· web vieweprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. deasemenea este usor de tinut...

61
Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla Cultivarea ciupercilor in regim casnic cu ajutorul perhidrolului Volumul I R. Rush Wayne, Ph.D. Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla Cresterea ciupercilor in regim casnic cu ajutorul perhidrolului Volumul I Copyright © 2001 R. Rush Wayne. Ph.D. Toate drepturile rezervate. Nici o parte a acestei lucrari nu poate fi reprodusa sau folosita sub nici o forma fara permisiunea autorului acesteia.. Pubicat pentru prima data sub titlul “Cresterea ciupercilor cu ajutorul perhidrolului”, Decembrie 1996 si sub titlul Cresterea ciupercilor – Pe calea cea simpla, Cutivarea ciupercilor in regim casnic cu ajutorul perhidrolului Ianuarie 1998 Editia a treia revizuita Noiembrie 1999 Redenumita Volumul I, August 2000 Revizuita Septembrie 2001 1

Upload: others

Post on 26-Dec-2019

7 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

 

Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simplaCultivarea ciupercilor in regim casnic

cu ajutorul perhidrolului

Volumul I 

R. Rush Wayne, Ph.D.

 

Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simplaCresterea ciupercilor in regim casnic cu ajutorul perhidrolului

Volumul I

Copyright © 2001R. Rush Wayne. Ph.D.

Toate drepturile rezervate. Nici o parte a acestei lucrari nu poate fireprodusa sau folosita sub nici o forma fara permisiunea autorului acesteia..

 

Pubicat pentru prima data sub titlul “Cresterea ciupercilor cu ajutorul perhidrolului”, Decembrie 1996si sub titlul

Cresterea ciupercilor – Pe calea cea simpla,Cutivarea ciupercilor in regim casnic cu ajutorul perhidrolului

Ianuarie 1998Editia a treia revizuita Noiembrie 1999Redenumita Volumul I, August 2000

Revizuita Septembrie 2001

  

Visitati Web site-ul pentru informatii despre Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simplahttp://www.mycomasters.com/Updates.html

precum si pentru ultimele si periodicele noi informatii despre metoda perhidrol.

 

 

1

Page 2:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

CUPRINS

Introducere

Preliminarii

CiupercileHypsizygus ulmarius (Elm oyster)Pleurotus eryngii (King oyster)Hericium erinaceus (Lion’s Mane)Agaricus subrufescens (Almond mushroom)Lentinula edodes (Shiitake)Pleurotus ostreatus (Oyster mushrooms)Ganoderma lucidum (Reishi mushroom)Coprinus comatus (Shaggy Mane)Hypsizygus tessulatus (Shimeji)Stropharia rugosa-annulata (King stropharia)Agaricus bisporus/brunnescens (button mushroom, Portobello)

Echipamentul de care veti avea nevoieSurse specializate de care s-ar putea sa aveti nevoie

Principiile de baza ale perhidrolului

Ce face perhidrolulEfectele biologice ale perhidroluluiAvantajele utilizarii perhidrolului in culturile de ciuperciContaminanti rezistenti la perhidrol

Ce nu face perhidrolulNevoia de atentie cand miceliul este expusPerhidrolul nu este un strerilizant in concentratia din culturile de ciuperci

Siguranta si consideratii de mediu in cazul perhidroluluiPerhidrolul si spiritul cultivarii organiceLacunele efectului perhidrolului din culturile de ciuperci

StabilitateaIn solutie puraLa temperaturi ridicateIn prezenta enzimelor care descompun perhidrolulAvand grija de puritatea stocului de solutie de perhidrol

Variatiile concentratiei perhidrolului din surse diferite de aprovizionareMasurarea concentratiei de perhidrolCalcularea necesarului de solutie de perhidrol de care avem nevoie

Cresterea si intretinerea culturii de Agar

Prepararea agaruluiMediul AMDUtilizarea concentratiei minime de perhidrol in mediul agar

Mediu de agar fara sterilizare sub presiuneRiscurile aparitiei de corpuri straine in agar si importanta curatirii vaselorReutilizarea mediului de agar tratat cu perhidrol

Procurarea culturilor de ciuperciImportanta pornirii de la un set de miceliu sortat atentClonarea ciupercilor

Stocarea miceliuluiMetoda in apa distilataMentinerea stocului de miceliu netratat cu perhidrol

2

Page 3:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Inocularea si manipularea culturilor de agarRacirea bisturiuluiInocularea pornind de la miceliul stocat in mediu fara perhidrolPrevenirea contaminarii prin inocularea la fund; curatarea miceliuluiIncubarea vaselor inoculate si stocarea acestora

Producerea miceliuluiAvantajele economice ale productiei proprii de miceliuAvantajele miceliului crescut pe substrat de rumegus

"In 10 Minute" miceliu pe rumegus ne-sterilizat sub presiuneSuplimenti nutritionali compatibili cu miceliu “In 10 Minute”Importanta curatirii containerelor in care produceti miceliu “In 10 Minute”

Miceliu pe rumegus sterilizat sub presiuneMiceliu pe seminteDificultatile miceliului pe seminte si problemele obtinerii acestuia

Containere pentru miceliuInocularea cu miceliuMetoda bucatilor de agarUtilizarea miceliului adaptat la perhidrol pentru inoculareIncubarea si ruperea miceliuluiCulturi lichide

Colonizarea compostuluiImportanta alegerii composturilor care nu contin enzime care sa descompuna perhidrolulPasteurizarea composturilor compatibile cu perhidrolulRecipiente folosite pentru fructificarea pe compost

Talajul si densitatea compostuluiPrepararea suplimentilor nutritionati pentru rumegusul tratat cu perhidrolSuplimenti nutritionali pentru compostCalculul necesarului de suplimentiMasurarea pH-ului compostului

Containere pentru culturaPungile folosite pentru gunoi pe post de containereEvitarea ciupercilor parazitare si a insectelorGaleti de plastic in loc de pungi pentru gunoi

Inocularea compostului din rumegus aditivat cu suplimentiMaruntirea miceliului inainte de inocularea acestuia in compostAdaugarea miceliului in compost

Formarea ciupercilorProceduri generale pentru fructificarea ciupercilor Oyster si HericiumProtectia personala impotriva sporilorCiuperci care necesita un pat de sol pentru a fructifica

Planificarea pe anotimpuriCresterea in natura versus cea in sere

RecoltareaProbleme ConcluziiDespre autor

Introduc ere

Pentru prima data cand a inceput sa ma intereseze cultivarea ciupercilor, am cumparat de la librarie cel mai cunoscut manual pentru aceasta, si l-am devorat. Dar interesul meu a scazut vertiginos pe masura ce lecturam acest manual. Am fost descurajat de necesarul de echipament si de procedurile necesare care erau sustinute in manual ca fiind obligatorii pentru pornirea unei prime culturi necontaminate. 

3

Page 4:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Trebuia sa am un  laborator steril, prevazut cu filtre speciale electrostatice si cu lampi in ultraviolet. Acest spatiu ar trebui sa fie dotat cu filtre de blocare a aerului, ar trebui sa port  imbracaminte sterilizata si  urma sa spal zilnic spatiul cu hipoclorit.  Cultura care urma sa fructifice trebuia sa fie intr-o alta incapere, astfel incat sporii sa nu patrunda in laborator. Iar containerele  care urmau sa fructifice, trebuiau sa fie prevazute cu filtre microporoase, astfel incat miceliul sa poata avea oxigenul necesar pentru dezvoltare dar bacteriile si mucegaiul sa nu poata patrunde in interior. Desigur, mai aveam nevoie si de o autoclava sau cel putin de un vas special sub presiune pentru a putea  steriliza materialele si substantele care urmau sa intre in aceste containere.

Luand in considerare acest necesar de echipament, am hotarat sa renunt  la cultivarea ciupercilor. Nu dispuneam de resursele de a cumpara acest echipament, oricum nu puteam sa inaintez mai mult de jumatate din drumul necesar pentru achizitionarea acestora fara a ma bloca. Din ceea ce urma sa culeg, casa mea urma sa devina o capcana pentru cresterea ciupercilor. Cu sau fara o menajera, urma sa avem o gramada de mizerie si dezordine, culturi microbiene de culoare verde si alba situate in si inafara frigiderului. Oricum din vremea  studentiei am invatat si deprins tehnicile de sterilizare; acestea in schimb nu urmau sa ma asigure ca la fiecare miscare in cultivarea  acestor delicioase ciuperci nu urma sa sar, din greseala, peste acestea.

Cu toate acestea, gandurile de a cultiva ciuperci nu au disparut in totalitate. Dimpotriva, peste aproape un an, am revenit in baza unei noi idei. Am citit despre faptul ca daca in mediul in care urma sa fie crescute semintele de orhidee era adaugat perhidrol atunci in acesta nu mai existau contaminanti. In timp ce perhidrolul ucidea bacteriile, fermentii si sporii ciupercilor, semintele orhideelor ramaneau in viata deoarece continutul acestora in enzime care descompun perhidrolul era destul de mare pentru ca acestea sa se autoprotejeze. Asa ca semintele orhideelor puteau fi germinate chiar si de catre incepatori fara a fi nevoie de tehnici sterile stricte.

Aici era intrebarea: putem sa adaugam perhidrol in mediul de dezvoltare a ciupercilor astfel incat acesta sa fie lipsit de contaminanti la fel ca in cazul orhideelor? Daca da, atunci probabil ca si cultivarea ciupercilor ar deveni mai accesibila si pentru incepatori, la fel ca in cazul germinarii orhideelor. Astfel ca am incercat sa dau un raspuns pornind de la miceliu. 

Ceea ce a urmat a fost un proces complicat si neliniar de invatare a cresterii diferitelor specii de ciuperci, de experimentari ale adaosului de perhidrol, a concentratiei acestuia, a cunoasterii diferitelor medii de cultura si a modului in care acestea interactioneaza cu ciupercile si perhidrolul,   testarea  diferitelor   tehnici   si   grade  de  pasteurizare  si   sterilizare,   intoarceri   inapoi   pornind  de   la  alte   valori   ale  pH-ului, experimentari cu suplimenti nutritionali, masurari si depistari ale surselor de contaminanti, imbunatatiri de proceduri, si asa mai departe, pana cand am ajuns sa pot spune ca am dezvoltat liniile directoare. Tot ce am facut practic a durat mult mai mult decat ati crede. Dar marele castig este ca pot spune DA, cresterea ciupercilor poate fi facuta de catre cultivatorii  incepatori fara a avea nevoie de facilitati sterile, filtrari ale aerului, chiar si fara a fi nevoie de vase sub presiune, daca se adauga perhidrol in cultura de ciuperci astfel incat aceasta sa nu mai aiba contaminanti. Utilizand tehnica pe care am dezvoltat-o, toate fazele cultivarii ciupercilor pot fi facute si de catre incepatori,  pe un sortiment variat de specii de ciuperci, si toate acestea investind foarte putin in echipamente si facilitati.

Am scris aceasta carte ca sa fie un ghid pentru cei care doresc sa-si faca un hobby din cresterea ciupercilor, care sa serveasca, de unul singur, ca baze primare in cresterea catorva specii comune de ciuperci, si in acelasi timp ca unul care sa-l poata folosi oricine, inclusiv incepatorii. Manualul meu anterior, “Cresterea ciupercilor cu ajutorul perhidrolului”, a fost scris pentru cultivatorii de ciuperci care sunt deja familiarizati   cu  metodele   traditionale  de  cultivare  a  ciupercilor,   fiind   focalizat  pe   folosirea  perhidrolului   ca  o   imbunatatire  a  cultivarii traditionale a ciupercilor. In timp ce acel manual facea posibila, pentru prima data, procesarea pasilor dintr-o cultura de ciuperci in regim casnic fara a mai fi nevoie de facilitati sterile si de filtrarea aerului, aceasta carte merge mai departe si prezinta procedurile care sunt  necesare fara a mai fi nevoie nici de sterilizarea sub presiune.

Bineinteles, ca nu toate procedurile descrise in aceasta carte au fost create de mine. In special, procedurile care nu necesita tehnica perhidrolului, sau care nu pot fi folosite in tehnica perhidrolului, isi au originea altundeva.

Pentru informatii avizate a tehnicilor traditionale de cultivare a ciupercilor, precum cele care presupun cultivarea la scara comerciala, va rog sa consultati Stamets, Growing Gourmet and Medicinal Mushrooms, Chilton si Stamets, The Mushroom Cultivator, sau alte carti de baza. Aceste carti sunt surse valoroase de informare pentru oricine doreste sa cultive ciupercile intr-un mod foarte serios. Deasemenea, pe masura ce veti parcurge aceste carti pagina cu pagina, si dupa discutiile despre procedurile elaborate de sterilizare si de surse de contaminanti, veti descoperii si veti aprecia acest manual pentru simplitatea tehnicilor pe care le contine.

Retineti ca tehnicile aseptice sau sterile, pe care procedurile din aceasta carte ar avea nevoie de explicatii suplimentare, se vor dovedi mult  mai  usor   in  practica  decat   in  descrierile   lor.  Speranta  mea este  ca  cititorul  va  cauta   instructiuni  directe  privitoare   la  acestea. Societatile de micologie va vor ajuta cand veti ajunge in acesta faza.

Retineti deasemenea ca aceasta carte chiar daca nu intentioneaza sa fie un ghid pentru cultivatorii de ciuperci in regim comercial, tehnicile descrise in ea s-au dovedit foate utile in regim comercial de mica amploare cat si pentru hobby-isti.

Preliminari i

Ciupercile

Doar despre ciupercile care sunt cultivate in mod frecvent sau care pot fi crescute acasa. Oricum, unele dintre ele sunt mai usor de crescut decat altele, si altele, chiar daca sunt usor de crescut, nu produc atat cat cele care sunt mai greu de cultivat.

Eu sunt focalizat doar pe patru tipuri de ciuperci pe care le cultiv in casa personala. Acestea sunt:

Hypsizygus ulmarius, Scoica ulmului sau ciuperca alba a ulmului: chiar daca aceasta nu este un membru al familiei de ciuperci scoica, este o ciuperca in stilul scoicai ca forma si ca si habitat. Creste agresiv pe rumegus sau paie, are rare probleme de contaminare daca sunt urmate tehnicile descrise aici si se simte bine in medii si conditii de temperatura variate, fructificand fie vertical fie orizontal. Cand sunt bine cultivate, ciupercile sunt mari si atractive, aratand ca niste flori albe stranii, si in opinia mea personala, sunt cele mai delicioase dintre 

4

Page 5:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

ciupercile scoica (nepunand in calcul si Pleurotus eryngii).

Pleurotus eryngii sau Scoica Rege: un membru al familiei ciupercilor scoica, dar care nu are forma si habitatul tipic al acestora. De provenienta din Europa, aceasta creaza pornind de la sol o postura impunatoare, alta decat cea pe care o are daca creste pe copaci sau busteni. Este mare si carnoasa. Substratul pe care il necesita este mult mai limitat decat la alte ciuperci scoica, la fel cum necesita si temperaturi stricte. Am citit ca prefera rumegusul sau paiele, oricum nu am experimentat suficient ca sa pot sa spun ca paiele sunt sau nu un substrat pentru ele. Fructifica cel mai bine la temperaturile de la terminarea primaverii, preferand sa creasca in locuri reci in timpul iernii, si uscandu-se la caldura din timpul verii. Este una dintre cele mai delicioase ciuperci cultivate daca este preparata adecvat: prajita rapid intr-o tigaie, fara sa o lasam sa fiarba in sucul propriu, apoi sarand-o usor.

Hericium erinaceus sau Coama Leului sau Pom Pom: o ciuperca lipsita de piciorul si palaria traditonala a ciupercii, aratand mai degraba cu un fel de bulgare de zapada acoperit cu ace din gheata. Creste rapid pe substrat de rumegus, si fructifica usor pentru o gama larga de temperaturi. Am auzit ca poate fi crescuta si pe substrat de paie, oricum eu nu am testat inca. Bucatarii adora aceasta ciuperca, si intr-adevar are o aroma deosebita apropiindu-se de cea a homarilor.

Agaricus subrufescens, sau ciuperca migdala: membru al familiei de ciuperci casnice buton si Portabellas. Este de neconfundat datorita aromei sale de extract de migdala. Ca o ciuperca casnica, prefera sa creasca pe balegar, dar poate fi crescuta pe paie, talaj, sau rumegus aditivat. Este o ciuperca care se dezvolta la caldura, dar fructifica si in sere daca acestea sunt incalzite pe timpul iernii, facand din aceasta un candidat la “Ciuperca anului”. Aceasta ciuperca in general are nevoie de un strat de sol sau turba, care sa fie aplicat la suprafata culturii pentru ca aceasta sa poata sa fructifice.

Alte cateva ciuperci care ar trebui luate in considerare:

Lentinula edodes sau Shiitake: foarte popular, crescuta de foarte multi oameni si documentata in mai toate cartile. Nu sunt un cultivator de Shiitake, dar metodele de cultivare, miceliul si prepararea substratului descrise aici trebuie sa funcrioneze si pentru Shiitake la fel cum functoneaza si pentru restul ciupercilor pe care le cultiv. Asigurati-va ca luati miceliu selectat pentru substratul pe care urmati sa cultivati: paie sau rumegus. Deasemenea este disponibil miceliu pentru temperaturi de iarna sau vara.

Pleurotus ostreatus si alte ciupercii din specia stridiilor precum H. ulmarius: acestea sunt printre cele mai usor de cultivat ciuperci, crescand rapid pe rumegus sau paie sau o mixtura de alte substarturi. Ele au fost primele ciuperci pe care le-am cultivat prin metoda perhidrol. Miceliul exista pentru marea majoritate a temperaturilor. Sporii de Pleurotus Ostreatus, care sunt produsi intr-o mare cantitate cand ciupercile ajung la maturitate, pot cauza probleme de sanatate.

Ganoderma lucidum sau Reishi: o ciuperca din topul celor medicinale datorita proprietatilor de stimulare a imunitatii. Aceasta ciuperca creste pe rumegusul de lemn tare la temperaturi ridicate. O alte specie inrudita cu aceasta Ganoderma oregonense, prefera temperaturile scazute. Ciuperca lemnoasa este rupta in bucati si din acesata se prepara ceaiuri.

Coprinus comatus sau coama paroasa: o ciuperca cu gust usor, cu viata scurta, care creste bine pe balegar. Nu am reusit sa o fac sa fructifice in sera, dar dupa ce am aruncat cultura in gradina, aceasta a continuat sa apara pentru inca doua sezoane.

Hypsizygus tessulatus, sau Shimeji: o ciuperca draguta, mica, rotunda si crocanta. Creste pe paie sau substraturi bazate pe rumegus. Miceliul pe care l-am obtinut necesita temperatura aproape de cea de inghet pentru a fructifica, astfel incat nu am experimentat prea mult. Dar presupun ca exista si miceliu care fructifica si fara sa-l inghetam.

Stropharia rugosa-annulata, sau King Stropharia: o ciuperca mare care creste pe substrat de talaj sau paie si care necesita un strat de pamant precum si de temperaturi ridicate pentru a fructifica. Miceliul se dezvolta lent, si pana la ora actuala se cunoaste doar o varietate care poate fi fructificata in sere.

Agaricus bisporus/Agaricus brunnescens, ciuperca buton sau ciuperca buton maro, crimini si portobellos: atatea tipuri de ciuperci buton pe care cei mai mari comercianti din US le cresc si le vand atat de ieftin incat aceste companii nu mai pot sa produca profit. Ca si ciuperca migdala, substratul preferat al ciupercilor buton si portobellos este balegarul. Prepararea compostului de calitate este un proces complicat si greoi care iese din scopul acestui manual. Dar acestea pot fi crescute si pe paie tratate cu perhidrol (vexi Volumul II). Productia nu va fi atat de ridicata ca si pe balegar, dar prepararea paielor este atat de usoara incat, probabil nu veti simtii lipsa surplusului de productie. La fel ca la ciupercile migdala, pentru fructificare trebuie sa existe un substrat de sol, dar in plus acestea necesita si conditii de racire a compostului. Miceliu poate fi obtinut pe seminte fierte sub presiune (in acest volum) sau prin fierberea orezului instant (vezi Volumul II, “In 10 Minute”).

Echipamentul de care aveti nevoie

Metodele descrise in acest volum necesita foarte putin echipament pentru a putea sa cresteti ciupercile dvs. preferate. Manavrarea si  masurarea perhidroluli necesita doar o pipeta (de 10ml) si un cilindru gradat (100ml sau 250ml). acestea pot fi procurate de la magazinele tehnico-sanitare. Pentru a masura concentratia perhidrolului din solutiile pe care-l cumparati de la farmacie, o sa mai aveti nevoie de o eprubeta cu guler si de un balon. Prepararea miceliului are nevoie de borcane cu capac ( de 800ml), un vas cu capac, o balanta sau un cantar si cateva pungi de plastic curate pentru mancare. Prepararea culturilor de Agar necesita in plus un set de vase Petri. Recomand folosirea celor din plastic. O oala sub presiune chiar daca nu este absolut necesara, este binevenita. Ea trebuie doar sa fie suficient de mare pentru ca borcanele sa incapa in ea. NU veti avea nevoie de incapere sterilizata, filtre de aer, lampi in ultraviolet, laborator steril,  scurgeri laminare, blocaje impotriva aerului, spalator pentru incaltaminte, etc. etc.

Prepararea si manipularea substratului final de compost necesita un vas cu capac pentru fierberea si racirea apei, un al doilea vas cu capac de marimea celui in care preparati ceaiul pentru fierberea apei necesare pasteurizarii containerelor, o galeata de 20l din plastic cu capac etans. (aceaste galeti pot fi cumparate ieftin de la fabricile de inghetata sau de la alte fabrici (evitati galetile care au fost folosite pentru vopsele, solventi, sau alte substante toxice).

5

Page 6:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Pentru perioada in care miceliul trebuie sa se imprastie in compostul final, veti avea nevoie de cutii de carton ( 20x20x20cm) si de cateva pungi de polietilena groase de 9-14micrometri (evitati pungile care sunt mai subtiri de 9), sau un set de galeti de 7-11l din plastic cu capac etans. Pentru manevrarea compostului veti avea nevoie de inca o mana de ajutor, si de un spatiu racoros. Mai tarziu, daca doriti sa cresteti o cantitate mare ciuperci, probabil ca veti opta pentru un ventilator si un sistem automat de stropire.

Furnizori specializati de care s-ar putea sa aveti nevoie

Pentru prepararea agarului, veti avea nevoie de Agar, pulbere fina de malt, (daca planuiti sa fierbeti sub presiune mediul) extract de drojdie precum si de alte cateva lucruri. Agarul ar trebuiu sa-l gasiti la magazinele care vand produse naturale pentru sanatate, la furnizorii de culturi de ciuperci (n.t. incercati la laboratoarele spitalelor). Retineti ca agarul chiar daca este mai scump decat mediile gata preparate, AMD, acestea din urma contin jumatate sau mai putin agar, astfel incat s-ar putea ca acesta sa nu fie o afacere. Pulberea de malt si extractul de drojdie le puteti gasi la magazinele gen Plafar sau in laboratoarele de cercetari (n.t. incercati la fabricile de bere).

Pentru prepararea miceliului si a compostului veti avea nevoie de fibra de hartie si de rumegus. Fibra de hartie este cel mai usor de procurat  de  la   fabricile care o produc. Rumegusul  puteti  sa-l  obtineti  de  la  fabricile  de  lemn, sau  in mediul   rural   la gaterele pentru prelucrarea  lemnului.   Incercati  sa aflati  din ce  lemn s-a obtinut   rumegusul  si   inceracti  sa obtineti   rumegus din  lemn de esenta  tare (rumegusul din lemn de brad va fi folositor doar in cazul ciupercilor Pleurotus Eryngii si A. subrufescens).

Notiuni de baza legate de perhidrol

Ce face perhidrolul ?

Radicalul perhidrol este o forma reactiva de oxigen care ataca diferitele forme organice. In celulele vii, acesta deterioreaza materialul genetic,  membranele   celulelor   si   orice   alceva  mai   intalneste   in   calea   lui   cu   care   poate   reactiona.   Facand  acestea,   perhidrolul   in concentratie suficienta ar putea sa distruga bacteriile, sporii acestora, fermentii si diferitii sporii inclusiv cei de ciuperca. Aparent, poate deasemenea sa ucida diferitii  spori mici prezenti  in aer si  contaminantii  care ataca celulele pielii  umane, care se spune ca exista in  permanenta in  jurul cultivatorilor de ciuperci.  Deci, perhidrolul actioneaza asupra tuturor contaminantilor prezenti   in aerul culturilor de ciuperci   inclusiv  asupra   sporilor  acestora.  Prin   contrast,  antibioticele   in   general   actioneaza  doar   asupra  contaminarii   bacteriene,   si fungicidele actioneaza doar asupra fermentilor si sprorilor.

Frumusetea  perhidrolului  consta   in  aceea  ca  aceasta  nu  distruge  miceliul  care  s-a  dezvoltat   si   nu   intereactioneaza   in  cresterea  si fructificarea acestuia. In ciuda razei mari de actiune a perhidrolului impotriva contaminantilor dintr-o cultura de ciuperci, exista o gama relativ mare a concentratiei acestuia in care acesta va permite dezvoltarea miceliului si fructificarea acestuia. Miceliul care s-a stabilizat,  datorita abilitatii lui de a produce la un nivel inalt enxime care descompun perhidrolul, este evident in stare sa se apere singur impotriva concentratiei  mari a radicalilor de perhidrol care distrug sporii,  celulele si   fragmentele minuscule ale organismelor multicelulare. Deci putem adauga perhidrolul la culturile de ciuperci, care sa permita dezvoltarea miceliului dar care sa omoare restul contaminantilor.

