examen bacterii 2011

Upload: cristina-tudor

Post on 15-Jul-2015

393 views

Category:

Documents


2 download

TRANSCRIPT

1

COCI GRAMM POZITIVI FAMILIA MICROCOCCACEAE FAMILIA MICROCOCCACEAE Genul Micrococcus Genul Stomatococcus Genul Dermacoccus Genul Kocuria Genul Kytococcus Genul Nesterenkonia

Genul Planococcus

Genul Staphylococcus

FAMILIA STAPHILOCCACEAE GENUL STAPHILOCOCCUS

1.Taxonomie n prezent Genul Staphylococcus a fost a fost ndeprtat din Familia Micrococcaceae la fel ca i Genul Planococcus, considerndu-se mai apropiai de gruparea Streptococcus Lactobacillus Bacillus, folosindu-se ca argumente: - peretele celular cu o compoziie diferit, - deosebirle imunologice ale catalazelor, - coninut diferite al bazelor ADN, - spectrul de sensibilitate la antibiotice diferit. 2. Definiie. Coci Gramm pozitivi, cu dimensiuni cuprinse ntre 0,5 - 1, aerobi, facultativ anaerobi, imobili, nesporulai, catalazo - pozitivi. Puin pretenioi, se cultiv pe medii obinuite i tolereaz concentraii ntre 5%-15% NaCl, unele specii fiind halofile. Genul Staphylococcus cuprinde un numr apreciabil de specii n modificare cresctoare continu, fiind cunoscute i clasificate pn n prezent 33 de specii dintre care 16 specii au fost identificate i la om: o specie Staphylococcus aueus-coagulazopozitiv i 15 specii de Staphylococcus coagulazo- negativi. Calificativul de coagulazopozitiv sau coagulzonegativ se refer la rezultatul testului pentru coagulaza liber.

1

2

GRUP

SPECIE

Staphylococ cus aureus

Staphylococcus aureus

INTER ES MEDIC AL UMAN major

LOCALIZARE TIPURI DE INFECII

Colonizeaz: nri, colon, tegument, mediu de spital. Determin infecii ale pielii (foliculite, furuncule, carbuncule, celulit, impetigo, infecii de plag), endocardite, pneumonii, artrite, osteomielite prin diseminare prin continuitate, diseminare limfatic sau sanguin . Determin toxiinfecii alimentare grave Colonizeaz tegumentul, mediul de spital . Determin bactriemii la noi nscui i pacienii oncologici. In seciiile de chirurgie cardio vascular determin infecii de pace-maker, de gref vascular, mediastinite, miocardite. In seciile de ortopedie determin infecii asociate cu dispozitive ortopedice, protezele articulare, rar osteomielit. Infeciile tractului urinar: cistita, uretrit, pielonefrita. Implicat n peritonita asociat cu dializa peritoneal ambulatorie n conductul autitiv extern Scalp Pielea feei Determin endocardite, peritonite,infecii ale tractului urinar, septicemii, infecii ale plgilor postintervenie pe os i articulaii Germene oprtunist, poate coloniza instrumentar pentru investigyaii invazive(catere, drenuri) poate determina Endocardite, abcese cerebrale, septicemii, infecii profunde, osteite, artrite, infecvii cutanate, infecii profunde, infecii ale protezelor vasculare sau ale protezelor valvulare.

Staphylococ cus epidermidis

Staphylococcus - epidermidis sensu stricto

major

-

auricularis capitis caprae, haemolitycus

rezident modest rezident major

-

hominis lugdunensis

modest major

2

3

-

pasteuri, rezident saccharolyticus modest warneri modest

Poate fi implicat in osteomielit i infecii ale tractului urinar Infecii ale tractului urinare la femei de vrst fertil, uretrite negonococice, prostatite, infecii ale plgilor, septicemii

Staphylococ Staphylococcus cus - saprophyticus saprophyti cus - xylosus, - cohnii Staphylococ cus simulans Staphylococ cus intermedius Staphyloco ccus Simulans Staphylococcus schleiferi

major, modest, modest modest major

Germene oportunist implicat n colonizarea instrumentarului medical folosit n practici microinvazive: catetere, drenuri, regsindu-se i pe alte dispozitive introduse n organism (valve, proteze), putnd determina infecii ale protezelor vasculare i valvulare.

3. Istoric 4. Habitat

Descoperit n l878 de Robert Koch n coleciile purulente ale unor bolnavi, cultivat n mediu lichid pentru prima dat de ctre Louis Pasteur. Germeni larg rspndii n natur. In stare saprofit se gsesc n aer, sol, ap, pe piele i n cavitile naturale ale omului i animalelor. Stafilococii condiionat patogeni (SCN coagulazonegativi) formeaz microcolonii la nivelul foliculilor piloi i la nivelul glandelor sebacee, pe tegumete i n nri. SCN au capacitatea de a se dezvolta pe suprafeele electronegative ale corpilor strini sub form de colonii alctuite din aceste bacterii i glicocalix slimesubstraturi organice, constituind un biofilm - principal factor de patogenitate. Aa sunt asociai din ce n ce mai frecvent cu infeciile aprute n urma practicrii manevrelor invazive pentru diagnostic sau tratament (catetere, drenuri) i a inseriilor protetice (valve cardiace, proteze vasculare, unturi artrio-venoase, proteze articulare, etc). Stafilococii patogeni (SCP -coagulazopozitivi) dei au tropism fa de derm producnd infecii nsoite cu puroi la nivelul pielii i glandelor anexe se pot implica n bacteriemii i septicemii n alte organe i esuturi.

5.Caractere morfotinctoriale

Coci sferici, nesporulai, n general necapsulai, imobili. Cel mai frecvent stafilococii sunt dispui n grmezi

3

4

neregulate asemntoare unui ciorchine de strugure (staphylo -strugure), dar se pot aranja i izolai, n diplo, tetrade sau n lanuri scurte de 3-4 celule. Gramm pozitivi de regul pot deveni Gramm variabili n condiii de stress metabolic ( temperatur, presiune osmotic, variaii de pH, factori antimicrobieni). Anomalia tinctorial se asociaz cu anomalii morfologice exprimate prin forma alungit, imperfect conturat a stafilococilor. 6. Caractere cultur. de Este un germene aerob i facultativ anaerob, nepretenios, dezvoltndu-se bine pe medii simple de cultur (geloz, geloz snge) la temperaturi ntre 35 -370 C, n 18-24 ore i la un pH optim de 7,5 dar sunt tolerate i variaii mari. Mediile cu suplimente organice (ser, ou, peptone, soia) favorizeaz pigmentogeneza. Dac produsul patologic recoltat conine i flor secundar, pentru izolarea stafilococilor se folosesc medii de mbogire hiperclorurate pn la 7-10 -15g% mediul Chapmann. - Elaboreaz pigmeni endogeni de natur lipidic, care coloreaz doar cultura nu i mediul. Pigmentarea devine mai evident dup meninerea plcii cu mediul de cultur nc 24 - 48 ore la temperatura camerei Staphylococus aureus elaboreaz un pigment auriu, Staphylococus epidermidis elaboreaz un pigment alb, Staphylococus saprophyticus elaboreaz un pigment citrin. - Elaboreaz hemolizine (alfa, beta i de curnd s-au identificat i hemolizine de tipul i - la stafilococcus aureus de tip uman. Unele tulpini dein hemolizine producnd hemoliz clar, total cu un contur bine delimitat (hemolizina - stafilococcus aureus), altele produc hemoliza difuz cu limite imprecise (hemolizina stafilococi animali i 20 %din stafilococii umani), care se clarific dupa cteva ore la frigider. - Au un echipament enzimatic bogat:catalaza, hialuronidaza, proteaze, lipaze, nucleaze, DN- aze . coagulaza,

7.Caractere biochimice

8. Rezistena fa de - Rezist la ntuneric i uscciune, fcnd parte din bacteriile factori fizci i chimici nesporulate cele mai rezistente la condiii de mediu nconjurtor, supravieuind luni de zile n produsele patologice uscate (puroi). - Sunt sensibili la dezinfectante i antiseptice n concentraiile uzuale. - La o temperatur de 550 C - 600 C sunt distrui n aproximativ 15 minute, deci pasteurizarea este eficient asupra lor. - Ctig uor rezistena la antibiotice: 90% din tulpini sunt rezistente la penicilina (produc penicilinaza care distruge penicilina G prin descompunerea inelului beta lactaminic), motiv pentru care pn la efectuarea antibiogramei se pot administra peniciline semisintetice (oxaciclina, methicilina).

4

5

ncepnd din anii 1960 s-a demonstrat exitena tulpinilor de Stafilococcus aureus meticilinorezistent (MRSA) cu rezisten multipl la antibiotice incluznd toate antibioticele lactaminice,macrolidele, aminoglicozidele, cotrimoxazolul, etc., extinzndu-se n prezent i la cefalosporine, motiv pentru care se recomand administrarea concomitent a vancomicinei cu rifampicin sau aminoglicozide. 9.Structura antigenic Este variat i heterogen, avnd antigene legate de corpul celular dar i structuri antigenice extracelulare (exotoxine, hidrolaze, hemolizine). Antigene legate de corpul celular - capsula prezent la un numr mic de tulpini de Stapylococcus aureus. - polizaharidul A identificat la Stapylococcus aureus i polizaharidul B identificat la Stapylococcus epidermidis sunt acizi teichoici. - proteina A ntlnit doar la stafilococii patogeni. - coagulaza legat (clamping factor- factor de agregare) - adezine- proteine de suprafa, specifice,implicate n colonizarea matricei intercelulare,n invazia esuturilor i n fagocitoz. de Stafilococii patogeni i datoresc aceast proprietate, capacitii de a elaboara un numr mare de toxine i enzime. Toxigeneza - Hemolizine elaboreaz hemolizine solubile, separabile prin electroforez (alfa, beta, gama, delta hemoliza). Cea mai importanta este alfa-hemolizina care distruge membrana eritrocitelor, trombocitelor i a altor celule la iepure oaie i om, are aciune dermonecrotic, i un important efect asupra musculaturii netede i asupra SNC, n doze mari putnd avea un efect letal. - Exotoxine piretogene (A,B) cu efecte imunosupresoare, cu efecte mitogene pronunate la nivelul limfocitelor T supresoare, cresc toxicitatea endotoxinelor germenilor Grammm negativi , eritrodermie - Enterotoxina produs de unele tulpini patogene are rol n etiologia toxiinfeciilor alimentare. Probabil ca aceasta determin excitaia direct a SNC dupa ce au fost lezai receptorii neutri din tubul digestiv - Factorul necrozant inoculat intradermic la iepure produce dermonecroza. - Factorul letal inoculat intravenos la iepure determin rapid moartea animalului. - Leucocidina poate avea un rol deosebit de important n infecii determinnd degranularea leucocitelor i macrofagelor, inhibnd motilitatea acestora. - Coagulaza liber i legat este tipic pentru stafilococii patogeni. In organisme produce o barier de fibrin n jurul focarului septic i la suprafaa germenului, avnd aciune antifagocitar. - Fibrinolizina sau stafilokinaza lizeaz cheagul de fibrin, favoriznd invazia stafilococilor.

