lp 2 proteina c reactiva

7/22/2019 LP 2 Proteina C Reactiva

1/4

LP 2 AMGMoase

PROTEINA C REACTIVA - CRP metoda dublei difuzii Ouchterlony simetoda latex

Metoda Ouchterlony metoda imunochimica bazata pe reactia de precipitare inmediu solidimunodifuzie radiala dubla.Metoda latexmetoda imunochimica bazata pe reactia de aglutinare.

PROTEINA C REACTIVA - CRP

Definitie

Este o proteina clasica de faza acuta a inflamatiei, care apare ca raspuns rapid labolnavii cu:

- diferite infectii microbiene(cu streptococ, pneumococ etc.)

- in inflamatii(reumatism),- in infarctul miocardic, in tumori, etc.

RolulProteina C reactiva este sintetizata in ficat si initiaza opsonizarea si fagocitoza

celulelor care patrund in organism, dar

- rolul ei principal rezida in fixarea si neutralizareasubstantelor toxice

endogene provenite din leziunile celulare.

Proteina C reactiva este o proteina care nu exista in mod normal in serul

uman.

Semnificatie clinica

-

Ea are importanta alaturi de alte teste cum ar fi VSH si fibrinogen.- Toate cele trei indica prezenta unui sindrom inflamator (este marker alinflamatiei).

- Prin proteina C reactiva se poate masura si riscul ca un pacient sa prezinte oboala cardiovasculara. Astfel, daca el are o concentratie de sub 1mg/l atunci

riscul este practic 0, iar daca are peste 3mg/l atunci riscul este foarte ridicat.

Dozarea CRP e utila in:

depistarea proceselor inflamatorii sistemice (cu exceptia lupusului eritematosdiseminat, si a rectocolitei hemoragice)

aprecierea eficacitatii tratamentului antiinfectios, sau antiinflamator


2/4

detectia precoce a unor complicatii postoperatorii (infectii ale plagii, tromboze,pneumonie)

diferentierea intre infectie si reactie de rejet dupa transplant de maduva osoasaReactia pr in care se pune in evidenta proteina C reactiva este o reactie in urma

caruia are loc un fenomen de precipitare (imunodifuzia dublu radiala-Ouchterlony)sau aglutinare (metoda latex).

Proteina C reactiva precipita pr in testarea serului de cercetat cu un antiser specif ic

in caz de boli in f lamatori i .

1. Testul de imunodifuzie dubl radial (Ouchterlony)Aceast metod se bazeaz pe difuzia antigenului i a anticorpilor unul ctre cellalt,ntr-un mediu gelozat, care iniial nu are ncorporat nici un reactant (Rpuntean,

1994). n dou godeuri alturate, decupate dintr-un gel de agar se umplu, unul cuprotein anticorp i unul cu protein antigel omoloag, Ag i Ac vor difuza unul sprecellalt iar la locul de ntlnire va aprea o linie de precipitat.

Pentru realizarea acestei metode se utilizeaza urmtoarele:- ser de examinat, proaspt sau pstrat la 20oC.- ser de referin (conine PCR Agstandard)- gel de agar- lam de microscopsau cutii Petri- antiser monospecificMod de lucru

- Agarul topit se toarn pe lama de microscop n cantitate de 3,5 ml gel.- Dup solidificare s-au decupat godeuri de 3 mm diametru, n model radial,

unul central i 6 periferice.- Godeurile se umplu cu reactani cu ajutorul micropipetei, astfel: n godeul

central se pune antiser iar n celelalte se repartizeaz: n I i IV ser de referin iar nII, III, V i VI serurile de cercetat.

- Placile au fost puse la termostat, n cutii umede, pentru a se mpiedeca

uscarea agarului.- Citirea se face n camer obscur, la o surs de lumin, (dup 2 ore sunt

vizibile, dup 4ore sunt clare, dup 24 ore sunt mult ntrite).

Rezultatele se exprim n prezent sau absent


3/4

2. Determinarea proteinei C-reactiv (CRP) prin metoda LATEXEste un test calitativ sau semicantitativ.

CRP este o -globulin, al crui nivel crete n procesele inflamatorii, n faza acut aunor afeciuni i dup operaii chirurgicale.

Principiul metodei

Reactivul CRP-Latex este o suspensie de particule de polistiren sensibilizate cu

anticorp uman de protein C-reactiv. Cnd reactivul ajunge n contact cu serul carecontine anticorpi de CRP, are loc o reacie antigen-anticorp usor de vizualizat, fiind oreactie de aglutinare a latexului.

Reactivi i materiale- Reactiv CRP Latex: 2 sau 4 ml de reactiv latex-

Control pozitiv: 0,5 ml ser uman, CRP>15mg/l- Control negativ: 0,5 ml ser uman, CRP1mg/l- Lame i baghete de unic folosin- Plci de reacie cu 6 locuri

Proba: ser proaspt sau conservat, nehemolizat, fr impuritiMod de lucru

- Se aduc reactivii i serurile de analizat la temperatura camerei- Se pune o pictur (40-50l) de prob i 1 pictur din fiecare control n

godeuri separate de pe plac- Se adaug 1 pictur reactiv latex- Se amestec cu bagheta picturile- Se observ prezena sau absena aglutinrii n 3 min

Rezultate

1. Rezultat pozitivapare aglutinare vizibil a particulelor de latexAceasta reprezint un nivel de CRP 6mg/l n serul testat

2. Rezultat negativnu apare aglutinare n interval de 3 minAceasta reprezint un nivel de CRP


4/4

lp 2 proteina c reactiva

Documents