curs 5 enzime.izoenzime

of 24 /24
ENZIMELE PLASMATICE- GENERALITĂŢI

Upload: holhos-larisa-bianca

Post on 22-Nov-2015

137 views

Category:

Documents


1 download

TRANSCRIPT

  • ENZIMELE PLASMATICE- GENERALITI

  • Enzimele sunt proteine dotate cu funcii catalitice specifice. Ele catalizeaz reacii in sisteme biologice care n lipsa enzimelor ar avea loc foarte lent.

    Din cele aproximativ 2000 de enzime cunoscute pn n prezent, au fost studiate aproximativ 100 i dintre acestea, numai o mic parte se gsesc n plasm i sunt investigate n scop diagnostic.

    Enzimele sunt produse n diverse celule ale organismului, localizarea intracelular a enzimelor la nivelul diverselor organite are o deosebit semnificaie funcional n dirijarea proceselor metabolice.

  • Cunoaterea localizrii intracelulare a diverselor enzime are i valoare diagnostic, ntruct o lezare celular care duce la eliberarea din celule a enzimelor mitocondriale este mai grav dect o leziune limitat la membrana celular i care duce doar la ieirea enzimelor citoplasmatice. - s-a constatat c unele enzime sunt localizate n citoplasm mitocondrii lizozomi

  • Enzimele care se gsesc n plasm pot fi clasificate nEnzime specifice plasmei (enzime plasmatice funcionale)

    Includ toate enzimele ce au o funcie bine definit i specific n plasm.

    Aceste enzime sunt sintetizate n ficat i sunt eliberate constant n plasm. Ele prezinta interes clinic cnd au o concentraie mai sczut fa de normal.Exemple: enzimele coagulrii, LCAT(lecitin-colesterol-acil-transferaza), pseudocolinesteraza, ceruloplasmina, renina.

  • Enzime nespecifice plasmei

    Nu prezint funcii fiziologice n plasm.

    Ele se gsesc n plasm n concentraie mult mai mica dect concentraia lor n esuturi.

    n multe cazuri, plasma este deficitar n activatori sau coenzime necesare pt activitatea optim a acestor enzime.

    Enzimele de secreie provin din glandele exocrine i pancreas, care acioneaz la nivelul tubului digestiv: amilaza, lipaza, tripsina, pepsinogenul.

  • Ori de cte ori o cale uzual de excreie este blocat sau dac eliberarea n lichidul extracelular este brusc accelerat, sau cota de producere este crescut, concentraia n plasm a acestor enzime este crescut semnificativ.

    Enzime celulare Au locul de aciune n celulele din care provin, unde se gsesc ntr-o concentraie ridicat.Prezenta lor in lichidul interstitial,limfa si plasma denota o alterare a membranei celulareUnele au specificitate pentru un anumit tip de esut, ne poate orienta asupra sediului de organ al unei leziuni.Principalele enzime celulare sunt AST, ALT, CK, LDH,GLDH(glutamat-dehidrogenaza).

  • Izoenzime

    Sunt enzime care n plasm prezint dou sau mai multe forme moleculare.

    Aceste variante sunt cunoscute ca i izoenzime i dei ele au structuri diferite au aceeai funcie catalitic. Catalizeaz aceeai reacie, dar au proprieti fizicochimice, cinetice, imunologice diferite. Pe baza acestor proprieti pot fi detectate i separate prin electroforez i cromatografie.

    Din punct de vedere structural, sunt oligomeri formai din subuniti identice sau diferite. Se cunosc izoenzime pentru oxidaze, dehidrogenaze, fosfataze, transaminaze.

  • De exemplu izoenzimele LDH exist n esuturi sub form de tetramer. Cele 5 izoenzime au rezultat prin combinarea diferit a doua tipuri de subunitti notate cu H (Heart) de provenien miocardic i M (Muscle) origine muscular.

    La electroforez se separ 5 fraciuni LDH1 i LDH2 de provenien miocardic i din elementele seriei roii, LDH3, LDH4 i LDH5 provin mai ales din ficat i din musculatura scheletic.

    Fraciunea LDH1 prezint o afinitate pentru alfa oxobutirat. infarct miocardic cresc fraciunile LDH1 i LDH2, hepatit, afeciuni musculare fraciunile LDH4 i LDH5.

  • Creatinkinaza este o enzima alctuit din dou subuniti B (Brain) din creier i M(Muscle) din musculatur.

    Astfel c exist trei izoenzime CK-BB care se afl n creier, izoenzima CK-MM se gsete n musculatura striat i n miocard i CK-MB care provine doar din miocard avnd o valoare deosebit n infarctul miocardic. n funcie de nivelul seric se apreciaz ansele de supravieuire a bolnavului.

