ghid national de biosiguranta pentru laboratoare

0LQLVWHUXO6QWLLDO5HSXEOLFLL0ROGRYD

&HQWUXO1DLRQDOGH6QWDWH3XEOLF

*+,'1$,21$/DE BIOSIGURAN

PENTRU LABORATOARE

&KLLQX

3UH]HQWXO*KLGHVWHRWUDQVSXQHUHDFHOHLGHDWUHLDHGLLLDSXEOLFDLHL206Laboratory Biosafety 0DQXDO DSUXWH vQ DQXO FRPSOHWDW FX XQHOH SUHYHGHUL FRQLQXWH vQ 'LUHFWLYD &RPLVLHLEuropene nr. 2000/54.

OrganL]DLD0RQGLDOD6QWLLToate drepturile rezervate.'HQXPLULOH IRORVLWHLSUH]HQWDUHDPDWHULDOXOXL vQSXEOLFDLLOHVDOHQX LPSOLFH[SULPDUHDQLFLXQHLRSLQLLGLQSDUWHD2UJDQL]DLHL0RQGLDOHD6QWLLSULYLQGVWDWXWXO MXULGLFDOYUHXQHL UL WHULWRULXRUDVDX]RQRULDODXWRULWLORUDFHVWRUDVDXSULYLQGGHOLPLWDUHDIURQWLHUHORUVDXJUDQLHORUDFHVWRUD/LQLLOHSXQFWDWHGHSHKULUHSUH]LQWJUDQLHOHDSUR[LPDWLYHDVXSUDFURUD s-aUSXWHDVQXH[LVWHun acord deplinWRWXL0HQLRQDUHDFRPSDQLLORU VSHFLILFH VDXDDQXPLWRUSURGXVHDOHSURGXFWRULORUQX LPSOLF IDSWXOFDFHVWHDVXQWDYL]DWHVDXUHFRPDQGDWHGHFWUH2UJDQL]DLD0RQGLDOD6QWLSUHIHUHQLDO IDGHDOWHSURGXVHDVHPQWRDUHGDUFDUHQXDXIRVWPHQLRQDWH(URULOHLRPLVLXQLOHIDFH[FHSLHQXPHOHproduselor proprietare fiind specificate cu majuscule. 2UJDQL]DLD0RQGLDOD6QWLL D OXDW WRDWHPVXULOHFD LQIRUPDLLOHGLQDFHDVWSXEOLFDLH V ILHverificate. Materialul publicat este distribuit fU JDUDQLL GH QLFL XQ WLS GLUHFWH VDX LQGLUHFWH5HVSRQVDELOLWDWHD SHQWUX LQWHUSUHWDUHD L XWLOL]DUHD DFHVWXL PDWHULDO UHYLQH FLWLWRUXOXL 2UJDQL]DLD0RQGLDO D 6QWLL QX YD IL UVSXQ]WRDUH SHQWUX QLFL R GDXQ VXIHULW FD UH]XOWDW DO XWLOL]ULLacestora.

Grupul de lucru SHQWUXUHGDFWDUHWHKQLFvQRUGLQHDDOIDEHWLF

Cojocaru Radu, GUvQPHGLFLQ

&HQWUXOGH(SLGHPLRORJLHD%ROLORU([WUHPGH3HULFXORDVHL6HFXULWDWH%LRORJLF, CNSP

Dmitrienco Valeria,GUvQPHGLFLQ

&HQWUXOGHSURILOD[LHLFRPEDWHre SIDA, CNSP

*KHRUJKLD6WHOD,GUvQPHGLFLQ

9LFHGLUHFWRUvQSUREOHPHGHHSLGHPLRORJLHJHQHUDO, CNSP

Ghidirim Victoria,GUvQPHGLFLQ

/DERUDWRUXOGHSROLRPLHOLWLHQWHURYLUR]H&1SP

Halacu Ala /DERUDWRUXOGHUHIHULQvQGLDJQRVWLFXO+9L+,9SIDA, CNSPMelnic AnatolGUvQPHGLFLQ

6HFLDHSLGHPLRORJLHJHQHUDO&1SP

6FRIHUD3HWUXGUvQPHGLFLQPrudnicionoc Svetlana

/DERUDWRUXOLQIHFLLUHVSLUDWRULLYLUDOH&1SP

/DERUDWRUXOEDFWHULRORJLHVDQLWDU&1SP Coordonator:

Spnu ConstantinGUKDELOLWDWvQPHGLFLQ,profesor universitar

Vicedirector n probleme de WLLQ, CNSP

([DPLQDWH L DSUREDWH VSUH HGLWDUH GH &RQVLOLXO GH ([SHUL DO 0LQLVWHUXOXL 6QWLL DORepublicii Moldova, Proces Verbal Nr. 3 din 04 iunie 2010

iii

iii

Cuvnt nainte Organizaia Mondial a Sntii (OMS) a recunoscut de mult timp c sigurana i, n particular, sigurana biologic reprezint probleme importante pe plan internaional. OMS a publicat prima ediie a Manualului de biosiguran n laborator n anul 1993. Acest manual a ncurajat statele s accepte i s implementeze noiunile de baz privind sigurana biologic i s elaboreze coduri naionale de practic pentru manipularea n condiii de siguran a microorganismelor patogene n laboratoarele aflate pe teritoriile lor. Din anul 1983, multe ri au urmat ndrumrile din acest manual pentru a elabora astfel de coduri de practic. A doua ediie a manualului a fost publicat n 1993. OMS continu s dein un rol coordonator n probleme legate de biosiguran la nivel internaional prin aceast a III-a ediie a manualului n care sunt abordate sigurana i securitatea biologic cu care ne confruntm n acest mileniu. Cea de-a III-a editie subliniaz importana responsabilitii personale. Au fost adaugate noi capitole privind evaluarea riscului, utilizarea n siguran a tehnologiei ADN recombinant si transportul materialelor infecioase. Recentele evenimente pe plan mondial au dezvluit noi ameninri pentru sntatea public prin utilizarea ru intenionat i eliberarea n mediul nconjurtor de ageni microbieni i toxine. De aceea, cea de-a III-a ediie introduce conceptele privind biosecuritatea protejarea materialului microbiologic mpotriva furtului, pierderii sau al diversiunii, care pot conduce la utilizarea neadecvat a acestor ageni i la afectarea sntii publice.. Aceast ediie include i informaii privind sigurana cuprinse n publicaia OMS din 1997 Sigurana n laboratoarele din unitile sanitare (1). A III-a ediie a Manualului OMS de biosiguran n laborator constituie un preios material de referin i un ghid pentru naiunile care sunt contiente de necesitatea de a elabora i stabili coduri naionale de practic pentru securizarea materialului microbiologic, asigurnd n plus disponibilitatea acestuia pentru scopuri clinice, de cercetare i epidemiologice. Dr A. Asamoa-Baah Assistant Director-General Communicable Diseases World Health Organization Geneva, Switzerland

iv

Mulumiri Elaborarea acestei a III-a ediii a Manualului de biosiguran n laborator a fost posibil prin contribuia deosebit a urmtorilor : Dr W. Emmett Barkley, Howard Hughes Medical Institute, Chevy Chase, MD, USA Dr Murray L. Cohen, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA (pensionat) Dr Ingegerd Kallings, Swedish Institute of Infectious Disease Control, Stockholm, Sweden Ms Mary Ellen Kennedy, Consultant in Biosafety, Ashton, Ontario, Canada Ms Margery Kennett, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne,

Australia (pensionat) Dr Richard Knudsen, Office of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention,

Atlanta, GA, USA Dr Nicoletta Previsani, Biosafety programme, World Health Organization, Geneva, Switzerland Dr Jonathan Richmond, Office of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention,

Atlanta, GA, USA (pensionat) Dr Syed A. Sattar, Faculty of Medicine, University of Ottawa, Ottawa, Ontario, Canada Dr Deborah E. Wilson, Division of Occupational Health and Safety, Office of Research Services,

National Institutes of Health, Department of Health and Human Services, Washington, DC, USA Dr Riccardo Wittek, Institute of Animal Biology, University of Lausanne, Lausanne, Switzerland Asistena urmtorilor specialiti este, de asemenea, apreciat: Ms Maureen Best, Office of Laboratory Security, Health Canada, Ottawa, Canada Dr Mike Catton, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne, Australia Dr Shanna Nesby, Office of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA Dr Stefan Wagener, Canadian Science Centre for Human and Animal Health, Winnipeg, Canada Autorii i referenii doresc s mulumeasc, de asemenea, pentru contribuiile originale ale numeroilor specialiti a cror munc a fost inclus n prima i a doua ediie a Manualului de biosiguran n laborator precum i n publicaia Sigurana n laboratoarele din unitile de ngrijire a sntii, OMS, 1997.

iv

vv

CUPRINS Cuvnt nainte ................................................................................................................. iii Mulumiri .......................................................................................................................... iv Cuprins ............................................................................................................................ v 1. Principii generale ......................................................................................................... 1 2. Evaluarea riscului microbiologic .................................................................................. 5 3. Laboratoarele de baz Nivelele de Biosiguran 1 i 2 ............................................ 7 4. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3 ....................................................... 17 5. Laboratorul nalt securizat Nivelul de Biosiguran 4 ............................................... 21 6. Biobazele ..................................................................................................................... 25 7. Recomandri pentru calificarea laboratorului/facilitilor acestuia .............................. 31 8. Recomandri pentru certificarea laboratorului/facilitilor acestuia ............................. 33 9. Conceptul de biosecuritate n laborator ....................................................................... 45 10. Hotele de siguran biologic .................................................................................... 47 11. Echipamente de siguran ......................................................................................... 57 12. Practici microbiologice corecte. Tehnici de laborator ................................................ 63 13. Planuri pentru evenimente neprevzute i msuri de urgen ................................. 71 14. Dezinfecia i sterilizarea ........................................................................................... 75 15. Noiuni introductive privind transportul materialelor infecioase 87 16. Biosigurana i tehnologia ADN recombinant ........................................................... 91 17. Substane chimice periculoase .................................................................................. 95 18. Pericole adiionale n laborator .................................................................................. 99 19. Responsabilul cu biosigurana i comitetul de biosiguran ...................................... 105 20. Reguli de siguran pentru personalul auxiliar .......................................................... 107 21. Programele de instruire ............................................................................................. 109 22. List-chestionar ......................................................................................................... 111 Anexa 1 - Primul-ajutor .................................................................................................... 117 Anexa 2 - Imunizarea personalului ............................ 119 Anexa 3 - Centre colaboratoare ale OMS n domeniul biosiguranei .............................. 121 Anexa 4 - Sigurana microbiologic a echipamentelor ........................... 123 Anexa 5 - Substanele chimice: pericole i precauii ....................................................... 127 Anexa 6 - Lista agenilor biologici . 153 Bibliografie 165

164

1

1. Principii generale Introducere

Prezentul ghid se refer la pericolul infecios implicat de manipularea diferitelor microorganisme, lund n considerare grupurile de risc crora le apartin (Grupurile de Risc OMS 1, 2, 3 i 4, vezi Anexa 6). Aceast clasificare a grupurilor de risc este valabil doar pentru activitatea de laborator. Tabelul 1 descrie grupurile de risc. Tabel 1. Clasificarea microorganismelor infecioase pe grupuri de riscGrup de risc 1 (risc infecios individual sau comunitar sczut sau absent) Microorganisme cu probabilitate minim de a provoca mbolnvire la om sau animal Grup de risc 2 (risc individual moderat, risc comunitar sczut) Ageni patogeni care pot provoca mbolnvire la om sau animal, dar este puin probabil s reprezinte un pericol sever pentru personalul de laborator, comunitate, faun sau mediu. Expunerile n laborator pot cauza infecii severe dar pentru care exist tratament eficace i msuri profilactice, iar riscul de rspndire al infeciei este limitat. Grup de risc 3 (risc individual ridicat, risc comunitar sczut) Ageni patogeni care n mod obinuit provoac mbolnvire sever la om sau animal, dar, de regul, nu se rspndesc de la un individ infectat la altul. Exist tratament eficace i msuri profilactice. Grup de risc 4 (risc individual i comunitar ridicat) Ageni patogeni care provoac, de regul, mbolnvire sever la om sau animal i care se pot transmite spontan de la un individ la altul, direct sau indirect. Nu exist, n general, tratament eficace i msuri profilactice.

