medicina regenerativa8re [compatibility mode]

7/24/2019 Medicina Regenerativa8re [Compatibility Mode]

1/39

Ingineria tisulara a pielii

Structura pielii


2/39

Pielea reprezint organul cu cea mai mare pondere norganismiare ca funcie principal rolul de proteciea acestuia.

Esteconstituitn principal din epiderm, dermihipoderm.Epidermul- melanocite, celule LangerhansiMerkel.

Dermul reprezint, n esen, esutul conjunctiv dintreepidermihipoderm.

Fibrele ce compunesutulconjunctiv de la nivelul dermului sunt colagenul si elastina.

Colagenulreprezint 80% din greutateauscata dermului i ofer rezistenla tensiune,iar elastinaasigurrevenirea pielii la formainiial dupdeformare,adicelasticitatea.

O alt component important a dermului este substana amorf intercelular.

Aceasta este format din GAG (acid hialuronic, dermatan sulfat i condroitin sulfat)

sintetizai de fibroblaste i mastocite. Glicozaminoglicanii leag apa, permind astfel

trecerea prin derm a nutrienilor,hormonilori metaboliilor, lubrifiaz reeauade fibre i

asigur funciadermului de amortizare aocurilor.

Hipodermul, sau esutul subcutanat, este localizat sub derm icuprinde un strat de esut conjunctiv i un strat de esut adipos.


3/39

Epidermul este format din cinci straturi celulare:stratul bazal, stratul spinos, stratul ganulos, stratul

lucid, stratul cornos.Stratul bazalsau germinativ este reprezentat de

celule cubice aezate pe membrana bazal fiindprincipala surs de rennoire a epidermului. Celulelebazale se mpart n celule stemicelule proliferative.La acest nivel seafl icelulele Merkel.

Stratul spinoseste format din 3-5 rnduri de celule

cuboidale. Citoplasma acestor celule este mai slabbazofil i conine pigment melanic i granulaii(keratinozomi).

Stratul granulos este format din 3-5 rnduri decelule turtite.

Stratul lucidapare doar la pielea mai groas,fiindreprezentat de un strat subire, translucid de celuleturtite.

Stratul cornos conine celule keratinizate,anucleate, parial exfoliate. Keratina are rolul de ampiedica deshidratareai ptrundereaapei sau a altorsubstanecu molecule mari. n cazul pielii mai groaseacest strat este bine reprezentat, dar n cel al pieliisubiripot lipsi straturile granulosilucid.


4/39

Al doilea strat din componenapielii, dermul, este format din esutconjunctiv (celule, fibrei substan intercelular) ivine n contactcu epiteliul prin intermediul membranei bazale.

Are rol de suport structurali nutriionalal epidermului.

Poate fi papilar n anumite zone sau reticular.

Dermul papilar este format dinesutconjunctiv lax cu fibre mai finede colagen, reticulinice i elastice. Celulele predominante suntfibroblasteleimastocitele.

Dermul reticularreprezintparteaprofunda dermului, este formatdin esut conjunctiv dens i determin elasticitatea pielii. Celulelecarepredominn dermul reticular sunt fibroblasteleimacrofagele


5/39

O alt component

important a dermului estesubstana amorfintercelular. Aceasta esteformat dinglicozaminoglicani

sintetizaide fibroblasteimastocite: acid hialuronic,dermatan sulfat icondroitin sulfat.

Fibrele ntlnite la nivelul dermului sunt colagenul si elastina.Colagenul reprezint 80% din greutatea uscat a dermului i ofer

rezisten la tensiune, iar elastina asigur revenirea pielii dupntindere la formainiial, adicelasticitatea.


6/39

FunciilepieliiPrintre cele mai importantefunciiale pielii senumrcea de receptor

al stimulilor externi. Stimulii dureroi i termici sunt recepionai determinaiile nervoase libere, cei tactili de discurile Merkel, stimulii depresiune suntrecepionaide corpusculii MeissneriVater-Pacini. Pieleaare rol debarierdeproteciempotrivaagenilornocivi(agenichimici,radiaiiUV, antigeni, microbi).

