemice sunt mai frecvente n cazul reducerii numrului sau disfuncionalitii celulelor fagocitare (neutrofile i macrofage). Dei mannanul, un poliozid parietal, exercit un chimiotactism pozitiv pentru neutrofile, n cazul neutropeniei sau anomaliilor calitative ale funciei fagocitare, celulele levurice nu sunt distruse sau sunt distruse foarte lent. Unele citokine de tipul interferonului gamma stimuleaz fagocitele, optimizndu-le capacitatea distructiv fa de microorganismele nglobate. Defectele fagocitare n cazul infeciei cu Candida albicans se pot manifesta n dou direcii principale. Un grad redus de fagocitoz se ntlnete n cazul defectelor de chemotactism (pacieni diabetici) sau n cazul apariiei leucopeniei n urma tratamentelor cu antibiotice, corticosteroizi, alte produse citotoxice sau iradieri. n etapa post fagocitar pot surveni, de asemenea, deficiene legate de sinteza mieloperoxidazei i a radicalilor liberi de oxigen, factori cheie ce asigur liza intracelular a microorganismelor. Situaiile de acest gen se ntlnesc relativ frecvent n practica medical, fiind legate fie de anomalii genetice, fie de boli hematologice proliferative (leucemii etc.) n care sunt avansate n sectorul circulant celulele incompetente funcional. Acest deficit n sinteza factorilor cu rol microbicid aprut n celulele fagocitare este amplificat de inhibiia mieloperoxidazei neutrofilice i macrofagice de ctre catalaza unor fungi cum ar fi Candida albicans, Aspergillus fumigatus (Pereianu i Saragea, 1996). n cazul candidozelor cutaneo-mucoase, rspunsul imun mediat celular prin limfocitele T asigur protecia organismului. Infecia cu Candida albicans survine adeseori pe un teren cu deficit imunitar celular pe care apoi l amplific. Mannanul - un poliozid din peretele celulei levurice care joac i rol de adezin - eliciteaz un efect de proliferare a limfocitelor T supresoare ce vor diminua drastic rspunsul imun la non-selful infectant i, astfel, Candida albicans i asigur prelungirea persistenei pe structurile anatomice ale organismului deja infectat. Tot aceast molecul parietal inhib prezentarea antigenelor levurii sistemului imunitar, fapt ce sustrage blastoconidiile de Candida albicans de sub aciunea mecanismelor de aprare ale gazdei. Incidena i gravitatea candidozelor cutaneo-mucoase sunt vizibil crescute la subiecii cu defecte genetice ale funciei limfocitelor T ceea ce confirm intervenia primordial a imunitii mediate celular n protejarea organismului fa de infecia cu Candida albicans la nivelul suprafeelor de raport ale acestuia cu mediul. Astfel, n aplazia i displazia timic apar candidoze cutaneo-mucoase incurabile chiar n perioada perinatal. Deficitul imunitar celular dobndit (depleie limfocitar T prin infecie cu HIV) predispune de asemenea la infecii fungice. De remarcat faptul c indivizii cu disfuncionaliti ale limfocitelor B nu au o susceptibilitate deosebit la candidoze dac nu se asociaz i o disfuncionalitate a limfocitelor T. Rspunsul imun mediat celular asigur, deci, protecia organismului fa de marea majoritate a micromiceilor. Orice factor de supresie a acestuia poate determina reactivarea i diseminarea infeciilor fungice asimptomatice sau slab manifeste clinic i chiar apariia de noi infecii cauzate de fungi oportuniti. Rspunsul umoral n infeciile fungice este materializat prin sinteza anticorpilor de tipul Ig G, Ig M, Ig A i Ig E, dar rolul lor protector este n general nesemnificativ (DeBoer i Moriello, 1993). TERAPIA N BOLILE MICOTICE Incidena din ce n ce mai ridicat, caracterul zoonotic manifestat n numeroase situaii, diversitatea cilor de transmitere i a lanurilor epidemiologice, polimorfismul semnelor 22

