08_enterobacterii
TRANSCRIPT
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
Diagnosticul de laborator al infeciilor cauzate de enterobacterii Escherichia coliProdus patologicmaterii fecale, bil alimente, vrsturi urin puroi, LCR, snge
1. Examen directdin materii fecale nu se efectueaz examen microscopic
2. Izolarepe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson, Levine geloz lactozat pe geloz snge bulion
3. Identificarecaractere morfotinctoriale o bacili gram negativi, cu capete rotunjite, cu cili peritrichi o necapsulai, nesporulai caractere de cultur o n bulion: l tulbur uniform, formeaz depozit i un inel aderent la suprafa o pe medii solide: colonii de tip S, mici geloz snge colonii S, mici, alb-cenuii, hemoliz (urin) geloz lactozat colonii S, mici, lactozo-pozitive (galbene) Leifson, MacConkey - colonii S, mici, lactozo-pozitive (roii) Levine colonii caracteristice, lactozo-pozitive (mov nchis), cu luciu metalic caractere biochimice o pe mediul SIM H2S negativ mobilitate pozitiv indol pozitiv -1-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
o pe mediul TSI glucoz pozitiv, cu producere de gaz H2S negativ lactoz, zaharoz pozitiv o pe mediul Simmons Simmons negativ o pe mediul cu uree uree negativ identificare antigenic prin reacii de aglutinare pe lam, cu seruri polivalente, apoi monovalente pentru: E. coli enteropatogen EPEC E. coli enteroinvaziv EIEC E. coli enterohemoragic EHEC, serotipul O157 se efectueaz antibiograma
GENUL KLEBSIELLAK. pneumoniae K. oxytoca K. rhinoscleromatis K. ozaenae
Produs patologicsput, secreii nazale n infecii respiratorii materii fecale, bil, vrsturi, alimente n infecii digestive urin n infecii urinare puroi LCR n meningite snge n septicemii -
Examen directo coloraia Gram: cocobacili, Gram negativi, dispui n diplo, ncapsulai, imobili, nesporulai -2-
se efectueaz doar din produse patologice normal sterile
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
o coloraia negativ
- Izolarepe geloz, geloz snge, geloz lactozat crete pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii, acestea fiind folosite pentru dg.
- Identificarecaractere morfotinctoriale (vezi examenul microscopic) caractere de cultur o colonii mucoase de tip M, lactozo pozitive caractere biochimice o pe mediul SIM H2S negativ mobilitate negativ indol variabil o pe mediul TSI fermenteaz glucoza fr producere de gaz H2S negativ descompune lactoza i zaharoza o pe mediul Simmons Simmons pozitiv o pe mediul cu uree ureaz pozitiv o pe geloza lactozat descompune lactoza identificare antigenic o prin reacia de umflare a capsulei se determin prezena antigenului K determinarea patogenitii o nu se efectueaz de rutin o K. pneumoniae inoculat la oareci intraperitoneal sau subcutan determin septicemie mortal antibiograma se efectueaz la toate tulpinile izolate
-3-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
GENUL PROTEUSP. vulgaris P. mirabilis P. penneri P. myxofaciens
Produs patologicfac parte din microflora tubului digestiv, produc diferite infecii n condiiile scderii rezistenei organismului. o infecii urinare urin o infecii nosocomiale (plgi postoperatorii i arsuri suprainfectate) secreie din plag o infecii ORL (sinuzite, otite) puroi o septicemie snge o meningite LCR o infecii digestive (mai rare) materii fecale
1. Examen directse practic doar din produse biologice n mod normal sterile bacili Gram negativi, polimorfi, cu cili peritrichi, necapsulai, nesporulai
2. Izolarepe geloz simpl, pe geloz snge pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson geloz lactozat
3. Identificarecaractere morfotinctoriale (vezi examenul direct) caractere de cultur o pe medii fr bil fenomenul de crare: colonii cu caracter invadant, margini dantelate ce pot acoperi toat suprafaa mediului. -4-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
fenomenul Dienes: dac tulpinile provin de la aceeai specie i sunt nsmnate pe aceeai plac, prin cretere se suprapun, dac tulpinile sunt diferite rmnentre ele o zon de demarcaie o pe medii cu bil colonii de tip S, lactozo negative ochi de pisic (produc H2S) caractere biochimice o geloz lactozat nu fermenteaz lactoza o pe mediul SIM H2S pozitiv mobilitate pozitiv indol variabil o pe mediul TSI fermenteaz glucoza H2S pozitiv nu descompune lactoza i zaharoza o pe mediul Simmons Simmons pozitiv o pe mediul cu uree ureaz pozitiv identificare antigenic o prin reacii de aglutinare cu seruri anti O, anti H lizotipia o este util n scop epidemiologic pentru stabilirea sursei unei infecii nozocomiale o n practic se poate nlocui prin nsmnarea tulpinilor izolate pe o plac de geloz i urmrirea apariiei fenomenului de crare sau a liniei Diene determinarea patogenitii nu are importan practic antibiograma P. mirabilis: indol negativ P. vulgaris: indol pozitiv
-5-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
-
este obligatorie pentru fiecare tulpin izolat, deoarece pot prezenta multirezisten, mai ales cele izolate din infecii nozocomiale.
