fam. staphylococcaceae

Fam. Fam. StaphylococcaceaStaphylococcacea

eeLP 4LP 4

Fam. Fam. StaphylococcaceaeStaphylococcaceae

Manualul de Bacteriologie Manualul de Bacteriologie Sistematica Bergey – 2004Sistematica Bergey – 2004

Genul Genul StaphylococcusStaphylococcus 38 specii, dintre care 18 au fost 38 specii, dintre care 18 au fost

izolate la om.izolate la om.

Fam. Fam. StaphylococcaceaeStaphylococcaceaeGRUP

Staphylococcus intermedius

GRUPStaphylococcus

simulans

GRUPStaphylococcus saprophyticus

GRUPStaphylococcus

epidermidis

GRUPStaphylococcus

aureus Gen Staphylococcus

Grup Grup Staphylococcus epidermidisStaphylococcus epidermidis Staphylococcus epidermidis sensu strictoStaphylococcus epidermidis sensu stricto Staphylococcus auricularisStaphylococcus auricularis Staphylococcus capitisStaphylococcus capitis Staphylococcus caprae subsp. IStaphylococcus caprae subsp. I Staphylococcus haemolyticusStaphylococcus haemolyticus Staphylococcus hominisStaphylococcus hominis Staphylococcus lugdunensisStaphylococcus lugdunensis Staphylococcus pasteuriStaphylococcus pasteuri Staphylococcus saccharolyticusStaphylococcus saccharolyticus Staphylococcus warneriStaphylococcus warneri

Grup Grup Staphylococcus Staphylococcus saprophyticussaprophyticus

Staphylococcus saprophyticusStaphylococcus saprophyticus Staphylococcus xylosusStaphylococcus xylosus Staphylococcus cohniiStaphylococcus cohnii

Grup Grup Staphylococcus intermediusStaphylococcus intermedius

Staphylococcus schleiferiStaphylococcus schleiferi

Caractere generale:Caractere generale:

coci Gram (+), dispusi izolat, in coci Gram (+), dispusi izolat, in perechi, in scurte lanturi si gramezi perechi, in scurte lanturi si gramezi neregulateneregulate

0,5 – 1,5 0,5 – 1,5 μμmm imobiliimobili nesporulatinesporulati catalazo – (+)catalazo – (+)

Caractere generale:Caractere generale: facultativ anaerobe, dar cresc mai bine facultativ anaerobe, dar cresc mai bine

aerobaerob nepretentiosi nutritiv (cultiva pe nepretentiosi nutritiv (cultiva pe

majoritatea mediilor uzuale)majoritatea mediilor uzuale) tolereaza concentratii de peste 5% NaCl tolereaza concentratii de peste 5% NaCl

(se pot cultiva pe medii cu sare: mediul (se pot cultiva pe medii cu sare: mediul Chapman – Manitol Salt Agar)Chapman – Manitol Salt Agar)

unele specii sunt chiar halofile (tolereaza unele specii sunt chiar halofile (tolereaza concentratii de 10 – 15% NaClconcentratii de 10 – 15% NaCl

HabitatHabitatStaphylococcus aureus Staphylococcus aureus colonizeaza:colonizeaza: vestibulul nazal vestibulul nazal mucoasele organelor cavitare cu mucoasele organelor cavitare cu

comunicare la exterior (colon, vagin)comunicare la exterior (colon, vagin)

de unde contamineaza frecvent de unde contamineaza frecvent tegumentul, tegumentul,

preferand zonele cu umiditate ridicata preferand zonele cu umiditate ridicata (axile, (axile,

perineu, plici interdigitale etc.)perineu, plici interdigitale etc.)

