MICROBIOLOGIA SI MICROBIOLOGIA SI DIAGNOSTICUL DE DIAGNOSTICUL DE

LABORATOR AL LABORATOR AL INFECTIILOR MENINGO- SI INFECTIILOR MENINGO- SI

GONOCOCICEGONOCOCICE

Clasificarea (Clasificarea (Bergey'sBergey's 2001), : 2001), :FamiliaFamilia – – NeisseriaceaeNeisseriaceaeGenurile Genurile - - Neisseria, Kingella,Neisseria, Kingella,

Chromobacterium, AquaspirillumChromobacterium, Aquaspirillum Genul Genul NeisseriaNeisseria include dou include douăă specii patogenespecii patogene

umane importante umane importante N. gonorrhoeaeN. gonorrhoeae şişi N.meningitidisN.meningitidis (neisserii “pretenţioase”)(neisserii “pretenţioase”). .

Specii comensale, Specii comensale, găzduite pe mucoasele aero-digestive, conjunctivă, vagin, uretra distală (neisserii “nepretenţioase”): : Neisseria Neisseria flava; Neisseria flavescens; Neisseria flava; Neisseria flavescens; Neisseria lactamica; Neisseria mucosa; Neisseria lactamica; Neisseria mucosa; Neisseria perflava; Neisseria pharyngis; Neisseria perflava; Neisseria pharyngis; Neisseria polysaccharea; Neisseria sicca; Neisseria polysaccharea; Neisseria sicca; Neisseria subflava; Neisseria subflava; Neisseria sp. In unele condisp. In unele condiţţii se ii se pot comporta ca patogeni oportunipot comporta ca patogeni oportunişşti.ti.

Caractere generale ale genului Caractere generale ale genului NeisseriaNeisseria

- Coci gramnegativi, asociaţi în diplococi, Coci gramnegativi, asociaţi în diplococi, uneori tetrade, imobiliuneori tetrade, imobili

- Bacterii strict aerobe, cu metabolism Bacterii strict aerobe, cu metabolism respiratorrespirator

- Catalazo- şi oxidazo-pozitiveCatalazo- şi oxidazo-pozitive- Sunt gazduite Sunt gazduite ppe mucoasele omului şi e mucoasele omului şi

animaleloranimalelor- Speciile patogene sunt exigente la Speciile patogene sunt exigente la

cultivarecultivare

Neisseria meningitidisNeisseria meningitidis1884 - Marchiafava si Celli observ1884 - Marchiafava si Celli observăă diplococi Gram- diplococi Gram- negativi negativi îîn LCR al unui pacient cu meningitn LCR al unui pacient cu meningităă1887 - Weichselbaum izoleaz1887 - Weichselbaum izoleazăă bacteria bacteria din LCRdin LCR şşi i

demonstreazdemonstreazăă rolul ei etiologic rolul ei etiologicBBacterie strict umană acterie strict umană care care colonicolonizezeaazză rinoă rinoffarariinngelegele la la

un un nnuummaarr mare mare de p de puurtărtătoritori sănă sănătotoşşi (5-30%)i (5-30%). . Portajul Portajul poate avea o duratpoate avea o duratăă de la c de la cââteva zile la cteva zile la cââteva luni. In teva luni. In uneleunele ca cazurizuri ş şi cui cu fre frecvcvenţăenţă redus redusă estă estee capab capabiilă lă ssăă provoaceprovoace septicemie ş septicemie şii//sausau oo meningită meningită cerebrospinală.cerebrospinală.

Caractere morfobiologiceCaractere morfobiologiceN.meningitidisN.meningitidis se prezint se prezintăă sub form sub formăă de coci imobili, de coci imobili,

gram-, in frotiu se aranjeazgram-, in frotiu se aranjeazăă in diplococi cu in diplococi cu suprafesuprafeţţele ele adiacente aplatizateadiacente aplatizate sau sau puţin concavepuţin concave (aspect reniform, de (aspect reniform, de ““boabe de cafeaboabe de cafea””). Posed). Posedăă capsulcapsulăă şşi fimbrii.i fimbrii.

Structura antigenicStructura antigenicăă a a N.meningitidisN.meningitidis

1.1. Ag Ag polpolizizaharidaharidiceice capsula capsularre perme permiit t caractericaracterizareazarea a a 13 serogrupe13 serogrupe:: A, B, C, D, X, A, B, C, D, X, Y, Z, 29E, W135, H, I, K et L. MY, Z, 29E, W135, H, I, K et L. Mai frecvent ai frecvent intintââlnite sunt serogrupelelnite sunt serogrupele A, B A, B,, C C, Y si W135, Y si W135. .

2.2. AgAg protei proteicce de dinin membran membranaa externă externă ((cincincici proteine majproteine majoorere)) perm permiit distincţit distincţiaa t tiippurilorurilor serologiserologicce e

3.3. Ag Ag lipo-oligo lipo-oligozzaharidaharidicicee (serotipuri) (serotipuri)..

Aceste Aceste antigene serveantigene servescsc î în calitate den calitate de mar markkererii epidemiologiepidemiologicici..