clinice i lezionale, dificultatea izolrii i identificrii agentului cauzal reprezint doar cteva aspecte care impun bolile micotice, din ce n ce mai mult, n patologia actual. ncercrile cercettorilor de a realiza produse medicamentoase antifungice de mare eficien i de a elabora diferite scheme terapeutice sunt ngreunate de multiplele modificri ce afecteaz att agentul etiologic, ct i gazda receptiv (omul i animalele). Modificrile cele mai accentuate care au avut repercusiuni majore asupra sensibilitii leau suferit organismele gazd. n situaii de vulnerabilitate a gazdei (dismicrobismul antibiotico-dependent, strile de imunodepresie) se creeaz terenul propice agresiunii micotice. Astfel, gazdele nu mai sunt capabile s-i menin integritatea funcional i morfologic, i, n consecin, fungii dezvolt procese morbide trenante i adeseori cvasirefractare la mijloacele antimicotice utilizate. Rspunsul redus la terapie a majoritii micozelor, att a celor localizate, ct i a celor sistemice, eecurile terapeutice i profilactice sunt cauzate de: structura particular a agenilor etiologici, slaba reactivitate a gazdelor, erorile n alegerea produsului medicamentos antifungic, coexistena unei boli de fond (diabet, nefropatii, sindrom de imunodeficien dobndit etc.), terapia fr o prealabil antimicogram (Drbu i col., 2005). Aspectele eseniale n nelegerea i abordarea terapeutic corect a infeciei fungice au mbrcat, de-a lungul anilor, mai multe orientri. n orientarea clasic, terapia infeciilor fungice consta exclusiv n folosirea unor substane antimicotice, mai mult sau mai puin eficace, influenarea evoluiei rmnnd n principal la latitudinea forelor de aprare ale organismului. Tendina actual dirijeaz terapeutul spre administrarea substanelor antifungice asociat cu msuri de ordin igienodietetic i/sau cu terapia imunostimulatoare (Golescu, 1997; Bennett, 1998; Nardoni i col., 2000; Milanta i col., 2000; Kuzner i col., 2000; Erzen i col., 2000; Kotnik i col., 2001; Mitra i Das, 2003). TRATAMENTUL ETIOTROP Administrarea unor produse medicamentoase cu electivitate ct mai strict pentru micromicei i cu nocivitate ct mai redus pentru celulele organismului bolnav reprezint scopul principal al tratamentului etiotrop. Stabilirea unui diagnostic cert, confirmat ulterior prin izolarea fungului i nsoit de evaluarea sensibilitii acestuia la substanele antifungice disponibile sunt etape obligatorii care preced tratamentul etiotrop. Datorit diversificrii i apariiei de noi produse antimicotice, n prezent, clasificarea lor se face dup mai multe criterii. Pe baza criteriului aplicabilitii, antimicoticele se clasific n: antifungice topice; antifungice sistemice. Antifungicele topice sau de contact sunt produse utilizabile n terapia infeciilor micotice cutanate i ale mucoaselor. Formulele de administrare sub care gsim aceste antifungice locale sunt diferite: soluii, emulsii, ampoane, pomezi, pulberi, unguente, creme i geluri. Antifungicele sistemice realizeaz concentraii serice terapeutice i, n plus, difuzeaz n esuturi i organe, efectul curativ manifestndu-se din acest motiv, att n cazul micozelor interne sau sistemice, ct i n cazul celor externe (tegumentare sau ale mucoaselor). n practica medical sunt folosite mai frecvent patru clase principale de antimicotice: macrolidele polienice; derivaii sintetici de imidazol; griseofulvina; 5 fluorocitozina. Primele dou afecteaz sinteza i funcionalitatea membranei celulare, iar celelalte dou metabolismul celular al fungilor (Zice, 1998). 23

Exist i o alt prere referitoare la clasificarea substanelor antimicotice. Coman i Mare (2000) consider c, cea mai pertinent clasificare a agenilor antifungici rmne ns cea care are la baz criteriul structurii chimice. n funcie de structura chimic, agenii antifungici folosii astzi se mpart n mai multe clase: ageni antifungici anorganici elemente chimice: iodul, sulful; acizi: acidul boric, acidul clorhidric; sruri: clorura de var, iodura de potasiu, permanganatul de potasiu, sulfatul de cupru, tiosulfatul de sodiu. ageni antifungici organici naturali: principii active vegetale, propolisul; de sintez i semisintez: acizi organici (benzoic, caprilic, propionic, salicilic, undecilenic); alilamine; antibiotice polien-macrolide; derivai de pirimidin; detergeni cationici; hidroxipiridone; imidazoli; morfoline; triazoli; thiabendazol. Iodul Iodul este un agent antimicotic eficace, cunoscut din cele mai vechi timpuri, folosit i n prezent n tratamentul topic al pilomicozelor, onicomicozelor i micozelor epidermice. Preparatele iodate cele mai utilizate sunt alcoolul iodat, glicerina iodat i tinctura Sabouraud, toate avnd o concentraie a halogenului activ de 1-2%. Sulful Sulful este un element chimic utilizat ca principiu medicamentos pentru efectul su antiparazitar, antifungic, cheratolitic i antiseboreic, dar nu mai poate fi inclus n arsenalul terapeutic actual datorit mirosului neplcut i faptului c utilizarea prelungit poate provoca dermatit iritativ. Clorura de var i permanganatul de potasiu Atunci cnd sunt aplicai local, aceti doi compui chimici acioneaz i ca antifungice, dei sunt substane cu rol decontaminant. Sulfatul de cupru Sulfatul de cupru manifest efect antimicotic chiar la concentraii relativ mici (1), putnd fi administrat n apa de but a psrilor cu aspergiloz. n concentraii mai mari, se folosete pentru aplicaii locale, fie sub form de soluii, fie ca unguent, n asociere cu alte substane active, mai ales n tricofiia vieilor. Utilizarea sa este limitat deoarece preparatele topice, n funcie de concentraie, pe lng efectul antifungic pot avea i efect iritant sau chiar caustic. Iodura de potasiu Acest compus chimic iodat este nc folosit ca antifungic att local (sub form de soluie Lugol), ct i sistemic, indicaia major reprezentnd-o sporotricoza. Propolisul Propolisul este un produs natural obinut prin activitatea familiilor de albine, implicnd colectarea i prelucrarea primar a exsudatelor mugurilor diverselor plante. Clasele de substane chimice prezente n compoziia propolisului sunt numeroase, acestea fiind reprezentate de: aldehide, alcooli, acizi i esteri alifatici, aminoacizi, acizi i esteri aromatici, flavone i flavonoizi, acizi grai, cetone, substane terpenoidice, steroizi, zaharuri, vitamine, elemente minerale. Diversitatea compoziional explic i paleta larg a utilizrilor propolisului n terapie. Pe lng aciunile antibacterian, antiviral, citotoxic, antiprotozoaric, imunomodulatoare i anestezic, propolisul manifest i importante proprieti antifungice, mai ales fa de speciile genului Candida i dermatofii (Marcucci, 1995; Cheng i Wong, 1996, cit. de Coman, 2000). Prerea general este aceea c, propolisul poteneaz substanele medicamentoase antifungice, acionnd sinergic cu acestea (Holderna i Kedzia, 1987, cit. Coman, 2000) i doar extractele 5-10% n pro24

pilenglicol manifest un efect antimicotic cert, chiar fr asocierea cu alte antifungice (Millet - Clera i col., 1987; Lisa i col., 1991, cit. Coman, 2000). Principiile active vegetale Multiple principii active vegetale exercit i un efect antimicotic pe lng alte numeroase aciuni farmacodinamice. Exist dou grupe de principii active cu rol antimicotic: cele ce acioneaz singular, avnd efect micocid puternic, i cele care acioneaz prin sinergism de potenare, ntregul fitocomplex fiind responsabil de proprietile antimicotice ale extractelor vegetale (Coman i Mare, 2000). Rezultatele studiilor realizate de colectivul de cercetare al Clinicii de Parazitologie Timioara ncurajeaz noile tendine n terapia naturist a dermatomicozelor. Eficacitatea terapeutic a extractului de Allium sativum, sub form de soluie i unguent, a fost testat pe cini i pisici infectate natural cu Microsporum canis. Ambele forme de prezentare au avut o eficacitate de 100%, dup aplicare local pe leziuni, timp de o lun de zile. Unguentul de Allium sativum asigur o vindecare mai rapid i previne, n mai mare msur, leziunile secundare (Drbu i col., 2005). Acelai unguent pe baz de extract de Allium sativum, aplicat zilnic, timp de 2-4 sptmni, a avut o eficacitate de 