Aceasta combinatie are o serie de avantaje. Cea mai evidenta este aceea ca reduce semnificativ costurile datorate echipamnetului si facilitatilor elaborate pentru controlul mediului. Prin adaugarea perhidrolului   in culturile de ciuperci devine posibila  indeplinirea tuturor fazelor procesului  traditonal de crestere a ciupercilor,   incepand de  la   izolare pana  la  fructificare, ca acestea sa se execute  in  locuri nesterilizate si fara filtrari ale aerului. Puteti sa uitati de laboratoarele sterile, filtrele de aer, lampile in ultraviolet, blocarile de aer si alte  echipamente  ascociate  controlului   contaminarilor  microbiene  –  chiar   si   de   filtrele  dispuse   la  gura  sacilor  de  plastic   in   care  se  afla compostul de fructificare. Utilizand perhidrolul, toate acestea se reduc la folosirea unor unelte sterile, la o sursa de apa fiarta (sau un vas sub presiune pentru o si mai mare siguranta). Si in timp ce metodele traditionale necesitau tehnici de sterilizare inalte si mentinerea unei igieni  perfecte a personalului  care urma sa prepare  agarul  si  miceliul,   folosirea perhidrolului  va  duce  la  succes  folosind metode de sterilizare modeste si o minima atentie pentru igiena personala. Mai mult, este posibil sa fructificati ciupercile – chiar si cele care dezvolta  un numar mare de spori – in aceeasi cladire pe care o folositi la mentinerea culturilor si la producerea miceliului, fara ca sa va fie frica ca sporii produsi de corpurile ciupercilor care fructifica se vor imprastia in cultura de agar distrugandu-l. Perhidrolul va ucide sporii proveniti din ciuperca a carei miceliu o protejeaza.

Contaminantii isi dezvolta rezistenta la perhidrol, in acelasi mod in care o fac cu antibioticele uzuale? Da si nu. Multi dintre contaminanti  sunt deja rezistenti la perhidrol, si odata ce acestia si-au stabilit o colonie, vor creste viguros. Aspergillus (mucegaiul verde-albastru) este foarte   rezistent   la   perhidrol.  Dar   in  mod  evident  perhidrolul,   intr-o  concentratie   suficienta,   trece  peste  mecanismul  de   rezistenta   a organismelor uni-celulare si a sporilor izolati, si chiar si peste organismele multi-celulare daca acestea sunt foarte mici.

Ce nu face perhidrolul ?

Un  lucru pe care perhirolul NU il face este sa va inlature toate grijile legate de sterilizare. Repet, chiar daca perhidrolul adaugat va ucide  sporii izolati, fermentii si bacteriile care se gasesc in cultura (si acestia sunt in cea mai mare parte problemele de contaminare a culturii),  perhidrolul NU va ucide organismele multicelulare care s-au stabilit (asa cum este mucegaiul verde) daca acestea au depasit o anumita dimensiune. Deasemenea, nu va fi   foarte folositor  in cazul  in care exista o concentratie mare de spori  de mucegai. Este evident ca organismele multicelulare si concentratiile mari de spori care germineaza sunt in stare sa produca suficient de multe enzime care sa descompuna perhidrolul, astfel aparandu-se de acesta. Si odata ce atat organismele multicelulare cat si concentratiile mari de spori sunt de dimensiuni microscopice putandu-se gasi pe mainile dvs. sau pe particulele fine de mizerie sau praf, ar fi bine sa va luati cateva masuri in plus legate de curatenie cel putin in fazele de inceput ale lantului de cultuvare a ciupercilor, chiar daca veti utiliza perhidrol. Oricum nu trebuie sa va fie frica sa lasati culturile in aerul din jur pentru o perioada scurta de timp, cum ar fi cand mutati dintr-un recipient in altul, sau cand doriti sa faceti o inspectie. Dar oricum nu veti dori ca unul din vasele Petri, de exemplu, sa cada pe jos. Tot la fel nu veti dori ca in culturile dvs. sa ajunga sa cada particule sau insecte. Este un lucru bun sa va obisnuiti sa stergeti praful in locul in care urmeaza sa incubati culturile. Va trebui sa treceti prin flacara sau sa sterilizati intr-un fel instrumentele pe care urmati sa le folositi pentru a transfera dintr-o cultura in alta. Si faceti o regula din a va sterge degetele in alcool inainte de inocularea agarului sau a miceliului. Eu fac in acelasi  mod cu suprafetele pe care urmeaza sa lucrez. Aceasta reduce sansele ca particule de dimensiuni mari sa patrunda in cultura, protejand  miceliul care este expus.

6

Page 7:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Este deasemenea foarte important sa stiti si sa va aduceti aminte ca perhidrolul NU protejeaza miceliul ciupercii de contaminantii din aer. Miceliul descompune perhirolul datorita faptului ca aceasta este in contact cu el, astfel ca orice contaminant din aer intra in contact cu miceliul si nu cu perhidrolul, efectul acestuia devenind nul. Astfel,  ca o regula generala, perhidrolul protejeaza mediul de cultura sau substratul de contaminanti aerobi. Astfel ca procedura in care trebuie sa aveti maximum de precautii luate este cea in care urmeaza sa  transferati miceliul, sau in cele in care este implicata expunerea miceliului la aerul nefiltrat. Si odata ce miceliul s-a contaminat, va trebui sa luati totul de la capat cu o cultura necontaminata, sau sa curatati intr-un fel sau altul astfel incat aceasta sa nu mai aiba contaminanti.  Acest lucru il vom discuta pe larg mai tarziu.

In final, perhidrolul nu este un sterilizant exceptand cazul in care concentratia lui este mare, caz in care nu mai poate fi folosit pentru cresterea ciupercilor. Asta este, in general nu puteti folosi perhidrolul pentru sterilizarea culturii de ciuperci. La concentratia compatibila cu cresterea ciupercilor, perhidrolul nu va ucide contaminantii vii prezenti in mediu, si acesta se va distruge rapid datorita enzimelor pe care acestia le produc. Oricum, chiar daca o parte din spori si bacterii vor fi ucise prin folosirea perhidrolului, vor ramane suficient de multi contaminati care sa prolifereze in scurt timp. Astfel ca regula generala devine: toate materialele si containere vor trebui sa fie pasteurizate inainte ca sa adaugam perhidrolul; materialele de cultura precum rumegusul neprocesat termic, va trebui sa fie steriluzat sub presiune pentru a distruge enzimele prezente in acesta. Si un corolar: orice apa care se foloseste fara a fi sterilizata sub presiune, va trebui sa fie curata si libera de particule, din moment ce orice fragment de material organic sau neorganic continut in aceasta pot contine contaminanti vii, a caror enzime sa descompuna perhidrolul.

Masuri de siguranta si consideratii de mediu in cazul perhidrolului

Nu exista nici o regula de precautie pentru a manevra perhirol de 3%. Toxicitate lui este foarte mica, si se descomune complet in apa si  oxigen cand se imprastie sau se inghite. Este lipsit de miros, nu pateaza si nu arde. Este cunoscut faptul ca decoloreaza doar cand temperatura lui ajunge la 60C, temperatura unei ape foarte fierbinti. Toate datele referitoare la el sustin ca pentru mediul inconjurator este benign.

Din moment ce perhidrolul in varianta comerciala este preparat chimic, altfel decat extras din surse naturale, probabil nu va fi considerat  ca  fiind compatibil  cu certificatele  si  standardele pentru produse organice care sunt   in  voga  la ora actuala.  Oricum, eu consider ca utilizarea perhidrolului este in spiritul unei culturi organice. Din moment ce perhidrolul prezent in culturile de ciuperci se descompune total in apa si oxigen pe masura ce miceliul castiga teren, astfel incat nu poate fi gasita nici o urma de perhidrol in ciuperca rezultata, ne-luand in calcul faptul ca acesta este un proces biologic natural. Mai mult, perhidrolul poate fi gasit in forma naturala in toate organismele care traiesc in aer precum si intr-o varietate de medii inconjuratoare naturale. Din timpuri imemoriale, albinele secreteaza enzime care adauga perhidrol la nectarul lor, asigurand protectia de bacterii, fermenti, mucegai si propagand aceste calitati mierii care rezulta. Miceliul unora dintre speciile de ciuperci produc la randul lor perhidrol care le ajuta la distrugerea organismelor intalnite in substratul din calea lor. Si  perhidrolul  este chiar  o parte a  procesului  de  aparare  si  vindecare a  organismului  uman.   Intr-adevar,  pe   tot  globul,  mii  de  oameni apartinand unui sistem de vindecare numit “terapia oxigenului” inghit perhidrol alimentar zilnic pentru a vindeca diferite boli si pentru a mari vitaliatea organismului lor, facand aceasta de mai multi ani de zile (oricum eu nu recomand acest lucru). In final, utilizarea perhidrolului  reduce necesarul de echipament si facilitati, simplificand toti pasii procesului de cultivare a ciupercilor.

Sunt cateva intrebari care se ridica legate de efectele oxidante ale perhidrolului folosit in cultivarea ciupercilor. Clorul, cand reactioneaza cu materiale organice precum fibrele de hartie, produce o mica cantitate de dioxina, un produs chimic foarte periculos care produce cancer. Perhidrolul nu produce dioxina, astfel incat, campaniile de duse de cei de la protectia mediului urmaresc sa convinga fabricile de hartie sa foloseasca perhidrolul in locul clorului. Totusi, s-ar putea imagina ca perhidrolul produce alte substante daunatoare in reactia lui cu substratul dintr-o cultura de ciuperci. Nu exclud aceasta posibilitate, dar o consider ca fiind foarte putin probabila. Pentru un singur  lucru:  organismele vii  din  aer  au evoluat  pe durata a milioane de  ani  avand  in  si   in   jurul   lor  perhidrol.  Perhidrolul  este generat  de metabolismul aerob natural, si se fromeaza in mod natural in reactia apei cu oxigenul in prezenta razelor ultraviolete ale soarelui. Asta inseamna ca organismele aerobe si-au dezvoltat un mecanism metabolic ca sa faca fata varietatii de oxidanti care rezulta din reactia perhidrolului cu materialele biologice. In plus, perhidrolul este stabilizat chimic in substraturile de ciuperci sterilizate si concentratia pe care o utilizam este atat de mica incat cantitatea de substrat oxidant trebuie sa fie foarte mica. In cele din urma, nu detin nici o dovada de  mutatie genetica sau de efecte toxice care sa fie prezente in miceliul sau ciupercile rezultate in urma utilizarii perhidrolului in cresterea lor.  Culturile de agar care contin perhidrol duc la formarea unui halou frumos si sanatos de miceliu, iar ciupercile rezultate din acesta sunt la fel de frumoase ca si cand ar fi fost crescute prin metode traditionale.

Stabilitatea

Solutia de perhidrol 3% pe care o puteti cumpara de la farmacii si care are stabilizator acidul fosforic, este aproape stabila daca este mentinuta in spatii racoroase. Cand este adaugat in mediile sterilizate sub presiune de cultivare a ciupercilor, este evident ca acesta se va descompune lent. Timpul in care acesta se va descompune, nu poate fi precizat, acesta depinzind de o sumedenie de factori cum ar fi: compozitia mediului, concentratia de perhidrol si temperatura. Oricum, din experienta personala de pana acum, pot sa spun ca acesta continua sa distruga contaminantii suficient de mult timp pentru a permite ca miceliul diferitelor specii de ciuperci sa poata sa se dezvolte si sa colonizeze substratul.

Pe de alta parte, perhidrolul nu va trebui sa fie adaugat in medii fierbinti (doar daca veti lua in calcul o cantitate suplimentara de perhidrol care  sa  suplineasca  pierderile  din  descompunere).  Din  moment  ce    perhidrolul  devine  activ   in   jurul   temperaturii   de  60C,  el   se  va  descompune rapid cand va intra in contact cu materiale organice a caror temperatura este apropiata sau mai mare decat aceasta. Asa ca asteptati pana ce mediul s-a racit, sau cel putin pana cand acesta ajunge la o temperatura la care il puteti tine in mana fara sa va ardeti, si doar atunci adaugati perhidrolul.

In contrast cu comportamentul sau in medii sterilizate, perhidrolul se descompune rapid in prezenta enzimelor, la fel cum se intampla cand il puneti pe rana. Celulele rupte de piele si vasele de sange ale unei rani contin enzime din abundenta care descompun perhidrolul, acesta eliminand bule de oxigen. Enzime similare, cunoscute ca si catalizatori si peroxizi, se gasesc in toate organismele vii sau care au fost  odata vii, exceptand cazul in care aceastea au fost tratate termic sau sterilizate. Astfel ca: semintele nefierte, faina, rumegusul, lemnul etc. vor distruge in scurt timp perhidrolul. Aceasta insemna ca ele vor trebui sa fie tinute departe de stocul dvs. de perhidrol. Deasemenea, 

7

Page 8:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

inseamna ca daca veti dori sa incorporati oricare din materialele specificate mai sus, mai inati va trebui ca sa le tratati termic pentru ca sa distrugeti enzimele care ar putea sa anuleze efectul perhidrolului pe care doriti sa-l adaugati in cultura.

Fac cateva masuratori pentru a verifica concentratia solutiei de perhidrol pe care urmeaza sa o folosesc. Cand folosesc perhidrol, dau jos capacul de pe aceasta si sterg partea superioara a sticlei cu alcool pentru a elimina contaminantii vii. Dupa care torn apa firbinte peste vasul in care urmeaza sa fie perhidrol si folosesc   o pipeta pasteurizata care o manevrez avand o bucatica de vata situata intre ea si  degetele mele. Pipeta nu necesita sa fie sterilizata in vas sub presiune, dar cel putin aceasta trebuie sa fie trecuta prin apa fiarta (partea de dedesubtul portiunii cu vata) pentru cateva minute, apoi racita, inainte ca aceasta sa fie utilizata. Un cilindru gradat de 100ml este  suficient pentru a steriliza in apa fierbinte pipeta. Temperatura ridicata va distruge organismele vii din pipeta, in timp ce perhidrolul va ucide restul de spori care rezista la caldura. Deasemenea am grija de fiecare data ca sa nu rastorn perhidrolul prin gatul sticlei pana cand nu sunt sigur ca acesta nu intra in contact cu contaminantii.

Variatiile concentratiei de perhidrol din diferite surse

Un fapt cert este ca atunci cand veti  cumpara solutie de perhidrol  inscriptionata cu 3%, concentratia acesteia s-ar putea sa fie alta. Concentratia s-ar putea sa difere considerabil in ambele directii. Ati putea sa fiti mai siguri ca ati cumparat o solutie pe care sa va puteti baza, uitandu-va ca aceasta sa nu fie expirata. (sticlele de perhidrol pe care eu le cumpar au inscriptionata doar luna nu si anul). Oricum, chiar daca aceasta nu au expirat nu puteti fi sigur ca concentratia acestora este de 3%. De aceea este necesar sa aveti o metoda prin  care sa masurati  concentratia solutiei.  Aceasta se poate face prin descompunerea unei mostre de perhidrol si  masurarea oxigenului eliberat, lucru pe care il fac simplu prin tehnica balonului.

Iata metoda pe care o folosesc pentru masurarea concentratiei solutiei de perhidrol:

Luati o eprubeta curata (preferabil una cu guler sau filet pentru capac), un balon mic (de jucarie) si o feliuta de ciuperca din palaria unei ciuperci pe care o aveti la indemana (pentru rezultate rapide, folositi o ciuperca tanara pe care o curatati de pielita pentru a o expune).  Daca nu aveti o ciuperca, puteti folosi o bucatica de banana sau alta vegetala cu coaja. Veti avea nevoie de solutia dvs. de perhidrol, o guma de legat borcanane, o pipeta pasteurizata, un cilindru de 100ml gradat si de un vas cu apa.

1) Cu ajutorul pipetei pasteurizate masurati 5ml de solutie de perhidrol pe care o turnati in eprubeta.2) Tinand inclinata eprubeta, puneti bucatica de ciuperca in eprubeta aproape de gatul ei, fara ca sa ajunga in perhidrol.

3) Fiind sigur ca balonul nu contine aer puneti-l pa gatul eprubetei evitand in continuare ca ciuperca sa ajunga in perhidrol.

4) Puneti guma de legat borcane peste gatul balonului astfel asigurandu-va ca nu v-a scapa aer pe la gatul acestuia.

5) In momentul in care aceasta instalatie este “sigilata” lasati sa cada ciuperca in perhidrol. Solutia ar trebui sa scoata bule de oxigen imediat.

6) Agiatati tubul. Solutia de perhidrol ar trebui sa se descompuna in 5-10 minute in functie de cantitatea de enzime prezente in ciuperca.

7) Cand s-a descompus complet veti observa ca numarul de bule si dimensiunea acestora scade. Intre timp balonul ar trebui sa se fi umplut cu oxigenul eliberat.

Colegii  mei  de  la cursurile  de chimie mi-au spus ca 5ml de solutie  de perhidrol  3% degaja aprox.  49ml de oxigen cand acesta se descompune complet la temperatura camerei si la presiunea de 1atm. Puteti folosi urmatoarea procedura pentru masurarea oxigenului eliberat de solutia de perhidrol: 

1. Umpleti un cilindru gradat cu apa si intoarcet-il cu gura in jos intr-un alt vas cu apa, asigurandu-va cu nu are bule de aer.2. Trageti gatul balonului de test peste gatul eprubetei pentru a capta oxigenul eliberat, dupa care il strangem in portiunea gatului 

cand il dam jos de pe eprubeta si il scufundam in apa din vas.

3. Avem grija ca oxigenul din balon sa fie eliberat doar in cilindrul gradat.

4. Tinand gatul cilindrului in apa din vas, citim volumul de oxigen eliberat prin aducerea la acelasi nivel a apei din cilidru cu a celei  din vas.

Prima data cand am facut testul, au reesit 52ml de oxigen din 5ml de perhidrol. Tinand cont ca este foarte probabil ca in balon sa fi existat  aprox. 3ml de aer, rezulta ca solutia a generat o cantitate foarte apropiata de cea teoretica.

Iata cum puteti sa calculati necesarul de solutie de perhidrol de care aveti nevoie, daca solutia de test are concentratia diferita de 3%: 

1. Impartiti volumul de oxigen degajat de 5ml de solutie 3% (49ml) la volumul de oxigen pe care l-ati obtinut.2. Inmultiti numarul astfel obtinut cu cantitatea de solutie pe care urmeaza sa o adaugati mediului ca si cum aceasta solutie ar fi 

de 3%.

Cunoasterea exacta a concentratiei de perhidrol este foarte importanta cand faceti agarul. Din moment ce veti lucra cu concentratii foarte apropiate de limita de jos a eficientei. Cand produceti miceliu veti lucra cu concentratii mult mai mari, astfel incat plaja acesteia este mai  mare. Folosesc mai mult perhidrol in compostul final, dar si aici exista loc reglaj a perhidrolului. Este indicat ca sa testati fiecare sticla cu 

8

Page 9:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

solutie de perhidrol mai ales in cazul producerii agarului si pentru a va face o idee generala despre cel care il produce sau il valorifica. Astfel veti fi siguri ca si culturile dvs. vor avea protectia pe care o doriti. Probabil ca veti experimenta din mai multe surse pentru a vedea care din ele au produsul cel mai de incredere. Paradoxal, cele mai ieftine se dovedesc a fi si cele mai bune. Magazinele cu echipamente pentru bazine de inot au si ele solutii de perhidrol dar cu concentratia mult mai mare, astfel incat este bine sa respectati indicatiile si atentionarile de pe eticheta acestora.

Cresterea si intretinerea culturilor de agar

Primul  pas   in   cresterea  ciupercilor  este   propagarea  si   intretinerea  miceliului  pe  agar   in   vase  Petri.  Acest   prim  pas  este   folosit   in  depozitarea, propagarea si intretinerea miceliului intr-o stare sanatosa prin transferare in serie, inoculand o a doua cultura.

Prepararea vaselor cu agar

Exista o gramada de retete pe care cultivatorii de ciuperci cresc miceliul, folosind ca mediu ogarul in vase Petri. Am incarcat cateva dintre acestea, dar in mod curent folosesc doar una: drojdie-malt-agar, sau altfel spus DMA. Acest mediu a dat rezultate acceptabile pentru ori  care din speciile de ciuperci pe care am dorit  sa le cresc. Nu este atat de bogat  in continut ca sa  fructifice  instantaneu, dar marea majoritate a miceliului se dezvolta in 2-3 saptamani. In opinia personala, daca utilizati perhidrolul in mediu nu este nevoie ca acesta sa creasca mai   repede,   tinand cont  ca aceasta va va obliga  sa   faceti  din  nou vase cu DMA, pentru a mentine miceliul  proaspat.  De asemenea, conform unora dintre cultivatori, se recomanda ca dupa mai multe transferuri  repetate de miceliu dintr-un vas in altul,  sa incepeti o cultura de la inceput (din cultura de stoc), pentru a evita problemele de imbatranire a miceliului. Din acest punct de vedere, cu cat miceliul creste mai repede, cu atat mai repede unul din ele va trebui sa fie pus in cultura de stoc. Daca acest lucru este adevarat,  atunci prrobabil ca voi avea miceliu care sa creasca relativ incet.

Imi mentin toate culturile din vasele Petri in mediu care contine perhidrol. Contaminarea vaselor cu perhidrol este rara, chiar daca se iau doar cateva precautii. Puteti sa turnati continutul vaselor in aerul bucatariei dvs., si puteti sa le incubati si depozita aproape ori unde doriti atat timp cat locul este relativ curat si mediul inconjurator compatibil cu cresterea miceliului.  Oricum vedeti  recomandarile mele de la sfarsitul acestei sectiuni.

Mediu DMA 

Iata reteta pentru 1l de solutie DMA pe care o folosesc:

12 gr. agar12 gr. pulbere fina de malt1 gr. pudra de drojdie0.5 gr. faina (prin rotatie: grau, secara, porumb, secara, orez si tarate)0.5 gr. hrana concentrata pentru iepuri (sau pentru alte animale)4-5 gr. rumegus (rumegusul poate fi marit pentru speciile care descompun lemnul care progreseaza lent pe agar)1 litru apa de ala robinet.

Daca cumparati DMA gata preparat, probabil ca acesta va contine doar primele trei ingrediente: agar, malt si drojdie (puteti sa le adugati pe cele care lipsesc). Cititi instructiunile producatorului pentru a vedea cata apa recomanda sa folositi. Probabil ca pentru 1 litru ea este cuprinsa intre 40-50gr. in functie de proportia de agar si malt, ar trebui sa reduceti undeva pe la jumatate aceasta cantitate pentru a obtine un mediu care sa fie mai bun pentru sanatatea pe termen lung a culturii de ciuperci.

Prepar mediul agar in vase Petri dupa cum urmeaza:

1. Adaug toti ingredientii intr-un borcan cu cantitatea de apa necesara. Borcanul ar trebui sa fie de doua ori mai mare decat solutia din el, pentru a pre-intampina iesirea solutiei in momentul cand aceasta ajunge sa fiarba.

2. Ajustez valoarea pH-ului folosindu-ma de bicarbonat de sodiu (apa din zona mea este acida), si puteti folosi otet de mere in  cazul in care apa dvs. este alcalina. Deasemenea vedeti mai jos “Note la masurarea pH-ului”.

3. Folosesc apoi vasul sub presiune din bucataria proprie pentru a topi si steriliza mediul. (folosesc apa de la robinet fara sa am nici o problema. Daca incercati sa cresteti miceliu folosindu-va de apa distilata, atunci cresterea va fi mult incetinita). Fierb fara presiune timp de 10 minute pentru ca agarul sa se poata topi, dupa care pun capacul pe  vas si mai fierb la presiunea maxima de 15atm. timp de 10minute. (daca utilizati DMA gata preparat, in instructiunile acestuia scrie sa fierbeti pentru 45 de minute.  NU faceti  acest  lucru! Nici  intr-un caz nu trebuie sa depasiti  20 de minute! Orice durata mai mare de aceasta va duce la caramelizarea ingredientelor, aceasta ducand la deteriorarea miceliului.). Sterilizez odata cu mediul un set de vase Petri, pe care le pun intr-un vas acoperit cu folie de aluminiu. (folosesc vase Petri de plastic reutilizabile, un litru de mediu ajungand  pentru aproape 30 de vase Petri).

4. Cand fierberea a luat sfarsit, iau cu grija vasul de pe foc si il depresurizez. Scot cu grija borcanul cu mediu si il  las sa se  raceasca in aer liber. Nu este necesar sa luati masuri de siguranta importriva intrarii aerului nesterilizat (asta presupunand ca nu va aflati intr-un mediu cu mult praf sau alte particule), din moment ce perhidrolul va ucide contaminantii prezenti in aer.

5. Astept pana cand pot sa tin in mana borcanul cu mediu fara sa ma ard. (obisnuiesc sa-l pun intr-un vas cu apa calda pentru a  evita ca acesta sa se solidifice).

6. Apoi adaug solutia de perhidrol cu ajutorul unei pipete pasteurizate si amestec rapid mediul cu perhidrolul miscand in mod circular inainte si inapoi borcanul (evitand sa produc o reactie care sa produca multe bule de oxigen – care vor duce la sfarsitul partii de la sufrafata agarului.)

9

Page 10:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

7. Odata cu acesta amestecare, ma indrept spre vasele Petri, care le-am pus pe o suprafata de lucru curata, si incep sa torn in acestea, avand grija sa le pun imediat capacul.

8. Cand agarul s-a solidificat, pun de-o parte vasele sa se usuce pentru cateva zile intr-un loc ferit si acoperit cu ceva usor.

Ca sa fiu in portiunea de siguranta a mediului de cultura din vasele Petri, folosesc concentratia minima de perhidrol pe care am gasit-o ca avand efect: aprox. 0,018%, sau 6ml de 3% la litrul  de mediu.(Puteti   folosi o concentratie de doua ori mai mare ca aceasta fara ca dezvoltarea miceliului sa fie influentata, dar retineti ca unele specii percum Stropharia, care se dezvolta mai incet, pot sa devina sensibile la expunerea cu perhidrol. Producerea de enzime rezistente la perhidrol pare sa mearga in paralel cu durata de crestere a organismelor). Cand vasele sunt inoculate, presupun ca concentratia incepe sa scada sub cea initiala, perhidrolul descompunandu-se pe masura ce miceliul se dezvolta. Eventual, s-ar putea ca perhidrolul sa dispara complet cand agarul este suprapopulat, daca nu cumva mai devreme. Odata ce a acesta a disparut s-ar putea sa apara pe marginile vasului Petri colonii de mucegai.

