NOTIUNI DE BAZA PENTRU INTERPRETAREA FROTIURILOR CERVICO-VAGINALE

Medic rezident Barbus Georgiana

“Coboram”:

modificari nucleare

suspicionarea unor microorganisme

grupuri ingramadite hipercrome

X40-> totul pare malign

CELULARITATE:

Celule scuamoase

Celule endocervicale

Celule endometriale

• maturare completa <- ESTROGEN peak la ovulatie predomina in faza foliculara

• caracteristici citologice dimensiune ~ celula scuamoasa intermediara forma

o poligonalao bine delimitata

1. CELULA SCUAMOASA SUPERFICIALA

• caracteristici citologice citoplasma

o abundentao eozinofila/ bazofilao transparenta, delicata

posibil granulara granule mici, maro inchis (perinucleare/citoplasma periferica*)

=lipide <- estrogen granule mai mari-> “Polka dot” cell

= celule degenerate/ prost pastrate posibil vacuolata

adipocit – radioterapie, cauter posibil plicaturata

1/3 sfarsitul ciclului menstrual, sarcina

1. CELULA SCUAMOASA SUPERFICIALA

*

1. CELULA SCUAMOASA SUPERFICIALA

• caracteristici citologice nucleu

o picnotic central (mic, rotund, hipercrom)o < hematie (<5)o ! halou subtire (<-reactiv)o ! cromatina fragmentata, rupta, inclusiv perinu-

clear-> aspect granular <- cariorexa (apoptoza)*

o ! nuclei goi (mai rar ca celulele intermediare)*

*f. luteala

1. CELULA SCUAMOASA SUPERFICIALA

• dispunere izolate clustere laxeo perleo vartejurio “ceapa”

2. CELULA SCUAMOASA INTERMEDIARA

celula s. superficiala……...celula s. parabazala

Caracteristici citologice:• dimensiune

celula s. superficiala (usor mai mica) celula parabazala-> celula superficiala (35-50)

• forma poligonala/ ovala/ fusiforma bine delimitata

• citoplasma abundenta mai frecvent bazofila transparenta, delicata-> opaca

2. CELULA SCUAMOASA INTERMEDIARA

• citoplasma depozite galbui = glicogen celule naviculare~ corabii o usor elongate, citoplasma clara, cu limite ingrosate,

nucleu excentric-> impins in periferie 1/3 sfarsitul ciclului menstrual sarcina premenopauza lauzie menopauza (frotiuri atrofice)

posibil plicaturate 1/3 sfarsitul ciclului menstrual sarcina

2. CELULA SCUAMOASA INTERMEDIARA

• nucleu REFERINTA (marime, cromazie) marimeo 7-8

= hematie~neutrofilx2 nucleu celula s. superficialausor < nucleul celulei parabazale= celula endometriala

rotund/ovalar, central, vezicular cromatina fina +/- cromocentre incizuri, crevase -> longitudinale +/- bifurcatii in capete -> “omida”

2. CELULA SCUAMOASA INTERMEDIARA

! binucleata/ multinucleata! nuclei goi <- citoliza (acid lactic) <- f.

luteala

• dispunere~ celulele s. superficiale

1. celule scuamoase superficiale2. celule scuamoase intermediare3. celule endocervicale

3. CELULE SCUAMOASE PARABAZALE

• !!!!!!!nu pe frotiuri normale!!!!! (confuzie cu celulele metaplazice)

atrofie menopauza, postpartum

inflamatie ->distrugerea straturilor superficiale

*fetite

• caracteristici citologice dimensiune 12-30 formao rotunda/ovalarao ! angulate (poligonale neregulate / elongate)o bine delimitate

Superficiala

Intermed.

citoplasmao opaca bazofilao !eozinofila / portocalie <-artefactualo vacuole mici (glicogen)

nucleuo usor >hematie (8-9)o central, rotund/ovalar, vezicularo cromatina fin granulata +/- cromocentreo nucleoli mici -> proeminenti in inflamatie

dispunereo izolateo clustere plate/mozaic (<-cele angulate artefactual)

