Face parte din familia Retroviridae, subfamilia Lentivirinae

VIRUSUL IMUNODEFICIENEI UMANE (HIV)

STRUCTURA HIVvirus ARN form sferic diametrul 100 130 nm alctuit din nucleoid cilindric situat excentric i o anvelop

STRUCTURA HIV

gp120env

Revers transcriptazapol

Anvelopa virusului HIVformat din membran lipidic derivat din membrana celulei gazd i din proteine virus specifice

gp41env

ARN simplu

p7gag

Strat lipidic

p17gag matrice

glicoproteina 41 (transmembranar) traverseaz membrana bilipidic ancornd la exterior gp 120; are rol n fuziunea anvelopei virale cu membranele celulelor gazd

p24gag capsidal Proteine gazd p9gag

glicoproteina 120 (de suprafa) plasat deasupra stratului bilipidic; are rol n recunoaterea receptorilor celulari specifici de care se leag.

1

Anvelopa virusului HIVanvelopa - cptuit spre interiorul particulei virale de o foi proteic subire = matricea viral rol de factor stabilizant al particulei virale format din proteina viral p17

Nucleoidul HIVconine 2 filamente de ARN viral monocatenar o serie de enzime necesare replicrii virale:p66

reverstranscriptaza (RTS) catalizeaz n sens retro copierea informaiei genetice n cursul replicrii virale; endonucleaza asigur integrarea ADN-ului proviral n ADN-ul celulei gazd; proteaza scindeaz precursorii polipetidici ai genei pol formndu-se proteinele enzimatice mature (RTS, endonucleaza)

Pricipala caracteristic : marea variabilitate a anvelopei viralese datoreaz unor mutaii n urma crora virusul dobndete noi caractere de patogenitate se poate sustrage sistemului imun (aciunii anticorpilor neutralizani).

p32

p11

Genomul viralcuprinde 9.193 de nucleotide fiind alctuit din 3 grupe de gene:a. gene structurale b. gene reglatoare c. gene de maturare

genele structuraleGena gag (genom-associated gene) Codific proteinele care formeaz miezul sau nucleul virusului:p 17 proteina matricei p 24 proteina capsidal p 7 proteina nucleocapsidei

Gena pol (polymerase) Codific:p 66 RTS p 11 proteaza p 32 integraza (endonucleaza)

Gena env (envelope) Codific glicoproteinele care alctuiesc nveliul virionului:Gp 160 glicoproteina precursor care prin scindare d natere la: gp 120 (de suprafa) gp 41 (transmembranar)

genele reglatoaregena rev reglarea expresiei virale activatoare a produciei de virus

genele de maturareNeeseniale in vitro n culturile de celule Eseniale pentru patogenitate in vivo gena vifpromoveaz infectivitatea virionilor

gena nef reglatoare negativ a produciei de virus; pare s aib aciune de supresie asupra replicrii virusului fiind responsabil de stadiul de integrare proviral latent n nucleul celulei gazd

gena vpucrete proporia particulelor virale extracelulare

gena vpr/vpxgen accesorie cu activitate neprecizat

gena tat transactivatoare implicat n relaia cu factorii de transcriere celulari

2

CICLUL REPLICATIV AL HIVATAARE FUZIUNE PTRUNDERE TRANSCRIPIA TRANSLAIA

ATAARE HIVde membrana celulelor int care poart pe suprafaa lor : Receptor CD4 Receptori alternativi:galactozilceramid pt. oligodendrocite, astrocite

REVERSTRANSCRIERE INTEGRARE N NUCLEUL CELULEI

ASAMBLARE NMUGURIRE

Coreceptori moleculari:CXCR4 pt. limfocite; CCR5 pt. macrofage

ATAARE HIVCelulele int sunt: limfocitul T limfocitul B monocitul macrofagul astrocitul oligodendrocitul fibroblastul din piele etc.

ATAARE HIV

Rol n recunoaterea receptorilor specifici i fixarea virusului de acetia - gp 120.