    S-au pus n eviden i izoenzimele unor enzime ca fosfataza alcalin, fosfataza acid, colinesteraza seric etc.

    Aloenzimele sunt alte forme moleculare ale enzimelor, variante determinate genetic prin mutaii.

    Ele caracterizeaz bolile genetice.

  • Principalele enzime plasmatice cu valoare diagnostic

    Lactatdehidrogenaza (LDH)

    Se gsete n -cantiti mari n muchiul striat, ficat, miocard, rinichi i ganglionii limfatici -cantiti mai mici n pancreas, eritrocite i plmni. Enzim a glicolizei, care catalizeaz reacia reversibil piruvat-lactat;Stabilete gradul de activitate a bolii n alveolita fibrozant criptogenic i n alveolita alergic extrinsec;Marker al hemolizeiRol de indicator retroactiv al IMA.

  • Structura activ a moleculei LDH este un tetramer format din dou tipuri de lanuri polipeptidice: - tip H (heart - sintetizat predominant n miocard); - tip M (muscle sintetizat predominant n muchiul scheletic i ficat).LDH poate fi separat n 5 izomeri, care difer ntre ei prin raportul n care sunt asociate lanurile polipeptidice de baza. LDH1(H4) LDH2(H3M) LDH3(H2M2) LDH4(HM3) LDH5(M4) LDH1 predomin n muchiul cardiac LDH5 n ficat i muschii sheletici

  • Infarct miocardic acut - creterea izoenzimei LDH1 (HBDH) la 8-24 de ore de la debutul infarctului cu maxim la 3-6 zile. ntr-o evoluie obinuit a infarctului valoarea LDH se normalizeaz n 7-12 zile.

    Raportul LDH1/LDH2 peste 0,75 are specificitate i sensibilitate de peste 90% pentru necroza miocardic.

    Raportul LDH total/HBDH (hidroxibutiratdehidrogenaza ):- sub 1,3 n infarct miocardic acut- peste 1,64 n afeciuni hepatice.

  • Valori normale : Total 120-240 UILDH1 sau hidroxibutiratdehidrogenaza (HBDH): 70-130 UI/l.

    Valori patologice : crescute ninfarctul miocardic miocardite, hepatite leziuni hepatice toxice boli maligneleucemii acute infarct pulmonar anemie hemolitic.Valoare diagnostic specific au n modificrile izoenzimatice. creteri- LDH1 i LDH2 se ntlnesc-n infarctul miocardic -anemie, - LDH4 i LDH5 - leziuni hepatice - procesele neopazice.

  • TransaminazeleAspartat-amino-transferaza (AST) sau glutamat-oxalacetat-transaminaza (GOT) - Oxoglutarate + L-aspartateAspartate aminotransferase (AST)

    L- glutamate + oxaloacetate

    se gsete n special n ficat, miocard, muchii striai. La nivelul ficatului, 60% din AST este localizat n citoplasm i 40% n mitocondrii. Cantiti mai reduse de enzim se gsesc n rinichi, pancreas, plmni i eritrocite.Valori normale : brbai 32 U/l, femei 31 U/lValori patologice: mai mari de 40 U/l.

  • Valori crescute n:

    patologia hepatic:- hepatita viral acut, necroza toxic a ficatului. -creteri moderate n hepatita cronic, hepatita medicamentoas, ciroz, icter.patologia cardiac: creteri marcate n infarctul miocardic, creteri moderate n miocardit, embolie pulmonar.patologia muscular: distrofii musculare, intervenii chirurgicale.stri hemoliticehipotiroidie cu mixedem

  • Alanil-amino-transferaza (ALT) glutamat-piruvat-transaminaza (GPT)- Oxoglutarate + L-alanineAlanine aminotransferase (ALT)

    L - glutamate + pyruvatese gsete- n cantiti mari n: citoplasma celulelor hepatice -cantiti mici n musculatura striat, miocard, rinichi, pancreas.Valori normale: brbai- 13-30 U/l ; femei- 10-24U/lValori patologice: mai mari de 30U/lCreteri n patologia hepatic: marcate n hepatita viral acut i necroza toxic a ficatului moderate n hepatita cronic, ciroze, icter mecanic.Evolueaz n paralel cu AST (GOT), cu valori mai mari n obezitate i valori mai mici n ischemii (miocardice, cerebrale, renale etc)