Diagnosticul de laborator al dizenteriei bacilareShigella dysenteriae Shigella flexneri Shigella boydi Shigella sonnei
Produs patologic (dizenteria bacilar):materii fecale o emise spontan o recoltate pe sond, de la purttori vrsturi alimente de la purttori: materii fecale cu sonda Nelaton
1. Examen direct nu se practic
2. Izolareape medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey, SS
3. Identificarecaractere morfotinctoriale o bacili Gram negativi, neciliai, necapsulai, nesporulai caractere de cultur o colonii de tip S, mici, transparente, lactozonegative caractere biochimice o pe mediul SIM H2S negativ mobilitate negativ indol variabil o pe mediul TSI fermenteaz glucoza fr producere de gaz H2S negativ -6-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
nu descompune lactoza i zaharoza o pe mediul Simmons Simmons negativ o pe mediul cu uree ureaz negativ identificare antigenic o reacii de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup determinarea patogenitii o testul keratoconjunctivitei la cobai testul Sereny
GENUL SALMONELLAS. enterica, subspecia enterica serogrupuri: S. typhi, S. paratyphi A, B, S. enteritidis
Produs patologicn febra tifoid o de la bolnavi: n prima spt. snge n a II-a spt. materii fecale, bil, suc duodenal n a III-a spt. materii fecale, snge pentru serodiagnostic n a IV-a spt. - snge pentru serodiagnostic o de la purttor: materii fecale dup administrarea unui purgativ, bil n gastroenterite materii fecale, vrsturi, alimente n septicemii snge
1. Examen direct: nu se efectueaz
2. Izolarepe medii de mbogire pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii (MacConkey, Leifson, SS) pe geloz snge, geloz lactozat
3. Identificarecaractere morfotinctoriale o bacili Gram negativi, ciliai peritrichi, nesporulai, necapsulai -7-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
-
caractere de cultur o pe geloz snge colonii de tip S, mici, transparente o pe MacConkey, Leifson colonii S, lactozo-negative o pe SS - colonii S, lactozo-negative, n ochi de pisic
-
caractere biochimice o pe mediul SIM H2S pozitiv mobilitate pozitiv indol negativ o pe mediul TSI fermenteaz glucoza H2S pozitiv nu descompune lactoza i zaharoza o pe mediul Simmons Simmons pozitiv
Seruri aglutinante polivalente O GrupI (A, B, D, E, L) Grup II (C, F, G, H)
pozitiv
negativ
Seruri monovalente AO, BO, DO, etc stabilire serogrup
Ser anti Vi
Seruri monovalente H stabilire serotip
pe mediul cu ureeureaz negativ identificare antigenic
4. Diagnostic serologicn febra tifoid o detectarea i titrarea anticorpilor fa de ag O, ag H ale S. typhi i paratyphi A, B (reacia Widal)
-8-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
Diagnosticul de laborator al infeciilor cauzate de Yersinia enterocoliticaProdus patologicn gastroenterite - materii fecale n apendicite, limfadenopatii mezenterice - coninut apendicular, ganglioni mezenterici n artrite septice - lichid sinovial snge
1. Examen direct - examen microscopic nu se practic
2. Izolareape geloz snge pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey
3. Identificarecaractere morfotinctoriale o bacili Gram negativi, mici, colorai bipolar, necapsulai, nesporulai, ciliai caractere de cultur o pe mediul Leifson, geloza lactozata - colonii de tip S, mai mici ca a altor enterobacterii, transparente, lactozonegative o pe geloz snge colonii de tip S, mici, mate, alb-cenuii, nehemolitice caractere biochimice o pe mediul SIM H2S negativ mobilitate negativ la 37 C pozitiv la 30 C
indol negativ o pe mediul TSI fermenteaz glucoza fr producere de gaz H2S negativ nu descompune lactoza descompune zaharoza o pe mediul Simmons -9-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