Din punctul de vedere al biosiguranei, laboratoarele se clasific astfel : - de baz - Nivel de biosiguran 1 - de baz - Nivel de biosiguran 2 - securizat - Nivel de biosiguran 3 - inalt securizat - Nivel de biosiguran 4 Aceast clasificare are la baz un complex de caracteristici ce se refer la proiectarea

i construcia laboratorului, nivelul de securizare, dotarea cu echipamente, practicile i procedurile operaionale pe care le implic manipularea microorganismelor din diferite grupuri de risc. Fr a fi exhaustiv, Tabelul 2 prezint corespondena dintre grupul de risc n care se ncadreaz microorganismul i nivelul de biosiguran al laboratorului n care acesta se manipuleaz.

11

1. Principii generale Introducere

Prezentul ghid se refer la pericolul infecios implicat de manipularea diferitelor microorganisme, lund n considerare grupurile de risc crora le apartin (Grupurile de Risc OMS 1, 2, 3 i 4, vezi Anexa 6). Aceast clasificare a grupurilor de risc este valabil doar pentru activitatea de laborator. Tabelul 1 descrie grupurile de risc. Tabel 1. Clasificarea microorganismelor infecioase pe grupuri de riscGrup de risc 1 (risc infecios individual sau comunitar sczut sau absent) Microorganisme cu probabilitate minim de a provoca mbolnvire la om sau animal Grup de risc 2 (risc individual moderat, risc comunitar sczut) Ageni patogeni care pot provoca mbolnvire la om sau animal, dar este puin probabil s reprezinte un pericol sever pentru personalul de laborator, comunitate, faun sau mediu. Expunerile n laborator pot cauza infecii severe dar pentru care exist tratament eficace i msuri profilactice, iar riscul de rspndire al infeciei este limitat. Grup de risc 3 (risc individual ridicat, risc comunitar sczut) Ageni patogeni care n mod obinuit provoac mbolnvire sever la om sau animal, dar, de regul, nu se rspndesc de la un individ infectat la altul. Exist tratament eficace i msuri profilactice. Grup de risc 4 (risc individual i comunitar ridicat) Ageni patogeni care provoac, de regul, mbolnvire sever la om sau animal i care se pot transmite spontan de la un individ la altul, direct sau indirect. Nu exist, n general, tratament eficace i msuri profilactice.

Din punctul de vedere al biosiguranei, laboratoarele se clasific astfel : - de baz - Nivel de biosiguran 1 - de baz - Nivel de biosiguran 2 - securizat - Nivel de biosiguran 3 - inalt securizat - Nivel de biosiguran 4 Aceast clasificare are la baz un complex de caracteristici ce se refer la proiectarea

i construcia laboratorului, nivelul de securizare, dotarea cu echipamente, practicile i procedurile operaionale pe care le implic manipularea microorganismelor din diferite grupuri de risc. Fr a fi exhaustiv, Tabelul 2 prezint corespondena dintre grupul de risc n care se ncadreaz microorganismul i nivelul de biosiguran al laboratorului n care acesta se manipuleaz.

2GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN 3(N758 LABORATOARE

2

Tabel 2. Relaia dintre grupurile de risc i nivelele de biosiguran Grup de

risc Nivel de

biosiguran Tip de laborator Practici de laborator Echipamente de

protectie

1 De baz - Nivel de biosiguran 1 Invmnt, cercetare GMT

Nici un fel; suprafa de lucru deschis

2 De baz - Nivel de biosiguran 2 Servicii de asisten primar; diagnostic, cercetare

GMT plus mbrcminte de protectie i semn de pericol biologic

Suprafa de lucru deschis plus HSB pentru producerea eventuala de aerosoli

3 Securizat Nivel de biosiguran 3

Servicii speciale de diagnostic, cercetare

Similar cu nivelul 2 plus mbrcminte special, acces controlat, flux de aer direcionat

HSB i/sau alte dispozitive primare pentru toate activitile

4 Inalt securizat - Nivel de biosiguran 4

Uniti pentru ageni patogeni periculoi

Similar cu nivelul 3 plus intrare etans, du la ieire, eliminare special a deeurilor

HSB clasa a III-a sau costum cu presiune pozitiv combinat cu HSB clasa a II-a, autoclav cu dou ci de acces (transmural), aer filtrat

GMT = Good Microbiological Techniques (practici microbiologice corecte) HSB = Hot de siguran biologic

OMS recomand elaborarea la nivel naional sau regional a unei clasificri a microorganismelor, pe baza grupurilor de risc, lund n considerare urmtoarele :

1. Patogenicitatea microorganismului. 2. Modul de transmitere i tipul de gazd caracteristice microorganismului, elemente ce

pot fi influenate de nivelul de imunitate al populaiei, densitatea i mobilitatea populaiei gazd, prezena vectorilor i de nivelul de igien a mediului.

3. Posibilitile locale de aplicare a unor msuri preventive eficace. Acestea pot include : profilaxia prin imunizare activ (vaccinare) sau pasiv (administrare de antiseruri / imunoglobuline specifice); aplicarea de msuri sanitare, ca de exemplu cele privind igiena alimentelor i a apei; controlul rezervorului animal sau al vectorilor reprezentai de artropode.

4. Posibilitile de administrare a unor tratamente eficace. Acestea pot include: imunizarea pasiv, vaccinarile postexpunere, folosirea de antibiotice, antivirale i ageni chimioterapici, lund n considerare i posibilitatea emergenei de tulpini rezistente la acestea.

n Anexa 6 este prezentat clasificarea agenilor biologici conform Anexei III a

Directivei 2000/54/CE a Parlamentului European i Consiliului, din data de 18 Septembrie 2000, referitoare la protejarea lucrtorilor mpotriva riscurilor pe care le implic expunerea la ageni biologici la locul de munc.

Desemnarea nivelului de biosiguran pentru lucrul n laborator trebuie s se bazeze pe evaluarea riscului. Pentru stabilirea nivelului corect de biosiguran, evaluarea va lua n

1. PRINCIPII GENERALE

3

considerare grupul de risc cruia i aparine microorganismul, dar i ali factori ce pot interveni. Pentru exemplificare, un microorganism aparinnd grupului de risc 2 necesit n general localuri i utiliti, echipamente, practici i proceduri pentru desfurarea n siguran a activitilor caracteristice Nivelului de biosiguran 2. Dac totui anumite experimente sunt generatoare de aerosoli n concentraii mari, Nivelul de biosiguran 3 este mai indicat, asigurnd un grad superior de limitare a aerosolilor la spaiul de lucru al laboratorului. Aprecierea nivelului de biosiguran necesar desfurrii unei anumite activiti este ghidat de judecata profesional bazat pe evaluarea riscului, i nu doar pe desemnarea mecanic a unui nivel de biosiguran a laboratorului dupa grupul de risc cruia i aparine microorganismul patogen care urmeaz a fi manipulat (vezi Capitolul 2).

Tabelul 3 prezint principalele cerine pentru fiecare nivel de biosiguran. Tabel 3. Rezumat al cerinelor nivelelor de biosiguran

Nivel de biosiguran 1 2 3 4

Izolarea(a) laboratorului Nu Nu Da Da ncpere etanabil pentru decontaminare

Nu Nu Da Da

Ventilaia: - flux de aer direcionat spre interior Nu De dorit Da Da - sistem de ventilaie controlat Nu De dorit Da Da - evacuarea aerului prin filtre HEPA Nu Nu Da / Nu(b) Da Intrare cu u dubl Nu Nu Da Da Sas (c) Nu Nu Nu Da Sas cu du Nu Nu Nu Da Anticamer Nu Nu Da Da Anticamer cu du Nu Nu Da / Nu(d) Nu Tratarea efluenilor Nu Nu Da / Nu(d) Da Autoclav: - n institutie/cldire Da Da Da Da - n laborator Nu Nu De dorit Da - cu acces dublu (transmural) Nu Nu De dorit Da Hote de siguran biologic: Nu De dorit Da Da Capacitate de monitorizare a siguranei personalului (e)

Nu Nu De dorit Da

(a) Izolarea fizic i funcional a laboratorului de circulaia general a personalului. (b) Depinde de locul de evacuare (vezi Capitolul 4). (c) Sas - Incint prevzut cu dou sau mai multe ui interpus ntre dou sau mai multe

ncperi (de exemplu cu presiuni diferite), pentru a controla fluxul de aer ntre acestea. Un sas poate fi proiectat i utilizat, fie pentru personal, fie pentru materiale sau probe.

(d) Depinde de agenii microbieni manipulai n laborator. (e) De exemplu, fereastr de vizualizare, sistem de supraveghere video, dou ci de

comunicare

n consecin, stabilirea nivelului de biosiguran ia n consideraie microorganismul (agentul patogen) folosit, facilitile disponibile, echipamentele i procedurile necesare desfurrii activitii de laborator n condiii de siguran.

ghid naional de biosiguran pentru laboratoare

3GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN 3(N758 LABORATOARE

2

Tabel 2. Relaia dintre grupurile de risc i nivelele de biosiguran Grup de

risc Nivel de

biosiguran Tip de laborator Practici de laborator Echipamente de

protectie

1 De baz - Nivel de biosiguran 1 Invmnt, cercetare GMT

Nici un fel; suprafa de lucru deschis

2 De baz - Nivel de biosiguran 2 Servicii de asisten primar; diagnostic, cercetare

GMT plus mbrcminte de protectie i semn de pericol biologic

Suprafa de lucru deschis plus HSB pentru producerea eventuala de aerosoli

3 Securizat Nivel de biosiguran 3

Servicii speciale de diagnostic, cercetare

Similar cu nivelul 2 plus mbrcminte special, acces controlat, flux de aer direcionat

HSB i/sau alte dispozitive primare pentru toate activitile

4 Inalt securizat - Nivel de biosiguran 4

Uniti pentru ageni patogeni periculoi

Similar cu nivelul 3 plus intrare etans, du la ieire, eliminare special a deeurilor

HSB clasa a III-a sau costum cu presiune pozitiv combinat cu HSB clasa a II-a, autoclav cu dou ci de acces (transmural), aer filtrat

GMT = Good Microbiological Techniques (practici microbiologice corecte) HSB = Hot de siguran biologic

OMS recomand elaborarea la nivel naional sau regional a unei clasificri a microorganismelor, pe baza grupurilor de risc, lund n considerare urmtoarele :

1. Patogenicitatea microorganismului. 2. Modul de transmitere i tipul de gazd caracteristice microorganismului, elemente ce

pot fi influenate de nivelul de imunitate al populaiei, densitatea i mobilitatea populaiei gazd, prezena vectorilor i de nivelul de igien a mediului.

