dozarea glutationului În sânge
TRANSCRIPT
-
8/18/2019 Dozarea Glutationului În Sânge
1/2
Dozarea glutationului în sânge
Glutationul este o tripeptidă (gamma-glutamil – cisteinil - glicocol),răspândită în toate celulele animale.
Datorită grupării tiol libere de la restul de cisteină, glutationul se
oxidează uşor trecând în orma oxidată (disulură). !rocesul este re"ersibil şistă la baza proprietă#ii glutationului de a ac#iona în organism ca sistemredox. $otodată glutationul îndeplineşte şi rolul de transportor şi donator de%idrogen.
Principiul metodei
Glutationul redus este determinat "olumetric cu o solu#ie de iodat de potasiu&', al cărui titru a ost stabilit a#ă de glutation. Glutationul total sedetermină după o prealabilă tratare cu *n pulbere şi o nouă titrare cu iodatde potasiu &'. Dieren#a între cele două orme reprezintă glutationuloxidat.
Stabilirea titrului KIO3 faţă de glutation+e prepară o solu#ie de glutation , în acid sulosalicilic . Din
această solu#ie se măsoară ml (mg glutation) într-un balon rlenme/er,se adaugă ,0 ml solu#ie acid sulosalicilic 1, ,0 ml iodură de potasiu 0 şi picături amidon. +e titrează cu iodat de potasiu &' la temperatura de2 şi imediat prin adăugarea solu#iei de iodură de potasiu. 3olumul teoreticde iodat de potasiu &' este ec%i"alent cu 4,5 ml pentru ml glutation.
Mod de lucruDozarea glutationului redus
Determinarea glutationului redus se ace pe sânge recoltat pe oxalat depotasiu în prima oră de la recoltare.6ntr-un pa%ar rlenme/er se pipetează 1 ml sânge, 4 ml apă distilată şi 1 mlacid sulosalicilic 0. +e 7ltrează amestecul pe un 7ltru uscat. ml 7ltratse trec într-un pa%ar rlenme/er, se adaugă ,0 ml solu#ie de acidsulosalicilic 1, ,0 ml solu#ie 89 0 şi două picături de amidon. +e titreazăimediat cu o solu#ie de iodat de potasiu &' până la colora#ia albastră.
Calcul+e ace #inând seama că 4,5 ml solu#ie iodat de potasiu &' titrează mg de glutation.
-
8/18/2019 Dozarea Glutationului În Sânge
2/2
n ml 89:4 ' 4,5 ; mg glutation' ml sânge.
Dozarea glutationului total
6ntr-un balon rlenme/er se măsoară –0 ml 7ltrat rămas de la
dozarea glutationului redus, peste care se adaugă -1 mg *n pulbere, curol de a reduce tot glutationul. +e lasă minute la temperatura camerei,agitându-se continuu. xcesul se îndepărtează printr-o 7ltrare pe %ârtie de7ltru uscată. Din 7ltrat se măsoară ml şi se procedează ca şi la titrareaglutationului redus. !entru a ob#ine glutationul oxidat se ace dieren#a întreglutationul total, dozat după adăugarea zincului şi glutationul redus, dozatini#ial.
Valori fziologice3alorile normale sunt cuprinse între 4-1 mg glutation redus la ml
sânge total şi 0- mg glutation oxidat la ml sânge total. 6ntreagacantitate de glutation se a