articol analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la hippophae rhamnoides l. cultivată in...

Upload: bogdan-soltuzu

Post on 07-Jul-2018

223 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    1/20

    Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L.cultivată in vitro

    BOGDAN-DORIN ŞOLTUZU*

    * Universitatea “Alexandru Ioan Cua!" #a$ultatea de Biolo%ie" Bd-ul Carol I &'A" $od i()''+'," Iai" Ro./nia

    Introducere

    0n (ro$esul de re%enerare a (alntelor !in vitro! se o12in (roto$lone $/nd re%enerarea se

    realiea3 din (roto(lati" so.ato$lone 4re%enerare din $elule so.ati$e5 i %a.eto$ole 4re%enerarea

     (lantelor din $elule %a.eti$e56 A$este $lone re(reint3 sursa unei .ari varia1ilit32i %eneti$e"

    datorat3 $ondi2iilor de $ultivare i re%enerare i (ot 7i utiliate 8n s(orirea (rodu$2iilor $antitative i

    $alitative6

    0n $on$luie se (oate a7ir.a $3 $ele .ai i.(ortante alternative 8n re%enerarea (lantelor sunt)

    - reinstalarea (ro%ra.ului onto%eneti$ $o.(let (rin indu$erea

    e.1rio%eneei so.ati$e9

    - re$onstru$2ia (lantei 8ntre%i (rin ini2ierea or%ano%eneei

    4rio%enea i $aulo%enea5

    Re%enerarea (rin or%ano%ene3 este s(e$i7i$3 .ai ales siste.elor stati$e de $ultivare"

    res(e$tiv utiliarea su1stratului solid re(reentat de .ediul de $ultut3 a%ariat6Ast7el se (oate realia .ulti(li$area industrial3 a %enoti(urilor valoroase naturale sau

    o12inute (rin (ro$edee $lasi$e" ori .oderne" i re(reentate (rin (lante de $ultur3" (lante

    orna.entale" (o.i" ar1ori 7orestieri sau (lante $u i.(ortan23 7itotera(euti$3 aa $u. este $3tina

    4 Hippophae rhamnoides656

    Te:ni$ile ;in vitro! o7er3 (osi1ilitatea $onserv3rii i (er(etu3rii unor %enoti(uri valoroase6

    C3tina este o (lant3 uni$3 i i.(li$it valoroas3 (rin $on2inutul $o.(lex de (rin$i(ii a$tive

    4Ala. " &''< 9 C:en si $ola16" &''+9 Dris" &''+56

    0n a$est $ontext a. ur.3rit ela1orarea unui siste. de .i$ro(ro(a%are (entru $lonarea unor 

    soiuri elit3 de  Hippophae rhamnoides ssp6 carpathica.  A$easta (resu(une testarea .ediilor 

    ade$vate $ultiv3rii ex(lantelor" 8n s$o(ul “re$onstru$2iei! (lantelor 8ntre%i i (er(etu3rii a$estora

    4=ao siTi%erstedt" >??

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    2/20

    Ini2ierea $ulturilor ;in vitro! a 7ost realiat3 la dou3 soiuri de Hippophae rhamnoides ssp6

    carpathica ) Sfiştofca i Perişor.

    Cara$terul $lonal al .ulti(li$3rii ve%etative a $elor dou3 soiuri a 7ost asi%urat (rin utiliarea

    ex(lantelor .eriste.ati$e 4-& (ri.ordii 7oliare" (relevat de la (lantule i .u%uri axilari (releva2i de (e ra.urile

    unor indivii .aturi6

    Material şi metode de cercetare

    Material vegetal

    x(lantele ve%etale utiliate 8n ex(eri.entele noastre au $onstat din (lantule de

     Hippophae rhamnoides ssp. carpathica" o12inute (rin %er.inare ase(ti$3 4#oto >5 i .u%uri

    axilari (releva2i de (e ra.urile tinere 4#oto ?56 re%3tirea ex(lantelor (entru ino$ulare a $onstat din

    steriliarea $:i.i$3 a$estora" utili8ndu-se o su$$esiune de rea$tivi)

