universitatea de ŞtiinŢe agricole Şi medicinĂ … · 2011-10-13 · hemoglobina, hematocritul...

17
UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ VETERINARĂ CLUJ-NAPOCA ŞCOALA DOCTORALĂ FACULTATEA DE MEDICINĂ VETERINARĂ GABRIELA ZOIŢA ZAH REZUMAT AL TEZEI DE DOCTORAT Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar CONDUCĂTOR ŞTIINŢIFIC, Prof. univ. dr. ROMAN MORAR CLUJ-NAPOCA 2011

Upload: others

Post on 28-Dec-2019

5 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ VETERINARĂ CLUJ-NAPOCA

ŞCOALA DOCTORALĂ

FACULTATEA DE MEDICINĂ VETERINARĂ

GABRIELA ZOIŢA ZAH

REZUMAT AL TEZEI

DE DOCTORAT

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi

modificările rinichiului în diabetul experimental

la şobolanii din linia Wistar

CONDUCĂTOR ŞTIINŢIFIC, Prof. univ. dr. ROMAN MORAR

CLUJ-NAPOCA 2011

Page 2: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 9

UNIVERSITY OF AGRICULTURAL SCIENCE AND VETERINARY MEDICINE CLUJ-NAPOCA

DOCTORAL SCHOOL

FACULTATY OF VETERINARY MEDICINE

GABRIELA ZOIŢA ZAH

SUMMARY OF PhD THESIS

Morpho-physiological research index and kidney changes in experimental diabetes

in Wistar line rats Scientific coordinator, Prof. Dr. Roman Morar

Cluj–Napoca 2011

Page 3: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 10

REZUMAT AL TEZEI DE DOCTORAT

Cercetările noastre au avut ca principal obiectiv acela al cunoaşterii modificărilor suferite de rinichi în diabetul subclinic provocat cu Streptozotocină şi rezultatul tratamentului cu produse fitoterapeutice originale.

Diabetul este o boală complexă cu exprimare clinică variată, ca formă şi intensitate, în aprecierea lui, sunt necesare cercetări clinice, biochimice, fiziologice şi metabolice complexe, iar rezultatele presupun interpretări relaţionale a tuturor proceselor ce-l acompaniază pentru ca în final să abordăm o terapeutică şi mai ales să reuşim o profilaxie bună. Pentru aceasta am urmărit:

- Modificările biochimice ale principalilor parametri ai sângelui la animalele îmbolnăvite şi tratate;

- Modificările întâlnite în hematologia animalelor îmbolnăvite şi tratate cu produse fitoterapeutice originale comparativ cu medicaţie uzuală antidiabetică;

- Modificările histopatologice ale rinichiului surprinse în timpul experimentului;

- Ne propunem să facem un studiu biochimic şi bibliografic al rolului jucat de sărurile minerale implicate în elasticitatea şi permeabilitatea vaselor capilare;

Scopul lucrării este de a corela aspectele clinice cu cele biochimice, hematologice şi histopatologice, afecţiunile ce se întâlnesc şi care în final sunt responsabile de diabet.

Deoarece diabetul, în sine, este o boală cu o lungă perioadă de evoluţie, observaţiile le-am efectuat o perioadă de 7 luni pe animalele îmbolnăvite şi tratate.

Obiective în abordarea acestui subiect şi realizarea acestei lucrări: - actualizarea datelor despre diabetul subclinic la om şi animale; - reproducerea experimentală a diabetului subclinic la şobolani, masculi din

rasa Wistar; - lotizarea şi supravegherea animalelor pentru acomodarea lor; - asigurarea unor condiţii standard de igienă, hrană şi microclimat; - urmărirea tratamentelor zilnice făcute animalelor timp de 7 luni; - recoltarea periodică a probelor de sânge, prelucrarea lor primară şi

analizele specifice făcute; - recoltarea probelor de rinichi în vederea analizelor histopatologice; - respectarea la maxim a măsurilor deontologice în ceea ce priveşte

protecţia animalelor supuse experimentelor; - prelucrarea datelor obţinute, interpretarea lor, respectarea lor grafică; - prelucrarea statistică a datelor care se pretează, pentru o mai mare

siguranţă a semnificaţiei; - prelucrarea specifică a probelor histologice, interpretarea rezultatelor şi

ilustrarea lor în imagini foto.