FUZIUNEAanvelopei virale cu membrana celular rol important gp 41ptrunderea: a. legarea gp120 de receptorul CD4 b. interaciune gp120coreceptor c. fuziunea membranelor

3

PTRUNDEREA virusului n celulvirusul i pierde nveliul; are loc conversia ARN-ului viral n ADN proviral bicatenar prin reverstranscriere catalizat de RTS ADN-ul proviral bicatenar este translocat n nucleul celulei gazd, transformat n ADN circular i inserat n genomul acesteia prin integraz

integrarea copiei ADN a genomului viral n genomul celulei gazd infecie latent sau persistent n aceast etap nu se sintetizeaz proteine virus specifice sistemul imun nu se mobilizeaz!! Principala cale de diseminare a virusului n aceast etap este transmiterea celular, prin fuziunea membranei celulei infectate cu membrana celulei neinfectate n cursul replicrii celulare de la celula mam la celula fiic

ACTIVAREA virusului latentsub aciunea unor factori insuficient cunoscui Prin transcripie ADN-ul proviral este transformat n ARN mesager i prin translaie n glicoproteine - proteine ale anvelopei i n enzime. Genomul viral este mpachetat ntr-o particul infecioas, este deplasat spre membrana celulei gazd;

ELIBERAREAnoilor particule virale prin INMUGURIRE

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECIEI HIV

4

DIAGNOSTIC SEROLOGICinvestigaii de triaj imuno-enzimatice ELISA

Metode imunoenzimatice ELISAenzyme-linked immunosorbent assay Permit detectarea anticorpilor. Este posibil determinare cantitativ La reacii particip: un reactant imunologic ataat de un suport solid (peretele unui recipient) un reactant imunologic marcat enzimatic - peroxidaza substrat specific (cromogenic) substane pentru stoparea reaciei

de confirmare imunoamprente radioimunoprecipitare imunofluorescen

de difereniere (HIV 1/2) tehnici rapide de diagnostic

Reaciile au loc n aparate automate, semiautomate.

Metode imunoenzimatice ELISA

Metode imunoenzimatice ELISApn la 5% rezultate false, prin erori tehnice. ELISA pozitiv trebuie confirmat prin folosirea altor teste ELISA bazate pe alte principii test de confirmare tip Western Blot (WB).

Testele fals pozitive: boli de colagen, hepatite cronice, malarie persoane cu anumite fenotipuri HLA.

Testul Western Blotpermite identificarea individual a anticorpilor anti-HIV specifici antigenelor virale. Antigenele sunt separate prin electroforez i transferate pe membrane de nitroceluloz care se incubeaz cu serul pacientului. Anticorpii din ser leag specific proteinele virale i sunt identificai prin comparare cu controale standard. o prob este pozitiv dac prezint benzi pozitive pentru cel puin dou din cele trei antigene majore gag, pol, env.

Testul Western BlotCriteriile CDC de interpretare: cel puin 2 din urmtoarele benzi: p24, gp41 sau gp160/120 pentru un test pozitiv nici una pentru un test negativ prezena oricrei alteia pentru un rezultat indeterminat

5

TESTELE RAPIDEconin suspensii microscopice de particule (latex, gelatin, hematii tanate) cuplate cu antigen viral. Anticorpii din serul testat aglutineaz aceste particule care formeaz un depozit vizibil cu ochiul liber sau la microscop dup numai 5 minute. utile n zone endemice, dac este necesar rapiditatea n orientarea diagnosticului serologic nu necesit echipamente speciale

METODE DIRECTEReplicarea viral demonstrat prin: evidenierea i dozarea antigenului p24, detectarea unor secvene genomice prin amplificare genic izolarea virusului.

Aceste tehnici evidentiaz infecia n timpul ferestrei imunologice (seroconversiei).

METODE DIRECTE Ag p24determinarea cantitatii de antigen p24 liber din plasm sau supernatantul din culturi celulare. Antigenemia p24 are valori mai mari iniial i apoi mai mici, tardiv n timpul infeciei cu HIV tehnic ELISA de tip sandwich, anticorpii anti-p24 se gsesc n godeuri se incubeaz cu serul sau plasma pacientului antigenul liber se leag specific este msurat intensitatea culorii.

METODE DIRECTE Ag p24O caracteristic a infeciei cu HIV coexistena antigenului p24 cu anticorpii anti-p24 pe tot parcursul bolii, n concentraii diferite. Creterea antigenului p24 la valori detectabile n faza de seroconversie sau n faze terminale limiteaz utilizarea acestui test doar pentru aceste perioade.

Reacia de polimerizare n lan (PCR)Tehnica const n amplificarea ADN existent n cantiti foarte mici printr-o serie de cicluri replicative. ofer informaii despre ncrctura viral. Cuantificarea acesteia este util n: diagnosticul infeciei, ndeosebi la nou-nscuii din mame seropozitive urmrirea evoluiei bolii evaluarea eficacitii diverselor tratamente antiretrovirale.