Caractere de culturCaractere de culturăă

N.meningitidisN.meningitidis este un mi/o aerob, foarte este un mi/o aerob, foarte exigent la cultivare. Se cultivexigent la cultivare. Se cultivăă doar pe doar pe medii medii îîmbogmbogăţiăţite cu ste cu sâânge sau ser nge sau ser şşi i preîpreîncncăălzite lzite îîn termostat: gelozn termostat: gelozăă-ser, -ser, gelozgelozăă-s-sâânge, geloznge, gelozăă-c-ciiocolatocolatăă. .

Coloniile S, Coloniile S, mici (1-2 mm), cu marginile mici (1-2 mm), cu marginile netedenetede, , bombate, bombate, translucide apar translucide apar peste 24peste 24-48-48 ore de incubare la 37 C ore de incubare la 37 C îîn n atmosferatmosferăă umedă umedă cu 5-10% COcu 5-10% CO22. .

Activitate biochimicActivitate biochimicăă

N.meningitidis N.meningitidis posedposedăă catalaz catalazăă si si oxidazoxidazăă, scindeaza glucoza , scindeaza glucoza şşi maltoza i maltoza ffăărrăă a produce gaz. a produce gaz.

RezistenRezistenţţa a îîn mediul externn mediul extern: : N.meningitidis N.meningitidis este o bacterie este o bacterie deosebitdeosebit de fragil de fragilăă, sensibil, sensibilăă îîn n special la desicare, special la desicare, radiaţii solare, radiaţii solare, variaţii de pHvariaţii de pH şşi i refrigerarerefrigerare; ; temperaturi sub 37 C determintemperaturi sub 37 C determinăă autoliza bacteriilor. autoliza bacteriilor.

Factorii de patogenitateFactorii de patogenitate

1.1. Adezine Adezine ((fimbriile fimbriile şşi proteine din i proteine din MEME))

2.2. Capsula – rol antifagocitarCapsula – rol antifagocitar

3.3. sIg AsIg A-p-proteaza – descompune sIg A roteaza – descompune sIg A de pe mucoasede pe mucoase

4.4. Endotoxina – declanEndotoxina – declanşşeaza secreeaza secreţţia ia diferitor citokinediferitor citokine

Epidemiologia infectiilor meningocociceEpidemiologia infectiilor meningocociceSursa de infecSursa de infecţţieie – bolnavii cu meningit – bolnavii cu meningităă sau sau

rinofaringitrinofaringităă meningococic meningococicăă sau purt sau purtăătorii de torii de germenigermeni

Transmiterea Transmiterea – aerogen, prin pic– aerogen, prin picăături Pflugge, turi Pflugge, prin obiecte contaminate (jucprin obiecte contaminate (jucăării…) - rii…) - exceptionalexceptional

Patogeneza infectiilor meningococicePatogeneza infectiilor meningocociceMeningococul Meningococul aderă aderă lala epiteliu epiteliull rino rinoffarariinngelui, gelui,

provocprovocâând nd ssauau oo infecţi infecţiee locală locală ((rinofaringitarinofaringita)), s, sauau oo infecti infectiee inaparentă. inaparentă. In In caz de caz de diminudiminuareare a rezistena rezistenţţei ei organismorganismuluiului, , bacteriabacteria trece trece îînn su subbmumucoascoasă şă şii apoi apoi îînn circulaţicirculaţiaa sanguină generală sanguină generală ((meningococcemiameningococcemia). ). AceastAceastăă translocaţitranslocaţiee estestee favori favorizatzată ă dde inflamaţie inflamaţiii rino rinoffarariingngiieenene,, îîn n specialspecial virale. virale.

In In circulaţicirculaţiaa generală, gr generală, graaţţiie capsulee capsulei, i, bacteribacteriaa est estee prote protejatjată de mă de mijloacele de ijloacele de rezistenrezistenţă ţă a a organismorganismuluiului. Pr. Prinin tropism tropism ppententrruu celule celulelele plexu plexuluilui choroid, choroid, meningococulmeningococul aderă aderă lala aacecestst nive nivel l şşii, pr, prinin translocaţitranslocaţiee, , trece trece îîn n spaţspaţiuliul meninge meningean, an, inducinducâând nd meningita cerebrospinalameningita cerebrospinala..

OdatOdatăă cu cu dispariţi dispariţiaa anticorp anticorpilorilor matern maternii, , N. meningitidisN. meningitidis devi devinne principale principalaa bacterie bacterie

responsabresponsabiilă de meningite lă de meningite la nou-nla nou-năăscuscuţţii. . UlteriorUlterior, imunit, imunitatateeaa antimeningococi antimeningocociccăă se se instalinstaleeaazză progresiv şă progresiv şi frecveni frecvenţţa a meningitelor meningococice diminueazmeningitelor meningococice diminueazăă..

