1

MEDII DE CULTURA suporturi materiale si nutritive care

servesc la cultivarea bacteriilor

amestecuri de substante care asiguracultivarea microorganismelor

Scopuri

Izolarea in cultura pura

Identificare

Diagnostic, tratament

Producerea industriala a unor substante

(prepararea vaccinurilor)

Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii

microbiene a unor elemente de mediu (apa,

alimente)

Clasificarea mediilor de cultura

Dupa consistenta: lichide

solide

semisolide

Dupa provenienta: naturale

sintetice

Dupa compozitie si scop: simple

complexe

speciale

2

Clasificarea mediilor de cultura

Medii complexe

de utilitate generala: - uzuale

- cu proteine native

Medii speciale

selective

de imbogatire

anaerobi

teste biochimice

Caracterele culturii microbiene pe medii solide

Colonia = ansamblu localizat, alcatuit din populatie

pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.

Pe mediu solid se descrie:

- forma coloniei - producerea de pigment

- marimea coloniei - consistenta coloniei

- suprafata coloniei - emulsificabilitatea

- marginile coloniei - mirosul culturii

Caracterele culturii microbiene pe medii solide

Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie

pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.

Colonii S (smooth):

marea majoritate a bacteriilor

Colonii R (rough):

3 genuri importante in patologia umana: Mycobacterium

Corynebacterium

Bacillus

S type

Staphylococcus aureus

3

type R: Mediul Lowenstein-Jensen MYCOBACTERIUM MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS PE TUBERCULOSIS PE MEDIUL LOWENSTEINMEDIUL LOWENSTEIN

type R CORYNEBACTERIUMtype R CORYNEBACTERIUM GENUL CORYNEBACTERIUM

CORYNEBACTERIUMCORYNEBACTERIUM

FLOARE DE FLOARE DE

MARGARETAMARGARETA

4

type R BacillusCARACTERE DE CULTURA

BACILLUS- GELOZA SIMPLA

CARACTERE DE CULTURA

BACILLUS GELOZA

SANGE

Caracterele culturii microbiene

In mediu lichid se descrie:

Turbiditatea Formarea de depozite

Culoarea Suprafata

5

In functie de necesarul de

oxigen: Bacterii

Aerobe

Anaerobe

Aerob facultativ anaerobe

Microaerofile

Bacterii anaerobe

Mediu lichid

Medii pentru anaerobi:

- Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la suprafata se adauga ulei de parafina

- Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; la suprafata

se adauga ulei de parafina)

- Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea

mediului, realizate prin incorporare)

Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid,

agenti reducatori si se sigileaza cu parafina)

Metode de insamantare

Insamantare = punerea in contact a uneiculturi bacteriene sau a unui produs patologiccu mediile de cultura.

Izolare = repicarea unei singure colonii pealte medii de cultura cu scopul de a obtinecultura pura

Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilorcrescute in/pe suprafata unui mediu de cultura

6

Tehnici de insamantare

Tehnica insamantarii prin epuizare:

Scop: obtinerea coloniilor izolate

Insamantarea prin intepare (pe medii solide

aflate in tuburi)

Insamantarea in panza

Pigment

7

Pigment Clasificare hemoliza pe geloza sange

hemoliza := streptococi -

hemolitici

hemoliza -incompleta, verzuie

streptococi -nehemolitici,

Medii simple: Apa peptonata

Bulion simplu

Geloza simpla

Medii complexe: bulion sange

geloza sange

geloza chocolatie

Medii lichide - bulion simplu

Categoria: Mediu de

baz

Componente: macerat

de carne + pepton +

NaCl 0,5%

Utilizare: pentru

germeni nepretenioi

8

Geloza simpla

Categoria: Mediu de baz

Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza simpla

Categoria: Mediu de baz

Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza sange

Categoria: Mediupentru bacteriipretentioase

Componente:geloz simpl + snge

Staphilococi

Streptococi

HEMOLIZA

STAFILOCOCSTAFILOCOC

-- COMPLETACOMPLETA

-- CALDCALD--RECE RECE

(se (se clarificaclarifica la 4la 4C)C)

STREPTOCOCSTREPTOCOC

-- INCOMPLETA INCOMPLETA

VERZUIEVERZUIE

-- COMPLETACOMPLETA

9

Hemoliza Geloza socolatie

Categoria: Mediuspecial

Componente: geloz simpl la 60-80C + snge

Utilizare: cultivareaneisseriilor, hemofililor

10

Mediul Chapman

Categoria: Mediu

selectiv i diferenial

(evidentiaza o proprietate

biochimica a tulpinii)

Componente: geloz

simpl + NaCl 7,5% +

manitol + rou fenol

Utilizare: selectiv

pentru stafilococ

Mediul Chapman

Medii folosite pentru enterobacterii

Cele mai importante genuri:

Escherichia

Proteus

Klebsiella

Salmonella

Shigella

medii de cultura utilizate:

Drigalski

Levine

McConkey

Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu = lactozo pozitive

Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu = lactozo negative

Drigalski

11

Mediul Levine

Categoria: Mediu selectivi diferenial Componente: geloz

simpl + eozin + lactoz +

albastru de metilen

Utilizare: cultivarea

enterobacteriilor (E.coli)

GENUL ESCHERICHIA

E.COLIE.COLI

LEVINELEVINE

KLEBSIELLA

GELOZA-SANGE

COLONII MUCOASE

KLEBSIELLA

ADCL

COLONII MUCOASE

12

PROTEUS- INVAZIE Mediul Muller - Hinton

Categoria: Mediu special

Utilizare: Efectuarea antibiogramelor

Mediul Sabouraud

Categoria: Mediu

special

Componente: geloz

simpl +

maltoz/glucoz +

antibiotice

Utilizare: cultivarea

fungilor