    - al$ool etili$ ' ti.( de + se$unde9

    - solu2ie de :i(o$lorit de sodiu ti.( de @->' .inute9

    - a(3 distilat3 steril3 utiliat3 (entru s(3larea re(etat3 a ex(lantelor 8n s$o(ul

    8nde(3rt3rii su1stan2elor anterior 7olosite6

    Metode de cercetare

      0ni2ierea $ulturilor in vitro a avut $a s$o(" intr-o (ri.a eta(a" evaluarea (osi1ilit32ilor de

    re%enerare dire$t3 (rin utiliarea ex(lantelor .eriste.ati$e6

    0n $onse$in23 a. lu$rat (e < variante ale .ediului 1aal Euras:i%e F Hoo%6 4ta1elul >56

    Diversi7i$area $o.(oi2iei .ediului Euras:i%e F Hoo% a avut la 1a3 utiliarea auxinelor i

    a $ito$:ininelor 8n di7erite $on$entra2ii i $o.1ina2ii" 7un$2ie de s$o(ul ur.3rit6

    Indu$2ia $aulo%en3 a 7ost realiat3 (rin testarea a dou3 $ito$:inine) 1enila.ino(urina i

    $:inetina" utili/ndu-se 8n a.1ele $auri $on$entra2ia de >.%l6 Au 7ost testate < variante ale

    .ediului E 4Ta1el &56 Jariantele > i & $on2in $a $ito$:inin3 BA iar $a auxin3 AIA6 Jariantele

    i < $on2in $a $ito$:inin3 K i $a auxin3 ANA6 Jariantele > i au o 1alan23 :or.onal3 e$:ili1rat3"

    iar & i < ex$edentar3 8n 7avoarea $ito$:ininei6 Jarianta +" li(sit3 de re%ulatori de $retere" a 7ost

    utiliat3 (entru indu$2ia rio%eneei6

    &

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    3/20

    MAC!"L"M"#"

    Ingrediente Concentra$ia %n solu$ianormală &mg'l(

     N   <  NO   D

    KNO   D

    >,+'

    >?''

    CaCl   & M &   & O

    '

    MIC!"L"M")#"

      D BO   <

    EnO   < M <   & O

    ZnO   < M   & O

     Na   & EoO   < M &

    & O

    CuO   <  M+   & O

    CoCl   &  M ,   & O

    ,"&

    &&"

    @",

    '"&+

    '"'&+

    '"'&+

    KI '"@

    I#AMI)"A$id ni$otini$iridoxin3 ClTia.in3

    '"+'"+'">

    Eeoinoitol >''+A,A!+- ' %l

    p, +"@

    #abelul . Compozi$ia c/imică a mediului Muras/ige 0 S1oog &MS 0 234(

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    4/20

    ariante egulatori de creştere5AP AIA A)A 6  

    > > .%l > .%l - -& > .%l '"> .%l - - - - > .%l > .%l< - - '"> .%l > .%l+ - - - -

    #abel 4. Medii nutritive pentru cultivarea e7plantelor meristematice de  Hippophaerhamnoides ssp. carpathica

     Index8 AIA - a$id -indolila$eti$  A)A - a$id -na7tila$eti$

      5AP - 1enila.ino(urina  6 - Hinetina

    Co.(onente .%l N

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    5/20

    - Re$oltarea ex(lantelor

    - Ini2ierea $ulturilor de $alus (rin ino$ularea a$estora (e .ediul nutritiv Euras:i%e-

    Hoo%6

    - Indu$erea re%ener3rii (e variante ale .ediilor de $ultur3" 1aate (e $on$entra2ii

    di7erite de re%ulatori de $retere6

    - Testarea $a(a$it32ii 1iosinteti$e a $alusului (rin TLC6

    ursa ex(lantelor ino$ulate ;in vitro! a $onstat 8n (lantule" o12inute (rin %er.inarea

    se.in2elor 8n $ondi2ii ase(ti$e6

    teriliarea .aterialului ve%etal a $onstat 8n trata.entul $:i.i$ $o.(let 1aat (e

    i.ersarea ex(lantelor in etanol ti.( de $/teva se$unde" ur.at3 de trata.entul $u o solu2ie de

