subiecte microbi-virusologie 4-6
DESCRIPTION
subiecteTRANSCRIPT
Sub 4 : Diagnosticul virusologic in gripa
Diagnostic direct:
-se recolteaza tampon faringian , nazal, spalatura nazala
-produsele patologice se recolteaza in primele ¾ zile de boala
-metoda clasica: izolare pe culture de celule sau oua embrionate; se folosesc colonii primare –maimuta-sau linii permanente
-efect citopatic nespecific
-oua embrionate –in cavitatea amniotica pentru adaptare-pasaje successive in cavitatea alantoida –lichid alantoidian (se evidentiaza virusurile)=r. de hemaglutinare
-prin r. de hemaglutinare: se realizeaza titrarea virusurilor si cuantificarea
-identificarea : se realizeaza prin inhibarea hemaglutinarii
-metode rapide : detectarea antigenelor virale( imunofluorescenta, ELISA) sau detectarea genomului PCR
Diagnosticul indirect –serodiagnosticul :
-se cauta anticorpii in serul pacientului
-reactii antigen-anticorp, ELISA, RIH, fixare a complementului
-se urmareste aparitia dinamicii semnificative, seroconversie
Reactie de hemaglutinare:
Lichid alantoidian + -
Hematii + +
! !
Umbreluta ( r+) buton rosu(r-)
Reactive de inhibitie a hemaglutinarii:
Lichid alantoidian h1n1 h2n3
Hematii +
Ac specifici + +
(r+) buton (r-) umbreluta
1
Sub 5.- Diagnosticul virusologic in rabie
Rabia este determinate de virusul rabic ce se gaseste in saliva, fiind transmisa de animale sau prin aerosoli-liliecii-. Diagnosticul se face atat la om cat si la animalul bolnav.
Diagnosticul efectuat este cel direct. Diagnosticul indirect se realizeaza pentru evidentierea ac – eficacitate vaccin.
La om se recolteaza raclat cornean, saliva, biopsie cutanata, mucoasa bucala.
La animale, post mortem , se recolteaza fragmenet de creier sau saliva.
In fragmenetele de creier, in M.O se vad corpusculuii Babes-Negri, incluziuni virale, iar in imunofluorescenta –ac marcati cu o substanta fluorescent sau elisa- sunt metode rapide pentru detctarea antigenelor virale.
Pentru detectarea genomului viral : PCR.mai putin rapida este izolarea pe culture de celule, soricei n.n. –paralizii spastic.
Identificare : reactii de neutralizare, IF, ELISA.
2
Sub 6. – Markeri serologici in suspiciunea de hepatita virala acuta cu VHB
• markerii serici ai hepatitei cu virus B (Ag şi Ac) evidenţiaţi prin reacţii imunologice (ELISA, HAP, IF, RIA) prezintă importanţă diagnostică şi prognostică:
- diagnostic direct: AgHBs(infectiozitate in boala acuta, cronica sau portaj-fals pozitiv), AgHBe-contagiozitate (AgHBc este prezent numai intrahepatic)
- diagnostic indirect: Ac anti-HBc (IgM – infectie acuta/recenta si recaderi- cel mai important marker ; Ig G anamnestici) si Ac totali anti-HBc – trecerea prin boala sau cronicizare), anti-HBe, anti-HBs (ultimii care apar si singurii protectori);
• PCR pentru decelarea virusului infecţios.
Ag HBs Ag HBe Ac antiHBc-ig m
Ac anti Hbc totali
Ac anti HBs
Ac anti HBe
+ + + +Hepatita acuta
+(>6 luni) +(>6 luni) ALAT normal
Purtator sanatos
+ + + Alat >2-5 ori
Hepatopatie cronica
+ + +Trecere prin boala cu imunizare+ vaccinare-postinfectie
VHB- are un antigen de suprafata HBs, unul specific corpului HBc, si unul enzimaticHBe+ anticorpi anti HBs, HBc,HBe.
-prezinta AND viral
Diagnosticul direct se pune prin PCR(id. De genom), ELISA( id ag virale), imunofluorescenta ( id ag virale),sau indirect, prin detectarea anticorpilor (ELISA)
3