3. CELULE SCUAMOASE PARABAZALE

• !!!!!!!nu in mod normal!!!!!• indica atrofie severa/ eventual prelevare din

marginea ulceratiilor• caracteristici citologice

dimensiune 10-12 (mici, nediferentiate) forma

o rotunda / ovalara ~ celula scuamoasa parabazalao ~histiocite mici

citoplasma redusa cantitativo bazofila, delicatao bazofila, delicatao ! eozinofila <-artefactual

nucleu = nucleul celulei s. parabazale

o ! +/- nucleol mic, rotund dispunere rare, izolate

o sincitii

4. CELULA SCUAMOASA BAZALA

• matura vs. imatura -> forma, dimensiuni diferite• caracteristici citologice

dimensiuneo celule s. parabazale (imatura)o celule s. intermediare (matura)

forma neregulata <-prelungiri (“spider cells”)o *matura ~ celula s. intermediara, dar mai rotundao foarte bine delimitate (membrana celulara ingrosata)

citoplasma cantitate variabilao densa, bazofilao *matura: extern mai bazofil, intern mai clar o ! vacuolata<- degenerescenta, vacuole secretorii, de

fagocitoza (!foarte rar glicogen)

* CELULA METAPLAZICA SCUAMOASA

nucleuo > hematie, ~ nucleul celulei s. intermediare (8)o rotund/ ovalar, centralo +/- membrana nucleara proeminentao +/- clari (in general cromatina fina, rar centromere)o +/ scizuri longitudinaleo +/- nucleoli (inflamatie)

!N:C usor/ moderat crescut dispunere o frecvent izolate/ agregate laxeo pavaj

* CELULA METAPLAZICA SCUAMOASA

! KOILOCITUL celula superficiala/ intermediaraÞ singur/ agregate

Modificari esentiale:NUCLEU - dimensiuni mari

- hipercrom

frecv. - cromatina vizibila, intunecata, granulara

- nucleoli slab definiti/ absenti

rar- picnotic, “tras”

- fragmentat/ cromatina periferica

* frecvent celule binucleate rar multinucleate +/- celule gigante

! KOILOCITULHALOU PERINUCLEAR (+ nucleu atipic)

- margine densa, bine definita-> limita posibil eozinofila - latime >= nucleu celulei intermediare

scuamoase normale

! KOILOCITUL

!!! Diagnostic diferential (halou+modificari nucleare)1. inflamatie halou subtire (frecvent: Trichomonas) atipii nucleare reactive (ex. nucleol)

2. acumulare de glicogen (!ACO http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/cncr.11056/pdf) halou galbui (frecvent: celule naviculare, celule cu atrofie androgenica)

nucleu impins excentric (posibil reactiv in context inflamator)

3. metaplazie scuamoasa imatura (/matura) halou cu demarcatie vaga dimensiune celulara ~ celula parabazala nuclei reactivi/ normali

Modificari reactive

koilocite

Modificari reactive + Trichomonas

koilocite

Koilocite

Incarcareglicogenica

sageti= pseudokoilocite (celule metaplazice)

koilocite

Caracteristici citologice:

!depinde de cum sunt surprinse dimensiune 20/ 8-12 (cele ciliate sunt mai mari) forma

transversal (privit de sus): rotunde longitudinal (privit din lateral): cilindrice * cubice, cilindrice scunde, rotunjite, ciliate +/- picaturi de mucus pe suprafata

5. CELULELE ENDOCERVICALE

citoplasma abundenta (lateral)/ redusa->moderata (sus) omogena, palid bazofila/ transparenta/ eozinofila (<-

artefactual) +/- aspect ingramadit posibil vacuolata (+/- neutrofile) incluziuni citoplasmatice intranucleare (zone clare

intranucleare-> ! aspect neregulat)

• nucleu dimensiuni variabile (in medie 8-> 15-16) => = nucleu celula s. intermediara->x2 rotund/ ovalar, vezicular (cromatina filamentoasa+/-

centromere) central/ excentric-> periferic (view) ! +/- multinucleate nucleoli foarte mici

5. CELULELE ENDOCERVICALE

• nucleu !nuclei goi eliptici/ rotunzi ! zone clare (incluziuni citoplasmatice) ! aspect mamelonat-> protruzie intracitoplasmatica a

nucleului spre polul luminal al celulei- view lateral (aspect hipercrom +/- bifurcat)=> nucleul ramane transparent