    :i(o$lorit de sodiu ti.( de >' .inute6 Ulterior ex(lantele au 7ost s(3late re(etat $u a(3distilat3 steril36

    Du(3 steriliarea ex(lantelor" a$estea au 7ost ino$ulate 8n $ondi2ii ase(ti$e 48n 1oxa $u

    7lux la.inar5 (e .ediul 1aal 6

    Indu$erea $aluso%eneei s-a realiat utili/ndu-se $ulturile de su(ra7a23" (e .edii

    a%ariate 4#oto >,">">@5" iar .ulti(li$area $alusului (e (ar$ursul .ai .ultor eta(e de

    su1$ultivare a 7ost evaluat3 (rin $/nt3rirea (eriodi$3 a 1io.asei (roas(ete 4la interval de <

    s3(t3./ni56Eaterialul ve%etal o12inut (rin dedi7eren2ierea ex(lantelor :i(o$otilare a $onstituit

    sursa ini2ierii $ulturilor su1.erse 4#oto >?" &'" &>56

    Eediul nutritiv utiliat (entru .ulti(li$area sus(ensiilor $elulare a 7ost E "

    su(li.entat $u 7ito:or.onii" in $on$entra2iile i $o.1ina2iile $ores(un3tor ta1elului &6

    us(ensiile $elulare au 7ost (er(etuate (e (ar$ursul .ai .ultor eta(e de su1$ultivare"

     (rin 8.(ros(3tarea .ediului de $ultur3 la interval de ile

    Metoda #LC de identificare a flavonoidelor 4Pa%ner i $ola16" >?@% .aterial ve%etal- >' .l .etanol-+ .inute 8n 1aia de a(3 la ,' ' C6 #iltratul este

    7olosit (entru $ro.ato%ra7ie6 A$east3 .etod3 ra(id3 extra%e 7lavonoidele li(o7ile i :idro7ile6

    Solu$ia de developare) a$etat de etil a$id 7or.i$ a$id a$eti$ a(3- >'') >>) >>)&

    Metode de identificare8 Rea$tivul N- G

    +

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    6/20

     e (ulveriea3 di7enil1oriloxietila.ina > 4N5" ur.at3 de + solu2ie etanoli$3 de G

    '" >>" >&" >" >

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    7/20

    $ultiva2i ""in vitro!" este sti.ulat3 de (reen2a 8n .ediul de $ultur3 a $ito$:i.inelor" 8n $ondi2iile

    aso$ierii $u auxinele6 ste %eneral ad.is 7a(tul $3 neo7or.area de .u%urai la nivelul $alusului se

    a7l3 su1 $ontrolul intera$2iunii $elor dou3 $ate%orii de 7ito:or.oni6 0n nu.eroase situa2ii

    a(titudinea $aulo%en3 nu (oate 7i (us3 8n valoare de$/t la ex(lante de un anu.it ti( 47ra%.ente de

    tul(ini" (e2iol" (edun$uli 7lorali" in7lores$en23 et$656 Rea$2ia varia3 7oarte .ult $u s(e$ia6 L3starii

    o12inu2i (rin sti.ularea $reterii i devolt3rii ex(lantelor .eriste.ati$e de  Hippophae

    rhamnoides au 7ost ulterior $ultiva2i (e .ediul E 73r3 re%ulatori de $retere 8n s$o(ul devolt3rii

    siste.ului radi$ular 4#oto >+56

    Rio%enea este 7eno.enul de 7or.are a r3d3$inilor" 7ie a $elor se$undare" 7ie 8n $aul

    8n.ul2irii ve%etative" neo7or.area de r3d3$ini adventive6 Rio%enea este de(endent3 de .ai .ul2i

    7a$tori6 Dintre a$etia" 8n a7ar3 de 7a$torul %eneti$" 7ito:or.onii 4.ai ales auxinele5 exer$it3 un rol

    7oarte i.(ortant6 e a$eti 7a$tori endo%eni se 1aea3 7a$torii exo%eni" iar 8.(reun3 a$eti 7a$tori$ondi2ionea3 (rodu$erea rio%eneei i a.(litudinea ei6 Din ex(erien2e de rio%ene3 e7e$tuate (e

    tul(ini de7oliate (e $ale arti7i$ial3 sau din a$elea exe$utate $u ra.uri de (e $are au 7ost 8nde(3rta2i

