PITESTI - ROMANIA

Contractor:Contractor:INSTITUTUL DE CERCETARE DEZVOLTARE PENTRU INSTITUTUL DE CERCETARE DEZVOLTARE PENTRU PPOMICULTUR PITEOMICULTUR PITE TITI--M R CINENIM R CINENI

Obiectivul general:Obiectivul general: 2 STCPM2 STCPM

Num rul Num rul /codul proiectului/codul proiectului 31/31/ADER 2.2.7.ADER 2.2.7.

ContractContract: 227/27. 10. 2011: 227/27. 10. 2011

Anul Anul îînceperiinceperii:: 01.11. 201101.11. 2011Anul finaliz riiAnul finaliz rii: : 10.12. 201410.12. 2014Durata:Durata: 37,5 luni37,5 luni

Denumirea proiectuluiDenumirea proiectului::ADER 2.2.7ADER 2.2.7-- Tehnici de producere Tehnici de producere i meni men inere a materialului s ditor inere a materialului s ditor

pomicol din categoriile biologice candidat, prebapomicol din categoriile biologice candidat, prebaz z i baz i baz

Persoana de contactPersoana de contact::Dr. ing. ISAC VALENTINADr. ing. ISAC VALENTINA

Date contact:Date contact:Tel: 0040Tel: 0040--248248--278066; Fax: 0040278066; Fax: 0040--248248--278477; 278477; v_isac2002@yahoo.comv_isac2002@yahoo.com

Obiectivul general 2 STCPM:Obiectivul general 2 STCPM:PerfecPerfec ionarea sistemelor ionarea sistemelor i tehnologiilor de cultura a i tehnologiilor de cultura a

plantelor plantelor îîn vederea asigur rii n vederea asigur rii sustenabilitsustenabilit iiii fermelor fermelor comerciale comerciale îîn contextul cren contextul cre terii performanterii performan elor de elor de mediumediu

Obiectivul specificObiectivul specific 2.2 2.2 ADERADERVerigi tehnologice/ tehnVerigi tehnologice/ tehnologii inovative de cultur a ologii inovative de cultur a

plantelor care s asigure garantarea veniturilor fermelor plantelor care s asigure garantarea veniturilor fermelor comerciale comerciale îîn condin condi iile respect rii criteriilor de mediu iile respect rii criteriilor de mediu i i ecoeco -- condicondi ionalitateionalitate

Obiectivele ProiectuluiObiectivele Proiectului11. . Elaborare model experimentalElaborare model experimental

2. 2. Crearea condiCrearea condi iilor impuse de reglement rile iilor impuse de reglement rile îîn vigoare pentru menn vigoare pentru men inerea inerea plantelor candidat (spaplantelor candidat (spa ii ii insectinsect proofproof). Experimentarea ). Experimentarea i introducerea i introducerea tehnicilor moderne privind diagnosticarea tehnicilor moderne privind diagnosticarea i testarea virali testarea viral

3. Evaluarea 3. Evaluarea i implementarea metodelor rapide (ELISA, PCR) pentru i implementarea metodelor rapide (ELISA, PCR) pentru determinarea st rii de s n tate viral a determinarea st rii de s n tate viral a regeneranregeneran ilorilor dup terapie dup terapie..

4. Dezvoltarea procedeelor de 4. Dezvoltarea procedeelor de termotermo-- i i chimichimiooterapie, cultuterapie, cultur de meristeme r de meristeme pentru eliminarea virusurilor la speciile pomicole pentru eliminarea virusurilor la speciile pomicole i meni men inerea materialului inerea materialului biologic candidat.biologic candidat.

5. 5. Managementul producerii materialului s ditor pomicol conform schManagementul producerii materialului s ditor pomicol conform schemelor de emelor de certificare din legislacertificare din legisla ia actual prin folosirea unor elemente ia actual prin folosirea unor elemente biotehnologicebiotehnologice îîn n îînmulnmul irea plantelor s n toaseirea plantelor s n toase..

6. Realizarea unor verigi tehnologice privind ob6. Realizarea unor verigi tehnologice privind ob inerea materialului biologic din inerea materialului biologic din categorii biologice superioarecategorii biologice superioare

