5/28/2018 Sange LP 1

1/9

Determinarea densitii sngelui i plasmei - Metoda Phillips - Van Slyke

Principiul determinrii. Determinarea densitii sngelui sau plasmei se face comparativ,fa de o serie de soluii de sulfat de cupru ale cror densiti ne sunt cunoscute. Picturade plasm sau snge se acoper cu o pelicul de proteinat de cupru care-i permiteplutirea, pentru cteva secunde, n interiorul lichidului, n momentul cnd densitile celordou lichide sunt egale.Materiale necesare.

- snge i plasm;- flacoane cu soluii de sulfat de cupru cu densiti diferite;- pipete.

Tehnica de lucru.Se iau dopurile de la flacoanele cu sulfat de cupru i se las ctva timp la temperaturacamerei. Din eprueta cu snge integral, se iau !ml cu o pipet i se las s cad nfiecare flacon cte o pictur de snge de la o nlime de ma"imum #cm de la suprafaalichidului.Pot e"ista trei situaii$

- pictura de snge se ridic la suprafaa lichidului, ceea ce nseamn c densitateapicturii e mai mic dect densitatea soluiei;- pictura de snge cooar spre partea inferioar a flaconului, fiind, deci, cu densitate

mai mare dect a soluiei din flacon;- pictura de snge plutete n interiorul soluiei timp de cteva secunde pn la

#%!min., deci densitatea sngelui este aceeai cu densitatea soluiei din flaconulrespectiv.

&a fel se procedea' i pentru determinarea densitii plasmei. Seria de soluii de sulfat decupru cu densiti cunoscute poate fi folosit la mai multe determinri (dup un timp, attpicturile de plasm ct i cele de snge integral se vor strnge n partea inferioar aflacoanelor). *n general, soluiile se vor schima cnd depo'itul de snge sau plasmdepete #%+ din volumul total al soluiei.Rezultate. Prin aceast metod, oinem dou valori$ densitatea sngelui integral (DS) idensitatea plasmei (DP)... Phillips i an Sl/0e au construit o nomogram cu a1utorul creia, cunoscnddensitatea unei proe de snge i a plasmei, se pot oine valorile hematocritului (2t) n3, a hemogloinei (2) n g3 i a proteinelor totale din plasm n g3 (ve'i nomograma,(figura#.4.). 5etoda permite determinarea proteinemiei i a 2 cu erori foarte mici.Valori de referin (kg/m3$

- Plasm$ #6!7 cu limite ntre #6!+-#686.

- Snge integral$ #644-#697 -rai; #64#-#69# -femei;Variaiile densitii plasmei

- :reteri fi'iologice$ la altitudine, prin splenocontracie, crete numrul de eritrocite; n efort, prin acelai mecanism; n deshidratri, prin transpiraie.

- :reteri patologice$ deshidratri - prin diaree, vom, arsuri - se pierde ap; poligloulii primare sau secundare; oc - n care se produce o concentrare a eritrocitelor, ca urmare a creterii

permeailitii capilare i trecerii lichidului circulant n interstiii.- Scderi fi'iologice$

la gravide, prin creterea fraciunii plasmatice, ca urmare a atragerii apei n vas,su aciunea progesteronului i a estrogenilor;

5/28/2018 Sange LP 1

2/9

ingerare masiv de lichide.- Scderi patologice$

anemii; posthemoragie, la cteva ore de la producerea acesteia, cnd lichidul interstiial

este atras n vase, pentru compensarea pierderii de volum i meninereapresiunii arteriale.

!mportana determinrii.

- determinarea densitii sngelui integral i a plasmei permit aprecierea rapid, prinnomograme, a hematocritului, a cantitii de 2 i a concentraiei proteinelorplasmatice;

- metoda an Sl/0e permite diagnosticul de oc postoperator, oc datorat arsurilorntinse i oc posthemoragic. De asemenea, a1ut la stadiali'area ocului iorientarea tratamentului n oc, anemii, deshidratri etc .

"tudiu indi#idual

#. :onsultnd un dicionar medical, definii urmtorii termeni$ hormon, anticoagulant,ser, firinogen, coagulare, hematocrit, sistem tampon.!. :onsultnd un tratat medical, determinati situaiile patologice n care presiunile

osmotic i coloid-osmotic intervin n patologia uman.8. :onsultnd un tratat medical, determinai situaiile patologice n care e"ist

modificri ale p2-ului sanguin.