Page 4: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 11

MATERIALE ŞI METODE DE LUCRU

Cercetările au fost făcute pe 63 capete şobolani masculi din rasa Wistar în vârstă de 2 luni, aleşi ca talie (masa 150 g), vârstă şi mărime să fie cât mai uniformi. La început am luat randomizat 7 capete, şi am format primul lot:

- Lotul 1 sănătos – 7 capete – neîmbolnăvit, martor sănătos. Celelalte animale au fost injectate cu câte 4 mg / 100 g masă corporală

Streptozotocină i.p. Animalele au fost supravegheate 3 zile, apoi am forma loturile experimentale astfel:

Lotul 2 format din 14 animale – lotul martor îmbolnăvit şi netratat. Lotul 3 format din 14 animale – lot tratat zilnic cu 1 tb SIOFOR 1000,

echivalent cu 12 mg/kg corp şi 4 g lactoză pentru corectarea gustului. Lotul 4 format din 14 animale – lot tratat zilnic cu 5,4 g ERIDIAROM / lot

/ zi. Lotul 5 format din 14 animale tratat zilnic cu DIAVIT, 6 g / lot / zi. Adăpostirea, furajarea şi adăparea animalelor a fost aceiaşi (hrană standard)

condiţiile de microclimat de asemenea. Cercetările au fost făcute în perioada 2007 – 2008 pe un efectiv de 63 capete

şobolani. După prima lună, a 2-a, a 3-a, a 5-a şi a 7-a lună experimentală s-au recoltat

probe de sânge (de la câte 7 – 8 animale / lot) în vederea examenelor serologice şi biochimice. Probele s-au luat individual din unghiul intern al ochiului, s-au recoltat în recipienţi special pregătiţi, păstrate la gheaţă şi transportate într-o oră la laboratorul de cercetări biochimice.

După prima lună, a 2-a, a 3-a lună, a 5-a şi 7-a s-au sacrificat câte 2 animale (loturile 2 - 5) pentru examene histopatologice şi 2 animale din lotul I martor sănătos pentru comparaţie (la 7 luni). Probele au fost fixate în vederea efectuării examenelor histopatologice.

Menţionăm că pe parcursul experimentului au ieşit din efectiv (morţi) următoarele animale:

- 1 cap din lotul 1 - lot martor sănătos; - 2 capete din lotul 2 – lot martor bolnav netratat; - câte un cap din lotul 4 – tratat cu Eridiarom şi lotul 5 – tratat cu Diavit Animalele au fost urmărite din punct de vedere clinic pe tot parcursul

experimentului. Prelucrarea histopatologică a probelor a constat în fixarea în 20%

formaldehidă, apoi modelarea fiecărei probe, includerea la parafină, secţionarea la microtom şi apoi fixarea şi colorarea cu Tricromic (H.E. şi Albastru), apoi examinarea la microscopul optic şi fotografierea imaginilor reprezentative.

Examenele biochimice şi hematologice s-au prelucrat individual specific prin metodele de laborator.

La examenul biochimic s-au urmărit: Calciul seric şi total, Magneziul, Glucoza, Ureea serică şi Creatinina.

Page 5: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 12

La examenul hematologic s-au urmărit: Leucocitele, Limfocitele, Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele.

CERCETĂRILE ŞI REZULTATELE INDICILOR BIOCHIMICI

URMĂRIŢI LA ŞOBOLANI TIMP DE 7 LUNI CALCIU SERIC TOTAL

Tabelul 1 Valorile medii ale calciului la loturile studiate (mg/dl) Average calcium values in the study groups (mg/dl)

Lun

a /

mon

th

Nr.