Simmons negativ o pe mediul cu uree ureaz pozitiv o pe geloz lactozat, Leifson, MacConkey nu descompune lactoza identificare antigenic o reacii de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup O3 i O9. determinarea patogenitii o nu are importan practic antibiograma se efectueaz
-10-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
Germene
Boalainfecii digestive
Produs patologicmaterii fecale, bil alimente, vrsturi urin puroi
Examen directdin materii fecale nu se efectueaz examen microscopic
Izolarepe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey,
Escherichia coliinfecii urinare infecii tegumentare, suprainfecii de plgi meningite septicemii
-
-
LCR snge -
Leifson, Levine geloz lactozat pe geloz snge bulion pe geloz, geloz snge, geloz lactozat pe medii selective i difereniale
Genul Klebsiella
-
infecii digestive infecii digestive infecii urinare infecii tegumentare, suprainfecii de plgi
-
sput, secreii nazale materii fecale, bil, vrsturi, alimente urin n infecii urinare puroi
-
se efectueaz doar din produse patologice normal sterile
-
-
meningite n septicemii
-
LCR snge
pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson
-11-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
-
infecii urinare (P. mirabilis, vulgaris)
-
urin
-
se practic doar din produse
-
pe geloz simpl, pe geloz snge
Genul Proteus-
infecii nosocomiale (plgi postoperatorii i arsuri suprainfectate)
-
secreie din plag
biologice n mod normal sterile bacili Gram negativi,
-
pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson
-
infecii ORL (sinuzite, otite)
-
puroi
polimorfi, cu cili peritrichi,
-
septicemie meningite infecii digestive (mai rare) dizenteria bacilar
-
snge LCR materii fecale materii fecale o emise spontan o recoltate pe sond, de la purttori -
necapsulai, nesporulai
-
geloz lactozat
Shigella dysenteriae
-
nu se practic
-
pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey, SS
-
vrsturi, alimente de la purttori: materii fecale cu sonda Nelaton
-12-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
Genul Salmonella
-
febra tifoid
-
de la bolnavi: o n prima spt. snge o n a II-a spt. materii fecale, bil, suc duodenal o n a III-a spt. materii fecale, snge pentru serodiagnostic o n a IV-a spt. - snge pentru serodiagnostic
-
nu se efectueaz
-
pe medii de mbogire
-
pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii (MacConkey, Leifson, SS)
-
de la purttor: o materii fecale dup administrarea unui purgativ, bil
-
pe geloz snge geloz lactozat
-
n gastroenterite n septicemii gastroenterite apendicite, limfadenopatii mezenterice
-
materii fecale, vrsturi, alimente snge materii fecale coninut apendicular, ganglioni mezenterici examen microscopic nu se practic pe geloz snge pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey -13-
Yersinia enterocolitica
-
-
artrite septice meningite
-
lichid sinovial LCR
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
GermeneCaractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL(geloz lactozat)
Identificare Caractere biochimiceReacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,
SIM H2S I Mo G
TSI L,Z H2S
Simm ons
M. cu uree
lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic reacii de aglutinare pe lam, cu seruri polivalente, apoi monovalente EPEC, EIEC, EHEC, serotipul O157 se efectueaz antibiograma
Escherichia coli
-
bacili gram negativi, cu capete rotunjite, cu cili peritrichi,
-
g. sg. colonii S, mici, alb-cenuii, hemoliz (urin)
+
-
+
+
+
+
-
-
-
-
g. l. colonii S, mici
-
Leifson, MacConkey colonii S, mici
-
necapsulai, nesporulai -
