8/10/2019 Detectarea Alterare Ulei de Mu0103sline Cu Unele Uleiuri Vegetale Prin Analiza GLC a Steroli Folosind Coloana Polar

1/3

1. IntroducereUleiul de masline este de obicei mai scump dect alte uleiuri comestibile, ceea ce l face un candidatpentru alterare cu alte mai ieftine uleiuri. Prin urmare, diferite metode au fost dezvoltate pentru adetermina falsificarile care sunt comise. Unele dintre aceste metode bazate pe analiza calitativ a

uleiului de msline cum ar fi culoarea, trigliceride i acizi grai.Mai mult, analiza calitativ a acizilor grai sau trigliceridele pot fi inadecvate, deoarece cele mai multeuleiuri vegetale conin aceleai acizi grai sau trigliceridele (Maria & Robert,1987).Din contr, analiza cantitativ a acizilor grai, trigliceridesau steroli pot fi utile pentru detectarea dealterare ulei de msline.Analiza cantitativ HPLC a trigliceridelor este considerat o metod puternic pentru detectarea dealterare de msline(El-Hamdy & Perkins, 1981; Maria & Robert, 1987). Determinareade steroli din ulei de msline sau alt ulei vegetal este, de obicei,realizat prin cromatografie gaz-lichid(GLC). Aceast analizar putea fi utilizata pentru a detecta prezena uleiurilor vegetale rafinaten ulei de msline prin determinarea stigmastadiene sau / i campesterol,deoarece primul nu apare nmsline i mai trziunu ar trebui s fie mai mult de 4% din totalul steroli. Cu toate acestea, folosindstigmastadiene ca un indicator pentru falsificare uleiului de msline este de ncredere numai atunci cnd

concentraia lor este ntre 0.01 i 4 mg / kg (Regulamentul CE, 1991). Mai mult dect att, campesterolulconinut n unele uleiuri de msline depete 4% stabilit prin regulamentul CE (Salvador, Aranda, siFregapane, 1998). Aceste dou fapte limiteaza utilizarea acestor dou steroli n detectarea prezeneiuleiurilor vegetale rafinate n uleiul de msline. Mai mult dect att, determinarea din aceste dousteroli se realizeaz prin, izolarea de steroli prin TLC, separare de stigmastadiene de coloan cu alumini determinarea acestor derivai de sterol prin gaz cromatografie, folosind non-polar coloane capilare.Cu toate acestea, izolarea sterolilor prin TLC i coloan de alumin sunt criticate pentru consumul detimp i laborioas de lucru (Bohacenko & KOPICOV, 2001).Utilizarea termo coloanei polar stabil este adecvat s se separe steroli, steroli metil i alcool aleunsaponifiables sililai de uleiuri vegetale, fr nici o purificare suplimentar . Mai mult dect att,aceast coloan a permis separarea componentelor care sunt considerate ca amprent de matrice

naturale.Prin urmare, a fost folosit pentru a detecta prezena unor cantiti mici de coaj n ulei de msline,folosind erthrodyol ca o amprent digital (Frega,Bocci, & Lercker, 1993).Coninutul maxim de campesterol n ulei de msline, stabilite de Regulamentul Comisiei (CEE) nr22568/1991 trebuie sfie de 64%, n timp ce cea a stigmasterolului trebuie s fie mai mic dect cea acampesterol.Pe de alt parte, nivelul acestor steroli n uleiuri vegetale depete cu mai mult de doua ori n ulei demsline. Prin urmare, aceast proprietate a fost utilizat n acest studiunca o nou metod pentrudeterminarea concentraiei minime detectabilede alterare ulei de msline cu soia, porumb, bumbac iuleiuri de floarea-soarelui de analiza GLC folosind termo stabil polar coloan.

2. Materiale i metode2.1. Uleiuri vegetale

Probe de ulei de Floarea-soarelui, porumb, soia i semine de bumbac pure au fost achiziionate de lapieele locale, verificanduse autenticitatea lor i utilizate ca adulterant. Doisprezece probe de ulei demsline extravirgin i de uleiuri de msline virgine au fost obinute de la diferite piete de ulei de mslinen Iordania.Amestecuri de ulei de msline i aceste uleiuri vegetale la nivel de 5%,10%, i 20% (g / g) s-au preparat.

8/10/2019 Detectarea Alterare Ulei de Mu0103sline Cu Unele Uleiuri Vegetale Prin Analiza GLC a Steroli Folosind Coloana Polar

2/3

2.2. Analiza SteroliCinci grame de fiecare din ulei de msline, uleiuri vegetale i pregtitele loramestecuri, au fost saponificate, i extrase conform metodelor european oficiale de analiz descris nRegulamentele CEE 2568/1991. O soluie de nesaponificabile n hexan (10% greutate / volum) a fostpreparat. O parte alicot de 50 l din aceast soluie a fost evaporati reziduul a fost silanizat cu unamestec de piridin-hexamethyldilizane-trimethylchlorosilazane 9: 3: 1 (v / v / v) la 50 l/ mg de unesaponificabile (Gutierrez, Varona, i Albi, 2000).Silanizate nesaponificabile au fost analizate princromatografie de gaz folosind Shimadzu cromatograf gaz (model 2010 Shimadzu Inc, Koyoto, Japonia)furnizat cu split-splitless de port injector, ionizare cu flacrdetector (FID) i integrator digital (ShimdzuCR 7A). Un RTX-65 TG (Restek, Statele Unite ale Americii) coloan capilar (60 m 0,25 mm i .d; peliculGrosimea fost de 0,25 m i ingredientele active au fost cu 35% difenil, 65% dimetil polisiloxan) a fostfolosit.Gazul purttor a fost heliula 1 ml / flux de coloan min i 1: 80 raport Split. Injectorarele idetectoarele de temperaturile erau la 320 C. Temperatura Cuptor fost programat 200-300 C cu o ratde 3 C / min.Identificarea Peak din campesterol, sitgmasterol i b- sitosterol a fost efectuat de timpii de retenie aistandardelor lor prevzutede Sigma Chemical Co (St. Luis, MO). Identificarea Peak din D5-avenasterol afost efectuat prin compararea timpului de reteniecu cele raportate n literatur (Frega, Bocci, si

Lercker, 1992).