Indi

v. /

no. I

ndiv

. Valori normale/ Normal

value

Lot martor sănătos / Healthy

control group

Lot bolnav netratat / Untreated

sicked group

Lot bolnav tratat cu Siofor / Group

treated with Siofor

Lot tratat cu Eridiarom /

Group treated with Eridiarom

Lot tratat cu Diavit / Group

treated with Diavit

1 6 4.5 – 5.5 4.42 4.88 5.18 5.12 4.76

2 5 4.5 – 5.5 4.17 5.38 5.26 5.4 5.3

3 7 9 – 9.5 7.99 5.36 9.33 9.60

5 6 9 – 9.5 8.725 8.083 9.38 9.56

7 6 9 – 9.5 8.068 7.974 9.18 9.389

După 2 luni de tratament se observă o creştere semnificativă a calciului seric cea mai importantă la lotul tratat cu Eridiarom urmat de lotul bolnav netratat (10,76), apoi de lotul tratat cu Siofor şi de lotul tratat cu Diavit.

Între 5 – 7 luni de observaţie, valoarea calciului la lotul bolnav creşte uşor dar nu ajunge la limita inferioară a normalului pe când la loturile tratate cu Eridiarom şi Diavit, valorile se înscriu în limita superioară a normalului.

Page 6: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 13

33.5

44.5

55.5

66.5

77.5

88.5

99.510

1 luna 2 luni 3 luni 5 luni 7 luni

SanatosHealthyBolnav Sick

Diavit

Eridiarom

Graficul 1 Evoluţia calciului 1 – 7 luni Calcium evolution 1 – 7 months

GLUCOZA (GOD/POD)

Tabelul 2 Valorile medii ale glucozei la loturile studiate (mg/dl)

Average values of glucose in the studied groups (mg/dl)

Lun

a / m

onth

Nr.

Indi

v. /

no.

Indi

v. Valori

normale/ Normal

value

Lot martor

sănătos / Healthy control group

Lot bolnav netratat / Untreated

sicked group

Lot bolnav tratat cu Siofor / Group

treated with Siofor

Lot tratat cu

Eridiarom / Group treated

with Eridiarom

Lot tratat cu Diavit / Group

treated with Diavit

2 5 75 - 135 77,66 122,33 82 140,33 152

3 7 50 - 135 83,57 127,85 130,57 136,97

5 6 50 -135 72 183,2 124,25 121,4

7 6 50 - 135 80 203,5 129,28 126,4

Glucoza este cea mai importantă zaharidă care se găseşte în mod normal în

organele şi sângele omului şi constituie combustibilul cel mai preţios pentru obţinerea energiei necesare activităţii lui. Din arderea unui gram de glucoză, de către organism, rezultă 4 calorii.

Page 7: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 14

Urmărind dinamica glucozei de-a lungul perioadei experimentale observăm că acesta s-a menţinut la limita inferioară la lotul martor sănătos variind între 72 şi 83,57 mg/dl.

La lotul bolnav a rămas constantă cu o creştere progresivă de la 122,33 mg/dl la 2 luni urcând la 127,85 mg/ dl la 3 luni, apoi la 183,25 mg la 5 luni şi la 203,5 mg /dl la 7 luni (pe măsură ce boala se cronicizează).

CREATININA

Sinteza creatininei are loc în ficat şi rinichi. Creatinina, ca şi ureea, este

eliminată prin urină. Ambele substanţe se găsesc în concentraţii fiziologice constante în sânge, care le transportă. Concentraţia de creatinină în urină poate fi utilizată ca valoare de referinţă pentru excreţia unor analiţi (albumina, alfa-amilaza).

Tabelul 3

Valorile medii ale creatininei la loturile urmărite 7 luni (mg/dl) Average values of creatinine in groups followed for 7 months (mg/dl)

Lun

a / m

onth

Nr.

Indi

v. /

no.