Formele clinice de infectii meningocociceFormele clinice de infectii meningococice1. Rinofaringita1. Rinofaringita (forma clinic (forma clinicăă cea mai frecvent cea mai frecventăă, ,

deseori asimptomaticdeseori asimptomaticăă))2. Septicemia2. Septicemia (meningococcemia). Reprezint (meningococcemia). Reprezintăă etapa a etapa a

doua a maladiei. doua a maladiei. Complica Complicaţţiiii: meningococcemie : meningococcemie fulminantfulminantăă (sindromul Waterhouse-Friderichsen) (sindromul Waterhouse-Friderichsen) îîn n 10 - 20 % de cazuri (10 - 20 % de cazuri (şşoc oc endotoxiniendotoxinicc, purpura , purpura extensivextensivăă indus indusăă de coagulopa de coagulopattie de consumaie de consumarere (Coagula(Coagularere Intra-Vasculară D Intra-Vasculară Diiseminseminatată)ă)..

3. Meningita cerebrospinal3. Meningita cerebrospinalăă epidemic epidemicăă.. Este Este precedată de o faringită şi însoţită de bacteriemie. precedată de o faringită şi însoţită de bacteriemie. EEste caracterizată prin febră înaltă, cefalee, vomă, ste caracterizată prin febră înaltă, cefalee, vomă, fotofobie, hiperestezie cutanată. Poate fi prezentă fotofobie, hiperestezie cutanată. Poate fi prezentă poziţia caracteristică în "cocoş de puşcă" dată de poziţia caracteristică în "cocoş de puşcă" dată de sindromul de contractură. Frecvent se întâlneşte sindromul de contractură. Frecvent se întâlneşte herpesul labial,herpesul labial, pete peteşşii cutanate sau artralgii.ii cutanate sau artralgii. Afectarea sistemului nervos se face în grade Afectarea sistemului nervos se face în grade variabile, cu delir, agitaţie psihomotorie, variabile, cu delir, agitaţie psihomotorie, somnolenţă, chiar comă, pareze şi paralizii, somnolenţă, chiar comă, pareze şi paralizii, convulsii.convulsii.

Evoluţia Evoluţia în absenţa tratamentului se face spre deces în în absenţa tratamentului se face spre deces în 80-90% din cazuri, restul prezentând sechele grave.80-90% din cazuri, restul prezentând sechele grave.

4. Alte forme:4. Alte forme: iinfecnfecţţii bronhopulmonare, ii bronhopulmonare, endocardite, pericardite, osteomielite, endocardite, pericardite, osteomielite, artrite (determinate de formarea de artrite (determinate de formarea de complexe imune), conjunctivite, angine. complexe imune), conjunctivite, angine.

Diagnosticul de laborator al Diagnosticul de laborator al infectiilor meningocociceinfectiilor meningococice

PrePrelevatelevate:: in funcin funcţţie de forma clinicie de forma clinicăă se se prelevă exprelevă exssudatul nasofaringianudatul nasofaringian, , sânge pentru sânge pentru hemoculturăhemocultură, , LCR, lichidul articular, etcLCR, lichidul articular, etc. .

Probele se prelevProbele se prelevă înainte de a se administra ă înainte de a se administra antibiotice şi se transportă rapid la laborator, antibiotice şi se transportă rapid la laborator, feritferitee de variaţiile de temperatură şi lumină. de variaţiile de temperatură şi lumină. La necesitate se utilizează mediul de transport La necesitate se utilizează mediul de transport Stuart Stuart

Diagnosticul directDiagnosticul directEExamenxamenulul LCR LCR esteeste primordial p primordial pententrruu diagnostic. Prelevat diagnostic. Prelevat

în condiţii aseptice prin puncţie lombară, în volum de în condiţii aseptice prin puncţie lombară, în volum de 4-6 ml în 2 eprubete de centrifugă. 4-6 ml în 2 eprubete de centrifugă.

LCR estLCR estee tu tullbburure, e, conconţţine ine mii sau zeci de mii de elemente mii sau zeci de mii de elemente celulare, cu predominanţa de 95-100% a neutrofilelor. celulare, cu predominanţa de 95-100% a neutrofilelor. AceastAceastăă reacţi reacţiee celulară celulară este insoeste insoţţitităă de de hhiipoglpogliicorahiecorahie, , de hde hiiperalbuminorahieperalbuminorahie şşi i pH acid prin pH acid prin acumularea de acid piruvic şi lactic. acumularea de acid piruvic şi lactic.