100% n infecia cu Tricophyton mentagrophytes la cobai (Ilie i col., 2005). n infecia experimental cu Microsporum canis la pisic s-a testat eficacitatea a dou extracte naturale: extractul apos i extractul crud de Allium sativum, aplicate local, zilnic, timp de o lun. Eficacitatea a fost de 100% n cazul aplicrii extractului apos i de 66% la pisicile tratate cu extractul antimicotic crud (Drbu i col., 2005). IMIDAZOLII Cele mai importante progrese n domeniul medicaiei antimicotice s-au nregistrat prin descoperirea compuilor heterociclici cu strucur azolic: imidazolul i triazolul (Mackenzie i col., 1986). Primele observaii s-au fcut asupra derivailor de benzimidazol: clonidazolul i clemizolul. Superiori derivailor de benzimidazol s-au dovedit compuii cu structur imidazolic, descoperii aproape simultan: clotrimazolul (Bayer) i miconazolul (Janssen), n anul 1969. Aceste descoperiri au deschis era derivailor imidazolici, considerai medicamente de elecie n tratamentul micozelor. Imidazolii conin n structura lor molecular un nucleu imidazolic substituit cu diveri radicali. Clotrimazolul Structura chimic a clotrimazolului este 1-1-0-clorfenil-1, 1-difenilmetil imidazol. Dup administrare oral, clotrimazolul traverseaz bariera intestinal n cantiti extrem de reduse. Pick-ul concentraiilor serice este atins n 1-3 ore de la administrare i n general se ncadreaz n intervalul 1-6 g/ml. Eliminarea clotrimazolului se face predominant prin materiile fecale, dup administrarea per os. Deoarece concentraia produsului n chim-ul gastrointestinal depete de multe ori nivelul minim necesar pentru manifestarea efectului terapeutic, principala indicaie a tratamentului cu clotrimazol pe cale oral este candidoza digestiv. Se poate administra i local, n asociere sau nu cu glucocorticoizi topici, avnd un bun efect terapeutic datorit persistenei de cteva zile n stratul cornos al tegumentului. n prezent, s-a renunat la administrarea oral, datorit reaciilor adverse frecvente i neplcute (vomismente, epigastralgii, diaree, colici abdominale, cefalee, stri confuzionale, polakiurie, manifestri alergice cutanate). Singurele ci de administrare i forme comerciale acceptate astzi sunt ovulele pentru administrarea intravaginal, crema i soluia pentru uz topic. Produsele medicamentoase pe baz de Clotrimazol sunt ntlnite n reeaua de distribuie sub diferite denumiri comerciale: CLOTRIMAZOL, ANTIFUNGOL, CANDISTAN, CLOTRIMOX, LOTRIMIN, TRIMYS-TEN. Ketoconazolul 25

Ketoconazolul sau Nizoralul este un derivat imidazolic administrabil pe cale oral, activ fa de muli micromicei filamentoi i levuriformi. Substana activ a fost obinut prin sintez i a intrat n experimentare clinic n 1980. Din punct de vedere al structurii chimice este cis-1-acetil-4/ 4-2-2,4-diclorfenil-2-(1-Himidazol-1-yl-metil-1, 3-dioxolan-4yl)-metoxi-fenilpiperazin. Dup administrarea oral, absorbia digestiv a Ketoconazolului cunoate variaii n funcie de specie, dar i de individ, fiind n general bun la om i carnivore, specii la care pH-ul gastric acid favorizeaz solubilizarea produsului. Structura alimentaiei nu are repercusiuni negative asupra absorbiei Ketoconazolului, ns o serie de procese patologice ca SIDA sau gastropatiile dissecretorii ce evolueaz cu hipo- sau anaciditate o reduc considerabil. Terapia simultan cu antiacide, anticolinergice, cimetidin sau alte substane blocante ale receptorilor H2 pot afecta absorbia, n sensul reducerii ei. Concentraia seric maxim este atins n 1-2 ore de la administrarea oral i este dependent de doza prescris; dup administrarea unei doze de 100-400 mg, nivelul seric atins variaz ntre 1-6 g/ml. Sunt semnalate cteva aspecte particulare referitoare la interferenele Ketoconazolului cu alte produse medicamentoase. Rifampicina reduce prin inducie enzimatic nivelul plasmatic al Ketoconazolului, acelai efect, ns indus prin mecanisme diferite manifestndu-l i izoniazida. Ketoconazolu