  • Raportul normal GOT/GPT = 1,3.Raport GOT/GPT crescut sugereaz afeciune cardiac. Raport GOT/GPT sczut sugereaz afeciune hepatic.Creatin- fosfokinaza (CK) este localizat cu preponderena n musculatura scheletic, miocard. S-au pus n eviden 3 izomeri: 1. CK/HM-de origine muscular i miocardic, 2. CK/BB gsit n esutul cerebral 3. CK/MB provenit din miocard.Aceast enzima catalizeaz formarea ATP din creatinfosfat i ADP i se inactiveaz foarte repede prin oxidarea gruprilor SH.Valori normale : femei 25-175 U/l ; brbai 25-200U/lValori patologice: creteri marcate apar n infarctul miocardic, infeciile musculare repetate i tetanos.

  • Creterea CK-MM distrofia muscular progresivtraumatisme musculareinjecii intramuscularebiopsii muscularepost-operator

    Creterea CK-BB leziuni ale sistemului nervos central (edem cerebral, accident vascular cerebral, traumatisme cranio-cerebrale, tumori cerebrale)anestezie generalintoxicaii cu somnifereelectrooc

  • Amilaza este o enzim de secreie exocrin i prezent n ser cu 2 forme izoenzimatice principale: salivar i pancreatic. Enzima este prezent n saliv, pancreas, ficat, suc duodenal, intestin subire.Valori normale: 230-2700 U/lValori patologice: -creteri marcate ale amilazei se ntlnesc n pancreatita hemoragic, creterea se manifest la 3-6 ore de la debutul bolii, max la 20-30 ore i se normalizeaz dup 2-8 zile.- creteri moderate se ntlnesc n: cancer de cap de pancreas, afeciuni ale glandelor, afeciuni abdominale acute - ulcer, litiaza biliar, colecistita acut - sarcina extrauterin, administrri de narcotice i opioide.

  • Fosfataza alcalin seric- este alctuit din 3 forme izoenzimatice: hepatobiliar osoasIntestinalse adaug n cursul sarcinii o form tranzitorie, forma placentar.Valori normale:copii 110-400 U/lfemei sub 104 U/l brbai sub 117 U/l. Creteri patologice ale fosfatazei alcaline se observ n afeciuni osoase i hepatice.Crete n afeciuni caracterizate prin activitate osteoblastic (tumori osteoblastice, metastaze, perioada de cretere, rahitism, b. Paget);

  • Fosfataza acid se gsete n cantiti mari n prostat i n cantiti mult mai mici n ficat, splin, rinichi, eritrocite, trombocite i glandele endocrine.

    Valori normale: fosfataza acid total: 0-90 U/l i prostatic:0-30 U/l

    Valori patologice:Creterea fosfatazei acide trombocitare: infarct, embolie pulmonar, trombocitoz, hemoliz.

    Creterea fosfatazei acide prostatice: adenom de prostatcarcinom de prostat

  • Lipaza pancreatic degradeaz trigliceridele n digliceride, n monogliceride i apoi acestea sunt transformate n glicerol i n acizi grai.

    Valori normale: 7-60 U/l

    Variaii patologice: pancreatita acut i cronic, cancer de cap de pancreas.

    Aldolaza este de origine muscular i hepatic.

    Ea scindeaz fructozo-1,6 difosfatul n 3-fosfogliceroaldehida i fosfodihidroxiacetona la nivelul tuturor celulelor i fructoza-1-fosfat n fosfodihidroxiacetona i gliceraldehida, la nivelul ficatului.

    Valori normale: 0.5-7.6 U/l la 37C.

    Variatii patologice: uropatii i hepatite virale.

  • Pseudocolinesteraza

    este o enzim secretat activ n plasm de ctre ficat.

    este un indicator al funciei proteosintetice a ficatului.

    scade mult n insuficiena hepatic, intoxicaii cu organofosforice.

    creteri ale pseudocolinesterazei serice se ntlnesc n sindromul nefrotic, n perioada de vindecare a unei hepatite, la obezi.

  • Gama glutamiltranspeptidaza ( -GT) se gsete predominant n celule hepatice (n special la nivelul canaliculelor biliare, care intervine n transportul amino-acizilor prin membran), renale, pancreas i prostat. Activitatea plasmatic a -GT este mai crescut la barbai dect la femei. Creterea activitii ei plasmatice este cea mai important modificare n colestaz, cnd valorile ei ajung de 10-50 de ori valorile normale.Valori normale: femei 7-32 U/l; brbai 11-50 U/l.Valori patologice: hepatite alcoolice, administrri de anticonvulsive, fenobarbital, medicaie contraceptiv.