5/28/2018 Sange LP 1

3/9

igura #.4.

5/28/2018 Sange LP 1

4/9

$!%& ' )*+R* ,- )0RT0R

#. >otai valorile oinute pentru densitatea plasmei i a sngelui integral.

................................................................................................................................................!. =dentificai parametrii de care depinde densitatea sngelui integral.

................................................................................................................................................8. =dentificai parametrii de care depinde densitatea plasmei.

................................................................................................................................................+. =ndicai cum poate fi densitatea sngelui la o gravid, n ultimul trimestru de sarcin.:um numii situaia respectiv i de ce apare la gravide?

................................................................................................................................................

4. :are este importana clinic a determinrii densitii sngelui i a plasmei?

................................................................................................................................................9. >otai valorile corecte pentru presiunea osmotic.

................................................................................................................................................7. >otai valorile corecte pentru presiunea oncotic.

................................................................................................................................................@. >otai valorile corecte pentru p2-ul sanguin.

................................................................................................................................................A. :alculai volumul plasmatic apro"imativ e"istent n corpul dumneavoastr.

................................................................................................................................................#6. nali'ai densitile plasmei la dou persoane care au valori diferite ale proteinemiei,de e"emplu 4 g%dl i 7,4 g%dl.

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB...............

5/28/2018 Sange LP 1

5/9

!.". D#$#%M&'(%#( )#M($*+%&$&

'efiniie. Ctimologic, hematocrit nseamn volumul hematiilor. 2ematocritul estefraciunea din volumul total al sngelui, ocupat de hematii, e"primat procentual. 5aipoate fi definit ca raportul dintre plasm i elementele figurate ale sngelui, e"primatprocentual, innd cont c, n mod normal, volumul leucocitelor i tromocitelor nudepete # 3.

5/28/2018 Sange LP 1

6/9

pstrare pn n momentul centrifugrii. Dup terminarea recoltrilor, tuurile sunt ae'ateradiar pe suportul special amena1at, fi"at pe rotorul centrifugii. Se centrifughea' timp de86 de secunde la 8666 rot%min, dup care tuurile se scot i se citesc cu a1utorul riglei censoete aparatul (figura !.@.).Juul de hematocrit se pune n ghida1ul al riglei de citire i se potrivete cu a1utorulutonului F, astfel ca limita inferioar a coloanei de hematii s coincid cu linia de 'ero ariglei, iar limita superioar a plasmei s coincid cu linia de #66.

Se citete limita superioar a coloanei de hematii, gradaia corespun'toare repre'entndvaloarea hematocritului e"primat n procente.

igura. !.@. igl pentru citirea hematocritului

+orectarea rezultatelor. :orectarea re'ultatelor este necesar deoarece$- dup centrifugare, printre hematii rmne un volum de plasm repre'entnd 43 din

volumul eritrocitar;- n ca'ul unui numr crescut de leucocite i%sau tromocite este necesar scderea

grosimii acestui strat din valoarea hematocritului;- hematiile din sngele venos au volum mai mare dect hematiile din sngele arterial;- utili'area unui alt anticoagulant (n afara heparinei i amestecului Kintroe) poate

produce ratatinarea hematiilor.Pentru calculul hematocritului sngelui total se va corecta hematocritul venos gsit,conform formulei$

Ht somatic = Ht venos x 0,96 x 0,91 x 1,09 n care$- 6,A9 E factor de corecie pentru plasma aflat printre hematii dup centrifugare;- 6,A# E factor de corecie pentru volumul hematiei din sngele arterial fa de hematia

din sngele venos;- #,6A E factor de corecie pentru anticoagulantele care ratatinea' hematiile (arevaloarea # pentru heparin i amestecul Kintroe).

- *n ca'ul tehnicii pre'entate de noi, factorul gloal de corecie este 6,@7.