10. Caractere patogenitate

5

6

- Hialuronidaza, factor de difuziune, prin scindarea acidului hialuronic din esutul interstiial favorizeaz invazia stafilococilor n esuturi. - Dezoxiribonucleaze, proteinazele, lipazele, proteina sindromlui toxico-septic (TSST1), toxina exfoliativ (dermatita exfoliativ Ritter), penicilinaza sunt alte substane extracelulare formate de stafilococi. 11.Rspunsul imun Imunitatea postinfecioas este specific fa de produii extracelulari (toxine, enzime) dar i fa de antigenele legate de corpii bacterieni. Titrul anticorpilor antistafilococici este sczut. n cazul unor infecii generalizate titrul poate atinge valori mari, dar care nu influeneaz procesul de vindecare. Stafilococii pot deveni patogeni i se pot manifesta ca atare fie prin multplicare i invazivitate, fie prin multiplicare i toxigenez. Copiii i adolescenii sunt mai susceptbili la infecia stafilococic. Toi factorii care scad rezistena organismului (infecii intercurente, boli debilitante, tulburri de nutriie, traumatisme, sarcina, etc) favorizeaz dezvoltarea infeciei. Forma clinic de manifestare a infeciei depinde de poarta de intrare, de numrul i virulena germenilor : l. Infecii ale pielii i esutului subcutanat: furuncule, abcese, foliculite, hidrosadenite, impetigo, infecia plgilor, dermatita exfoliativa Ritter, pemphigus neonatorum, etc. 2. Infecii la nivelul cilor respiratorii: rinofaringit, sinusit, bronit, pneumonii, mai ales la copii i la vrstnici dup infecii virotice. 3. Infecii gastrointestinale a. enterit acut la copiii cu disbacterioze n urma tratamentelor cu antibiotice cu spectru larg de aciune. b. toxiinfecii alimentare (TIA) - determinate de stafilococii productori de enterotoxin. 4. Infecii urinare ocupnd locul 2 n etiologia cistitelor i glomerulonefritelor dup Esch. coli. Poate cauza abcese perirenale. 5 Infecii la nivelul oaselor i articulaiilor determin osteomielita i artrita septic. 6. Infecii la nivelul altor organe: meningite, otite, endocardite; abcesele cerebrale sau pulmonare se datoreaz rspndirii germenilor pe cale sanguin sau limfatic de la nivelul procesului superficial. 7. Infecii generalizate - febra puerperal postabortum sau post partum sunt din ce n ce mai rare. Mai frecvent poate apare sindromul de oc toxic determinat de stafilococul productor de TSST-1 toxina 1 a ocului toxic. 8. Infecia stafilococic de spital, infecia nozocomial este cea mai temut astzi, deoarece tulpinile de spital sunt patogene, prezint cel mai ades plurirezisten la antibiotice, iar organismele receptive (bolnavii) au o aprare antiinfecioas sczut.

12.Boala la om

6

7

13. Epidemiologie

Sursa de infecie: este reprezentat de omul bolnav cu diferite forme de boal, purttorul sntos de germeni n special din mediul spitalicesc (nas, tegumente), animale, alimente, elemente de mediu. Calea de trasmitere: direct sau indirect, complex . Receptivitatea : general, n special la nou nscui, bolnavi imunodeprimai, cu transplant de organ, maladii cronice decompensate. Factorii socioeconomici precari , pot influena negativ circulaia stafilococilor n mediu.

7

8

FAMILIA STREPTOCOCCACEAE 1. Taxonomie Iniial clasificarea germenilor aparinnd acestei familii s-a bazat pe caractere fenotipice i anume: - caracteristici ecologice, - rezistena la factori fizici i chimici , - aspectul morfologic al colonilor, - tipul de hemoliz produs pe agar snge, - specificitatea serologic a substanelor specifice de grup i de tip, - reacii biochimice. n prezent, dup mai multe remanieri, criteriile de taxonomie molecular au primat n conturarea Familiei Streptococcaceae i anume: - analiza secvenelor ARNr 16S, - hibridarea acizilor nucleici, - utilizarea anticorpilor monoclonali, - compoziia n lipide, - analiza electroforetic a enzimelor, etc.

Familia Streptococcaceae cuprinde n prezent urmtoarele genuri: Genul Streptococcus Streptococii Genul Enterococcus Streptococii enterici Genul Lactococcus Streptococii prezeni n produsele lactate Genul Vagococcus Streptococii mobili Genul Abiotrophia Streptococii simbiotici

i cocii Gramm pozitivi din alte genuri se nrudesc cu streptococii i anume: Genul Aerococcus Larg rspndii n natur, dar i pe tegumente. - Implicai n endocardite subacute Genul Gemella Coci prezeni n microbiocenoza tractulului respirator i digestiv. - Implicai n endocardite subacute, Genul Globicatella Habitat insuficient precizat, rar izolai i de la om. - Implicai n meningite. Genul Helcococcus Habitat insuficient precizat, rar izolai i de la om Genul Leuconostoc - Ubicvitar pe vegetale,furaje, alimente dar i n tubul digestiv al omului. - Implicai n meningite, i bacteriemii neonatale. Genul Pediococcus - Ubicvitar pe vegetale, furaje, alimente dar i n tubul digestiv al omului.

8

9

abcese meningite

i

GENUL STREPTOCOCCUS 1. Taxonomie Cuprinde n prezent 6 grupri de specii, conturate astfel n urma: - analizei comparative a secvenelor ARNr 16S, - constatrii rezultatelor hibridrii acizilor nucleici, - analizei taxonomice numerice.

2. . Clasificarea streptococilor nc nu exist un sistem perfect ci doar perfectibil pentru clasificarea tuturor streptococilor. S-au utilizat de a lungul timpului: - apectul hemolizei pe mediul cu agar-snge; - specificitatea serologic a antigenelor de grup (Lancefield) i de tip; - rezistena la aciunea factorilor fizici i chimici; - teste biochimice; - teste de genetic molecular..

Cele mai importante specii de streptococi pentru patologia uman sunt urmtoarele: GRUPUL 1. Grupul pyogenes SPECIA - Str. pyogenes - Str. agalactiae, - Str. dysgalactiae, - Str. porcinus. - Str. anginosus, - Str. costellatus, - Str. intermedius. - Str. mitis, - Str. oralis, - Str. gordonii, - Str. sanguis, - Str. parasanguis, - Str. crista, - Str. pneumoniae. - Str. salivarius, - Str. vestibularis, - Str. thermophillus

2. Grupul anginosus

3. Grupul mitis

4. Grupul salivarius

9

10

5. Grupul bovis 6. Grupul mutans

- Str. bovis - Str. mutans, - Str. sobrinus - Str. cricetus, - Str. rattus.

3. Habitat Germenii Genului Streptococcus se regsesc gzduii la om i diverse animale (bovine, porcine, equine, canine, psri, maimue, obolani, etc) de unde pot polua diferite elemente ale mediului ambiant. Unele specii fac parte din flora indigen, a orofaringelui, tractului gastrointestinal i pielii fiind nepatogene, altele sunt patogene, determinnd variate manifestri clinice imediate sau la distan n timp. 4. Manifestri clinice GRUPUL 1. Grupul pyogenes SPECIA - Str. pyogenes DETERMINARE CLINIC Portaj nasofaringian: 10%-40%; Infecii potenial grave: tegumentare (impetigo, erizipel), esuturi moi (celuluitfasceit necrozant) respiratorii (angine, faringite), febr puerperal. Tulpinile eritrotoxigene determin: scarlatina sau sindromul de oc toxic; Complicaii supurative: prin diseminarea infeciei pe cale sanguin, limfatic sau prin contiguitate; Complicaii nonsupurative: febra reumatic, glomerulonefrit acut, coree, eritem nodos. Portaj: faringian, intestinal, vaginal; Noi nscui: pneumonii, meningite; Aduli: infecii postpartum Imunodeficieni:infecii tegumentare, esuturilor moi. Nefrite Infecii ale aparatului urinar i genital Fac parte din flora rezident la nivel orofaringian, intestinal, genital; Infecii purulente la nivelul: cavitii bucale, faringelui, cilor respiratorii superioare, tractului digestiv, urinar, SNC, la nivelul tegumentelor, prilor moi, oaselor.

- Str. agalactiae

ale

- Str. dysgalactiae - Str. porcinus 2. Grupul anginosus - Str. anginosus - Str. costellatus - Str. intermedius

10

11

3. Grupul mitis streptococi viridans

- Str. mitis, - Str. oralis, - Str. gordonii, - Str. sanquis, -Str. parasanquis, - Str. crista, - Str. pneumoniae

Flor rezident la nivelul cavitii bucale i orofaringelui. Potenial cariogenn. Endocardite subacute la pacienii cu valvulopatii sau cu tulburri ale dinamicii sanguine cardiace. Pneumonii i meningite rar. Bacteriemii i septicemii la pacieni oncologici. Portaj orofaringian : 30%-70%; Frecvent implicat n: otite medii, sinuzite, meningite. Agentul etiologic al pneumoniei franc lobar i al reacutizrii bronitelor cronice. La copii implicat n etiologia peritonitelor primare. Flor rezident la nivelul cavitii bucale i orofaringelui. Accidental patogen, cu manifestri clinice asementoare Grupului mitis. Ocazional n colon. Implicai n endocardite subacute la pacieni cu suferine intestinale (diverticulite, neo de colon). Flor rezident la nivelul cavitii bucale. Implicate n formarea plcii dentare i n cariogenez. Rar implicate n endocardite subacute.

4. Grupul salivarius

- Str. salivarius, - Str. vestibularis

5. Grupul bovis

- Str. bovis

6. Grupul mutans

- Str. mutans, - Str. sobrinus

STREPTOCOCCUS PYOGENES 1.Definiie Sunt coci sferici sau ovali, Gramm pozitivi, dispui n lanuri (strepto = lan) sau perechi, nesporulai, imobili. Sunt saprofii, patogeni sau saprofii condiionat patogeni. Germeni pretenioi nutritivi, aerobi i facultativ anaerobi, unii carboxifili.

Aspectele descrise la Streptococcus pyogenes sunt valabile pentru toate speciile de streptococi. 2. Habitat Sunt larg rspndii n natur, fcnd parte din flora normal a omului i animalelor.

11

12

3.Caractere morfologice

4.Caractere cultur

5.Caractere biochimice

Au form de coci, ovoizi sau sferici cu diametrul de l- 2 mm. Ei sunt dispui n diplo sau lanuri de lungimi variabile condiionate de factorii de mediu. Sunt imobili, nesporulai. n peretele bacterian mureina se regsete n cantitate mare, unele specii pot prezenta o capsul de natur polizaharidic care le confer o mare virulen i mpiedic fagocitoza. de Streptococii sunt germeni mai pretenioi dect stafilococii, necesitnd pentru cretere medii mai complexe care s conin proteine native (snge, ser, ascit), vitamine i factori de cretere. Streptococii piogeni sunt cei mai pretenioi, streptococii viridans sunt mai puin pretenioi iar enterococii cresc pe mediile uzuale. Cresc de obicei pe medii lichide de bulion glucozat sau pe mediul solid de geloz- snge. Pe medii cu bulion glucozat streptococii piogeni cresc n form de flocoane care se depun pe perei sub form de fulgi i las un sediment pe fundul eprubetei. Streptococii care dein capsul deci un grad ridicat de patogenitate determin o turbiditate omogen a mediului. Pe medii cu snge dezvolt colonii mai mici dect ale stafilococului (0,5-2mm), incolore i determin o zon de hemoliz. Streptoocii piogeni determin pe geloz snge colonii de tip S iar cei care dein capsul - colonii de tip M. In funcie de elaborarea de hemolizine streptococii se mpart n 4 categorii: - streptococi alfa hemolitici, metabolizeaz incomplet hemoglobina dnd o coloraie verzuie n jurul coloniilor caracteristic pentru streptococii viridans, ei fiind saprofii, contiionat patogeni. - streptococii alfa prim hemolitici metabolizeaz complet hemoglobina, dar este o hemoliz n care mai exist hematii nehemolizate. n aceasta categorie intr serotipurile B i D ale streptococilor, fiind saprofite, condiionat patogene. - streptococii betahemolitici care elaboreaz hemolizina beta, dau o hemoliza complet, ntins, coloniile avnd marginile clare. Din aceasta categorie fac parte streptococii de grup A (care sunt ntotdeauna patogeni) dar i cei din grupurile B, C , F i G . - streptococii gama sunt nehemolitici, nu elibereaz hemolizine. Din aceast grup fac parte streptococii de grup D i peptostreptococii. Au capacitatea de a elabora hemolizine (alfa, alfa prim, beta) sau streptococii gama nu elaboreaz hemolizine.. Elaboreaz enzime care permit degradarea zaharurilor cu producere de acid. Sunt catalazo negativi i nu sunt sensibili fa de bil. Sunt aerobi dar pot fi i microaerofili sau chiar facultativ anaerobi (enterococii), fiind implicai n infeciile mixte cu localizare pulmonar. Streptococii de grup A sunt sensibili la bacitracin i la pirolidonil beta naftilamid (testul PYR) ceea ce permite diferenierea lor.