Metode noi, rapide, fiabile, economice Metode noi, rapide, fiabile, economice i cu o mare putere discriminatorie i cu o mare putere discriminatorie îîn n detectarea detectarea i identificarea patogenilor virali.i identificarea patogenilor virali.Tehnologii/verigi tehnologiTehnologii/verigi tehnologice eficiente privind testarea viralce eficiente privind testarea viral , eliberarea de , eliberarea de virusuri virusuri i meni men inerea materialului biologic pomicol necesar producerii unor inerea materialului biologic pomicol necesar producerii unor plante care s plante care s îîndeplineasc toate standardele impuse de certificarendeplineasc toate standardele impuse de certificare;;SelecSelec ionarea celor mai bune clone din punct de vedere al autenticitionarea celor mai bune clone din punct de vedere al autenticit ii, ii, calitcalit ilor pomologice ilor pomologice i al productiviti al productivit ii;ii;Metode optimizate pentru devirozarea materialului infectat, obMetode optimizate pentru devirozarea materialului infectat, ob inerea inerea plantelor candidat;plantelor candidat;Tehnologii/secvenTehnologii/secven e tehnologice de mene tehnologice de men inerea inerea i i îînmulnmul ire a materialului ire a materialului s ditor pomicol prin metode clasice s ditor pomicol prin metode clasice i neconveni neconven ionale (culturi de ionale (culturi de esuturi);esuturi);Ghiduri de bune practici pentru producerea, menGhiduri de bune practici pentru producerea, men inerea inerea i multiplicarea i multiplicarea materialului s ditor pomicolmaterialului s ditor pomicol;;Metode Metode i proceduri care s conduc la i proceduri care s conduc la îîmbun tmbun t irea schemelor actuale de irea schemelor actuale de certificare a materialului s ditorcertificare a materialului s ditor;;SpaSpa ii protejate pentru menii protejate pentru men inerea plantelor candidat, prebinerea plantelor candidat, prebaz az i baz i baz îîn n conformitate cu normele conformitate cu normele îîn vigoare;n vigoare;ObOb inerea materialului prebaz inerea materialului prebaz i conservarea i conservarea îîn biodepozitar;n biodepozitar;Completarea bazei materiale necesare test rilor Completarea bazei materiale necesare test rilor i stabilirii tehnicilor i stabilirii tehnicilor i i tehnologiilor de lucru; Producerea tehnologiilor de lucru; Producerea materialului s ditor bazmaterialului s ditor baz ..

Cuantificarea gradului de infectare cu virusuri a speciilor Cuantificarea gradului de infectare cu virusuri a speciilor i i soiurilor;soiurilor;Baz material format din Baz material format din 10 spa10 spa ii izolate care s asigure ii izolate care s asigure condicondi ii pentru evitarea ii pentru evitarea reinfect riireinfect rii;;11--2 protocoale de lucru optimizate pentru testare 2 protocoale de lucru optimizate pentru testare i i diagnosticare diagnosticare viralviral ;;35 35 -- 45 clone selec45 clone selec ionate conforme privind caracteristicile ionate conforme privind caracteristicile de autenticitate de autenticitate i stare i stare fitosanitarfitosanitar i testate de virusuri;i testate de virusuri;Verigi tehnologice privind eliberarea de virusuri la 1 Verigi tehnologice privind eliberarea de virusuri la 1 -- 3 3 specii pomicole; specii pomicole; BiotehnologiiBiotehnologii de de îînmulnmul ire pentru obire pentru ob inerea materialului inerea materialului prebazprebaz la 1la 1--2 specii pomicole2 specii pomicole;;Plante Plante prebazprebaz i baz din soiurile a i baz din soiurile a 10 10 -- 12 specii 12 specii pomicole.pomicole.

SelecSelec ionarea celor mai bune cloneionarea celor mai bune clone din punct de vedere al autenticit ii, calit ilor pomologice i al productivit ii - 76 soiuri:10 soiuri de m r: Jonathan, Idared, Florina, Goldspur, Golden Delicious, Prima, Generos, Romus, Starkrimson, Mutsu i portaltoii M 106 i M9;9 soiuri de p r: Williams, Cure, Tudor, Monica, Argessis, Carpica, Williams ro u, Euras,

Conference i portaltoiul Gutui A;9 soiuri de prun: Agent, Ialomi a, Gras ameliorat, Centenar, Silvia, Minerva, Diana, Andreea, Delia i portaltoiul Mirobolan BN 4Kr;6 soiuri de cire : Ponoare, Daria, Tentant, Superb, Stella, Germrsdorf i portaltoiul IPC 5.6 soiuri de vi in: Moc ne ti 16, arina, Rival, Stelar, Ilva, Schattenmorelle;7 soiuri de cais: Tudor, Goldrich, Traian, Sulmona, Sirena, Harcot, NJA 42;8 soiuri de piersic: Catherine sel. 1, Cora, Creola, Liana, Delta, Florin, Cardinal, Redhaven;6 soiuri de c p un: Premial, Real, Red Gauntlet, Coral, Magic, Benton;3 soiuri de zmeur3 soiuri de zmeur: Cayuga, Opal, Ruvi;4 soiuri de mur: Darrow, Thornfree, Dar 8, Dar 24;6 soiuri de coac z: Abanos, Deea, Tsema; Jonkheer van Teets, Red Lake, HoughtonCastle; 2 soiuri de agri2 soiuri de agri :: Virens, Verda;

Studiu documentar referitor la sursele de material vegetal i caracterizarea genotipurilor luate în studiu (18 pagini).