100

90

80

70

60

50

40

0

20

10

0

100

80

60

40

20

0

A

B

5/28/2018 Sange LP 1

7/9

Determinarea hematocritului se poate reali0a i prin metode moderne, cu unanali0or automat. Se determin numrul de eritrocite%litru de snge prin msurareaintensitii luminii reflectate de masa de eritrocite aflate ntr-un volum de snge predefinitsi se calculea'a folosind formula hematocritului.rori de determinare a hematocritului. Determinarea hematocritului poate fi afectat de$

- e"ces de anticoagulant;- tipul de anticoagulant;- sngele arterial are un 2t cu !3 mai mic dect 2t din sngele venos;- anali'oarele automate pot da valori fals crescute;- situaii patologice care cresc (n mod fals) valoarea hematocritului$ reticulocito',

leucocito' mare, pre'ena de crioglouline, macrotromocite;- situaii patologice care scad (n mod fals) valoarea hematocritului$ hemoli' in vitro,

autoaglutinare, microcito'.Valorile normale 2i #ariaiile fiziologice ale hematocritului. ceste valori suntpre'entate n taelul !.8.

Jaelul !.8. alorile normale i variaiile fi'iologice ale hematocritului

Se" rst JeritoriulcirculatorCfortfi'ic

Cmoii,stres ltitudine Sarcin

Frai$+9 43

emei$+6 43

>ounscut$49 3

# lun$++,9 3

9 luni$89,! 3

# an$8! 3

+ ani$87 3

#! ani$+6 3

Sngearterial$+4 3

Snge venos$+7 3

Sngesplenic$

76 E @6 3

2tcrescut

2t

crescutprin

contraciasplinei

2t crescut

prinscderea

pL!n aerulinspirat

2t sc'ut prinhemodiluie

Variaii patologice ale hematocritului- Scderea hematocritului apare n anemii i n situaiile n care crete volumul

plasmatic (hemodiluie).- :reterea hematocritului apare n poligloulii i n situaiile n care scade volumul

plasmatic.

alorile e"treme ale hematocritului se asocia' cu stri patologice cu risc

vital$- 2t M !63 $ se asocia' cu hipo"ie sever care determin insuficiencardiac i deces;

5/28/2018 Sange LP 1

8/9

- 2t N 963$ se asocia' cu creterea accentuat a vsco'itii sngelui,tromo'e locale i coagularea spontan a sngelui.

!mportana clinic a determinrii hematocritului. Determinarea hematocritului serecomand n$

- Stri patologice n care se modific numrul de hematii (anemii, poligloulii).- Stri patologice n care se modific volemia.- Stri post hemoragie.- Stri de oc.

"tudiu indi#idual

#. :onsultnd un dicionar medical, cursul Oi'iologia sngelui i materialelerecomandate n iliografie, v rugm s definii urmtorii termeni$ volemie,

hipovolemie, hipervolemie, normocitemie, oligocitemie, policitemie, factor decorecie, coeficient, indice, raport, e"primare procentual.!. :e variaii fi'iologice ale hematocritului cunoatei? :um se e"plic?8. :um influenea' numrul de hematii valoarea hematocritului?

5/28/2018 Sange LP 1

9/9

$!%& ' )*+R* ,- )0RT0R

#. Pre'entai principiul metodei de determinare a hematocritului.

................................................................................................................................................

!. Pre'entai succesiunea etapelor corespun'toare modului de lucru pentru determinareahematocritului prin micrometod.

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB.BB..............8. C"plicai necesitatea corectrii hematocritului citit. :are sunt indicii de corecie utili'ai?

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................+. :are sunt valorile normale ale hematocritului?

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................4. :e valoare are hematocritul plasmei?

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................9. :are sunt parametrii iologici de care depinde hematocritul?

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................7. :e relaii e"ist ntre hematocrit i vsco'itatea sngelui?

BBBBBBBBBBBBBBBBBBB.BBBBBBBBBBB...................................@. C"plicai variaiile fi'iologice ale hematocritului n funcie de vrst i se".

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................A. C"plicai variaiile hematocritului n funcie de altitudine.

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................#6. C"plicai modificrile hematocritului produse de efortul fi'ic.

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................##. *n ce situaii concrete recomandai determinarea hematocritului la un pacient?

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................#!. :um e"plicai importana procedurii Qde luare de snge pacientului, aplicat foartefrecvent n trecutul medicinei?

BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB....................................