12

13

6. Rezistena n Sunt microorganisme relativ rezistente, putnd supravieui cteva mediu, la ageni fizici, sptmni n secreiile faringiene uscate la temperatura camerei, pe chimici i biologici tampoane de vat. In stare liofilizat i pstrez viabilitatea ani de zile. Sunt distrui de razele solare, u.v., antiseptice i dezinfectante n concentraiile uzuale, precum i de cldur la 55 0 C, timp de 20 de minute. Sunt rezisteni fa de violetul de genian. Streptococii de grup A sunt ntotdeauna sensibili la peniciline (nefiind necesar antibiograma). Streptococii de grup D si ctig rapid rezistena la antibiotice. Sunt rezisteni la concentraii mari de NaCl (6,5 g%), la aciunea bilei i a srurilor biliare la fel ca i streptococii viridans. 7.Structur antigenic Este deosebit de complex, coninnd att antigene somatice ct i antigene solubile. - Antigenele somatice a. antigenul capsular (se poate izola de la germeni foarte patogeni). b. antigenul M se gsete la suprafaa peretelui bacterian, fiind unul din principalii factori de virulen ai streptococilor de grup A. Este specific de tip, streptococii de grup A mprindu-se n 80 de tipuri - serovaruri (GRIFFITH). c. proteina asociat proteinei M (MAP), d. substana T , protein care permite mprirea n 28 de serovaruri a streptococilor piogeni, e. proteina R care este un antigen de suprafa, f. Carbohidratul C se gsete n profunzimea peretelui. Are specificitate de grup. Pe baza acestei substane streptococii au fost mprii de ctre LANCEFIELD n l9 grupe, notate cu litere: A,B....U. Majoritatea streptococilor care sunt patogeni pentru om aparin grupului A. Din aceast clasificare lipsesc streptococii viridans care nu au substana C. Substana C nu este factor de patogenitate, de aceea anticorpii anti C nu confer protecie. - Antigene solubile a. Exotoxina (eritrotoxina) sau toxina Dick are afinitate pentru piele determinnd exantem, iar la nivelul mucoaselor enantem. Exist un singur tip de toxin eritrogen care este elaborat numai de streptococii lizogenizai, anticorpii antiexotoxin sunt protectori.. Exotoxina determin scarlatina. b. Hialuronidaza scindeaz acidul hialuronic i favorizeaz invazia germenilor. c. Fibrinolizinele sau streptokinazele au proprieti proteolitice; activnd plasminogenul din plasm, l transform n plasmin care este capabil s digere fibrina. Streptokinaza administrat intravenos este util n embolia pulmonar, tromboza arterial i venoas, n infarctul miocardi acut. Este deosebit de antigenic. Determinarea streptokinazelor are importan pentru diagnosticul si prognosticul bolii.

13

14

d. Sreptodornaza (dezoxiribonucleaza) depolimerizeaz ADN. Dup infecii streptoocice ale pielii n special apar anticorpi antiADNeaz. e. Streptolizinele se submpart n: - streptolizina O elaborat de grupele A,C,G de streptococi, oxigenabil, de natur proteic cu aciune hemolitic, leucolitic i cardiotoxic. Este puternic antigenic, declannd n organismului bolnavului elaborarea de antistreptolizine O (evideniabil prin reacia ASLO). Deosebit de importante n diagnosticul precoce i tardiv al infeciei streptococice. - streptolizina S este oxigenostabil, neantigenic, producnd n anaerobioz hemoliza beta pe mediile cu snge. 8.Caractere patogenitate de Patogenitatea streptococilor este determinat de capacitatea lor de virulen, toxigenez i de sensibilizare. Caracterul de patogenitate prin multiplicare este dat de proteina M i capsula de acid hialuronic, determinnd afeciuni la poarta de intrare. Invazivitatea este determinat de enzimele litice care determin apariia unor focare secundare propagate din aproape n aproape. Aceste caractere de patogenitate pot da natere la infecii acute, dintre care unele au un mare potenial de cronicizare; pot da infecii de focar la poarta de intrare sau la distan. Aceste infecii sunt ntotdeauna purulente. Toxigeneza este o proprietate pe care o regsim doar la streptococii de grup A, ei dein receptori pentru bacteriofagi, devenind lizogeni i elabornd exotoxine. Rezistena mpotriva infeciei streptococice are specificitate de tip. Imunitatea specific dpinde da anticorpii anticapsulari i antideterminani de suprafa. Cercetri recente au demonstrat existena unei imuniti locale la nivelul mucoaselor. Imunitatea fa de de infecia cu streptococi de grup A este legat de prezena: - anticorpilor specifici antiproteina M (se cunosc 80 de tipuri diferite) care asigur gazdei o protecie de lug durat ani de zile; - anticorpilor anti MAP care apar la titruri ridicate n complicaiile nesupurative, au o dinamic asemntoare anticorpilor M; - anticorpilor anticarbohidrat (anti CHO) cu semnificaie asemntoare cu anticorpii antiMAP, reacionnd ncruciat cu glicoproteinele din valvele cardiace umane; - anticorpilor antiproteine din citoplasma celulei streptococului (proteina 40KD i proteina 50KD), - anticorpilor antiantigenul citoplasmatic endostreptozin, antigenul cu rol n patogenia glomerulonefritei difuze acute; - anticorpilor antistreptolizin O, a cror titru este orientativ n diagnosticul infeciilor poststreptocice. Imunitatea dup scarlatin este durabil pentruc exist un singur tip de toxin eritrogen.

9. Rspunsul imun

14

15

In funcie de poarta de intrare are loc o reacie inflamatorie difuz a esutului care se poate extinde rapid. Aceast infecie primar poate fi urmat n anumite circumstane de o septicemie sau de atingerea altor esuturi prin diseminare hematogen (febra puerperal, osteomielita hematogen). - Erizipelul se dezvolt atunci cnd pori de intrare sunt pielea sau mucoasele superficiale. - Febra puerperal survine cnd streptococii ajung n uter dup natere. - Septicemia este provocat de infectarea cu streptococi fie postoperator, fie posttraumatic. Infecii locale Angina streptococic cea mai frecvent infecie. La copiii mici determin rinofaringite subacute cu pericol de penetrare n urechea medie, mastoid sau meninge. La adolesceni i aduli pot aprea rinofaringite acute, amigdalite pultacee, i dac agenii patogeni dein eritrotoxina - scarlatina. Infeciile tractului respirator superior nu conduc de obicei la mbolnviri pulmonare. Pneumoniile determinate de streptococ complic cel mai ades unele infecii virale n antecedetele imediate, are evoluie rapid progresiv i sever . Impetigo se dezvolt n special la copiii mici n urma unor infecii ale pielii n straturile superficiale. Infecii ale pielii cu streptococi pot conduce la o aa numit nefrit poststreptococic i numai rareori la reumatism. Endocardite bacteriene Endocardita acut infecioas determinat de streptococii beta hemolitici, stafilococi sau bacteriile Gramm negativ atac n cadrul unei bacteriemii aparatul valvular defect; netratat poate evolua infaust. Endocardita subacut bacterian este determinat cel mai frecvent de streptococii viridans, putnd evolua netratat spre deces. Boli autoimune poststreptococice Apare mai nti un mecanism de hipersensibilizare umoral de tip I sau III i numai dup aceea hipersensibilizarea celular de tip IV. Ulterior intervin mcanismele autoimune prin degradarea esuturilor n focarul respectiv. Aceste boli sunt date n general de streptococii de grup A. Streptococii determin boli prin hipersensibilizare deoarece pe tot parcursul copilriei trecem prin multiple infecii cu acest tip de germeni. La un moment dat una dintre infecii devine contactul sensibilizant iar urmtoarea va fi contactul declanant. Apariia anticorpilor antistreptolizin O la valori foarte ridicate indic fenomene de sensibilizare. Bolile autoimune postreptococice sunt: - reumatismul articular, - cardita reumatismal, - eritemul nodos,

15

16

- glomerulonefita. 11. Epidemiologie Incidena maxim a infeciilor streptococice este n perioada colarizrii primare (6-12 ani), copiii fiind surs de infecie pentru restul familiei. Sursa de infecie este reprezentat omul bolnav cu diverse forme de boal sau purttorul de germeni . Ci i mecanisme de transmitere: prin contact direct: bolnavul fiind mult mai periculos dect purttorul, ntruct disemineaz prin picturi, secreii, mini contaminate doza infectant apreciat la 100 germeni. Infeciile transmise cutanat sunt favorizate de abraziuni, nepturi prin manevre traumatice, inclusiv nepturi determinate de insecte. Streptococii vehiculai indirect prin lenjerie de pat i corp, inventar moale, sunt mai puin infectani. Prin mecanism indirect streptococii pot fi diseminai i prin alimente contaminate: salate, ou, lapte, derivate contaminate. Receptivitatea este general. Incidena infeciilor streptococice nu coreleaz cu sexul cu excepia celor de grup B sau cu factori genetici sau rasiali. Reumatismul ns la albi coreleaz cu fenotipul HLA DR 4 i la populaia neagr cu HLA DR 2. Profesia nu expune semnificativ. Persoanele imunodeficiente sunt expuse mai mult la bacteriemie. Infeciile streptococice au sezonalitate de toamn - primvar, cele cu localizare cutanat fiind favorizate ns de timpul cald i umed. Factorii naturali de mediu: umiditatea crescut, temperatura sczut din sezonul rece favorizeaz transmiterea prin aerosoli a streptococilor, catarul respirator i creterea portajului Factorii socio-economici precari, aglomeraia favorizeaz infeciile streptococice. Infeciile streptococice se manifest endemic, scarlatina determinat de streptococul hemolitic fiind ns considerat cu potenial epidemic periculos. Epidemii localizate de angine streptococice se nregistreaz la copiii din cree, grdinie, coli internate, aezminte sociale, dar i la tinerii militari n cazrmi.

STREPTOCOCCUS VIRIDANS Habitatul preferenial este cavitatea bucal, dar se regsesc i n tractul gastrointestinal sau n cel genital la femei Sunt considerai germeni saprofii, condiionat patogeni. Totui prezena lor se poate asocia cu endocardite bacteriene subacute n special la pacienii cu proteze valvulare. Streptocii viridans au fost izolai i de la pacieni cu infecii n alte organe sau sisteme, rolul lor patogen crescnd la pacienii neutropenici. Sunt lipsii de antigenul specific de grup (carbohidratul C) motiv pentru care nu sunt

16

17

clasificabili Lancefield. Ei se identific prin caractere fiziologice. Reaciile sunt negative la majoritatea testelor pentru identificarea de gen. Se constituie ntr-un grup apreciabil de streptococi care determin hemoliza de tip alfa, dar pot fi i nehemolitici.

GENUL ENTEROCOCCUS Principalele specii recunoscute de Kalina n 1970 la om ca fcnd parte din genul Enterococcus sunt Enterococcus faecalis i Enterococcus faecium. n prezent pe baza caracterelor biochimice i a studiilor genetice sunt descrise 19 specii de enterococi. 1. Definiie 2. Habitat 3.Caractere morfologice 4.Caractere cultur Coci Gramm pozitivi, imobili (cu 2 excepii), nesporulai catalazo negativi, facultativ anaerobi. Fac parte din flora enteric, a tractului genito-urinar la om i animal. Polueaz intens mediul ambiant: sol, ap, alimente, insecte. Coci, cocbacili, dispui fie izolat, fie perechi sau n lanuri scurte, imobili, nesporulai, Gramm pozitivi. de Cresc bine pe orice agar baz suplimentat cu 5% snge de berbec, sau n mediu lichid: bulion cu 6,5 % Na Cl. Temperatura optim de cultivare 10 C 37 C. Sunt nonhemolitici i ocazional hemolitici, determinnd hemoliz . Hidrolizeaz esculina n prezena bilei sau a srurilor biliare, sunt PYR (pyroliodonyl arylamidaz) i LAP (leucin aminopeptidaz) pozitive, tolereaz Na Cl 6,5%. n Rezisteni n condiii de mediu adverse. Rezistent la antibiotice i chimioterapice determin infecii profunde greu de tratat. Conine un antigen specific de grup D. Infecii urinare la pacienii cu uropatii obstructive. Infecii mixte pelvine. Infecii de plag. Bacteriemii la imunodeprimai i la persoane vrstnice ndelung spitalizate. Endocardite bacteriene. Incert implicai n infecii ale sistemului nervos central sau n infecii ale aparatului respirator. Implicai frecvent n infeciile nozocomiale ocupnd locul 2 dup Escherichia coli n infeciile nozocomiale de tract urinar, i locul 3 dup stafilococii coagulazo-pozitivi i stafilococii coagulazo-negativi n bacteriemiile de spital.