Levine colonii caracteristice, (mov nchis), cu luciu metalic -14-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
GermeneCaractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL(geloz lactozat)
Identificare Caractere biochimiceReacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,
SIM H2S I Mo G
TSI L,Z H2S
Simm ons
M. cu uree
lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic - prin r.de umflare a capsulei se determin prezena antigenului K
Genul Klebsiella
Col. Gram: cocobacili, Gram negativi, n diplo, ncapsulai, imobili, nesporulai Col. negativ
Colonii de tip M (mucoase)
+
-
+ -
-
+
+
-
+
+
determinarea patogenitii-nu seefectueaz de rutinK. pneumoniae inoculat la oareci intraperitoneal sau subcutan determin septicemie mortal
antibiograma se efectueaz la toate tulpinile izolate -15-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
GermeneCaractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL(geloz lactozat)
Identificare Caractere biochimiceReacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,
SIM H2S I Mo G
TSI L,Z H2S
Simm ons
M. cu uree
lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic-r. de aglutinare cu seruri anti O, anti H lizotipia-n scop epidemiologic
Genul Proteus
-
bacili Gram pe medii fr bil negativi, polimorfi, cu cili fenomenul de crare fenomenul Dienes
-
+
+ -
+
+
-
+
+
+
peritrichi, necapsulai, nesporulai
pe medii fr bil colonii de tip S, lactozo negative, ochi de pisic (produc H2S)
determinarea patogenitii nu are importan practic antibiogramaobligatorie
-16-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
GermeneCaractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL(geloz lactozat)
Identificare Caractere biochimiceReacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,
SIM H2S I Mo G
TSI L,Z H2S
Simm ons
M. cu uree
lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic-r. de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup determinarea patogenitii-testul keratoconjunctivitei la cobai testul Sereny
Shigella dysenteriae
-
bacili Gram negativi, neciliai, necapsulai, nesporulai
colonii de tip S, mici, transparente, lactozonegative
-
-
+ -
+
+
-
-
-
-
-17-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
GermeneCaractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL(geloz lactozat)
Identificare Caractere biochimiceReacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,
SIM H2S I Mo G
TSI L,Z H2S
Simm ons
M. cu uree
lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic-r. de aglutinare cu seruri mono si polivalente Diagnostic serologic-n febra tifoid-detectarea i titrarea anticorpilor fa de ag O, ag H ale S. typhi i paratyphi A, B (reacia Widal)
Genul Salmonella
bacili Gram negativi, ciliai peritrichi, nesporulai, necapsulai
-
g. sg colonii de tip S, mici, transparente
-
+
-
-
+
-
+
+
-
-
MacConkey, Leifson colonii S, lactozonegative
-
SS - colonii S, lactozo-negative, n ochi de pisic
-18-
Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8
GermeneCaractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL(geloz lactozat)
Identificare Caractere biochimiceReacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,
SIM H2S I Mo G
TSI L,Z H2S
Simm ons
M. cu uree
lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenicreacii de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup O3 i O9. determinarea patogenitii-nu are importan practic antibiograma se efectueaz
bacili Gram
-
mediul Leifson, MacConkey- col. de tip S, mai mici ca a altor enterobacterii, transparente, lactozonegative
Yersinia enterocolitic a
negativi, mici, colorai bipolar, necapsulai, nesporulai, ciliai -
-
-
-
+ -
+
+
-
-
+
pe g. sg. colonii de tip S, mici, mate, alb-cenuii, nehemolitice
-19-