Prin vascularizaia bogat, pielea efectueaz termoreglareaorganismului. La nivelul pielii are loc schimbul de cldura cu mediulnconjurtor. Pierderea de cldura se face prin procese de conducie,convecie, radiaie i evaporare i este reglat prin intermediul fluxuluisangvin, prin fenomene de vasoconstricie sau vasodilataie. Glandele

sudoripare au rolul de a excretacompuii rezultaiprin catabolism.De mare importaneste i funcia imunologic a pielii, ndeplinitprin activitatea celulelor Langerhans i Granstein, a mastocitelor ikeratinocitelor, care sintetizeaz factori de stimulare ai coloniilor demacrofage.


7/39

Funciadeprotecieare componentele:A.Funcia de barier cutanat ntre mediul extern i mediulintern,fcnd fa unei duble agresiuni antigenice: pe de o parteprevine ptrunderea toxinelor externe n organism i pe de altpartempiedicdeshidratarea, pierderea de ioniialte molecule;B.Funciadeprotecie mecanicprin care pielea opune o anume

rezisten fade traumatismele directe sau prin traciune datoritelasticitiisale;C.Funcia de protecie mpotriva radiaiilor prin care stratulcornos absoarbe i reflect cam 50% din radiaii; absorbirearadiaiilor se realizeaz prin pigmentul din piele, melanina, care

produce bronzarea,nsexcesul de expunere esteduntor;D.Funcia de termoreglare, pielea contribuind la meninereaconstant a temperaturii; previne supranclzirea prin evaporareatranspiraiei i favorizeaz nclzirea corpului prin contraciamuchilorerectori,anexaifirului depr.


8/39

Funcia senzorial care este una din funciile de comunicare cumediulnconjurtor,estendeplinitdeurmtoriireceptori:

de durere(terminaiinervoase libere);de presiune (corpusculii Pacini);termici (corpusculii Krause);tactili (corpusculii MerkeliMeissner).

Figura 2. Pielea,barierdeproteciempotriva factorilor externi


9/39

Funcia imunologic, care este dat de epiderm (celuleleLangerhans, keratinocitele, celulele nondeterminante) i derm(histiocitele, macrofagele, limfocitele, mastocitele, plasmocitele),avnd puterea de a distruge produii cu antigenitate mareproveniiatt din mediul extern ctidin mediul intern.Funciade rezervor de celule embrionareutiln transplantul

de piele.Funcia de sintez a filmului hidrolipidic (mantaua acid ategumentului datorit pH-ului su acid de 5-6) care are rol deprotecie antichimic ide lubrifiere a straturilor desuprafaaleepidermului.

Funcia de suprafa respiratorie la nivelul creia serealizeazschimbul de gaze.Funciade comunicare: pieleareflectanumitestri emoionaleprin schimbarea culorii(roie, palid) ipoate semnalizaprezenaunei afcetiuni.


10/39


11/39

nfunciede gradul de afectare al epidermuluiidermului, arsurile seclasificn:

Arsuri de gradul I,cnd este afectat doar epidermul superficial. Acest tip dearsur provoac durere i eritem. Rspunsul inflamator induce vasodilataie, iarvindecarea sefinalizeazn 8 zile .

Arsuri de gradul II,cnd sunt afectatei straturile inferioare ale epidermului.Poate fi superficial, dac se distruge epidermul i dermul superficial sau

intermediar, dac se distruge epiderma i dermul intermediar (stratul reticular aldermului). Inflamaia este mai pronunat, iar celule distruse elibereaz histamin,compus care determin permeabilizarea vaselor si edem. Plaga va avea un aspecteritematos, umedi se va produce depigmentarea pielii. Durerea, n cazul arsurii degradul II, este adeseori intens. Vindecarea n cazul arsurii intermediare dureaz3sptmni, iar cicatricea este inestetic. Dac vindecarea unei arsuri de gradul IIdureazmai mult de 3sptmnise intervine chirurgical, prin excizareigrefare.

Arsuri de gradul III,cnd leziunea se extindepnlaesutulsubcutanat. Plagaesteuscat, dur i lipsit de sensibilitate, receptorii fiind distrui. Ca tratament seimpune cicatrizarea asistat (excizare i grefare) pentru prevenirea infeciei i acicatrizriihipertrofe.


12/39

Tipuri de arsuri


13/39


14/39

Fazele procesului de vindecare

Procesul de vindecare a rnilorprovocate de arsuri este diferit n funcie de

gravitatea leziunii. Arsurile de gradul 1i2 sevindecprin reepitelializare, iar celede gradul 3 i4 prin cicatrizare. Arsurile de gradul 1 au o evoluie favorabil ,vindecarea realizndu-se n doar cteva zile. Epiteliul nu este distrus n ntregimeise poate regenera prindifereniereacelulelor bazale. n schimb, arsurile de gradul 2ajung la nivelul dermuluii presupunreconstrucia totala epidermei. Vindecareaeste totui posibil prin migrarea celulelelor epiteliale ale glandelor anexeneafectate.