Indi

v. Valori

normale/ Normal

value

Lot martor sănătos

/ Healthy control group

Lot bolnav netratat / Untreated

sicked group

Lot bolnav tratat cu Siofor / Group

treated with Siofor

Lot tratat cu Eridiarom /

Group treated with Eridiarom

Lot tratat cu Diavit /

Group treated with

Diavit

2 5 0.2 - 0.8 0.553 0.593 0.450 0.463 0.497

3 7 0.2 - 0.8 0.619 0.427 0.581 0.577

5 6 0.5 – 1.1 0.515 0.193 0.555 0.518

7 6 0.2 - 0.8 0.401 0.468 0.485 0.386

După 5 luni de tratament observăm că lotul sănătos are valoarea creatinei la

limita inferioară a normalului (0,515 mg/dl) la lotul bolnav netratat scade foarte mult ajungând la 0,193 mg/dl iar la celelalte 2 loturi creatinina creşte uşor dar se menţine la limita normalului fiind de 0,618 mg/dl la lotul tratat cu Diavit şi de 0,655 mg/dl la lotul tratat cu Eridiarom.

Page 8: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 15

CERCETĂRILE ŞI REZULTATELE INDICILOR HEMATOLOGICI

NUMĂRUL LEUCOCITELOR (WBC)

Tabelul 4

Valorile medii ale numărului leucocitelor în cele 7 luni la loturile studiate (103/µl) Average values of leukocytes in the seven months, in the studied groups (103/µl)

Lun

a / m

onth

Nr.

Indi

v. /

no.

Indi

v. Valori

normale/ Normal

value

Lot martor

sănătos /Healthy control group

Lot bolnav

netratat / Untreated sicked group

Lot bolnav tratat cu Siofor / Group

treated with Siofor

Lot tratat cu Eridiarom /

Group treated with Eridiarom

Lot tratat cu Diavit / Group

treated with Diavit

1 6 4,1 - 10,9 7 9,75 7,58 6,52 6,82

2 5 4,1 - 10,9 7,23 9,7 8,4 7,3 6,83

3 7 2,1 – 19,5 10,21 15,34 8,25 7,32

5 6 2,1 – 19,5 10,2 13,67 7,93 6,7

7 6 2,1 – 19,5 11,91 12,76 8,5 7,89

Dinamica leucocitelor este uşor accentuată la lotul sănătos, creşte semnificativ la lotul bolnav netratat şi se menţine aproape normal la lotul tratat cu Diavit.

La lotul tratat cu Eridiarom dinamica este ascendentă până la 5 luni apoi coboară brusc la 7 luni ajungând la nivelul valorilor din prima lună.

Cele mai mici valori se înregistrează la lotul tratat cu Diavit.

Page 9: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 16

HEMOGLOBINA (HGB) Tabelul 5

Valorile medii ale hemoglobinei la loturile studiate (g/dl) Average values of hemoglobin, in the studied groups (g/dl)

Lun

a / m

onth

Nr.

Indi

v. /

no.

Indi

v. Valori

normale/ Normal

value

Lot martor

sănătos / Healthy control group

Lot bolnav

netratat / Untreated sicked group

Lot bolnav tratat cu Siofor / Group treated

with Siofor

Lot tratat cu Eridiarom /

Group treated with Eridiarom

Lot tratat cu Diavit /

Group treated with

Diavit

1 6 14 - 18 14,56 13,56 14,6 15,16 14,7

2 5 14 - 18 14,43 13,6 14,7 15,26 14,56

3 7 14 - 18 15,49 16,35 15,38 18,49

5 6 14 - 18 16,06 15,83 15,55 16,14

7 6 14 - 18 16,43 15,45 16,56 19,4

În timpul experimentului dinamica hemoglobinei creşte accentuat de la

14,7g/dl la 19,4g/dl la lotul tratat cu Diavit, creşte foarte uşor la lotul sănătos de la 14,56 g/dl la 16,43 g/dl şi foarte puţin la lotul bolnav netratat de la 13,56g/dl la 15,45 g/dl. La lotul tratat cu Eridiarom se menţine aproape constantă, creşte de la 15,16 g/dl la 16,56g/dl.