Obtinerea mediului de agar ne-presurizat

Daca nu dispuneti de un vas sub presiune, sau nu doriti  sa folositi  unul, atunci puteti   totusi sa obtineti  agarul prin  fieberea/aburirea acestuia, modificand putin reteta acestuia. Va trebui sa inlocuiti ingredientele care contin enzime care descompun perhidrolul cu altele care sunt libere de acestea. In reteta de mai sus, agarul, pulberea de malt si rumegusul nu contin enzime care descompun perhidrolul, dar drojdia, faina, si hrana concentrata de iepuri toate contin. Pentru a utiliza perhidrolul in mediul agar, in mod normal trebuia sa fierbem sub presiune acest mediu pentru a distruge enzimele din acestea care descompun perhidrolul. Oricum, alte ingrediente pot fi folosite in locul acestora. Drojdia de bere asigura vitaminele, astfel incat ea poate fi inlocuita cu un pic dintr-o pilula sintetica de vitamine B-complex. Deoarece aceasta este sintetica ea nu contine enzime. Faina si concentratul de iepuri asigurau proteinele/nitrogenul, astfel ca acestea trebuie inlocuite cu alte surse de proteine compatibile cu perhidrolul. In mod curent, doar substantele procesate la nivel inalt nu contin enzime care sa descompuna perhidrolul: gelatina, laptele praf de soia, lapte praf degresat de vaca, sosul de soia sarac in sodiu, etc. Pentru a testa prezenta enzimelor, amestecati putina substanta in cauza cu un pic de solutie de perhidrol si urmariti evolutia bulelor de oxigen emanate. Daca nu exista emanatii de bule inseamna ca puteti s-o folositi.

Iata reteta pentru obtinerea unui litru de agar ne-presurizat:

12 gr. agar12 gr. pudra fina de malt0.5 gr. sursa de nitrogen (prin rotatie gelatina, lapte praf de soia, lapte praf, sos de soia sarac in sodiu, etc.)5-7 rumegus0.1 gr.?  dintr-o pastila de viatmina B-complex (suficient cat sa faca solutia putin galbena)1 litru de apa fara impuritati

1. Lasati borcanul in care se gaseste mediul (impreuna cu casele Petri) sa fiarba intr-un vas cu capac pentru aproximativ 45 de minute, timp in care se topeste agarul si vor fi distruse toate organismele vii din mediu (s-ar putea ca vasele Petri sa fie necesar  sa le fierbeti pentru o perioada mai lunga de timp).

2. Dati jos vasul si lasati ca acesta sa se raceasca, adaugand perhidrolul conform primei retete. Perhidrolul va distruge restul de spori care au ramas in mediu. Obisnuiesc sa adaug o cantitate putin mai mare de perhidrol in mediul fiert fara presiune (cca. 8ml). In general, am observat ca vasele care nu au fost sterilizate sub presiune se contamineaza mai usor, dar oricum mult greu decat vasele care nu au deloc perhidrol.

Aveti grija de bucatelele de agar care au cazut infara vaselor Petri. Daca acestea nu sunt indepartate, pe acestea v-a creste mucegaiul in  cateva zile, si sporii acestuia vor difuza in vasele Petri, germinand la marginea agarului.

Daca reutilizati vasele Petri, asa cum fac eu, atunci curatiti-le cu grija dupa ce a-ti scos agarul din ele. Chiar si cea mai mica bucatica de  agar vechi ramas in vas, daca nu este in contact cu perhidrolul din noul mediu pe care-l veti turna in vas, poate duce la un punct de start in  contaminarea si cresterea mucegaiului.

Un beneficiu care apare datorita faptului ca agarul este turnat in vase aproape cand acesta este rece este ca produce o condensare mult mai mica in vasele Petri decat in cazul in care acesta ar fi turnat cand este fierbinte. Aceasta inseamna ca nu va trebui sa va faceti griji legate de scuturarea vaselor de eventualul condens produs in acestea, sau sa fiti obligat sa incalziti vasele pentru a produce evaporarea picaturilor de apa. Si o sa vedeti mai bine ce se intampla in interiorul vaselor. Oricum, suprafata agarului are nevoie de o uscare, astfel ca le las sa stea la temperatura camerei pe durata unei zile, usor acoperite cu o hirtie ceruita (pentru a evita intrarea prafului) inainte ca se le  utilizez. Vasele cu mediu care nu a fost sterilizat sub presiune vor fi mai umede decat cele sterilizate sub presiune datorita temperaturi si  timpului mai mic de fierbere, astfel incat acestea vor trebui lasate la uscat pentru o perioada mai mare de timp.

Daca v-a mai ramas agar dupa ce l-ati turnat in vase, restul va putea fi mentinut steril depozitand-ul in frigider. Cand urmeaza sa-l folositi din nou, puteti   topi din nou agarul, retinand ca trebuie sa adugati din nou perhidrol, deoarece prin  incalzire veti distruge ceea ce ati adaugat de prima data.

Procurarea culturilor de ciuperci

Exista cateva moduri in care puteti sa va procurati miceliul necesar inocularii agarului. Sporii de la o ciuperca pot fi germinati in mediu nutritiv. O bucatica din masa unei ciupercii proaspete poate fi scoasa in conditii aseptice dupa care este dispusa pe suprafata agarului urmand sa imprastie miceliul. Sau, cultura de miceliu poate fi obtinuta de la un cultivator, in mod normal sub forma unei culturi in  eprubeta sau in vas Petri.

10

Page 11:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Din moment ce mediul care contine perhidrol va ucide sporii, nu am incercat sa germinez spori pentru a obtine miceliu in agar. In loc de  acestea, prefer sa obtin miceliu de la un cultivator cu reputatie. In felul cum vad eu lucrurile, acesta a trecut prin toate fazele si problemele legate de izolarea unui miceliu care sa aiba caracteristicile dorite, si procurand miceliul de la el, sunt relativ sigur ca voi putea izola miceliu  avand aceleasi  caracteristici.  Dimpotriva,   in cazul   in care cresteti  miceliul  provenit  din spori  sau din clonarea ciupercii,  si  acesta nu fructifica, nu veti sti cine este de vina: conditiile pe care i le-ati asigurat sau masa din care provine este cu probleme. (Sporii sunt ca si semintele: pot sau nu sa aiba aceleasi caracteristici genetice ca si parintii). Si puteti sa pierdeti o gramada de timp incercand sa fructificati  o cultura care nu merita. Mai mult, dupa ce v-ati chinuit sa stabilizati conditiile optime de crestere a acestuia, in cazul in care pierdeti  cultura, exceptand cazul cand il procurati de la producator, nu puteti sa va intoarceti inapoi sa mai luati o “copie”. Va trebui sa porniti totul de la inceput, testand conditii noi pentru noua cultura.

Cand obtineti miceliul de la un furnizor comercial, este de la sine inteles ca-l veti folosi pentru cultivare – si sa vindeti daca doriti – miceliu, cultura pregatita pentru fructificare, sau ciupercile rezultate din acesta. 

Este de la sine inteles ca nu veti folosi aceasta cultura pentru a va face banca proprie de miceliu si nu veti vinde cultura in agar la altii. Daca doriti sa vindeti culturi pe agar, drumul etic este sa va izolati cultura proprie prin clonarea sau geminarea sporilor proveniti de la o ciuperca salbatica.

Clonarea ciupercilor

Poate fi distractiv, fara indoiala, sa clonati cultura dvs. dintr-o ciuperca culeasa din natura. Probabil ca veti obtine o cultura care va va face  prima impresie despre calitatea clonarii. Daca veti dori sa incercati, veti avea nevoie de agar tratat cu perhidrol, un bisturiu, o lampa cu alcool si o ciuperca proaspata.

Pentru a clona o ciuperca:

1. Curatati suprafata exterioara a ciupercii astfel incat pe aceasta sa nu mai existe mizerii.2. Rupeti palaria ciupercii (sau baza piciorului acesteia) pastrand-o cat mai curata.

3. Aprindeti lampa cu alcool si sterilizati lama bisturiului. Apoi taiati o bucatica mica din masa ciupercii care nu a fost in contact cu  partea exterioara a ciupercii. Aceasta va fi mult mai usor de facut daca ciuperca este mai carnoasa, dacat daca ea este foarte subtire.

4. cand aveti bucatica de ciuperca pe lama bisturiului, tranferati-o intr-unul din vasele cu mediu agar. Din moment ce sansele de reusita sunt mici, mai taiati cateva bucatele de ciuperca si transferatile fiecare in vase separate cu agar.

5. In final, inveliti-le intr-o punga de plastic, si puneti-le intr-un loc convenabil la incubat la temperatura camerei.

6. Cresterea miceliului, daca aceasta are loc, terbuie sa fie visibila in cateva zile, imprestiindu-se dinspre bucatica de ciuperca. Mucegaiul sau bacteriile s-ar putea sa creasca si ele, caz in care va trebuie sa taiati o bucatica din miceliu neinfestat si sa-l  transferati intr-un vas proaspat cu agar. Daca va decideti sa subclonati miceliul rezultat din preluarea lui fara contaminanti, fiti sigur ca veti   face aceasta inainte ca mucegaiul sa devina matur (sa se inchida la culoare si sa formeze spori).  Altfel  veti  transfera odata cu miceliul si mucegaiul.

Daca incercati sa clonati miceliu din ciuperci aflate in salbaticie, retineti ca perhidrolul aflat in mediul agar nu va auto-curata miceliul de contaminantii rezistenti. Daca materialul din care urmeaza sa clonati este murdar, si nu puteti sa obtineti o bucatica din masa acestiua care sa fie curata, atunci perhidrolul din agar nu va avea nici o influenta. Ele nu este un sterilizator. Oricum, daca materialul dvs. este in  principiu curat, perhidrolul din agar va reduce conatminarea la fund a vaselor.

Stocarea miceliului

In momentul in care ati obtinut o cultura de miceliu sanatoasa si curata, va trebui sa aveti o cale pentru ca mostre din acesta sa fie  conservat pentru perioade lungi de timp, astfel incat sa aveti de unde sa reporniti cultura in cazul in care se intampla sa o pierdeti pe cea curenta. Metoda de stocare pe care o folosesc necesita doar prelevarea unei suprafete cu miceliu din mediu agar si tranferarea acestuia intr-o eprubeta cu capac in care se gaseste apa distilata. (ii multumesc lui Joe Kish pentru faptul ca mi-a adus in atentie aceasta tehnica). Odata ce miceliul se afla in apa distilata, acesta hiberneaza pentru un timp nedefinit pentru unele tipuri de miceliu (pentru specia Oyster cel putin pe durata unui an, din experianta personala). Mentinerea in frigider nu este obligatorie.

Oricum, metoda traditionala pentru cei care nu au posibilitatea de a le stoca in azot lichid, este cea in agar in vase Petri, dar aici durata de depozitare este de maximum 6 luni.

Acum, cand doriti  sa faceti  pregatirile pentru stocarea pe termen  lung a miceliului,  va recomand sa-l  obtineti  pe acesta fara ajutorul perhidrolului. Motivul pentru care va indic sa procedati in acest mod, este faptul ca nu cunosc efectele pe termen lung ale expunerii la  perhidrol a miceliului de stoc. Poate acesta sa duca la imbatranirea prematura? Duce acesta la slabirea treptata a miceliului? Se petrec modificari genetice in timp? Eu nu sunt in masura sa dau si sa rezolv problemele care ar putea sa apara in cazul diferitelor specii pe care doriti  sa  le stocati.   In plus, culturile care se dezvolta  incet  in stocul pe care il  aveti  sunt  in stare sa se apere mai bine de actiunea perhidrolului decat cele care hiberneaza, care sunt posibil sa se deterioreze. Astfel, atat timp cat mediul agar si eprubete cu apa distilata se pot prepara usor cu ajutorul perhidrolului, stocurile de miceliu fara perhidrol sunt cele mai sigure. In afara de aceasta, este atat de usor  de preparat apa distilata de calitate in eprubete cu capac: puneti apa distilata in eprubete puneti-le capacul fara sa-l strangeti si fierbti-le sub presiune pentru 30 de minute (daca nu aveti vas sub presiune, fierbeti-le pentru cel putin 1 ora, adaugand cateva picaturi de perhidrol 3%; perhidrolul va distruge spori rezistenti la caldura, iar prin fierberea apei perhidrolul va fi distrus). Si spre deosebire de vasele Petri,  

11

Page 12:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

eprubete cu capac pot fi tinute in flacara inainte si dupa deschiderea capacului, facand posibila sterilizarea aerului in manevrarea miceliului fara a mai fi nevoie de filtre de aer. Invelesc aceste eprubete de stoc continand miceliu in pungi de plastic pentru mancare, inainte ca sa le  depozitez in subsolul casei mele.

Inocularea si manevrarea culturilor de agar

Fac inocularea vaselor sau eprubetelor cu agar folosindu-ma de un bisturiu sterilizat in lampa cu alcool, apoi transferand in fiecare vas sau eprubeta bucatele mici de miceliu taiate din vasele pe care s-a creat un halou sanatos de miceliu. Cand utilizez flacara pentru stelirizarea bisturiului il las sa se raceasca inainte de a taia bucatele de agar prin adancirea acesteia in agar. (in mod traditional veti raci bisturiul  infingandu-l in agarul noului vas. Dar bisturiul s-ar putea sa descompuna o parte din perhidrolul din vasul din care urmeaza sa taiem. In aer nefiltrat aceasta ar putea sa faciliteze dezvoltarea contaminantilor, din moment ce acesta este mai putin protejat. Aceasta nu este o problema cu vasul din care inoculam, din moment ce acesta va fi golit. Dar ar putea sa devina o problema in noul vas. Asa ca racesc bisturiul in cel vechi).

Daca inoculati dintr-un vas de cultura de stoc fara perhidrol, nu folositi o “bucla de inoculare” exceptand cazul in care doriti sa luati o  bucata mai mare de miceliu. Din experienta proprie, fragmentele de miceliu mici preluate cu bucla de inoculare nu sunt suficiente pentru a stabiliza o colonie de miceliu in prezenta perhidrolului care lupta impotriva contaminatorilor, si in mod special cand cultura precedenta n-a fost crescuta pe perhidrol. Miceliul are o sansa mai mare de stabilizare daca transferati o bucata de miceliu dintr-o eprubeta de stoc cu apa distilata, sau o bucata de miceliu cu agar scoasa dintr-un vas cu ajutorul unui bisturiu sau a unui obiect ascutit si steril. (Trebuie sa recunoastem ca este frustrant sa sapati cu ajutorul unui bisturiu in interiorul unei eprubete).

Culturile   care   n-au   fost   expuse  mediului   cu   perhidrol   vor   intarzia   la   prima   inoculare,   pe  masura   ce  miceliul   se   adapteaza   noului mediu.Uneori miceliul va aparea ca incerca sa cresca in afara agarului cu perhidrol. (veti observa comportari similare cand transferati dintr-un vas original continand perhidrol pe care miceliul s-a supradezvoltat de cateva zile astfel incat perhidrolul s-a descompus. Mai devreme sau mai tarziiu, oricum miceliul se va stabiliza si va incepe sa cresca normal pe suprafata noului mediu.

Nu am observat niciodata nici un fel de probleme cu miceliul care a fost expus in mod continuu perhidrolului. In mod normal transfer miceliului de 10 ori din mediul continand perhirol  inainte de a ma intoarce la o cultura de stoc fara perhidrol, oricum alegerea de 10 transferuri este arbitrara si intoarcerea la culturile de stoc s-ar putea sa nu fie necesara deloc.

Retineti ca perhidrolul protejeaza doar portiunea de agar care nu are miceliul crescut pe ea. Miceliul in sine nu este protejat din moment ce acesta descompune  perhidrolul pe masura ce creste. De aceea vasele de cultura vechi care au  miceliul suprapopulat pe durata a mai mult de cateva zile se manifesta ca si cum ar avea contaminanti in lucru. 

Prevenirea contaminarii la fundul vasului

Este de asemenea posibil ca si contaminatii sa se acumuleze in miceliu daca il transferati in mod repetat in aer nefiltrat, chiar daca exista intotdeauna perhidrol in agar si miceliul nu a acoperit intregul vas.Oricum nu veti observa contaminanti crescand in miceliul  ciupercii din vasul dvs., contaminantii invizibili continuand sa cresca incet. Aceasta contaminare poate fi o problema daca folositi sau nu perhidrolul in mediu sau in compostul de fructificare. Oricum daca miceliul sau compostul final va fi fara perhidrol, atunci exista o sansa mai mare ca si contaminantii sa prolifereze in mediu neprotejat.

Pentru a va pazi de aceasta contaminare folosesc un simplu truc: de regula inoculez la fundul agarului in momentul in care fac transferul  (cat de des faceti aceasta depinde de modul  in care va stocati vasele si de perioada de stocare .Cea mai sigura cale este sa faceti aceasta operatie la fiecare transfer, cel putin cu vasele care le folositi pentru transferul miceliului in serie. Dar s-ar putea sa fiti  nevoiti sa faceti aceasta de 2-3 ori inainte ca rata de succes sa devina efectiva ). Fac inocularea la fund in modul urmator : 

1. Intoarceti vasul cu fundul in sus.2. Ridicati partea de jos a vasului pe verticala si fortati usor ca agarul din acesta sa ajunga in capacul vasului folosindu-va de un 

bisturiu  incalzit.  (Daca agarul tinde sa se rupa in acest pas inseamna ca nu va fi  necesar sa mariti  cantitatea de agar  la  prepararea mediului).

3. Inchideti vasul la loc pana cand veti fi gata, apoi transferati o bucata de miceliu pe partea expusa a agarului, cu un bisturiu incalzit si racit. 

4. In   final , dupa inocularea la fund inchideti vasul, intoaceti-l din nou cu fundul in sus, fortand usor (din nou cu ajutorul unui  bisturiu incalzit), ca agarul sa ajunga inapoi la pozitia uzuala din vas, acum el stand pe bucatele de miceliu.

Acest aranjament  forteaza miceliul  sa creasca de la fundul  agarului   in sus,  trecand prin mediul de agar,   lasand orice acumulare de contaminanti care apar in proces in urma. Unele tipuri de miceliu nu se dezvolta facand acest aranjament, dar pana acum nu am avut nici  o problema cu miceliul  care poate creste prin mediu, acesta dezvoltandu-se viguros.   In orice caz,  datorita manipularii  semnificative,  aceasta procedura are un grad ridicat de contaminare comparativ cu cel al unei transferari simple. Chiar daca am vazut de putine ori ca vasele de agar inoculate pe calea normala sa fie contaminate cand aceastea ajung la maturitate, acum prin inocularea la fund nu pierd mai mult de un vas din cinci. Curatarea suprafetei de lucru si a mainilor cu alcool inainte de a incepe sa faceti operatiile, reduce numarul de  esecuri.

O operatie dificila si importanta in procedura de inoculare la fund este evitarea zgarierii sau ruperii de bucatele de agar care sa ajunga pe  fundul vasului Petri cand rasturnati agarul la loc. Aceste bucatele de agar, tind sa fie un mediu propice de crestere a contaminantilor  dataorita proximitatii lor cu aerul ambiant. Este de asemenea indicat sa folositi vase in care mediul este suficient de uscat pentru a elimina  o suprafata umeda sau cu picaturi de apa. Daca agarul este foarte umed in momentul in care-l rasturnati in capac, s-ar putea ca acesta sa lase in urma suficient de mult mediu astfel incat sa va cauzeze probleme mai tarziu, cel putin la marginile mediului.

12

Page 13:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Un sfat final: fiti sigur sa nu taiati pana la fund mediul, cand doriti sa faceti un transfer dintr-un vas inoculat la fund. Daca-l taiati pana la  fund, atunci   intreaga dvs.  munca se  iroseste,  deoarece  in acest  mod propagati  contaminanti   la   fundul  vasului.  Pentru a nu permite contaminantilor sa prolifereze, specializati-va in a lua bucatele doar de la suprafata agarului.

Odata ce vasele cu agar sunt inoculate (eu tin intotdeauna patru vase de miceliu), le pun intr-o punge de plastic curata, careia ii rasucesc  gatul si o leg. Pungile inchise permit o respiratie cu aerul ambiant si blocheaza patrunderea in interior a diferitilor spori si insecte. Pun trei  sau patru vase Petri   in aceeasi punga. Ele pot fi   incubate oriunde este convenabil:  rafturi  de carti,  baie, tejghea, etc. Nu recomand pastrarea lor in frigider, datorita condensului care apare, si deasemenea nu recomand incubarea lor deasupra unei surse de incalzire deoarece s-ar putea ca prin ciclurile repetate de incalzire-racire contaminantii sa poata fi introdusi in mediul dvs.

Unul dintre avantajele utilizarii perhidrolului este faptul ca ofera posibilitatea sa stocam usor medii de agar ne-inoculate. Eu tin un set de vase agar ne-inoculate intr-un loc racoros si nu in frigider. La fel ca si cele inoculate le pastrez inchise intr-o punga de plastic. De fiecare  data cand urmeaza sa inoculez cu miceliul din aceste vase, iau unul ne-inoculat din stoc si-l inoculez, astfel incat acesta ia locul celui  utilizat. In acelasi timp, inlocuiesc orice vas pe care au inceput sa apara colonii de mucegai la marginea lor. In acest fel, numarul de vase  in care se dezvolta miceliul ramane constant, evitand sa ajung sa fiu in dificultate.

Productia de miceliu

Productia de miceliu este al doilea stadiu in cresterea ciupercilor. Miceliu este “demarorul” folosit la inocularea compostului de fructificare a ciupercilor, sau sursa pentru producerea de si mai mult miceliu. In mod traditional, productia de miceliu este lasata in seama furnizorilor  comerciali  de  miceliu,   care  au   facilitati   sterile  de mentinere  a  miceliului   fara  contaminanti.  Odata cu dezvoltarea metodei  perhidrol, productia de miceliu a devenit doar un alt pas in producerea ciupercilor, si unul chiar mai usor.

Posibilitatea de a produce miceliu fara facilitati sterile are o importanta financiara substantiala pentru micii cultivatori. Daca cumparati miceliu acesta ajunge in jurul a 20-25$ / 400gr. Daca produceti miceliu singuri, atunci boabele de semintele vor costa in jur de 1-2$ pentru aceeasi cantitate, iar perhidrolul utilizat mai putin de 10c. (rumegusul, daca nu este gratis, atunci acesta va costa oricum mai putin decat semintele). Si tineti cont ca nu va trebui sa cheltuiti o suma deloc neglijabila pentru construirea unui laborator steril cu instalatie de filtrare a aerului pentru ca sa puteti sa produceti miceliu.

Pentru a produce miceliul pentru ciupercile pe care doresc sa le cultiv, m-am obisnuit ca miceliul sa-l obtin pe rumegus. Cu metodele curente pe care le folosesc, miceliul crescut pe rumegus poate fi preparat mai repede si mai usor decat cel crescut pe seminte, fara a fi  nevoie de inmuierea semintelor, si fara a fi nevoie sa sterilizam sub presiune (vezi mai jos). De asemenea miceliul matur provenit din vase agar cu rumegus va coloniza mai repede rumegusul, si din experienta proprie, cu o mai mica rata de contaminare cu mucegai, decat miceliul  pe seminte. Contaminarea miceliului  in sine este rara, probabil  un borcan din 100, si  asta doar ocazional, datorita greselilor inevitabile. Este adevarat ca rumegusul nu are o contributie nutririonala atat de mare precum semintele, dar nu este o dificultate ca sa adaugam aceste elemente nutritionale care lipsesc direct in substrat, folosidu-ne de surse care nu necesita presurizare.

Pentru marea majoritate a speciilor, miceliul crescut pe seminte este recomandat, din moment ce semintele contin baza nutritionala a substratului. Aceste seminte trebuie sterilizate sub presiune. Totusi sunt doua specii de ciuperci care vor creste foarte bine pe rumegus in  loc de seminte: Hypsizygus ulmarius (elm oyster) si Hypsizygus tessulatus (Shimeji). Din moment ce  H. ulmarius creste la fel de bine pe cat de usor si are un gust considerabil mai bun decat ciupercile traditionale Oyster apartinand familiei Pleurotus, nu vad nici un impediment ca sa folositi rumegusul in locul semintelor pentru productia de miceliu.

“Miceliu in 10 minute”

Procedura  mea  originala   de  preparare   a  miceliului   pe   rumegus  necesita   sterilizarea  unei   cantitati   suficiente   de  apa   si   adaugarea perhidrolului dupa ce aceasta era fiarta sub presiune si racita. Aceasta este o procedura “penibila”, astfel incat am cautat o alternativa. Cautarile mele au dus la dezvoltarea unei proceduri de producere “miceliu  in 10 minute”, o forma de rumegus si fibra de hartie care necesita doar o fierbere pentru 10 minute fara presiune. Aceasta este probabil cea mai rapida metoda existenta de preparare a miceliului pe rumegus. In aceasta procedura “intr-un singur pas” toate ingredientele solide sunt plasate in borcan apoi este adaugat perhidrolul si toata apa, si amestecul este incalzit si racit. Este evident ca suficient perhidrol va exista dupa racirea amestecului, suficient pentru a tine rumegusul liber de contaminanti.  

Reteta pentru “miceliu in 10 minute”:

42,5gr. rumegus85gr. fibra de hartie0,4gr. de calcar (piatra de var)0,4gr. gips (optional)2% din greutate suplimenti nutritionali150ml. apa fierbinte amestecata cu 20ml. de pehidrol 3%Borcan cu capac continand disc de carton (vezi mai jos “containere pentru miceliu”)

1. Intr-un borcan de 800gr. puneti rumegusul (rumegusul ordinar nu va functiona), fibra de hartie, calcarul, gipsul si suplimentii nutritionali (vezi mai jos). Rumegusul trebuie sa provina dintr-un lemn cat mai usor, cum ar fi lemn de bumbac sau brad.

2. Adaugati apa fierbinte cu perhidrol si amestecati usor.

3. Dupa cateva minute in care lichidul va fi absorbit de rumegus, scuturati borcanul cu un capac temporar mixand ingredientele, apoi bateti borcanul de o suprafata captusita astfel incat sa dislocati substratul aflat in partea superioara a borcanului.

4. Umeziti discurile de carton din capacul final si puneti capacul la loc fara a-l strange la maxim.13

Page 14:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

5. Puneti borcanul intr-un vas de fierbere care sa contina 1-2cm. de apa, acoperiti-l cu capac, aduceti-l la temperatura de fierbere si lasati-l sa fiarba pentru doar 10min. (urmaresc ca vasul sa se incalzeasca rapid astfel incat pun in acesta apa calda de la robinet. Borcanele stau pe un gratar care le situeaza deasupra apei din vas.)