I. Examenul microscopicI. Examenul microscopic al sedimentului LCRal sedimentului LCR a) a) Frotiuri colorate cu albastru de metilen sau Gram:

diplocodiplococici Gram Gram--negatinegativivi reniformi reniformi îîn pozitie in pozitie intra şntra şii extraextracelularcelulară, ă, dardar densit densitatateeaa bacteri bacteriaană estnă estee scscăăzutzută, ă, şşi i examenexamenulul est estee negati negativ v îîn 1/3 n 1/3 cacazurizuri.. Prezenţa Prezenţa leucocitelor în număr mare pledează pentru un leucocitelor în număr mare pledează pentru un prognostic favorabil. Frotiul colorat Ziehl-Neelsen prognostic favorabil. Frotiul colorat Ziehl-Neelsen permite diferenţierea de meningita tuberculoasăpermite diferenţierea de meningita tuberculoasă

b) RIF b) RIF

II. EII. Examenxamenulul bacteriologicbacteriologic Sedimentul din LCRSedimentul din LCR se însămânţează pe medii de se însămânţează pe medii de

cultură îmbogăţite, cum sunt geloza-sânge, geloza-cultură îmbogăţite, cum sunt geloza-sânge, geloza-ciocolată, mediul Muller-Hinton preîncălzite la 37 C.ciocolată, mediul Muller-Hinton preîncălzite la 37 C.

ExExssudatul nazofaringianudatul nazofaringian se însămânţează imediat se însămânţează imediat după recoltare pe medii cu adaos de antibiotice după recoltare pe medii cu adaos de antibiotice (lincomicină, vancomicină, ristomicină) pentru (lincomicină, vancomicină, ristomicină) pentru inhibarea altor specii microbiene existente în inhibarea altor specii microbiene existente în exexssudat.udat.

SângeleSângele pentru hemocultură se însămânţează pentru hemocultură se însămânţează direct pe medii de cultură lichide (bulion glucozat direct pe medii de cultură lichide (bulion glucozat 2% respectând proporţia de 5 % sânge). Examinările 2% respectând proporţia de 5 % sânge). Examinările se fac zilnic timp de 5-7 zile prin subculturi.se fac zilnic timp de 5-7 zile prin subculturi.

IdentificareaIdentificarea şi diferenţierea de neisseriile comensale şi diferenţierea de neisseriile comensale se bazează pe aspectul morfologic pe frotiuri se bazează pe aspectul morfologic pe frotiuri colorate Gramcolorate Gram, , prin testul oxidazei care este pozitiv,prin testul oxidazei care este pozitiv, scindarea scindarea numai a numai a glucozei glucozei şşi maltozeii maltozei, identificarea , identificarea serologică prin RA cu seruri imune specifice de grup.serologică prin RA cu seruri imune specifice de grup.

III.III. Decelarea directăDecelarea directă în sânge şi LCR a în sânge şi LCR a antigenelor antigenelor polizaharidice capsulare, polizaharidice capsulare, utilizutilizâând reacnd reacţţiile de iile de contraimunoelectroforeză, ELISA, latex şi contraimunoelectroforeză, ELISA, latex şi coaglutinarecoaglutinare cu antiseruri specifice de cu antiseruri specifice de grup.grup.

IV. Diagnosticul serologic. IV. Diagnosticul serologic. Pot fi titraţi Ac Pot fi titraţi Ac antimeningococici utilizând RA sau RHAI. antimeningococici utilizând RA sau RHAI. Are valoare diagnostică redusăAre valoare diagnostică redusă

V. Detectarea acizilor nucleiciV. Detectarea acizilor nucleiciTratamentul Tratamentul trebuie instituit extrem de trebuie instituit extrem de

urgent, la 30 minute de la internare şi de urgent, la 30 minute de la internare şi de la efectuarea puncţiei lombare. la efectuarea puncţiei lombare.

Tratamentul etiotropTratamentul etiotrop constă în administrarea constă în administrarea de antibiotice timp de 7-10 zile: Penicilină, de antibiotice timp de 7-10 zile: Penicilină, AmpicilinAmpicilinăă, Cloramfenicol, Cefalosporine , Cloramfenicol, Cefalosporine generaţia a III.generaţia a III.

Profilaxia specificProfilaxia specificăă: : imunizare activă imunizare activă cu cu vaccin vaccin polizaharidic polizaharidic antimeningococic antimeningococic monovalent sau polivalent (A, C, Y, W), care se monovalent sau polivalent (A, C, Y, W), care se poate administra intradermic sau subcutanat, poate administra intradermic sau subcutanat, după vârsta de 3 luni (pentru grupul A), oferind după vârsta de 3 luni (pentru grupul A), oferind protecţie de 95-100% pentru o durată de 2-3 ani;protecţie de 95-100% pentru o durată de 2-3 ani; polizaharidul capsular de grup B este un polizaharidul capsular de grup B este un homopolimer al acidului sialic homopolimer al acidului sialic şşi nu este i nu este imunogen pentru oameni. imunogen pentru oameni.

ContacţiiContacţii vor fi supravegheaţi clinic timp de 10 vor fi supravegheaţi clinic timp de 10 zile. Chimioprofilaxia cu Penicilină V, timp de 7 zile. Chimioprofilaxia cu Penicilină V, timp de 7 zile, sau cu Rifampicină, 3 zile, se aplică în familii zile, sau cu Rifampicină, 3 zile, se aplică în familii sau în colectivităţi de preşcolarisau în colectivităţi de preşcolari

PurtătoriiPurtătorii,, depistaţi în focar, vor fi trataţi timp de depistaţi în focar, vor fi trataţi timp de 7-10 zile cu Penicilină V.7-10 zile cu Penicilină V.