Page 10: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 17

ANALIZA ŞI INTERPRETAREA INDICILOR STATISTICI BIOCHIMICI

GLICEMIA

Tabelul 6

Valorile indicilor statistici pentru glucoză, comparativ pentru fiecare din loturile formate, în cadrul experimentului

The values of statistical indicators for glucose, compared to each of the groups formed in the experiment

Loturi / Groups

Lun

a / M

onth

s

Media (X)

Average

Eroarea standard a mediei (Sx)

Average standard

error

Varianţa (S2)

Variance

Deviaţia standard

(S) Standard deviation

Coeficient de variaţie

V % Coefficientof variation

Martor sănătos / Healthy control

2 77,667 6,431 57,556 11,138 14,341 5 72 16,145 10042,667 32,290 44,848 7 80,006 6,138 301,443 17,362 21,701

Martor bolnav / Diseased control

2 88,333 9,396 54,889 16,275 18,424 5 183,25 9,34 348,917 18,679 10,193 7 203,5 4,424 156,571 12,513 6,149

Îmbolnăvit şi tratat cu Eridiarom / Diseased and treated with Eridiarom

2 140,333 11,5 97,556 19,918 34,741 5 124,25 3,198 40,917 6,397 4,434 7 129,288 1,147 10,533 3,245 2,330

Îmbolnăvit şi tratat cu Diavit / Diseased and treated with Diavit

2 152 31,841 172,667 55,151 106,059 5 136,47 7,857 246,907 15,713 10,379 7 126,405 2,695 58,089 7,622 6,030

Inducerea diabetului cu Streptozotocină determină o creştere semnificativă a mediei glicemiei faţă de lotul martor, respectiv 183,25 mg ‰ la 5 luni şi 203,5 mg ‰ la 7 luni după administrare. În tratamentul cu Eridiarom şi Diavit la 2 luni apare o scădere a mediei glicemice până la valoarea de 57,33 mg ‰, respectiv 52 mg ‰. La 7 luni de la administrare, în tratamentul cu Diavit tendinţa de scădere a mediei glicemice este mai accentuată, 126,405 mg‰ la 7 luni.

Page 11: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 18

ANALIZA ŞI INTERPRETAREA INDICILOR STATISTICI HEMATOLOGICI

HEMOGLOBINA (HGB)

Tabelul 7

Valorile indicilor statistici pentru hemoglobina, comparativ pentru fiecare din loturile formate, în cadrul experimentului

The values of statistical indicators for hemoglobin, compared to each of the groups formed in the experiment

Loturi / Groups

Lun

a /

Mon

ths Media

(X) Average

Eroarea standard a mediei (Sx)

Average standard error

Varianţa (S2)

Variance

Deviaţia standard

(S) Standard deviation

Coeficient de variaţie

V % Coefficientof variation

Martor sănătos / Healthy control

2 14,433 0,463 0,643 0,802 5,557 5 16,063 0,159 0,101 0,318 1,980 7 16,435 0,187 0,279 0,528 3,214

Martor bolnav / Diseased control

2 13,6 0,265 0,210 0,458 3,370 5 15,835 0,093 0,034 0,185 1,168 7 15,453 0,139 0,155 0,394 2,548

Îmbolnăvit şi tratat cu Eridiarom / Diseased and treated with Eridiarom

2 15,267 0,088 0,023 0,190 1,001 5 15,555 0,318 0,405 0,636 4,089 7 16,566 0,276 0,609 0,780 4,710

Îmbolnăvit şi tratat cu Diavit / Diseased and treated with Diavit

2 14,567 0,296 0,263 0,513 3,523 5 16,148 1,050 4,412 2,100 13,008 7 19,405 0,543 2,355 1,535 7,908

Hemoglobina are tendinţa de creştere la loturile tratate de la 15,267 g/l la 2

luni la 16,566 g/l la 7 luni în tratamentul cu Eridiarom, respectiv 14,567 g/l la 2 luni la 19,40 g/l în urma tratamentului cu Diavit la 5 luni.