6. Cand au trecut cele 10min. scoateti borcanele si lasati-le sa se raceasca la temperatura camerei. 

7. Umeziti discurile de carton din interiorul capacelor prin turnarea libera a unei solutii dse 3% perhidrol. Scurgeti orice exces.

8. Mediul este gata pentru inoculare.

In procedura de mai sus am amestecat o parte din rumegus si doua parti fibra de hartie. Prezenta rumegusului permite ca miceliul crescut in borcane sa poate fi usor sfaramitat. Bineinteles ca puteti sa preparati amestecul in pungi de plastic rezistente la caldura si atunci nu o sa mai aveti nevoie de fibra de hartie pentru maruntirea miceliului din moment ce puteti face aceasta prin manipularea pungii.

Agarul colonizeaza rumegusul cu dificultate, de aceea am adaugat surse suplimentare nutritionale in compozitia retetei de mai sus. Reteta standard folosea o parte tarate la patru parti rumegus, dar daca doriti sa o folositi pe aceasta va fi nevoie sa sterilizati sub presiune pentru a elimina enzimele care descompun perhidrolul. De aceea am identificat cativa suplimenti nutritionali  care nu necesita sterilizare sub presiune. 

Doua alternative sunt lapte praf de soia si laptele praf de vaca. Am folosit aceste doua substante cu succes in reteta de mai sus adaugand 8,5gr. 

Fertilizatorii artificiali pentru o alta sursa de suplimenti de azot. Am folosit cu succes pentru ambele specii P. eryngii si H. ulmarius. Oricum fiti atent ca miceliului ii trebuie timp pentru a se adapta la chimicale ca acestea, astfel ca dezvoltarea acestora va fi mai lenta la inceput. 

Probabil ca nu doriti sa folositi fertilizatori artificiali. Este bine, din moment ce urina umana contine azot primar, aceasta poate fi folosita ca un supliment organic in locul fertilizatorilor. In acest caz va trebui sa inlocuiti jumatate din apa necesara cu urina proaspata.

Puteti sa folositi si alti suplimenti, ideea de baza fiind ca trebuie sa aduceti nivelul de azot din mediu la 0,4% sau in procente de proteine in  jurul lui 2,5%. Vezi sectiunea suplimentilor pentru prepararea compostului pentru detalii de calcul.

Doua note finale pentru procedura “miceliu in 10 minute”: unu, aveti grija sa folositi containere si ingrediente curate, folositi doar apa fara impuritati si daca lucrati in bucatarie, asigurati-va ca nu vor ajunge in borcane substantele organice. De asemenea fiti sigur ca nici unul din  ingredientele (sau discurile de carton din capace) sunt atat de vechi incat acestea sa fie ruginite si sa inceapa sa se descompuna. Acestea vor introduce contaminanti a caror enzime vor descompune perhidrolul. Aceasta procedura functioneaza deoarece nu exista enzime care sa descompuna perhidrolul in componenta retetei, fiind nevoie sa va asigurati de aceasta.

Doi, aceasta procedura functioneaza si din cauza cantitatii mici de substante prezente in borcanele de 800gr. care se incalzeste si se  raceste rapid, astfel incat mai ramane ceva perhidrol intact dupa tratamentul termic. Cantitatilor mai mari le va trebui mai mult timp sa se incalzeasca si mai mult timp sa se raceasca, astfel incat va fi nevoie de o cantitate mai mare de perhidrol pentru a fi sigur ca acesta va supravietui. In acest caz va trebui sa experimentati si sa determinati dvs. necesarul de perhidrol care trebuie sa-l adaugati.

Miceliu pe rumegus sterilizat sub presiune

Daca nu veti folosi rumegus tratat termic in cuptoare sau veti dori sa folositi un supliment nutitiv percum taratele, atunci va fi nevoie sa sterilizati sub presiune mediul dvs. si sa adaugati perhidrolul dupa ce acesta s-a racit. V-a trebui sa sterilizati separat suficienta apa pentru a dilua perhidrolul intr-un raport de 1/3 sau ½ din raportul de apa adaugata mediului. Dupa ce ati  facut aceasta masuratoare pentru  diluarea perhidrolului, turnati-o peste mediu si scuturati-l bine pentru ca acesta sa se distribuie rapid.

Iata procedura pe care o folosesc:

1. Adaugati aproape jumatate din totalul de apa pe care urmeaza sa o turnati peste mediul din containerele pe care doriti sa le preparati.

2. Masurati si sterilizati cealalta jumatate de apa cu perhidrol, care urmeaza sa o turnati mai tarziu.

3. Diluati  perhidrolul   in apa sterilizata  cand aceasta s-a racit,   intr-o dilutie de 1  la 10 (s-au altefel spus,  adaugati solutie de perhidrol de 3% in raportul 1/10 din volumul total de apa)

4. Masurati necesarul de apa pentru fiecare container intr-un cilidru gradat pasteurizat in apa fiarta.

5. Turnati cu cilindrul gradat aceasta apa in fiecare container, asigurandu-va ca nu ajunge nici o picatura de apa de pe exteriorul cilindrului sa cada in containere si amestecati repede. Dilutia finala va fi de 1/20, sau o concentratie a perhidrolului de aprox.  0,15%, identica cu cea folosita la seminte.

Miceliu pe seminte

14

Page 15:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Acum, daca v-ati hotarat sa folositi seminte ca suport pentru cresterea miceliului - trebuie sa va atentionez mai ales daca pana acum n-ati mai folosit seminte pentru cresterea miceliului – ca succesul in cazul semintelor este mult mai dificil de realizat chiar daca folositi perhidrol. Aceasta deoarece semintele pe care le puteti obtine din zona dvs. s-ar putea sa contina o varietate de contaminanti care sa nu poata fi  exterminati prin fierbere sub presiune.

Si chiar daca am marit timpul de sterilizare sub presiune si am marit concentratia de perhidrol, nu am fost in stare sa produc seminte de secara fara contaminati. Din fericire, am fost in masura sa substitui aceste seminte de secara cu altele albe de grau. Si chiar daca acestea  erau mai umede decat cele de secara (30% fata de 8%) acestea erau mai curate decat cele de secara. Semintele de grau am putut sa le  folosesc chiar daca a trebuit sa le inmoi pe durata noptii dupa care le-am fiert sub presiune. Intotdeauna am obtinut grau fara contaminati procedand in acest mod cu semintele. Din pacate seminte de grau alb se gasesc mult mai greu dacat cele de grau rosu cu care am intampinat acealeasi probleme ca si cu cele de secara.

Orice seminte pe care intentionati sa le folositi trebie sa fiti sigur ca:

1. Substratul este steril inainte de a adauga perhidrolul2. Ati inlaturat toate urmele de mediu care s-ar putea afla pe exteriorul containerelor.

Desigur, ca problema sterilizarii complete exista si in laboratoarele speciale de productie a miceliului. Daca exista spori de mucegai sau bacterii in interiorul semintelor sau alte particule, si aceastea nu sunt distruse complet prin sterilizare, acestea vor ajunge sa germineze si  sa se imprastie in mediu indiferent de filtrarea aerului sau de perhidrolul adaugat. La fel se intampla si cu perhidrolul, daca in urma acestei strerilizarii mai exista enzime care sa-l descompuna in seminte, in aceste locuri se vor crea goluri de mediu neprotejat de perhidrol.

A doua problema exista si in cultivarea traditionala. Daca urme din mediul de cultura ajung inafara culturii, aceste bucatele mici pot deveni locul ideal de crestere si imprastiere a contaminantilor. Daca aceasta se intampla cu subtraturile tratate cu perhidrol, cultura va ramane curata pana in momentul in care aceasta este scuturata pentru a fi maruntita. Cateva zile mai tarziu contaminantii vor inflorii, avantajati fiind de saracirea in perhidrol produsa de cresterea miceliului. Aceasta problema poate fi evitata curatind cu atentie containerele atat la interior cat si la exterior, si stergand exteriorul acestora cu alcool dupa ce au fost inoculate cu miceliu.

Iata cum fac ca sa obtin miceliu pe seminte de grau alb:

1. Cantaresc 200gr intr-un borcan de 800gr.2. Adaug apa de la robinet in exces si un pic de bicarbonat de sodiu pentru a domoli aciditatea apei mele de la robinet.

3. Pun amestecul la o temperatura apropiata de cea de fierbere pentru 1-2ore pana cand semintele sau umflat. Scurg surplusul de apa cand semintele si-au dublat volumul.

4. Sterilizez borcanul sub presiune pentru 1 ora. Durata de timp depinde de seminte si de vasul sub presiune.

5. Cand borcane s-au racit, adaug 10ml de perhidrol 3% (20ml pentru fiecare 450gr de seminte uscate), dupa care il scutur bine pentru ca acesta sa acopere semintele.

Un cultivator mi-a spus ca adauga colorant alimentar pentru a colora perhidrolul, astfel incat este in masura sa si vada daca acesta s-a distribuit  uniform in masa de seminte. (daca semintele s-au unit  intr-o masa compacta, va fi  foarte dificil sa acoperiti  toate semintele complet cu perhidrol, asa ca incercati sa reglati prin volumul de apa folosit si prin durata de timp cat le lasati la muiat). Concentratia finala  de perhidrol este mare, aprox. 0,15%, dar miceliul continua sa creasca bine, doar putin mai incet decat in cazul in care nu ati fi adaugat perhidrol. (daca adaugati o cantitate masurata de apa, nu uitati sa scadeti volumul perhidrolului pe care urmeaza sa-l adaugati pentru a obtine umectarea dorita). S-ar putea sa reusiti si cu o cantitate mai mica de perhidrol, dar pentru aceasta ar trebui sa-l diluati intr-un volum mai mare de apa pentru a fi sigur ca acesta va ajunge pe toate semintele. Pe de alta parte, puteti sa adugati de doua ori mai mult perhidrol  fara ca miceliul sa fie afectat in crestere in cele mai multe cazuri.

Containere pentru miceliu

Eu cresc miceliul in borcane de sticla de 800gr, borcane care provin de la muraturile pe care le folosim. Ele au capacul dintr-o singura  bucata. Si borcanele de 1 litru sunt valabile daca au capacele dintr-o singura bucata. Asigurati-va ca interiorul fiecaruia este curat inainte de fiecare utilizare, la fel si capacele acestora. Capacele care au urme de rugina in interior sunt locuri ideale pentru dezvoltarea culturilor microbiene.

Retineti ca utilizarea perhidrolului duce la inutilitatea folosirii filtrelor de aer pe capace, asa cu metodele traditionale o cereau. Oricum,  capacele  borcanelor  sunt  cele  mai   vulnerabile   chiar  daca  ati   folosit   perhidrolul   la  prepararea mediului,  din  moment  ce veti   scutura borcanele pentru a distribui uniform miceliu, si prin scuturare spori de mucegai din aer pot patrunde in interior (sau bucatele mici de mucegai care au crescut pe fisurile de pa capac) intrand in contact cu miceliul (care nu este protejat). Pentru a compensa vulnerabilitatea capacelor, procedez in felul urmator:

1. Prepar un set de discuri de carton care sa intre in interiorul capacelor (prin trasarea unui cerc dupa forma capacului si taierea putin mai interiorul liniei cu ajutorul unei foarfeci).

2. Pentru procedura “Miceliu in 10 minute”, amestec ingredientele cu un alt capac, dupa care pun capacul original chiar inainte de fierbere.

3. Dupa ce mediul s-a racit, dau jos capacele si umezesc discurile de carton cu o solutie de perhidrol 3%. In acest mod discurile  cu perhidrol devin o bariera impotriva contaminantilor din aer care ar putea intra.

15

Page 16:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

In cazul mediului  pe seminte, care necesita sterilizare sub presiune,  invelesc fiecare disc de carton din capace in folie de aluminiu, sterilizandu-le separat de borcane si capacele acestora. Apoi, dupa ce adaug perhidrolul in mediul sterilizat si il amestec, dau jos capacul  temporar si pun la loc capacul original prevazut cu discurile de carton sterile pe care le-am umezit cu solutie de perhidrol de 3%.

Inocularea cu miceliu

Containere sterile continand mediu pot fi inoculate in mai multe moduri. Puteti taia bucati de miceliu din culturile de agar cu ajutorul unui bisturiu dupa care acestea sa fie puse in mediu. (ca sa faceti astfel, prima data inclinati borcanul sau punga pe o parte astfel incat miceliul pe care il puneti sa nu ramana la suprafata mediului dar sa fie pe marginea borcanului sau pungii pentru a putea urmari modul in care acesta se dezvolta). Sau puteti sa scuturati containerul dupa ce ati adaugat miceliul. Personal, prefer sa nu scutur containerul, deoarece de cele mai multe ori miceliul ajunge la suprafata mediului, nefiind protejat de perhidrol, fiind si greu de dislocat in urmatoarele scuturari. Bucatelele mici de miceliu care rezulta in urma acestei scuturari par a fi prea mici pentru a isi reveni efectiv si sa creasca in mediul cu  perhidrol in care a poposit. Asa ca pun bucati de agar in partea de jos a substratului, dupa care il inchid (3/4 bucati sunt suficiente pentru miceliul care se dezvolta lent). In mediul de rumegus pentru H. erinaceus, dupa ce am pus bucatele de miceliu in partea de jos, tasez rumegusul deoarece aceasta specie prefera mediile mai dense de substrat pentru a se dezvolta.

Retineti ca mediile tratate cu perhidrol trebuie sa fie inoculate cu miceliu tratat cu perhidrol, cum este cel care s-a dezvoltat pe agar tratat cu perhidrol. Altfel, miceliul care nu este adaptat s-ar putea sa moara in scurt timp sau sa-i trebuiasca o lunga perioada de timp pana sa  inceapa sa creasca in mediul cu perhidrol de o concentratie relativ ridicata pe care l-am propus a fi utilizat in substrat. (composturile tratate cu perhidrol contin perhidrol in concentratie mai mica, asa ca ele pot fi inoculate in siguranta cu miceliu care nu este adaptat la perhidrol).

In procedura mea originala urma ca borcanele sa fie dispuse in pungi de plastic inchise. (faceam asta imediat ce terminam de sters cu alcool exteriorul acestora). Foloseam pungi de plastic pentru a putea sa asigur schimbul de aer si pentru a proteja de prezenta sporilor si a insectelor. (pungile pot fi refolosite, daca acestea sunt curate). In ultima vreme, am incubat miceliul in borcane fara a le mai inchide in  pungi de plastic, si se pare ca se dezvolta la fel de bine.

In final, ma asigur ca borcane sunt inchise complet si las ca miceliul sa se dezvolte pe durata a catorva zile. Descompunerea perhidrolului produce oxigenul necesar pentru cresterea miceliului in aceasta faza, iar nivelul de dioxid de carbon nu este foarte mare. Cand am un halo crescut  pe o largime de aprox. 1cm, atunci scutur borcanul, si ca rezultat acesta va incepe sa creasca in multe alte locuri in cateva zile.  (nu asteptati prea mult pana sa scuturati, atat timp cat miceliu crescut nu este protejat pe masura ce haloul se mareste. Obisniesc sa slabesc putin stransoarea capacului dupa ce am scuturat, pentru a permite schimbul de gaze, dar acum pot spune ca acest lucru nu este  necesar. Discurile de carton evident ca permit schimbul de gaze necesar chiar daca acestea sunt stranse la maximum cu capacul.

Mediul este gata de a fi folosit mai departe in momentul in care miceliul s-a dezvoltat in intreaga masa a acestuia. Deobicei astept pana cand miceliul s-a dezvoltat la suprafata mediului mai mult de 5mm dupa care il folosesc la inocularea altor medii.

Daca folositi pungi in loc de borcane pentru producerea miceliului, procedura in sine este aceeasi. Nu trebuie sa va faceti griji pentru contaminantii care ar putea sa patrunda in punga – acestia vor fi omorati de perhidrolul din mediu.

Ce se poate spune in cazul utilizarii perhidrolului in culturile lichide? Nu am urmarit aceasta posibilitate, din doua motive. Primul este ca orice metoda de inoculare a unei culturi lichide necesita ca aceasta sa fie inoculata cu un mediu lichid (miceliu zdrobit in mixer, etc.),  metoda care elibereaza o mare cantitate de enzime care descompun perhidrolul din mediu. Al doilea motiv este ca, presupunand ca primul  motiv este rezolvat, ma astept ca sa scada rapid concentratia de perhidrol din cultura lichida datorita circulatiei  libere de spori  intacti  purtatori de enzime. (in substraturile solide miceliul este captusit intr-o anumita zona, si concentratia de perhidrol ramane in substrat la un  nivel acceptabil). Scaderea concentratiei de perhidrol poate fi compensata prin adaugarea regulata de perhidrol proaspat, dar aceasta ar presupune o metoda de masurare a concentratiei de perhidrol in solutii foarte diluate.

Colonizarea compostului

Colonizarea compostului de fructificare a ciupercilor, este cel de-al treielea si ultimul dintre stadiile de producere a ciupercilor

Deoarece perhidrolul este o solutia atat de ieftina, este convenabil financiar ca sa adaugam suficienta solutie de perhidrol in substratul de fructificare pentru a-l proteja de contaminanti. Si dintr-un punct de vedere tehnic, procedand in acest mod este posibil sa crestem ciuperci care descompun lemnul fara a fi nevoie sa sterilizam substartul sub presiune sau sa-l fierbem. Pentru procedurile prezente in acest volum, substratul ales este unul care nu contine enzime care descompun perhidrolul. Perhidrolul nu va aduce nici un beneficiu substraturilor care au o mare activitate biologica, cum ar fi balegarul, paiele pasteurizate sau talajul obtinut din lemn verde tratat in apa fiarta.

Primul material pe care l-am gasit ideal pentru a fi utilizat impreuna cu perhidrolul este rumegusul. Rumegusul pe care il folosesc este tratat termic, astfel incat acesta nu v-a descompune perhidrolul, chiar si fara fierbere sub presiune. Ca rezultat, acest rumegus poate fi  pasteurizat convenabil adaugand apa fierbinte peste el. Ca atare aceasta apa fierbinte aduce substartul la gradul de umiditate indicat pentru a face din acesta substratul ideal pentru fructificarea ciupercilor. (cand turnati apa fierbinte peste granulele de rumegus, acestea se  desfac la loc in rumegusul din care au provenit). Tot atat de bine, puteti folosi si rumegusul rezultat din prelucrarea lemnului uscat termic in cuptoare. (in cazul rumegusului de brad presupun ca aceasta incalzire distruge o parte din inhibatorii prezenti in rasina bradului). Aveti grija ca rumegusul sa nu contina diferiti aditivi. (marea majoritate nu contin).

Un alt substrat pe care l-am folosit cu perhidrol sunt granulele de fibra de hartie reciclata. Acest produs a fost obtinul in urma a doua tratamente termice de curatire. Granulele totusi sunt 30% umede inainte de a adauga apa. La fel ca si in cazul granulelor de rumegus, acestea nu contin nici un fel de enzime. Neajunsul acestuia este pretul, deoarece orice material folosit pe post de pat pentru animale va fi  de cel putin trei ori mai mare decat granulele din rumegus. 

16

Page 17:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Daca in zona dvs. nu exista granule de rumegus sau de fibra de hartie, atunci trebuie sa luati in considerare procedurile prezentate in cel de-al doilea volum pentru prepararea substraturilor.  Aceste proceduri va permit sa folositi o mare diversitate de materiale pe post de substraturi, inclusiv acelea care contin enzime care descompun perhidrolul. Singurul material care NU poate fi folosit in procedurile cu perhidrol este rumegusul umed, acela care rezulta din prelucrarea bustenilor.

Daca aveti un alt tip de substrat care doriti sa-l folositi cu perhidrolul, sa zicem hartia sau cartonul folosit, dar planuiti sa-l pasteurizati si nu  sa-l fierbeti sub presiune, va trebui sa fiti sigur ca acesta nu contine enzime dupa ce l-ati pasteurizat. Puteti sa testati simplu prin punerea  unei mici cantitati de material intr-o cana si adaugarea unui strop de solutie de perhidrol 3%. Daca nu se intampla nimic imediat, asteptati un pic. Cand enzimele de descompunere a perhidrolului se gasesc in substrat, atunci amestecul va scoate bule si va spumega. Daca enzimele nu sunt prezente, atunci amestecul nu va arata diferit de un substrat caruia i-ati adaugat apa.

Recipientele pentru fructificarea substraturilor variaza de la o specie de ciuperca la alta. Pentru ciupercile care descompun lemnul, marea majoritate a containerelor vor contine rumegus (care nu-l vom obtine din granule de rumegus), cel putin 1% var pudra, suficienta apa pentru a obtine in final o umidiatate a substratului de 60-65% si 5-20% din greutatea substratului uscat suplimenti nutritionali cum ar fi tarate de orez (care asigura 0,1-0,4% din necesarul total de azot).

Concentratia ridicata de azot din rumegusul suplimentat se traduce in general printr-o productie mai mare de ciuperci. In acelasi timp, concentratia ridicata de azot ridica riscul contaminarii. Cu metoda perhidrolului, pericolul contaminarii nu va creste apreciabil odata cu cresterea nivelului de azot. Oricum, pentru a fi in partea sigura a lucrurilor, rareori ridic concentratia azotului peste 0,4%

Talajul si densitatea substratului

In mod traditonal recipientele contin si talaj, dar eu nu l-am inclus niciodata in substraturi din moment ce necesita ca acestea sa fie fierte separat sub presiune iar mai apoi adaugate restului de substrat. Uni cultivatori cred ca talajul este crucial pentru cresterea ciupercilor shiitake. Nu l-am gasit a fi necesar sa-l utilizez in cazul ciupercilor H. ulmarius, P. eryngii, sau H. erinaceus. Oricum, pentru H.erinaceus, am gasit ca fiind benefica compresarea cu mainile a rumegusului pana cand tot aerul prezent  in acesta (dar nu si apa) s-a eliminat.  Aceasta serveste in acelasi mod in care talajul este folosit pentru a crea un substrat cu o densitate mai mare. Imi pot imagina ca ciuperci  ca H. erinaceus, care cresc pe copacii de lemn de nuc sau cires, prefera mai degraba substraturi dense decat cele pufoase. In metodele  traditionale fara perhidrol, nu este indicat ca sa presati  substratul datorita pericolului de a crea conditii  anaerobe pentru organismele contaminatoare. Cu perhidrolul prezent in substrat acest lucru nu se intampla deoarece prin descompunerea perhidrolului oxigenul produs distruge organismele care altfel s-ar gasi intr-un mediu anaerob.

Prepararea rumegusului cu suplimenti si perhidrol

Iata cum trebuie sa procedati in cazul granulelor de rumegus:

1. Prima data, curatati bine o galeata cu capac de 20l din plastic. (rutina mea de curatare presupune spalarea interiorului galetii cu  ajutorul unui burete si a unui detergent biodegradabil si apoi clatirea acesteia).

2. Clatiti galeata si capacul acesteia in apa clocotita – o scufundare totala a acestora ar fi ideala. Din acest moment, va trebui sa  evitati ca sa mai atingeti interiorul galetii sau a capacului acesteia.

3. Puneti galeata goala pe un cantar si cantariti cam 3kg de granule de rumegus daca sunt din stejar sau 2,2-2,5kg daca acestea sunt din brad (folosesc un borcan de 1kg pe care-l folosesc pe post de lopata si care l-am sterilizat cu putina apa in cuptor, fara a fi nevoie de o pasteurizare). Va trebui sa faceti propriile dvs. ajustari in functie de granulele de rumegus pe care le aveti si a  rumegusului care rezulta din acestea si bineinteles lasand loc pentru suplimenti si miceliu precum si pentru spatiul necesar unui amestec eficient a continutului.

4. Daca folositi suplimenti solizi, atunci acestia pot fi adaugati in acest moment.

5. Adaugati varul. Daca acesta contine enzime atunci va trebui sa fie copt la 400C pentru mai multe ore. Nu folositi dolomit, din cauza continutului sau de magneziu care inhiba dezvolarea ciupercilor.  Pentru ciupercile care cresc pe rumegus de stejar folosesc aprox. 60gr de var, sau 30gr pentru cele care cresc pe lemn de brad.

6. Fierbeti intr-un vas cu capac jumatate din apa care urmeaza sa o adaugati. (apa trebuie sa nu contina particule vizibile). Pentru acest pas fierb 3,5 litri de apa pentru 4kg de granule de rumegus (aprox.3 litri de apa pentru 3kg de granule de rumegus de brad). Daca folositi suplimenti nutritionali solubili, puteti sa-i adaugati inainte de a fierbe apa. Puteti sa experimentati diferite  grade de umiditate pentru speciile pe care urmeaza sa la cresteti. Unul dintre avantajele prezentei perhidrolului in substratul final este ca puteti sa adaugati mai multa apa decat ar fi voie in mod normal, fara a crea zone anaerobe propice dezvoltarii contaminantilor. Oricum rumegusul tinde sa absoarba mai multa apa decat poate incorpora in el, ceea ce face dificila turnarea lui in pungi fara a varsa.

7. La 1 minut dupa ce apa a inceput sa fiaerba, dati-o cu grija jos de pe foc si turnati-o peste substrat. Puneti capacul la galeata si amestecati prin invartirea galetii timp de cateva minute pentru ca apa sa fie distribuita.

8. Fierbeti intr-un alt vas cu capac restul de apa necesara (in functie de tipul de rumegus pe care-l aveti). Dupa ce apa a fiert 1 minut luati-o jos de pe foc si lasati-o sa se raceasca cu capacul pus pe ea. Veti folosi aceasta apa pentru a adauga perhidrolul in ea.

9. Lasati galeata cu substrat sa se raceasca cu capacul pus pe ea. Racirea dureaza de obicei cateva ore. Fundul galetii poate fi  cald cat sa puteti tine mana pe el in momentul in care doriti sa adugati perhidrolul.

17

Page 18:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

10. Cand apa din vasul al doilea s-a racit, adaugati cca. 120ml de perhidrol 3%.

11. Turnati perhidrolul astfel diluat peste rumegusul din galeata care s-a racit, amestecandu-l prin invartirea galetii. Astfel se obtine o concentratie finala de aproximativ 0,03%.