EPIDEMIOLOGIA INFECIEI HIV

6

SURSA DE INFECIEpersoane infectate HIV pacieni cu SIDA Acetia elimin virusul prin snge, sperm, secreie vaginal. Mai este infecios: lcr, lichid amniotic Cantitate foarte mic de virus este prezent n fecale, saliv, lacrimi, urin, lapte matern

TRANSMITEREcontact sexual homosexual (SUA, Europa) heterosexual (Africa prevalen crescut la femei: 1 din 4 are infecie HIV) factori de risc:parteneri multipli, sodomia, raporturi buco-genitale, contact sexual n timpul menstrelor, etc.

TRANSMITERETransmitere parenteral: transfuzii transplante contact cu snge contaminat accidente medicale injecii cu acelai ac

TRANSMITERETransmitere materno-fetal: Intrauterinriscul infeciei ftului este de 30 50%

Intrapartumexpunere la sngele mamei i la secreia vaginal

Postpartumprin lapte matern

Prevenirecomportament sexual fr risc sterilizarea corect a instrumentarului medico-chirugical triajul corect, strict al donatorilor de snge i de organe screening-ul gravidelor

INFECTAREdurata de supravieuire a virionului 6 ore

! imperios necesar infectarea unei celule !CD4 / receptori pt.virus la locul contaminriivirusul nglobat n celulele din prima linie a sistemului imuncelule dendritice macrofage monocite

7

INFECTAREsistemul monocito-macrofagic prezint virusul celulelor cu memorie (limfocit T) protejeaz virusul fa de antiretrovirale

ISTORIA NATURAL A INFECIEI HIV

ETAPEinfecia primar stadiul asimptomatic (perioad de laten) stadiul simptomatic (imunodepresie minor) SIDA (imunodepresie major)

INFECIA PRIMAR5 30 zile

expunere infecie simptome

80%

semne i

febr uoar, faringit sindrom mononucleozic: febr nalt (1 lun), erupie rujeoliform, mialgii, artralgii, cefalee limfadenopatii, scdere ponderal, faringit, tulburri gastro-intestinale, transpiraii nocturne, ulceraii bucale

INFECIA ASIMPTOMATICluni sau ani n funcie de: vrsta pacientului calea de transmitere starea sistemului imun8,3 ani adult, transfuzie cteva luni 3 ani copii

INFECIA ASIMPTOMATIClimfadenopatia cronic generalizat

! marker foarte sensibil al infeciei HIV 2 sau mai muli ggldiametrul > 1 cm elastici, nedureroi n 2 locuri diferite sau inghinal persisteni 3 6 luni etiologie necunoscut

8

INFECIA SIMPTOMATICimunodepresie minor afeciuni clinice comune recurente / persistente astenie fizic subfebrilitate transpiraii nocturne diaree trenant (peste 1 lun) herpes zoster multimetameric candidoz bucal recidivant leucoplazia proas a limbii etc.

SIDAdup 2 8- 10 ani de la infecie imunodepresie major infecii oportuniste pneumocistoz pulmonar toxoplasmoz cerebral cryptosporidioz candidoz esofagian sarcom Kapoi diseminat etc.

SIDAafectat orice organ, dar mai frecvent plmnul SNCcomplex de demen HIV adult encefalopatie progresiv - copil

DATE GENERALE HIV/SIDA N LUME Decembrie 2009

Numr persoane n via cu HIV/SIDA Total 33,3 milioane (31,4 35,3 milioane)Adulti 30,8 milioane (29,2 32,6 milioane) Femei 15,9 milioane (14,8 17,2 milioane) Copii < 15 ani 2,5 milioane (1,6 3,4milioane)

Persoane infectate cu HIV n anul 2009 Total 2,6 milioane (2,3 2,8 milioane)Adulti 2,2 milioane (2,0 2,4 milioane) Copii < 15 ani 370 000 (230 000 510 000)

tubul digestiv

Decese datorate SIDA n 2009 Total 1,8 milioane (1,6 2,1 milioane)Adulti 1,6 milioane (1,4 1,8 millioane) Copii < 15 ani 260 000 (150 000 360 000)Sursa: AIDS epidemic update: December 2010

9