3. Posibilitile locale de aplicare a unor msuri preventive eficace. Acestea pot include : profilaxia prin imunizare activ (vaccinare) sau pasiv (administrare de antiseruri / imunoglobuline specifice); aplicarea de msuri sanitare, ca de exemplu cele privind igiena alimentelor i a apei; controlul rezervorului animal sau al vectorilor reprezentai de artropode.

4. Posibilitile de administrare a unor tratamente eficace. Acestea pot include: imunizarea pasiv, vaccinarile postexpunere, folosirea de antibiotice, antivirale i ageni chimioterapici, lund n considerare i posibilitatea emergenei de tulpini rezistente la acestea.

n Anexa 6 este prezentat clasificarea agenilor biologici conform Anexei III a

Directivei 2000/54/CE a Parlamentului European i Consiliului, din data de 18 Septembrie 2000, referitoare la protejarea lucrtorilor mpotriva riscurilor pe care le implic expunerea la ageni biologici la locul de munc.

Desemnarea nivelului de biosiguran pentru lucrul n laborator trebuie s se bazeze pe evaluarea riscului. Pentru stabilirea nivelului corect de biosiguran, evaluarea va lua n

1. PRINCIPII GENERALE

3

considerare grupul de risc cruia i aparine microorganismul, dar i ali factori ce pot interveni. Pentru exemplificare, un microorganism aparinnd grupului de risc 2 necesit n general localuri i utiliti, echipamente, practici i proceduri pentru desfurarea n siguran a activitilor caracteristice Nivelului de biosiguran 2. Dac totui anumite experimente sunt generatoare de aerosoli n concentraii mari, Nivelul de biosiguran 3 este mai indicat, asigurnd un grad superior de limitare a aerosolilor la spaiul de lucru al laboratorului. Aprecierea nivelului de biosiguran necesar desfurrii unei anumite activiti este ghidat de judecata profesional bazat pe evaluarea riscului, i nu doar pe desemnarea mecanic a unui nivel de biosiguran a laboratorului dupa grupul de risc cruia i aparine microorganismul patogen care urmeaz a fi manipulat (vezi Capitolul 2).

Tabelul 3 prezint principalele cerine pentru fiecare nivel de biosiguran. Tabel 3. Rezumat al cerinelor nivelelor de biosiguran

Nivel de biosiguran 1 2 3 4

Izolarea(a) laboratorului Nu Nu Da Da ncpere etanabil pentru decontaminare

Nu Nu Da Da

Ventilaia: - flux de aer direcionat spre interior Nu De dorit Da Da - sistem de ventilaie controlat Nu De dorit Da Da - evacuarea aerului prin filtre HEPA Nu Nu Da / Nu(b) Da Intrare cu u dubl Nu Nu Da Da Sas (c) Nu Nu Nu Da Sas cu du Nu Nu Nu Da Anticamer Nu Nu Da Da Anticamer cu du Nu Nu Da / Nu(d) Nu Tratarea efluenilor Nu Nu Da / Nu(d) Da Autoclav: - n institutie/cldire Da Da Da Da - n laborator Nu Nu De dorit Da - cu acces dublu (transmural) Nu Nu De dorit Da Hote de siguran biologic: Nu De dorit Da Da Capacitate de monitorizare a siguranei personalului (e)

Nu Nu De dorit Da

(a) Izolarea fizic i funcional a laboratorului de circulaia general a personalului. (b) Depinde de locul de evacuare (vezi Capitolul 4). (c) Sas - Incint prevzut cu dou sau mai multe ui interpus ntre dou sau mai multe

ncperi (de exemplu cu presiuni diferite), pentru a controla fluxul de aer ntre acestea. Un sas poate fi proiectat i utilizat, fie pentru personal, fie pentru materiale sau probe.

(d) Depinde de agenii microbieni manipulai n laborator. (e) De exemplu, fereastr de vizualizare, sistem de supraveghere video, dou ci de

comunicare

n consecin, stabilirea nivelului de biosiguran ia n consideraie microorganismul (agentul patogen) folosit, facilitile disponibile, echipamentele i procedurile necesare desfurrii activitii de laborator n condiii de siguran.

principii generale

5

2. Evaluarea riscului microbiologic

Coloana vertebral a practicilor de biosiguran este evaluarea riscului. Dei exist o multitudine de instrumente destinate a ajuta evaluarea riscului pentru o procedur sau pentru un experiment, cel mai important component este reprezentat de evaluarea (judecata) profesional. Evaluarea riscului ar trebui realizat de ctre specialitii cei mai familiarizai cu caracteristicile specifice ale microorganismelor ce vor fi utilizate, cu procedurile i echipamentele, cu animalele ce pot fi folosite ca model i cu echipamentele i facilitile disponibile pentru o manipulare securizat. eful laboratorului sau investigatorul principal sunt rspunztori pentru evaluarea adecvat i la timp, precum i pentru conlucrarea strns cu colectivul de protecia muncii i personalul de biosiguran n vederea asigurrii echipamentului i facilitilor necesare desfurrii activitii pentru care s-a fcut evaluarea. Dupa evaluarea iniial a riscului, acesta se reevalueaz periodic i se revizuiete dac se consider necesar, lund n considerare acumularea de noi date corelate cu problema gradului de risc i informaiile din literatura de specialitate. Unul din cele mai utile instrumente pentru evaluarea riscului microbiologic este listarea grupurilor de risc pentru agenii microbiologici (vezi Cap. 1). Simpla referire la grupurile de risc pentru un anumit agent microbian este insuficient pentru evaluarea riscului. Ali factori ce vor trebui luai n considerare sunt urmtorii:

1. Patogenitatea agentului infecios i doza infectant 2. Consecinele posibile ale expunerii 3. Calea natural de infectare 4. Alte ci de transmitere, rezultate n urma manipulrii n laborator (parenteral, aerian,

ingerare) 5. Stabilitatea agentului infecios n mediul extern 6. Concentraia agentului infecios i volumul de material concentrat ce se manipuleaz 7. Disponibilitatea unei gazde adecvate/susceptibile (umane sau animale) 8. Informaii disponibile din studii pe animale, raportri privind infecii dobndite n

laborator (profesionale) sau raportri de cazuri clinice 9. Intenia de a utiliza anumite tehnici in laborator (ultrasonarea, aerosolizarea,

centrifugarea, etc) 10. Orice manipulare genetic a microorganismului care poate duce la extinderea gamei

de gazde susceptibile sau poate modifica sensibilitatea acestuia la terapiile considerate eficace

11. Accesul efectiv la msuri profilactice sau terapeutice eficace.

Pe baza informaiilor obinute prin evaluarea riscului, se stabileste nivelul de siguran biologic necesar desfurrii activitii planificate, se selecteaz echipamentul corespunztor proteciei personalului i procedurile operaionale standard (POS) ce vor include aspecte de siguran a muncii, cu scopul desfurrii activitii n modul cel mai sigur posibil.

6GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN 3(1758 LABORATOARE

Probe despre care exist informaii limitate Procedurile de evaluare a riscului descrise mai sus se aplic cu succes atunci cnd

dispunem de suficiente informaii . Sunt ns situaii cnd informaiile existente sunt insuficiente pentru a permite o evaluare corect a riscului, cum este cazul probelor clinice sau al celor epidemiologice colectate pe teren. n aceste situaii este prudent s se adopte o atitudine precaut n manipularea probelor.

1. Precauiile standard (3) trebuie respectate ntotdeauna i se vor folosi barierele de protecie (mnui, halate, protecie ocular), ori de cte ori probele provin de la pacieni.

2. Aplicarea practicilor si procedurilor pentru Nivelul de biosiguran 2 trebuie s reprezinte cerina minim pentru manipularea probelor.

3. Transportul probelor trebuie s respecte regulile si reglementrile naionale i/sau internaionale.

Anumite informaii pot fi de mare ajutor pentru a uura determinarea riscului de

manipulare a acestor probe :

1. Datele medicale privind pacientul 2. Datele epidemiologice (date de morbiditate si mortalitate, calea de transmitere

suspectat, alte date privind investigarea focarului) 3. Informaii privind originea geografic a probei.

n cazul unor episoade epidemice de origine necunoscut, se pot elabora ad hoc

ghiduri adecvate, care s fie difuzate/publicate de autoritile naionale competente i/sau OMS prin World Wide Web (aa cum s-a procedat n anul 2003, n condiiile emergenei sindromului respirator acut sever (SARS)), ghiduri care s indice modalitatea de transport a probelor i nivelul de biosiguran ce se impune n procesul de analiz a acestora. Evaluarea riscului i microorganismele modificate genetic

O discuie detaliat privind evaluarea riscului n cazul microorganismelor modificate genetic (genetically modified organisms = GMOs) este prezentat n Capitolul 16.


7

3. Laboratoarele de baz Nivelele de Biosiguran 1 i 2

Acest ghid prezint cerinele minime pentru laboratoare clasificate pe toate nivelele de biosiguran, care manipuleaz microorganisme din Grupurile de risc 1-4. Dei unele precauii pentru anumite microorganisme din Grupul de risc 1 pot prea mai puin justificate, se recomand aplicarea lor cu scopul nsuirii i promovrii practicilor microbiologice corecte. Toate laboratoarele medicale (de sntate public sau de diagnostic clinic n ambulatorii, spitale, etc) trebuie concepute conform unui Nivel de biosiguran 2 sau peste. Deoarece nici un laborator nu are un control complet asupra probelor pe care le primete, personalul din laborator poate fi expus la microorganisme din grupuri de risc superioare celor anticipate. Aceast posibilitate trebuie luat n considerare cnd se elaboreaz planurile i politicile de biosiguran. De regul, precauiile standard trebuie adoptate i aplicate ntotdeauna. Regulile pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2, prezentate n acest manual, sunt cuprinztoare i detaliate, ele fiind fundamentale pentru toate laboratoarele, indiferent de nivelul de biosiguran.

Recomandrile pentru laboratoarele securizate Nivel de biosiguran 3 i nalt securizate - Nivel de biosiguran 4, care urmeaz (Capitolele 4 i 5), constituie de fapt modificri i suplimentri ale acestor reguli, destinate lucrului cu ageni patogeni mai periculoi. 3.1. Codul de practici

Acest cod este o list a celor mai importante practici i proceduri de laborator care stau la baza practicilor microbiologice corecte (good microbiological techniques = GMT). n multe laboratoare i programe naionale n care acestea particip, acest cod se poate utiliza pentru elaborarea de reguli i proceduri scrise pentru efectuarea n siguran a operaiunilor n laborator.