    .u%urii" a reieit $lar 7a(tul $3 at/t 7runele $/t i .u%urii exer$it3 8n anu.ite 7ae de devoltare a

    or%anelor" res(e$tiv a (lantelor" o a$2iune sti.ulatoare asu(ra indu$erii (ro$eselor de rio%ene36

    Bai(etal se translo$:ea3 (rin (lant3 o su1stan23" $u a$2iune 1ene7i$3 asu(ra $a(a$it32ii rio%ene a

    2esuturilor" su1stan23 (rodus3 7ie 8n 7rune 4(rin a$2iune 7otosinteti$35" 7ie 8n tinerele 7runuli2e ale

    .u%urilor a7la2i 8n $retere a$tiv3 sau 8n a(exul (lantelor6 Eu%urii (ot exer$ita o a$2iunesti.ulatoare asu(ra rio%eneei" (ri.3vara i in:i1atoare iarna 4de exe.(lu" la (lo(56 e de alt3

     (arte" 7runele senes$ente (ot in:i1a a$est (ro$es6 Uneori" s-a $onstatat o in:i1are a rio%eneei"

    atun$i $/nd .u%urele axilar s-a a7lat 8n a(ro(ierea onei 1aale a 1utaului6 Un anu.it 7ra%.ent

    ex(lantat se $o.(ort3 $a un .ini1uta6 l di7er3 de un 1uta nor.al" 8ntru$/t 1utaul $lasi$ de2ine

     1o%ate reerve endo%ene" are .u%uri i 7rune6 Eu%urii i 7runele (ot i du(3 des(rinderea

    7ra%.entului de (e (lanta F .a.3" s3 sintetie anu.i2i $o.(ui :or.onali6 x(lantul" din $aua

    di.ensiunilor sale reduse i a deta3rii sale" nu .ai 1ene7i$ia3 de "".esaQe! i ""sus2ineri! (a $are

    s3 le (ri.eas$3 de la .u%uri sau de la 7rune i r3./ne de(endent de .ediul de $ultur36 l este

    li(sit de 8ntre%ul ""$o.(lex rio$alini$! i de al2i 7a$tori $orelativi6 #a$torul %eneti$" .3ri.ea

    ex(lantului" v/rsta (lantei F .a.3" starea 7iiolo%i$3 a $elulelor (e $are le de2ine sunt 7a$tori $are

    $on$ur3 la evolu2ia ulterioar3 a ino$ulului6 Uneori ""in vitro! se (rodu$e o (ierdere a $a(a$it32ii

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    8/20

    rio%ene" .ai ales $a ur.are a (ra$ti$3rii unor re(i$3ri 4su1$ulturi5 su$$esive6 e (une (ro1le.a

     (3str3rii sau a redo1/ndirii 8n $a de (ierdere a $a(a$it32ii rio%ene" 4Ca$:i23 F Cos.a ">?@56

    a5 J/rsta exe.(larului ve%etal sau a or%anului donator de ex(lante exer$it3 un rol i.(ortant

    8n $a(a$itatea $elulelor ino$ulate de a-i ex(ri.a toti(oten2ialitatea6

    At/t la (lantele (erene" $/t i la $ele anuale" exist3 un de$lin (ro%resiv" (e .3sura avans3rii

    seoniere a $a(a$it32ii de ex(ri.are a toti(oten2ialit32ii" de$lin $are se instalea3 di7erit i tre(tat 8n

    or%ane6 e (rodu$e o redu$ere a densit32ii $entrelor (rodu$3toare de .eriste.oii" (e .3sura

    8naint3rii 8n v/rst36 Alt3 i(ote3 ar (utea 7i a$eea" 8n ti.(" se instalea3 o re(resie %radat3 a

    $o.(eten2ei re%enerative a $entrelor (rodu$3toare de .eriste.oii" existente la nivelul unui

    anu.it or%an6 Dar nu nu.ai v/rsta (lantei donatoare $ontea3" $i i 7aa de devoltare 8n $are se

    a7l3 (lanta res(e$tiv36 Eulte (lante (erene (ot r3./ne Quvenile ti.( de .ai .ul2i ani6 esuturi