Fi experimental privind producerea materialului de înmul ire i plantare fructifer certificatdin punct de vedere virotic – 10 pagini

Crearea condiCrearea condi iilor impuse de reglement rile iilor impuse de reglement rile îîn vigoare pentru menn vigoare pentru men inerea inerea plantelor CANDIDAT plantelor CANDIDAT i PREBAZ i PREBAZ (spa(spa ii ii insectinsect proofproof))

•Izolator de 180 mp, cu plante crescute în containere i cu fertirigare

SCDP BISTRI A(specia prun)

•Izolator de 52 mp, cu plante crescute în containere.•Izolator (300 mp), cu plante crescute în ghivece mari de 50 l, câte 6 ghivece pentru fiecare soi i portaltoi de prun.

Reabilitarea a 10 izolatoare (2.200 mp), pentru men inerea plantelor Ini iale i Prebaz în

conformitate cu normele în vigoare i asigurarea condi iilor necesare evit rii reinfect rii cu virusuri.

Reabilitarea a Reabilitarea a 10 izolatoare10 izolatoare (2.200 mp),(2.200 mp), pentru pentru menmen inerea plantelor Iniinerea plantelor Ini iale iale i i PrebazPrebaz îîn n

conformitate cu normele conformitate cu normele îîn vigoare n vigoare i asigurarea i asigurarea condicondi iilor necesare evit rii iilor necesare evit rii reinfect riireinfect rii cu virusuri.cu virusuri.

TESTAREA VIROTIC A MATERIALULUI SELECTATTESTAREA VIROTIC A MATERIALULUI SELECTAT, , RETESTAREA MATERIALULUI RETESTAREA MATERIALULUI PREBAZPREBAZ I I BAZBAZIndexarea prin Indexarea prin metode biologice, tmetode biologice, testeeste serologiceserologice ii molecularemoleculare (ELISA(ELISA, , PCR)PCR) pentru 68 boli pentru 68 boli viralevirale, , a ar tat a ar tat

cc ::

Plantele candidatPlantele candidat selecselec ionate sunt ionate sunt s n toases n toase ((--) ) i pot fi utilizate pentru obi pot fi utilizate pentru ob inerea materialului PREBAZ inerea materialului PREBAZ i ulterior BAZi ulterior BAZ . .

Rezultatele testelor ELISA au ar tat c soiurile de Rezultatele testelor ELISA au ar tat c soiurile de cirecire Ponoare, Daria Ponoare, Daria i Superb sunt infectate cu virusuri i Superb sunt infectate cu virusuri ((ArMVArMV, CLRV, PNRSV), CLRV, PNRSV) iar soiul de iar soiul de vivi in in Moc neMoc ne ti cu ti cu PPV.PPV.

RetestareaRetestarea DASDAS––ELISA la PREBAZA de prun ELISA la PREBAZA de prun –– BistriBistri a, a, efectuat pentru efectuat pentru PPV, PDV, PNRSV, ACLSV, PPV, PDV, PNRSV, ACLSV, ApMVApMV i MLRSV a fost negativi MLRSV a fost negativ . . De asemenea, rezultatele ICDe asemenea, rezultatele IC--RTRT--PCR au confirmat absenPCR au confirmat absen a PPV. a PPV.

Test rile serologice DASTest rile serologice DAS––ELISA efectuate la soiurile de c pELISA efectuate la soiurile de c p un un i arbui arbu tii fructiferi, ltii fructiferi, la soiurile de m r a soiurile de m r i p r i p r (pentru virusurile:(pentru virusurile: ACLSVACLSV, , ApMVApMV, , ASGVASGV , , ASPVASPV, , AP) aAP) au ar tat c plantele testate sunt s n toaseu ar tat c plantele testate sunt s n toase..

La La prunprun ss--au au doveditdovedit a a fifi infectateinfectate cu cu virusulvirusul Plum poxPlum pox treitrei soiurisoiuri: Diana, Silvia : Diana, Silvia sisi IalomiIalomi aa, , dede ii pomiipomii erauerauasimptomaticiasimptomatici. . DetecDetec iaia virusuluivirusului Plum poxPlum pox a a fostfost realizatarealizata ii molecular, molecular, prinprin ICIC--RTRT--PCR, PCR, iariar rezultatelerezultateleobob inuteinute au au confirmatconfirmat rezultatelerezultatele serologiceserologice, , acesteaceste soiurisoiuri fiindfiind eliminate de la eliminate de la îînmulnmul ireire..