Procesul de vindecare al arsurilor de gradul 3 i4 este mai complex, necesitreconstruciadermuluiia tesutului conjunctiv . Vindecarea n acest caz se face princicatrizareiestempritn mai multe faze,deiacestea se pot suprapune n timp.Aceast mparire a fost facut prin determinarea rezistenei inciziei (esutuluicicatricial) n timp. n prima faza, faza inflamatorie,

rezistena inciziei

rmneneschimbat icelulele inflamatoriiinvadeazincizia. n cea de-a douafaz,faza deproliferare,rezistenaincizieicreterapiddatoritproducerii de colagen. n ultimafaz,faza de maturare sau remodelare, are loc ocreterearezisteneiinciziei, darconinutulde colagenrmne acelai.


15/39

Rolul colagenului n vindecarearnilor

Colagenul este un element cheie al procesului de vindecare arnilor, nca din fazele incipiente ale vindecrii pn la cicatrizareapropriu-zis,careconstn formarea unuiesutdin fibre de colagen.Astfel, colagenuldetermincantitateaicalitateaesutuluicicatricial.n primul pas spre vindecare, coagularea, colagenul influeneaz

agregareatrombocitar.

Un alt proces n care colagenul intervine este cel de migrare afibroblastelor, acesta depinznd de prezena colagenului. Stadiilefinale ale vindecrii unei rni implic metabolismul colagenului

(producie, maturare, degradare). Rezistena i funcionalitateacicatricii depind de intensitatea i perioada de timp n care au locaceste procese metabolice.


16/39

Variatia continutului de colagen i a rezistentei unei incizii corespunzatoarecelor 3 faze ale procesului de vindecare


17/39

Faza inflamatorieFaza inflamatorie este primafaza procesului de vindecareiare rolul de a

pregtirana pentru reepitelializarei reconstruciadermului.Inflamaia acutpoatedura de la 24pnla 48 de ore, dar uneori chiari2sptmni. naceast fazaparrspunsulvasculari rspunsulcelular.

Rspunsulvascularconstnhemostaz iformarea dopului plachetar, etapen care suntimplicaimediatori chimici. Catecolaminele vor inducevasoconstricia,

iar dup ce hemostaza s-a produs un alt set de mediatori chimici (histamin,serotonin, chinin) vor induce vasodilataie i creterea permeabilitii capilarepentru ca proteineleiapassepoatinfiltra la nivelulplgii.

Rspunsul celular se bazeaz pe chimiotaxie: celulele inflamatorii suntatrase la locul arsurii datorit semnalelor eliberate sistemic precum factorii de

cretere i de coagulare ai trombocitelor. Celulele inflamatorii, n specialneutrofilele i monocitele vor fagocita organismele strine de la nivelul plgii,mpiedicnd astfel infectarea zonei. Un alt rol important al macrofagelor esteeliberarea de citokine care atrag celulele endoteliale, fibroblasteikeratinocite carevor asigura regenerareatisular.


18/39

Fazaproliferativ

Cea de-a douafazavindecrii,fazaproliferativpresupune formareaesutuluidegranulaie ia colagenului (matricea dereconstrucie).

Pentru ca acest process aibloc, fibroblastele au nevoie de oxigen inutrienti,

deci de onouvascularizare, care estedeclanatde factorii decretereangiogenicieliberai de macrofage n mediu hipoxic i se realizeaz prin vasculogenez,angiogenez i arteriogenez, procese care difer prin modul de formare a vaselorsangvine. n procesul de vasculogenez intervin celule stem endoteliale(angioblastele), iar n angiogenez i n arteriogenez noul vas este format prinmigrarea celulelor endoteliale ale venulelor postcapilare n afara venulei odat ce

membranabazala fostdigeratde proteaze. n procesul de arteriogenezare loc nplus migrarea celulelor musculare pelngcele endoteliale

Neovascularizarea rnii : angiogeneza, arteriogeneza, vasculogeneza


19/39

Faza de remodelare

n ultima faz, faza de remodelare, are loc maturarea epidermului (neoformareprin mitoz a celulelor epidermice de la marginile plgii i migrarea acestora),fibroblastele setransformn miofibroblastei realizeaz contracia rnii. Cantitatea

de colagen rmne aceeai deoarece concomitent cu sinteza colagenului are loc idegradarea saenzimaticdectre colagenaz.

