Universitatea de Universitatea de Medicina si Farmacie Medicina si Farmacie

“Victor Babes”, “Victor Babes”, Timisoara Timisoara

Benteu Darius, seria E, grupa Benteu Darius, seria E, grupa 3434

Expresia crescuta a Translocazei 1 a Expresia crescuta a Translocazei 1 a Nucleotidului Adenina (ANT1) induce Nucleotidului Adenina (ANT1) induce apoptoza si regresie tumorala apoptoza si regresie tumorala in vivoin vivo

ApoptozaApoptoza

Moarte celulara programataMoarte celulara programata

Dereglari – neoplazii, metastazeDereglari – neoplazii, metastaze

Studiul genelor a caror expresie Studiul genelor a caror expresie determina apoptozadetermina apoptoza

ANTANT-adenine nucleotide -adenine nucleotide translocasetranslocase

Schimb ATP-ADP=> Schimb ATP-ADP=> ↑ ATPc↑ ATPc

Exista 4 izoforme:Exista 4 izoforme:

↑ ↑ ANT1 => ↓ activitatii NFkBANT1 => ↓ activitatii NFkB

NFkB – factor important in dezvoltarea tumoriiNFkB – factor important in dezvoltarea tumorii

1 – inima, 1 – inima, muschi, creiermuschi, creier2 – ficat 2 – ficat

ObiectiveObiective

Efectul anticancer al supraexpresiei Efectul anticancer al supraexpresiei ANT1ANT1

Terapie genica pentru ANT1 in Terapie genica pentru ANT1 in celulele canceroase celulele canceroase in vivoin vivo si si in in vitrovitro

MaterialeMateriale

Linia celulara folosita: MDA-MB-231Linia celulara folosita: MDA-MB-231

Soareci balb/c de 6-8 saptamaniSoareci balb/c de 6-8 saptamani

Kituri RT-PCR/PCRKituri RT-PCR/PCR

Plasmidul: pcDNA 3.1-ANT1

Metode Metode in vitroin vitro

Celulele cultivate pe 6 placiCelulele cultivate pe 6 placi Transfectia utilizand plasmidulTransfectia utilizand plasmidul

Examinarea celulelor:Examinarea celulelor: Extractia DNAExtractia DNA Masurare potential membranarMasurare potential membranar Anticorpi anti NFkBAnticorpi anti NFkB

Metode – Metode – in vivoin vivo

2 grupuri2 grupuri

A fost stabilit un model de tumoraA fost stabilit un model de tumora

Ziua 14: terapia pentru grupul de Ziua 14: terapia pentru grupul de studiustudiu

La fiecare 3 zile – tumora examinataLa fiecare 3 zile – tumora examinata

RezultateRezultate

Statistica: student t, p<0,05 Statistica: student t, p<0,05 semnificativasemnificativa

In vitro: In vitro: ↑ANT1=> 30-40% celule ↑ANT1=> 30-40% celule distrusedistruse

In vivo: ↑ ANT1=>In vivo: ↑ ANT1=>

•Inhibarea Inhibarea cresterii tumoriicresterii tumorii•Diferente mari Diferente mari intre cele 2 intre cele 2 grupurigrupuri•Ziua 40: tumora Ziua 40: tumora la jumatatela jumatate

Evolutia tumorii – Evolutia tumorii – in in vivovivo

ConcluziiConcluzii

Cresterea tumorii a fost inhibata Cresterea tumorii a fost inhibata prin:prin:– Inactivarea NFkBInactivarea NFkB– Inducerea apoptozeiInducerea apoptozei

Metode mai eficiente pentru Metode mai eficiente pentru terapia genica in vivoterapia genica in vivo

ReferinteReferinte

1. Gorczyca W, Melamed MR, Darzynkiewicz Z. Programmed death of cells (apoptosis)

2. van Delft MF, Huang DC. How the Bcl-2 family of proteins interact to regulate apoptosis.

3. Cotter TG, Lennon SV, Glynn JG, Martin SJ. Cell death via

apoptosis and its relationship to growth, development and differentiation of both tumor and normal cells.

4. Fulda S, Debatin KM. Modulation of apoptosis signaling for cancer therapy.

5. Klingenberg M. Energetic aspects of transport of ADP and ATP through the mitochondrial membrane.

Va multumesc!Va multumesc!