Fiecare laborator trebuie s adopte un manual de siguran sau de operaiuni care s identifice pericolele cunoscute sau poteniale precum i procedurile i practicile specifice pentru eliminarea sau reducerea la minimum a acestor pericole. GMT sunt fundamentale pentru sigurana activitilor de laborator. Echipamentul special de laborator este un element suplimentar, care nu va putea ns niciodat s nlocuiasc aplicarea procedurilor corecte. Cele mai importante concepte sunt enumerate mai jos. 3.1.1. Accesul 1. Sigla internationala de avertizare si inscriptia Pericol biologic (Figura 1) trebuie s fie

afiate pe uile ncperilor unde sunt manipulate microorganisme aparinnd grupului de risc 2 sau mai mare.

2. Numai persoanele autorizate vor fi lsate s intre n zonele de lucru ale laboratorului. 3. Uile laboratorului trebuie s stea nchise. 4. Copiii nu trebuie autorizai sau lsai s intre n zonele de lucru ale laboratorului. 5. Accesul n biobaze trebuie s se fac numai pe baza unei autorizaii speciale. 6. Nu se admite accesul altor animale n afara celor folosite pentru activitile de laborator


8

PERICOL BIOLOGIC

ACCESUL PERMIS NUMAI PERSONALULUI AUTORIZAT

Nivel de biosiguran .................................................................... Responsabil .................................................................................. n caz de urgen telefonai .......................................................... Tel. serviciu ............................ Tel. acas ....................................

Autorizarea pentru acces se obine de la responsabilul nominalizat mai sus

Figura 1. Sigla de pericol biologic

3.1.2. Protecia individual a personalului 1. Salopetele de laborator, halatele sau uniformele trebuie purtate tot timpul ct se lucreaz n

laborator. 2. Mnui corespunztoare de protecie trebuie purtate n timpul tuturor procedurilor care pot

implica contactul direct sau accidental cu snge, cu alte umori sau fluide ale organismului, cu alte materiale potenial infecioase sau cu animale infectate. Dup utilizare, mnuile se scot aseptic i se spal minile.

3. Personalul trebuie s se spele pe mini dup manipularea materialelor infecioase i a animalelor infectate i nainte de prsirea zonei de lucru a laboratorului.

4. Ochelarii de protecie, ecranele de protecie facial sau alte dispozitive de protecie trebuie purtate ori de cte ori este necesar protecia ochilor i a feei de stropi, obiecte impactante i surse artificiale de radiaii ultraviolete.

5. Este interzis purtarea mbrcminii protectoare de laborator n afara laboratorului, de exemplu n cantine, camere de oficiu, biblioteci, toalete, etc.

6. nclmintea decupat n partea din fa (sandale) este improprie purtrii n laborator. 7. Consumul de alimente, buturi, machiajul i manipularea lentilelor de contact sunt interzise

n zonele de lucru ale laboratorului. 8. Depozitarea de alimente sau buturi oriunde n zona de lucru a laboratorului este interzis. 9. mbrcmintea i nclmintea de protecie ce a fost utilizat n laborator nu trebuie s fie

depozitat n aceleai dulapuri cu mbrcmintea i nclmintea de strad.

3.1.3. Procedurile 1. Pipetarea cu gura este strict interzis. 2. Nici un material nu trebuie dus la gur. Etichetele nu trebuie umectate cu limba nainte de

lipire. 3. Toate procedurile tehnice trebuie efectuate ntr-un mod care s reduc la minimum

formarea de aerosoli i picturi.

3. LABORATOARELE DE BAZ NIVELELE DE BIOSIGURAN 1 I 2

4. Folosirea acelor i seringilor hipodermice trebuie limitat. Ele nu trebuie folosite ca substituente ale dispozitivelor de pipetare sau pentru oricare alt manoper ce nu reprezint injecii parenterale sau aspirarea de fluide de la animalele de laborator.

5. Toate stropirile accidentale i expunerile evidente sau posibile cu material infecios trebuie raportate responsabilului laboratorului. Se va pstra o eviden scris a acestor accidente i incidente.

6. Se va elabora i aplica o procedur scris pentru curarea-inactivarea substanelor vrsate.

7. Lichidele contaminate trebuie decontaminate (chimic sau fizic) naintea evacurii lor n reeaua de canalizare. n funcie de riscul evaluat se poate dezvolta un sistem de tratare a acestor lichide.

8. Documentele ce urmeaz a fi scoase din laborator trebuie s fie protejate pe toat perioada ct se afl n laborator, pentru a nu fi contaminate.

3.1.4. Zonele de lucru ale laboratorului 1. n laborator trebuie pstrat curenia i ordinea, eliminndu-se toate materialele care nu

sunt necesare pentru munca desfurat n laborator. 2. Suprafeele de lucru trebuie decontaminate dup fiecare vrsare de materiale potenial

periculoase precum i la sfritul zilei de lucru. 3. Toate materialele contaminate, probele i culturile, trebuie decontaminate nainte de a fi

ndeprtate sau curate pentru refolosire. 4. Ambalarea i transportul trebuie s respecte reglementrile naionale i/sau internaionale

n vigoare. 5. Ferestrele ce pot fi deschise trebuie prevzute cu plase/ecrane pentru insecte.

3.1.5. Managementul biosiguranei 1. eful de laborator (persoana care poart n mod direct responsabilitatea laboratorului) are

obligaia s asigure elaborarea i adoptarea unui plan de management al biosiguranei i ale unui manual de siguran i operaiuni.

2. Responsabilul cu activitatea laboratorului (subordonat efului laboratorului) trebuie s asigure instruirea periodic a personalului laboratorului n domeniul siguranei.

3. Personalul trebuie avertizat asupra pericolelor speciale i are obligaia s citeasc manualul de siguran i operaiuni i s respecte procedurile i practicile standard. Responsabilul laboratorului trebuie s se asigure c toi membrii personalului i-au nsuit aceste reguli. O copie a manualului de siguran i operaiuni trebuie s existe permanent n laborator pentru a putea fi consultat n orice moment.

4. Trebuie s existe un program de dezinsecie i deratizare. 5. Trebuie asigurate, n caz de necesitate, pentru toi membrii personalului, o evaluare

medical adecvat, supraveghere i tratament, i trebuie inute evidene medicale adecvate.

3.2. Conceperea structurii i facilitilor laboratorului

n proiectarea laboratorului i stabilirea efecturii anumitor activiti n spaiul acestuia, se va acorda o atenie deosebit situaiilor despre care se tie c ridic probleme de siguran. Acestea sunt: 1. Formarea de aerosoli 2. Manipularea de volume mari i/sau de concentraii ridicate de microorganisme 3. Supraaglomerarea spaiului de lucru sau acumularea de prea multe echipamente



8

PERICOL BIOLOGIC

ACCESUL PERMIS NUMAI PERSONALULUI AUTORIZAT

Nivel de biosiguran .................................................................... Responsabil .................................................................................. n caz de urgen telefonai .......................................................... Tel. serviciu ............................ Tel. acas ....................................

Autorizarea pentru acces se obine de la responsabilul nominalizat mai sus

Figura 1. Sigla de pericol biologic

3.1.2. Protecia individual a personalului 1. Salopetele de laborator, halatele sau uniformele trebuie purtate tot timpul ct se lucreaz n

laborator. 2. Mnui corespunztoare de protecie trebuie purtate n timpul tuturor procedurilor care pot

implica contactul direct sau accidental cu snge, cu alte umori sau fluide ale organismului, cu alte materiale potenial infecioase sau cu animale infectate. Dup utilizare, mnuile se scot aseptic i se spal minile.

3. Personalul trebuie s se spele pe mini dup manipularea materialelor infecioase i a animalelor infectate i nainte de prsirea zonei de lucru a laboratorului.

4. Ochelarii de protecie, ecranele de protecie facial sau alte dispozitive de protecie trebuie purtate ori de cte ori este necesar protecia ochilor i a feei de stropi, obiecte impactante i surse artificiale de radiaii ultraviolete.

5. Este interzis purtarea mbrcminii protectoare de laborator n afara laboratorului, de exemplu n cantine, camere de oficiu, biblioteci, toalete, etc.

6. nclmintea decupat n partea din fa (sandale) este improprie purtrii n laborator. 7. Consumul de alimente, buturi, machiajul i manipularea lentilelor de contact sunt interzise

n zonele de lucru ale laboratorului. 8. Depozitarea de alimente sau buturi oriunde n zona de lucru a laboratorului este interzis. 9. mbrcmintea i nclmintea de protecie ce a fost utilizat n laborator nu trebuie s fie

depozitat n aceleai dulapuri cu mbrcmintea i nclmintea de strad.

3.1.3. Procedurile 1. Pipetarea cu gura este strict interzis. 2. Nici un material nu trebuie dus la gur. Etichetele nu trebuie umectate cu limba nainte de

lipire. 3. Toate procedurile tehnice trebuie efectuate ntr-un mod care s reduc la minimum

formarea de aerosoli i picturi.


4. Folosirea acelor i seringilor hipodermice trebuie limitat. Ele nu trebuie folosite ca substituente ale dispozitivelor de pipetare sau pentru oricare alt manoper ce nu reprezint injecii parenterale sau aspirarea de fluide de la animalele de laborator.

5. Toate stropirile accidentale i expunerile evidente sau posibile cu material infecios trebuie raportate responsabilului laboratorului. Se va pstra o eviden scris a acestor accidente i incidente.

6. Se va elabora i aplica o procedur scris pentru curarea-inactivarea substanelor vrsate.

7. Lichidele contaminate trebuie decontaminate (chimic sau fizic) naintea evacurii lor n reeaua de canalizare. n funcie de riscul evaluat se poate dezvolta un sistem de tratare a acestor lichide.

8. Documentele ce urmeaz a fi scoase din laborator trebuie s fie protejate pe toat perioada ct se afl n laborator, pentru a nu fi contaminate.

3.1.4. Zonele de lucru ale laboratorului 1. n laborator trebuie pstrat curenia i ordinea, eliminndu-se toate materialele care nu

sunt necesare pentru munca desfurat n laborator. 2. Suprafeele de lucru trebuie decontaminate dup fiecare vrsare de materiale potenial

periculoase precum i la sfritul zilei de lucru. 3. Toate materialele contaminate, probele i culturile, trebuie decontaminate nainte de a fi

ndeprtate sau curate pentru refolosire. 4. Ambalarea i transportul trebuie s respecte reglementrile naionale i/sau internaionale

n vigoare. 5. Ferestrele ce pot fi deschise trebuie prevzute cu plase/ecrane pentru insecte.

3.1.5. Managementul biosiguranei 1. eful de laborator (persoana care poart n mod direct responsabilitatea laboratorului) are

obligaia s asigure elaborarea i adoptarea unui plan de management al biosiguranei i ale unui manual de siguran i operaiuni.

2. Responsabilul cu activitatea laboratorului (subordonat efului laboratorului) trebuie s asigure instruirea periodic a personalului laboratorului n domeniul siguranei.

3. Personalul trebuie avertizat asupra pericolelor speciale i are obligaia s citeasc manualul de siguran i operaiuni i s respecte procedurile i practicile standard. Responsabilul laboratorului trebuie s se asigure c toi membrii personalului i-au nsuit aceste reguli. O copie a manualului de siguran i operaiuni trebuie s existe permanent n laborator pentru a putea fi consultat n orice moment.