Morar şi col. (1993) comunică creşteri ale hemoglobinei la loturile tratate cu Eridiarom faţă de lotul martor în experienţele făcute pe miei şi purcei.

REZULTATELE PARAMETRILOR BIOCHIMICI

Cercetările au fost efectuate pe 56 capete şobolani masculi din rasa Wistar în vârstă de 2 luni, cărora le-am provocat diabetul subclinic prin administrarea i.p. a 4 mg/100 masă corporală Streptozotocină. După administrare am lăsat animalele într-un lot comun, după 3 zile am format cele 4 loturi experimentale (separat lotul martor sănătos format din 7 capete).

Page 12: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 19

Probele de sânge s-au recoltat lunar din unghiul intern al ochiului de la 7 – 8 animale din fiecare lot. Sângele (1,5 – 2 ml) a fost recoltat în recipienţi speciali, păstrat la temperatura de 4oC şi imediat a fost trimis la laboratorul de specialitate.

Toate analizele au fost efectuate prin metode enzimatice specifice colorimetrice la analizatorul automat biochimic – imunologic Konelab.

Calciul seric total – La loturile tratate cu Diavit sau Eridiarom dinamica Ca este în creştere chiar după prima lună de tratament, după 2 luni, creşterea este semnificativă, ajungând la 5 – 7 luni în limitele superioare normale ale datelor din literatură şi ale martorului sănătos.

La lotul bolnav netratat, după 3 luni se înregistrează o scădere drastică a Ca care nu s-a mai redresat.

Dinamica magneziului - După 2 luni de tratament la toate loturile, valorile lui sunt mici, sub limita inferioară a normalului chiar şi la lotul sănătos, iar după 3 luni de tratament valorile lui cresc până la limita superioară a valorilor normale la lotul tratat cu Diavit şi cu Eridiarom.

Dinamica glucozei este constant crescută la lotul bolnav netratat şi creşte pe măsură ce boala avansează.

La loturile tratate cu Eridiarom sau Diavit dinamica glucozei scade treptat, ajungând la valori normale după 3 luni de tratament.

Ureea serică - După primele luni de tratament la toate loturile îmbolnăvite, ureea serică avea valori mari, peste limita maximă admisă chiar şi la martorul sănătos. După 3 luni de tratament, valorile ei scad la normal şi se menţin scăzute la loturile tratate cu Eridiarom sau Diavit ajungând la media datelor din literatură sub cea a lotului martor sănătos.

Creatinina - După 2 luni de tratament valorile cele mai mari le înregistrează lotul bolnav netratat şi valori mai mici la loturile tratate cu Siofor, Eridiarom şi Diavit.

După 7 luni de observaţie, cele mai mari valori le înregistrăm la lotul bolnav netratat şi valori mai mici la loturile tratate cu Eridiarom, Diavit şi martor sănătos, ele ajungând la limitele normalului.

În ansamblu se observă că pentru normalizarea unor parametri biochimici, rezultatele se obţin chiar din prima lună de tratament (Ca), la magneziu – după 2 luni de tratament, moment după care valorile se menţin bune şi chiar foarte bune. Aceste rezultate ne confirmă necesitatea urmăririi parametrilor biochimici şi hematologici timp îndelungat (7 luni).

Prelucrarea statistică a datelor confirmă rezultatele biochimice. REZULTATELE PARAMETRILOR HEMATOLOGICI

Numărul de leucocite - La lotul bolnav netratat, valoarea obţinută este cea mai mare iar cea mai mică se înregistrează la lotul tratat cu Eridiarom şi cu Diavit.

După 3, respectiv 5 luni de tratament, diferenţele se menţin dar mai crescute la lotul bolnav netratat (cu 9%). La 5 luni, valorile înregistrate la loturile tratate cu Eridiarm şi Diavit sunt mai mici decât la lotul martor sănătos iar la lotul bolnav sunt foarte mari.