5.Caractere biochimice 6.Rezistena mediu 7.Structur antigenic 8.Patologie infecioas

17

18

STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE (PNEUMOCOCUL) 1. Definiie 2. Habitat Coci Gramm pozitivi, alungii, lanceolai, dispui n general n diplo pe axul longitudinal. Nu se recunoate unanim c cele 80 de serotipuri de pneumococ ar face parte din flora normal a tractului respirator superior. Sunt frecvent localizai n cavitatea bucal, nazal, faringian i laringian. Se gsesc att la purttori sntoi ct i la bolnavi. Nu circul liber n natur. Diplococi Gramm pozitivi, imobili, nesporulai, ncapsulai. Majoritatea pneumococilor sunt saprofii dar exist i pneumococi care dein o capsul de natur polizaharidic implicat n patogenitate i n rezistena germenilor n mediul extern. Pneumococii sunt aerobi i facultativ anaerobi. de Pneumococii sunt germeni pretenioi crescnd numai pe medii mbogite (geloz snge). Creerea lor este favorizat ntr-o atmosfer de 5% CO2 i la o temperatur de 370 C. Pe geloz snge pneumococii ncapsulai determin colonii S iar ceilali colonii M. Sunt germeni hemolitici, coloniile sunt mici, transparente, nconjurate de o zon de hemoliz de tip alfa prim, la fel ca i streptococii viridans. n mediul de cultur lichid tulbur omogen mediul. Glucoza se constitue n principala surs de energie pentru pneumococi. Elibereaz enzime zaharolitice, proteolitice, lipolitice. Fermenteaz inulina, sunt sensibili la optochin ceea ce i difereniaz de streptococii viridans. Produc enzime autolitice. Autoliza este indus i accelerat de bil, sruri biliare, acizi bilari consituindu-se ntr-un test important de identificare a lor (testul bilolizei - Neufeld). Rezistent la testul bil- esculin. Testul CAMP i al creterii satelite negativ.

3.Caractere morfologice

4.Caractere cultur

5.Caractere biochimice

6.Rezistena n n mediul extern rezistena lor este sczut, fiind distrui de razele mediu, la ageni solare i de dezinfectantele uzuale. fizici , chimici i n schimb pot supravieui cteva luni n sput uscat, la ntuneric. biologici n timp microorganismele devin Gramm negative i au tendin la autoliz care poate fi intensificat de ageni tensioactivi de suprafa. Actualmente este de semnalat apariia pneumococilor rezisteni la peniciline (20-40%) sau chiar tulpini multirezistente la antibiotice.

18

19

7.Structur antigenic

8. Caractere patogenitate

Exist antigene somatice i antigene solubile. La nivelul peretelui se identific un carbohidrat specific de grup caracteristic tuturor pneumococilor. Proteina M este un antigen caracteristic pentru fiecare tip de pneumococ. Antigenul K identificat n capsula polizaharidic protejeaz pneumoocul de fagocitoz, favoriznd invazivitatea acestuia. Structura lui este specific pentru fiecare seroip, identificndu-se pn n prezent 83 de serotipuri diferite. Criterii de identificare a pneumococilor sunt: reacia de umflare a capsulei utiliznd anticorpi anticapsulari, reacia de coaglutinare sau latex aglutinare, inoculare la oareci. de Este patogen prin multiplicare i invazivitate, caractere determinate de prezena capsulei. Nu are capacitate de toxigenez. Elaboreaz o hialuronidaz care-i favorizeaz invazivitatea n cile respiratorii inferioare. Imunitatea fa de infecia pneumococic are specificitate de tip, depinznd de anticorpii care apar mpotriva antigenului capsular (antigenul K) ct i de funcia fagocitelor. Este de scurt durat, oferind protecie o perioad de timp redus. Vaccinarea antipneumococic induce formarea de anticorpi anticapsulari Pneumococii pot determina clinic: - otite, sinuzite, - bronite acute i cronice, - meningit foarte grav, - endocardit foarte grav, - peritonita, - pneumonia franc lobar. Sursa de infecie: omul bolnav, purttorul sntos Aproximativ 40-70% dintre oameni sunt la un moment dat purttori sntoi de pneumococ ceea ce denot c mucoasa respiratorie normal are un grad important de rezisten natural. Cile i mecanismele de transmitere: direct, aerogen prin picturi, secreii, obiecte de uz pro priu contaminate. Receptivitastea este general, extremele de vrst fiind cele mai expuse. Infeciile cu rhinovirusuri (guturaiul ) favorizeaz infecia pneumococic. Factorii care pot predispune organismul uman la infecia pneumococic sunt: - anomalii consituionale sau dobndite ale tractului respirator, - intoxicaia cu alcool sau droguri, - malnutriia, debilitatea, - tulburri circulatorii i insuficiena cardiac, - hiposplenismul,

9. Rspunsul imun

10.Patologie infecioas

11.Epidemiologie

19

20

- anemia, - afeciuni renale, - imunodeficene de diferite cauze. Vaccinarea antipneumococic cu vaccinuri polizaharidice, ce conin 23 din serotipurile cele mai circulante nu se administreaz sub vrsta de 2 ani. Acestea induc formarea de anticorpi anticapsulari. Factorii naturali de mediu: umiditatea crescut, temperatura sczut favorizeaz transmiterea aerian a pneumococului i creterea portajului. Factorii socio-economici precari, aglomeraia, slaba alimentaie, nivelul de igien personal deficitar favorizeaz infeciile pneumococice.

20

21

COCI GRAMM NEGATIVI AEROBI FAMILIA NEISSERIACEAE Genul Neisseria Genul Eikenella Genul Kingella M-5 Genul Simonsiella M-6 Genul Alysiella

CDC EF -4

GENUL NEISSERIA n prezent se cunosc 16 specii de Neisserii dintre care 10 cu mai multe subspecii i biovaruri se regsesc la om, iar 6 specii la animale. Categoria Neisserii saprofite Specia Neisseria sicca, Neisseria lactamica, Neisseria mucosa, Neisseria cinerea, Neisseria flava, Neisseria perflava, Neisseria subflava, Neisseria elongata. Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis.

Neisserii patogene

Neisserii cu habitat Neisseria polysaccharea, animal, ocazional Neisseria canis, izolate la om Neisseria maccacae, Neisseria flavescens, Neisseria denitrificans,

Cele mai multe specii de Neisserii sunt saprofite populnd mucoasa oro-faringian i nazo-faringian la adult i copil, chiar mai multe specii o dat. Durata colonizrii cu Neisserii saprofite se poate extinde la cteva luni; acestea determinnd rareori infecii clinice manifeste cu localizri variate, n special la persoane imunocompromise.

21

22

n schimb, Neisseriile patogene sunt strict parazite pentru om, fiind implicate n patologia infecioas, atacnd mucoasele i determinnd infecii acute cu tendin invaziv pe esuturi i ocazional sistemic. CategoriaNeisserii saprofite

SpeciaNeisseria sicca, Neisseria lactamica, Neisseria mucosa, Neisseria cinerea, Neisseria flava, Neisseria perflava, Neisseria subflava,

Neisseria elongata.

Determinarea clinic Endocardite, osteomielite, artrite, celulite, conjunctivite; Meningite, septicemii, osteomielite, artrite, celulite, conjunctivite; Endocardite, meninigite, osteomielite, artrite, celulite, conjunctivite; Endocardite, osteomielite, artrite, celulite, conjunctivite; Meningite, osteomielite, artrite, celulite, conjunctivite; Osteomielite, artrite, celulite, conjunctivite; Endocardite, meningite, septicemii, osteomielite, artrite, celulite, conjunctivite; Osteomielite, artrite, celulite, conjunctivite. Infecii asimptomatice localizate uretral, rectal, faringian la brbat; endocervical, rectal, faringian la femei, vulvovaginal la fetie i conjunctival la nou nscut. Femeile fac infecii gonococice mai frecvent dect brbaii. Infecie manifest: (PID pelvic inflammatory disease): uretrit, epidimitt, prostatit, salpingit, metrit, pelviperitonit, abcese tuboovariene, sau DGI (infecie gonococic diseminat): erupii cutanate, artrite, tenosinovite, endocardit, meningit. Panoftalmia infecie conjunctival care implic lcrimare i edem asociate cu o bogat secreie purulent care incorect tratat evolueaz spre perforarea cu cicatricizare elterioar a corneei. .

Neisserii patogene

Neisseria gonorrhoeae,

22

23

Neisseria meningitidis

Neisserii cu habitat Neisseria polysaccharea, animal, ocazional Neisseria canis, izolate la om Neisseria maccacae, Neisseria flavescens, Neisseria denitrificans

Purttori sntoi pe mucoasa cilor aeriene superioare Infecii manifeste Rinofaringite benigne Meningit meningococic Complicaii: sindromul Waterhouse Friedrichsen de coagulare disemninat intravascular. Infecia menigococic consituie o problem pentru persoanele cu deficit de complement (componenetele C6 C9). Patogenitatea lor la om nc nu este cert.

NEISSERIA GONORRHOEAE GONOCOCUL 1. Definiie 2. Habitat Coci, reniformi, dispui n diplo cu concavitile fa n fa, ncapsulai, Gramm negativi. Specific uman, localizat la nivelul mucoaselor genitale, urterale, faringiene, conjunctivale la persoane infectate, indiferent dac infecia este simptomatic sau nu. Coci reniformi, cu diametrul de 0,6 1,0m, frecvent dispui n diplo, cu feele alturate, plane sau uor concave, asemntoare boabelor de cafea. Sunt nconjurai de cte o structur capsular comun, de natur polizaharidic care-i mparte n mai multe serogrupuri. Sunt germeni imobili i nesporulai. Gonococul se gsete dispus intracelular (ntr-un leucocit pot coexista 20- 30 de gonococi) n fazele acute ale bolii; n infeciile cronice situaia se inverseaz. de Germene foarte pretenios, pentru cultivarea lui fiind necesare vitamine, proteine native, anumii aminoacizi, etc. mbogite cu antibiotice (vancomicin, lincomicin, colimicin). Este necesar o anumit umiditate pentru c gonococul este foarte sensibil la uscciune. Cultivarea se face pe agar snge asociat cu mediul HYL (variant a mediului Mueller -Hinton), n atmosfer nbogit cu CO2 5% - 7%, pH 6 -

3. Morfologie

4.Caractere cultur

23

24

8 la o temperatur optim de 350 C. Gonococul produce pe mediu dup 24 de ore, colonii de tip S sau de tip M, mici, nepigmentate, transparente sau opace, nehemolitice. Pe aceiai plac se pot identifica pn la 5 tipuri de colonii (T1 - T5), ceea ce poate facilita identificarea gonococilor. Placa este considerat negativ n cazul n care nu se dezvolt colonii dup 72 de ore de la nsmnare 5.Caractere biochimice Gonococul fermenteaz glucoza cu formare de acid, fr gaz dar nu i maltoza i este productor de citocromoxidaz. Recent s-au introdus n diferenierea speciilor de Neisserii i teste pe substraturi cromogene: ONPG ( galactozidaza), GGT ( glutamiltransferaza) i HPAP (hidroxiprolin- aminopeptidaza). Gonococul nu produce ONPG i nici GGT dar scindeaz HPAP. Remarcm heterogenitatea antigenic i capacitatea gonococilor de a-i modifica structurile de suprafa in vitro i probabil i in vivo, eludnd astfel mecanismele de aprare ale gazdei Ca structuri antigenice remarcm: - lipooligolizaharidul (LOZ - cu lan zaharidic scurt) denumit i endotoxin, eliberat numai dup moartea germenilor, - pilii - structuri proteice cu rol n ataarea de celulele gazdei, protejeaz gonococul de activitatea fagocitar, - porinele: proteina I formeaz pori la suprafaa celulei bacteriene, sunt diferite de la o tulpin la alta, find utile n serotiparea gonococilor; proteina II (OPA) este util pentru aderarea germenului, - IgA1 proteaza, - capsula din polifosfat, - prezena unor anumite plasmide implicate n rezistena la antibioticele betalactaminice.