12. Lasati substratul sa se raceasca la temperatura camerei. Acum el este gata sa fie folosit.

Probabil va intrebati dupa atatia pasi din aceasta procedura, de ce nu se poate simplifica urmand pasii de la procedura “Miceliu in 10 minute” ? Daca concentratia de perhidrol a fost crescuta pentru a compensa descompunerea din substratul cald, atunci perhidrolul poate fi adaugat la inceputul procedurii impreuna cu toata apa. Acest lucru s-ar putea dovedi posibil cu o concentratie initiala suficient de mare de perhidrol. Oricum, substratului ii ia de doua ori mai mult timp sa se raceasca daca intreaga apa clocotita este adaugata peste el. In aceste conditii, presupun ca perhidrolul va avea sanse minime sa supravietuiasca expunerii indelungate la caldura, chiar daca concentratia lui initiala a fost marita de cateva ori.

Suplimenti nutritionali pentru compost

Daca utilizati suplimenti nutritionali traditionali cum ar fi meiul sau taratele de orez, va trebui sa le fierbeti sub presiune. In timp ce sunt inca calde, suplimentii sterilizati se toarna in substratul rece pasteurizat. Aveti grija sa stergeti picaturile de pe partea exterioara a borcanelor inaintea turnarii.

Marea majoritate a suplimentilor traditionali folositi in culturile de ciuperci necesita fierberea sub presiune pentru eliminarea enzimelor care descompun perhidrolul inaintea pasteurizarii substratului. (Aceste enzime sunt remarcabil de stabile, si pasteurizarea standard nu este suficienta in general pentru inactivarea lor, chiar si in cazul suplimentilor mai delicati cum sunt taratele). Oricum, asa cum am discutat in sectiunea dedicata producerii miceliului, am gasit acum cativa suplimenti care sunt liberi de enzime si care pot fi adaugati fara o sterilizare sub presiune,  in acest  caz amestecate  in rumegus. Doi dintre suplimentii  care sunt produsi   la scara comerciala sunt deja  folositi   in industria de ciuperci lamelare (Sylvan’s Millichamp 3000 si CG 60). Acestia contin proteine de soia denaturate si respectiv gluten de porumb denaturat, evident ca prin procesul de denaturare se descompun enzimele. Acesti suplimenti sunt foarte valorosi, dar cultivatorii casnici s-ar putea sa intampine dificultati in obtinerea acestora. In acelasi timp, trebuie sa avem grija ca acestia sa nu se deterioreze in magazia noastra, in mod special pentru Millichamp 3000.

Cateva forme mai costisitoare de proteine procesate se gasesc mai usor, cum sunt: proteinele vegetale, lapte praf de soia sau lapte praf de vaca.

Un alt tip de supliment care poate fi folosit fara a fi necesara fierberea sub presiune sunt fertilizatorii chimici simpli. Din moment ce acesti  fertilizatori  nu provin din organisme vii,  acestia nu contin  enzime care sa descompuna perhidrolul. Cu toate acestea, marea parte a nutrientilor   pot   fi   totusi   folositi   in   cresterea  miceliului   dupa   o   perioada   de   adaptare.  Daca   doriti   sa   incercati   aceasta  metoda   de suplimentare, eu recomand ca sa preparati miceliul cu acelasi tip de supliment, astfel incat perioada de adaptare a avut loc deja pana in momentul in care inoculati compostul. Deasemenea, aveti o sansa in plus sa vedeti cum fertilizatorii pe care ii detineti ajuta la cresterea  organismelor. Formula fertilizatorilor variaza foarte putin, astfel ca este indicat sa testati fertilizatorul pe o cultura mica inainte de a-l folosi in compost.

Ureea este o sursa de azot obisnuita in formula fertilizatorilor chimici, si este probabil posibil sa o utilizam ca supliment fara o fierbere sub presiune.

Daca doriti ceva mai “organic” decat fertilizatorii artificiali (si este un motiv bun de a evita dependenta de substante care necesita energie si petrol pentru producerea lor), urina umana si cea animala poate fi folosita ca supliment care nu necesita firbere sub presiune. Oricum,  ea trebuie pe cat posibil sa fie tinuta in locuri fara micro-organisme pana in momentul in care v-a fi folosita. Adaugarea de perhidrol poate fi un mod de a face aceasta.

Calculul cantitatii de suplimenti pe care trebuie sa-I adaugam

Cum puteti sa calculati cantitatea de suplimenti pe care urmeaza sa o folositi? Calculele sunt doar aproximative, si in final va trebui sa luati decizii in baza productiei de ciuperci pe care ati obtinut-o in functie de cantitatea de suplimenti pe care ati utilizat-o. Dar puteti sa va faceti o idee despre cantitatea de suplimenti pe care sa o adaugati consultand cartea lui Stamets's Growing Gourmet and Medicinal Mushrooms, unde in anexe dezvaluie ca taratele de orez au un aport NPK (azot –fosfor-potasiu) in raportul 2-1,3-1. Astfel, daca substratul de obicei are nevoie de suplimenti de tarate de orez intre 5-20%, as cum Stamets sugereaza, atunci un fertilizator 20-20-20, care are de 10 ori mai mult  azot decat taratele de orez, va trebui sa adaugati de 10 ori mai putin, sau 0,5-2% din masa uscata a substratului. Daca adaugati 30gr de tarate de orez atunci va trebiu sa adaugati doar 3gr de fertilizator 20-20-20, adica a zecea parte. In cazul suplimentilor comerciali, va trebui  sa aflati de la producator procentul de azot pe care-l contine, si sa-l impartiti la 2 ca sa aflati fractia din cantitatea de tarate de orez pe care trebuie sa o adaugati. Sylvan's Millichamp 3000, produs din soia, are in jur de 7.3% azot, astefl ca va trebui sa utilizati ¼ din cantitatea de  tarate de orez pe care ar fi trebuit sa o folositi. 

Puteti sa faceti si calculul direct tinand cont ca trebuie sa aveti o concentratie de 0,1-0,4% de azot in substartul final, fara a mai face  referire la taratele de orez utilizate de Stamets.

1. Impartiti procentul de azot din supliment la procentul de azot dorit in substratul final.2. Impartiti numarul gasit anterior  la greutatea totala a substratului pentru a afla cantitatea de supliment pe care trebuie sa o 

adaugati.

18

Page 19:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Astefel,  daca doriti  sa obtineti  concentratia de 0,2% azot  in substratul  final (care necesita suplimentarea cu 10% din masa uscata a substratului daca folosim tarate de orez), ce cantitate de praf de soia trebuie sa adaugam? Daca praful de soia contine 7,6% azot, atunci 7,6 imparti la 0,2 rezulta 38. Daca masa totala a substratului este de 2.5kg, atunci 2.5 impartit la 38 da 65gr de praf de soia de adaugat.

Nota la masurarea Ph-ului substratului

Eu folosesc indicatori universali colorati pentru masurarea ph-ului in gama 4-10 a mediilor folosite ca substraturi, urmarind ca acesta sa fie in gama 6-7 in cele mai multe cazuri. Indicatori sunt ieftini si convenabili, si printr-o comparare in trei culori, sunt sigur de citirea pe care o efectuez. Oricum, nu este o idee prea buna ca sa masori pH-ul cu o banda de hartie dupa ce ai adaugat perhidrolul, din moment ce acesta  poate modifica caracteristicile indicatorului colorat. In culturile de agar si in cele de productie a miceliului, masurarea se poate face usor  inainte de sterilizare. In cazul granulelor de rumegus, folosindu-va de ex. de o cana de masura (una care a fost clatita in apa clocotita) luati  o mica cantitate din continutul galetii dupa ce ati adaugat apa si varul. Apoi folosindu-va de indicatorul universal puteti sa masurati pH-ul substratului scos. Atentie, oricum citirea pe care o faceti va da doar o idee relativa despre pH, deoarece experimentati inainte ce miceliul  sa fi fost adaugat si varul care se dizolva incet. Suplimentarea cu CaOH (var stins de constructii) rezolva aceasta problema, deoarece se dizolva si reactioneaza mult mai repede, dar pentru o parte din ciuperci ar fi mai bine daca acesta s-ar dizolva mai incet, mentinand sursa de alcalinitate. Va trebui doar sa calibrati cantitatea de var utilizata dozand-o in functie de ultima recolta de ciuperci pe care a-ti obtinut-o.

Containere pentru compost

In mod traditional, culturile pe rumegus au fost crescute in saci de plastic speciali cu filtrare microporoasa, pentru a asigura schimbul de gaz fara a permite insa intrarea contaminantilor. In prezenta perhidrolului in compost, oricum, veti putea sa folositi saci ordinari utilizati pentru gunoi pentru cresterea ciupercilor (cu o economie de 0,5-0,8$ per punga). Evident ca procesul folosit pentru realizarea acestora  implica pasteurizarea, astfel incat acestia nu vor prezenta urme semnificative de contaminare. Daca veti folosi aceste pungi de plastic, atunci va recomand sa le folositi pe acelea care sunt facute din plastic dens, avand grosimea de 13,5 micrometri sau mai mica. Aceste pungi sunt suficient de subtiri pentru ca oxigenul sa difuzeze prin ele, astfel incat culturile pot ajunge la maturitate cand acestea sunt etans inchise prin rasucire  si   legare.  Deasemenea, pungile care sunt subtiri  par a  fi   facute din PVC, acestea putand imprastia reziduri  de estrogen in cultura de ciuperci, si in mod cert acestea sunt impregnate si cu fungicide.

Daca nu folositi containerele traditionale, atunci va trebui sa puneti pungile in interiorul unor containere de marime apropiata pentru a da o forma substartului. Cutiile de carton, in care puteti sa puneti pana la 2,5kg de substrat, pot fi folosite dupa ce interiorul acestora a fost  curatat de resturile de alimente care au fost prezente in ele.

Pungile folosite nu sunt biodegradabile. O alternativa la acestea sunt galetile de plastic cu capac de 7-11l, preferabil  din polietilena. Galetile de 20l sunt bune dar sunt un pic cam prea mari pentru cultura pe rumegus. Acestea pot fi curatate cu detergent dupa care clatite  cu apa clocotita. Daca capacele nu sunt inchise ermetic pe durata dezvoltarii pentru a putea permite schimbul de gaze, acestea devin vase de cultura excelente pentru speciile de ciuperci care cresc vertical cum ar fi P. Eryngii. Pentru speciile care cresc pe orizontala precum H. Erinaceus aceste galeti sunt bune cu conditia ca in momentul in care urmeaza sa fructifice, acestea sa fie culcate pe o parte.  (Umplu galeata doar la 1/3 maximum ½ din capacitatea acesteia, astfel incat partea goala a galetii va fi o bariera umeda). H. Ulmarius va fi  un pic inghesuit in spatiul acestor galeti, cu exceptia cazului in care umpleti galeata pana aproape de capacitatea maxima, astfel incat ciorchinele acestora sa poata sa creasca in afara galetii. Pentru a obtine a doua recolta de ciuperci din acelasi compost, atunci va trebui  ca sa intoarceti in galeata compostul cu fundul in sus deoarece acestea nu-i place sa creasca de doua ori pe aceeasi suprafata.

Inocularea compostului cu suplimenti

Prepar miceliul pentru inoculare in mod traditional:

1. Cu o zi inainte de inocularea miceliului, faramitez cat pot de mult miceliu din borcan prin lovirea acestuia de un obiect tare protejat cu o suprafata moale.

2. Cand miceliul sa desfacut in particule, pun la loc borcanul si-l incubez peste noapte pentru a da o sansa acestuia sa incepa sa creasca din nou. Acest lucru produce o diferenta considerabila in viteza cu care acesta va coloniza intregul compost. Daca lucrez cu miceliu pe seminte, acesta imi confera sansa de a vedea contaminarea cu bacterii  a miceliului  prin aparitia de seminte „umede” sau unsuroase si pe care nu s-a dezvoltat nici un pic de miceliu. Cand miceliul a ajuns la maturitate prin  metoda perhidrol, prezenta a 2-3 nuclee de seminte „umede”, probabil ca nu vor interfera cu restul semintelor, astfel incat veti putea sa colonizati cu succes compostul din moment ce bacteriile care sunt in stare sa traiasca expunerii la perhidrol sunt in  general organisme benigne cand sunt in cantitati mici. Oricum, daca aveti mai mult de 2-3 nuclee, atunci bacteriile vor coloniza incet dar sigur substantial compostul, care ar putea sa dea o sansa mucegaiului sa castige teren. Astfel, ca probabil, veti dori sa aruncati miceliul care are o cantitate substantiala de nuclee „umede”.

3. Inoculzez compostul prin imprastierea rapida a miceliului faramitat in galeata de 20l in care se gaseste compostul. Inchid cu capacul si amestec totul bine prin rotirea galetii.

4. Torn compostul in pungi. Fiecare punga este cu gura in sus si se gaseste intr-o cutie de carton de dimensiune adecvata cantitatii de compost pe care dorim sa o punem in pungi. 

5. Cand am umplut punga pana la capacitatea cutiei de carton, pun capacul galetii la loc si avand grija ca sa nu ating suprafata interioara a pungii scutur un pic punga pentru ca rumegusul sa poata patrunde si  in eventualele locuri   in care punga s-a suprapus, apoi rasucesc gatul pungii dupa care o leg strans.

6. In final mai comprim compostul apasandu-ma in jos cu mainile pe punga, incet dar ferm. Am observat ca acest lucru pentru unele specii de ciuperci mareste viteza de crestere, in mod special in cazul in care rumegusul este din lemn de bumbac sau brad.

19

Page 20:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Dupa ce etichetez, cutia este pregatita pentru incubare, si de aici incolo, urmez procedura standard de crestere a ciupercilor. Puteti folosi blocurile de miceliu rezultat fie pentru obtinerea unei recolte de ciuperci, fie pentru inocularea bustenilor sau a paturilor de talaj in natura.

Formarea ciupercilor

Pentru marea majoritate a speciilor de ciuperci cultivate, formarea ciupercilor incepe imediat dupa ce culturile au fost mutate pentru o perioada in locuri cu temperaturi scazute, dupa ce li s-a oferit mai multa lumina si mai mult aer, presupunand ca substratul a fost colonizat complet. In acest moment nu mai este nevoie de mai mult perhidrol, din moment ce miceliul este stabilizat.

Procedura  precisa de  inducere  a   formarii  ciupercilor  difera de  la  o  specie  la  alta,  si  acesta nu  este scopul  acestui  manual  pentru informarea despre fiecare dintre ele, dar va voi indica liniile directoare pe care trebuie sa le urmati pentru speciile mele favorite. Doua  dintre speciile de ciuperci foarte familiare mie sunt doua dintre cele mai usor de crescut ciuperci: Hypsizygus ulmarius (the White Elm mushroom) si Hericium erinaceus (Lyon’s Mane sau Pom Pom). Multe alte alte ciuperci din specia Oyster urmeaza aceleasi proceduri precum H. Umarius. Celelalte specii   familiare mie sunt Pleurotus eryngii  (King Oyster) si  Agaricus subrufescens (almond mushroom) urmeaza un tratament putin diferit de primele doua. Shiitake urmeaza cu totul alte proceduri.

Multe din speciile de ciuperci care “cresc” usor sunt gata sa fructifice cand compostul a fost ”cucerit” de miceliu. De cele mai multe ori acesta capata culoarea alba un locul celei maro originale. Cat timp ii trebuie unei culturi pentru a ajunge la maturitate depinde de miceliu,  compost si de temperatura de incubare. Ciupercilor Hericium le poate lua 2-3 sapatamani pana cand sa formeze primele mici primordii globurare albe de ciuperca la suprafata compostului, dar eu le las pana la 1 luna inainte de a deschide pungile. Ciupercii H. ulmarius ii  trebuie 5 saptamani in cazul compostului de rumegus de brad sau paie si 6 sapatamani pe rumegus de stejar (la temperatura camerei), dupa care mici gramezi de primordii vor incepe sa se formeze spontan. In urma taierea pe laterala pungii, in forma de X   sau a unei singure crapaturi cu ajutorul unui cutit curat, H. ulmarius precum si alte specii de ciuperci din familia Oyster, vor crea primordii pe partea unde a fost perforata punga in 1-2 sapatamani, urmand ca ciupercile sa se dezvolte repede. Incepeti sa spray-ati apa din momentul in care ciupercile au ajuns la cca. 2,5 cm.

Hericium, deasemenea va forma ciuperci pe partea laterala a pungii, dar in perioada iernii gasesc mai usor de crescut ciuperci de mare dimensiune daca le las sa fructifice in punga. Intoarceti simplu pe o parte punga si deschideti-o doar putin, permitand ca schimbul de gaze sa aiba loc, dar creend in continuare o bariera de umezeala. Corpurile ciupercilor care fructifica vor fi dispuse la intamplare provenind din primordiile initiale.

Daca urmeaza sa cresteti doar cateva pungi cu ciuperci,  ventilarea nu va aduce mare castig. Dar cu cat veti avea mai multe pungi, necesitatea ventilarii este necesara pentru indepartarea dioxidului de carbon care se acumuleaza. Daca ciupercile nu primesc suficient aer pe masura ce se dezvolta, aceste se vor deforma. Ciupercile din familia Oyster si H. ulmarius, de exemplu, vor creste avand piciorul foarte  lung si palariile ciupercilor de forma iregulara, atunci cand concentratia de dioxid de carbon este prea mare. Cand veti avea suficient de multe pungi de cultivat, atunci necesitatea unui sistem de stropire automat nu se afla departe.

Retineti ca daca urmeaza sa cresteti H. ulmarius sau alte specii de Oyster in casa, probabil ca va trebui sa va luati precautiile necesare pentru a va proteja de cantitatea enorma de spori pe care acestea le produc. Culegerea ciupercilor cand sunt tinere va poate ajuta sa scadeti nivelul de spori. Acoperirea culturii cu o folie de polietilena sau orice alt material va retine sporii in interiorul acesteia in timp ce va  permite schimbul de gaze cu exteriorul, necesar fructificarii. Oricum, daca cineva din familie este sensibil la spori, va trebui sa purificati aerul de spori cu ajutorul filtrelor, daca nu, atunci cresteti-le in afara cladirii.

Ciupercile Almond, white button, precum si King Stropharia si Shaggy Mane, si uneori chiar si King Oyster toate au nevoie de un strat de  sol aplicat culturii de ciuperci pentru ca sa le stimuleze sa fructifice. Stratul de sol este mixtura menita sa reproduca umezeala, friabilitatea unui pamant argilos. Aceasta contine microorganisme care sa accelereze formarea ciupercilor si de asemenea creeaza un rezervor de umezeala pentru cresterea lor.  In general contine doar putine elemente nutritive necesare cresterii  miceliului si acest  lucru trimite de asemea un semnal culturii de ciuperci ca aceasta sa inceapa formarea ciupercilor. Marea majoritate a lor contin turba. O formula simpla pe care am utilizat-o la cresterea ciupercilor Almond necesita simpla amestecare a unei parti de turba amestecata cu o parte de pamant de gradina, plus o mana intreaga de gips (sulfat de calciu) pentru 7-11kg. de mixtura umezita pana la saturare. Stratul de sol este aplicat in  partea superioara a culturii de ciuperci avand o grosime de pana la 5cm. Aveti grija sa nu il tasati, porozitatea acestuia fiind necesara pentru incurajarea formarii primordiilor de ciuperci. 

Mlastinile de turba sunt cunoscute ca un habitat primejdios, asa ca avem nevoie de alternative pentru a inlocui turba ca material de  initializare a fructificarii. Cultivatorii din diferite parti ale lumii au inceput sa gaseasca alternative, asa cum sunt cele pe care le puteti gasi cautand in baza de date a patentelor din US (vezi http://www.uspto.gov/). In unele cazuri pamantul este suficient ca si pat sau pamant plus silicati. Silicatii in sine pot fi o alternativa (oricum acestia nu vor furniza microorganisme). Ciupercile Almond si King Oyster nu au absoluta  nevoie de acest sol (patul de sol pare sa accelereze formarea primordiilor in cazul P. eryngii) astfel ca modificarea conditiilor ar putea sa duca la o fructificare buna fara aceste organisme.

Daca nu aplicati un pat de sol atunci veti avea nevoie sa asteptati 1-2 saptamani in plus pentru ca miceliul sa se dezvolte in intreaga masa si inainte sa se formeze primordiile. Cu ciupercile Almond, acesta este timpul in care cultura trebuie sa se incalzeasca (eu pun cutia cu cultura deasupra unui radiator pentru a fi sigur ca acestea se incalzesc suficient). Este de asemenea perioada de stropire usoara a patului la fiecare 2 zile pentru a-l mentine umed. (pentru P. eryngii nu sunt necesare incalzirea si stropirea). Ciupercile in mod uzual incep sa se  formeze in cateva zile dupa ce miceliul a iesit la suprafata patului de sol.  

Planificarea pe anotimpuri

Daca nu cresteti  doar cateva ciuperci,  aveti  un spatiu rece si  izolat cum ar  fi  o pivnita  luminoasa, probabil  ca veti putea sa cresteti ciupercile favorite pe toata durata anului. Oricum daca urmeaza sa cresteti in natura sau doriti sa cresteti multe ciuperci inauntru (astfel incat veti avea nevoie de ventilarea naturala), va trebui sa va planuiti dinainte ca sa aveti culturile cu ciuperci potrivite sezonului. Eu cresc ciupercile in pivnita tinand geamurile deschise si avand un ventilator pentru aer proaspat, astfel ca ciupercile cresc mai greu in perioada 

20

Page 21:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

cea mai calda din vara si in cea mai rece perioada din iarna. Inchiderea geamurilor nu este optionala, deoarece dioxidul de carbon se va acumula   si   va   inhiba   formarea   ciupercilor.   Incalzirea   si   racirea   aerului   adus  din   exterior   este   desigur   posibila,   dar   creste   in  mod semnificativ factura de energie, prea mult pentru gustul meu. Astfel ca ciupercile mele produc cel mai bine primavara si toamna.

In cea mai rece perioada a iernii atat temperatura cat si nivelul de temperatura scade. Tuturor ciupercilor le ia un timp mai indelungat ca sa colonizeze compostul. P. eryngii fructifica cu dificultate si H. ulmarius creste foarte incet producand picioare mai lungi si palarii deformate daca lumina si temperatura sunt prea scazute. H. erinaceus de asemenea creste incet in aceasta perioada, dar aceste specii vor avea o  productie normala, dar mai mica, de ciuperci chiar si in perioada cea mai rece din iarna. Ciupercile A. subrufescens au nevoie de caldura, dar paradoxal acestea produc foarte bine in timpul iernii in interiorul pivnitei, deoarece ele vor fructifica intr-o camera incalzita si nu au nevoie de atat de mult aer si lumina precum alte ciuperci. 

In partea cea mai calda a verii cand exista lumina suficienta s-ar putea sa intampinam dificultati la initializarea fructificarii la temperaturi inalte. Mentinerea umiditatii la temperaturi ridicate, de asemenea, poate fi dificila. Oricum am fructificat H. erinaceus pe compost uscat la 90 grade in aer; evident ca aerul proaspat a initializat fructificarea din moment ce H. erinaceus din pivnita refuza sa fructifice pana cand temperatura a scazut substantial. Ciupercilor A. subrufescens le place vremea calda si tind sa fructifice dupa ce varful de temperatura a trecut. Ganoderma lucidum prefera de asemenea vremea calda la fel ca Stropharia.

Cresterea in natura versus cresterea in sera

Obisnuiesc sa cresc toate ciupercile mele in sere. Asta imi permite sa le cresc pe toata durata anului datorita temperaturilor moderate si de asemenea ma salveaza de la problemele cauzate de melci si limacsi, carora le plac ciupercile si care cresc in numar mare in zona mea.  (in momentul de fata am cativa limacsi care incearca sa se catere pe ferestre si sa ajunga de pe postamentul de ciment eventual la culturile de fructificare). Caprioarele de asemenea mananca ciuperci si insectele pot fi o problema in cultivarea in natura. Astfel ca in trecut am recomandat intotdeauna cultivarea in sere. Dar cultivarea in natura are avantajele ei. Unul dintre motive este ca ciupercile fructificate in  natura au o aroma distinctiva superioara fata de cele crescute in sera. De asemenea formarea ciupercilor poate fi mai robusta in aer proaspat decat  in sera. Exista mai mult spatiu fizic pentru ele. Si mai este o mica problema cu sporii  care pot  fi   inhalati.  Ciupercile parazitare pot fi reduse in actiunea lor printr-o acoperire intr-un fel sau altul cu folie sau alte materiale dintr-un singur strat. Daca regiunea dvs. se afla in zona temperata la marginea marii, ar trebui sa puteti sa cresteti ciuperci in natura pe toata durata anului. Astfel daca credeti ca puteti tine la distanta daunatorii, dati-i drumul si fructificati culturile in natura. Veti avea nevoie doar de o zona umbrita care poate fi mentinuta umeda.

Culegerea ciupercilor

Cunoasterea momentului cand trebuie sa culegeti ciupercile este o problema vasta in a stii cat de mari cresc acestea si ce sanse au ca sa ajunga la maturitate. Cu P. eryngii si H. ulmarius, desfacerea marginilor palariei este semnul uzual ca ciuperca a ajuns la maturitate, dar trebuie sa corelati cu marimea ciupercii pentru a fi sigur. Cu A. subrufescens, palaria se desface si lamelele incep sa aiba o culoare rosiatica. Cu H. erinaceus, se formeaza mici “ace de gheata” si ciuperca devine mai fina.

Marea majoritate a ciupercilor se spune ca sunt mai gustoase daca sunt culese inainte ca acestea sa imprastie multi  spori,  cu toate acestea ele vor castiga  in greutate daca sunt  lasate sa creasca  in continuare. Este  in mod sigur adevarat  ca H. ulmarius este mai gustoasa cand este tanara, dar personal nu am facut comparatii de gust pentru restul de specii pe care le cresc.