Testare c p un pe F. vesca UC – 04 Altoire de foliol R. o.”Munger” - zmeur Altoire cu ramur deta at - zmeur

PROTOCOALE DE LUCRU OPTIMIZATE PENTRU TESTARE PROTOCOALE DE LUCRU OPTIMIZATE PENTRU TESTARE I I DIAGNOSTICARE DIAGNOSTICARE

DIAGNOSTICUL MOLECULAR AL VIRUSULUIDIAGNOSTICUL MOLECULAR AL VIRUSULUIPLUM POXPLUM POX

ICIC--RTRT--PCR PCR folosfolosesteeste kitulkitul QiagenQiagen OneOne Step RTStep RT--PCRPCRi perechea de amorse polivalente P1i perechea de amorse polivalente P1/P2 /P2 care care

amplific un fragment de amplific un fragment de 243 243 bpbp corespunz tor corespunz tor regiunii Cregiunii C--terminus a proteinei terminus a proteinei capsidalecapsidale ((WetzelWetzeli i colabcolab., 1991). Pentru ., 1991). Pentru imunocapturimunocaptur ssee

utiliutilizeazazeaza antiser produs de BIOREBA. antiser produs de BIOREBA. Ciclul termic utilizat pentru RTCiclul termic utilizat pentru RT--PCR PCR cuprindecuprinde::

RReverstranscriereeverstranscriere -- 30 30 minmin la 50la 50°°C, C, denaturare/inactivareadenaturare/inactivarea reverstranscriptazeireverstranscriptazei timptimpde de 2 2 minmin la 94 la 94 °°C urmat de C urmat de 35 35 dede cicluri: cicluri: denaturare denaturare ADNcADNc -- 30 s la 94 30 s la 94 °°C, hibridarea cu C, hibridarea cu amorsele amorsele -- 45 s la 61 45 s la 61 °°C, elongaC, elonga ia ia ADNcADNc -- 60 s 60 s la 72 la 72 °°C.C.

Dup ultimul ciclu urmDup ultimul ciclu urmeazaeaza elongaelonga ia final la ia final la 72 72 °°C C pe durata a 10 min. pe durata a 10 min.

ProduProdu ii de amplificare ii de amplificare sese sepseparaara prin electroforez prin electroforez , , îîn gel de n gel de agarozagaroz (Sigma) 1,5%. (Sigma) 1,5%.

Vizualizarea produVizualizarea produ ilor de amplificare silor de amplificare s--a realizat a realizat îîn n lumin UVlumin UV, imaginea , imaginea gelurilorgelurilor fiind achizifiind achizi ionat ionat cu o camer video cu o camer video DocPrintDocPrint. .

DIAGNOSTICUL MOLECULAR AL DIAGNOSTICUL MOLECULAR AL FITOPLASMEI FITOPLASMEI EUROPEAN STONE FRUIT EUROPEAN STONE FRUIT YELLOWYELLOW (ESFY)(ESFY)

NestedNested--PCRPCR,, se realizeaz se realizeaz îîn dou etape de n dou etape de amplificare amplificare

Pentru amplificare Pentru amplificare sese utilizutilizeazaeaza ADNADN--ulul total din total din floemfloem i nervurile frunzelor de prun, extras cu i nervurile frunzelor de prun, extras cu ajutorul ajutorul kitkit--uluiului de extracde extrac ie ie DneasyDneasy PlantPlant Mini Mini KitKit ((QiagenQiagen).).

Pentru prima amplificare sPentru prima amplificare se e recomandarecomanda primeriiprimeriiP1/P7 (P1/P7 (SchneiderSchneider si si colabcolab., 1995), iar pentru ., 1995), iar pentru cea decea de--a doua amplificare setul de a doua amplificare setul de primeriprimeriR16(X)F1/R16(X)R1 (R16(X)F1/R16(X)R1 (LeeLee si si colabcolab., 1995).., 1995).

Ciclul termic utilizat pentru Ciclul termic utilizat pentru NestedNested--PCRPCR îîn ambele n ambele etape de amplificare etape de amplificare esteeste urm torul urm torul: : denaturare denaturare -- 5 5 minmin la 94la 94°°C, C, urmat de urmat de 35 35 dedecicluri: denaturare cicluri: denaturare ADNcADNc -- 20 s la 9220 s la 92°°C, C, hibridarea cu amorsele hibridarea cu amorsele -- 20 s la 55 20 s la 55 °°C, C, elongaelonga ia ia ADNcADNc -- 40 s la 72 40 s la 72 °°C. C.

Dup ultimul ciclu urmDup ultimul ciclu urmeazaeaza elongaelonga ia final la ia final la 72 72 °°C C pe durata a 10 min. pe durata a 10 min.

Migrarea si vizualizarea produMigrarea si vizualizarea produ ilor PCR ilor PCR se facese faceidentic cu procedura pentru ICidentic cu procedura pentru IC--RTRT--PCRPCR

Au fost experimentate i pot fi implementate protocoale ELISA - kit + protocol Bioreba i kit + protocol Sediag pentru detectarea a 17 virusuri i phytoplasme.Tehnicile moleculare de diagnostic au un poten ial foarte ridicat de detec ie virali sunt foarte utile în procedura de certificare a materialului s ditor.

