2. inhibitori naturali
TRANSCRIPT
Dependenţa AE:
- S
- E
- to
conservare
denaturare
- pH
- inhibitori (mediu)
Clase enzime
1. Oxidoreductaze
2. Transferaze
3. Hidrolaze
4. Liaze
5. Izomeraze
6. Sintetaze (Ligaze)
Inhibiţia reversibilă
Competitivă
Necompetitivă
Inhibiţia specifică ireversibilă
Inhibitor suicid:
Ligand dezvoltă o legătură covalentă stabilă
La nivel proteaze: resturi aspartat, histidină, serină.
Allopurinol / aloxantina:
inhibitor xantinoxidază (XO)
(hipo)xantina - acid uric
xantina – aloxantină
Mo / enzimă complex stabil
Acţiunea inhibitoare a allopurinolului asupra xantinoxidazei
Inhibitori naturali:- sintetizaţi de celulele vii;- funcţie reglatoare în procesele enzimatice;- lipsă: acţiuni catastrofice – incompat. cu viaţa;
Serpine (Serine Protease Inhibitors):- proteaze: transmitere şi amplificare semnal;- acţiune antiproteazică: activare proteaze plasmă (coag.; firinoliză; complem.) – ţinta unui inhibitor; - control acţiune proteaze – limitare de acţiune;- control probabilistic interacţie: protează – inhibitor;- biosinteză fibroblaste;
- antitripsina-α1
- antitrombina III- antiplasmina-α2.
- migrare electroforetică – α;
Probabilitate interacţie protează-inhibitor:
- mare;
- acţiunea proteazei - scurtă;
- efectele limitate;
- întârziere în neutralizare proteaze riscantă
Inhibitorii plasmatici ai proteazelor
- o grupare heterogenă ~ 20% globuline
- migrarea electroforetică α
- complexe ireversibile inhibitor-enzimă,
Creşteri α1-antitripsinei: reacţii de fază acută
inflamaţii cronice. Deficienţe: antitripsina: astm, emfizem – creşte AE elastază cu consecinţe asupra alveole pulmonare.
α2-Macroglobulina Mw: 725 KDa,
- inhibarea enzimelor coagulării
- prezentă: suprafaţa membranei limfocitare
- funcţii imunoreglatoare: depresia şi supresia Ig.
Macroglobulina-α2:
- absenţa - incompatibilitate cu viaţa;
- constituent plasmă
(300-400 mg/100mL);
- Mw: 725 kDa
- 4 subunităţi identice asociate -S-S-;
- prezenţă: suprafaţa membranei limfocitare;
- acţiune inhibitoare:
plasmina, trombina, kalicreina.
Deficit parţial:
- tulburări de coagulare;
- tulburări de fibrinoliză accentuată;
- septicemii;
- pancreatită acută.
Nivele crescute:
- diabetul zaharat;
- sindrom nefrotic: sinteză accelerată proteică;
- pierderea urinară nesemnificativă.
Nexinele - inhibitori plasmatici:- inhibă serinproteaze din lichidele interstiţiale:
trombina, plasmina, tripsina:(antitripsina, antitrombina, antiplasmina);
- acţiune specifică în raport cu proteazele; - interacţia nexină-serinproteaze: acil-enzimă;- complexele nexină-protează:
adsorbţie pe celulele producătoare de nexine; internalizare în celulă a proteazelor;distrucţie proteaze.
Deficienţe: antitripsina: astm, emfizem – creşte AE elastază cu consecinţe asupra alveole pulmonare.
Proteaze implicate în apărare nespecifică:
- complement – liză celule ţintă;
- coagulare;
- fibrinoliză.
- acţiune: cascadă enzimatică – precursori;
- acumularea: consecinţe catastrofale;
- controlul - complexe inactive:
proteaze-antiproteaze:
activarea unei proteaze;
ţinta unui inhibitor.
β-lactame:
- peniciline;
- cefalosporine.
Peniciline:
- antibiotice: biosinteză ciuperci;
- cicluri condensate: β-lactam - tiazolidinic.
- efect:
- inhibarea reticulării peptidoglicani;
- fragilitate şi neprotejare celulară/mediu.
*
* Centru activ peniciline, cicluri planare, deformare spaţială, reactivitate,
agenţi de acilare
Ţinta β-lactamaze, Ez de reticulare
- -
- -
-
Ciclul β-lactamic: planar;
datorită ciclului vecin se deformează:
tensionare-deschidere – agent de acilare;
legătură amidică;
atom de carbon chiral;
centrul activ al penicilinelor;
ţinta: β-lactamaze;
β-lactamele pot interacţiona cu proteine:
- Ez care catalizează reticularea peptidoglicanilor;
- β-lactamaze (hidrolaze) - suprimă acţiunea antibiotică.
Celula bacteriană /
eucariotă
Perete peptidoglicanic
Gram (+) perete 25 µm; membrană dublu lipidică;
Gram (-) perete 2-3µm;
2 membrane dublu lipidice. Structură – specificitate;
antigenitate.
Deschidere ciclu lactamic:
- β-lactamaze – suprimă acţiunea antibiotică;
A,B,C,D – serinenzime (A,C,D), metaloenzimă (B).
- gene codante: plasmide sau cromozom bacterian;
- acilarea ireversibilă (uneori) reversibilă;
- hidroliza acilderivatului format (deacilare):
mai rapidă decât acilarea: β-lactamază;
mai lentă sau nulă, proteina rămâne acilată: inhibiţia ireversibilă.
Acilarea:
rest Ser din situs enzimatic;
Ez – CH2 – OH + R – CO- X
Ez – CH2 – O – CO – R + HX
Eq dinamic: Ez de reticulare / lactamază
Mutaţii bacteriene:
creşterea puterii de hidroliză a penicilinelor;
Lupta contra rezistenţei la peniciline:
- analogi de peniciline rezistenţi la β-lactamaze.
- gasire inhibitori ireversibili ai β-lactamazelor.