HabitatHabitat

proportia purtatorilor de proportia purtatorilor de S. aureus S. aureus variaza intre 20 – 40% intre adultii variaza intre 20 – 40% intre adultii sanatosi sanatosi

si si ajunge pana la 40 – 70% in mediul de ajunge pana la 40 – 70% in mediul de

spitalspital

HabitatHabitat speciile umane de stafilococi coagulazo speciile umane de stafilococi coagulazo

– (-) colonizeaza narile si tegumentul.– (-) colonizeaza narile si tegumentul. S. epidermidisS. epidermidis – omniprezent in – omniprezent in

biotopurile tegumentarebiotopurile tegumentare celelalte specii au tropisme pentru celelalte specii au tropisme pentru

anumite biotopuri: anumite biotopuri: scalpscalp fatafata conduct auditiv externconduct auditiv extern

Patologie infectioasaPatologie infectioasaS. aureusS. aureus

S. aureus:S. aureus: infectii ale pielii, cele mai comune infectii ale pielii, cele mai comune

localizari: localizari: foliculite, foliculite, furuncule, furuncule, carbuncule, carbuncule, celulita, celulita, impetigo, impetigo, infectii ale plagilorinfectii ale plagilor


Aceste infectii superficiale se pot extinde:Aceste infectii superficiale se pot extinde: prin continuitateprin continuitate pe cale limfaticape cale limfatica pe cale sangvina (bacteriemie, septicemie)pe cale sangvina (bacteriemie, septicemie)

cauzand infectii grave:cauzand infectii grave: endocarditeendocardite meningitemeningite pneumoniipneumonii pioartritepioartrite osteomieliteosteomielite etc.etc.


Infectii profunde primare (localizarea Infectii profunde primare (localizarea superficiala initiala poate trece neobservata):superficiala initiala poate trece neobservata): Pneumonii stafilococice: Pneumonii stafilococice:

varstnicivarstnici complica pneumoniile viralecomplica pneumoniile virale in mediul de spital, complica BPCO, dupa intubatie sau in mediul de spital, complica BPCO, dupa intubatie sau

aspiratie pulmonaraaspiratie pulmonara Izbucniri nosocomiale cu diverse localizari:Izbucniri nosocomiale cu diverse localizari:

plaga chirurgicalaplaga chirurgicala infectii de shunt ventricularinfectii de shunt ventricular peritonita la pacienti cu dializa peritoneala peritonita la pacienti cu dializa peritoneala

continuacontinua etc.etc.


Infectiile cu Infectiile cu S. aureus S. aureus meticilino – meticilino – rezistente, cu rezistenta multipla la rezistente, cu rezistenta multipla la antibiotice, incluzand toate antibiotice, incluzand toate antibioticele antibioticele ββ – lactamice si adesea – lactamice si adesea macrolidele, aminoglicozidele, macrolidele, aminoglicozidele, cotrimoxazolul etc. sunt dificil de cotrimoxazolul etc. sunt dificil de stapanit , mai ales cand evolueaza in stapanit , mai ales cand evolueaza in mediul de spital.mediul de spital.

Patologie infectioasaPatologie infectioasaStafilococi coagulazo (-) - Stafilococi coagulazo (-) -

SCNSCN utilizarea pe scara larga a procedurilor utilizarea pe scara larga a procedurilor

medicale invazive (sonde, catetere din medicale invazive (sonde, catetere din materiale plastice introduse in organism materiale plastice introduse in organism in scop terapeutic) si a insertiilor in scop terapeutic) si a insertiilor protetice (valve cardiace, shunturi, protetice (valve cardiace, shunturi, proteze vasculare si articulare etc.)proteze vasculare si articulare etc.)

S. epidermidis sensu stricto – S. epidermidis sensu stricto – cel mai cel mai inalt efect patogeninalt efect patogen

Patologie infectioasaPatologie infectioasa S. epidermidis sensu S. epidermidis sensu

stricto stricto infectii nosocomiale in sectii de nou – nascuti si infectii nosocomiale in sectii de nou – nascuti si

oncologie – I cauza a bacteriemiilor in aceste unitationcologie – I cauza a bacteriemiilor in aceste unitati infectii in sectii de chirurgie cardio – vasculara: infectii in sectii de chirurgie cardio – vasculara:

mediastinite, infectii de mediastinite, infectii de pace – makerpace – maker, infectii de grefa , infectii de grefa vasculara, endocardita asociata cu valve proteticevasculara, endocardita asociata cu valve protetice

patogen primar in infectiile asociate cu shunturile LCR, patogen primar in infectiile asociate cu shunturile LCR, protezele articulare, dispozitivele ortopediceprotezele articulare, dispozitivele ortopedice