6.Structura antigenic

7. Rezistena n Este un germene sensibil, puin rezistent n mediul exterior: la mediu, la ageni uscciune, lumin solar, variaii de temperatur. fizici , chimici i In produsele patologice expuse uscrii rmn n via 2-5 ore. In schimb biologici pe prosoape i bureii uzi rmn viabili 1-2 zile. La 420 C caldur uscat sunt distrui n cteva ore i la 550 C n maximum 5 minute. Sunt germeni stenotermi (rezist doar la variaii mici de temperatur) ca i meningococii. Sunt sensibili la majoritatea dezinfectantelor uzuale i a antisepticelor. Produc enzime autolitice. In prezent 90% dintre tulpinile de gonococ sunt rezistente la anumite antibiotice: penicilin, streptomicin, vancomicin, motiv pentru care pentru conducerea corect a unui tratament eficient este necesar efectuarea antibiogramei. 8.Caractere patogenitate. de Se multiplic masiv la poarta de intrare. Invazivitatea n schimb este modest, glandele anexe fiind implicate rar. Toxigeneza prin endotoxin se manifest n cazul infeciilor cronice atunci cnd toxina fixndu-se pe vasele locale produce inflamaii.

24

25

9.Rspunsul imun

n infecia gonococic datorit variaiei antigenice, se ocolesc mecanismele imunitare ale gazdei i imunitatea postinfecioas este inexistent practic, ceea ce face posibil ca aceiai persoan s poat trece prin infecii repetate. Deci rspunsul imun umoral este modest, iar rspunsul imun celular apare doar n infeciile cronice La brbat detemin uretrite, prostatite, epididimite cu un exudat purulent masiv. La femei determin uretrite, cervicite, anexite, metrite. Toate cazurile manifeste clinic debuteaz ca forme acute cu o simptomatologie subiectiv i obiectiv evidente (secreie abundent verzuie la nivel genital) care tratat incomplet, incorect se poate croniciza devenind greu de depistat i de tratat. Complicaiile cele mai frecvente sunt: artritele, endocarditele, septicemiile. Localizarea extragenital cea mai frecvent ntlnit este blefaroconjunctvita nou-nscuilor din mame care sufer de blenoragie i i pot infecta ftul n timpul naterii (intrapartum). Procesul inflamator se poate extinde determinnd panoftalmia gonococic. Pentru prevenirea acestor infecii, n materniti nou nscuilor li se aplic profilactic instilaii oculare cu nitrat de argint 1% sau proteinat de Ag. Sursa de infecie este reprezentat de omul bolnav. Calea i mecanismul de transmitere: direct pe cale sexual prioritar mai rar de la mam la ft n timpul naterii, rarisim indirect prin intermediul unor obiecte de uz personal recent contaminate. Receptivitatea este general, depinde de comportamentul sexual al partenerilor.

10. Boala la om

11. Epidemiologie

NEISSERIA MENINGITIDIS MENINGOCOCUL 1. Definiie 2. Habitat Sunt coci reniformi, aezai n diplo, ncapsulai, nesporulai, imobili, Gramm negativi, dispui intra sau extracelular. Germene specific uman. Izolat de la purttori sntoi de meningococ la care germenii se localizeaz pe tegumente dar n special n cavitatea bucal i nazal. La bolnavii de meningit menigococic, germenii se multiplic n lichidul cefalorahidian. Coci reniformi, dispui n diplo, feele adiacente nu sunt att de plate ca la gonococ. Cte 2 germeni sunt nconjurai de o capsul cu o structur de polizaharid - polifosfat, mai ales la culturile tinere virulente. Sunt imobili,

3.Caractere morfologice

25

26

nesporulai. 4. Caractere cultur de Sunt foarte pretentioi, pentru cultivare utilizm mediul Mller Hinton, adaugndu-se antibiotice la care meninigocoul este rezistent. Crete n atmosfera de CO 5-10% i la o temperatur de 350 C -370 C. Modern se utilizeaz n SUA: MTM (mediul Tayer Martin modificat), ML (mediul Martin Lewis), NYC, n Romania - mediul HYL. Meningococul germene stenoterm, adic rezist la variaii mici ale temperaturii, temperatura optim de dezvoltare fiind la 350 C. Coloniile de meningococ sunt de tip S: gri albe, transparente, cele ncapsulate putnd determina i colonii M pentru tipurile A i C. Pe mediu solid coloniile sunt nehemolitice, mici, cu marginile neregulate iar mediul lichid este tulburat n mod uniform de meningococi.

5.Caractere biochimice

Fermenteaz pe lng glucoz i maltoza. Reacia oxidazei este pozitiv. Recent s-au introdus n diferenierea speciilor de Neisserii i teste pe substraturi cromogene: ONPG ( galactozidaza), GGT ( glutamiltransferaza) i HPAP (hidroxiprolin- aminopeptidaza). Meningococul are numai activitate GGT ( glutamiltransferazic). 6. Rezistena n Sunt germeni foarte sensibili n mediul exterior; la temperatura mediu, la ageni camerei mor ntr-o or, chiar n produsele patologice. La 55 0 C sunt fizici, chimici i distrui n 20 - 30 minut biologici Nu suport uscciunea. Sensibil la antisepticele i dezinfectantele uzuale (alcoolul de 70 l distruge n 15 minute), la cldur umed, radiaii u.v. Majoritatea meningococilor sunt sensibili la antibiotice: peniciline, ampicilin, tetraciclin, rifampicin, cefalosporine. 7.Structura antigenic Conine antigene somatice i antigene solubile. a. Antigene somatice. - Antigenul capsular imunogen i protector, mparte meningococii n 12 grupe serologice dintre care cele mai importante sunt A,B,C,Y, i W-135 - Antigenul O care se afla n peretele bacteriei. b. Antigene solubile - lipooligolizaharidul (LOZ - cu lan zaharidic scurt) denumit i endotoxin, eliberat numai dup moarea germenilor,permite mprirea meningococilor n 12 serotipiri. -pilii cu rol n aderarea germenului ce celula gazd, - porinele cu rol n aderena la epitelii i fagocite Este de remarcat c meningococul nu produce variaii antigenice. de Sunt germeni patogeni cu virulen sczut. 70% din infectiile meningococice sunt asimptomatice. Cea mai frecvent infecie este rinita cu caracter benign; rar infecia poate disemina pe cale hematogen determinnd bacteriemii autolimitate (erupii maculo- papuloase, artralgii, mialgii, miocardite; poate invada meningele, alterea bariera hematoencefalic i crete presiunea intracranian.

8. Caractere patogenitate

26

27

Activarea proceselor inflamatorii prin eliberarea de endotoxin poate conduce la apariia unui sindrom de coagulare intravascular diseminat cu prognostic infaust. 9. Rspunsul imun Este de tip umoral. n general este slab i nesemnificativ pentru c infecia rmne cantonat la poarta de intrare. Meningita meningococic induce un rspuns imun mai puternic, conferind protecie specific de grup. Se manifest prin: - rinite meningococice benigne, - sinuzite benigne, - faringite benigne, - meningita cerebrospinal meningococic ( MCSE). De cele mai multe ori este vorba despre o infecie generalizat (meningococemie), meningita fiind doar urmarea unei localizri secundare. Sindromul WATERHOUSE-FRIDERICHSEN -ocul endotoxinic , nerecunoscut i netratat corespunztor provoac moartea n 3 zile de la debut. Se manifest printr-o vasodilataie generalizat i creterea permeabilitii pereilor vasculari, ajungndu-se chiar la o extravazare a hematiilor n esuturi. Se nsoete de: - purpura fulminans, - coagulopatie de uzur, - oc i blocaj suprarenal. Infecia meningococic cunoscut n zonele tropicale i temperate, nu i se poate preciza incidena real. Meningita meningococic afecteaz n special copiii mici (0-4 ani ) i adolescenii n perioadele interepidemice. Serogrupul B circul preferenial n Europa de Vest, iar serogrupul A n Europa de Est. Sursa de infecie: exclusiv uman este reprezentat de bolnavi (cu rinofaringit sau meningit meningococic) i de purttori sntoi sau convalesceni. Ci i mecanisme de transmitere: calea aerian prin picturi Flgge mecanism direct; sau mai rar indirect prin obiecte recent contaminate. Receptivitatea este general, condiionat de vrst, rezistena natural nespecific i de starea de imunitate a organismului . Vaccinarea antimeningococic se poate practica cu caracter profilactic utiliznd vaccinuri polizaharidice monovalente (grup A sau C), bivalente (AC) i tetravalente (ACWY). Pentru serogrupul B nu exist vaccin. Sezonalitatea este n sezonul rece i umed (iarn - nceput de primvar) n zonele temperate i n sezonul uscat (noiembrie -martie) la tropice. Factorii favorizani: factorul climatic natural precum i factorii economico-social (evolueaz mai frecvent n colectiviti seminchise de copii i adolesceni).

10. Boala la om

11. Epidemiologie

27

28

BACILI GRAMM NEGATIVI AEROBI , FACULTATIV ANAEROBI FAMILIA PARVOBACTERIACEAE Reunete bacterii ce posed un echipament enzimatic srac, motiv pentru care necesit condiii speciale pentru cultivare, crescnd cu greutate pe mediile de cultur artificiale. Familia Parvobacteriaceae cuprinde mai multe genuri importante pentru patologia uman: Genul Genul Haemophilus Brucella Genul Legionella Genul Bordetella Genul Campylobacter Genul Pasteurella Genul Helycobacter Genul Francisella

GENUL HAEMOPHILUS Taxonomie Genul Haemophilus este ntr-o permanent schimbare, unele specii sunt eliminate, altele candideaz pentru eliminare, altele sunt nou incluse sau nou identificate. Dintre speciile incluse enumerm: Haemophilus. influenzae, Haemophilus aegyptius, Haemophilus ducreyi - la om; Haemophilus suis, Haemophilus parasuis, Haemophilus influenza- murium, Haemophilus ovis, Haemophilus somnus, etc- la animale care determin n special antropozoonoze. HAEMOPHILUS INFLENZAE A fost izolat de Pfeiffer n l892 i incriminat n mod eronat ca agent etiologic al pandemiei de grip care a evoluat n lume n anii 1890-1892. 1. Definiie Coccobacili i / sau bacili, uneori de form filamentoas, cu grade diferite de polimorfism, Gramm negativi, nesporulai, imobili, aerobi sau facultativ anaerobi, dependeni de factorii de cretere X i/sau V prezeni n snge. Face parte din flora normal existent pe mucoasa tractului respirator, mucoasa conjunctival, putnd coloniza sporadic intestinul, mucoasa genital, uretra anterioar la peste 80 % dintre persoanele sntoase. Poate deveni patogen oportunist la persoanele imunodeprimate.

2. Habitat

28

29

3.Caractere morfologice

Cocobacil mic de 0,5- 2 m, dispus uneori n lanuri scurte. Imobil, nesporulat. Este Gramm negativ, dispus n general extraleucocitar. Pe culturi tinere i pe medii bogate este capsulat pe cnd n culturile vechi pe lng formele cocobacilare se pot vedea bacili de mrimi variabile i forme filamentoase care pierzndu-i capsula ridic probleme de diagnostic diferenial microbiologic. Se dezvolt optim n mediu umed cu CO2 5-10%, la temperatura de 35 C- 37 C, pH- 7,6, incubat minimum 24 - 48 de ore . Este un germene pretenios care necesit pentru cultivare factori ai coagulrii: factorul X (hemina) i factorul V ( geloza chocolat). Haemophylus influenzae crete pe medii de cultur n care componentele globulelor roii sunt eliberate n mediu, n urma distrugerii hematiilor sub aciunea cldurii sau prin digestie pepetic. Factorul X se mai gsete i n esuturi animale i n drojdie. Factorul V este termolabil, identificat ca fiind nicotinamid adenin dinucleotid (NAD) i ia parte la procesele de oxidoreducere ale microbului. S-a observat c Haemophilus influenzae crete mai abundent i dezvolt colonii mai mari n imediata vecintate a coloniilor de stafilococ care elaboreaz factorul V (fenomen denumit satelitism sau doic). Pe mediile de cultur (geloz ocolat) coloniile sunt mici, grilucioase sau semiopace, netede, plate sau convexe, cu margini precis delimitate, transparente, asemntoare picturilor de rou sau de condens, pulverulente. Tulpinile capsulate produc colonii mai mari pn la 1 3 mm , mucoide , cu tendina de confluare i pot prezenta cnd sunt observate n lumina transmis oblic, fenomenul de iridiscen. Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi. Fermenteaz slab i inconstant glucoza i zaharoza. Tulpinile ncapsulate produc indol transformnd triptofanul n indol. Reduc nitraii n nitrii. Sunt mprii n mai multe biotipuri ( a- f) pe baza unor teste biochimice.

