medii de cultura • suporturi materiale si nutritive care ... · pdf file2 clasificarea...
Embed Size (px)
TRANSCRIPT

1
MEDII DE CULTURA• suporturi materiale si nutritive care
servesc la cultivarea bacteriilor
• amestecuri de substante care asiguracultivarea microorganismelor
Scopuri
• Izolarea in cultura pura
• Identificare
• Diagnostic, tratament
• Producerea industriala a unor substante
(prepararea vaccinurilor)
• Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii
microbiene a unor elemente de mediu (apa,
alimente)
Clasificarea mediilor de cultura
Dupa consistenta: lichide
solide
semisolide
Dupa provenienta: naturale
sintetice
Dupa compozitie si scop: simple
complexe
speciale

2
Clasificarea mediilor de cultura
• Medii complexe
– de utilitate generala: - uzuale
- cu proteine native
– Medii speciale
• selective
• de imbogatire
• anaerobi
• teste biochimice
Caracterele culturii microbiene pe medii solide
• Colonia = ansamblu localizat, alcatuit din populatie
pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.
Pe mediu solid se descrie:
- forma coloniei - producerea de pigment
- marimea coloniei - consistenta coloniei
- suprafata coloniei - emulsificabilitatea
- marginile coloniei - mirosul culturii
Caracterele culturii microbiene pe medii solide
• Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie
pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.
Colonii S (smooth):
marea majoritate a bacteriilor
Colonii R (rough):
3 genuri importante in patologia umana:• Mycobacterium
• Corynebacterium
• Bacillus
S type
• Staphylococcus aureus

3
type R: Mediul Lowenstein-Jensen MYCOBACTERIUM MYCOBACTERIUM
TUBERCULOSIS PE TUBERCULOSIS PE
MEDIUL LOWENSTEINMEDIUL LOWENSTEIN
type R CORYNEBACTERIUMtype R CORYNEBACTERIUM GENUL CORYNEBACTERIUM
CORYNEBACTERIUMCORYNEBACTERIUM
““FLOARE DE FLOARE DE
MARGARETAMARGARETA””

4
type R BacillusCARACTERE DE CULTURA
BACILLUS- GELOZA SIMPLA
CARACTERE DE CULTURA
BACILLUS GELOZA
SANGE
Caracterele culturii microbiene
• In mediu lichid se descrie:
– Turbiditatea Formarea de depozite
– Culoarea Suprafata

5
In functie de necesarul de
oxigen:– Bacterii
• Aerobe
• Anaerobe
• Aerob facultativ anaerobe
• Microaerofile
Bacterii anaerobe
• Mediu lichid
Medii pentru anaerobi:
- Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la
suprafata se adauga ulei de parafina
- Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; la suprafata
se adauga ulei de parafina)
- Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea
mediului, realizate prin incorporare)
Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid,
agenti reducatori si se sigileaza cu parafina)
Metode de insamantare
• Insamantare = punerea in contact a uneiculturi bacteriene sau a unui produs patologiccu mediile de cultura.
• Izolare = repicarea unei singure colonii pealte medii de cultura cu scopul de a obtinecultura pura
• Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilorcrescute in/pe suprafata unui mediu de cultura

6
Tehnici de insamantare
• Tehnica insamantarii prin epuizare:
– Scop: obtinerea coloniilor izolate
• Insamantarea prin intepare (pe medii solide
aflate in tuburi)
• Insamantarea in panza
Pigment

7
Pigment Clasificare – hemoliza pe geloza sange
• hemoliza β:
= streptococi β -hemolitici
• hemoliza αααα -incompleta, verzuie
• streptococi γ -nehemolitici,
Medii simple: Apa peptonata
Bulion simplu
Geloza simpla
Medii complexe: bulion sange
geloza sange
geloza chocolatie
Medii lichide - bulion simplu
• Categoria: Mediu de
bază
• Componente: macerat
de carne + peptonă +
NaCl 0,5%
• Utilizare: pentru
germeni nepretenţioşi

8
Geloza simpla
• Categoria: Mediu de bază
• Componente: bulion simplu + agar-agar
Geloza simpla
• Categoria: Mediu de bază
• Componente: bulion simplu + agar-agar
Geloza sange
• Categoria: Mediupentru bacteriipretentioase
• Componente:geloză simplă + sânge
• Staphilococi
• Streptococi
HEMOLIZA
ααββ
STAFILOCOCSTAFILOCOC
-- αα COMPLETACOMPLETA
-- ββ CALDCALD--RECE RECE
(se (se clarificaclarifica la 4la 4°°C)C)
STREPTOCOCSTREPTOCOC
-- αα INCOMPLETA INCOMPLETA
VERZUIEVERZUIE
-- ββ COMPLETACOMPLETA

9
α Hemoliza Geloza socolatie
• Categoria: Mediuspecial
• Componente: geloză simplă la 60-80°C + sânge
• Utilizare: cultivareaneisseriilor, hemofililor

10
Mediul Chapman
Categoria: Mediu
selectiv şi diferenţial
(evidentiaza o proprietate
biochimica a tulpinii)
Componente: geloză
simplă + NaCl 7,5% +
manitol + roşu fenol
Utilizare: selectiv
pentru stafilococ
Mediul Chapman
Medii folosite pentru enterobacterii
Cele mai importante genuri:
Escherichia
Proteus
Klebsiella
Salmonella
Shigella
medii de cultura utilizate:
Drigalski
Levine
McConkey
Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu = lactozo pozitive
Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu = lactozo negative
Drigalski

11
Mediul Levine
• Categoria: Mediu selectivşi diferenţial
• Componente: geloză
simplă + eozină + lactoză +
albastru de metilen
• Utilizare: cultivarea
enterobacteriilor (E.coli)
GENUL ESCHERICHIA
E.COLIE.COLI
LEVINELEVINE
KLEBSIELLA
GELOZA-SANGE
COLONII MUCOASE
KLEBSIELLA
ADCL
COLONII MUCOASE

12
PROTEUS- INVAZIE Mediul Muller - Hinton
• Categoria: Mediu special
• Utilizare: Efectuarea antibiogramelor
Mediul Sabouraud
• Categoria: Mediu
special
• Componente: geloză
simplă +
maltoză/glucoză +
antibiotice
• Utilizare: cultivarea
fungilor