infectii articulare – in absenta – factorilor predispozantiinfectii articulare – in absenta – factorilor predispozanti osteomielita – mai rarosteomielita – mai rar peritonita asociata cu dializa peritoneala ambulatorie peritonita asociata cu dializa peritoneala ambulatorie

continuacontinua infectii ale tractusului urinar: cistita, uretrita, infectii ale tractusului urinar: cistita, uretrita,

pielonefritapielonefrita

Patologie infectioasaPatologie infectioasa S. haemolyticusS. haemolyticus

endocardita, chiar in absenta valvelor endocardita, chiar in absenta valvelor proteticeprotetice

septicemiesepticemie peritonitaperitonita infectii ale tractului urinarinfectii ale tractului urinar infectii ale plagilor chirurgicaleinfectii ale plagilor chirurgicale infectii ale osuluiinfectii ale osului infectii ale articulatiilorinfectii ale articulatiilor

Patologie infectioasaPatologie infectioasa S. lugdunensis; S. S. lugdunensis; S.

schleiferischleiferi patogeni oportunisti semnificativipatogeni oportunisti semnificativi pot coloniza cateterele, drenurile, alte dispozitive introduse pot coloniza cateterele, drenurile, alte dispozitive introduse

in organismin organism endocardite pe valve protetice sau nativeendocardite pe valve protetice sau native septicemiisepticemii abcese cerebraleabcese cerebrale infectii profundeinfectii profunde osteiteosteite osteoartrite croniceosteoartrite cronice infectii ale protezelor vasculareinfectii ale protezelor vasculare infectii cutanateinfectii cutanate infectii ale plagilorinfectii ale plagilor infectii ale lichidului peritonealinfectii ale lichidului peritoneal infectii de cateterinfectii de cateter

Patologie infectioasaPatologie infectioasa S. saprophyticusS. saprophyticus

agent etiologic frecvent implicat in agent etiologic frecvent implicat in infectiile tractusului urinar la femei infectiile tractusului urinar la femei tinere, in perioada fertilatinere, in perioada fertila

uretrite negonocociceuretrite negonococice prostatiteprostatite infectii ale plagilorinfectii ale plagilor septicemiisepticemii

Patologie infectioasaPatologie infectioasa SCN SCN

capacitatea unor tulpini de SCN de a se capacitatea unor tulpini de SCN de a se dezvolta pe suprafetele electronegative dezvolta pe suprafetele electronegative ale corpilor straini ca microcolonii ale corpilor straini ca microcolonii formate din bacterii si glicocalix formate din bacterii si glicocalix (“(“slime”slime”) sub forma unui biofilm – unul ) sub forma unui biofilm – unul dintre factorii principali de patogenitate dintre factorii principali de patogenitate care promoveaza dezvoltarea infectiei care promoveaza dezvoltarea infectiei cu aceste microorganisme.cu aceste microorganisme.

Patologie infectioasaPatologie infectioasa SCN SCN

infectiile cu tulpini meticilino – infectiile cu tulpini meticilino – rezistente, cu rezistenta multipla la rezistente, cu rezistenta multipla la antibiotice pun probleme medicale antibiotice pun probleme medicale dificile, mai ales in tratamentul dificile, mai ales in tratamentul pacientilor cu valve cardiace pacientilor cu valve cardiace protetice.protetice.

IzolareaIzolarea medii de cultura neselective: geloza – sangemedii de cultura neselective: geloza – sange medii de cultura selective: medii de cultura selective:

bulion thioglicolat, bulion thioglicolat, agar hiperclorurat cu manitol si rosu fenol agar hiperclorurat cu manitol si rosu fenol

(mediul Chapman), (mediul Chapman), agar Vogel – Johnsonagar Vogel – Johnson agar Baird – Parkeragar Baird – Parker

medii de cultura diferentiale: medii de cultura diferentiale: agar trehaloza – manitolagar trehaloza – manitol bulion trehaloza – manitolbulion trehaloza – manitol

mediu de imbogatire:mediu de imbogatire: mediu hipercloruratmediu hiperclorurat

Caractere de culturaCaractere de cultura se dezvolta usor, in 18 – 24 h, pe medii se dezvolta usor, in 18 – 24 h, pe medii

nutritive simple in aerobioza.nutritive simple in aerobioza. temperatura optima de crestere: 37temperatura optima de crestere: 37°°CC pH optim = 7,5pH optim = 7,5 colonii cu aspect S, cremoae, rotunde, Ø: 2 – colonii cu aspect S, cremoae, rotunde, Ø: 2 –