4. Caractere de cultur

5.Caractere biochimice

6. Rezistena n mediu, Puin rezistent n condiiile mediului exterior transmiterea lui se la ageni fizici, chimici realizeaz numai prin picturile lui Phlgge, motiv pentru care se i biologici recomand nsmnarea produselor patologice pe medii de cultur chiar la patul bolnavului. n sput poate rezista 24 48 de ore. Pentru conservarea germenilor este necesar liofilizarea sau congelarea la - 700 C. Este distrus de cldura uscat la 560 C n 30 de minute. Este sensibil la uscciune, la aciunea antisepticelor uzuale i la aciunea antibioticelor (tetraciciline, cloramfenicol, polimixine,

29

30

etc) i a sulfamidelor. Este un germene penicilinorezistent. 7. Structur antigenic - antigenul polizaharidic capsular pe baza cruia specia este mprit n 6 serotipuri: a, b, c,d ,e, f. Tipurile se difereniaz pe baza reaciei de umflare a capsulei i prin imunofluorescen. Haemophilus influenzae tip b frecvent implicat n mbolnvirile respiratorii la copii, prin antigenul su poliribozil - ribitol - fosfat (PRP) prezint nrudiri antigenice cu penumococul, streptococii piogeni, specii saprofite de stafilococi, enterococi. Tipul b produce bacteriocine. Anticorpii anticapsulari sunt protectori, stimuleaz fagocitoza i au aciuni bactericide. - antigene somatice: antigenul M este un antigen de suprafa, labil, comun tuturor tulpinilor de Haemophilus influenzae i substana P care face parte din corpul bacteriei.. - endotoxina (antigenul O) se elibereaz dup moartea germenilor. Germenul este patogen prin capacitatea de multiplicare la poarta de intrare i prin toxigenez datorate eliberrii endotoxinei. Nou nscuii pn la 3 luni sunt protejai de infecii datorit anticorpilor materni. Peste aceast vrst pn la 5 ani, copiii sunt receptivi la infecia cu Haemophilus influenzae, fiind frecvent incriminat n etiologia meningitelor. Imunitatea natural se instaleaz peste vrsta de 8 ani. Vaccinurile cu polizaharidul capsular n componen sunt protectoare dar nu induc un rspuns imun semnificativ pentru grupa de vrst cu riscul cel mai nalt la infecie. Afecteaz frecvent mucoasele tractului respirator, unde n asociaie cu alte specii bacteriene (streptococi piogeni, pneumococi) sau virale cauzeaz infecii ale cilor respiratorii: de la catar nazofaringian, la traheite, bronite, pneumonii, otite, sinusite, mastoidite, pluerite i pericardite, artrite. Poate determina o laringotraheit obstructiv fulminant care necesit intervenie de urgen (traheotomie sau intuibaie prompt) pentru conservarea funciei respiratorii. Prin ptrunderea microorganismului n torentul, circulator poate determina: meninigite, septicemii, pleuerite, pericardite, artrite, osteomielite. Sursa de infecie: omul sntos sau purttorul sntos de germeni. Calea i mecanismul de transmitere este direct - aerogen, prin picturi Flugge. Receptivitatea este general indiferent de vrst, cu predominen pentru copiii 0- 5 ani . Profilaxia nespecific se realizeaz prin creterea rezistenei

8. Caractere patogenitate 9. Rspunsul imun

de

10. Boala la om

11.Epidemiologie

30

31

generale a organismului Se poate practica cu bune rezultate la grupele de risc o vaccinare cu un vaccin preparat din polizaharidul capsular legat de toxoidul difteric. Vaccinarea nu mpiedic portajul, motiv pentru care n circumstane epidemiologice se indic profilactic antibioticoprofilaxia (rifampicin).

HAEMOPHILUS DUCREYI (Streptobacillus ulceris mollis Ducreyi). 1. Definiie 2. Habitat Cocobacili dispui intra i extraleucocitari, Gramm negativi. Nu se semnaleaz ca germene saprofit la om. Este strict patogen, se gsete pe mucoasa genital, fiind considerat agentul etiologic al ancrului moale. Cocobacili fini, de dimensiuni mici (0,5 mili- 2 mili), colorai bipolari, dispus n perechi sau lanuri scurte sau medii (lan de biciclet). Nesporulat, imobil, ncapsulat, Gramm negativ.

3.Caractere morfologice

4. Caractere de cultur

Recolta produsului patologic este recomandat a se preleva de la baza ancrului. Cultivarea este dificil, necesitnd factorul X i o atmosfer de 10% CO2 i o temperatur de 33 C. Mediile trebuie s utilizeze snge proaspt de iepure sau cal, trebuie s aib o umiditate constant i suprafaa neted. Pe mediul cu snge coloniile produc hemoliz . Invadarea mediului de microorganisme de contaminare se previne prin nglobarea n mediul utilizat a unor substane sau asociaii de substane selective precum: bacitracin, lincomicin, vancomicin, etc. Pe geloz snge de iepure se dezvolt colonii mici, izolate, convexe, strlucitoare, pulverulente. Dup aproximativ 2- 3 de zile coloniile se mresc i capt n centru o depresiune crateriform. Exist tulpini care pe mediile cu snge produc un satelitisim discret n jurul striurilor cu stafilococ i nu produc acest fenomen n jurul discurilor cu factorul V. 5.Caractere biochimice Este un germene aerob, facultativ anaerob. Unele tulpini produc hemolizin . Reduc nitraii n nitrii. 6. Rezistena n mediu, Puin rezistent n mediul exterior, calea i mecanismul de la ageni fizici, chimici transmitere acceptat fiind cea sexual. i biologici Sub aciunea cldurii moare n 60 de minute la 560 C.

31

32

Sublimatul 0,5% l omoar n cteva minute. Este sensibil la uscciune. Dezinfectanii obinuii l inactiveaz rapid. Este sensibil la aciunea antibioticelor: cloramfenicol, tetracicline, kanamicina, streptomicin, biseptol, rifampicin. Poate deveni rezistent la antibiotice i chimioterapice motiv pentru care nainte de nceperea tratmaneului, antibiograma este util. 7. Structur antigenic Prezint un antigen capsular, antigen somatic i endotoxin (antigenul O). Toate tulpinile de Haemophilus ducreyi sunt identice din punct de vedere antigenic. Este dat de capacitatea de multiplicare i de toxigenez (endotoxin). Nu are capacitate de invazivitate. Rspunsul umoral este lipsit de importan practic. Apare i un rspun umoral prin hipersensibilizare, anticorpii evideniindu-se i dup 10 ani de la infecie. Exist i un rspuns imun celular, dar nu exist imunitate fa de reinfecie. Se numete ancrul moale deosebindu-se de ancrul dur din sifilis. Dup o incubaie de 3 - 5 7 zile de la contactul sexual infectant, apare pe mucoasa genital sub forma unei ulceraii necrotice cu baza moale, cu margini neregulate, dureroase - ancrul. Leziunea poate exprima i o secreie purulent. Se nsoete de obicei de o inflamaie dureroas a ganglionilor limfatici locoregionali care pot i supura. Boala se oprete de obicei la acest stadiu, fr a se generaliza. Sursa de infecie: omul bolnav cu diferite forme de boal. Calea i mecanismul de trasmitere: direct pe cale sexual. Receptivitatea este general la persoanele active sexual. Profilaxie nespecific: depistarea activ a surselor de infecie i tratarea lor, educaie pentru sntate referitoare la un mod de via sntos care s exclud libertinajul sexual.

8. Caractere patogenitate 9. Rspunsul imun

de

10. Boala la om

11.Epidemiologie

HAEMOPHILUS AEGYPTIUS (Haemophilus conjunctivitidis, bacilul lui Koch- Weeks). Este un germene hemofil care s-a adaptat la conjunctiva omului. Necesit spre a fi cultivat att factorul X ct i factorul V. Pe mediul chocolat dezvolt colonii cu margini neregulate. Fermenteaz glucoza. Produce indol.

32

33

Aglutineaz hematii umane. Reduce nitraii n nitrii. Este foarte contagios, producnd conjunctivita subacut epidemic.

GENUL BRUCELLA Cuprinde mai multe specii dup cum urmeaz: Specia Brucella abortus Brucella melitensis Brucella. suis Brucella canis Brucella neotomae Brucella ovis Brucella maris 1. Definiie 2. Habitat Bio grupe 7 (1-6, 9) 3 5 1 1 1 1 Gazde naturale bovine ovine, caprine porcine, iepuri, reni, roztoare cini obolanul de deert ovine mamifere marine

Cocobacili sau bacili scuri, Gramm negativi, imobili, nesporulai, inconstant capsulai, strict aerobi. Zoonoz care infecteaz de preferin animale, omul fiind mbolnvit accidental, dar se poate regsi i pe diferite elemente de mediu nconjurtor unde poate rezista mult timp (sol, echipamente infectate, etc.) datorit unor transformri ale brucelellelor n forme L (persisteri). Bacili fini, cococbacili de 0,6-l,5m, aezai izolai, n diplo sau n grmezi neregulate. Grammnegativi, se coloreaza bipolar. Nesporulai, neciliai, necapsulai (eventual utiliznd tehnici speciale de colorare se poate evidenia o capsul fin). n produsele patologice au o dispoziie intracelular iar n culturile vechi pot prezenta un polimorfism accentuat. Brucellele cresc foarte greu n 3-4 sptmni pe medii simple (colonii S), dar lichidul de ascit, ficatul, serul sanguin, sngele glicerina, glucoza sau mai recent agarul cu triptoz de soia adugate la mediu le favorizeaz creterea. Este necesar suplimentarea mediului de cultur cu amestecuri selective de bacitracin, polimixin, vancomicin, acid nalidixic, nistatin. Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi. Temperatura optim de cretere este 370 C, la un pH de 6,6-7. Brucella abortus necesit o atmosfer CO2 10% pentru izolare. Tulbur mediul lichid formnd un depozit. Pe mediile solide dezvolt colonii mici, rotunde, bombate, translucide, gri- glbui,

3.Caractere morfologice

4.Caractere de cultur

33

34

pulverulente. Pentru izolarea Brucellelor din hemoculturi se folsete n mod obinuit mediul bifazic Costaneda care se analizeaz timp de 3-4 sptmni. Se pot cultiva i pe membrana corioalantoidian a oului embrionat de gin. 5.Caractere biochimice Au activitate metabolic modest. Sunt germeni catalazopozitivi, oxidazo-pozitvi cu excepia Brucellei ovis i neotoma nu lichefiaz gelatina. Criteriille pentru identificarea speciilor i biogrupelor sunt: producerea de ureaz i H2 S, prezena unei atmosfere bogate n CO2 i a mediului mbogit cu tionin i fuxin bazic pentru cretere, aglutinarea cu antiserurile monospecifice (A,M,R), sensibilitatea la bacteriofagul Tbilisi, sondele ADN.