<-ovulatie/ postovulator

5. CELULELE ENDOCERVICALE

• dispunere izolate clustere fagure de miere picket fence/ palisadate !+/- rozete

5. CELULELE ENDOCERVICALE

• vizibile in ziua 1->12 a ciclului menstrual• >12 anormal• !>40 ani• caracteristici citologice

dimensiuneo < celulele endocervicale, ~ nucleul celulelor

intermediare (usor mai mari)o *variabila (diametre 10-120)

formao rotunda/ovalara/ elongateo delimitare imprecisa

citoplasmao redusa cantitativ bazofila/ mai abundenta clara/ amfofilao frecvent vacuolata- 1/ mai multe vacuole, nu foarte

distincte, rar cu neutrofile

6. CELULELE ENDOMETRIALE

nucleu o ~ nucleul celulelor s. intermediare ~-> parabazale o ! frecvent excentric, mico rotund/ reniform (bean-shaped)o * vacuolele turtesc nucleul in periferieo ! rar multinucleateo ! rar nucleolio !!! mijlocul ciclului menstrual sunt rotunzi, vagi/ opaci/ fin

granulari• *celule stromale endometriale !vizibile in ziua 5-6 a

ciclului menstrual forma

o superficiale= rotunde, ~ histiocite, agregateo profunde= fusiforme, hipercrome

in general- neregulate (!!!), z 10-12 citoplasma delicata bazofila/eozinofila +/- material fagocitat nucleu rotund/ reniform

6. CELULELE ENDOMETRIALE

dispunereo plaje (inconjurate de hematii si detritusuri celulare)o clustere 3D -> mingio menstruatie: *mingi cu dublu contur- hipocromazie

marginala- hipercromazie interna - celule stromale interior, endometriale exterior

o fagure de miere/ palisade <- exfoliere spontanao !!! rar izolate

!!! Diagnostic diferential cu urmatoarele tipuri de celule:

- endocervicale - celule scuamoase parabazale

- celule de rezerva - celule inflamatorii

- celule stromale superficiale

=> Importanta informatiilor clinice!: femeie>40 ani, DUM, histerectomizata, ulceratii vizibile colposcopic etc. + identificarea fazei ciclului pe PAP

6. CELULELE ENDOMETRIALE

Celule endometriale Celule endocervicale

Menstra – hematii, celule endometriale (degenerate), neutrofile, celule intermediare (degenerate) 1. Faza foliculara (z. 6-> 13/14)

o <- estrogen => predomina celulele superficiale izolate, aspect eozinofil

o fond curat (cantitate minima de neutrofile)o celule endocervicale de aspect bazofil, nuclei centrali,

rotunzio ferigi

Ovulatie (z. 13-14)o >>>>> celule s. superficialeo celulele endocervicale de aspect vacuolat, citoplasma

abundenta, aspect mamelonat intracitoplasmatic al nucleului

FAZELE CICLULUI MENSTRUAL

2. faza luteala (z. 14-28) Predomina celulele intermediare, plicaturate, in plaje,

clustere (* celule s. superficiale plicaturate) >>> nuclei goi (<-citoliza) fond murdar (>>>neutrofile) spre menstra-> celulele intermediare agrega,

cantitatea de lactobacili creste=> citoliza celulelor intermediare -> “mancate de molii”

FAZELE CICLULUI MENSTRUAL

predomina celulele parabazale 2 patternuri:1. dimensiuni celulare uniform crescute/ dimensiuni nucleare uniform crescute - nuclei x3-5 nucleu celula scuamoasa intermediara

- gri, opaci2. citoplasma cu eozinofilie marcata

- nucleu picnotic, cariorexa= > filamente de ADN=> fond murdar- +/- variatii de dimensiune si forma