CazuCazurile de meningitrile de meningităă sau meningococcemie sau meningococcemie v voror fi fi declaratedeclarate inin 24 de ore de la depistare 24 de ore de la depistare

Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeCaractere morfobiologiceCaractere morfobiologiceNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae este un coc Gram- este un coc Gram-

negativ, cu diametrul de 0.6 - 1.0 µm, negativ, cu diametrul de 0.6 - 1.0 µm, uzual observat uzual observat îîn perechi cu suprafen perechi cu suprafeţţele ele concave alconcave alăăturate. In prelevate turate. In prelevate patologice (puroi, exsudate) se patologice (puroi, exsudate) se localizeazlocalizeazăă frecvent intracelular in frecvent intracelular in leucocite polimorfonucleare (neutrofile). leucocite polimorfonucleare (neutrofile). Imobil, poseda fimbrii cu lungimea de Imobil, poseda fimbrii cu lungimea de cativa micrometri. cativa micrometri. În funcţie deÎn funcţie de preprezzenenţaţa fimbri fimbriilorilor sse e cunosc patrucunosc patru ttiippuriuri dede N. gonorrhoeaeN. gonorrhoeae :: T1, T2, T3, T4 T1, T2, T3, T4

Caractere de culturaCaractere de culturaGonococul este exigent la cultivare. Pentru Gonococul este exigent la cultivare. Pentru

izolarea lui se utilizeazizolarea lui se utilizeazăă medii medii îîmbogmbogăţăţite ite cu ser cu ser sangvinsangvin, extract de drojdii, lichid , extract de drojdii, lichid ascitic, etcascitic, etc (HYL, Thayer-Martin) (HYL, Thayer-Martin). Culturile . Culturile cresc la 35-36 C cresc la 35-36 C îîn atmosfern atmosferăă umed umedăă cu 5- cu 5-10 % CO10 % CO22. Peste 24-48 ore apar colonii . Peste 24-48 ore apar colonii mici mici (0,5-1mm), (0,5-1mm), netede, translucidenetede, translucide. .

După aspectul coloniilor pot fi descrise 4 După aspectul coloniilor pot fi descrise 4 tipuri:tipuri:

- Colonii de tipul I şi II apar la izolare, Colonii de tipul I şi II apar la izolare, corespund tulpinilor virulente, purtătoare corespund tulpinilor virulente, purtătoare de pili (fimbrii),de pili (fimbrii),

- Colonii de tipul III şi IV, apar la repicare, mai Colonii de tipul III şi IV, apar la repicare, mai mari, corespund tulpinilor fără pili mari, corespund tulpinilor fără pili

Structura antigenicăStructura antigenică- 3 proteine majore din ME3 proteine majore din ME (PI, PII, PIII) (PI, PII, PIII)

definesc multiple serotipuri (variante). definesc multiple serotipuri (variante). PII prezintă o mare variabilitate PII prezintă o mare variabilitate antigenică, chiar în interiorul unei antigenică, chiar în interiorul unei tulpini.tulpini.

- Lipopolizaharidul MELipopolizaharidul ME- Proteina fimbriilorProteina fimbriilor, cu o mare , cu o mare

diversitate antigenicădiversitate antigenicăCaractere biochimiceCaractere biochimice: gonococii sunt : gonococii sunt

oxidazo-pozitivi, scindeaza doar oxidazo-pozitivi, scindeaza doar glucoza pglucoza pââna la acid, nu atacna la acid, nu atacăă maltoza maltoza

Factorii de patogenitateFactorii de patogenitate1.1. Adezinele (fimbriile, unele proteine din Adezinele (fimbriile, unele proteine din

membrana externa – PII). Aceste proteine membrana externa – PII). Aceste proteine suportsuportăă frecvent varia frecvent variaţţii antigeniceii antigenice

2.2. sIgAsIgA-p-proteaze, cu rol in colonizarea roteaze, cu rol in colonizarea mucoaselormucoaselor

3.3. Proteine ale ME (PI), care inhibProteine ale ME (PI), care inhibăă capacitatea fagocitelor de a capacitatea fagocitelor de a distrugedistruge gonocociigonococii

4.4. Endotoxina Endotoxina 5.5. Sisteme de captare a Fe (receptori Sisteme de captare a Fe (receptori

membranari pentru transferinmembranari pentru transferinăă şşi i lactoferinlactoferinăă, care permit captarea directa , care permit captarea directa a Fe din aceste substana Fe din aceste substanţţe, precum e, precum şşi i extragerea lui directextragerea lui directăă din din hemoglobinhemoglobină)ă)