6. Rezistena n mediu, Germeni rezisteni n condiiile mediului nconjurtor. Rezist la la ageni fizici, chimici uscciune, rmnnd viabili n praf i o lun de zile i cteva luni n i biologici lapte i carne. Sunt moderat sensibili la cldur i aciditate. Sunt sensibili la substanele dezinfectante uzuale. Se citeaz frecvent rezistena la multiple antibiotice, fiind necesare pentru tratament asocieri de antibiotice i chimioterapice. 7. Structur antigenic Deine o structur antigenic relativ complex. Este comun pentru toate speciile de Brucella. Tulpinile capsulate prezint un antigen capsular K. Este descris un antigen de suprafa L, asemntor cu antigenul Vi de la Salmonelle Dein i antigene O de perete care au 2 fraciuni notate A i M distribuite inegal. La Brucella melitensis predomin fraciunea M, la Brucella abortus fraciunea A, iar la Brucella suis ambele fraciuni sunt distribuite egal. Endotoxina (antigenul O, lipopolizaharidul) prezent la nivel parietal are n compoziie acizi grai, fiind strns legat de structuri proteice care-i confer o activitate biologic distinct. Pe lng aceste antigene principale mai exist nc 30 de antigene diferite printre care antigene heterofile comune cu Vibrio holeric, Salmonella enteritidis, Proteus, Yersinia enterocolitica. Dat de capacitatea de multiplicare i invazivitate, provocnd infecii inaparente, acute sau cronice. Nu produc exotoxine dar elaboreaz o endotoxin de natur gglucido lipido-polipeptidic. Brucellele se multiplic intracelular de aceea sunt destul de rezistente la antibiotice. Pare s existe un factor de patogenitate neprecizat nc care este produs in vivo pare favorizeaz supravieuirea intracelular a germenilor.

8.Caractere patogenitate

de

34

35

9. Rspunsul imun

Imunitate natural nu exist, dei att la om ct i la animale se semnaleaz un oarecare grad de rezisten. In urma infeciei se instaleaz o imunitate mixt bazat pe prezena concomitent a anticorpilor serici i a imunitii celulare. Rspunsul imun umoral este puternic dar nu i protector. Este util n diagnostic, bazndu-se pe activitatea limfocitelor B stimulate de prezena germenilor. Rspunsul imun celular este protector dar numai pentru suprainfecie, fenomen denumit premuniie. Rspunsul imun celular i infecia primar se evideniaz prin intradermoreacia la brucelin (testul Burnet). Reacia se citete la 72 - 96 de ore de la inoculare. Prezena la locul administrrii a eritemului, edemului, eventual necrozei susin pozitivitatea reaciei (rspuns imun celular, consecutiv infeciei). Se manifest clinic: acut, subacut sau cronic. Poarta de intrare cel mai frecvent incriminat este cea cutanat printr-o soluie de continuitate sau tractul digestiv prin consum de lapte sau carne infectat cu brucelle. Incubaia de l-6 sptmni cteva luni, cu debut de obicei insidios i nespecific: stare general moderat alterat, cefalee,astenie, febr, artralgii, transpiraii abundente. n perioada de stare (3-4 sptmni) simptomatologia este polimorf, descriindu-se aproximativ 200 de semne clinice care pot apare n bruceloz. Poate evolua spre maladia cronic care dureaz ani de zile, cu diagnostic foarte dificil de stabilit. Sursa de infecie: animalele bolnave sau infectate (cadavre, avortoni) ca i produsele lor (carne, lapte, derivate de lapte) care pot polua elemente de mediu nconjurtor. Ci i mecanisme de transmitere: indirect -digestiv, direct - respiratorie, cutanat, conjunctival. Receptivitatea: general, indiferent de sex, vrst, mai frecvent n mediul rural Bruceloza este considerat boal profesional pentru cresctorii de animale, blnari, buctari, mcelari, medici veterinari, medici de laborator. Profilaxia nespecific: pasteurizarea laptului, evitarea contactului cu produse animale posibil infectate, protecia personalului cu echipamente adecvate, purtate corect, aplicarea unor msuri eficiente de dezinfecie la locul de munc cu risc crescut. Profilaxie specific pentru categoriile de risc se recomand un vaccin preparat din germeni vii atenuai.

10. Boala la om

11. Epidemiologie

35

36

GENUL BORDETELLA Taxonomie - nrudit pe considerente filogenetice comune cu genul Alcaligenes. Recunoate n prezent 6 specii: - Bordetella pertussis - Bordetella parapertussis, - Bordetella bronchoseptica, strns nrudite ntre ele din punct de vedere genetic, fiind considerate subtipuri ale unei specii genomice unic; - Bordetella avium, - Bordetella hinzii, - Bordetella holmesii.

Specia Bordetella pertussis Bordetella parapertussis Bordetella bronchoseptica Bordetella avium Bordetella hinzii, Bordetella holmesii

Habitat Specific uman Specific uman

Determinare clinic Tusea convulsiv Sindrom asemntor, dar mai benign Animale (cine, pisic, porc, Rinite atrofice, bronhopneumonii iepure, cobai, oarece, la animale; s-a izolat i de la obolan), maimu, om . pacieni imunodeficieni Psri Coriza curcanilor Psri, om. S-a izolat din hemoculturi la pacieni imunocompromii SIDA Om Pacient imunodeficient BORDETELLA PERTUSSIS

Istoric: a fost izolat pentru prima dat n anul 1906 de Bordet i Gengou 1. Definiie 2. Habitat Cocobacili de mici dimesiuni imobili, nesporulai, Gramm negativi, strict aerobi,au metabolism respirator dar sunt inactivi metabolic. Germeni - parazii intracelulari pentru omul bolnav dar i pentru unele animale cu snge cald. Specia are tropism pentru epiteliul respirator. Nu a fost izolat niciodat din mediul extern. Cocobacil cu dimensiuni ntre 0,2m0,5m/0,5m1m, neflagelat, imobil, nesporulat. Germene Gramm negativ dispus frecvent izolat sau n pereche i foarte rar n lanuri scurte cu tendin s devin pleomorfi, filamentoi sau bacilari prin subcultivare. n culturile recente prezint capsul evideniabil prin coloraii speciale. n primele ore de cultivare sunt prezeni pili ataai peretelui

3.Caractere morfologice

36

37

bacterian. Coloraia cu albastru de toluidin evideniaz metacromatice dispuse bipolar. 4. Caractere de cultur

granule

Germene pretenios, nsmnarea produsului patologic trebuie efectuat pentru creterea anselor de cultivare, la patul bolnavului, prin tehnica plcii tuite . Temperatura optim de cultivare este apreciat la 350 C- 370 C, n mediu strict aerob. Solicit pentru cretere aminoacizi i vitamine ca substane nutritive; glutation, ioni de fier ca ageni reductori; cloruri i fosfai ca sruri minerale; acizi grai i peroxizi organici cu aciune neutralizant asupra unor substane inhibitoare, prezente n produsele patologice recolte sau n mediile de cultur. Ca mediul de elecie folosim mediul Bordet-Gengou ce conine agar, macerat de cartof, snge defibrinat de oaie, glicerol. Albuminele plasmatice din acest mediu leag acizii grai i permit dezvoltarea germenilor. Mediile devin selective prin suplimentare cu meticilin sau cefalexin, deoarece antibioticele inhib flora Gramm pozitiv din exudatele nazofaringiene. Contaminarea cu fungi poate fi prevenit prin suplimentarea mediilor de cultur cu amphotericin B. Se incubeaz la termostat n atmosfer umed pe o perioad de 7 zile, cititndu-se zilnic la 48 de ore de la incubare. Coloniile care se dezvolt n 3- 6 zile sunt de tip S, mici, convexe, uor transparente, foarte aderente, cu coloraie metalic asemntoare unor picturi de mercur. In jurul coloniilor exist o zon mic de hemoliz difuz (faz I). Se pot utiliza i alte medii speciale pentru creterea germenilor: mediul Regan Lowe care prezint avantajul unei eficiene mai lungi pn la 8 sptmni, coloniile fiind mici, convexe, strlucitoare cu opalescen perlat. Strict aerob. Temperatura optim de dezvoltare: ntre 350 C- 370 C. Testul oxidazei pozitiv. Nu scindeaz ureea. Produc catalaz i hemolizine. In subculturi nu au nevoie de factorii X i V.

5.Caractere biochimice

6. Rezistena n mediu, Germene foarte puin rezistent n mediul extern: rezist la ageni fizici, chimici maximum 2 ore la temperatura camerei; lumina solar l distruge n 60 i biologici de minute, iar la 550 C este distrus n 30 de minute. i poate pierde rezistena chiar n macroroganism, trecnd din forma S, virulent - faza I spre fazele intermediare II i III i n final faza IV n care se regsesc forme R avirulente. Este rezistent la penicilin dar este sensibil la macrolide (Eritromicina, Claritromocina), Ampicilin, Cotrimoxazol, Tetraciclin, Clormafenicol. 7. Structur antigenic Este deosebit de complex, recunoscnd:

37

38

- antigenul K de suprafa (aglutinogenul) este de natur proteic. Exist aglutinogene specifice de gen i de specie. Aceste microorganisme au capacitatea de a-i modifica serotipul in vitro cu multiple implicaii n epidemiologie. Pe baza antigenului K se disting 4 faze antigenice (I-IV). Germenii din faz I sunt proprii tulpinilor izolate pe medii mbogite; coloniile izolate sunt de tip S virulente, capsulate cu o mare putere imunogen motiv pentru care se utilizeaz la fabricarea vaccinurilor specifice. Fazele II i III sunt considerate intermediare, iar tulpinile de faz IV sunt considerate de tip R degradate antigenic, nepatogene, netoxigene; - hemaglutinina fimbrial (FHA) de natur proteic, cu structur filamentoas situat la suprafaa germenelui - pertactina protein nefimbrial de suprafa; - antigene din peretele celular - lipopolizaharidul (endotoxina), comun germenilor Gramm negativi, cu efect piretogen i histaminosensibilizant. S-au izolat i alte fraciuni antigenice: - toxina pertussis (TP) exotoxina care este un factor major de virulen, antigenic i imunogen, format din 6 subuniti legate necovalent. Altereaz funciile celulei gazd, mpiedicnd n cazul fagocitelor- chematoxisul, fagocitoza i aciunile bactericide. Efectele sistemice ale toxinei includ limfocitoza, alterarea unor activiti hormonale cum ar fi creterea produciei de insulin (hipoglicemie ) i augmentarea sensibilitii la histamin (inducnd mrirea prermeabilitii capilare, hipotensiune, oc); - adenilatciclaza - enzim cu caracter invaziv care ptrunde intracelular i determin hipersecreie de mucus apos i inhib activitatea fagocitar a macrofagelor i leucocitelor; - toxina letal dermonecrotic compus din 4 subuniti are o aciune vasoconstrictoare producnd necroze ischemice n special pulmonare; - citotoxina traheal substan toxic pentru epiteliul ciliat respirator care determin ciliostaza i moartea celulelor ciliate, prin sinteza n exces de aci nitric; stimuleaz i eliberarea de interleukin -1 ceea ce are efect piretogen; 8. Caractere patogenitate de Germenii sunt patogeni prin localizare i prin capacitatea lor de multiplicare i de toxigenez. Infecia nu depete tractul respirator. Capacitatea de multiplicare este dat de prezena capsulei i antigenului de perete, producnd necroza i exfolierea mucoasei respiratorii cu apariie de exudat. Toxigeneza este dat de endotoxin care are aciune local i de exotoxin care are tropism pentru SNC. Bacteriile se multiplic rapid, interfer cu activitatea mucociliar normal i produc toxine care determin apariia manifestrilor clinice). Este de tip umoral, fiind puternic, protector i de durat. Apar

9. Rspunsul imun

38

39

titruri nalte de anticorpi anti TP ce pot persista tot timpul vieii fiind corelai cu imunitatea fa de o nou mbolnvire i anticorpi anti FHA. Imunitatea nnscut este nesemnificativ, copiii mici fiind foarte receptivi la infecia cu Bordetella pertussis. 10. Boala la om Se numete tuse convulsiv sau tuse mgreasc Incubaie: 7- 10- 21 zile. Faza cataral: evolueaz cu simptome necaracteristice fiind perioada cnd microorganismele colonizeaz cile respiratorii superioare i determin un catar traheo-bronic: febr, strnut, tuse cu expectoraie predominent nocturn. Dureaz aproximativ 2 sptmni perioad cnd germenele este foarte virulent. Perioada de stare (paroxistic) reprezint faza toxemic cu crizele tipice de tuse spastic, chintoas cu caracter nocturn care se termin cu vom i posibilitatea de aspirare a vomismentelor. Pot aprea convulsii, cianoz, stare de anxietate. n acest stadiu apare limfocitoza periferic i hipoglicemia datorate suntezei de TP (toxin pertussis). Boala este anergizant, germenul este citolitic pentru epiteliul respirator, deschiznd astfel o poart de intrare pentru o serie de complicaii bacteriene cu stafilococ, Haemophylus influenzae, bacil piocianic, enterobacterii. Pot apare astfel complicaii pulmonare i la nivelul sistemului nervos central. Convalescena este de durat: 3-4 sptmni. In perioada de stare i n convalescen bolnavul nu mai este contagios (sunt prezeni germeni de faza IV). Maladie cu rspndire general, cu un grad nalt de contagiozitate 40%, maxim n perioada cataral a bolii. Sursa: exclusiv uman reprezentat de omul bolnav n faza cataral a bolii, cu form tipic sau atipic de boal. Ci i mecanisme de transmitere: direct - aerogen, prin picturile lui Pflugge i excepional indirect prin obiecte personale recent contaminate ntruct germenii nu rezist n mediul extern dect cel mult 2 ore. Receptivitatea este general, prezent la natere se epuizeaz fie prin trecerea prin boal , fie prin vaccinare. Exista un profilactic eficient vaccinul DTP (diftero- tetano pertussis), introdus din anul 1930. Vaccinul DTP existent conine pe lng componenete protectoare i componente care induc reacii adverse uneori necontrolabile, studiindu-se n prezent folosirea pentru componenenta peertussis a unui vaccin acelular n care s fie inclus toxina pertussis inactivat. Factori favorizani: naturali - sezonalitate de iarn primvar n zona temperat unde boala evolueaz endemic i factori economicosociali colectivitile de copii i adolesceni unde aglomeraia, lipsa dezinfeciei curente cresc riscul mbolnvirilor.

