1

MEDII DE CULTURA• suporturi materiale si nutritive care

servesc la cultivarea bacteriilor

• amestecuri de substante care asiguracultivarea microorganismelor

Scopuri

• Izolarea in cultura pura

• Identificare

• Diagnostic, tratament

• Producerea industriala a unor substante

(prepararea vaccinurilor)

• Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii

microbiene a unor elemente de mediu (apa,

alimente)

Clasificarea mediilor de cultura

Dupa consistenta: lichide

solide

semisolide

Dupa provenienta: naturale

sintetice

Dupa compozitie si scop: simple

complexe

speciale

2

Clasificarea mediilor de cultura

• Medii complexe

– de utilitate generala: - uzuale

- cu proteine native

– Medii speciale

• selective

• de imbogatire

• anaerobi

• teste biochimice

Caracterele culturii microbiene pe medii solide

• Colonia = ansamblu localizat, alcatuit din populatie

pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.

Pe mediu solid se descrie:

- forma coloniei - producerea de pigment

- marimea coloniei - consistenta coloniei

- suprafata coloniei - emulsificabilitatea

- marginile coloniei - mirosul culturii

Caracterele culturii microbiene pe medii solide

• Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie

pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.

Colonii S (smooth):

marea majoritate a bacteriilor

Colonii R (rough):

3 genuri importante in patologia umana:• Mycobacterium

• Corynebacterium

• Bacillus

S type

• Staphylococcus aureus

3

type R: Mediul Lowenstein-Jensen MYCOBACTERIUM MYCOBACTERIUM

TUBERCULOSIS PE TUBERCULOSIS PE

MEDIUL LOWENSTEINMEDIUL LOWENSTEIN

type R CORYNEBACTERIUMtype R CORYNEBACTERIUM GENUL CORYNEBACTERIUM

CORYNEBACTERIUMCORYNEBACTERIUM

““FLOARE DE FLOARE DE

MARGARETAMARGARETA””

4

type R BacillusCARACTERE DE CULTURA

BACILLUS- GELOZA SIMPLA

CARACTERE DE CULTURA

BACILLUS GELOZA

SANGE

Caracterele culturii microbiene

• In mediu lichid se descrie:

– Turbiditatea Formarea de depozite

– Culoarea Suprafata

5

In functie de necesarul de

oxigen:– Bacterii

• Aerobe

• Anaerobe

• Aerob facultativ anaerobe

• Microaerofile

Bacterii anaerobe

• Mediu lichid

Medii pentru anaerobi:

- Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la

suprafata se adauga ulei de parafina

- Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; la suprafata

se adauga ulei de parafina)

- Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea

mediului, realizate prin incorporare)

Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid,

agenti reducatori si se sigileaza cu parafina)

Metode de insamantare

• Insamantare = punerea in contact a uneiculturi bacteriene sau a unui produs patologiccu mediile de cultura.

• Izolare = repicarea unei singure colonii pealte medii de cultura cu scopul de a obtinecultura pura

• Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilorcrescute in/pe suprafata unui mediu de cultura

6

Tehnici de insamantare

• Tehnica insamantarii prin epuizare:

– Scop: obtinerea coloniilor izolate

• Insamantarea prin intepare (pe medii solide

aflate in tuburi)

• Insamantarea in panza

Pigment

7

Pigment Clasificare – hemoliza pe geloza sange

• hemoliza β:

= streptococi β -hemolitici

• hemoliza αααα -incompleta, verzuie

• streptococi γ -nehemolitici,

Medii simple: Apa peptonata

Bulion simplu

Geloza simpla

Medii complexe: bulion sange

geloza sange

geloza chocolatie

Medii lichide - bulion simplu

• Categoria: Mediu de

bază

• Componente: macerat

de carne + peptonă +

NaCl 0,5%

• Utilizare: pentru

germeni nepretenţioşi

8

Geloza simpla

• Categoria: Mediu de bază

• Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza simpla

• Categoria: Mediu de bază

• Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza sange

• Categoria: Mediupentru bacteriipretentioase

• Componente:geloză simplă + sânge

• Staphilococi

• Streptococi

HEMOLIZA

ααββ

STAFILOCOCSTAFILOCOC

-- αα COMPLETACOMPLETA

-- ββ CALDCALD--RECE RECE

(se (se clarificaclarifica la 4la 4°°C)C)

STREPTOCOCSTREPTOCOC

-- αα INCOMPLETA INCOMPLETA

VERZUIEVERZUIE

-- ββ COMPLETACOMPLETA

9

α Hemoliza Geloza socolatie

• Categoria: Mediuspecial

• Componente: geloză simplă la 60-80°C + sânge

• Utilizare: cultivareaneisseriilor, hemofililor

10

Mediul Chapman

Categoria: Mediu

selectiv şi diferenţial

(evidentiaza o proprietate

biochimica a tulpinii)

Componente: geloză

simplă + NaCl 7,5% +

manitol + roşu fenol

Utilizare: selectiv

pentru stafilococ

Mediul Chapman

Medii folosite pentru enterobacterii

Cele mai importante genuri:

Escherichia

Proteus

Klebsiella

Salmonella

Shigella

medii de cultura utilizate:

Drigalski

Levine

McConkey

Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu = lactozo pozitive

Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu = lactozo negative

Drigalski

11

Mediul Levine

• Categoria: Mediu selectivşi diferenţial

• Componente: geloză

simplă + eozină + lactoză +

albastru de metilen

• Utilizare: cultivarea

enterobacteriilor (E.coli)

GENUL ESCHERICHIA

E.COLIE.COLI

LEVINELEVINE

KLEBSIELLA

GELOZA-SANGE

COLONII MUCOASE

KLEBSIELLA

ADCL

COLONII MUCOASE

12

PROTEUS- INVAZIE Mediul Muller - Hinton

• Categoria: Mediu special

• Utilizare: Efectuarea antibiogramelor

Mediul Sabouraud

• Categoria: Mediu

special

• Componente: geloză

simplă +

maltoză/glucoză +

antibiotice

• Utilizare: cultivarea

fungilor