3 mm., margini perfecte, suprafata neteda, 3 mm., margini perfecte, suprafata neteda, bombata si lucioasa.bombata si lucioasa.

mediile lichide sunt tulburate omogen, cu mediile lichide sunt tulburate omogen, cu depozit granular in partea inferioara a depozit granular in partea inferioara a tubului de culturatubului de cultura

Caractere de culturaCaractere de cultura tulpinile cu deficiente ale peretelui celular, tulpinile cu deficiente ale peretelui celular,

provenind din probe care contin substante provenind din probe care contin substante antimicrobiene sau supuse unor tratamente antimicrobiene sau supuse unor tratamente termice pot da nastere pe mediile solide, termice pot da nastere pe mediile solide, unor colonii de tip G (unor colonii de tip G (glossy – glossy – lucios), pitice lucios), pitice sau G – R (sau G – R (rough – rough – rugos) mici, cu margini rugos) mici, cu margini imperfecte, granulate, fara hemolizaimperfecte, granulate, fara hemoliza

nu tulbura mediul lichid in care sunt nu tulbura mediul lichid in care sunt insamantate si apar ca un depozit granular insamantate si apar ca un depozit granular in partea inferioara a tubului de cultura.in partea inferioara a tubului de cultura.

Caractere de culturaCaractere de cultura pe mediile cu 5 – 8% sange defibrinat de berbec pe mediile cu 5 – 8% sange defibrinat de berbec

sau de bou, sau de bou, S. aureus S. aureus sisi S. haemolyticus S. haemolyticus produc produc o zona circulara de hemoliza in jurul colonieio zona circulara de hemoliza in jurul coloniei

hemolizina hemolizina αα a a S. aureusS. aureus determina hemoliza determina hemoliza totala cu clarificarea completa a mediuluitotala cu clarificarea completa a mediului

ββ – hemolizina tulpinilor animale de – hemolizina tulpinilor animale de S. aureusS. aureus, , intalnita ocazional si la tulpini umane, intalnita ocazional si la tulpini umane, determina o hemoliza de tip “cald – rece”: zone determina o hemoliza de tip “cald – rece”: zone de hemoliza incompleta la 37de hemoliza incompleta la 37°°C, care, dupa C, care, dupa expunerea culturii cateva ore la 4expunerea culturii cateva ore la 4°°C, devine C, devine completa, similare celei produse de hemolizina completa, similare celei produse de hemolizina αα..

Caractere de culturaCaractere de cultura prezenta pigmentului carotenoid, portocaliu sau prezenta pigmentului carotenoid, portocaliu sau

galben – citrin – caracteristica relativ constanta a galben – citrin – caracteristica relativ constanta a tulpinilor de tulpinilor de S. aureus.S. aureus.

dar si unii SCN pot produce pigment: dar si unii SCN pot produce pigment: S. saprophyticus, S. hominis, S. haemolyticusS. saprophyticus, S. hominis, S. haemolyticus pigmentogeneza coloniilor pe mediile nutritive pigmentogeneza coloniilor pe mediile nutritive

simple sau cu adaos de sange defibrinat poate simple sau cu adaos de sange defibrinat poate intarzia timp de 24 – 48 h. in cazul tulpinilor de intarzia timp de 24 – 48 h. in cazul tulpinilor de S. S. aureus aureus supuse unui tratament nefavorabil supuse unui tratament nefavorabil dezvoltarii lor (antibiotic, antiseptic, termic etc.)dezvoltarii lor (antibiotic, antiseptic, termic etc.)

pigmentogeneza – este absenta in anaerobiozapigmentogeneza – este absenta in anaerobioza mediile cu suplimente organice complexe (ser, ou) mediile cu suplimente organice complexe (ser, ou)

favorizeaza pigmentogeneza.favorizeaza pigmentogeneza.