     Quvenile (ot 7i %3site i la ar1orii .aturi" .ai ales la (lantele (rovenite din se.in2e i nu (e $alea8n.ul2irii ve%etative" tradi2ionale6 L3starii 4$are $res$ anual sau (rin .etode de 7or2are a 7or.3rii

    a$estora5" 8n ona 1aal3 a tul(inilor sunt adesea Quvenili6 Un rol i.(ortant 8l are i a$2iunea

     (rin$i(alilor 7a$tori de .ediu" 8n $are sunt $res$ute (lantele F .a.3" (re$u. i $ondi2iile 8n $are

    sunt in$u1ate ex(lantele sau ino$ulii 8n (re$ultur3" i anu.e) lu.ina" te.(eratura" a7e$tele $:i.i$e

    i 7ii$e" $u rol sele$tant sau de $reare a unei (redis(oi2ii re%enerative6

     15 Lu.ina F rata .axi.3 de re%enerare i de .ulti(li$are este atins3 nu.ai da$3 ex(lantele

    au 7ost re$oltate de la (lante donatoare la $are $erin2ele 47oto(erioad35 au 7ost satis73$ute6x(lantele derivate din (lante $res$ute 8n $ondi2ii de 7oto(erioad3 ne7avora1il3 (rodu$ (u2ine

     (lantule sau delo$" $:iar da$3 ""in vitro!" 7oto(erioada a 7ost satis73$ut3 $ores(un3tor6 "" In vitro!

     (reten2iile 2esuturilor i ale ino$ulilor (rivind 7oto(erioada sunt de .i$3 i.(ortan236 Du(3

    Euras:i%e 4>?@, ore ilu.inare ilni$3 $ores(unde devolt3rii o(ti.e a nenu.3rate

    ti(uri de ino$uli6 O intensitate lu.inoas3 (rea .are (oate re(resa or%ano%enea6

    $5 Te.(eratura6 La $alusul de  Arabidopsis thalliana" .en2inerea a$estuia (e o durat3

    s$urt3 de ti.(" la

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    9/20

    #eno.enul de laten23 $reea3 (ro1le.e 8n $eea $e (rivete rea$2ia ex(lantelor la

    $ultura ""in vitro! sau a (lantulelor neo7or.ate la trans7erul lor 8n $ondi2iile .ediului se(ti$"

    intr/nd 8n re(aus 7iiolo%i$6

    Eatsuo i Arisu.i 4>??5 au o1servat la Lilium longiforum $3 .axi.ul de 1ul1iori se

    di7eren2ia3 din ex(lantele (relevate din solii re$olta2i de la 1ul1i $are au 7ost sto$a2i < F +

    s3(t3./ni la >'SC9 nesu(unerea 1ul1ilor la 7ri% ridi$3 (ro1le.e 8n 8nvin%erea (ro1le.elor de

    laten236

    Cerin2ele de laten23 seonier3" (reente la nivelul or%anelor 41ul1i" .u%uri5 (ot 7i

    satis73$ute" (reala1il ex(lant3rii 2esuturilor6 Uneori a(li$area unei (erioade de 7ri% la 1ul1ilii

    neo7or.a2i ""in vitro!" (re.er%3tor trans7er3rii lor din ""in vitro!" 8n $ondi2iile naturale de via23"

     (oate 7i o .3sur3 salutar3 8n su(ri.area laten2ei9 1ul1ilii 2inu2i la 7ri% (ot r3./ne dor.ini6

    Cultivarea $elulelor ve%etale " 8n s$o(ul a$u.ul3rii de 1io.as3- sursa (rin$i(al3 deo12inere a .eta1oli2ilor se$undari" a (er.is extinderea a$estei .etode la un nu.3r .are de

    s(e$ii de i.(ortan23 e$ono.i$36 x(loatarea $:i.i$o-7ar.a$euti$3 a (lantelor" (rin a(li$area

    te:ni$ilor de $ultivare “in vitro!" asi%ur3 o12inerea unor $o.(ui utili 8n industria ali.entar3

