METODA DREPTEI DE ETALONARE ETAPE1.Se prepar proba analitic din materialul de analizat care conine analitul n concentraie necunoscut2.Se prepar etaloanele care conin analitul n concentraie cunoscut. Etaloanele se prepar dintr-o soluie stoc.3.Se prepar proba martor care nu conine analitul, dar conine reactivii de derivatizare utilizai la prepararea etaloanelor i probei necunoscute.4.Se traseaz spectrul de absorbie A = f() prin msurarea absorbanei unui etalon fa de martor la diferite lungimi de und.Se determin lungimea optim de analiz corespunztoare maximului de absorbie.5.Se msoar absorbana etaloanelor la lungimea optim de analiz,fa de martor.6.Se traseaz dreapta de etalonare A = f(c)7.Se msoar absorbana probei analitice i se determin concentraia speciei analitice prin interpolare

ALEGEREA LUNGIMII OPTIME DE ANALIZ N ABSORBIA MOLECULAR Avantaje1.Metoda are sensibilitatea maxim(panta dreptei de etalonare este maxim)2.Dreapta de etalonare are cea mai bun liniaritate (nu prezint abateri semnificative de la legea lui Lambert Beer.3.Se pot determina precis concentraii mai mici de analit

DREAPTA DE ETALONARE IN ABSORBIA MOLECULAR DefinitieDreapta de etalonare n absorbia molecular este reprezentarea grafic a absorbanei fa de concentraia etaloanelor. Dreapta de etalonare se traseaz la lungimea optim de analiz. Panta dreptei de etalonare este Concentraieprob Absorban prob cxConcentratieAbsorbanAxtg = Cu ct absorbtivitatea molar () este mai mare cu att dreapta are o pant mai mare,Metoda este mai sensibil i pot fi determinate concentraii mai mici.

INFLUENA DESCHIDERII FANTEI I A LUNGIMII DE UND SELECTATE ASUPRA ABATERILOR 1.Situaia A. Dac se lucreaz pe maximul peakului (la m) i fanta este infinitezimal se obine liniaritate prefect a curbei de etalonare2.Situaia B. Se lucreaz pe maximul absorbiei i efeste 1/10 din semilrgimea benzii de absorbie, abaterile de la liniaritate sunt neglijabile3.Situaia C. Se lucreaz pe maximul absorbiei dar fanta este larg apar abateri negative n soluii concentrate.4.Situaia D.Se lucreaz la alt lungime dect maximul de absorbie. Panta dreptei scade semnificativ i abaterile de la liniaritate sunt cele mai mari.D C D CBBAAConcentratieAbsorbanLungime de unda/nm

DETERMINAREA SUBSTANELOR IN AMESTEC PRIN ABSORBIA MOLECULAR PRINCIPIU:Determinarea substanelor n amestec se bazeaz pe aditivitatea legii lui Lambert Beer la o anumit lungime de und pentru un amestec de substane.La o anumit lungime de und, absorbana total este suma absorbanelor compuilor din amestec. AT = Ai = i ci lUnde: Ai absorbana componentului (i) la lungimea de und () absorbtivitatea molar a componentului (i) la lungimea de und() ci concentratia componentului (i) din amestec

DETERMINAREA SUBSTANELOR IN AMESTEC PRIN ABSORBIA MOLECULARPentru un mestec binar, legea lui Lambert Beer este:

AT = A1 +A2 = 1 c1 l + 2 c2 l

Din aceast ecuaie nu putem calcula concentraiile c1 i c2 din amestec. Pentru a determina concentraiile din amestecul binar trebuie s se cunoasc absorbana amestecului la dou lungimi de und 1 respectiv 2AT1 = 1 c1 l + 2 c2 l Pentru 1

AT2 = 1 c1 l + 2 c2 l Pentru 2

Dac se cunosc absorbanele amestecului la cele dou lungimi de und i coeficienii sistemului se pot calcula concentraiile celordou componente

Etapele analizei amestecurilor de substane 1.Determinarea lungimilor optime de analiz 1 i 22.Determinarea coeficienilor sistemului de ecauii i3.Determinarea absorbanei amestecului la cele dou lungimi de und i rezolvarea sistemuluiCondiiile care se impun la determinarea amestecurilorde substane:

1.Substanele s nu reacioneze ntre ele2.Substanele s nu prezinte interferene spectrale3.Substanele s aib absorbtiviti molare diferite,pentru ca determinantul sistemului () s fie diferit de zero.

DETERMINAREA LUNGIMILOR OPTIME DEANALIZ A AMESTECURILOR Pentru aceasta se prepar un etalon din fiecare compus i se traseaz spectrul de absorbie A = f().

Din spectrul de absorbie se determin lungimile optime de analiz 1i 2, corespunztoare maximelor de absorbie pentru cei doi compui.Se aleg lungimile optime corespunztoare maximelor, deoarece la acestelungimi de und dreptele de etalonare au panta maxim, respectiv abaterilede la liniaritate sunt neglijabile. Implicit metoda are sensibilitate i precizie foarte buneCompus 1Compus 2

DETERMINAREA COEFICIENILOR SISTEMULUISe prepar etaloane din fiecare compus Se msoar absorbanele etaloanelor la cele dou lungimi de undSe traseaz dreptele de etalonare A = f(c) pentru fiecare compus la cele dou lungimi de und i se calculeaz panta dreptelor, care sunt egale cu coeficientii sistemului