Caractere de culturaCaractere de cultura pe mediul Baird – Parker, dupa 24 h. pe mediul Baird – Parker, dupa 24 h.

incubare, coloniile de incubare, coloniile de S. aureusS. aureus au Ø: 1 – au Ø: 1 – 1,5 mm., sunt convexe, negre 1,5 mm., sunt convexe, negre stralucitoare cu o ingusta bordura alba si stralucitoare cu o ingusta bordura alba si inconjurate de un halou clar cu Ø: 2 – 5 inconjurate de un halou clar cu Ø: 2 – 5 mm.mm.

alti stafilococi: colonii negre, dar fara alti stafilococi: colonii negre, dar fara halou clarhalou clar

coloniile unor tulpini de coloniile unor tulpini de S. epidermidisS. epidermidis determina un halou larg, opac, bordat cu determina un halou larg, opac, bordat cu o zona clara, ingusta. o zona clara, ingusta.

Caractere microscopiceCaractere microscopice pe frotiul direct din prelevatul clinic colorat pe frotiul direct din prelevatul clinic colorat

Gram, stafilococii au aspect de coci Gram (+) Gram, stafilococii au aspect de coci Gram (+) sau Gram – variabili, izolati, in perechi, in sau Gram – variabili, izolati, in perechi, in lanturi scurte sau in gramezi, intra – si lanturi scurte sau in gramezi, intra – si extracelulari.extracelulari.

pe frotiul colorat Gram efectuat din culturi pe pe frotiul colorat Gram efectuat din culturi pe mediu solid, stafilococii apar sub forma de coci mediu solid, stafilococii apar sub forma de coci perfect rotunzi, dispusi in gramezi neregulate, perfect rotunzi, dispusi in gramezi neregulate, asemanatoare “ciorchinilor de strugure”asemanatoare “ciorchinilor de strugure”

pe frotiurile efectuate din prelevate sau culturi pe frotiurile efectuate din prelevate sau culturi in mediu lichid pot aparea si izolati, in perechi, in mediu lichid pot aparea si izolati, in perechi, tetrade sau lanturi scurte de 3 – 4 celule.tetrade sau lanturi scurte de 3 – 4 celule.

Caractere microscopiceCaractere microscopice

in conditii de stress metabolic in conditii de stress metabolic (temperatura, pH, presiune osmotica, (temperatura, pH, presiune osmotica, factori antimicrobieni etc.) pot deveni factori antimicrobieni etc.) pot deveni Gram – variabili: in aceeasi gramada, Gram – variabili: in aceeasi gramada, alaturi de coci Gram (+) apar mai multi alaturi de coci Gram (+) apar mai multi sau mai putini coci Gram (-).sau mai putini coci Gram (-).

odata cu anomalia tictoriala apar de odata cu anomalia tictoriala apar de regula si anomalii morfologice: forme regula si anomalii morfologice: forme usor alungite, cu contur imperfectusor alungite, cu contur imperfect

Identificare preliminara:Identificare preliminara:

Etapele cheie ale identificarii stafilococilor:Etapele cheie ale identificarii stafilococilor:1. Diferentierea Fam. 1. Diferentierea Fam. StaphylococcaceaeStaphylococcaceae de de

Fam. Fam. Streptococcaceae:Streptococcaceae: aspectul microscopicaspectul microscopic morfologia coloniilormorfologia coloniilor testul catalazeitestul catalazei

Identificare preliminara:Identificare preliminara: 2. Diferentierea genului 2. Diferentierea genului StaphylococcusStaphylococcus de de

genul genul Micrococcus:Micrococcus: testul producerii de acid din glucoza in testul producerii de acid din glucoza in

anaerobiozaanaerobioza testul sensibilitatii la lizostafintestul sensibilitatii la lizostafin testul producerii de acid din glucoza in testul producerii de acid din glucoza in

aerobioza in prezenta eritromicinei in aerobioza in prezenta eritromicinei in concentratie de 0,4 concentratie de 0,4 μμg/ml g/ml

testul sensibilitatii la furazolidon (100 testul sensibilitatii la furazolidon (100 μμg/disc)g/disc) testul modificat pentru oxidaza testul modificat pentru oxidaza testul sensibilitatii la bacitracina (0,04 U/disc)testul sensibilitatii la bacitracina (0,04 U/disc)

