1

MEDII DE CULTURĂ

Clasificări ale mediilor de cultură: 1. medii lichide şi medii solide; 2. medii simple (apă peptonată); 3. medii complexe: a - de utilizare generală: medii uzuale şi medii cu proteine native; b - medii speciale: - medii selective (solide), - medii de îmbogăţire (lichide), - medii pentru anaerobi, - medii pentru teste biochimice. 4. medii sintetice – compuse din substanţe chimice pure cu compoziţie minimală sau foarte complexe şi sunt utilizate mai ales în cercetare. Agar-agar Peptonă

MEDII LICHIDE

Apă Bulion Bulion Mediul cu Mediul Mediul Mediul peptonată nutritiv glucozat selenit Chapman Pick Sabouraud sau acid lichid lichid pentru simplu de sodiu fungi

2

MEDII SOLIDE

Agar nutritiv înclinat (geloză nutritivă sau simplă înclinată)

Agar nutritiv (geloză nutritivă sau simplă) Mediul Mueller Hinton

Agar sânge (geloză sânge) Agar ciocolat (geloză şocolatie)

3

Mediul Drigalski Mediul Mac Conkey

Mediul Levine (EMB-Agar) Mediul CLED (cistină, lactoză, deficient în electroliţi)

Mediul Leifson (ADCL) Mediul Hektoen

4

Mediul Shigella Salmonella Mediul Wilson Blair

Mediul Chapman Mediul agar nutritiv cu 0,004% telurit de Potasiu

Mediul BRILLIANCE TM UTI AGAR Mediul Löwenstein-Jensen

5

Metoda Castañeda (mediu bifazic cu Medii pentru anaerobi: agar F şi bulion F) geloza Veillon Tarrozzi

MEDII SOLIDE PENTRU FUNGI

Mediul SABOURAUD Mediul BRILLIANCE CANDIDA AGAR

6

Medii pentru teste biochimice

1) Medii pentru evidenţierea unui singur test biochimic

Mediul agar Mediul pentru Mediul cu Mediul Mediul Mediul cu bilă-esculină oxidare-fermentare fenilalanină Christensen cu Simmons cu acetat uree (Urea agar cu citrat de de sodiu base) sodiu

Mediul cu lizină

7

2) Medii multitest (pentru a evidenţia mai multe proprietăţi biochimice) TSI MIU MILF (Triple Sugar (Mobilitate, (Mobilitate, Indol, Iron) Indol, Uree) Lizină, Fenilalanină)

3) Microteste biochimice (galerii api pentru identificarea biochimică a speciilor bacteriene) Microtest biochimic api 20 E (galerie api pentru identificare speciilor de enterobacterii)

Microtest biochimic api 20 NE (galerie api pentru identificarea speciilor de bacili gram negativi nefermentativi)

8

Microtest biochimic ID 32 STAPH (galerie pentru identificarea speciilor din genul Staphylococcus)

4) Carduri - VITECK

Sisteme celulare utilizate pentru cultivarea virusurilor

Sistemele celulare care pot fi utilizate sunt: 1) culturi de celule - în cole pe medii de întreţinere şi de multiplicare. Colele cu cultură sunt examinate pentru activitate metabolică normală tradusă prin acidifierea mediului (indicatorul roşu fenol devine galben) şi pentru pânza celulară confluentă, utilizând microscopul inversat.

Colă cu cultură de celule şi indicator de pH (roşu fenol) pentru cultivarea virusurilor

(metabolism celular normal: culoare galbenă)

Sursele de obţinere a culturilor de celule sunt: ţesuturi fragmentate tratate cu tripsină; culturi de organe pentru virusurile exigente (Coronavirus); fragmente de mucoasă respiratorie sau mucoasă digestivă. Culturile de celule utilizate sunt:

1- culturi primare 2- linii celulare sau stabilizate (linii de celule continue, imortalizate): a) linii tumorale de tip:

Hela (derivată din carcinom de col uterin); Hep-2 (derivată din carcinom hepatic); KB (derivată din carcinom rinofaringian); RD (derivată din rabdomiosarcom uman). b) linii celulare: BHK-21 (derivată din rinichi de embrion de hamster); MA 188 (derivată din testicul de cal); PK (derivată din rinichi de porc); RK (derivată din rinichi de iepure); L132 (derivată din plămân embrionar uman); VERO (derivată din rinichi de maimuţă verde). c) celule diploide derivate din ţesuturi embrionare.

9

2) oul embrionat -ouăle utilizate sunt albe, fecundate, curăţate, spălate, curate, şterse şi incubate pe suporturi la 37-38°C şi umiditate de 60%. -după 4 zile de incubare, ouăle sunt examinate pe ovoscop prin transluminare pentru a pune în evidenţă embrionul (o zonă opacă, roşiatică, de la care pornesc vase de sânge) şi viabilitatea acestuia (un embrion viu este animat de mişcări permanente). 3) animale de laborator (utilizate pentru virusuri care se cultivă dificil prin alte metode, de exemplu: unele virusuri Coxsackie, Arbovirusuri, virusul rabic).