Designation Location Contribution

PilEmajor fimbrial protein

initial binding to epithelial cells

P.II (Opa)outer membrane protein

contributes to invasion

P.I (Por)outer membrane porin

may prevent phagolysosome formation in neutrophils and/or reduce oxidative burst

LOSouter membrane lipooligosaccharide 

elicits inflammatory response, triggers release of TNF

P.III (Rmp)outer membrane protein

elicits formation of ineffective antibodies thatblock bactercidal antibodies against P.I and LOS

Tbp1 and Tbp2

outer membrane receptors for transferrin

iron acquisition for growth

Lbpouter membrane receptor for lactoferrin

iron acquisition for growth

RezistenRezistenţţa a îîn mediul externn mediul extern

N. gonorrhoeaeN. gonorrhoeae este un mi/o fragil, este un mi/o fragil, sensibil la variasensibil la variaţţii de temperaturii de temperaturăă, , desicare, raze UV desicare, raze UV şşi alte condii alte condiţţii ale ii ale mediului extern. mediului extern.

Gonococul este inhibat de bumbacul Gonococul este inhibat de bumbacul din tampoane (hipoclorit...). Pentru din tampoane (hipoclorit...). Pentru prelevări sunt indicate tampoane cu prelevări sunt indicate tampoane cu alginat de Ca sau din dacron.alginat de Ca sau din dacron.

Epidemiologia infecEpidemiologia infecţţiei gonocociceiei gonococice

Sursa de infecSursa de infecţţieie – unica surs – unica sursăă este este bolnavbolnavul cu gonoree, în special cu infecţie ul cu gonoree, în special cu infecţie inaparentăinaparentă

TransmitereaTransmiterea

– – la maturi exclusiv prin contact sexual; la maturi exclusiv prin contact sexual;

- - la nou-nla nou-năăscut – la trecerea prin canalul de scut – la trecerea prin canalul de nanaşştere al mamei bolnavetere al mamei bolnave

Patogeneza gonoreeiPatogeneza gonoreei

Prin intermediul fimbriilor Prin intermediul fimbriilor şşi a unor proteine i a unor proteine din ME (din ME (PIIPII) gonococii ader) gonococii aderăă la vilozit la vilozităţăţile ile celulelor epiteliale columnare neciliate. celulelor epiteliale columnare neciliate.

UrmeazUrmeazăă penetrarea lor penetrarea lor îîn celuln celulăă (prin (prin endocitozendocitozăă), apoi vacuola este transportat), apoi vacuola este transportatăă la baza celulei, unde bacteria este eliberatla baza celulei, unde bacteria este eliberatăă prin exocitozprin exocitozăă îîn n ţţesutul subepitelial. esutul subepitelial.

Pe parcursul infecPe parcursul infecţţiei, lipoiei, lipoppolizaharidul olizaharidul bacterian (Lbacterian (LPPZ) Z) şşi peptidoglicanul sunt i peptidoglicanul sunt eliberate prin autoliza celulelor. Ambele eliberate prin autoliza celulelor. Ambele substansubstanţţe activeaze activeazăă complementul pe calea complementul pe calea alternativa, Lalternativa, LPZPZ de asemenea stimuleaz de asemenea stimuleazăă producproducţţia factorului de necrozia factorului de necrozăă a tumorilor a tumorilor (TNF), care provoac(TNF), care provoacăă distugerea celulelor. distugerea celulelor. Neutrofilele sunt imediat atrase Neutrofilele sunt imediat atrase îîn focar n focar şşi i inglobeaza bacteriile. Mulinglobeaza bacteriile. Mulţţi gonococi sunt i gonococi sunt capabili capabili săsă supravie supravieţţuieasca uieasca îîn interiorul n interiorul fagocitelor pfagocitelor pâânnăă la moartea lor, cu la moartea lor, cu eliberarea bacteriilor ingerate.eliberarea bacteriilor ingerate.

InfecInfecţţiile cauzate deiile cauzate de N.gonorrhoeae N.gonorrhoeaeInfecInfecţţia gonococicia gonococicăă este este îîn general n general

limitatlimitată laă la mucoase mucoaselele cu epiteliu cu epiteliu columnar. Mai frecvent implicatcolumnar. Mai frecvent implicatăă este este uretra, cervixul, rectul, faringele uretra, cervixul, rectul, faringele şşi i conjunctiva. Epiteliul scuamos al conjunctiva. Epiteliul scuamos al vaginului nu este sensibil la infecvaginului nu este sensibil la infecţţia cuia cu N. gonorrhoeae.N. gonorrhoeae. Totu Totuşişi, la feti, la fetiţţe e gonococul poate provoca vulvovaginite.gonococul poate provoca vulvovaginite.

InfecInfecţţiile mucoaselor sunt caracterizate iile mucoaselor sunt caracterizate uzual uzual prinprin secre secreţţii purulente. ii purulente.

Gonoreea este o uretritGonoreea este o uretrităă specific specificăă, cu eliminare , cu eliminare masivmasivăă de puroi, mai aparent la barbati dec de puroi, mai aparent la barbati decâât la t la femei. femei.