Page 13: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 20

La 7 luni de observaţie cele mai mici valori se înregistrează la loturile tratate cu Eridiarom şi Diavit iar la lotul bolnav netratat valoarea medie este foarte mare.

Limfocitele - După 7 luni de tratament observăm o scădere a limfocitelor la lotul bolnav netratat dar chiar şi la martorul sănătos şi o creştere foarte semnificativă a valorii lor la lotul tratat cu Diavit.

La lotul sănătos valorile se menţin 5 luni apoi scad semnificativ spre 7 luni. Hemoglobina - După prima lună de tratament, se observă o uşoară creştere a

hemoglobinei la lotul tratat cu Eridiarom şi la cel tratat cu Diavit şi o importantă scădere la lotul martor netratat.

După 2 luni de tratament numai la lotul bolnav netratat valoarea hemoglobinei este sub limita inferioară medie.

După 3 luni de tratament diferenţele se accentuează la lotul tratat cu Diavit, valoarea medie depăşeşte limita superioară a speciei, acelaşi lucru se înregistrează la 5 respectiv 7 luni de observaţie.

La 7 luni, hemoglobina medie ajunge la valori mari şi la lotul tratat cu Eridiarom.

Cea mai mică valoare se înregistrează de către lotul bolnav netratat. Deci dinamica hemoglobinei creşte accentuat la lotul tratat cu Diavit, foarte

puţin la lotul sănătos şi la lotul bolnav netratat. La lotul tratat cu Eridiarom se menţine aproape constant, valori mari, de la 2

luni la 7 luni. Prelucrarea statistică a datelor confirmă semnificaţia acestor rezultate.

Hematocritul - După prima lună de tratament hematocritul scade la lotul bolnav netratat şi la lotul tratat cu Siofor şi creşte la lotul tratat cu Eridiarom.

După 2 luni de tratament valorile hematocritului se menţin mari la lotul tratat cu Eridiarom şi la cel tratat cu Diavit.

La 3 respectiv 5 luni valoarea hematocritului scade la lotul tratat cu Eridiarom şi se menţine uşor crescută la loturile tratate cu Diavit şi martor netratat.

După 7 luni de tratament, valorile hematocritului sunt mari la lotul tratat cu Eridiarom şi Diavit, valori mai mari decât ale lotului martor sănătos şi bolnav netratat la care se înregistrează cea mai mică valoare medie.

Valorile medii sunt confirmate de prelucrarea statistică a datelor.

Trombocitele - După primele 2 luni de la începerea experimentului, valorile medii ale trombocitelor scad faţă de lotul martor la toate loturile.

După 3 luni, valorile medii ale trombocitelor cresc foarte mult la lotul bolnav netrat, iar la lotul tratat cu Diavit valoarea medie ajunge la media lotului martor sănătos.

După 7 luni de observaţie, valoarea medie a trombocitelor la loturile tratate cu Eridiarom şi Diavit se apropie de media lotului sănătos fiind însă foarte mare la lotul bolnav netratat.

Şi aici prelucrarea statistică a datelor confirmă valoarea mediilor obţinute dealungul experimentului.

Page 14: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 21

În urma experimentului observăm că îmbunătăţirea (normalizarea) parametrilor urmăriţi se apropie de valorile lotului sănătos netratat sau a valorilor medii din literatura clasică după 2 – 3 luni de observaţie (leucocite, limfocite, hematocrit) pentru unii parametri, pentru normalizarea lor trebuie să treacă 5 sau chiar 7 luni de tratament (trombocitele).

REZULTATELE EXAMENULUI HISTOPATOLOGIC

Datele histopatologice obţinute se corelează cu rezultatele găsite în primele luni de la îmbolnăvirea experimentală a animalelor. Atât ureea cât şi creatinina sunt mari în primele 3 luni de boală apoi se normalizează.

Organismul animalelor luptă pentru menţinerea homeostaziei normale în primele 3 – 4 luni de observaţie.