4. Trebuie s existe un program de dezinsecie i deratizare. 5. Trebuie asigurate, n caz de necesitate, pentru toi membrii personalului, o evaluare

medical adecvat, supraveghere i tratament, i trebuie inute evidene medicale adecvate.

3.2. Conceperea structurii i facilitilor laboratorului

n proiectarea laboratorului i stabilirea efecturii anumitor activiti n spaiul acestuia, se va acorda o atenie deosebit situaiilor despre care se tie c ridic probleme de siguran. Acestea sunt: 1. Formarea de aerosoli 2. Manipularea de volume mari i/sau de concentraii ridicate de microorganisme 3. Supraaglomerarea spaiului de lucru sau acumularea de prea multe echipamente

3. laboratoarele de baz nivelele de biosiguran 1 i 2

10

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN 3(1758 LABORATOARE

1

4. Infestarea cu roztoare i insecte 5. Accesul neautorizat 6. Circuit de lucru: folosirea anumitor probe sau a unor reactivi specifici.

Exemple de design pentru laboratoare cu Nivel de biosiguran 1 i 2 sunt prezentate n Figura 2 i, respectiv, 3.

Figura 2. Laborator cu nivel de biosiguran 1 (prin amabilitatea CUH2A, Princeton, NJ, USA).

3.2.1. Caracteristici de proiectare: 1. Trebuie asigurat un spaiu suficient pentru desfurarea n siguran a muncii de laborator i pentru curenie i ntreinere

2. Pereii, tavanele i pavimentele trebuie s fie netede, uor de curat, impermeabile la lichide i rezistente la substanele chimice i dezinfectantele folosite uzual n laborator. Pavimentele nu trebuie s fie alunecoase.

3. Suprafaa meselor de lucru trebuie s fie impermeabil la ap, rezistent la dezinfectante, acizi, baze, solveni organici i la cldur.

4. Iluminatul trebuie s fie adecvat pentru desfurarea tuturor activitilor. Reflexiile i strlucirile nedorite trebuie evitate.

5. Mobilierul de laborator trebuie s fie rezistent. Spaiile deschise ntre i sub mese, hote i echipamente trebuie s fie accesibile pentru curenie.

6. Trebuie prevzute spaii de depozitare adecvate pentru materialele de folosin imediat, prevenind astfel aglomerarea acestora pe mesele de lucru i n spaiile libere dintre acestea. Trebuie de asemenea prevzute spaii suplimentare pentru depozitarea pe termen lung, localizate corespunztor n afara zonelor de lucru.

7. Trebuie asigurate spaii i faciliti adecvate pentru manipularea i depozitarea n siguran a solvenilor, materialelor radioactive, a gazelor comprimate i lichefiate.



Procedurile care genereaz aerosoli se execut n Hota de siguran biologic. Uile sunt meninute nchise i marcate cu semne de pericol adecvate. Deeurile potenial contaminate sunt colectate separat de restul deeurilor.

8. Spaiile pentru pstrarea mbrcminii i nclmintei de strad i a obiectelor personale

trebuie asigurate n afara zonelor de lucru. 9. Spaiile pentru mncat, but i odihn trebuie asigurate n afara zonelor de lucru. 10. Chiuvete cu ap curent pentru splarea minilor, trebuie s existe n fiecare ncpere a

laboratorului, preferabil lng ua de ieire. 11. Uile trebuie s aib geamuri sau vizoare, s fie conforme cu normele de protecie contra

incendiilor i, de preferat, s se nchid singure. 12. Pentru Nivelul de biosiguran 2 trebuie ca un autoclav sau alte mijloace de decontaminare

s fie accesibile n imediata apropiere a laboratorului. 13. Sistemele de securitate trebuie s cuprind protecia mpotriva focului, urgenelor electrice,

s prevad duuri de urgen i faciliti pentru splarea ochilor. 14. Trebuie s existe zone sau camere de prim ajutor echipate adecvat i accesibile (vezi Anexa 1). 15. La proiectarea de faciliti noi, trebuie luat n considerare asigurarea de sisteme mecanice

de ventilaie, care s asigure un flux de aer direcionat spre interior, fr recirculare. Dac nu exista ventilaie mecanic, ferestrele trebuie s se poat deschide i trebuie prevzute cu plase pentru insecte.

16. Aprovizionarea cu ap curent de bun calitate este esenial. Nu trebuie s existe interconectri ale surselor de ap ale laboratorului cu cele de aprovizionare cu ap potabil. Un dispozitiv anti-reflux trebuie s protejeze sistemul public de aprovizionare cu ap.


11


1

4. Infestarea cu roztoare i insecte 5. Accesul neautorizat 6. Circuit de lucru: folosirea anumitor probe sau a unor reactivi specifici.

Exemple de design pentru laboratoare cu Nivel de biosiguran 1 i 2 sunt prezentate n Figura 2 i, respectiv, 3.


3.2.1. Caracteristici de proiectare: 1. Trebuie asigurat un spaiu suficient pentru desfurarea n siguran a muncii de laborator i pentru curenie i ntreinere

2. Pereii, tavanele i pavimentele trebuie s fie netede, uor de curat, impermeabile la lichide i rezistente la substanele chimice i dezinfectantele folosite uzual n laborator. Pavimentele nu trebuie s fie alunecoase.

3. Suprafaa meselor de lucru trebuie s fie impermeabil la ap, rezistent la dezinfectante, acizi, baze, solveni organici i la cldur.

4. Iluminatul trebuie s fie adecvat pentru desfurarea tuturor activitilor. Reflexiile i strlucirile nedorite trebuie evitate.

5. Mobilierul de laborator trebuie s fie rezistent. Spaiile deschise ntre i sub mese, hote i echipamente trebuie s fie accesibile pentru curenie.

6. Trebuie prevzute spaii de depozitare adecvate pentru materialele de folosin imediat, prevenind astfel aglomerarea acestora pe mesele de lucru i n spaiile libere dintre acestea. Trebuie de asemenea prevzute spaii suplimentare pentru depozitarea pe termen lung, localizate corespunztor n afara zonelor de lucru.

7. Trebuie asigurate spaii i faciliti adecvate pentru manipularea i depozitarea n siguran a solvenilor, materialelor radioactive, a gazelor comprimate i lichefiate.



Procedurile care genereaz aerosoli se execut n Hota de siguran biologic. Uile sunt meninute nchise i marcate cu semne de pericol adecvate. Deeurile potenial contaminate sunt colectate separat de restul deeurilor.

8. Spaiile pentru pstrarea mbrcminii i nclmintei de strad i a obiectelor personale

trebuie asigurate n afara zonelor de lucru. 9. Spaiile pentru mncat, but i odihn trebuie asigurate n afara zonelor de lucru. 10. Chiuvete cu ap curent pentru splarea minilor, trebuie s existe n fiecare ncpere a

laboratorului, preferabil lng ua de ieire. 11. Uile trebuie s aib geamuri sau vizoare, s fie conforme cu normele de protecie contra

incendiilor i, de preferat, s se nchid singure. 12. Pentru Nivelul de biosiguran 2 trebuie ca un autoclav sau alte mijloace de decontaminare

s fie accesibile n imediata apropiere a laboratorului. 13. Sistemele de securitate trebuie s cuprind protecia mpotriva focului, urgenelor electrice,

s prevad duuri de urgen i faciliti pentru splarea ochilor. 14. Trebuie s existe zone sau camere de prim ajutor echipate adecvat i accesibile (vezi Anexa 1). 15. La proiectarea de faciliti noi, trebuie luat n considerare asigurarea de sisteme mecanice

de ventilaie, care s asigure un flux de aer direcionat spre interior, fr recirculare. Dac nu exista ventilaie mecanic, ferestrele trebuie s se poat deschide i trebuie prevzute cu plase pentru insecte.

16. Aprovizionarea cu ap curent de bun calitate este esenial. Nu trebuie s existe interconectri ale surselor de ap ale laboratorului cu cele de aprovizionare cu ap potabil. Un dispozitiv anti-reflux trebuie s protejeze sistemul public de aprovizionare cu ap.


12


1

17. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de curent electric i un sistem de iluminare pentru situaiile de urgen care s faciliteze ieirea din laborator. Un generator de rezerv este de dorit pentru susinerea echipamentelor eseniale (incubatoare, hote de biosiguran, congelatoare, etc.) i pentru ventilarea cutilor cu animale.

18. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de gaz. Buna ntreinere a instalaiei este obligatorie.

19. Laboratoarele i cldirile biobazelor sunt uneori inta vandalizrilor. Trebuie avute n vedere securitatea fizic i mpotriva incendiilor. Uile solide, ferestrele protejate i eliberarea controlat a cheilor de acces sunt obligatorii. Alte msuri trebuie luate n considerare i aplicate dac este necesar pentru creterea siguranei.

3.3. Echipamentele de laborator mpreun cu procedurile i practicile corecte, utilizarea echipamentelor de siguran

contribuie la reducerea riscului. Acest capitol trateaz principiile de baz legate de echipamentele utilizate n toate laboratoarele, indiferent de nivelul de biosiguran. Exigenele legate de echipamentul de laborator pentru nivelele superioare de biosiguran sunt tratate n capitolele respective. eful de laborator are obligaia ca, dup consultarea cu responsabilul cu biosigurana i colectivul de siguran, s asigure ca echipamentul adecvat s fie procurat i folosit corespunztor. Echipamentul va fi ales lund n considerare cteva principii generale, de exemplu: 1. S fie conceput astfel nct s previn sau s limiteze contactul dintre operator i

materialul infecios 2. S fie confecionat din materiale impermeabile la lichide, rezistente la coroziune i

corespunztoare ca structur. 3. S fie confecionat astfel nct s nu aib asperiti, margini ascuite i pri mobile

neprotejate 4. S fie proiectat, construit i instalat pentru a facilita operarea simpl i ntreinerea,

curarea, decontaminarea i testarea n vederea certificrii; ori de cte ori este posibil, se va evita utilizarea sticlriei i a altor materiale casante.

Este util s se consulte n detaliu documentaia privind performanele i specificaiile

de construcie ale echipamentelor pentru a dobndi convingerea c prezint caracteristicile de siguran necesare (vezi Capitolele 10 i 11). 3.3.1. Echipamente eseniale pentru asigurarea biosiguranei 1. Dispozitive de pipetare, pentru a evita pipetarea cu gura. Sunt disponibile diverse modele. 2. Hotele de biosiguran, ce trebuie folosite ori de cte ori:

- se manipuleaz materiale infecioase; aceste materiale pot fi centrifugate n spaiul deschis al laboratorului dac se folosesc cupe de centrifug cu dispozitiv de securizare i dac sunt introduse i descrcate ntr-o hot de biosiguran

- exist risc crescut de infecii aerogene - se folosesc proceduri cu potenial ridicat de producere de aerosoli: centrifugarea,

mojararea, secionarea, agitarea sau mixarea viguroas, dezintegrarea sonic, deschiderea containerelor cu material infecios cu presiune intern diferit de presiunea ambiant, inocularea intranazal a animalelor i recoltarea de esuturi infectate de la animale i ou, etc.