Termenul Termenul "gonoreea","gonoreea", a fost utilizat prima data de a fost utilizat prima data de Galen in secolul II Galen in secolul II şi înseamnăşi înseamnă ““scurgereascurgerea seminţeiseminţei". Multe secole gonoreea ". Multe secole gonoreea şşi sifilisul erau i sifilisul erau confundate. Paracelsus (1530) credea ca gonoreea confundate. Paracelsus (1530) credea ca gonoreea este un simptom precoce al sifilisului. Aceasta este un simptom precoce al sifilisului. Aceasta confuconfuzzie a fost intie a fost intăărita de medicul englez John rita de medicul englez John Hunter, in 1767. Hunter intenHunter, in 1767. Hunter intenţţionat ionat şşi-a inoculat i-a inoculat puroi de la un bolnav puroi de la un bolnav cu simptome cu simptome de gonoree, de gonoree, îmîmbolnavbolnavindu-seindu-se de sifilis! de sifilis!

Agentul cauzal al gonoreei, Agentul cauzal al gonoreei, Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae, a , a fost descris pentru prima oarfost descris pentru prima oarăă de A. Neisser de A. Neisser îîn n 1879 1879 îîn puroi de la un bolnav de gonoree. Mi/o a n puroi de la un bolnav de gonoree. Mi/o a fost izolat fost izolat îîn culturn culturăă pur purăă îîn 188n 18822 de către Loeffler de către Loeffler pe ser coagulat şpe ser coagulat şi rolul si rolul săău etiologic a fost stabilit u etiologic a fost stabilit ulterior pe voluntari umani (conform postulatelor ulterior pe voluntari umani (conform postulatelor lui Koch). lui Koch).

ParticularitaParticularitaţţile gonoreei la ile gonoreei la bbăărbarbaţţii

In majoritatea cazurilor decurge acutIn majoritatea cazurilor decurge acut (85-95%)(85-95%), fiind manifestat, fiind manifestatăă clinic: clinic:

1.1. UretritaUretrita ( (secresecreţţie uretralie uretralăă alb – alb – galbuie, durergalbuie, dureree şşi usturime la i usturime la mictiune, dizurie)mictiune, dizurie)

2.2. ProstatitaProstatita

3.3. OrhitaOrhita

4.4. Epididimita Epididimita

ParticularitParticularităţăţile gonoreei la femeiile gonoreei la femeiIn majoritatea cazurilor infecIn majoritatea cazurilor infecţţia decurge ia decurge

asimptomaticasimptomatic (80% de cazuri) (80% de cazuri), cu , cu evoluevoluţţie spre cronicizare.ie spre cronicizare.

Formele clinice:Formele clinice:1.1. CCervicitaervicita (cu sau f (cu sau făărrăă leucoree) – forma leucoree) – forma

cea mai frecventcea mai frecventăă2.2. Uretrita Uretrita 3.3. Bartolinita Bartolinita 4.4. SalpingitaSalpingita (pericol de sterilitate, (pericol de sterilitate,

graviditate extrauteringraviditate extrauterinăă))5.5. OvaritaOvarita6.6. EndometritaEndometrita7.7. PeritonitaPeritonita

Alte forme cliniceAlte forme clinice: : faringita faringita şşi proctita i proctita gonococicgonococicăă

Diseminarea infecDiseminarea infecţţiei gonococice iei gonococice (1-3%) (1-3%) determindeterminăă artrite, artrite, leziuni cutanate, leziuni cutanate, septicemii, septicemii, endocardite, meningite.endocardite, meningite. Tulpinile de Tulpinile de N. N. gonorrhoeaegonorrhoeae care cauzeaza infectii care cauzeaza infectii diseminate sunt uzual rezistente la diseminate sunt uzual rezistente la complement complement şşi la reaci la reacţţia bactericidia bactericidăă a serului. a serului.

La nou-nLa nou-năăscut scut conjunctivitaconjunctivita purulent purulentăă cu cu extinderea rapidă a infecţiei la globul ocular extinderea rapidă a infecţiei la globul ocular ((ophthalmia neonatorumophthalmia neonatorum) poate) poate fi urmare a fi urmare a contamincontaminăării la trecerea prin canalul de rii la trecerea prin canalul de nanaşştere tere

Diagnosticul de laborator al gonoreeiDiagnosticul de laborator al gonoreei

Prelevate: Prelevate: - La barbaLa barbaţţii - - secresecreţţiile uretraleiile uretrale- La femei La femei - - secresecreţţiile uretrale, vaginale, din iile uretrale, vaginale, din

endocol sau endocol sau orificiile orificiile glandele vulvareglandele vulvare- Pot fi examinate conPot fi examinate conţţinutul leziunilor cutanate, inutul leziunilor cutanate,

exsudat articulaexsudat articularr,, nasofaringian, nasofaringian, s sâânge, puroi nge, puroi din conjunctivdin conjunctivă, tampon rectală, tampon rectal..