Minute OreMinute Ore ZileZile SaptamaniSaptamani LuniLuni

InflamareInflamare

ProliferareProliferare

RemodelareRemodelare

Hemostaza trombocite

Inflamare neutrofilemonocitemacrofage

Reepitelializare

Reconstructie a dermului

keratinocite

celule endotelialefibroblaste

Maturarea epidermei

Contractiaranii

Maturarea cicatricei

keratinocite

miofibroblaste

celule endoteliale

Etapele vindecrii rnilor i celulelecare au rol n procesul de vindecare

Ultima etap n vindecarea rnilor este contracia, care semnific reducerea mecanic adimensiunii plgii cu 80-90% din dimensiunea iniial. n cazul rnilor extinse, cele trei faze sesuprapun i pot fi observate astfel : n centrul plgii faza inflamatorie, iar spre margini fazele de

proliferare i maturare.


20/39

Dup anul 1990 s-au dezvoltat mai multe tipuri de pansamentelesintetice pentru arsuri, mult mai adecvate nevoilor de tratament, maiales n cazul arsurilor severe :filme adezive permeabile;hidrogeluri;

hidrocoloizi;alginai;spume sintetice;mee siliconice;adezivi tisulari;

filme barier;pansamente care conin colagen i argint


21/39

Pansamentele pentru arsuri pot fi clasificate nfunciede modul ncareinteracioneazcu mediul biologic n :

pansamente pasive, clasice, care oferdoar o acoperire arnii;

pansamente interactive, n categoria crora intr filmelepolimerice transparente, hidrogelurile, pansamentele de tipspum,caresunt permeabile pentru ap, vapori, oxigen i impermeabile pentrubacterii;

pansamentele bioactive, care elibereaz substane active pentruvindecarea rnilor, categorie din care fac parte hidrocoloizii,hidrogelurile,alginai,materialele pebazde colagen sau chitosan


22/39

Substituenitisulari bioactivi

Substitueniitisulari suntfolosiipentru ambuntivindecarea, adiminua durerea, pentru o nchidere mai rapid a rnii, o cicatrizareestetic i funcional, iar n cazul arsurilor extinse pentru scdereamortalitii.

Cei maieficieni substitueni tisulari sunt cei bioactivi pentrucgrbescvindecarea mai mult dect ceiineri,dar nu i pot nlocui total,avndindicaiispecifice.


23/39

Componente dermale folosite la bioactivareasubstituenilorde

piele

Componentele dermale acelulare folosite n componenasubstituenilorde piele pentru a stimula vindecarea sunt : Colagenul, component proteic cu rol de matrice de suport,depozitareighidarecelular; Elastina,component proteiccareconferelasticitateesutului;

Fibronectina,component proteiccareasigur aderenacelulelor,sporete diviziunea celulelor epiteliale, ndeplinete funcia dechemoatractant al macrofagelorifibroblastelor; Factori decretere, proteine carestimuleaztoate fazele procesuluide vindecare;

Glicozaminoglicanii, proteine glicozilate care au rolul de adezactiva proteazeleide a mbuntii aderena celular;

Acidul hialuronic, un carbohidrat complex caremeninehidratarea,scadeinflamaia i stimuleazvindecarea.


24/39

Clasificarea substituenilor tisulari bioactivi

n funcie de componena acestora, substituenii tisularibioactivi pot fi : esuturi naturale: alogrefe, xenogrefe, membrane amniotice,submucoasa intestinuluisubireporcin; Compozite sintetic-biologice; Echivalenidermali pebazde colagen : Integra ; esuturi obinuteprin cultivarecelular.