    4$oloran2i"indul$itori5"$:i.i$3"7ar.a$euti$34al$aloii"%li$oide$ardiotoni$e6steroii5"

    $os.eti$3 4 (i%.en2i" uleiuri eteri$e56

    A$u.ularea 1io.asei ve%etale “in vitro!" (e 1aa $3reia sunt extrai .eta1oli2ii

    se$undari" este reultatul .ulti(li$3rii $elulelor9 $ineti$a .ulti(li$3rii (o(ula2iilor $elulare (resu(une derularea a$elorai 7ae $a i 8n $aul (o(ula2iilor 1a$teriene6

    Eaterialul ve%etal a 7ost analiat i din (un$t de vedere al 1iosinteei .eta1oli2ilor 

    se$undari $u rol antioxidant " i.unosti.ulator - (i%.en2ii 7lavonoidi$i" 8n s(e$ial 7lavonele i

    io7lavonele la  Hippophae rhamnoides  4Geet:a i $ola16 &''&9 Ros$:" &''

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    10/20

    industria 7ar.a$euti$36 ste $unos$ut 7a(tul $3 7lavonoidele sunt a%en2i antioxidan2i av8nd

    a$2iune antineo(lai$3 4Nis:ino" >??@5 i antiviral3 4 Gra7 i $ola16" &''+9 C:en i $ola16" &''+56

     i%.en2ii 7lavonoidi$i sunt (i%.en2i 7enoli$i 4$on2in 8n .ole$ula lor un :etero$i$lu

     (irani$ sau 7urani$ $ondensat $u un inel 1eneni$566 se %3ses$ 8n stare li1er3 sau le%at3 su1 7or.3

    de %li$oide6

    #lavonele i io7lavonele sunt (i%.en2i $are deriv3 de la & 7enil-1eno(iron3 i 7enil-

     1eno(iron36 unt su1stan2e $ristaline" solu1ile 8n a(3 i al$ool6 e %3ses$ du1 7or.3 de

    %li$oide) a(i%enina" lut$olina" uer$itina6

    Eediul E" su(li.entat $u &.%l BA i '"'& .%l ANA a sti.ulat $alusarea la

    nivelul (lantulelor" 8n s(e$ial 8n ona :i(o$otilului6 

    Jariantele II i IJ ale .ediului 1aal E au de.onstrat un (ronun2at e7e$t $aulo%en

    asu(ra ex(lantelor de ti(ul .u%urilor axilari6 Calusarea $o.(let3 a ex(lantelor Quvenile s-a (rodus (e varianta II a .ediului 1aal E $u &.%l BA i '"'& .%l ANA 4 #oto >," >5 6

     Calusul (ri.ar" o12inut (rin dedi7eren2ierea $o.(let3 a ex(lantelor" a 7ost su1$ultivat

     (eriodi$" la interval de < s3(t3./ni6

    Din (un$t de vedere .a$ros$o(i$" $alusul (ri.ar este :etero%en din (un$t de vedere al

    $ulorii i $onsisten2ei" av/nd o $uloare al1- %3l1uie sau 1run3 i o $onsisten23 7ria1il3 4#oto >@56

    us(ensiile $elulare au 7ost o12inute din $alus i au 7ost (er(etuate (e (ar$ursul .ai

    .ultor eta(e de su1$ultivare" (rin 8.(ros(3tarea .ediului de $ultur3 la interval de ile 4#oto>?" &'" &> 56

     Analia 1io$:i.i$3 a $alusului (rin .etoda $ro.ato%ra7iei 8n strat su12ire (e (l3$i de

    sili$a%el eviden2ia3 a1sen2a $o.(uilor .ai sus a.inti2i" at/t 8n $alusul (ri.ar" $/t i (e

     (ar$ursul eta(elor de su1$ultivare6

    >'

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    11/20

    #oto >- ursa de ex(lante

    #oto &- A(ex $aulinar

    #oto - tadiu in$i(ient al $aulo%eneei la Hippophae rhamnoides ssp. carpathica

    >>

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    12/20

    #oto &

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    13/20

    #oto -Caulo%ene3 avansat3

    #oto @- Caulo%ene3 avansat3

    #oto ?- Eu%uri axilari de Hippophae rhamnoides ssp. carpathica

    >

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    14/20

    #oto >'- Ini2ierea $ulturii de .u%uri axilari

    #oto >>- Devoltarea ex(lantelor .u%urale “in vitro!