Probleme

In ciuda faptului ca utilizez perhidrolul pentru protectia culturilor de ciuperci, au fost multe cazuri cand lucrurile nu au mers asa cum am planuit, aparand contaminantii. De fiecare data a trebuit sa gasesc cauza problemei si sa corectez problemele si de fiecare data mi-a fost  dat sa invat ca utilizarea perhidrolului in sine nu este o chestie fara cusur. Procedurile pe care le-am descris aici sunt desprinse din cele mai bune invataminte personale, incorporand tot ce am invatat din greseliile facute si ar trebui sa asigure punctele de pornire necesare  producerii unei culturi bazate pe perhidrol libera de contaminanti. Cu toate acestea problemele sunt partea inevitabila a unei culturi de ciuperci si mai devreme sau mai tarziu va trebui sa le rezolvati.

Intotdeauna am gasit descurajant faptul de a citi o lista cu lucrurile care pot merge rau, astfel in loc de aceasta am creat o lista cu intrebari  care atrag atentia asupra diferitelor aspecte ale procesului de cultivare in scopul rezolvarii problemelor contaminantilor.

Daca adaugati perhidrol si aveti in continuare o contaminare importanta ar trebui sa va puneti singuri cateva din intrebarile urmatoare:

Este concentratia de perhidrol din solutia de stoc cea care trebuie sa fie? A trecut mai mult de o luna de cand l-ati masurat ultima data?

Functioneaza corect echipamentul de fierbere sub presiune?

Este aburul  in masura sa intre in borcanele dvs. si se echilibreza? (sunt capacele destul de desfacute? Daca fierbeti  sub presiune, ati permis timp de 5min. ca aburul sa se echilibreze inainte sa puneti capacul vasului sub presiune?) 

Elementul pe care il folositi pentru fierbere este suficient?

Fierbeti   la  o  temperatura suficient  de  inalta si  pentru suficient  timp pentru a elimina contaminantii  si,  daca este necesar, enzimele care descompun perhidrolul?

Este substratul dvs. suficient de umed pentru ca aburul sa il penetreze?

21

Page 22:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Suplimentii pe care ii adaugati sunt dizolvabili inainte sa-i utilizati?

Este perhidrolul adaugat distribuit in toata masa mediului?

Este citirea pH-ului reala? (perhidrolul este aparent mai stabil in jurul pH-ului neutru).

Daca substratul de fructificare este contaminat, este miceliul dvs. curat?

Daca miceliul este contaminat, este mediul de agar curat?

Daca turnati liber perhidrol in culturi exista picaturi care ajung in interior de pe suprafete nesterilizate?

Sunt vasele Petri fara urme ale mediului vechi?

Daca vasele de agar devin contaminate, contaminarea este la suprafata sau in masa agarului? Daca este la suprafata uitati-va la o sursa de contaminare externa mediului de agar; daca este in agar, contaminarea este de dinainte sau in timpul turnarii.

Ati permis mediului sau substratului sa se raceasca suficient inainte sa adaugati perhidrolul?

Este apa dvs. fara particule?

V-ati uitat la toate sursele si materialele nesterilizate si nepasteurizate care intra in contaca cu cultura dvs.?

Au ciupercile  suficienta  lumina  (dar  nu expuse  razelor  solare),  aer  proaspat  si  umiditate  pentru a creste  la  dimensiunea normala?

Concluzii

Deoarece am ajuns la sfarsitul acestui manuscris, sunt fortat sa iau o pauza de moment si sa ma autoexaminez. Am denumit acest volum “Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla”, si acum trebuie sa ma intreb daca nu am exagerat un pic prin atribuirea acestui nume. Dupa toate, exista in continuare multe cai ca lucrurile sa mearga rau in cultivarea ciupercilor decat cai care sa duca la o cultura fara probleme. Si uneori ma gandesc ca este o minune intr-devar ca obtinem aceste organisme ca raspuns la ceea ce facem astfel incat sa producem aceste ciuperci delicioase.

Ei bine, este o minune. Si chiar cu intretinerea pe care perhidrolul o asigura culturilor, procesul este pe departe de a fi profesionist. Dar ma simt multumit ca procedurile descrise aici fac sa fie posibil pentru hobisti cu un minimum grad de confort si tehnici sterile sa execute toti pasii necesari unei culturi de ciuperci in spatiul casei proprii, mult mai usor decat inainte, fara a fi nevoie de echipamente speciale pentru controlul contaminantilor ci doar de vase de fierbere si pipete de masurare. Si fara a mai fi stresati de contaminanti, cultivatorii casnici vor fi liberi insfarsit sa se focalizeze pe lucrurile care ne atrag pe noi toti cultivatorii intr-un singur loc, urmarirea pentru mai mult timp a cresterii  acestor frumoase si delicioase ciuperci.

Despre autor

Rush Wayne este diplomat in Biochimie si Biologie Moleculara la Universitatea Harvard si detine si o diploma de fizician in Biochimie la Universitatea California din Berkley. A intrat prima data in contact cu procedurile de crestere a ciupercilor cand a absolvit in 1970, dar nu a devenit un cultivator de ciuperci pana in 1993, cand a reusit sa-si implementeze inovatiile continute in acest manual. Instructiunile de  folosire a perhidrolului in cultivarea ciupercilor se afla in posesia cultivatorilor de ciuperci din peste 75 de tari de pe intreg globul.

22

Page 23:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simplaCultivarea ciupercilor in regim casnic

cu ajutorul perhidrolului

Volumul II 

 

R. Rush Wayne, Ph.D.  

 

Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simplaCresterea ciupercilor in regim casnic cu ajutorul perhidrolului

Volumul II

Copyright © 2001R. Rush Wayne. Ph.D.

Toate drepturile rezervate. Nici o parte a acestei lucrari nu poate fireprodusa sau folosita sub nici o forma fara permisiunea autorului acesteia..

 

Volumul I publicat sub titlul Cresterea ciupercilor prin metoda perhidrolului,Decembrie 1996

Volumul II publicat pentru prima data in August 2000Revizuit si adaugat, Iulie 2001

 

Visitati Web site-ul pentru informatii despre Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simplahttp://www.mycomasters.com/Updates.html

precum si pentru ultimele si periodicele informatii noi despre metoda perhidrol.

 

23

Page 24:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

CUPRINS

Introducere

Obtinerea, Depozitarea si Pastrarea culturilor de ciuperciUtilizarea eprubetei in loc de vasul Petri Dezavantajele vaselor PetriAvantajele si dezavantajele folosirii eprubeteiPrepararea eprubetelor cu perhidrolEfectuarea transferului in si din eprubetaCuratarea miceliului din eprubeta

Mediul Bazat pe Bere (MBB)Pornind de la Spori Avantajele si dezavantajele pentru cazul in care porniti de la sporiRevizuire a metodei sporilor in perhidrolColectarea SporilorGerminarea Sporilor prin Metoda DiscAlte idei de obtinere a miceliului fara agarDe ce sa cautati un inlocuitor pentru agarCum sa preparati discurileEfectuarea transferurilorCuratarea miceliuluiPastrarea culturilor fara agarExpedierea culturilor prin posta

Re-sterilizarea cu ajutorul perhidrolului a vaselor Petri disponibilizate  

Prepararea miceliului Miceliu in pungi de plastic – “Miceliu in 8 minute” Avantajele si dezavantajele folosirii pungilor de plasticProducerea miceliului Folosirea miceliului

Miceliu pe substrat "In 10 Minute"Inocularea substratului din paie fara a folosi miceliuCum sa preparati si sa inoculatiNote legate de procedura folositaProbleme care pot aparea

Prepararea CompostuluiCompostul I: Prepararea paielor cu perhidrol – la temperatura camerei Avantajele si dezavantajele perhidrolului cand folositi paieCe se intampla cu enzimele?Procedura de preparare a paielor  sau a altor tipuri de sustratNote la aceasta proceduraCompostul II: Prepararea talajului din lemn neuscat cu perhidrolCompostul III: O metoda de “pune-si-amesteca” pentru substraturile compatibile cu perhidrolul Ratiunile si avantajele metodei “pune-si-amesteca”Cateva cuvinte despre rumegusul uscat in cuptoareProcedura “pune-si-amesteca”  la temperatura camereiSuplimente naturale folosite in aceasta metodaCata apa trebuie sa folositiCat perhidrol trebuie sa utilizatiNote la procedura “pune-si-amesteca “

Concluzii

Despre Autor  

 

Introducereintoarcere la meniu   

24

Page 25:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Am scris cel de-al doilea manual: “Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla”, pe de-o parte pentru a completa scaparile si omisunile din primul volum si pe de alta parte, pentru a prezenta citeva idei noi de cultivare a ciupercilor care sa duca la reducerea timpului, a efortului si a banilor investiti. 

La fel ca si in primul volum, majoritatea metodelor din acest volum, au fost initial concepute pentru utilizare pentru culturi la scara mica sau casnica. Dar doua noi metode de preparare a compostului descrise in acest volum au fost special concepute pentru cultivatorii care doresc sa lucreze la scara comerciala. Si aproape toate tehnicile prezentate in aici,  s-ar putea dovedi cel putin folositoare in contextul unei productii la scara comerciala.

Procedurile din acest volum sunt organizate conform etapelor necesare in realizarea unei culturi de ciuperci.  Astfel,  prima data este prezentata pastrarea culturilor si a sporilor de germinare a culturiilor. Apoi urmeaza metodele de preparare a miceliului, incheindu-se cu procedurile de preparare a compostului.

Procedurile din acest volum presupun faptul ca sunteti familiarizat cu metodele folosirii perhidrolului ca element de pasteurizare. Daca nu ati mai folosit aceasta metoda, este indicat sa consultati primul volum din Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla. Acesta contine informatii esentiale precum si notiuni generale de cultivare a ciupercilor, iar in particular informatiile necesare pentru utilizarea perhidrolului in cultivarea ciupercilor. 

Metodele bazate pe utilizarea perhidrolului din acest volum, sunt  inventii  personale – pana in momentul  in care alcineva v-a sustine contrariul. Metodele care nu se bazeaza pe metoda perhidrol au fost facute publice de catre cei care le-au dezvoltat. Le-am prezentat aici  deoarece ele au o valoare certa pentru cultivatorii prin metoda perhidrol.

Destul cu povestile! La treaba!

Obtinerea, Depozitarea si Pastrarea culturilor de ciuperciintoarcere la meniu   

Utilizarea eprubetei in loc de vasul Petriintoarcere la meniu

Este cunoscut faptul ca in procedura standard de dezvoltare a culturiilor de ciuperci se foloseste vasul Petri umplut cu un mediu de agar. Tinand cont ca nu toti cultivatori pot detine laboratoare sterile, acest standard trebuie pus sub semnul intrebarii. Probabil cel mai mare dezavantaj al vasului Petri este faptul ca are o suprafata asa mare de expunere. Datorita faptului ca acestea sunt folosite pentru pastrarea indelungata a culturii de ciupercii, probabilitatea de a fi contaminate din aer este foarte mare. Chiar si prin metoda perhidrol, ocazional pot aparea infestari care se vad pe marginea vasului Petri. Aceasta se intampla mai ales atunci cand miceliul s-a dezvoltat aproape pe toata suprafata agarului, si in mod special in perioadele de timp umede. 

O solutie de rezolvare a problemelor este schimbarea vaselor cu unele care au o suprafata de expunere cat mai redusa. De exemplu,  eprubetele cu capac sunt o alegere buna. Ma refer aici la eprubete care au dimensiunile aproximative de 19x125mm, care urmeaza a fi  umplute partial cu agar topit si care este lasat sa se solidifice sub un anumit unghi. 

Eprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza sa fie inchisa sau deschisa. Astfel obtinem asigurarea suplimentara impotriva contaminantilor. Apa din acestea se evapora mult mai greu decat cea din vasele Petri, astfel ca si concentratia de perhidrol ramane eficienta pe o durata mai  lunga de timp. Chiar si fara perhidrol, rata de contaminare este redusa. In plus cantitatea de agar necesara in eprubete este mai mica decat cea din vasele Petri, aceasta ducand la economisirea de bani. Dar are si un dezavantaj. Unele ciuperci nu le place mediul umed din eprubeta (exemplu: H. ulmarius). Nu puteti sa monitorizati morfologia miceliului din eprubete asa cum o faceti in vasele Petri (modificarile  morfologice pot  indica eventuale contaminari  sau alte  probleme).  Si  poate  fi  extrem de dificil  sa  rupeti  bucatele din miceliul  aflat   in eprubeta cand doriti sa inoculati alte culturi. Aceasta ultima problema depinde si de tipul de pat pe care il creaza miceliul ciupercii.

Prepararea eprubetelor Aici aveti modul de obtinere a unui set de eprubete: 

1) Masurati ingredientele conform retelei MDA (malt-drojdie-agar) si puneti-le intr-o cana curata de metal prevazuta cu gat de scurgere.(Mai jos aveti reteta MDA -  din 250ml. o sa obtineti aproximativ 20 de eprubete.) 

2) Puneti o folie de aluminiu ca si capac la cana. Puneti cana in vasul sub presiune in care se gaseste putina apa. Puneti si eprubetele cu capac in vasul sub presiune, de preferinta intr-un alt vas. 

3) Fierbeti 10 minute fara capacul pus. Puneti capacul, si fierbeti la presiune maxima pentru inca 10 minute. 

4) Indepartati imediat vasul sub presiune de pe aragaz si raciti-l. Dati-i jos capacul imediat ce presiunea a disparut. Scoateti cana si vasul cu eprubete pentru a se raci mai repede. Puteti pune cana intr-un vas cu apa rece pentru a grabi racirea, dar nu lasati ca solutia din el sa inceapa sa se solidifice.

5) Adaugati 1,5ml perhidrol la 250ml mediu MDA. Puneti perhidrolul cu ajutorul unei pipete pe care ati pasteurizat-o prin trecerea acesteia prin apa fierbinte. Amestecat perhidrolul prin rotirea canii.

25

Page 26:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

6) In final puneti continutul in eprubete. Folositi-va de gatul de scurgere al canii pentru a evita varsarea pe gatul eprubetei. Intre degetul mic si cel inelar de la mana tineti capacul eprubetei. 

7) Puneti  capacul   la   fiecare eprubeta si  dispuneti  eprubetele pe un plan  inclinat  usor,  pentru ca acestea sa se solidifice.   In momentul in care acestea s-au solidificat, acestea sunt pregatite pentru utilizare.

Reteta MDA pe care o folosesc:  

12 gr. Agar-agar12 gr. pulbere de malt1 gr.  drojdie de bere uscata0.5 gr. faina (prin rotatie grau, secara, porumb, orez, ovaz)0.5 gr. hrana concentrat pentru iepuri (ori pentru alte animale) 4 gr. rumegus (cantitatea de rumegus poate fi crescuta pentru speciile care se dezvolta mai greu pe agar)1 litru apa de la robinetpentru ajustarea pH-ului intre 6 si 8 folositi otet de mere si bicarbonat de sodiu (optional)

Efectuarea transferului in si din eprubeta

Pentru inocularea eprubetei, si pentru extragerea miceliului din ea, este indicat sa aveti o ustensila rigida.Pentru confectionarea acesteia puteti folosi o sarma rigida careia ii faceti o bucla mica la unul din capete, celalat capat introduceti-l printr-un tub de sticla (3mm diametru). In final topiti sticla la capatul sirmei care nu are bucla pana cand aceasta se lipeste de sarma. Acest tub cu nucla de sarma formata devine ustensila dvs. de lucru. 

Pentru succesul inocularii, va fi nevoie de o mica sapatura efectuata in continutul eprubetei pentru ruperea unei bucati de agar cu miceliu pe care il veti transfera in eprubetele noi. (daca bucatica este prea mica sau daca radeti doar miceliul de la suprafata agar-ului, s-ar putea  ca acesta sa nu se dezvolte). Dar, daca de prima data nu reusiti, atunci puteti incerca in continuare cu aceeasi eprubeta. Perhidrolul o va mentine fara contaminanti. Imi place sa sap cu ustensila pe care am creat-o pentru a taia o bucatica de cultura. Dar este foarte dificil sa rupeti o bucatica de dimensiunea dorita. De multe ori am avut bucati care au cazut jos de pe ustensila in miscarea pe care o faceam pentru tranfer. Oricum in final veti reusi. Invartiti gura eprubetei in flacara sau lampa cu alcool inaintea desfacerii capacului  si inainte de punerea acestuia la loc. 

Curatarea miceliului din eprubeta

In Volumul I : Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla, am explicat cum microbi invizibili pot sa contamineze si sa se dezvolte intr-o cultura tratata cu perhidrol. Tot acolo am prezentat si o metoda de “ curatare” a miceliului contaminat prin inocularea la fund a vasului Petri. In eprubeta, contaminarea se petrece intr-un ritm mai lent decat in vasele Petri. Dar s-ar putea ca acumularea acestora sa fie exact in locul in care miceliul trebuie curatat. Deoarece nu exista o procedura convenabila de inoculare a eprubetei la fundul acesteia, va trebui sa folosim alta metoda. Aceasta consta in turnarea unui al doilea strat de agar – cand acesta este suficient de racit, dar nesolidificat – peste miceliul  care s-a dezvoltat peste primul strat. Astfel miceliul se dezvolta  in ala doilea strat,  autocuratandu-se pe masura ce se dezvolta. 

Iata cum trebuie sa procedati: 

Preparati si inoculati eprubetele asa cum am descris mai sus. Permiteti miceliului sa se dezvolte un pic peste agar.

1) Preparati o cantitate mica de MDA prin procedura standard. Folositi cana cu gat de scurgere. Acoperiti-o cu folie de aluminiu.2) Dupa fierbere, cand s-a racit substanta, adaugati perhidrolul de concentratie uzuala. Amestecati prin rotirea usoara a canii.

3) In momentul in care fundul canii puteti sa-l tineti in mana aprindeti lama cu alcool. Deschideti o eprubeta tinand capacul pe degetul mic. Rotiti gura eprubetei peste flacara lampii cu alcool. Turnati agarul proaspat in eprubeta astfel incat sa acoperiti complet miceliul. Puteti sa faceti asta fie tinand inclinat eprubeta, fie tinand-o in pozitie verticala. Cu cat veti turna mai putin agar cu atat mai mica va fi distanta pe care miceliul o va strabate pana va ajunge la suprafata. Fiti atent: agarul din cana tinde sa se solidifice rapid! Tineti cana intr-un vas cu apa usor incalzita.

4) Puneti la loc capacul eprubetei. 

5) Asteptati ca miceliul sa se dezvolte pe noul strat de agar.

Cand extrageti miceliul pentru inoculare, aveti grija sa nu patrundeti din stratul superior in cel inferior. Astfel veti anula functia celui de-al doilea strat.

Mediul Bazat pe Bere (MBB)   intoarcere la meniu   

In continuare aveti o metoda pentru prepararea mediului de agar care va salveaza de la marea majoritate a cantaririlor si masuratorilor. De asemenea aceasta este perfecta pentru cei care nu pot sa gaseasca o sursa de extract de malt. Si chiar daca puteti obtine maltul, acesta  se poate pietrifica in cazul in care il depozitati. Acest mediu rezolva aceasta problema. El provine prin bunavointa Dr. Nenad Vidovic si  Sansin Corporation din Ontario, Canada (vezi Vidovic, N., Specialty Mushrooms--Small Scale Production,  Mycelium, 25, 1999, pages 4 

26

Page 27:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

and 8). Dr. Vidovic a demonstrat ca cateva specii de ciuperci se pot dezvolta in mediul MBB la fel de bine ca si in mediul comercial de extract de malt. A modificat reteta lui pentru a include si perhidrolul. 

Ingrediente:1 parte bere proaspata3 parti apa2% agar din greutate (2 gr. pulbere de agar la 100ml.) 

1) Amestecati berea cu apa.2) Adaugati agar-ul.

3) Sterilizati intr-un vas de presiune (15atm.) dupa ce ati incalzit 10min. pentru ca agar-ul sa se dizolve.

4) Raciti pana cand puteti sa manevrati cu mana. Adaugati perhidrolul (6ml/l, 3%), amestecati bine si turnati mediul in vase Petri sterile.

Dr. Vidovic mentioneaza ca MBB fara agar este un mediu excelent de stocare. El numeste acest mediu MLBB (mediu lichid bazat pe bere). Ambele culturi de Oyster (Pleurotus ostreatus) si morels (speciile Morchella) s-au putut folosi si dupa doi ani de zile (fara adaos de  perhidrol). De asemenea acest mediu este indicat pentru germinarea din spori. 

Pornind de la Sporiintoarcere la meniu

Pornesc de la ideea ca toti cultivatorii doresc sa inceapa cu specii de ciuperci sanatoase. Aceasta se poate obtine de la furnizori de miceliu de ciuperci. Aceste culturi au fost testate si au dovedit ca au o productie de ciuperci buna in cazul in care se reproduc conditiile de crestere. Exceptand cazul in care in mod repetat cultura se deterioreaza, aceasta va produce cantitati de ciuperci insemnate in conditiile  cerute de cultura. Si in cazul in care pierdeti cultura, puteti (in cele mai multe cazuri) sa obtineti miceliul de la acelasi furnizor. Astfel  aceasta copie va produce ciupeci in aceleasi conditii pe care le-ati folosit si pana acum. Daca porniti de la spori, dimpotriva, nu aveti nici o  asigurare asupra faptului ca veti obtine cantitatea de ciuperci normala din cultura de miceliu pe care ati dezvoltat-o. De asemenea nu aveti  nici o asigurare ca ciupercile cultivate vor avea aceleasi caracteristici cu acelea a caror spori i-ati folosit. In plus, nu veti cunoaste conditiile  optime de crestere a miceliului obtinut din spori pana cand nu veti efectua cateva testari. Si daca veti pierde cultura, nu veti avea de unde sa porniti din nou.

Totusi exista si  pareri contrare. Culturi  obtinute din germinarea sporilor sunt de cele mai multe ori  mai viguroase. Cu specii  care se dezvolta rapid ca Oyster, diferenta dintre ciuperca mama si ciuperca obtinuta din sporii acesteia este, de cele mai multe ori, mica. Sporii  costa putin sau deloc, pe cand cand miceliul poate fi costisitor. Sporii pot fi obtinuti din ciuperci uscate pe cand miceliul nu. Si asa mai  departe. In mod cert merita sa aveti o metoda simpla de germinare din spori. 

In manualul I, am insistat asupra faptului ca sporii nu pot germina intr-un mediu cu perhidrol. Dar o seama de cultivatori mi-au scris ca au  germinat spori   in prezenta perhidrolului. Astfel  ca acum pot sa spun da, se poate. Va trebui sa aplicati  peste un milion de spori  pe suprafata mediului cu perhidrol, dar aceasta se poate. Totusi nu sunt convins ca aceasta idee este una buna pentru cazul in care aceasta devine o rutina. Miceliul obtinut pe aceasta cale poate fi foarte usor modificat genetic. Si asa cum va fi dovedit, nu este foarte dificil sa incepeti o cultura incepand de la spori in absenta perhidrolului, chiar in spatii nesterilizate. O metoda buna este sa incepeti cu spori in  eprubeta. Astfel sansele de contaminare prin aer este in mod substantial redusa comparativ cu vasele Petri.

Colectarea Sporilor

Iata o metoda de colectare a sporilor:

1) Sterilizati pentru 15min. vase Petri in oala sub presiune. Lasati-le sa se raceasca.2) Luati o ciuperca matura pentru colectarea sporilor. Daca este posibil, alegeti una curata care sa nu fie acoperita cu spori.

3) Curatati o suprafata in incaperea in care urmeaza sa lucrati, in care sa nu existe multi curenti de aer si alte persoane. Curatati suprafata cu un burete, apoi stergeti-o cu alcool.

4) Deschideti unul din vasele Petri (capacul il puneti cu fata in sus pe suprafata curatata). Aranjati ciuperca deasupra vasului. Daca este suficient de mare ea va acoperi intreaga suprafata a vasului. Ciupercile mici precum cele Morels, pot fi suspendate deasupra vasului printr-un fir. Folositi-va imaginatia. Ideal este ca ciuperca sa nu atinga partea interioara sau fundul vasului  Petri. Totodata, nu doriti ca interiorul vasului Petri sa fie expus contaminarilor din aer. Dar doriti ca ciupercile sa fie astfel dispuse incat sporii sa cada in vas.

5) Continuati sa colectati spori, ideal pana cand vedeti ca sporii apar ca un praf in vase. Aceasta duraza aproximativ o ora pentru ciupercile Oyster, care produc in mod copios spori. Dar veti avea nevoie de cateva ore pentru alte specii, si chiar si atunci nu  veti observa sporii in vas. Inchideti vasul Petri cand ati terminat. 

Germinarea Sporilor prin Metoda Disc  

27

Page 28:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Aici aveti metoda mea preferata de germinare a sporilor. Ea nu foloseste nici agar nici perhidrol. O sa colectati sporii pe un disc mic de  carton, apoi il veti introduce in eprubeta. Sporii vor germina in cateva picaturi de mediu nutritiv in eprubeta. Am folosit aceasta metoda cu succes pentru germinarea sporilor din shiitake, portabello, almond mushroom, elm oyster si Pleurotus. Iata cum veti proceda: 

1) Executati cateva gauri la intamplare intr-o bucata de carton de culoare gri. Faceti aceasta cu ajutorul perforatorului de hartie.2) Faceti aproximativ 10ml. de MLBB (fara agar)

3) Luati un set de eprubete cu capac.

4) In fiecare eprubeta puneti 5-10 picaturi de MLBB.

5) Sterilizati discurile de carton intr-un vas Petri sau intr-un vas cu capac (10min. la 15atm.).

6) In acelasi timp strilizati eprubetele care contin MLBB in ele. Eprubetele vor avea o cantitate mica de lichid pe fundul acestora dupa ce s-au racit.

7) Odata ce toate sunt sterilizate si racite, sterilizati in flacara o penseta. Utilizati-o pentru manevrarea discului de carton pe care colectati sporii (sau colectati sporii direct in vasul in care aveti discurile de carton).

8) Puneti fiecare disc pe care ati colectat spori in eprubetele sterile (utilizati flacara la gatul eprubetei cand deschideti si inchideti). Asigurati-va ca discul ajunge in mediul lichid de pe fundul eprubetei. Discul va trebui sa fie umed pentru ca sporii sa germineze. Insurubati capacul strans. Faceti cateva eprubete.

9) Va trebui sa va asigurati ca eprubetele nu se vor usca. Aceasta lucru este important pentru speciile care germineaza mai lent cum ar fi Shiitake sau Almond. Pentru aceste specii plasati eprubetele intr-un alt vas cu capac. In continuare adaugati un pic de apa in vas si puneti-i capacul. 

