01_fiziologie_cultivare_3.pdf

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 1/54

19 și 22.

 10. 2015

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 2/54

”Pentru ca r ăul să triumfe, e destul

ca oamenii buni să nu faca nimic”.

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 3/54

"(Medicii și studenții la medicină): Au avut

vocația sacrificiului sau pur și simplu și-aufăcut datoria față de cei persecutați?Faptul că au ascultat mai mult de legeamorală a medicinei decât de legile trecătoare

ale comunismului i-a transformat pe mii deadepți ai lui Hipocrate în victime alerepresiunii, alături de pacienții lor.". 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 4/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 5/54

• fiziologie / cultivare / importantă practică 

• un altfel de ”microbiologie”

• antiseptice/dezinfectante – sterilizare ...

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 6/54

• despre cercetare / acces la articole / cercul de

microbiologie / alte activități ... • http://www.youtube.com/watch?v=rauK6U1PnQ4 • http://www.youtube.com/watch?v=69ewuG8eCB0 

• dar și ... despre ascultare ...

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 7/54

Fiziologia bacteriană 

• Constituţia chimică a bacteriilor  

• Metabolismul bacterian

• Căi metabolice 

• Căi biosintetice particulare 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 8/54

Yellow to orange colonies

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 9/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 10/54

Uridil mono-fosfat UMP

UTP

UDP N-AGln

N-A-Gln-1P

UDP NAGln - piruvat enol eter

UDP NAGln lactic acid eter

(UDP Acid NAM) 

UDP - ANAM - L-Ala

UDP - ANAM - L-Ala D-Gln L-Lis

UDP - ANAM - pentapeptid

FEP

+ 2H

L-Ala

D-Gln

L-Lis

D-Ala - D-Ala D-Ala L-Ala

FOSFONOMICINA

CICLOSERINA

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 11/54

UDP - ANAM - pentapeptid

BP-P-P - ANAM - pentapeptid

BP-P-P - ANAM - NAGln - pentapeptid

BP-P-P – ANAM - NAGln - pentapeptid - pentaglicină 

Peptidoglican - ANAM - NAGln - pentapeptid - pentaglicină 

Peptidoglican - ANAM - NAGln

 – pentapeptid

 –  pentaglicină 

BP-P

UDP-NAGln

Glicil-ARNt

PeptidoglicanBP-P-P

Pi

BACITRACINA

VANCOMICINA

PENICILINA

PENICILINA

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 12/54

Cultivarea bacteriană 

Definiţii 

•  Populaţia = o multitudine de indivizi ai unei specii

care habitează într -un anumit biotop.

•  Clona = populaţia care rezultă dintr -o singură celulăprin înmulţire vegetativă. 

•  Tulpina = populaţia microbiană alcătuită dindescendenţii unei singure izolări în cultură pură. 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 13/54

Cultivarea bacteriană 

•  Creşterea oricărui organism are loc prin sinteza denoi molecule.

•  Deoarece creşterea volumului celular raportată lacreşterea suprafeţei este mai mare, în cursul creşterii

se ajunge la un punct critic.

•  Multiplicarea celulară este o consecinţă a creşterii.Se restabileşte raportul optim dintre volumul şisuprafaţa celulei. 

•  Multiplicarea majorităţii bacteriilor se face prindiviziune simplă (binară). Sporii nu reprezintăforme de multiplicare (aşa cum se întâmplă în cazulfungilor).

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 14/54

Cultivarea bacteriană 

Metodele de cultivare a bacteriilor urmăresc 3 obiective:

•  obţinerea unei populaţii microbiene suficiente cantitativpentru investigaţiile propuse,

•  prevenirea contaminării produsului cercetat cu unmicroorganism străin şi

•  izolarea fiecărei tulpini microbiene urmărite în cazul unuiprodus pluri-microbian în culturi mono-microbiene

denumite “culturi pure”. 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 15/54

Cultivarea bacteriană 

Cultivarea se realizează prin însămânţarea bacteriilor pemedii de cultură.

Mediile solide sau lichide care asigură nutrienţii şi condiţiilefizico-chimice necesare creşterii şi multiplicării bacteriene se

numesc medii de cultură.

Totalitatea bacteriilor acumulate prin multiplicarea într -un mediu

de cultură poartă numele de cultură bacteriană.

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 16/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 17/54

Cultivarea bacteriană 

Mediile de cultură 

Microorganismele pot fi cultivate pe gazde vii şi pe mediiartificiale.

•  Există anumite microorganisme (ex. virusuri, Ricketts i i ,Chlamydi i ) care nu pot fi cultivate decât pe gazde vii: 

- animale de laborator

- ouă de găină embrionate 

- culturi de celule

•  Majoritatea bacteriilor, fungii şi unele protozoare se potcultiva şi pe medii artificiale. 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 18/54

Cultivarea bacteriană 

Clasificarea mediilor de cultură artificiale - după starea de agregare,- după natura ingredientelor,- după complexitatea ingredientelor (ex. medii speciale),

- după scopul urmărit (transport, izolare, identificare etc),

Există medii de cultură- simple (agar, apă peptonată, bulion simplu etc) şi- medii de cultură mai complexe (agar -sânge, bulion

glucozat, agar Muller-Hinton etc).

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 19/54

Cultivarea bacteriană 

Medii speciale- electiv

- selectiv

- de îmbogăţire 

- diferenţial 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 20/54

Cultivarea bacteriană 

Mediul electiv  conţine  ingredientele care convin cel mai

bine dezvoltării unei anumite bacterii (de exemplu mediul

Lőffler, cu ser coagulat de bou, pentru bacilul difteric).

