2.1.1. Determinarea conținutului de tanine

Principiul metodei: totalitatea compușilor fenolici sînt oxidați de reactivul Folin-

Ciocalteu. Acesta este compus din amestecul acizilor fosfovolframic și fosfomolibdenic, care la

rîndul său se reduce pînă la amestecul de oxizi colorați în albastru. Intensitatea culorii este

proporțională conținutului de compuși fenolici. Intensitatea culorii se determină la

spetrofotometru, iar conținutul substanțelor fenolice se determină după curba de etalonare [13].

Modul de lucru: Într-un vas de 50 ml se plasează 0,5 ml extract, se adaugă cca 25 ml

apă distilată. Se amestecă, apoi se adaugă 2,5 ml de reactiv Folin-Ciocalteu și 10 ml sol. carbonat

de sodiu 20%. Se aduce pînă la cotă cu apă distilată și se agită bine, și se lasă pe 30 min. A fost

măsurată absorbanța la spectrofotometrul „HACH LANGE DR-5000" (fig. 2.2) la lungimea de

undă de

750 nm. Proba martor a fost pregătita la fel, însă fără extract [14]. Rezultatul a fost calculat după

urmatoarea formulă:

mt=C tM t10−3 50V ext 103 [ mg ] (2.3)

unde: mt - masa de taninuri în 0,5 ml extract, mg;

C t -concentrația de taninuri totale, ținînd cont de curba de etalonare, mol/l;

M t -masa molară de taninuri, g/mol;

V ext -volumul extractului, ml.

Pentru a obține cantitatea totală de taninuri din extract, valoarea obținută a fost înmulțită

cu volumul de extract obținut (ml). Pentru a determina concentrația de taninuri (mol/l) a fost

elaborată curba de etalonare.

Figura 2.2 Spectrofotometrul „HACH LANGE DR-5000".

Elaborarea curbei de etalonare

Se pregătește soluția etalon de enotanin (3 mg de tanin obținut din semințe de struguri se

dizolvă în 100ml de apă alcoolizată 10 % ). Într-o serie de baloane cotate de 50 ml se introduce

în ordine crescătoare 0,5; 1; 2,5; 5; 7,5; 10 ml de soluție etalon de tanin. Se adaugă în fiecare

balon cîte 1ml reactiv Folin-Ciocalteu, 10 ml sol. carbonat de sodiu de 20 % și se aduce la cotă

cu apă distilată. Dupa 30 min se măsoară intensitatea optică la spectrofotometru la lungimea de

undă de 750 nm în chiuveta de 10 mm [13].

Figura 2.3 Probele utilizate pentru elaborarea curbei de etalonare.

2.1.8. Metoda de detrminare a pH-ului

Modul de lucru: se alege și se conectează unitatea de schimb corespunzătoarei metodei

dorite.

Se allege și se conectează electrodul corespunzător metodei. Se conectează autotitratorul apăsînd

tasta roșie Stop. Se clătește electrodul, se șterge cu hîrtie de filtru, se introduce în paharul cu

probă, de asemenea, de asemenea, se introduce și capătul biuretei. Se apasă tasta verde Start

pentru a începe titrarea.

Figura 2.6 Aparatul pentru măsurarea pH-ului ˝Titrino plus.Metrohm.