determinarea micotoxinelor din produse alimentare

8/16/2019 Determinarea Micotoxinelor Din Produse Alimentare

1/4

Determinarea micotoxinelor din produse alimentare

Micotoxinele fac parte din categoria metaboliţilor unor fungi ( Aspergillus, Penicillium şi Fusarium) carese dezvoltă pe produsele alimentare, impurifică aceste produse şi, de cele mai multe ori, le conferă proprietăţi

toxice. Cele mai cunoscute micotoxine care contaminează produsele alimentare sunt: aflatoxinele, ochratoxinele,zearalenona, patulina şi tricotecenele.oxicitatea foarte crescută a micotoxinelor şi prezenţa lor, practic ubicvitară, !n produsele alimentare

care reprezintă substraturi favorabile pentru dezvoltarea mucegaiurilor fac imperios necesară evidenţierea şideterminarea cantitativă !n alimente.

"eterminarea micotoxinelor se realizează !n mai multe etape:# extracţia micotoxinelor din proba de analizat$# purificarea extractelor conţin%nd micotoxine$# identificarea prin cromatografie pe strat subţire$# determinarea semicantitativă sau cantitativă.

Determinarea aflatoxinelor B şi G

&flatoxinele reprezintă un grup de metaboliţi secundari elaboraţi de tulpini toxinogene de Aspergillus , Penicillium , şi Rhisopus $ dintre ele mai importante, at%t din punct de vedere alnumărului de tulpini c%t şi a cantităţii de toxină produsă sunt A. flavus şi A. parasiticus.

O

O

O

O O

H

OCH 3H

O

O

O

O O

H

OCH 3H

'tructura chimică a aflatoxinei ) 'tructura chimică a aflatoxinei *

O

O

O

O

OCH 3

O

O

H

H

O

O

O

O

OCH 3

O

O

H

H

Structura chimic ă a afatoxinei G 1 Structura chimic ă a afatoxinei G 2

+xtracţia aflatoxinelor se poate realiza !n diferite moduri, !n funcţie de conţinutul !n grăsimi al probei. Identificarea aflatoxinelor prin cromatografie pe strat subţire Reactivi şi materiale:- plăci cromatografice cu ieselgel - Merc , activate /0 minute la ))01C$- sisteme de solvenţi :


2/4

# toluen#acetat de etil#acid formic (2:3:)4, sau # cloroform#metanol (5:)4, sau

# cloroform#acetonă (5:)4, !n sistem monodimensional, şi # eter etilic# metanol 6 apă (53:3,2:),24 - I;

# cloroform# acetonă(50:)0 ) - II, !n sistem bidimensional.# soluţii standard de aflatoxine B 1, B , G 1, G , cu concentraţii cuprinse !ntre 0,*2 # 0,20 µg7m8.

9repararea acestor soluţii se realizează sub lumină galbenă, deoarece aflatoxinele sunt fotosensibile. Atenţie: afatoxinele sunt deosebit de toxice!Cromatoplăcile se usucă !n aer, ferite de lumină, timp de )0 # *0 minute, după care se examinează !n

lumină ood, la λ ; /:)0:/4 sau# eter etilic# metanol # apă (52:3:)4, !n sistem unidimensional, şi

# eter etilic# metanol # apă (52:3:)4 # I; # cloroform#acetonă#izopropanol (=>:)0:/ ) - II$ # soluţii standard de aflatoxine %, )0 µg7m8.

Cromatoplăcile se usucă !n aer, ferite de lumină, timp de )0#*0 minute, după care se examinează !nlumină ood, la λ ; /


3/4

Determinarea cantitativă se realizează prin densitometrie sau cromatografie de lichide de !naltă performanţă$ se utilizează o coloană cu fază !nversă C )=, fază mobilă apă# acetonitril (>2:*24, debit ; 0,2m87minut.

Determinarea oc(ratoxinelor?chratoxinele sunt micotoxine nefrotoxice elaborate de genuri de Aspergillus şi Penicillium, care

contaminează cerealele şi mai ales, orzul$ pot fi prezente !n produsele alimentare pentru care materiile prime suntcereale dar şi !n alte categorii de produse (vinuri4. ?chratoxinele &, , C reprezintă un grup de compuşicu structură chimică !nrudită, !n molecula cărora 8#fenilalanina este cuplată printr#o legăturăamidică cu un derivat izocumarinic:

C 6 H 5 CH 2 CH

COOR

NH CO

R 1

O

CH 3

OOH

'tructura chimică a ochratoxinelor

Identif icarea ochratoxinei prin cromatografie pe strat subţireCromatoplăcile se usucă !n aer, ferite de lumină, după care se examinează !n lumină ood la λ ; *23

nm.c(ratoxina apare su# formă de spoturi cu fluorescenţă verde-al#astră$Determinarea cantitativă se realizează prin densitometrie sau cromatografie de lichide de !naltă

performanţă$ coloană C )=, eluent acetat de sodiu 3 mM # acid acetic # acetonitril ()5: 2*: 3=4$ debit ) m8 peminut, detector AB sau detector de fluorescenţă :(λ excitaţie ; /// nm şi λ emisie ; 3


4/4

determinarea micotoxinelor din produse alimentare

Documents