Pattern 1/ Pattern 2/ Pattern 1+2

!!!FROTIUL ATROFIC

plaje de celule scuamoase fusiforme nuclei mari, hipercromi

celule endocervicale rare/ absente mici (forma pastrata) citoplasma redusa, opaca, fara secretii (+/- vacuole) nuclei aparent hipercromi

macrofage uni/multinucleate cu material fagocitat

globule bazofile rotunde/ ovalare- dimensiuni= celulele parabazale unele cu centrul mai dens

modificari inflamatorii -> leucocite, detritusuri celulare

!!!FROTIUL ATROFIC

!!! N:C normal !!!Modificari reactive:

celule scuamoase- nuclei x2 nucleii celulelor intermediare

uoara hipercromazie/ posibil eucromi cromatina posibil granulara (uniform) ! rotunzi, contur regulat bi/multinucleate nucleoli proeminenti

MODIFICARI REACTIVE SI REPARATORII- REGENERARE, DEGENERARE

halouri perinucleare citoplasma

policromazie vacuole cu neutrofile

endocervicale: nucleu x2-4 fata de normal rotunzi/ ovalari nucleoli proeminenti citoplasma abundenta, vacuolata (cu neutrofile)

MODIFICARI REACTIVE SI REPARATORII- REGENERARE, DEGENERARE

Mov-halou reactiv

Negru-Trichom.

Reparatie:

plaje 2D coezive, fara suprapuneri (rar celule izolate)-> “streaming effect”-> scoala pestilor (aliniate in aceeasi directie)

celule crescute in dimensiuni , limite precise nucleu crescut in dimensiuni, rotunzi, cromatina fina,

1/mai multi nucleoli proeminenti bi/multinucleate mitoze citoplasma abundenta, bazofila/ policroma, vacuolata neutrofile

MODIFICARI REACTIVE SI REPARATORII- REGENERARE, DEGENERARE

scoala pestilor

mitoza- context reparator

nucleoli, scizuri

FLORA:

Bethesda: 1. Trichomonas vaginalis

bulgari de neutrofile, fond murdar (granular), pseudoeozinofilie citoplasmatica si nucleara, halouri perinucleare (modificari reactive relativ specifice)-> ?umbre slab definite gri-palid bazofile?

-> forma de para, nucleu excentric, ingustat, slab definit, citoplasma cu granule eozinofile (diagnostic pozitiv numai daca identificam nucleul; flagelul nu se identifica de regula in PAP)

!!!80% asociaza leptothrix (pseudofilamente lungi) 2. Organisme parazitare consistente morfologic cu

Candida (hife teoretic eozinofile, frecvent bazofile: “bat de bambus” >= 3x grosimea lactobacililor, cu mici intreruperi, +/- ramificari, posibil blastospori rotunzi-ovalari) >>>neutrofile pseudokeratoza/ celule scuamoase eozinofile modificari reactive: nuclei usor crescuti in dimensiune, mic

halou, nucleoli

Leptothrix

3. modificari in flora vaginala sugestive pentru vaginoza bacteriana (a nu se confunda cu aspecte din faza luteala ! Nr. >lactobacili ce par sa acopere celulele)

“clue cells”- suprafetele celulelor scuamoase acoperite de cocobacili

0 lactobacili, neutrofile rare (intre celulele scuamoase) raspuns la antibioterapia empirica

4. modificari consistente cu Herpes simplex celule multinucleate, membrane nucleare ingrosate marcat,

nuclei cu aspect de sticla mata, agregate nucleare, incluziuni eozinofile intranucleare

!!!!celule endocervicale multinucleate 5. microorganisme consistente morfologic cu

Actinomyces >>neutrofile, macrofage, multinucleate Gupta bodies/ iepurasi de praf- agregate pseudofilamentoase

cu ramificari bruste (ramificatii ce ies radiar din iepurasul de praf)

gri-albastre

FLORA

BIBLIOGRAFIE

“Cytology Diagnostic Principles and Clinical Corellates” Edmund S. Cibas, Barbara S. Ducatman

“Comprehensive Cytopathology” Marluce Bibbo

“Fundamentals in PAP test Cytology” Rana S. Hoda, Syed A. Hoda

“Atlas of Gynecologic Cytology” Grace T. Mckee

“The Art and Science of Cytopathology” Richard M. DeMay

“Koss’ Diagnostic Cytology and its Histological Bases” Leopold G. Koss

! UTILE

http://nih.techriver.net/index.php <- cursuri + teste

http://www.cytologystuff.com/ <- cazuri + cursuri

http://screening.iarc.fr/atlascyto.php <- cursuri + teste