3. Rezultate i discuii

Este bine stabilit faptul c campesterol i stigmasterol coninutul n instalaii uleiuri sunt mult mai maridect coninutul lor n ulei de msline.De exemplu, procentul campesterol din seminele de bumbac, floarea soarelui,uleiuri de soia i porumbsunt 6.4 - 14.15%, 5-13%, 15.8-24.2% i 16-24%, iar cea a stigmasterolului sunt 2.1-6.8%, 6-13%, 14.9-19.1% i 4.3-8.0%, respectiv (CAC, 2005). Pe de alt parte , procentul campesterol n steroli deulei demsline nu trebuie s depeasc 4%, iar procentul stigmasterol trebuie s fie mai mic dect cea acampestrol (Regulamentul CE 2568, 1991). Prin urmare, aceste dou steroli ar putea fi utilizate caindicatori pentru a detecta falsificarea de ulei de msline cu uleiuri vegetale.

Figura. 1 prezint urmele GLC ale fraciunilor nesaponificabile de ulei de msline,porumb, soia, floareasoarelui i bumbac . Urmele aratc campesterol, sitgmasterol, B sitosterol i D5-avenasterol au fostbine separate. Aceste rezultate au fost de acord cu rezultatele altor muncitorii care au raportat caceast coloan polar este adecvat pentru fracionarea sterolilor, steroli i alcooli metilici ai suspensiei(Frega colab., 1992).Reproductibilitatea, definit ca deviaia standard relativ de timpul de retenie pentru 15 duplicate,pentru campesterol, stigmasterol, b-sitosterol i D5-avenasterol fost mai mic de 2% .Este bine cunoscut faptul c 4 steroli sus menionate reprezint mai mult de 95% din totalul sterolilordin uleiurile de msline (Regulamentul CE, 1991), i n consecin ar putea fi reprezenta sterol total nulei de msline. Procentul din fiecare sterol a fost calculat n probele analizate ulei de msline iar ceiamestecat cu alte uleiuri vegetale prin mprirea domeniile lor de vrf de suprafeele totale de vrf aleacestor 4 steroli i rezultatele sunt prezentate n tabelele 1 i 2. Este evident c studiati 4 steroli sunt

prezente n concentraii acceptabile stabilite prin Regulamentul CE (1991). Procentul de Campestrol afost comparabil cu cele ale altor date publicate, n timp ce cea a stigmasterol a fost uor mai mare(Boggia, Evangelisti, Ross, Salvadeor, & Zunin, 2005; Bohacenko i KOPICOV, 2001; SalvadorAranda, Gomez-Alonso, si Fregapane, 2000).Pentru a evalua capacitatea de a detecta alterare ulei de msline cu uleiuri de porumb, floarea soarelui,soia si seminte de bumbac amestecurile coninnd 5%, 10% i 20% din aceste uleiuri n ulei de msline(proba nr 6, Tabelul1) au fost preparate i analizate pentru coninutul lor de steroli.

8/10/2019 Detectarea Alterare Ulei de Mu0103sline Cu Unele Uleiuri Vegetale Prin Analiza GLC a Steroli Folosind Coloana Polar

3/3

Rezultate n tabelul 3 arat c adugarea de 5-20% uleiuri vegetale la ulei de msline (proba nr 6T dinTabelul 1) a determinat o cretere semnificativ n procente campesterol a probei mixte ulei de msline.O astfel de cretere a variat de la 160% n cazul adugrii de 5% din floarea-soarelui ulei la 470% n cazuladugrii de ulei de porumb 20%. Creterea stigmasterolca urmare a procesului de amestecare a variatde la 200% n cazul adugarea de 5% ulei de semine de bumbac la 500% n cazul adugrii de 20%ulei de soia.Procentul stigmasterol din steroli de ulei de msline trebuie s fie mai dect limita maxim acceptabilpentru campesterol (4% din total steroli). n deosebire de campesterol, stigmasterol procent alamestecuri nu a depit aceast limit. Prin urmare, campesterol putea fi utilizat ca indicator, dar nustigmasterol pentru a detecta falsificarea de ulei de msline cu aceste uleiuri vegetale la niveluri depeste 5%.Aceste rezultate sunt de acord cu cele raportate de Bohacenko i KOPICOV (2001), care a constatat cconinutul campesterol i D7-stigamstenol ar putea fi folosite pentru a detecta falsificarea de ulei demsline cu unele uleiuri vegetale la niveluri mici de 5%. Cu toate acestea, campesterol procent a unoruleiuri de msline este mai mare de 4% stabilit prin Regulamentul CE (1991) aa cum sa observat n cazululeiului de msline Cornicabra (Salvador i colab., 1998). Acest fapt poate limita utilizarea procentuluicampesterol pentru a detecta falsificarea ulei de msline cu uleiuri vegetale. Prin urmare, ambele

campesterol i stigmasterol procente au fost utilizate n acest studiu pentru a detecta alterare a demsline cu aceste uleiuri prin msurarea Factorul autenticitate (Af), dup cum urmeaz.