Pentru recoltarea acestor secrePentru recoltarea acestor secreţţii se foloseste un ii se foloseste un tampon de tampon de alginat de Caalginat de Ca (sau ansa (sau ansa bacteriologică), bacteriologică), care este apoi trimis care este apoi trimis imediat înimediat în laborator pentru testare (dupa necesitate se laborator pentru testare (dupa necesitate se foloseste mediufoloseste mediull de transport de transport Stuart cu Stuart cu tioglicolat şi cărbune activattioglicolat şi cărbune activat).).

Daca eliminDaca eliminăările sunt srile sunt săraceărace, se procede , se procede la la stimularea secreţiei (stimularea secreţiei (reactivarereactivare, , provocare):provocare):

- AlimentarAlimentarăă (cu bauturi alcoolice – bere) (cu bauturi alcoolice – bere)- ChimicChimicăă (instila (instilaţţii cu nitrat de Ag – sol. ii cu nitrat de Ag – sol.

1% in uretra, 10% in colul uterin)1% in uretra, 10% in colul uterin)- BiologicBiologicăă (inocularea gonovaccinului, (inocularea gonovaccinului,

recoltarea secreţiilor imediatrecoltarea secreţiilor imediat dupa dupa menstre la femei)menstre la femei)

- MecanicMecanicăă (masaj al prostatei) (masaj al prostatei)- TermicTermicăă ( (diatermie sau inductotermiediatermie sau inductotermie) )

Metodele de dMetodele de diagnosticiagnostic

1.1. Examenul microscopic Examenul microscopic (elocvent (elocvent doar in cazul uretritelor acute la doar in cazul uretritelor acute la bbăărbarbaţţi). i).

- In frotiuri din puroiul uretral In frotiuri din puroiul uretral colorate Gram sau cu albastru de colorate Gram sau cu albastru de metilen se observmetilen se observăă diplococi gram- diplococi gram- situasituaţţi intra- sau extracelular.i intra- sau extracelular.

- RIFRIF

Examenul bacteriologicExamenul bacteriologic ((este obligator in este obligator in forme asimptomatice sau cronice)forme asimptomatice sau cronice)

GGonocoonococcuull fiindfiind oo bacterie bacterie foartefoarte fragilă, est fragilă, estee obligator de a obligator de a însămânţînsămânţaa imediat prelev imediat prelevaatteleele sau sau de a utiliza un mediu de transport de a utiliza un mediu de transport adaptatadaptat. . Pentru izolare se folosesc medii Pentru izolare se folosesc medii îîmbogatite (ex.: mbogatite (ex.: mediul mediul ThayerThayer--Martin, Martin, carecare est estee bogatbogat în fact în factoorrii de crde creeşşteretere ş şii conţin conţinee antibioti antibioticce (vancome (vancomiicincinaa, , colistincolistinaa, am, amffotericinotericinaa) ) care care inhibă inhibă altealte bacteri bacteriii ddinin prelev prelevaat). t). CoColloniileoniile ap apaarr peste peste 18 18 - - 24 h d 24 h de e incubaincubarere iin atmosn atmosfferă eră cucu CO CO22..

Identificarea Identificarea N.gonorrhoeaeN.gonorrhoeae se efectuează în baza se efectuează în baza caracterelor morfotinctoriale, aspectul coloniilor caracterelor morfotinctoriale, aspectul coloniilor crescute pe medii selective, oxidaza +, scindarea crescute pe medii selective, oxidaza +, scindarea doar a glucozei până la acid. Seroidentificarea cu doar a glucozei până la acid. Seroidentificarea cu Ac monoclonali în reacţia de Co-aglutinare Ac monoclonali în reacţia de Co-aglutinare

Depistarea directă a Depistarea directă a N. gonorrhoeaeN. gonorrhoeae în în prelevate poate fi realizată prin tehnici prelevate poate fi realizată prin tehnici ELISA sau RIFELISA sau RIF

Detectarea acizilor nucleici prin Detectarea acizilor nucleici prin hibridare sau amplificare genicăhibridare sau amplificare genică

Examenul serologic Examenul serologic (serodiagnosticul)(serodiagnosticul)

- RFC- RFC

Tratamentul gonoreeiTratamentul gonoreei

Antibiograma este indispensabilAntibiograma este indispensabilăă unui unui tratament eficient!tratament eficient!

- Cefalosporine de generaCefalosporine de generaţţia IIIia III- FluoroFluorochichinolonenolone- Cotrimoxazol Cotrimoxazol Profilaxia gonoreeiProfilaxia gonoreei- Nespecifica (Nespecifica (individuală sau generalăindividuală sau generală))- Prevenirea oftalmiei gonococice se Prevenirea oftalmiei gonococice se

efectueaza prin instilarea efectueaza prin instilarea intraconjunctivală intraconjunctivală la nla nou-născuţiou-născuţi a solu a soluţţiei de nitrat de Ag iei de nitrat de Ag