DOCUMENT : L.P. 14 - Microbiologie Generală DATA : 29/03/2014

TITLU : Determinarea dimensiunii celulei microbiene PAGE : 1/2

1

9. Determinarea dimensiunii celulei microbiene Determinarea dimensiunii celulelor este un alt criteriu morfologic important utilizat la

încadrarea taxonomică a unui grup de microorganisme reprezentativ, pe baza măsurătorilor biometrice efectuate la microscop.

Pentru acest scop se folosesc micrometrul ocular şi micrometrul obiectiv în vederea determinării indicelui micrometric.

Micrometrul ocular (figura 9.1 A) se montează în locul ocularului stâng al microscopului cu care se lucrează. Este de fapt un ocular obișnuit care are gravată la mijloc o scară micrometrică, a cărei diviziune diferă de la un microscop la altul. Pentru aceasta este necesară etalonarea scării micrometrice în vederea aflării dimensiunii unei diviziuni (μm) de pe micrometrul ocular.

Micrometrul obiectiv (sau lamă micrometrică) (figura 9.1 B) este o lamă de sticlă în centrul căreia este gravată o scară lungă de 1 mm şi împărţită în 100 părţi egale. Fiecare diviziune este egală cu 0,01 mm, adică 10µ.

Pentru etalonarea scării micrometrice a ocularului se așează micrometrul ocular în ocularul microscopului şi micrometrul obiectiv pe platina microscopului. Se potrivește ca prima diviziune a scării micrometrului ocular să se suprapună exact cu prima diviziune a scării obiectivului prin rotirea ocularului atât cât este necesar, deplasând și platina microscopului (figura 9.1 C).

Exemplu : dacă la suprapunere, o diviziune a micrometrului obiectiv (cu valoarea 0,01 mm = 10µ) corespunde unui număr de 8 diviziuni ale micrometrului ocular, atunci valoarea diviziunii ocularului este de 10µ:8= 1,25µ.

Această valoare reprezintă indicele micrometric sau coeficientul micrometric al microscopului respectiv

Cunoscând valoarea în microni (μm) a unei diviziuni din micrometrul ocular, care nu este altceva decât valoarea indicelui micrometric şi numărul de diviziuni corespunzător lungimii celulei microbiene, pe care o măsurăm, putem determina dimensiunea reală a microorganismului respectiv (figura 9.1 D). Acest lucru se calculează atunci când se utilizează obiectivul 10x. Dacă se examinează cu obiectivul 40x, atunci rezultatul obținut dintre numărul de diviziuni și indicele micrometric se împarte la 4 pentru a afla dimensiunea reală a microorganismului.

Exemplu : Dacă la examinarea cu obiectivul de 10x, microorganismul măsurat are 10 diviziuni, cum este cazul celulei de drojdie (figura 9.1 D), dimensiunea reală a celulei este 1,25µ x 10 = 12,5µ. Dacă examinarea se face cu obiectivul 40x, atunci rezultatul este de 4 ori mai mic, adică 12,5µ : 4 = 3,125 µ

Într-o populație microbiană există o anumită variabilitate a dimensiunii celulare la nivel de gen, specie, tulpină. Această varibilitate poate fi naturală, spontană sau indusă, astfel încât studierea ei are numeroase implicații practice și teoretice în microbiologie.

Coeficientul de variabilitate se calculează pentru a observa gradul de variabilitate a dimensiunilor celulelor (L, l) dintr-o populație microbiană (cultură pură de microorgansime), pe parcursul creșterii și dezvoltării acestora. Acesta se exprimă în % și este raportul dintre abaterea standard (s) și media aritmetică ( x ) pentru trăsătura luată în studiu.

Coeficientul de variabilitate se calculează după următoarea formula :

v% = s/x 100

în care : x- valoarea parametrului ; n- numărul de celulele măsurate sau numărul de valori individuale pentru parametrul luat în studiu

∑(x-x)2

s = n -1

∑x x = n

DOCUMENT : L.P. 14 - Microbiologie Generală DATA : 29/03/2014

TITLU : Determinarea dimensiunii celulei microbiene PAGE : 2/2

2

Figura 9.1 Determinarea dimensiunii celulare

A – micrometrul ocular; B – micrometrul obiectiv; C – suprapunerea celor două scări pentru etalonarea microscopului; D - măsurarea dimensiunii celulei microbiene