ÎÎnmulnmul irea materialului selecirea materialului selec ionationat devirozaredevirozareA fost A fost îînmulnmul itit fondul biologic plante Candidat (inifondul biologic plante Candidat (ini iale)iale) la speciile pomicole la speciile pomicole lemnoase lemnoase i la c pi la c p un un i arbui arbu tii fructiferi. tii fructiferi. ÎÎn urma lucr rilor de altoire efectuate la ICDP au fost n urma lucr rilor de altoire efectuate la ICDP au fost îînmulnmul ite 13 ite 13 soiuri la specia m r soiuri la specia m r ((78 plante78 plante)), c, câte 10 âte 10 soiuri p r soiuri p r i prun i prun ((50 de plante din fiecare specie50 de plante din fiecare specie)), , 3 soiuri3 soiuri lla a cirecire ((15 plante15 plante)), iar la vi, iar la vi in sin s--au obau ob inut 25 de plante din 5 soiuriinut 25 de plante din 5 soiuri. . La prun, BistriLa prun, Bistri a a a a îînmulnmul it prin altoire it prin altoire îîn vederea obn vederea ob inerii plantelor inerii plantelor Candidat 7 soiuri Candidat 7 soiuri (64 plante) testate serologic (64 plante) testate serologic i molecular i molecular i stabilite ca i stabilite ca „„Virus Virus freefree””..Aplicarea Aplicarea îînmulnmul irii prin butairii prin buta i a permis realizat nucleul de plante i a permis realizat nucleul de plante Candidat la Candidat la 3 s3 soiuri oiuri de coac z negru de coac z negru i 3i 3 soiuri de coac z ro soiuri de coac z ro u totalizând un num r de u totalizând un num r de 32 plante la 32 plante la container mencontainer men inute inute îîn prezent n prezent îîn span spa ii izolate. ii izolate. Pentru realizarea nucleelor de Pentru realizarea nucleelor de Plante iniPlante ini ialeiale i i PrebazPrebaz (material (material in in vitrovitro) au fost ) au fost folosite folosite i elemente i elemente biotehnologicebiotehnologice::

-- Au fost optimizate protocoale de lucru Au fost optimizate protocoale de lucru i randamentele i randamentele îîn fiecare faz a n fiecare faz a culturii culturii in in vitrovitro. .

-- au fost create au fost create nucleele de plante ininucleele de plante ini iale in iale in vitrovitro la la 5 s5 soiuri de c poiuri de c p un, 4 un, 4 soiuri de zmeur, 3 soiuri de mur soiuri de zmeur, 3 soiuri de mur i a portaltoilor M9 i a portaltoilor M9 i M1i M106 (06 (m rm r), ), Gutui A (Gutui A (p rp r), IPC ), IPC 5 (cire5 (cire , vi, vi in), in), MirobolanMirobolan BN 4Kr (prun). Plantele obBN 4Kr (prun). Plantele ob inute sunt folosite la inute sunt folosite la producerea prin micropropagare a nucleelor de plante producerea prin micropropagare a nucleelor de plante PrebazPrebaz îîn funcn func ie de ie de necesitnecesit ile activitile activit ii de producere a materialului s ditor pomicolii de producere a materialului s ditor pomicol. .

ÎÎn procesul de n procesul de devirozare devirozare au fost introduse un numar de 3 soiuri de cireau fost introduse un numar de 3 soiuri de cire i un soi de i un soi de vivi in. Min. Metoda aplicat a fost prin etoda aplicat a fost prin culturi de meristemeculturi de meristeme. A fost stabilit mediul de . A fost stabilit mediul de cultura LF cu 0,3 mg/l GA3 si 0,01 mg/l IBAcultura LF cu 0,3 mg/l GA3 si 0,01 mg/l IBA cât cât i i protocolul de lucruprotocolul de lucru pentru pentru speciile respectivespeciile respective..