1

3. Anse de transfer de unic folosin din plastic. Alternativ, n scopul reducerii producerii de aerosoli, n interiorul hotei de biosiguran se pot folosi incineratoare electrice pentru anse de transfer.

4. Tuburi i flacoane cu capace prevzute cu filet. 5. Autoclave sau alte mijloace folosite pentru decontaminarea materialului infecios 6. Pipete Pasteur de unic folosin din plastic, ori de cte ori este posibil, evitnd utilizarea

celor din sticl 7. Echipamentele precum autoclavele i hotele de biosiguran trebuie validate cu metode

adecvate nainte de a fi introduse n uz. Acestea trebuie recertificate la intervale regulate de timp, n acord cu instruciunile productorului (vezi Capitolul 7).

3.4. Supravegherea strii de sntate a personalului Autoritatea angajatoare, prin eful de laborator, este responsabil de asigurarea unei

supravegheri adecvate a strii de sntate a personalului laboratorului. Obiectivul acestei supravegheri este monitorizarea strii de sntate n relaie cu factorul ocupaional. Activitile ce trebuie desfurate pentru ndeplinirea acestor obiective sunt: 1. Imunizarea activ i pasiv ori de cte ori acest lucru este indicat (vezi Anexa 2) 2. Facilitarea depistrii precoce a infeciilor dobndite n laborator 3. Excluderea indivizilor cu susceptibilitate crescut, ca de exemplu femeile nsrcinate sau

persoanele imunodeprimate, din locurile sau activitile de laborator cu periculozitate crescut

4. Asigurarea personalului cu echipamente de protecie i proceduri eficace. 3.4.1. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz microorganisme la Nivelul de biosiguran 1

Experiena activitii n acest tip de laboratoare arat c, n cazul manipulrii microorganismelor la acest nivel, este improbabil producerea de mbolnviri ale oamenilor sau de afeciuni ale animalelor cu importan sub raport veterinar. Se recomand, totui, efectuarea unui control medical nainte de angajare la tot personalul, cu nregistrarea antecedentelor medicale. Se recomand raportarea prompt a strilor de boal sau a accidentelor de laborator, iar ntreg personalul trebuie s fie contient de importana respectrii practicilor corecte microbiologice. 3.4.2. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz microorganisme la Nivelul de biosiguran 2 1. Este necesar un control medical nainte de angajare. Ar trebui nregistrate antecedentele

personale medicale i evaluat starea de sntate n relaie cu factorul ocupaional. 2. nregistrrile privind mbolnvirile i absenele ar trebui pstrate de ctre eful laboratorului 3. Femeile de vrst fertil ar trebui informate cu privire la riscul expunerii ftului prin factor

ocupaional la anumite microorganisme (ex. virusul rubeolic). Precauiile pentru protejarea ftului variaz n funcie de microorganismele la care pot fi expuse viitoarele mame.

3.5. Pregtirea personalului Erorile umane i tehnica deficitar pot compromite i cele mai bune reguli i bariere de

siguran menite a proteja personalul laboratorului. Pe de alt parte, un personal contient de exigenele impuse de regulile de siguran, bine informat pentru recunoaterea i stpnirea pericolelor din laborator, este cheia prevenirii producerii acestor infecii, a incidentelor i


13


1

17. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de curent electric i un sistem de iluminare pentru situaiile de urgen care s faciliteze ieirea din laborator. Un generator de rezerv este de dorit pentru susinerea echipamentelor eseniale (incubatoare, hote de biosiguran, congelatoare, etc.) i pentru ventilarea cutilor cu animale.

18. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de gaz. Buna ntreinere a instalaiei este obligatorie.

19. Laboratoarele i cldirile biobazelor sunt uneori inta vandalizrilor. Trebuie avute n vedere securitatea fizic i mpotriva incendiilor. Uile solide, ferestrele protejate i eliberarea controlat a cheilor de acces sunt obligatorii. Alte msuri trebuie luate n considerare i aplicate dac este necesar pentru creterea siguranei.

3.3. Echipamentele de laborator mpreun cu procedurile i practicile corecte, utilizarea echipamentelor de siguran

contribuie la reducerea riscului. Acest capitol trateaz principiile de baz legate de echipamentele utilizate n toate laboratoarele, indiferent de nivelul de biosiguran. Exigenele legate de echipamentul de laborator pentru nivelele superioare de biosiguran sunt tratate n capitolele respective. eful de laborator are obligaia ca, dup consultarea cu responsabilul cu biosigurana i colectivul de siguran, s asigure ca echipamentul adecvat s fie procurat i folosit corespunztor. Echipamentul va fi ales lund n considerare cteva principii generale, de exemplu: 1. S fie conceput astfel nct s previn sau s limiteze contactul dintre operator i

materialul infecios 2. S fie confecionat din materiale impermeabile la lichide, rezistente la coroziune i

corespunztoare ca structur. 3. S fie confecionat astfel nct s nu aib asperiti, margini ascuite i pri mobile

neprotejate 4. S fie proiectat, construit i instalat pentru a facilita operarea simpl i ntreinerea,

curarea, decontaminarea i testarea n vederea certificrii; ori de cte ori este posibil, se va evita utilizarea sticlriei i a altor materiale casante.

Este util s se consulte n detaliu documentaia privind performanele i specificaiile

de construcie ale echipamentelor pentru a dobndi convingerea c prezint caracteristicile de siguran necesare (vezi Capitolele 10 i 11). 3.3.1. Echipamente eseniale pentru asigurarea biosiguranei 1. Dispozitive de pipetare, pentru a evita pipetarea cu gura. Sunt disponibile diverse modele. 2. Hotele de biosiguran, ce trebuie folosite ori de cte ori:

- se manipuleaz materiale infecioase; aceste materiale pot fi centrifugate n spaiul deschis al laboratorului dac se folosesc cupe de centrifug cu dispozitiv de securizare i dac sunt introduse i descrcate ntr-o hot de biosiguran

- exist risc crescut de infecii aerogene - se folosesc proceduri cu potenial ridicat de producere de aerosoli: centrifugarea,

mojararea, secionarea, agitarea sau mixarea viguroas, dezintegrarea sonic, deschiderea containerelor cu material infecios cu presiune intern diferit de presiunea ambiant, inocularea intranazal a animalelor i recoltarea de esuturi infectate de la animale i ou, etc.


1

3. Anse de transfer de unic folosin din plastic. Alternativ, n scopul reducerii producerii de aerosoli, n interiorul hotei de biosiguran se pot folosi incineratoare electrice pentru anse de transfer.

4. Tuburi i flacoane cu capace prevzute cu filet. 5. Autoclave sau alte mijloace folosite pentru decontaminarea materialului infecios 6. Pipete Pasteur de unic folosin din plastic, ori de cte ori este posibil, evitnd utilizarea

celor din sticl 7. Echipamentele precum autoclavele i hotele de biosiguran trebuie validate cu metode

adecvate nainte de a fi introduse n uz. Acestea trebuie recertificate la intervale regulate de timp, n acord cu instruciunile productorului (vezi Capitolul 7).

3.4. Supravegherea strii de sntate a personalului Autoritatea angajatoare, prin eful de laborator, este responsabil de asigurarea unei

supravegheri adecvate a strii de sntate a personalului laboratorului. Obiectivul acestei supravegheri este monitorizarea strii de sntate n relaie cu factorul ocupaional. Activitile ce trebuie desfurate pentru ndeplinirea acestor obiective sunt: 1. Imunizarea activ i pasiv ori de cte ori acest lucru este indicat (vezi Anexa 2) 2. Facilitarea depistrii precoce a infeciilor dobndite n laborator 3. Excluderea indivizilor cu susceptibilitate crescut, ca de exemplu femeile nsrcinate sau

persoanele imunodeprimate, din locurile sau activitile de laborator cu periculozitate crescut

4. Asigurarea personalului cu echipamente de protecie i proceduri eficace. 3.4.1. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz microorganisme la Nivelul de biosiguran 1

Experiena activitii n acest tip de laboratoare arat c, n cazul manipulrii microorganismelor la acest nivel, este improbabil producerea de mbolnviri ale oamenilor sau de afeciuni ale animalelor cu importan sub raport veterinar. Se recomand, totui, efectuarea unui control medical nainte de angajare la tot personalul, cu nregistrarea antecedentelor medicale. Se recomand raportarea prompt a strilor de boal sau a accidentelor de laborator, iar ntreg personalul trebuie s fie contient de importana respectrii practicilor corecte microbiologice. 3.4.2. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz microorganisme la Nivelul de biosiguran 2 1. Este necesar un control medical nainte de angajare. Ar trebui nregistrate antecedentele

personale medicale i evaluat starea de sntate n relaie cu factorul ocupaional. 2. nregistrrile privind mbolnvirile i absenele ar trebui pstrate de ctre eful laboratorului 3. Femeile de vrst fertil ar trebui informate cu privire la riscul expunerii ftului prin factor

ocupaional la anumite microorganisme (ex. virusul rubeolic). Precauiile pentru protejarea ftului variaz n funcie de microorganismele la care pot fi expuse viitoarele mame.

3.5. Pregtirea personalului Erorile umane i tehnica deficitar pot compromite i cele mai bune reguli i bariere de

siguran menite a proteja personalul laboratorului. Pe de alt parte, un personal contient de exigenele impuse de regulile de siguran, bine informat pentru recunoaterea i stpnirea pericolelor din laborator, este cheia prevenirii producerii acestor infecii, a incidentelor i


14


1

accidentelor. n acest scop, instruirea continu la locul de munc privind msurile de siguran este esenial. Un program eficace de siguran ncepe cu conducerea laboratorului, care trebuie s se asigure c practicile i procedurile de siguran sunt integrate n instruirea de baz a salariailor. Instructajul n ceea ce privete msurile de siguran trebuie s fie parte integrant a instruiriii noilor salariai din laborator. Salariailor trebuie s li se prezinte codul de practici i reglementarile locale, inclusiv manualul de siguran i de operaiuni. Se vor lua msuri care s demonstreze c salariaii le-au citit i neles, spre exemplu, prin semntur. Responsabilii laboratorului joac un rol cheie n pregtirea personalului n ceea ce privete tehnicile corecte de laborator. Responsabilul cu biosigurana poate s sprijine procesul de instruire prin punerea la dispoziie a unei documentaii specifice i a altor mijloace ajuttoare (vezi Capitolul 21). Instruirea personalului ar trebui s cuprind ntotdeauna informaii despre metodele sigure n cazul procedurilor cu risc crescut cu care ntreg personalul laboratorului se ntlnete n mod curent i care implic : 1. Riscul de inhalare (ex. producerea de aerosoli) cu ocazia folosirii anselor, nsmnrii

plcilor cu agar, pipetrii, etalrii frotiurilor, deschiderii recipientelor ce conin culturi, recoltrii de probe de snge / ser, centrifugrii, etc.