n funcie de indicaiile de folosire, substituenii tisulari

bioactivi seclasificn : temporari, folosii pentru arsurile superficiale sau doar pentruacoperirepncnd ogrefva fidisponibil;

permaneni,care nlocuiesc definitiv pieleadistrus


25/39

Pansamentele adecvatediferitelor tipuri de rni


26/39

Substituenitisularipermaneni

Substituenii tisulari permaneni sunt destinai nlocuiriipermanente a pielii distruse total de arsuri i sunt mult maicompleci dect substituenii temporari. n dezvoltareasubstituenilor permanenise ntlnescdou abordri:

construirea unui substituent cu doustraturi, unul interior ce va fincorporat ca neodermiunul exterior sintetic, care va fi nlocuit cuoautogref,sau celule epiteliale umane cultivate;

construirea unui substituent cu un strat unic care va nlocui fie

dermul, fie epidermul


27/39

Proprietile ideale ale unui substituent tisularpermanent sunt cele ale unei structuri de tip bistrat:

1.aderen rapid i ferm;2.aplicare facil i sigur;

3.disponibilitate ntr-operioad minimde ateptare;4. imitare ct maibuna pielii(structurde bistrat);5.ncorporarerapid;6.absenariscului de transmitere de boli;

7.rezultate funcionale icosmetice bune;8.cost sczut.


28/39

Substituenii permanenidisponibili n practicaclinicsunt : Apligraf, alogref format din dou straturi matrice decolagenikeratinociteifibroblaste umane neonatale; OrCel, alogref format dintr-un burete de colagennsmnatcu keratinociteifibroblaste umane neonatale;

Epicel

, autogref format dintr-un singur strat carenlocuiete epiderma, din keratinocite cultivate de origineautolog; Alloderm,alogrefcarenlocuietedoar dermulformatdinderm celular;

Integra, substituent sintetic format dintr-un strat exterior desiliconio matricedermalde colageniglicozaminoglicani


29/39

Pielea bioartificiala = autogrefa de piele = substituient de pieleumana se obtine printr-o tehnologie care implica recoltarea prinbiopsie a fibroblastelor si keratinocitelor de la un tesut de originesanatos si generarea proliferarii celulare in prezenta unui suport deancorare si a mediilor de cultura adecvate. Se disting trei aspecteimportante ale procesului de formare a noului tesut:

- necesitatea biodegradarii totale a suportului;

- formarea unei noi matrici extracelulare, care inlocuieste

suportul;

- stabilizarea matricii nou formate - dobndirea de catre aceasta

a caracteristicilor fizico-chimice, mecanice si biologice adecvate

functiei sale.


30/39

Etapele de realizare ale pielii bioartificiale


31/39

Calitatea de auxiliar poate fi detinuta de substante de naturadiversa, acestea avnd adesea si o importanta functionala. Se

disting astfel:

proteine:fibroina, fibrinogen, albumina, elastina;

polizaharide animale( GAG): condroitinsulfati, acid

hialuronic, heparina;

polizaharide vegetale: celuloze modificate, dextran,

chitosan, xantan;

polimeri sintetici: copolimeri cu acid acrilic, copolimericu grupe sulfonate sau sulfatate, produsi de policondensare.


32/39

Colagenul solubil este semnalat a fi utilizat pentru ingineria tisulara informa reticulata, dehidrotermic sau prin intermediul carbodiimidelor, inprezenta sau nu de mucopolizaharide.

CS - C - O H + R 1 - N = C = R 2

O

CS - C - O - C

O

N H

R1

N

R2

CS - C - O - C

N H

R1

N

R2

+ H O -

O

O

CS - C - O -

O

O

O

+

N H

R

1

N

O =C

CS - C - O -

O

O

O

+ Col - NH 2 CS - C - N H - Co l +

O

O

O

H O -

R2

O

Uree subst i tui t \

Colage n cu func] i i aminice

libere

N H S

Con droi t in sulfat

cu grupe carboxi l ice

ED C

N N

N N

Mecanismul atasarii covalente a condroitin- sulfatului la colagen utiliznd 1-etil-3(3-

dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) si N-succinimida (NHS). R1= -CH2-CH3; R2= -

(CH2)3-NH+

-(CH3)2Cl-


33/39

Tabelul 2. Citotoxicitatea matricilor, evaluata in vitro

Cultura de fibroblaste Cultura de mioblasteMatrice Metoda de

reticulare CP IIb

(%)CVII

c

(%)CVID

c

(%)CP II

b

(%)CVII

c

(%)CVID

c

(%)

Col -3.4 3.6 100 7 1007 3.42.0 1006 1003

Col EDC (Et)a

1.5 6.2 105 8 9710 3.42.8 1066 974

Col-CS EDC(Et) 2.6 5.1 99 8 1045 -1.82.9 951 966

Col- matrice colagenica; Col-CS- matrice colagen-condroitin sulfat

a-reticulare in prezenta de etanolCP II

b-indice de inhibare a proliferarii celulare, masurat prin colorarea

celulelor cu Trypan Blue;CVII

c-indice de viabilitate a celulelor, masuraa utiliznd WST-1 ca

agent de proliferare celulara;I- celule in contact indirect cu matricea, D- celule in contact direct cu

matricea.