Aplicarea culturilor Aplicarea culturilor in in vitrovitro a permis realizarea nucleelor de a permis realizarea nucleelor de Plante iniPlante ini ialeiale (material (material iniini ial in ial in vitrovitro) l) la 5a 5 soiuri de c p soiuri de c p un, 4 soiuri de zmeur, 3 soiuri de mur un, 4 soiuri de zmeur, 3 soiuri de mur i a portaltoilor i a portaltoilor M9 M9 i M1i M106 (06 (m rm r), ), Gutui A (Gutui A (p rp r), IPC 5 (cire), IPC 5 (cire , vi, vi in), in), MirobolanMirobolan BN 4Kr (prun). BN 4Kr (prun). Au fost optimizate protocoale de lucru Au fost optimizate protocoale de lucru îîn cea ce priven cea ce prive te te îînr d cinarea in nr d cinarea in vitrovitro la la portaltoiiportaltoii de m r M de m r M9 9 i M106 i M106 ii a portaltoiului de a portaltoiului de cirecire /vi/vi inin IPC 5 cu obIPC 5 cu ob inerea unor inerea unor randamente de randamente de îînr d cinare bunenr d cinare bune: 82% la portaltoiul M106, 70 % la portaltoiul M9 : 82% la portaltoiul M106, 70 % la portaltoiul M9 i i 73,33 % la portaltoiul de 73,33 % la portaltoiul de cirecire /vi/vi inin IPC 5.IPC 5.Rezultatele obRezultatele ob inute inute îîn urma studiilor desfn urma studiilor desf urate cu soiurile de mur au permis urate cu soiurile de mur au permis realizarea unui protocol de lucru privind obrealizarea unui protocol de lucru privind ob inerea plantelor din cultura de meristeme inerea plantelor din cultura de meristeme îîn numai trei etape prin eliminarea fazelor de n numai trei etape prin eliminarea fazelor de îîn ln l are are i i îînr d cinare nr d cinare in in vitrovitrorezultând reducerea perioadei de rezultând reducerea perioadei de îînmulnmul ire ire in in vitrovitro, r, reducerea pierderilor de material educerea pierderilor de material datorit unor eventuale contamin ri datorit unor eventuale contamin ri îîn faza de n faza de îîn ln l are are i i îînr d cinare nr d cinare in in vitrovitro iiimplicit sc derea costurilor de producimplicit sc derea costurilor de produc ie ca urmare a reducerii consumului de ie ca urmare a reducerii consumului de substansubstan e chimice,e chimice, energie electric energie electric i fori for de munc de munc ..

TESTAREA/RETESTAREA TESTAREA/RETESTAREA I MI MENEN INEREAINEREA MATERIALULUI MATERIALULUI PREBAZ PREBAZ I BAZ EXISTENTI BAZ EXISTENT

P1 P1 -- ÎÎn urma inspecn urma inspec iei efectuate la SCDP Bistriiei efectuate la SCDP Bistri a, ITCSMS Cluj a eliberat documentele oficiale de a, ITCSMS Cluj a eliberat documentele oficiale de certificare la categoria PREBAZA a certificare la categoria PREBAZA a ase soiuri de prun: Agent, Gras ameliorat, Centenar, ase soiuri de prun: Agent, Gras ameliorat, Centenar, MinervaMinerva, Andreea , Andreea i i DeliaDelia.. Rezultatele analizelor Rezultatele analizelor au reconfirmatau reconfirmat statusulstatusul „„virusvirus--freefree”” al plantelor al plantelor BAZA menBAZA men inute inute îîn n biodepozitarelebiodepozitarele de la SCDP Bistride la SCDP Bistri a.a.

P2 P2 -- A fost constituit nucleul de material A fost constituit nucleul de material PrebazPrebaz format din 24 soiuri de piersic format din 24 soiuri de piersic i 23 soiuri la cais.i 23 soiuri la cais.Toate soiurile Toate soiurile retestateretestate au prezentat test negativ au prezentat test negativ f r soiul Cardinal infectat cu PPVf r soiul Cardinal infectat cu PPV..

CPCP -- A fost constituit un A fost constituit un nucleu de plante nucleu de plante PrebazPrebaz pentru pentru ramuri altoi la speciile lemnoaseramuri altoi la speciile lemnoase pentru care a fost depus pentru care a fost depus documentadocumenta ia la ITCSMS Argeia la ITCSMS Arge îîn vederea certific rii ca n vederea certific rii ca PrebazPrebaz . .

RetestareaRetestarea viralviral a a PrebazelorPrebazelor aa identificat numai la prun, identificat numai la prun, infecinfec ie cu ie cu PPVPPV la 3 plante la 3 plante din din soiul Gras ameliorat soiul Gras ameliorat i 2 plante i 2 plante dindin soiul Ialomisoiul Ialomi a a diagnostic confirmat diagnostic confirmat atât prin metoda DASatât prin metoda DAS--ELISA cât ELISA cât i prin AGRISTRIPi prin AGRISTRIP. .

Materialul s n tos r mas Materialul s n tos r mas îîn n biodepozitarbiodepozitarulul ICDP ICDP PitePite titi--M r cineniM r cineni constituconstituiie materialul din care se e materialul din care se vorvor îînmulnmul i i plantelplantelee BAZ BAZ , necesare , necesare îînfiinnfiin rii plantarii planta iilor mam ramuri iilor mam ramuri altoi, de butaaltoi, de buta i i i a i a marcotierelormarcotierelor ..

Rezultatele Rezultatele retest rilorretest rilor efectuate la soiurile de c p efectuate la soiurile de c p un un i i arbuarbu tii fructiferi au ar tat c plantele testate sunt s n toasetii fructiferi au ar tat c plantele testate sunt s n toase, , starea lor sanitara fiind liber de virusuri.starea lor sanitara fiind liber de virusuri.