TestTest RezultatRezultat SemnificatieSemnificatieCatalazaCatalaza ++ StaphylococcStaphylococc

aceaeaceae-- StreptococcaStreptococca

ceaeceaeFurazolidon Furazolidon (100(100μμg/disc)g/disc)

> 15 mm.> 15 mm. StaphylococcStaphylococcusus

< 10 mm.< 10 mm. MicrococcusMicrococcusGlucoza Glucoza anaerobanaerob

++ StaphylococcStaphylococcusus

-- MicrococcusMicrococcusCoagulaza Coagulaza legata si/sau legata si/sau proteina Aproteina A

++ S. aureus, S. aureus, S. S. lugdunensis, lugdunensis, S. schleiferiS. schleiferi

-- celelalte celelalte speciispecii

Identificare preliminara:Identificare preliminara: 3. Diferentierea 3. Diferentierea S. aureus S. aureus de celelalte de celelalte

specii de stafilococi:specii de stafilococi: caractere de cultivarecaractere de cultivare testul coagulazei libere (testul in tub)testul coagulazei libere (testul in tub) testul coagulazei legate (testul pe lama)testul coagulazei legate (testul pe lama) testul proteinei Atestul proteinei A testul termonucleazeitestul termonucleazei testul fermentarii manitei in anaerobioza testul fermentarii manitei in anaerobioza

TestulTestul S. S. aureusaureus

S. S. lugdunenslugdunens

isis

S. S. schleiferschleifer

iiCoagulaza Coagulaza liberalibera

++ -- --

Acidifierea Acidifierea manitolului manitolului anaerobanaerob

++ -- --

TermonucleTermonucleazaaza

++ -- ++

TestulTestul S. S. saprophytisaprophyti

cuscus

S. S. epidermiepidermi

disdis

S. S. haemolytihaemolyti

cuscusNovobiociNovobiocina na (5(5μμg/disc)g/disc)

<16 mm.<16 mm. >16 mm.>16 mm. >16 mm.>16 mm.

AcidifiereAcidifierea a trehalozei trehalozei (aerob)(aerob)

++ -- ++

AcidifiereAcidifierea a manitolulmanitolului (aerob)ui (aerob)

-- -- + (+ (--))

Identificare definitiva:Identificare definitiva:

4. Diferentierea celorlalte specii de 4. Diferentierea celorlalte specii de stafilococi implicate mai frecvent in stafilococi implicate mai frecvent in infectii la om:infectii la om: baterii extinse de teste pentru baterii extinse de teste pentru

identificarea cu o acuratete acceptabila identificarea cu o acuratete acceptabila a speciilor de stafilococia speciilor de stafilococi

metode moleculare de identificaremetode moleculare de identificare

Detectarea toxigenezeiDetectarea toxigenezei latex – aglutinarelatex – aglutinare ELISAELISA

enterotoxinele stafilocociceenterotoxinele stafilococice

RPLA (aglutinare pasiva inversata)RPLA (aglutinare pasiva inversata) ELISAELISA

toxina TSST1toxina TSST1

Metode de diagnostic si Metode de diagnostic si epidemiologie molecularaepidemiologie moleculara

identificarea tulpinilor de stafilocociidentificarea tulpinilor de stafilococi detectarea rapida a stafilococilor in prelevat detectarea rapida a stafilococilor in prelevat

(MRSA, TIA)(MRSA, TIA) detectarea rapida a detectarea rapida a S. aureus S. aureus si SCN, in si SCN, in

combinatie cu identificarea genelor de combinatie cu identificarea genelor de rezistenta la antibiotice (rezistenta la antibiotice (mecA mecA cu sau fara alte cu sau fara alte gene de rezistenta)gene de rezistenta)

detectarea genelor care codifica pentru factori detectarea genelor care codifica pentru factori de patogenitate (enterotoxina, leucocidina etc.)de patogenitate (enterotoxina, leucocidina etc.)

tiparea tulpinilor de stafilococi in scop tiparea tulpinilor de stafilococi in scop epidemiologic.epidemiologic.

fam. staphylococcaceae

Documents