La lotul martor sănătos rinichiul este normal, glomerulul renal este funcţional fiind format dintr-un ghem de capilare cu mai multe anse.

Fig. 1 – Rinichi funcţional normal. Glomerul renal funcţional format dintr-un ghem

de capilare cu mai multe anse. (HE x 200) (original) Normal functioning kidney. Renal Glomerul function consists of a bundle of

capillaries with more opportunities Aspectul histopatologic al rinichiului la lotul bolnav de diabet şi netratat este

următorul: - Atrofia ghemului vascular cu o hipoplazie a celuleor mezangiului şi o dilatare

exagerată a capsulei Bowman şi edemaţierea şi început de sclerozare a capsulei; - Celulele mezangiale îşi reduc aria citoplasmatică; - Capilarele ghemului vascular îşi reduc mult lumenul apărând din loc în loc

discontinuitate.

Page 15: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 22

Fig. 2 – Rinichi lot bolnav netratat (HE x 100) (original)

Kidney patient group untreated

Fig. 3 Rinichi lot tratat cu Eridiarom (HE x200) (original) Kydney, Eridiarom treated group

Page 16: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 23

Fig. 4 Rinichi lot tratat cu Eridiarom (HE x200) (original) Kydney, Eridiarom treated group

Fig. 5 Rinichi lot cu diabet netratat (după 7 luni). Glomerul atrofiat şi dilatarea

spaţiului Bowman (HE x 200) (original) Kidney untreated diabetic group (after 7 months). Glomerata atrophied and dilated

Bowman space La lotul tratat cu Eridiarom sau Diavit observăm glomeruli renali funcţionali

la care capsula Bowman este integră, ghemul vascular cu celule mezangiale funcţionale ce delimitează capilarele glomerulare.

Tubii uriniferi distali sunt permeabili, funcţionali, epiteliul tubilor având celule funcţionale cu polul apical în hiperfuncţie.

Page 17: UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ … · 2011-10-13 · Hemoglobina, Hematocritul şi Trombocitele. ... 129,28 . 126,4 . Glucoza este cea mai importantă zaharidă

Cercetări privind indicii morfo-fiziologici şi modificările rinichiului în diabetul experimental la şobolanii din linia Wistar

Gabriela Zoiţa Zah 24

BIBLIOGRAFIE SELECTIVĂ

1. Blendea, M., Carmen P. Orbai, G. Hazi, I. Gozariu (1998) - Insulin secretion

and glucose tolerance in experimental thyrotoxicosis. Rom. i. Endocrinol, 36, 3-4, 113-121.

2. Bologh Sămăghiţan V. (2004) – Modificări ionice la copii cu diabet zaharat de tip I sub tratament cu Eridiarom, Conferinţa Fundaţiei de Laborator Clinic, Oradea, 19 – 22 mai, p. 26, publicată integral în: Diabetul – alternative fitoterapeutice, 2007, p. 105 – 115.

3. Brukner I. (1980) – Medicină internă. Vol. II, Editura Medicală, Bucureşti. 4. Ciobanu Luminiţa (1988) - Eficacitatea tratamentului cu Eridiarom în

enterocolitele acute – Teză de doctorat, conducător ştiinţific Prof. Dr. N. Miu, U.M.F. Cluj-Napoca.

5. Morar R., Dana Pusta, Zoiţa Gabriela Zah, I. Paşca, O. Rotaru (2011) – Modificări histopatologice ale rinichiului de şobolan în diabetul experimental provocat cu Streptozotocină, Al XI-lea Congres Naţional de Medicină Veterinară, Bucureşti, 8 – 11 mai, p. 74.

6. Morar R., Dana Pusta, Zoiţa Gabriela Zah, I. Paşca, O. Rotaru (2011) – Cercetări asupra modificărilor histopatologice ale rinichiului de şobolan în diabetul experimental provocat cu Streptozotocină (Sz), Al XI-lea Congres Naţional de Medicină Veterinară, Bucureşti, 8 – 11 mai, poster.