Plante PREBAZ la Plante PREBAZ la container ICDP Pitecontainer ICDP Pite titi

SpeciaSpecia SoiuriSoiuri Nr. Nr. planteplante SpeciaSpecia PortaltoiPortaltoi Nr. Nr. planteplante

M rM r 1010 4242 M rM r M 106M 106 250250P rP r 99 2424 M 9M 9 22PrunPrun 99 1212 P rP r, , gutuigutui BN 70BN 70 22CireCire 66 2222 GutuiGutui AA 22ViVi inin 66 1212 PrunPrun MirobolanMirobolan dwarfdwarf 33CaisCais 44 55 MirobolanMirobolan C5C5 22PiersicPiersic 22 66 MirobolanMirobolan BN BN

4Kr4Kr22

NectarinNectarin 11 11 CireCire , , vivi inin IPC 2IPC 2 22ZmeurZmeur 66 365365 IPC3IPC3 22MurMur 44 550550 IPC4IPC4 22Coac zCoac z negrunegru 33 33 IPC5IPC5 22Coac zCoac z roro uu 33 33 IPC 7IPC 7 22AgriAgri 22 22 PiersicPiersic AdaptabilAdaptabil 22AfinAfin 22 22 CaisCais ApricorApricor 22C tinC tin 22 22C pC p unun 55 10.00010.000

Materialul biologic certificat la categoria Materialul biologic certificat la categoria PrebazPrebaz îîn 2013 n 2013 SCDP BistriSCDP Bistri a a –– prunprun

Soi/portaltoiSoi/portaltoi Cant.Cant. Lot nr.Lot nr. Etichete oficiale Etichete oficiale atribuiteatribuite

Nr. Nr. total/serie/detotal/serie/dela...panala...pana lala

Agent/Mirobolan29CAgent/Mirobolan29C 33 3BN06713BN0671--3BN013BN01 3/BN/7998403/BN/799840--799842799842

Gras Gras ameliorat/Mirobolanameliorat/Mirobolan29C29C

33 3BN06723BN0672--3BN013BN01 3/BN/7998433/BN/799843--799845799845

Centenar/Mirobolan29CCentenar/Mirobolan29C 33 3BN06733BN0673--3BN013BN01 3/BN/7998463/BN/799846--799848799848

Minerva/Mirobolan29CMinerva/Mirobolan29C 33 3BN06743BN0674--3BN013BN01 3/BN/7998493/BN/799849--799851799851

Andreea/Mirobolan29CAndreea/Mirobolan29C 33 3BN06753BN0675--3BN013BN01 3/BN/7998523/BN/799852--799854799854

Delia/Mirobolan29CDelia/Mirobolan29C 33 3BN06763BN0676--3BN013BN01 3/BN/7998553/BN/799855--799857799857

Total Total 1818

Aspecte din faza de fortificare la ghiveci a Aspecte din faza de fortificare la ghiveci a prebazelorprebazelor de zmeur de zmeur (A), (A), c pc p un(B), mur (C), un(B), mur (C),

portaltoi (D)portaltoi (D)

ProiectulProiectul 31/ADER 227 31/ADER 227 -- finalfinalPRODUCEREA MATERIALULUI S DITOR BAZPRODUCEREA MATERIALULUI S DITOR BAZ

La ICDP PiteLa ICDP Pite ti ti M r cineniM r cineni (CP), a fost demarat (CP), a fost demarat procesul obprocesul ob inerii plantelor Baz la speciile lemnoase inerii plantelor Baz la speciile lemnoase cu obcu ob inerea portaltoilor. A fost inerea portaltoilor. A fost îîntocmit documentantocmit documenta ia ia i a fost inii a fost ini iat procesul de certificare a materialului de iat procesul de certificare a materialului de

c tre ITCSMS Argec tre ITCSMS Arge . Au fost ob. Au fost ob inute la speciile inute la speciile lemnoase un num r de lemnoase un num r de 1380 plan1380 plante Bazte Baz , trecute prin , trecute prin procesul de certificare reprezentate de: portalprocesul de certificare reprezentate de: portaltoi de toi de m rm r, , p rp r/gutui/gutui, prun, piersic, cais, , prun, piersic, cais, cirecire /vi/vi inin. . PortaltoiiPortaltoii Baz obBaz ob inuinu i vor fi utilizai vor fi utiliza i la producerea de pomi i la producerea de pomi Baz din soiurile existente Baz din soiurile existente îîn plantan planta ia mam ia mam PrebazPrebaz . . La c pLa c p un un i arbui arbu tii fructiferi au fost tii fructiferi au fost îînmulnmul ite ite i i certificate la categoria Baz de ITCSMS un num r de certificate la categoria Baz de ITCSMS un num r de 13 150 plante13 150 plante