Mediul selectiv  conţine  substanţe  antimicrobiene,

inhibând  dezvoltarea altor bacterii decât  cea a cărei izolare se urmăreşte. De ex. medii  în  care includem

antibiotice (faţă  de care bacteria care se doreşte  a fi

izolată este rezistentă).

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 21/54

Cultivarea bacteriană 

Mediul de  îmbogăţire  favorizează   înmulţirea  anumitor

bacterii patogene, inhibând  dezvoltarea florei de

asociaţie  dintr-un produs patologic. Funcţionează 

concomitent ca mediu selectiv şi ca mediu electiv  (ex.

mediile de îmbogăţire utilizate pentru izolarea Salmonel la

typh i ).

Mediul diferenţial conţine un anumit substrat (de exemplu

unele zaharuri) care poate fi sau nu metabolizat,

determinând modificarea culorii sau aspectului culturii.

• Ex. agarul cu albastru de brom-timol lactozat (AABTL)

care diferenţiază bacteriile lactozo-pozitive (cum este E.

col i ) de bacteriile lactozo negative (Shigel la , Salmonel la ).

• Alte ex. ADCL (agar dezoxicolat citrat lactoză),  TSI (3

zaharuri şi fier), MIU (mobilitate indol uree).

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 22/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 23/54

Cultivarea bacteriană 

Colonia izolată 

Pe medii solide, germenii însămânţaţi în suprafaţă produccolonii.

Colonia este totalitatea bacteriilor rezultate din multiplicareaunei singure celule bacteriene. O colonie este o clonăbacteriană. 

Coloniile izolate se pot obţine de exemplu prin tehnica însămânţării prin dispersie (cu ansa bacteriologică sau

cu tamponul).

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 24/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 25/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 26/54

Cultivarea bacteriană 

Aspectul culturilor pe medii solide

Colonia S (smooth) are suprafaţă bombată şi netedă,margini circulare şi adesea aspect strălucitor.germenii păstrează structura antigenicănu aglutinează spontan cu soluţie salină fiziologică

germenii capsulaţi îşi păstrează capsula 

virulenţa este conservată.

Majoritatea bacteriilor studiate formează colonii de tip S (S.aureus , S. pyo genes , E. co li etc).

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 27/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 28/54

Cultivarea bacteriană 

Aspectul culturilor pe medii solide

Colonia R (rough) este plată, suprafaţa ei prezintărugozităţi, marginile sunt crenelate.- structura antigenică nu este caracteristică 

- nu păstrează capsula 

- virulenţa nu este conservată (excepţii B. anthracis ,M. tuberculosis , C. dip hteriae ).

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 29/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 30/54

Cultivarea bacteriană 

Aspectul culturilor pe medii solide

Colonia R (rough) este plată, suprafaţa ei prezintărugozităţi, marginile sunt crenelate.- structura antigenică nu este caracteristică 

- nu păstrează capsula 

- virulenţa nu este conservată (excepţii B. anthracis ,M. tuberculosis , C. dip hteriae ).

Colonia M (mucoid) este mare, strălucitoare, mucoasă.

- este dată de exemplu de bacteriile care prezintăcapsule mari (exemplu Klebsiel la pneumoniae ).

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 31/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 32/54

Cultivarea bacteriană 

Aspectul culturilor pe medii lichide

Bacteriile şi fungii facultativ anaerobi se dezvoltă în toatămasa de lichid, tulburându-l.

Bacteriile strict aerobe se dezvoltă preponderent lasuprafaţa mediului. 

Variantele S tulbură omogen mediul (majoritatea bacteriilor). 

Variantele R realizează o tulburare mai puţin omogenă.Pot lăsa mediul limpede, formând flocoane care se depun

sau un strat (văl) la suprafaţa mediului (de exemplubacilul difteric sau bacilul tuberculos).

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 33/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 34/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 35/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 36/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 37/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 38/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 39/54

http://health.dir.groups.yahoo.com/group/cerc_microbiologie

 _UMF/

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 40/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 41/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 42/54

http://www.eurosurveillance.org/ 

http://www.cdc.gov 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 43/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

Antibioterapia se află în IMPAS ! 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 44/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

Principalele PROBLEME ?

• un număr IMENS de prescrieri abuzive

• folosire IRAŢIONALĂ a unor antibiotice 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 45/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

REZULTATUL ?

• apariţia de specii sau de tulpini “mutante” 

•  înmulţirea reacţiilor adverse 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 46/54

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 47/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

SOLUŢIA ? 

• descoperirea de noi antibiotice ...

• folosirea raţională a “bateriei” de Ab existentă 

• EVITAREA frecventelor erori întâlnite în practică !!! 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 48/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

1.ESTE incorectă utilizarea antibioticelor  

•  în lipsa diagnosticului clinic, 

•  în orice stare febrilă,

•  în “bănuiala unei infecţii” ... 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 49/54

febră = infecţie = antibiotice 

RAŢIONAMENT GREŞIT ! 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 50/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

2. Utilizare fără a interpreta corect datele de

laborator• noţiuni elementare de bacteriologie = anul al II-lea

• recoltarea produsului patologic … 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 51/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

3. Prescriere nejustificată, spre ex. în

•  în boli infecţioase cu agenţi patogeniinsensibili la antibiotice (absurd în“tratamentul” gripei)

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 52/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

4 (1). Erori în alegerea antibioticelor, prin 

• necunoaşterea sau nerespectarea spectruluiantimicrobian 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 53/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

4 (2). Erori în alegerea antibioticelor, prin 

• nefolosirea antibioticului de elecţie 

7/23/2019 01_Fiziologie_Cultivare_3.pdf

http://slidepdf.com/reader/full/01fiziologiecultivare3pdf 54/54

Erori în practica antibioticoterapiei 

5. Utilizarea antibioticelor în scop profilactic

•  în principiu, trebuie privită cu rezerve