34/39

Hidrogeluri pentru regenerarea in situ a tegumentului

Biohidrogelurile pentru regenerarea in situ a tegumentuluireprezintometod de tratament a arsurilor extinse care a cunoscut o dezvoltarerapid i implic folosirea hidrogelurilor n combinaie cu factori decretere ialte molecule care favorizeazcicatrizarea. Hidrogelurile custructur tridimensional degradabil activatpot stimula vindecarea prin

atragerea keratinocitelor i promovarea angiogenezei. Activareabiologic a acestori hidrogeluri se face prin legarea chimic a unorfactori de cretere, dintre care cei aprobabai pentru uz medical suntVEGF (factor decreterevascular-endotelial), RGDS (otetrapeptid) .

Absenadermului este motivul principal pentru care reepitelializarean cazul arsurilor severe nu poate avea loc. De aceea, majoritateasubstituenilortisulari de acest tip au ncompoziiecolagen (Apligraf,Integra).


35/39

Hidrogeluri pentru ncorporarea de medicamente care faciliteaz

vindecarea i atenueaz inflamaia

O alt ntrebuinare a hidrogelurilor n vindecarea rnilor const nfolosirea acestora ca material pentru eliberarea controlat a unorsubstane active uor de metabolizat, a factorilor de cretere i aproteinelor bioactivatoare (RGDS). De structura biohidrogelurilor pot fi

legate covalent substane antiinflamatorii i cicatrizante cu masmolecular joas cum ar fi fenilpropanoid glicozida.

Aceste hidrogeluri reprezint o nou generaie de materiale cubiodisponibilitate i stabilitate nalte care asigur un tratament topiceficient


36/39

Alte produse comerciale :-GRAFTSKIN-retea de colagen cu fibroblaste acoperita cu celuleepidermice, promovat de Organogenesis Inc. Canton, USA;-DERMAGRAPH T.C.-produs din tesut uman, Michigan, U.S.A;-TERUDERMIS- compozit tip sandwich format dintr-un statcolagenic fibros rezultat prin liofilizare peste care se gaseste depusun film siliconic, provenit de la Teruneo Corporation, S.U.A;-BIOBRANE-structura tesuta de nylon impregnata cu colagenporcin, peste care se gaseste depusa o membrana siliconicasemipermeabila, produsa de Dow B.Hiekaw Inc.;


37/39

Performantele produsuluiBIOBRANEMaterialul este flexibil, cucapacitate ridicata de permeatiea vaporilor de apa ceea ce

diminueaza acumularile defluid, in timp ce transparentaavansata a stratului superiorpermite evaluarea continua atesutului in refacere. Prezenta

colagenului confera produsuluicapacitate de limitare acontractiei ranii.

Mecanismul de actiune al substituientului

cutanat BIOBRANE


38/39


39/39

OrCel iApligraf sunt aprobate de FDA, utilizate pentru tratamentul rnilorulceroasecronice. Aceste substituiente sunt constituite dintr-o matricecolagenicdublustratificatn caresunt ncorporate keratinocite i fibroblaste umane. OrCel, prima matrice celular biologicsintetizat,esteprodus i conservatprin metode criogenice, spre deosebire de Apligraf, care

este un produs utilizatproaspt. Apligraf

seobinedin fibroblaste dermale umane, cultivatentr-o suspensie ce conine colagen tip I. Interaciunile colagen-fibroblaste conduc lareorganizareaiintensificarea fibrilelor colagenice, cu formarea unui echivalent dermal, n 4-6zile. Keratinocitele cultivate pe suprafaa suportului dermal sunt expuse unei interfee aer-lichid, cu scopul de a favoriza maturarea i cornificarea stratului epidermal. VascularizareaApligraf serealizeazn 14 zile.

Substitut de piele dublu stratificat (a) Apligraf; (b) comparaie ntre Apligraf i

pielea natural uman. Substituientul prezint structur asemntoare pielii naturale

medicina regenerativa8re [compatibility mode]

Documents