10) Incubati. Schimbati apa din vasul cu capac in cazul in care aceasta s-a deteriorat. 

11) Periodic  examinati  discurile  din eprubete pentru a  observa  semnele  de aparitie  a  miceliului.  Scoateti  eprubetele care  au mucegait sau in care s-au dezvoltat bacterii. (mucegaiul de culoare verde sau albastru-verde va creste repede in gramezi. Acestea sunt albe la inceput, apoi urmeaza sa se coloreze la mijloc. Bacterile vor face ca lichidul sa se tulbure.)

12) Odata ce ati obtinut ceva miceliu mutati discul intr-un vas Petri sau o eprubeta tratata cu perhidrol. Puteti sa faceti aceasta folosindu-va de o penseta sterilizata. 

13) Incubati si lasati ca miceliul sa se dezvolte. Cresterea va fi lenta, deoarece miceliul trebuie sa se adapteze la perhidrol.

Culoarea inchisa a discurilor de carton ajuta la punerea in evidenta a miceliului ce se dezvolta. Dar aveti grija ca miceliul uneori poate fi  observat destul de greu.

Intr-un vas tratat cu perhidrol, puteti observa haloul format de miceliul care se imprastie in momentul in care creste. Miceliul poate sa nu fie  omogen dispersat sau poate contine contaminanti. Daca este asa, haloul creat va avea portiuni cu cresteri deferite si cu infatisare diferita. Puteti lua miceliu din portiunile care arata cel mai bine si sa-l transferati in alte vase. Sectoarele de miceliu valabile au o crestere radiala  sau de forma unui sarpe. Miceliul care arata ca bumbacul (vata) ar trebui evitat (aceasta forma este normala pentru unele specii). Odata  ce ati obtinut miceliul in varianta corecta, fara sectoare, sunteti in masura sa cultivati miceliu si mai apoi sa-l utilizati in compost. Si nu uitati sa depozitati aceasta cultura!

Alte idei de obtinere a miceliului fara agarintoarcere la meniu   

Agarul este probabil cel mai costisitor ingredient folosit in cresterea ciupercilor. Este relativ usor sa-l utilizati odata ce v-ati obisnuit cu acesta. Dar multi dintre cei care doresc sa inceapa cultivarea ciupercilor ezita din cauza ca nu sunt familiarizati cu agarul. De aceea  m-am gandit la cateva alternative. Aici sugerez o varianta simpla care da rezultate si care este o alternativa la agar – discurile gri de carton.  Cortonul gri este ieftin si usor de gasit. (pot fi folosite si alte culori de carton). Atat timp cat acesta este curat, acesta nu va contine enzime care sa descompuna perhidrolul. Spre deosebire de cartonul presat cartonul gri se umezeste usor si materialul umed este suficient de usor de rupt in bucati pentru a fi transferat. Deasemenea este un substrat bun pentru dezvolaterea miceliului, oferind suportul pentru o crestere rapida chiar daca cantitatea de alti nutrienti este redusa. Si este un simplu fapt ca sa adaugati solutie nutritiva daca aceasta o considerati necesara.

Astfel, in loc sa treceti prin toate problemele in cazul folosirii agarului: masuratori si cantariri precise, dizolvarea si topirea agarului, racirea inceata, adaugarea perhidrolului, turnarea in vase, asteptarea pentru solidificarea acestuia, uscarea acestuia pe durata a mai multor zile, este mai usor sa taiati discuri de carton care sa se portiveasca in vasele Petri sau in borcane si sa preparati intr-un alt vas apa cu o solutie nutritiva. Apoi, fierbeti vasele sau borcanele in vasul sub presiune pentru 10 minute..Raciti rapid si adaugati perhidrolul. In final, inmuiati discul in solutia din vase pentru a avea protectia asigurata de perhidrol. Discurile de carton sunt pregatite sa fie utilizate imediat ce acestea s-au imbibat cu solutie.

Se pot folosi si cartoanele tiparite ca inlocuitor, dar acestea au cateva dezavantaje. Unul dintre ele este cazul in care acestea au o culoare deschisa, ca atare dezvoltarea miceliului este greu de observat. Dimensiunea miceliului poate avea marimea unui paianjen mic, care este 

28

Page 29:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

foarte greu de reperat  pe cartonul  deschis  la culoare.  Ca sa complicam si  mai  mult,  miceliul  poate  incepe sa se dezvolte  in masa  cartonului si mai putin la suprafata acestuia. In plus, de cele mai multe ori acesta nu se dezvolta intr-un halou frumos precum cel din mediul cu agar. Aparent dezvolatarea miceliului este influentata da variatiile si conditiile pe care acesta le intalneste in diferitele straturi ale cartonului.

Nu cunosc inca daca se poate face transferul direct doar pe cartoane, fara ca sa intram intr-o limitare a dezvoltarii din lipsa de nutrienti. In  mod normal ma astept ca acest carton sa nu mai aiba nevoie de solutii nutritive suplimentare. Pana la urmatoarea notificare, este o buna idee sa adaugati solutie nutritiva pe discurile de carton, pentru a mentine dezvoltarea miceliului.

Cum sa preparati discurile

Aici aveti pasii detaliati pentru prepararea discurilor de carton. Retineti ca puteti sa utilizati borcanele mici cu capac in locul vaselor Petri.

1) Masurati aprox. 250ml de apa de la robinet intr-un borcan mic. Folositi MLBB (descris anterior) daca doriti sa adaugati nutrieti.2) Cautati carton gri, cu cat mai gros cu atat mai bine, preferabil gri pe ambele fete. Trasati cu ajutorul unui creion si a vasului 

Petri  exteriorul acestuia. Taiati pe interiorul cercului astfel creat  la 2-3mm fata de contur pentru ca dimensiunea discul de carton rezultat sa incapa in vasul Petri.

3) Folositi un numar de vase Petri egal cu numarul de discuri taiate plus cel putin unul in plus.4) Umeziti discurile de carton usor: scufundati-le in apa de robinet si imediat scuturati-le. Apoi inchideti-le in interiorul vaselor 

Petri.5) Sterilizati in vasul sub persiune borcanul sau vasele Petri, inclusiv pe cel gol, pentru 10 minute la 15atm. (lasati ca apa sa 

fiarba timp de 10 minute inainte ca sa puneti capacul).6) Raciti vasul sub persiune, si scoateti vasele si borcanul cu solutia nutritiva.7) Cand solutia s-a racit   ,  adaugati 1,5ml de perhidrol 3%. Utilizati  o pipeta sterilizata in apa fierbinte.  In  final veti  obtine o 

concentratie de aprox. 0.018% de perhidrol in solutia nutritiva.8) Turnati putina solutie diluata de perhidrol  in vasul Petri care este gol. Acesta va fi folosit ca un rezervor pentru inmuierea 

discurilor de carton.9) Sterilizati  varful pensetei cu flacara. Folositi  penseta pentru mutarea rand pe rand a discurilor de carton in rezervorul  de 

inmuiere care contine solutia de perhidrol. Lasati ca acestea sa se imoaie bine in solutie. Apoi mutati-le din nou in vasele Petri din care au provenit.

10) Acum discurile/vasele sunt pregatite pentru a fi folosite. 

Puteti folosi pentru pastarea si incubarea acestora pungi de stocare a alimentelor asa cum am sugerat in volumul I. Dar probabil ca veti observa ca discurile de carton se usca rapid. Puteti sa le pastrati umede pentru o mai lunga perioada de timp daca le puneti intr-un container care are la fund solutie de perhidrol. De exemplu, cautati un  bocan prin gura caruia sa puteti sa introduceti usor vasele Petri. Folositi un inaltator care va mentine la distanta vasele Petri de solutia de perhidrol care urmeaza sa o turnati in borcan (concentratia  acesteia este tot 0,018% la fel cu cea din vasele Petri). In final, acoperiti gatul borcanului cu folia dintr-o punga de palstic pe care o legati  cu elastic pentru borcane (astfel  veti permite patrunderea unei cantitati  de oxigen adecvata pentru cultura). Aveti  grija ca sa umpleti  suficient borcanul cu vase Petri astfel incat sa nu fie posibila rasturnarea acestora in solutia de la fundul borcanului.

Efectuarea Transferurilor

Acum probabil ca va intrebati cum veti transfera bucati din discul de carton din vasele Petri in alte vase. Nu veti taia bucati din acesta, asa  ca iata cum veti proceda: puteti sa luati fragmente de la suprafata cartonului folosindu-va pentru aceasta de varful unui bisturiu. Doar zgariati de cateva ori cu bisturiul suprafata cartonului, fragmentele rezultate urmand a fi transferate in alt vas cu ajutorul bisturiului.

De pe cartoanele poroase, aceasta metoda se dovedeste a fi foarte grea de realizat pentru a obtine fragmentele necesare pentru transfer. 

Curatarea miceliului

Asa cum am explicat  in volumul  I si   la sectiunea eprubetei, contaminanti   invisibili  se pot dezvolta pe suprafata care urmeaza sa se dezvolte miceliul din vasele tratate cu perhidrol. Aceasta deoarece perhidrolul protejeaza mediul si nu miceliul. Contaminantii invisibili trebuie eliminati periodic. Altfel, acestia se vor multiplica in miceliu sau in compost. Miceliul crescut pe cartoane nu face exceptie.

In cazul culturilor pe agar, curatarea miceliului se face printr-o procedura penibila. Aceasta presupune dezlipirea agarului de pe fundul vasului si  rasturnarea lui  in capac,  inocularea fundului vasului si reintoarcerea agarului  in pozitia  initiala. Aceasta forteaza miceliul  sa creasca spre suprafata mediului, lasand contaminatii in urma lui. Chiar daca aceasta metoda da rezulatetele scontate, aceasta creste rata esecurilor datorita manevrelor dificile pe care trebuie sa le realizam.

In cazul discurilor de carton, este usor sa inoculam fundul acestora: doar resturnati vasul cu capul in jos. Astfel discul cade in capac si avem acces la fundul discului. Doar tranferati o mostra de miceliu cu ajutorul unui bisturiu pe suprafata discului care acum este expusa, inchideti si rasturnati din nou vasul. Atat! Dar este dovedit ca miceliului ii trebuie o perioada surprinzator de mare ca creasca prin disc. In loc ca aceasta sa se intample, el prefera sa se imprastie pe lateralele discului. Astfel ca in loc sa asteptam ca miceliul sa strabata spre suprafata, putem in mod simplu sa ii permitem acestuia sa se dezvolte la fundul discului. Atat timp cat acesta nu este deranjat, acesta va continua sa se dezvolte pe fundul discului. Aceasta metoda asigura o foarte mica expunere la contaminatii din aer. Aceasta, deasemenea va trebui sa mentina miceliul curat, mai ales daca discul sta aproape culcat pe fundul vasului. Daca va obisnuiti sa inoculati vasele pe aceasta cale, si materialul de transfer il luati de la marginea haloului pe care miceliu l-a creat, ma astept ca sa aveti foarte putine probleme cu acumularea de contaminanti invisibili.

Probabil ca veti intampina greutati in mentinerea discurilor pe fundul vaselor Petri. In acest caz, mai bine incercati sa creati un sandvici  format din doua discuri de carton umede cu solutie de perhidrol. Astfel puteti sa inoculati partea din interiorul sandviciului, dintre cele doua 

29

Page 30:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

discuri. Miceliul se va dezvolta in intregime in interiorul sandviciului, mentinandu-se liber de contaminantii din aer. Faptul ca suprafetele exterioare ale discurilor vor fi putin mai uscate decat cele din interior, va contribui la descurajarea imprastierii bacteriilor si a mucegaiului.  Astfel miceliu se va autocurata pe masura ce acesta se va raspandi catre marginile sandviciului.

Cand doriti sa ajungeti la miceliul protejat aflat in sandvici, cercetati portiuni mici de disc. Dar nu puteti sa vedeti cum s-a dezvoltat acesta fara ca sa desfaceti sandviciul. Asa ca fiti atent ca sa datati culturile. Astfel puteti fi sigur ca ati lasat suficient timp pentru ca miceliul sa se  dezvolte inainte ca sa desfaceti sandviciul.

Pastrarea culturilor fara agar

Pentru pastrarea pe termen lung a miceliului, prefer sa folosesc rumegus in eprubete cu capac. Iata cum procedez:

1) Puneti aprox. 28gr de rumegus intr-un vas sau cana.2) Adugati 25ml apa fierbinte peste rumegus.3) Puneti amestecul astfel creat in eprubete, cam pana la jumatatea acestora. Pentru aceasta puteti folosi o bucata de plastic 

moale pe care o potriviti la gatul eprubetei si cu ajutorul degetelor impingeti amestecul in interior.4) Puneti capacele la eprubete si sterilizatile timp de 10 minute. Raciti-le.5) Inoculati fiecare tub cu o bucatica de cultura din agar. Invartiti gura eprubetei in flacara cand o deschideti si o inchideti.6) Depozitati eprubetele inoculate intr-un loc rece (sau la temperatura camerei pentru speciile care se dezvolta in locurile calde).

Miceliul va coloniza lent substratul. Apoi, cand veti avea nevoie de o mostra proaspata, luati o eprubeta. Puteti sa luati o bucatica din substratul colonizat folosind un bisturiu. Apoi rasturanti-l in noul mediu. In final puneti capacul la eprubeta si depozitati-o la locul ei pentru o folosire ulterioara.

Am dispus doar de un timp limitat pentru a putea spune cat de bine se pastreaza culturile pe un timp mai indelungat. Dar presupun ca ele se mentin mai bine dacat culturile pe mediu agar. Fibrele lemnoase si cartonul sunt mai aproape de mediul natural in care cresc ciupercile  decat agarul. Si daca nu adaugati nici o alta solutie nutritiva, fibrele lemnoase vor scadea in valoarea lor nutritiva. Aceasta este in mod uzual recomandat pentru pastrarea culturilor. Aceste medii sunt mai aproape de faza de hibernare. In acelasi timp, unele specii, precum Oyster, nu se pastreaza bine in medii umede (apa distilata sau eprubeta). Aceste specii prefera mai degraba un mediu precum fibrele de hartie sau rumegusul, care au caracteristica de a fi mai putin umede. In plus, culturile pe fibre de hartie care rezista la rece, cum sunt  ciupercile Oyster, pot fi usor mentinute in stare inghetata.

Expedierea culturilor prin posta

Discurile de carton in varianta sandvici pot fi usor introduse in pungi cu autoinchidere, urmand sa fie trimise prin posta. Faceti un sandvici realizat din doua discuri de carton gri care le-ati sterilizat si umezit in solutie de perhidrol. (Fata lucioasa a discurilor va fi dispusa pe exteriorul sandviciului. Aceasta ajuta la pastrarea umezelii dintre discuri si la evitarea patrunderii eventualilor contaminati pe care i-ati impachetat). Apoi cu o penseta, introduceti sandviciul in cea mai mica punga cu fermoar pe care o gasiti. Inchideti-o si lasati ca miceliul sa se dezvolte pe durata a catorva zile.   (Atentie!  Sanndviciul  se poate usca  repede. Pentu a preveni  acest   lucru puneti  punga  intr-un container – recipientul in care a fost iaurt  - in care ati introdus ceva apa (punga nu va atinge apa), inchideti-l cu capac. Schimbati apa in cazul in care aceasta s-a deteriorat.) in loc de pungile cu fermoar puteti folosi o punga obisnuita pe care o sigilati cu scotch dupa ce ati  introdus sandviciul in ea. In final expediati cultura prin posta. Acest recipient, la celalalt capat va trebui sa fie transferat intr-un vas nou. Pentru a face acest lucru, el sau ea va trebuie sa scoata din interiorul sandviciului miceliul care a fost protejat pana acum, intr-un vas Petri steril (cu ajutorul unei pensete).

Metoda de expediere in plicuri normale este valabila doar pentru speciile care tolereaza bine temperaturile scazute din depozitul unui avion. Miceliul speciilor care trebuie mentinute la caldura (ex Agaricus Subrufescens) trebuie sa fie impachetate intr-un plic special care sa izoleze termic interiorul acestuia de exterior.

Re-sterilizarea cu ajutorul perhidrolului a vaselor Petri disponibilizate   intoarcere la meniu   

Iata o metoda de sterilizare a vaselor Petri confectionate din plastic. Bineinteles ca si alte containere pot fi sterilizate la fel.

1) Spalati fiecare vas, avand grija sa indepartati agarul vechi. Clatiti-le.2) Turnati putin perhidrol de 3% si intindeti-l pe intreaga suprafata a vasului.

3) Plasati vasele intr-un cuptor cu microunde si incalziti pana solutia de perhidrol se evapora din vase. Reglarea cantitatii  de caldura pe care faceti aceasta operatie nu are prea multa importanta.

Astfel vasele petri sunt sterilizate si pregatite pentru urmatorul mediu.

Unul din corespondenti, a subliniat faptul ca simpla incalzire in cuptorul cu microunde este suficienta pentru sterilizarea vaselor Petri. Ca raspuns, am precizat la randul meu, faptul ca simpla utilizare aperhirolului este suficienta pentru sterilizarea vaselor la fel de bine (si asta este mai favorabil pentru cazul in care nu dispuneti de un cuptor cu micrunde). Cele doua metode combinate asigura o securitate sporita a  sterilizarii.

Prepararea miceliuluiintoarcere la meniu   

30

Page 31:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Miceliu in pungi de plastic – “Miceliu in 8 minute”intoarcere la meniu

In Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla, am prezentat o procedura de preparare a rumegusului folosind ca si containare borcane de sticla cu capac. Aceasta este in continuare metoda mea preferata de producere a miceliului. Dar am testat diferita variante bazate pe aceasta metoda care sa fie adaptabile diferitelor situatii.

De exemplu, presupunand ca nu aveti o stiva de borcane, dar aveti pungi de plastic normale in care stocati alimentele, le puteti folosi ca si containare pentru miceliu. De fapt acestea confera o seama de avantaje fata de borcanele de sticla: 

Nu trebuie sa folositi fibra de hartie in reteta. Simplifica procesul de  formare a miceliului,  miceliul  este mult  mai   faramitat.  Aceasta  faramitare o  faceti  prin manipularea 

pungilor. Schimbul de aer are loc mult mai bine in pungile de plastic. (Oxigenul poate intra direct prin plastic, dar nu prin sticla) Acesta se 

pare ca duce la micsorarea timpului de obtinere a miceliului. Materialul din pungi se incalzeste si se raceste mult mai repede decat in borcane. Pungile permit mirosirea directa a miceliului fara a fi necesara deschiderea containarelor. Aroma lui strabate prin punga de 

plastic. Aceasta va permite sa verificati puritatea miceliului fara a mai fi nevoie sa va uitati la el. Contaminarea cu bacterii si prezenta mucegaiului este usor de sesizat prin pungile de plastic. 

Reduce costurile financiare.

Pe de alta parte, pungile sunt nedegradabile (oricum acestea pot fi spalate si reutilizate). Pungile pot fi perforate usor fara a sesiza acest lucru. Si nu sunt convenabile pentru cazul cand doriti sa inlaturati doar o portiune din miceliu (in borcane puteti sa dati jos capacul, sa rasturnati o parte din miceliu in alt container, dupa care sa puneti capacul la loc). Pentru   acest din urma motiv, folosesc in continuare borcanele pentru miceliul de baza. 

Producerea miceliului 

Iata o reteta pentru prepararea miceliului  in 6 pungi mici cu metoda  “Miceliu  in 8 minute” (fiecare dintre pungi este suficienta pentru inocularea unei galeti de 20l cu rumegus preparat sau a unei cantitati de 2,2-3,2 kg. de substanta uscata)

625gr. rumegus (sau alte materiale compatibile cu specia de ciuperci)45-60ml. supliment nutritional (vezi Volumul I pentru optiuni)11,5gr.  carbonat de calciu (piatra de var)5,7gr.  gips (sulfat de calciu)990ml. apa de robinet fierbinte110ml. perhidrol 3%

1) Masurati rumegusul intr-o galeata sau vas. Adaugati ingredientele lichide si lasati ca apa sa fie absorbita.2) Adaugati ingredientele ramase si amestecati folosind o lingura sau spatula.

3) Masurati 250-290gr. (aproximativ 2.75 cani) din substratul rezultat si mutatile in 6 pungi de plastic curate. Rasuciti gatul pungilor pentru o inchidere cat mai perfecta.

4) Incalziti aproximativ 8 cm. de apa intr-un vas larg. Legati gaturile tuturor pungilor impreuna si introduceti-le pe toate odata in apa care fierbe.

5) Puneti capac si fierbeti pentru 8min.

6) Scoateti imediat pungile si lasati-le sa pluteasca intr-un vas mare cu apa rece. Aveti grija ca gaturile pungilor sa nu ajunga in apa.

7) Cand pungile s-au racit suficient scoateti-le din apa. Legati gaturile rasucite ale pungilor cam la 2,5cm. de la nivelul materialului din punga.

8) Cand pungile s-au racit complet acestea sunt gata pentru inoculare.

Folosirea miceliului

Pentru utilizarea pungilor cu miceliu, inainte cu o zi de a inocula compostul, maruntiti miceliul. Puteti face asta prin manipularea pungii, astfel incat bucatile mari sa fie maruntite in altele mai mici, iar acestea la randul lor in altele si mai mici. Aveti grija sa nu perforati punga cu unghiile sau prin rasucirea pungii. In urmatoarea zi sunteti gata sa mutati miceliul din aceste pungi. Retineti ca gaturile acestor pungi nu  sunt sterile in portiunea superioara a locului unde l-ati legat (puteti evita contacul miceliului cu suprafata nesterila prin rasucirea pungii peste exteriorul acesteia).  

Miceliu pe seminte "In Zece Minute"intoarcere la meniu

Iata aici o metoda de preparare a miceliului pe seminte fara a utiliza vase sub presiune: folositi boabe de orez nedecorticat si netratat. Doar adaugati apa, gips si  perhidrol peste orez si   fierbeti-l   intr-un borcan sau punga de plastic. Raciti-l,  acesta  fiind pregatit  pentru inoculare. Ideea acestei proceduri mi-a parvenit prin bunavointa lui René Rikkelman. 

31

Page 32:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

1) Folositi un set de borcane sau pungi de plastic noi.2) Pentru borcane trasati gatul capacului pe o bucata de carton. Taiati putin in interiorul acestei trasari. Potriviti discul in interiorul 

capacului.  Mai   tarziu   veti   umezi   aceste   discuri   cu   perhidrol,   astfel   incat   acestea   vor   avea   rolul   unei   bariere   impotriva contaminatorilor.

3) Cumparati o cantitate de boabe de orez nedecorticate de la magazin (Uncle Bens, Krafts). Orezul normal nu poate fi folosit din cauza enzimelor pe care le cuprinde. Boabele de orez instant albe nu pot fi folosite din cauza ca nu contin destule elemente  nutritive.

4) Puneti boabele de orez intr-un castron mare. Adaugati gipsul, aproximati 1gr. pentru fiecare cana cu orez.5) Intr-un vas inalt (cutia de mingi de tenis) masurati astfel inact sa obtineti la un volum de apa fierbinte doua volume de orez.  

Adaugati suficient perhidrol astfel incat concentratia finala sa fie de 0,3-0,35% (aproximativ 0,1 din volumul rezultat).6) Adaugati  apa  in  castron.  Amestecati  orezul  cu ajutorul  unei   linguri.  Marea majoritate a  lichidului  va  fi  absorbita  de orez.  

Amestecati in continuare astfel incat aceasta sa fie distribuita uniform.7) Cand absorbtia apei s-a terminat  impartiti  masa rezultata in borcane sau pungi. Umpleti  borcane cam doua treimi. Gauriti 

capacele cu discurile de carton mentinandu-le cat mai aproape de capac.8) In cazul pungilor sariti direct la pasul 12 de mai jos. Pentru borcane adaugati aproximativ 2cm. de apa intr-un vas mare. Vasul  

va trebiu sa aiba un gratar astfel incat sa se evite asezarea directa a borcanelor pe fundul acestuia. Puneti borcanele cu tot cu capac fara ca acestea sa fie stranse la maxim.

9) Aduceti apa din vas la temperatura de fierbere. Cand aceasta incepe sa fiarba consistent fierbeti pentru inca10min. Scoateti imediat borcanele din vas pe o suprafata rezistenta la caldura. (ATENTIE – aburii din vas pot produce arsuri si borcanele sunt fierbinti. Folosirea manusilor de bucatarie este o solutie pentru manevrarea in aceasta faza.)

10) Aveti rabdare pana borcanele s-au racit suficient.11) Deschideti fiecare borcan si adaugati solutie de perhidrol 3% pe discutile de carton din capace acestora pana cand acestea s-

au umezit complet. Scuturati-le de orice exces de perhidrol.12) Pentru pungile de plastic puneti cam 10cm. de apa in vas pe care o duceti la punctul de fierbere. Puneti pungile de plastic cu 

orez in vas astfel incat acestea sa pluteasca (folositi manusile de bucatarie ca sa evitati sa va opariti). Asigurati-va ca gaturile  pungilor nu vor ajunge in apa. Puneti capacul si fierbeti-le pentru doar 8min.

13) Scoateti pungile intr-un vas mai mare cu apa in care aveti apa rece pentru o racire rapida. Sigilati-le prin rasucirea gatului pungii cand acestea s-au racit.

Inocularea substratului din paie fara a folosi miceliuintoarcere la meniu

Iata aici un truc pentru cultivatorii de ciuperci Oyster pentru cazul in care acestia nu mai doresc sa mai prepare miceliu. Sau poate doriti sa incercati ceva diferit: inocularea paielor cu ciuperci maruntite. Am vazut ca aceasta sa functioneze doar cu aceste ciuperci. Si aceasta functioneaza foarte bine in cazul in care ciupercile pe care le folositi sunt foarte tinere. Acestea nu trebuie sa fie formate complet, cam la dimensiunea de 2,5-5cm. In aceasta faza tesatura ciupercii se dezvolta rapid. Daca aceste ciuperci tinere sunt maruntite si amestecate cu paiele, vor imprastia miceliu in masa acestora in doar doua zile. Iata cum veti proceda:

1) Preparati o gramada de paie la temperatura camerei folosind metoda cu perhidrol prezentata mai tarziu in acest volum.2) Culegeti o ciorchina de ciuperci Oyster.