2. Riscul de ingerare, cu ocazia manipularii probelor, frotiurilor i culturilor 3. Riscul de expunere percutan, prin folosirea seringilor i acelor 4. Muscturi i zgrieturi n cazul manipulrii animalelor 5. Manipularea sngelui i a altor produse patologice potenial periculoase 6. Decontaminarea i eliminarea materialelor infecioase

3.6. Manipularea deeurilor Se consider deeuri toate materialele care se arunc. n laboratoare, n desfurarea activitii cotidiene, decontaminarea deeurilor i

eliminarea final a acestora sunt strns legate. Un numr foarte mic de materiale contaminate necesit ndeprtarea efectiv din laborator sau distrugerea. Majoritatea sticlriei, instrumentelor i articolelor de mbrcminte sunt refolosite sau reciclate. Principiul general ce trebuie s funcioneze este c toate materialele infecioase vor fi decontaminate, autoclavate sau incinerate n laborator.

Principalele probleme care se pun, nainte de eliminarea oricriu obiect sau material din laboratoarele ce lucreaz cu microorganisme potenial infecioase sau esuturi de la animale, sunt: 1. Au fost obiectele sau materialele respective eficient decontaminate sau dezinfectate printr-

o procedur autorizat? 2. Dac nu, au fost ele ambalate ntr-un mod autorizat pentru incinerare imediat la faa

locului sau pentru transfer ntr-o alt locaie cu posibiliti de incinerare? 3. Aruncarea obiectelor sau materialelor decontaminate implic eventual alte pericole

adiionale, biologice sau de alt tip, pentru cei care ndeplinesc procedurile de eliminare sau care ar putea veni n contact cu obiectele eliminate n afara perimetrului respectiv?

3.6.1. Decontaminarea Autoclavarea cu abur este metoda de elecie pentru toate procesele de

decontaminare. Materialele care urmeaz s fie decontaminate i eliminate vor fi puse n containere adecvate (ex. saci din plastic autoclavabil, cu coduri de culori care indic destinatia coninutului acestora pentru autoclavare i/sau incinerare). Pot fi luate n consideraie i


1

metode alternative doar dac acestea ndeprteaz i/sau omoar microorganismele (pentru mai multe detalii vezi Capitolul 14). 3.6.2. Procedurile de manipulare i eliminare a materialelor contaminate i a deeurilor

Trebuie adoptat un sistem de identificare i de separare a materialelor infecioase i a containerelor respective. Vor fi obligatoriu respectate reglementrile naionale i internaionale n domeniu. Categoriile care se includ sunt urmtoarele: 1. Deeurile necontaminate (neinfecioase) care pot fi refolosite, reciclate sau eliminate ca

deeuri generale sau menajere 2. Obiectele ascuite (tietoare-neptoare) contaminate (ex. ace hipodermice, bisturie, cuite i cioburi de sticl); acestea vor fi ntotdeauna colectate n containere rezistente la nepare-tiere, prevzute cu capace i vor fi tratate ca infecioase.

3. Materialul contaminat destinat decontaminrii prin autoclavare urmat de splare i refolosire sau reciclare.

4. Materialul contaminat destinat autoclavrii i eliminrii. 5. Materialul contaminat destinat incinerrii directe.

Obiectele ascuite

Dup utilizare, acele hipodermice nu trebuie reacoperite, tiate sau detaate din seringile de unic folosin. ntregul ansamblu trebuie plasat n containerul pentru obiecte ascuite. Seringile de unic folosin, folosite separat sau cu ace, trebuie plasate n containere i incinerate, cu autoclavare prealabil dac este necesar.

Containerele pentru obiecte ascuite (tietoare-neptoare) trebuie s fie rezistente la nepare-tiere i nu trebuie umplute la capacitatea maxim. Cnd sunt umplute pe , aceste containere trebuie plasate n containere pentru "deeuri infecioase" i incinerate, cu autoclavare prealabil dac practica laboratorului o necesit. Containerele pentru obiecte tietoare-neptoare nu trebuie aruncate n mediul nconjurtor.

Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate autoclavrii i refolosirii

Se interzice curarea prealabil a oricrui material contaminat (potenial infecios) destinat autoclavrii i refolosirii. Orice curare sau reparaie trebuie fcut doar dup autoclavare sau dezinfecie.

Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate eliminrii

n afar de obiectele tietoare-neptoare, care au fost tratate mai sus, toate materialele contaminate (potenial infecioase) trebuie autoclavate n containere etane, de exemplu saci de plastic autoclavabil, colorai conform unui cod de culori, nainte de a fi eliminate. Dup autoclavare, materialul poate fi plasat n containere de transfer ctre incinerator. Dac este posibil, materialele rezultate din activitile de asisten medical nu trebuie eliminate n mediul extern, la rampele de depozitare a deeurilor, nici dup decontaminare. Dac exist un incinerator disponibil la nivelul laboratorului, autoclavarea se poate omite: deeurile contaminate trebuie plasate n containere speciale (de exemplu, saci cu culori corespunztoare unui cod) i transportate direct la incinerator. Containerele de transfer refolosibile trebuie s nu prezinte scurgeri i s aib capace etane.

Recipiente de colectare, preferabil incasabile, trebuie plasate la fiecare punct de lucru. Cnd se folosete un dezinfectant, deeurile materiale trebuie s rmn n contact direct cu acesta (ex. neprotejate de bule de aer) un interval de timp corespunztor, n conformitate cu instruciunile de folosire a dezinfectantului utilizat (vezi Capitolul 14). Containerele de colectare i transport vor fi decontaminate i splate nainte de refolosire.


15


1

accidentelor. n acest scop, instruirea continu la locul de munc privind msurile de siguran este esenial. Un program eficace de siguran ncepe cu conducerea laboratorului, care trebuie s se asigure c practicile i procedurile de siguran sunt integrate n instruirea de baz a salariailor. Instructajul n ceea ce privete msurile de siguran trebuie s fie parte integrant a instruiriii noilor salariai din laborator. Salariailor trebuie s li se prezinte codul de practici i reglementarile locale, inclusiv manualul de siguran i de operaiuni. Se vor lua msuri care s demonstreze c salariaii le-au citit i neles, spre exemplu, prin semntur. Responsabilii laboratorului joac un rol cheie n pregtirea personalului n ceea ce privete tehnicile corecte de laborator. Responsabilul cu biosigurana poate s sprijine procesul de instruire prin punerea la dispoziie a unei documentaii specifice i a altor mijloace ajuttoare (vezi Capitolul 21). Instruirea personalului ar trebui s cuprind ntotdeauna informaii despre metodele sigure n cazul procedurilor cu risc crescut cu care ntreg personalul laboratorului se ntlnete n mod curent i care implic : 1. Riscul de inhalare (ex. producerea de aerosoli) cu ocazia folosirii anselor, nsmnrii

plcilor cu agar, pipetrii, etalrii frotiurilor, deschiderii recipientelor ce conin culturi, recoltrii de probe de snge / ser, centrifugrii, etc.

2. Riscul de ingerare, cu ocazia manipularii probelor, frotiurilor i culturilor 3. Riscul de expunere percutan, prin folosirea seringilor i acelor 4. Muscturi i zgrieturi n cazul manipulrii animalelor 5. Manipularea sngelui i a altor produse patologice potenial periculoase 6. Decontaminarea i eliminarea materialelor infecioase

3.6. Manipularea deeurilor Se consider deeuri toate materialele care se arunc. n laboratoare, n desfurarea activitii cotidiene, decontaminarea deeurilor i

eliminarea final a acestora sunt strns legate. Un numr foarte mic de materiale contaminate necesit ndeprtarea efectiv din laborator sau distrugerea. Majoritatea sticlriei, instrumentelor i articolelor de mbrcminte sunt refolosite sau reciclate. Principiul general ce trebuie s funcioneze este c toate materialele infecioase vor fi decontaminate, autoclavate sau incinerate n laborator.

Principalele probleme care se pun, nainte de eliminarea oricriu obiect sau material din laboratoarele ce lucreaz cu microorganisme potenial infecioase sau esuturi de la animale, sunt: 1. Au fost obiectele sau materialele respective eficient decontaminate sau dezinfectate printr-

o procedur autorizat? 2. Dac nu, au fost ele ambalate ntr-un mod autorizat pentru incinerare imediat la faa

locului sau pentru transfer ntr-o alt locaie cu posibiliti de incinerare? 3. Aruncarea obiectelor sau materialelor decontaminate implic eventual alte pericole

adiionale, biologice sau de alt tip, pentru cei care ndeplinesc procedurile de eliminare sau care ar putea veni n contact cu obiectele eliminate n afara perimetrului respectiv?

3.6.1. Decontaminarea Autoclavarea cu abur este metoda de elecie pentru toate procesele de

decontaminare. Materialele care urmeaz s fie decontaminate i eliminate vor fi puse n containere adecvate (ex. saci din plastic autoclavabil, cu coduri de culori care indic destinatia coninutului acestora pentru autoclavare i/sau incinerare). Pot fi luate n consideraie i


1

metode alternative doar dac acestea ndeprteaz i/sau omoar microorganismele (pentru mai multe detalii vezi Capitolul 14). 3.6.2. Procedurile de manipulare i eliminare a materialelor contaminate i a deeurilor

Trebuie adoptat un sistem de identificare i de separare a materialelor infecioase i a containerelor respective. Vor fi obligatoriu respectate reglementrile naionale i internaionale n domeniu. Categoriile care se includ sunt urmtoarele: 1. Deeurile necontaminate (neinfecioase) care pot fi refolosite, reciclate sau eliminate ca

deeuri generale sau menajere 2. Obiectele ascuite (tietoare-neptoare) contaminate (ex. ace hipodermice, bisturie, cuite i cioburi de sticl); acestea vor fi ntotdeauna colectate n containere rezistente la nepare-tiere, prevzute cu capace i vor fi tratate ca infecioase.

3. Materialul contaminat destinat decontaminrii prin autoclavare urmat de splare i refolosire sau reciclare.

4. Materialul contaminat destinat autoclavrii i eliminrii. 5. Materialul contaminat destinat incinerrii directe.

Obiectele ascuite

Dup utilizare, acele hipodermice nu trebuie reacoperite, tiate sau detaate din seringile de unic folosin. ntregul ansamblu trebuie plasat n containerul pentru obiecte ascuite. Seringile de unic folosin, folosite separat sau cu ace, trebuie plasate n containere i incinerate, cu autoclavare prealabil dac este necesar.

Containerele pentru obiecte ascuite (tietoare-neptoare) trebuie s fie rezistente la nepare-tiere i nu trebuie umplute la capacitatea maxim. Cnd sunt umplute pe , aceste containere trebuie plasate n containere pentru "deeuri infecioase" i incinerate, cu autoclavare prealabil dac practica laboratorului o necesit. Containerele pentru obiecte tietoare-neptoare nu trebuie aruncate n mediul nconjurtor.

Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate autoclavrii i refolosirii

Se interzice curarea prealabil a oricrui material contaminat (potenial infecios) destinat autoclavrii i refolosirii. Orice curare sau reparaie trebuie fcut doar dup autoclavare sau dezinfecie.

Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate eliminrii

n afar de obiectele tietoare-neptoare, care au fost tratate mai sus, toate materialele contaminate (potenial infecioase) trebuie autoclavate n containere etane, de exemplu saci de plastic autoclavabil, colorai conform unui cod de culori, nainte de a fi eliminate. Dup autoclavare, materialul poate fi plasat n containere de transfer ctre incinerator. Dac este posibil, materialele rezultate din activitile de asisten medical nu trebuie eliminate n mediul extern, la rampele de depozitare a deeurilor, nici dup decontaminare. Dac exist un incinerator disponibil la nivelul laboratorului, autoclavarea se poate omite: deeurile contaminate trebuie plasate n containere speciale (de exemplu, saci cu culori corespunztoare unui cod) i transportate direct la incinerator. Containerele de transfer refolosibile trebuie s nu prezinte scurgeri i s aib capace etane.

Recipiente de colectare, preferabil incasabile, trebuie plasate la fiecare punct de lucru. Cnd se folosete un dezinfectant, deeurile materiale trebuie s rmn n contact direct cu acesta (ex. neprotejate de bule de aer) un interval de timp corespunztor, n conformitate cu instruciunile de folosire a dezinfectantului utilizat (vezi Capitolul 14). Containerele de colectare i transport vor fi decontaminate i splate nainte de refolosire.


16


Incinerarea deeurilor contaminate trebuie sa se fac n conformitate cu prevederile autoritilor de sntate public i de protecie a mediului, ca i cu normele de biosiguran din laborator (vezi seciunea despre incinerare n Capitolul 14).

3.7. Sigurana chimic, mpotriva incendiilor, electric, mpotriva radiaiilor i a echipamentelor

O bre/discontinuitate n sistemul de securizare al microorganismelor patogene poate fi rezultatul indirect al unor accidente chimice, incendii, accidente electrice sau legate de radiaii.

Este esenial meninerea unor standarde ridicate de siguran n aceste domenii, n orice laborator microbiologic. Reguli i regulamente de funcionare pentru toate aceste domenii trebuie elaborate de autoritatea naional sau local competent, al crei sprijin trebuie solicitat n caz de necesitate. Pericolele chimice, electrice, de incendiu i cele radioactive sunt tratate mai detaliat n Partea a IV a acestui manual (Capitolele 15-17).

1

4. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3

Laboratorul securizat Nivel de biosiguran 3 este proiectat i echipat pentru lucrul cu microorganisme din Grupa de risc 3, i cu volume sau concentraii mari de microorganisme din Grupa de risc 2 care implic un risc de diseminare sub forma de aerosoli. Securizarea cu Nivel de biosiguran 3 necesit ntrirea programelor operaionale i de siguran peste cele descrise pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2 (vezi Capitolul 3).

Regulile descrise n acest capitol sunt prezentate sub forma de suplimentri la cele pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2, care trebuie prin urmare aplicate naintea celor specifice pentru laboratoarele securizate Nivel de biosiguran 3. Principalele adugiri i modificri se refer la:

1. Codul de practici 2. Designul (concepia structural i funcional) i facilitile laboratorului 3. Supravegherea strii de sntate a personalului.

Laboratoarele din aceast categorie trebuie nregistrate la autoritile naionale i

regionale din domeniul sanitar. 4.1. Codul de practici

Se aplic codul de practici pentru laboratoarele de baz - Nivel de biosiguran 1 si 2, excepie fcnd situaiile unde apar modificri dup cum urmeaz : 1. Sigla international de avertizare i inscripia Pericol biologic afiate pe uile de acces,

vor trebui s fie nsoite de menionarea nivelului de biosiguran, de numele responsabilului din laborator ce controleaz accesul, i s precizeze condiiile de intrare n acest perimetru (ex. imunizarea prealabil).

2. mbrcmintea de protecie de laborator trebuie s fie de tipul : halate care se nchid la spate sau care se ncheie prin nfurare, costume sau salopete, bonete, iar acolo unde este necesar huse protectoare pentru inclminte sau inclminte special. Nu sunt acceptate halatele de laborator cu nasturi in fa sau cu mneci scurte. Imbrcmintea de laborator nu trebuie purtat n afara acestuia i trebuie decontaminat nainte de splare. Atunci cnd se lucreaz cu anumii ageni (ex. ageni zoonotici, patogeni vegetali), este obligatoriu s se nlocuiasc mbrcmintea de strad cu mbrcminte de laborator, destinat exclusiv acestui scop.

3. Manipularea deschis a tuturor materialelor potenial infecioase trebuie s se execute in hote de siguran biologic sau n orice alt incint de izolare primar (vezi Capitolul 10).

4. Echipamentul de protecie respiratorie este necesar pentru anumite proceduri de laborator sau n cazul lucrului cu animale infectate cu anumii patogeni (vezi Capitolul 11).

4.2. Designul i facilitile laboratorului

Se aplic design-ul i facilitile laboratorului de baz - Nivel de biosiguran 1 i 2, cu urmtoarele modificri :


17


Incinerarea deeurilor contaminate trebuie sa se fac n conformitate cu prevederile autoritilor de sntate public i de protecie a mediului, ca i cu normele de biosiguran din laborator (vezi seciunea despre incinerare n Capitolul 14).

3.7. Sigurana chimic, mpotriva incendiilor, electric, mpotriva radiaiilor i a echipamentelor

O bre/discontinuitate n sistemul de securizare al microorganismelor patogene poate fi rezultatul indirect al unor accidente chimice, incendii, accidente electrice sau legate de radiaii.

Este esenial meninerea unor standarde ridicate de siguran n aceste domenii, n orice laborator microbiologic. Reguli i regulamente de funcionare pentru toate aceste domenii trebuie elaborate de autoritatea naional sau local competent, al crei sprijin trebuie solicitat n caz de necesitate. Pericolele chimice, electrice, de incendiu i cele radioactive sunt tratate mai detaliat n Partea a IV a acestui manual (Capitolele 15-17).

1

4. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3

Laboratorul securizat Nivel de biosiguran 3 este proiectat i echipat pentru lucrul cu microorganisme din Grupa de risc 3, i cu volume sau concentraii mari de microorganisme din Grupa de risc 2 care implic un risc de diseminare sub forma de aerosoli. Securizarea cu Nivel de biosiguran 3 necesit ntrirea programelor operaionale i de siguran peste cele descrise pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2 (vezi Capitolul 3).

Regulile descrise n acest capitol sunt prezentate sub forma de suplimentri la cele pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2, care trebuie prin urmare aplicate naintea celor specifice pentru laboratoarele securizate Nivel de biosiguran 3. Principalele adugiri i modificri se refer la:

1. Codul de practici 2. Designul (concepia structural i funcional) i facilitile laboratorului 3. Supravegherea strii de sntate a personalului.

Laboratoarele din aceast categorie trebuie nregistrate la autoritile naionale i

regionale din domeniul sanitar. 4.1. Codul de practici

Se aplic codul de practici pentru laboratoarele de baz - Nivel de biosiguran 1 si 2, excepie fcnd situaiile unde apar modificri dup cum urmeaz : 1. Sigla international de avertizare i inscripia Pericol biologic afiate pe uile de acces,

vor trebui s fie nsoite de menionarea nivelului de biosiguran, de numele responsabilului din laborator ce controleaz accesul, i s precizeze condiiile de intrare n acest perimetru (ex. imunizarea prealabil).

2. mbrcmintea de protecie de laborator trebuie s fie de tipul : halate care se nchid la spate sau care se ncheie prin nfurare, costume sau salopete, bonete, iar acolo unde este necesar huse protectoare pentru inclminte sau inclminte special. Nu sunt acceptate halatele de laborator cu nasturi in fa sau cu mneci scurte. Imbrcmintea de laborator nu trebuie purtat n afara acestuia i trebuie decontaminat nainte de splare. Atunci cnd se lucreaz cu anumii ageni (ex. ageni zoonotici, patogeni vegetali), este obligatoriu s se nlocuiasc mbrcmintea de strad cu mbrcminte de laborator, destinat exclusiv acestui scop.

3. Manipularea deschis a tuturor materialelor potenial infecioase trebuie s se execute in hote de siguran biologic sau n orice alt incint de izolare primar (vezi Capitolul 10).

4. Echipamentul de protecie respiratorie este necesar pentru anumite proceduri de laborator sau n cazul lucrului cu animale infectate cu anumii patogeni (vezi Capitolul 11).

4.2. Designul i facilitile laboratorului

Se aplic design-ul i facilitile laboratorului de baz - Nivel de biosiguran 1 i 2, cu urmtoarele modificri :

18


1. Laboratorul trebuie s fie separat de zonele cu trafic nerestricionat din cldire. O separare suplimentar se poate realiza prin plasarea laboratorului fie la captul nchis al unui coridor fie prin construirea unei separaii i a unei ui, sau accesul printr-o anticamer (ex. intrarea printr-o u dubl sau printr-un laborator de baz Nivel de biosiguran 2), delimitnd o zon special proiectat pentru meninerea unei diferene de presiune ntre spaiul laboratorului i spaiile adiacente acestuia. Anticamera trebuie s aibe faciliti de separare a mbrcminii curate de cea contaminat i, daca este necesar, un du.

2. Uile anticamerei trebuie s se blocheze alternativ (recomandabil automat), astfel nct o singur u s fie deschis la un moment dat. Se poate asigura o ieire de siguran pentru situaiile de urgen, reprezentat de un panou de sticl ce se poate sparge la nevoie.

3. Suprafaa pereilor, a pardoselilor si tavanelor trebuie s fie rezistent la ap i uor de curat. Deschiderile aprute n aceste suprafee (ex. de trecerea evilor instalaiilor), trebuie etaneizate pentru a facilita decontaminarea ncperilor respective.

4. Camera laboratorului trebuie s poata fi inchis etan pentru decontaminare. Sistemele de ventilaie trebuie construite astfel nct s permit decontaminarea gazoas.

5. Ferestrele trebuie s fie nchise etan i incasabile. 6. Lng fiecare u de ieire trebuie prevzut o chiuvet pentru splarea minilor, a crei

surs de ap s nu fie acionat cu mna. 7. Trebuie s existe un sistem de ventilaie care s menin un flux de aer direcionat ctre

interiorul laboratorului. Trebuie s fie instalat un sistem de monitorizare, cu sistem de atenionare vizual cu sau fr alarm, astfel nct personalul s se poata asigura c se menine direcionarea corect a fluxului de aer spre interiorul laboratorului.

8. Sistemul de ventilaie al cldirii trebuie construit astfel nct aerul din laboratorul securizat - Nivel de biosiguran 3 s nu fie recirculat spre alte zone ale cldirii. Aerul poate fi filtrat prin filtre HEPA (High Efficiency Particulate Air), recondiionat i recirculat n interiorul laboratorului. Cnd aerul din laborator (altul dect cel din hotele de biosiguran) este eliminat n afara cldirii, acesta trebuie evacuat la distan de cldiri locuite sau de zonele de ventilaie. n funcie de agentul biologic manipulat, aerul poate fi eliminat prin filtre HEPA. Se recomand un sistem de control al nclzirii, ventilaiei i aerului condiionat (HVAC = heating, ventilation and air-conditioning), cu scopul prevenirii instalrii unei presiuni pozitive n laborator. Se recomand, de asemenea, instalaii de alarm sonor sau vizual care s atrag atenia personalul asupra defectrii sistemului HVAC.

9. Toate filtrele HEPA trebuie instalate astfel nct s permit decontaminarea gazoas i

ghid national de biosiguranta pentru laboratoare

Documents