ProiectulProiectul 31/ADER 227 31/ADER 227 -- finalfinalPRODUCEREA MATERIALULUI S DITOR BAZPRODUCEREA MATERIALULUI S DITOR BAZ

Implementarea la SCDP BistriImplementarea la SCDP Bistri a a standardelor OEPP a a standardelor OEPP i a legislai a legisla iei naiei na ionale privind ionale privind obob inerea inerea i meni men inerea materialului de inerea materialului de îînmulnmul ire din categoriile biologice superioare ire din categoriile biologice superioare a permis, a permis, îîn perioada 2n perioada 2012012--2013:2013:Certificarea la categoria PREBAZ a Certificarea la categoria PREBAZ a 18 plante din soiurile de prun: Agent 18 plante din soiurile de prun: Agent -- 3 plante, 3 plante, Gras ameliorat Gras ameliorat -- 3 plante, Centenar 3 plante, Centenar –– 3 plante, 3 plante, MinervaMinerva -- 3 plante, Andreea 3 plante, Andreea -- 3 plante 3 plante ii DeliaDelia -- 3 3 plante (certiplante (certificat anexat).ficat anexat).

Certificarea la categoria BAZ a Certificarea la categoria BAZ a 95 plante din soiurile de prun: Agent 95 plante din soiurile de prun: Agent -- 20 plante, 20 plante, Gras Gras amelioratameliorat-- 15 plante, Centenar 15 plante, Centenar -- 20 plante, 20 plante, MinervaMinerva -- 15 plante, Andreea 15 plante, Andreea -- 15 15 plante plante ii DeliaDelia -- 10 plante (certificat anexat).10 plante (certificat anexat).MentinereaMentinerea prin prin retest riretest ri anuale a materialului biologic din categoriile PREBAZ anuale a materialului biologic din categoriile PREBAZ ii BAZ certificate anterior BAZ certificate anterior îîn n biodepozitarulbiodepozitarul de la SCDP de la SCDP BistriBistri aa..Soiurile ce vor constitui materialul BazSoiurile ce vor constitui materialul Baz la SCDP Constanla SCDP Constan a (P2)pentru speciile a (P2)pentru speciile piersic piersic i i nectarinnectarin sunt: sunt: SpringtimeSpringtime, , FlavorcrestFlavorcrest, , RedRed HavenHaven, , SpringcrestSpringcrest, , SpringcrestSpringcrest, , SpringtimeSpringtime, , SnowSnow QueenQueen, Fantasia, , Fantasia, FlavortopFlavortop, May , May GoldGold, , StarkStark, , RedRedGoldGold, , i portaltoi piersic GF 677.i portaltoi piersic GF 677.Soiurile ce vor constitui materialul BazSoiurile ce vor constitui materialul Baz pentru specia cais sunt: pentru specia cais sunt: BergeronBergeron, , GoldrichGoldrich((SungiantSungiant), ), HargrandHargrand, , PorticiPortici, , SanSan CastreseCastrese i portaltoiul i portaltoiul MirobolanMirobolan 29 C.29 C.

ProiectulProiectul 31/ADER 227 31/ADER 227 -- finalfinalDiseminare rezultateDiseminare rezultate

ProiectulProiectul 31/ADER 227 31/ADER 227 -- finalfinalConcluziiConcluzii, , recomandrecomand riri

ApreciemApreciem c activit c activit ile planificate pentru derularea proiectului au fost ile planificate pentru derularea proiectului au fost realizate, rezultatele fiind cele scontate. realizate, rezultatele fiind cele scontate.

ValidareaValidarea tehnicilor de diagnoz tehnicilor de diagnoz viralviral permit permit îîn continuare derularea n continuare derularea activitactivit ii ii îîn domeniul producerii de material s ditor n domeniul producerii de material s ditor i de asemenea i de asemenea tehnicile de tehnicile de îînmulnmul ire studiate, cu menire studiate, cu men iunea necesitiunea necesit ii perfecii perfec ion rii ion rii acestora.acestora.

PropunemPropunem dezvoltarea unor studii aprofundate dezvoltarea unor studii aprofundate îîn domeniu pentru n domeniu pentru eficientizareaeficientizarea producerii materialului de producerii materialului de îînmulnmul ire categorii superioare de ire categorii superioare de calitate.calitate.

PentruPentru crecre terea competitivitterea competitivit ii sectorului de producere a ii sectorului de producere a materialului s ditor din Româniamaterialului s ditor din România, dar , dar i pentru a crei pentru a cre terea vizibilitatea terea vizibilitatea i i credibilitatea credibilitatea rii noastre pe plan internarii noastre pe plan interna ional ional îîn acest domeniu de interes n acest domeniu de interes pentru agricultur este necesar continuarea activitpentru agricultur este necesar continuarea activit ii proiectului prezentat.ii proiectului prezentat.