11. Epidemiologie

39

40

GENUL PASTEURELLA Taxonomie -Studii de hibridare ADN-ADN, ADNARNr demonstreaz heterogenitatea Genului Pasteurella i a Genului Actinobacillus, impunndu-se reclasificri ntre aceste dou genuri . Genul Pasteurella includea pe baza unor criterii de structur, biochimice i antigenice urmtoarele specii: - Pasteurella multocida specia tip, - Pasteurella pneumotropica nrudit cu Actinobacillus , - Pasteurella haemolytica - nrudit cu Actinobacillus, - Pasteurella ureae reclasificat ca Actinobacillus ureae, - Pasteurella.gallinarum, - Pasteurella anatipestifer, - Pasteurella aerogenes - nrudit cu Actinobacillus, - Pasteurella bettyae specie nou ncadrat.

Specia Pasteurella multocida

Pasteurella bettyae Pasteurella aerogenes Pasteurella pneumotropica Pasteurella haemolytica Pasteurella ureae (Actinobacillus ureae)

Gazde naturale Implicaii clinice la om Animale: bovidee, porcine, Portaj nasofaringian. caprine, ovine, cini, pisici. Infecii de plag mucat de animale Psri bolnave. Infecii pulmonare, meningite, oc septic, septicemii. Nu se pot preciza Infecii materno-fetale: plgi chirurgicale, leziuni supurative ale degetelor i piciorului Iepuri i cobai - ocazional Infecii de plag dup muctura de animal contaminat oarec, cini, pisici Infecii de plag dup muctur de animal, endocardite, septicemii. Ovine, caprine, bovine, Rar infecii la om: pneumonii, galinacee septicemii. Comensal n cile respiratorii Ocazional determin infecii ale superioare la om tractului respirator sau se izoleaz de la pacieni cu ozen.

1. Definiie

Cocobacili, mici, polimorfi, imobili, Gramm negativi, aerobi facultativ anaerobi, catalazo i oxidazo- pozitivi, reduc nitraii i nitriii, produc indol, patogeni n special pentru animale. Germenii se gsesc cantonai pe mucoasa tractului respirator superior i gastrointestinal la variate gazde animale slbatice i domestice precum i la psri. Omul se infectraz accidental prin contactul cu animale infectate.

2. Habitat

40

41

3.Caractere morfologice

Sunt germeni mici cu dimensiuni cuprinse ntre 0,3m 1 m/ 1m -2m, de form cocbacilar sau cocoid, Gramm negativi, ce se pot colora frecvent bipolar. Nu prezint cili. Unele tulpini sunt ncapsulate. Pot prezenta un polimorfism accentuat pretndu-se la erori de diagnostic cu germeni din genul Neisseria, Haemophilus,Yersinia, Bacillus, Enterobacteriaceae. Germeni pretenioi nutritiv se pot cultiva pe agar-snge sau agarocolat, necesitnd un inocul bogat cantitativ din produsul patologic. Germeni aerobi, facultativ anaerobi cresc la o temperatur optim de 370 C Pe geloz snge dezvolt colonii de tip S mici, rotunde, convexe, netede, strlucitoare, transparente, nehemolitice. Pasteurella multocida dezvolt colonii cenuii-glbui i brunific uor mediul nconjurtor. Dup 5 zile cresc, ajungnd la un diametru de 6 mm,cu centrul opacificat, devenit granular, periferia coloniei cenuiuglbuie, i cu inele concetrice sau striaii fine. Germenii ncapsulai prezint colonii mucoase de tip M. Diferenierea speciilor se face pe baza caracterelor biochimice Fermenteaz carbohidraii. Produc oxidaz i catalaz.

4. Caractere de cultur

5.Caractere biochimice

6. Rezistena n mediu, Sunt germeni puin rezisteni la condiiile mediului la ageni fizici, chimici nconjurtor. i biologici Sunt sensibili la aciunea factorilor fizici i chimici; lumina solar i omoar n 2-3 zile, iar cldura umed de 560C n 45 de minute. Sunt sensibili la sublimat 0,1%, clorura de var 5%, etc. Unii colorani ca albastrul de metilen, violetul de genian inhib multiplicarea germenilor din acest gen. Sensibili la aciunea antibioticelor, fiind necesar efectuarea antibiogramei. 7. Structur antigenic Prezint un antigen somatic O. Tulpinile capsulate au fost mprie n 5 serotipuri n funcie de caracterisiticile antigenului capsular (A,B,C,D,E). La tipul A capsula este format n special din acid hialuronic. Este patogen prin multiplicare i invazivitate. Capsula reprezint cel mai important factor protector, inhibnd fagocitarea germenilor i permind invadarea organismului gazd. Germenii au capacitatea de a se multiplica n esuturi att extracelular ct i intracelular Se recunoate o stare de imunitate postiinfecioas, rspunsul imun fiind att de tip umoral ct i de tip celular.

8. Caractere patogenitate

de

9. Rspunsul imun

41

42

10. Boala la om

a. Pasteurella multocida - infecii locale: celulite, abcese, osteomielite aprute la om dup mucturi provocate de animale infectate (cine, pisic). - infecii ale tractului respirator (pneumonii, abcese pulmonare), - infecii sistemice (bacteriemii, meningitie, septicemii). 2. Pasteurella pneumotropica (P.p.) descris prima dat n l950 de Jawetz, se izoleaz din infeciile cu caractere enzootic de la oarece, iepure, roztoare diverse, crora le cauzeaz conjunctivite sau pneumonii. La om n urma unei mucturi de ciine sau pisic determin infecii tegumentare, meningite sau chiar septicemii.

11.Epidemiologie

Sursa de infecie este de obicei animal, poarta de intrare fiind cutanat de regul o plag sau o zgrietur, tabloul clinic fiind deosebit de variat. Calea de transmitere direct o plag provocat de regul prin muctura de cine sau pisic sau prin neptur accidental (zgrietur). Sunt posibile i accidente de laborator. Receptivitatea - general. Infecia la om are caracter sporadic. Limitarea contactului cu animale domestice i slbatice prezint cea mai sigur msur de control a infeciei cu Pasteurelle.

42

43

GENUL FRANCISELLA Taxonomie Genul este format din 3 specii i anume: - Francisella tularensis cu 2 biovaruri A i B cunoscute i nc unul propus pentru zona centroasiatic. - Francisella novicida care cu toate diferenele fenotipice este identic genetic cu Francisella tularensis. - Francisella philomiragia specie distinct dar strns nrudit cu cele 2 specii mai sus prezentate.

1.Definiie

Cocobacili foarte mici, Gramm negativi, imobili, oxidazonegativi, catalazo-pozitivi slab, strict aerobi. Necesit pentru cultivare cistein sau cistin. Atac zaharurile oxidativ lent, nu produc gaz. Produc H2S. Francisella tularensis infecteaz animale slbatice (iepuri, obolani, oareci, popndi, bizami, veverie) i domestice dar i psrile. Se mai regsete la unele insecte: cpue, nari, mute de animale. Francisella novicida izolat de la un obolan moscat. Francisella philomiragia izolat de la pacieni imunocompromii care au avut contact cu apa oceanic. Prelevatele de la pacieni bolnavi colorate uzual rmn negative, doar coloraia imunofluorescent identific Francisella tulrarensis. Cocobacili pleomorfi, foarte mici 0,7m - 1 m /0,2 m - 0,3 m, neciliai, nesporulai, rareori ncapsulai. Sunt Gramm negativi, slab colorai, se colorez de obicei bipolar. Microscopul electronic evideniaz i elemente mai mici de 0,1 microni care pot trece prin filtrele bacteriologice uzuale. Este deosebit de pretenios, crescnd numai pe medii speciale (Francis, McCoy), n atmosfera de CO2 10%, la o temperatur de 37 C n condiii de aerobioz. Cresc lent, dup 24-48 ore de la cultivare colonii mici, punctiforme translucide (tip S). Dup 4 zile diametrul lor crete la 2 mm capt o culoare cenuie, sunt colonii mucoide, uor emulsionabile. Se pot dezvolta i n 2-3 sptmni, dac culturile provin din prelevate paucibacilare. n jurul coloniilor de Francisella tularensis pe mediile cu snge apare o arie de nverzire iar agarul cu snge chocolat este brunificat. Se pot dezvolta n embrionul de gin: pe membrana

2. Habitat

3.Caractere morfologice

4. Caractere de cultur

43

44

corioalantoidian cauznd moartea embrionului . 5.Caractere biochimice Francisella tularensis prezint o activitate biochimic redus. Poate fermenta unii carbohidrai sau alcooli, fr producere de gaz. Este catalazo - pozitiv i oxidazo-negativi. Caracterele biochimice nu au importan practic n diagnosticul curent.

6. Rezistena n mediu, Este un germene rezistent n condiii de mediu extern: 2-3 luni n la ageni fizici, chimici ap, 35 de zile n ghea, 10-60 de zile n sol, 100 de zile n carnea i biologici congelat, 10 zile n pine, 8 zile n lapte, 45-100 de zile pe boabe de cereale. Este distrus rapid de cldur. Este sensibil la dezinfectante i la aciunea antibioticelor: streptomicin, tetracicline. Sunt rezistente la peniciline. 7. Structur antigenic Tulpinile de Francisella tularensis sunt omogene din punct de vedere antigenic. Capsula conine lipopolizaharide i carbohidrai. S-au extras i antigene de la nivelul peretelui celulei bacteriene. Francisella tularensis deine i antigenul somatic O (LPZ) endotoxina. Exist unul sau mai multe antigene proteice nrudite cu antigenele aglutinante ale Genului Brucella. 8. Caractere patogenitate de Factorii de patogenitate nu sunt foarte bine cunoscui. Componentele de suprafa ale celulei (materialul extracelular, capsula) sunt implicate n patogenitate. Endotoxina pare s aib un rol similar n patogenez ca cel al endotoxinei de la Salmonella typhi. Dup infecie, rspunsul imun este durabil, putnd persista toat viaa, fiind mediat att umoral ct i celular. n cadrul rspunsului imun umoral, anticorpii aglutinani apar dup 10 zile de la debutul bolii cresc n perioada de stare a bolii i scad n convalescen, rmnnd la aceste valori ani de zile. Nu au efect protector. Tendina bolii la recderi sau cronicizare care pot apare n condiiile unor titruri ridicate de anticorpi serici sau a rspunsului imun persistent se datoreaz posibilitii de supravieuire intracelular a germenilor. Imunitatea celular repre