3) Scufundati ciorchina in apa calda cu sapun pentru a le curati, apoi scuturati-le de lichid.

4) Plasati ciorchina pe o bucata de hartie ceruita sau pe a alta suprafata curata.

5) Utilizand un cutit curat, maruntiti ciupercile (o dimensionare exacta a maruntirii acestora nu are importanta). Tineti ciorchina de baza acesteia. Incercati sa nu atingeti palariile ciupercilor cu mainile.

6) Imprastiati ciupercile maruntite in paiele preparate. Folositi-va de manusi de unica folosinta pentru a face aceasta cat mai bine.

7) Incubati paiele asa cum ati face cu o cultura normala.

Note legate de pasii procesului:

2) Nu am o formula precisa pentru necesarul de ciuperci care trebuie folosit. Acesta depinde de cat de fin maruntiti ciupercile. Dar puteti incerca pornind de la aproximativ 15% ciuperci din masa uscata de paie.

3) Scufundarea in baia cu sapun previne transferul de corpuri straine sau insecte. Probabil ca aceasta reduce si contaminarea cu bacterii si mucegai.

5)-6) Este de asemenea posibil sa utilizati un mixer pentru maruntirea ciupercilor si aceasta este o idee buna in cazul  in care exista posibilitatea ca ciupercile sa contina larve. Curatati ciupercile si mixerul trecandu-le prin apa fierbinte cu sapun. Nu recomand mixarea acestora pana cand acestea ajung sa fie mai mult lichide – apa care va fi obtinuta astfel va trebui sa fie lasata sa se scurga din paie dupa  inoculare.

Prin  repetarea acestei  metode  la   infinit  se produce deteriorarea culturii  de ciuperci? Am  formulat  aceasta  intrebare deoarece exista mentalitatea ca aceasta metoda duce la saracirea calitatii culturilor de ciuperci. Este clar ca culturile de ciuperci pot fi mentinute pentru transfer ani de zile pe un mediul de calitate. Acestea vor trebui pastrate intr-un loc care sa evite acumularea de boli toxice. Pot fi usor incalzite pana la evitarea caramelizarii mediului.

32

Page 33:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Oricum, fara a sti cu certitudine, cred ca imbatranirea nu poate fi o problema care poate sa apara pentru cel putin cativa ani. O parte dintre cele mai mari organisme de pe pamant sunt ciupercile care acopera vaste suprafete de teren; aceste organisme trebuindu-le foarte multi ani pentru ca sa ajunga la dimensiunea actuala. Asa ca este foarte posibil ca si ciupercile sa aiba varsta, durata de viata a  acestora find  egala cu cea a oamenilor, daca nu mai mare.

Prepararea Compostuluiintoarcere la meniu   Compost I: Prepararea paielor cu perhidrol – la temperatura camereiintoarcere la meniu

Acum ajungem la o metoda de utilizare a perhidrolului, la prepararea paielor folosite ca si compost pentru ciuperci. Aceasta metoda poate fi atractiva pentru ambele tipuri de cultivatori: casnici si comerciali. Procedura prezentata poate fi efectuata in intregime la temperatura camerei, fara pasii de incalzire si racire, si fara a fi necesar sa utilizam solutii caustice. Aceasta face ca prepararea substratului sa fie foarte usoara si convenabila. Nu este necesar sa dispuneti de utilaje mari pentru incalzirea apei sau a substratului. De asemenea nu apar probleme de supra pasteurizare si nici griji legate de viteza de racire. Si de asemenea nu se pune problema de a inregistra pierderi in producerea compostului. Este doar “ceaiul “ natural produs in mod normal prin imbibarea paielor cu apa.

Aceasta procedura a fost dezvoltata pentru paie dar este posibil sa preparati prin aceasta metoda si alte substraturi care se imbiba in apa. Acestea includ iarba, iarba uscata si panusi de porumb. Materialele de acest gen sunt disponibile in cele mai mult parti ale globului. De asemenea, mi s-a spus ca si cojile bumbacului pot fi preparate prin aceasta procedura. Astfel ca doar materialele neporoase nu vor putea fi folosite. (Talajul obtinut din prelucrarea lemnului se prepara printr-o metoda putin diferita de aceasta – vezi mai jos).

Am testat aceasta procedura pe elm oyster (H. ulmarius) si pe   almond mushroom (Agaricus subrufescens). Specii similare de ciuperci traditionale precum oyster (Pleurotus species), Portobellos, Champignon si Royal Sun Agaricus (Agaricus blazei) ar trebui sa creasca la fel de bine pe compost de paie preparat prin aceasta metoda. Mai mult decat un semn de intrebare sunt ciupercile shiitake. Acestea cresc in mod normal pe paie cu un supliment nutritiv, eu nefolosind suplimente pentru cresterea ciupercilor elm oyster si almond mushroom.

Ce se intampla cu enzimele?

Trebuie sa recunosc ca pana acum am argumentat faptul ca pasteurizarea cu perhidrol nu functioneza in cazul paielor. Am sustinut aceasta deoarece paiele contin un nivel ridicat de enzime care descompun perhidrolul (asa cum fac si alte substraturi similare). Aceste enzime ar   trebui   sa  distruga  perhidrolul   intr-un   timp scurt.  Acestea  ar  proteja  si  numerosii  spori  de  mucegai  din  paie  de  actiunea  perhidrolului. Dar s-a dovedit fara indoiala ca paiele pot fi pasteurizate cu perhidrol. Da, enzimele din paie intr-adevar distrug perhidrolul intr-un scurt timp. Dar perhidrolul se dovedeste a avea un efect benefic in continuare chiar daca acesta a supravietuit doar putin in urma  contactului cu paiele. Nu trebuie decat sa marim concentratia de perhidrol (comparativ cu cea folosita la prepararea rumegusului). Si va trebui   sa  marim  concentratia   solutiei  de  perhidrol   folosindu-ne  de  notiunile  de   chimie.  Perhidrolul   in   sine   nu  protejeaza  paiele   de contaminare, asa cum se intampla cu enzimele libere din rumegus. Dar paiele tratate cu perhidrol se pare ca rezista contaminatorilor, chiar si dupa ce perhidrolul a disparut. Si se pare ca acesta transforma substratul intr-un mediu mai favorabil pentru dezvoltarea miceliului.

Procedura

In ciuda acestei prefate complicate, procedura de preparare a paielor cu perhidrol este extrem de simpla. Se intampla cam asa:

1) Plasati paiele intr-un vas mare2) Umpleti vasul cu o cantitate de solutie rece pana la imersarea paielor (vezi mai jos).

3) Pentru paiele zdrobite, imersarea in solutie dureaza aproximativ 4 ore la temperatula camerei. Pentru paie nezdrobite, imersare dureaza cel putin 28 de ore, sau pana cand solutia capata culoarea unui ceai concentrat.

4) Scurgeti paiele pana in momentul cand din acestea nu mai picura apa.

5) Mutati paiele in containerele de cultura amestecandu-le cu miceliu pe masura umplerii acestora.

Note la prepararea paielor

1) Daca vasul in care ati pus paiele are un capac greu sau care se inchide etans, atunci este bine ca acesta sa fie folosit pentru imersarea paielor in solutie.

2) Cea mai eficienta solutie pe care am gasit-o pana in momentul de fata contine perhidrol in concentratie de minimum 0,15%. Aceasta este combinata cu 10ml.  de otet  de mere pe litru de solutie.  Concentratii  mai  mari  de otet nu au dat rezultate.  

Suficient de curios, o alternativa care s-a dovedit aproape la fel de eficienta este perhidrol amestecat cu hidroxid calciu (apa de  var Ca(OH)2). Dar, aici veti folosi mult mai putina apa de var decat ati folosit in cazul in care ati folosi pentru pasteurizare doar apa de var. Ultimele variante de solutii foloseau atat de multa apa de var incat acesta creea probleme in momentul in care se dorea scurgerea solutiei de pe paie. Dar acum veti adauga doar atat de multa apa de var astfel incat sa cresteti pH-ul un pic in timp ce perhidrolul reactioneaza cu paiele. Veti folosi doar 7-9,5ml. apa de var la 3,8l de solutie cu perhidrol de 0,15%. (sau 0,4-0,5gr de hidroxid de calciu la 1l de solutie). Concentratii mai mari de hidroxid de calciu nu vor functiona.

33

Page 34:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Recomand alternativa  de   folosire  a  apei  de  var  doar  pentru  substraturile   care   in  mod natural   sunt  acide.  De  ex.  Cojile bumbacului pot fi tratate cu aceasta, dar nu cu alternativa cu otet de mere. (Michael Joy,  comunicare personala).

Iata cum puteti sa calculati cantitatea de perhidrol de care aveti nevoie. Solutia va trebui sa ajunga la o concentratie de 0,15% asa ca impartiti la 0,15 la concentratia de pe sticla de perhidrol. Apoi inmultiti catul cu volumul de apa pe care il veti folosi. De exemplu sa presupunem ca doriti sa faceti 100l de apa cu o concentratie de 0,15% de perhidrol, si ca stocul dvs de perhidrol  ara concentratia de 6%. Atunci 0,15 deimpartit la 6 da rezulatatul 0,025. Inmultind acest rezultat cu 100l obtineti 2,5l. Aceasta este cantitatea de perhidrol cu concentratie de 6% pe care va trebui sa o adaugati in cei 100l de apa pentru ca in final sa aveti  o concentratie de 0,15%. (ca sa fim mai exacti, veti adauga 2,5l la 97,5l de apa. Astfel veti obtine 100l. Oricum veti proceda veti fi suficient de aproape de concentratia dorita.)

Solutiile pot fi preparate cu apa rece de la robinet. Dar cele mai bune rezultate se obtin cand temperatura apei este aproape de cea a camerei.

3) Recomand zdrobirea si maruntirea paielor. Aceasta duce la obsorbtia apei mult mai usor de catre acestea. Particulele de dimensiune mica vor incuraja dezvoltarea miceliului mult mai repede dupa inoculare.

Umezirea paielor se produce mult mai repede in climate calde si mult mai lent in cele reci. Ajustati-va timpul pentru inmuiere si in functie de temperatura ambianta.

4) Durata cat va trebui sa scurgeti paiele de solutie depinde de cantitatea de paie pe care o utilizati. Probabil ca minimum 2 ore va fi necesar.

5) Paiele pot fi amestecate cu miceliu si incarcate in saci de plastic care se pot, de exemplu, dispune in coloane. Daca ati folosit gips, acesta poate fi amestecat in aceasta faza.

Nu   recomand   adaugarea   de   suplimenti   nutritivi,   deoarece   taratele   care   sunt   cel  mai   des   folosite   ca   supliment   nutritiv   vor   invita  contaminantii. In cazul in care trebuie sa folositi suplimenti, sugerez utilizarea unora care se apropie de caracteristicile paielor. Unul dintre acestea este alfalfa (lucerna), care poate fi dizolvat in solutia cu perhidrol din paie.

Compost II: Prepararea talajului din lemn neuscat cu perhidrolintoarcere la meniu

Unele specii de ciuperci au fost cultivate traditional in natura folosind ca substrat talajul. In mod normal talajul este preparat simplu prin mentinerea lui in apa pana cand acesta s-a umezit. Cultivatorii au mentionat ca de multe ori au crescut buruieni pe acesta. Deasemenea,  speciile inoculate au terminat prin a fructifica in afara suportului de germinare. Astfel incat este nevoie de o cale sigura de preparare a talajului.

Am observat ca talajul rezultat din lemnnul neuscat poate fi preparat cu ajutorul perhidrolului, contrar continutului sau ridicat de enzime care descompun perhidrolul. Dar procedura care a rezultat pentru acest talaj duce la o colonizare a lui usor mai lenta. Pentru rezutate crescute, recomand urmatoarea metoda:

1) Imbibati in apa talajul peste noapte astfel inact acesta sa fie umed.2) Scurgeti-l de surplusul de apa.

3) Acoperiti talajul cu solutie de perhidrol de 1% sau mai mare.

4) Inoculati-l cu miceliu.

Talajul poate fi acoperit cu perhidrol folosindu-va de un recipient cu dispozitiv tip spray, cu ajutorul caruia aplicati perhidrolul intr-un strat fin  peste talaj in timp ce il amestecati. Datorita faptului ca concentratia de perhidrol este mare, doar o mica cantitate din el se va utiliza prin  aceasta metoda.

Talajul poate fi inoculat imediat cu miceliu daca acesta a fost crescut pe un mediu cu perhidrol. Altfel, ar fi bine sa lasati talajul o perioada de timp pentru ca perhidrolul sa se “linisteasca” pe masura ce acesta intra in reactie cu enzimele din talaj.

Talajului i se poate adauga un supliment nutritiv (lapte praf), acesta primind acelasi tratament odata cu talajul.

Aceasta procedura funtcioneza bine cu ciupercile oyster. Ar trebui sa mearga bine si cu King Stropharia (Stropharia rugosa-annulata), pe care cultivatorii de ciupercile le cresc in natura folosind talaj cu apa plata. Dar, retineti, ca dupa colonizarea talajului Stropharia are nevoie pentru fructificare de un strat de pamant dispus deasupra talajului. 

Compost III: O metoda de “pune-si-amesteca” pentru substraturile compatibile cu perhidrolul intoarcere la meniu

Urmatoarea procedura va permite sa preparati la temperatura camerei substraturile pentru ciupercile care consuma lemn, intr-un singur pas. Contrar metodelor anterioare de pregatire a compostului din paie sau talaj, aceasta procedura NECESITA sa porniti cu materiale care nu contin enzime care sa distruga perhidrolul. Perhidrolul pe care-l veti adauga va ramane in substrat si-l va proteja de contaminantii care apar in aer. Astfel incat nu mai este necesar sa faceti filtrarea aerului sau sa folositi incaperi sterile. Substratul rezultant nu va contine 

34

Page 35:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

contaminanti liberi, permitand cresterea ciupercilor care descompun lemnul. Desigur, va trebui sa mai adaugati aditivi in substratul lemnos pe care il alegeti, precum si sa asigurati conditiile de crestere normale a ciupercilor.

In primul volum Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla, am prezentat o metoda de preparare a rumegusului care a fost uscat in cuptoare. Acea procedura presupunea ca in primul pas sa adaugati apa fierbinte peste rumegus. Aceasta servea atat la pasteurizarea rumegusului cat si umezirea rapida a acestuia. Solutia de perhidrol se adauga in momentul in care substratul era rece si avea rolul de protectie impotriva contaminantilor. Aceasta procedura era suficient de simpla pentru cultivatorii casnici. Dar aceasta necesita doi pasi: adaugarea   solutiei,   deci   incalzirea   si   racirea   acesteia,   ceea   ce   poate   deveni   frustrant   in   cazul   unei   culturi   la   scara   comerciala. Deasemenea, pasteurizarea prin adaugarea apei fierbinti  nu functioneaza atat de bine in cazul  in care folositi rumegus rezultat de la lemnul uscat in cuptoare.

Aceasta noua procedura evita frustrarea produsa de procedura anterioara prin utilizarea unei cantitati de perhidrol de 10 ori mai mare. La acest nivel, perhidrolul produce pasteurizarea substratului, si o face la temperatura camerei. Asta inseamna ca nu mai trebuie sa incalziti  si sa raciti. Inseamna, deasemenea, ca puteti sa adaugati perhidrolul odata cu apa intr-un singur pas. Mai mult, puteti sa adaugati restul  substantelor aditive deodata cu perhidrolul (var, gips, sau alte suplimente nutritive compatibile cu perhidrolul). Aceasta face ca aceasta procedura sa se numeasca “pune-si-amesteca”, ea creand substratul necesar pentru cresterea ciupercilor. Este la fel de usor ca si cum ati  face clatite dintr-un amestec  - va trebui sa asteptati ca perhidrolul sa pasteurizeze substratul. Este, fara doar si poate, una dintre cele mai  simple metode de preparare a rumegusului dezvoltata pana la ora actuala.

Ca substrat puteti   folosi orice produse derivate din lemn care sunt compatibile cu perhidrolul, cum ar fi:  caramizi pentru incalzire de rumegus, fibra de hartie. De asemenea am avut succes preparand paiele prin aceasta metoda pentru cresterea ciupercilor elm oyster in pofida numarului mare de enzime de descompunere a perhidrolului prezente in acestea. Trebuie doar sa fiti siguri ca materialul folosit ca substrat este compatibil cu specia de ciuperci pe care urmeaza sa o cultivati.

Cateva cuvinte despre rumegusul uscat in cuptoare

In zona in care eu locuiesc, a Pacificului de nord-vest, sunt disponibile o seama intreaga de produse care au la baza rumegusul. Este vorba despre rumegusul care provine din procesarea lemnului care a fost uscat in cuptoare. Acesta poate fi gasit la diferite fabrici care utilizeaza acest  produs  pentru   realizarea de parchet,  panouri,  mobila  si  altele.  Prin  contrast,   rumegusul  umed provine  de   la  gater.  Rumegusul provenit din uscarea in cuptoare a lemnului este in general mai ieftin decat caramizile pentru incalzire din rumegus. Acesta din urma are o mica cantitate de enzime care descompun perhidrolul. Acest nivel al enzimelor il face compatibil cu cresterea ciupercilor prin  metoda “pune-si-amesteca”. Da, ciupercile Oytser cresc repede si sunt relativ rezistente la contaminanti. Dar alte specii precum Shiitake si  Lions’ Mane, care cresc mai incet si sunt mai sensibile la contaminanti, au mai putine sanse sa fie crescute pe acest substrat.

Cum ati putea sa stiti ca rumegusul pe care il aveti provine din lemnul uscat in cuptoare? Puneti o cantitate mica de perhidrol 3% si un pic de detergent. Daca nu apare decat o mica reactie produsa dupa aproximativ 10min., mostra dumneavoastra de rumegus a provenit din lemn uscat in cuptoare, si trebuie sa fie compatibil ca substrat de crestere a ciupercilor Oyster prim metoda “pune-si-amesteca”.

Acest rumegus este de multe ori prea fin si usor ca sa poata fi pasteurizat cu o cantitate mica de apa fiarta, asa cum am aratat in metoda  din volumul I. Dar este mult mai rezonabil si mai usor sa acoperiti rumegusul folosind solutia de perhidrol pentru pasteurizare descrisa in procedura “pune-si-amesteca” descrisa mai jos:

Procedura “pune-si-amesteca”

Aici aveti descrisa procedura de prepare a rumegusului la temperatura camerei. Rumegusul uscat in cuptoare poate fi preparat in mod similar pe aceasta cale, dar va absorbi mai multa apa si se va umfla mai mult in containerul pe care il folositi:

1) Spalati si clatiti containerul (clatirea nu necesita apa calda).2) Masurati varul sau alte suplimente nutritive compatibile cu perhidrolul, si gipsul daca folositi (vezi volumul I pentru determinare 

cantitatilor necesare).

3) Masurati rumegusul in container.

4) Intr-un alt container puneti aproximativ 6,2 l de apa pentru fiecare 10kg. de rumegus (vezi notele de mai jos). Temperatura apei trebuie sa fie cel putin egala cu temperatura camerei (20C) sau poate fi incalzita pana cand ea poate atinsa cu mana. Aceasta va ajuta pentru rumegusul din lemn dens, cum ar fi stejarul. Ca si in precedentele proceduri, apa trebuie sa nu contina particule vizibile. 

5) Adaugati perhidrol astfel incat concentratia acestuia in apa sa fie de aproximativ 0,14%.

6) Unele tipuri de rumegus, cum este cel din stejar se umezesc mai greu. Pentru acestea adaugati o lingurita de bicarbonat de sodiu pentru fiecare 6,2 l de solutie de perhidrol.

7) Dupa amestecarea bicarbonatului  in solutia cu perhidrol,  turnati  solutia peste rumegus. Apoi adaugati restul de ingrediente uscate. Procedati   in acest mod pentru a evita ca ingredientele uscate sa se depuna pe fundul containerului cu solutie de perhidrol.

8) Inchideti cu capacul si lasati ca rumegusul sa absoarba apa (aproximativ 10-15min.).

35

Page 36:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

9) Amestecati substratul prin rotirea containerului.

10) Lasati substratul in containerul inchis pentru cel putin 2 ore.

11) Amestecati substratul din nou prin rotire.

12) Inoculati substratul si impartiti-l in pungi.

Note la procedura “pune-si-amesteca “:

Ca intotdeauna este bine sa folositi rumegusul pe care ciupercile obisnuiesc sa creasca. In general evitati sa folsiti rumegus provenit din conifere (brad, pin).

In volumul I am sugerat cateva variante pe care puteti sa le folositi ca suplimente nutritive. In general acestea sunt costisitoare si greu de gasit. Dar acum am descoperit ca este posibil sa utilizati cateva materiale uzuale “naturale” – cel putin pentru cresterea ciupercilor elm oyster prin metoda “pune-si-amesteca”. Unul din aceste materiale sunt taratele de ovaz. Acestea contin aproximativ 2,5% nitrogen (ar trebui sa mearga si taratele de grau care contine aproximativ 2% nitrogen). chiar daca exista enzime in aceste materiale, acestea nu vor duce la deteriorarea culturii de ciuperci elm oyster. Din pacate in cazul ciupercilor lions’ mane nu a dat rezultate.

De asemenea mai  exista  o  metoda de  crestere a  evicientei  suplimentelor:  acoperiti-le  cu  o mica  cantitate  de ulei  vegetal.  Miceliul  ciupercilor de-abia asteapta sa consume uleiul.

Probabil ca va trebiu sa faceti cateva experimente pana veti ajunge la cantitatea de apa pe o veti adauga. Aceasta variaza in functie de tipul materialului folosit ca substrat si in functie de tipul lemnului. In cazul rumegusului puteti folosi in principiu cantitati egale in greutate de apa si rumegus. Pentru caramizi de rumegus s-a dovedit ca aveti nevoie de mai multa apa. Veti dori sa adaugati apa suficienta pentru ca aceste caramizi sa se dizolve. Materialul ramas la fundul containerelor (cand puneti substratul in pungi) probabil ca veti observa ca acesta nu este suficient de umed. Rumegusul din lemn usor va absorbi probabil mai multa apa decat cel din lemn dens.

Unele materiale folosite ca substrat, cum este rumegusul uscat  in cuptoare, s-ar putea sa nu se umezeasca. In aceasta situatie puteti sa  adaugati o cantitate de detergent bio-degradabil pentru a grabi absorbtia apei. De exemplu am folosit un sfert de lingurilta de detergent la 6l de apa sau 2,5ml. la 6,2l apa.

Concentratia ridicata de perhidrol folosita in aceasta procedura se apropie mai mult de concentratia solutilor de perhidrol pe care le gasiti  la farmacii. Am utilizat 1/3 cana (80ml.) de perhidrol pentru bazine de inot pentru fiecare 6,2l de apa. Acest produs are inscriptionata o concentratie de 27%, dar din testele pe care l-am efectuat ea ajunge si pana 34%. Puteti folosi si perhidrol dedicat alimentelor (35%) sau alte solutii similare. Retineti ca aceste produse concentrate sunt mult mai periculoase decat solutiile de 3%. Solutiile acestea pot provoca arsuri, se pot aprinde sau pot exploda, astfel incat trebuie sa le tratati cu grija. Cititi si instructiunile de utilizare de pe fiecare.

Ce cantitae de solutie de perhidrol aveti nevoie? Concentratia finala a solutiei trebuie sa ajunga in jur de 0,45%. Prima data impartiti 0,45 la concentratia solutiei de perhidrol pe care o aveti. Inmultiti catul cu volumul de apa care o sa-l folositi. De exemplu sa spunem ca vreti sa faceti 20l cu solutie de 0,45% avand solutie de perhidrol de 6%. Atunci 0,45 impartit la 6 da rezultatul 0,075. inmultind cu 20l rezulta 1,5l.  aceasta este cantitatea de solutie de perhidrol 6% pe care o puneti in 20l de apa pentru a obtine o soluti 0,45%. (de fapt o sa adaugati 1,5l la 18,5l apa pentru a obtine 0,45%. Oricum veti proceda veti fi aproape de concentratia ceruta)

Substratul poate fi amestecat in prima instanta cu suplimentele, daca aceasta este mai convenabil decat sa rasturnati containerul. Dupa acest prim amestec  suplimentele nepasteurizate vor trebui indepartate de substrat. Doar suplimentele pasteurizate (clatite in aba fierbinte) pot fi folosite.

Ce putem spune despre calea de obtinere a miceliului prin metoda “pune-si-amesteca”? Am avut succes cu ciupercile Oyster. Fructificarea culturii inoculate cu acesta au ridicat un semn de intrebare la inceput, dar au colonizat complet si au produs ciuperci. Ca sa incercati,  amestecati o cantitate de mediu obtinut prin metoda “in 8 minute” descrisa mai sus, marind concentratia de perhidrol la 0,45%. Daca folositi borcane umeziti discurile de carton din interiorul capacelor cu solutie de perhidrol 3%. Apoi lasati miceliul fara sa-l mai agitati, inchis  in containerul lui, pentru cel putin 2 ore inainte sa inoculati.

Concluziiintoarcere la meniu   

Procedurile pe care l-am descris  in acest supliment ne dau o privire de ansamblu asupra numeroaselor posibilitati  si  cai tehnice de  crestere a ciupercilor.  In fiecare moment, in mod normal,  imi vin noi  idei si trucuri pe care nu am ajuns inca sa le testez. Si stiu din corespondenta pe care o am cu numerosii  mei  cititori  ca si acestia au  idei fascinante.  Sper ca acest  volum va stimula creativitatea ulterioara in aceasta ramura care se dezvolta rapid.

 

Despre autorintoarcere la meniu   

36

Page 37:  · Web viewEprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza

Rush Wayne este diplomat in Biochimie si Biologie Moleculara la Universitate Harvard si detine si o diploma de fizician in Biochimie la Universitatea California din Berkley. A intrat prima data in contact cu procedurile de crestere a ciupercilor cand a absolvit in 1970, dar nu a devenit un cultivator de ciuperci pana in 1993, cand a reusit sa-si implementeze inovatiile continute in acest manual. Instructiunile de  folosire a perhidrolului in cultivarea ciupercilor se afla in posesia cultivatorilor de ciuperci din peste 75 de tari de pe intreg globul.

37