    #oto >&- volu2ia ex(lantelor .u%urale “in vitro!

    >

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    15/20

    #oto >- volu2ia ex(lantelor .u%urale “in vitro!

    #oto >+- Rio%enea

    >+

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    16/20

    #oto >,-Ger.inarea ase(ti$3 a se.in2elor de Hippophae rhamnoides

    #oto >- Dedi7eren2ierea (lantulelor de Hippophae rhamnoides

    #oto >@- Calus de Hippophae rhamnoides

    >,

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    17/20

    #oto >?- Ini2ierea $ulturilor su1.erse

    #oto &' us(ensii $elulare de Hippophae rhamnoides

    #oto &>- us(ensii $elulare

    >

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    18/20

    Concluzii

    •Cultivarea ex(lantelor .eriste.ati$e de Hippophae rhamnoides ssp. carpathica6 (e .ediul

    Euras:i%e F Hoo% $u >.%l BA i '"> .%l AIA 4varianta II5 a sti.ulat $aulo%enea i

    i.(li$it (osi1ilitatea $lon3rii ra(ide a soiurilor $ultivate6

    •Dintre $ito$:ininele testate" 1enila.ino(urina s-a dovedit .ult .ai e7i$ient3 $o.(arativ $u

    $:inetina 8n .i$ro(ro(a%area (rin $ulturi de .eriste.e6

    •x(lantele de ti(ul a(exului $aulinar 8nso2it de >-& (ri.ordii 7oliare $onstituie $ele .ai

    ade$vate .i$ro(ro(a%3rii $lonale6

    •Re%enerarea (lantelor 8ntre%i a 7ost o12inut3 (rin 8nr3d3$inarea l3starilor (e .ediul 1aal E"

    li(sit de 7ito:or.oni6•Ei$ro(ro(a%area dire$t3 a $elor dou3 soiuri de $3tin3 a 7ost o12inut3 8ntr-un interval de @

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    19/20

    •  Eetoda de .i$ro(ro(a%are a(li$at3 8n $aul s(e$iilor analiate 8n a$east3 lu$rare 4

     Hippophae rhamnoides65 s-a 1aat (e utiliarea ex(lantelor de ti( .u%ural6xisten2a unui

    nu.3r destul de .are de .u%uri la nivelul l3starilor deter.in3 o e7i$ien23 e$ono.i$3

    deose1it3" 8ntru$/t din 7ie$are .u%ure (oate 7i re%enerat3 o nou3 (lant36

    • Utiliarea BA 8n ex$es" 8n $o.1ina2ie $u ANA" $/t i K 8n $o.1ina2ie $u &"< D s-au

    dovedit 1ene7i$e de$lan3rii $aulo%eneei i i.(li$it .i$ro(ro(a%3rii dire$te la Hippophae

    rhamnoides6

    •  A$east3 $ale de re%enerare ;in vitro! $onstituie $el .ai e7i$ient .od de ridi$are la

    .axi.u. a randa.entului 8n .ulti(li$area (lantelor" $on$o.itent $u asi%urarea trans.iterii

    la des$enden2i a estrei ereditare a su1ie$tului su(us .ulti(li$3rii6

    5ibliografie

    >6 Ala. Ze1 4&''',

    &6 C:en" D6" Daniel" K6G6" C:en" E66 Ku:n" D66" Landis-iVoVar" K6R6" Don" W66 4&''+5-

    DietarX 7lavonoids as (roteaso.e in:i1itors and a(o(tosis indu$ers in :u.an leuHe.ia

    $ells" Bio$:e.6 :ar.a$ol6 ,?4>'5) >->??,5- Sea buckthorn  $Hippophae rhamnoides%: A

    multipurpose plant " orti$ultural Te$:nolo%X ,4

  • 8/18/2019 Articol Analiza biosintezei unor compuşi de tip flavonic la Hippophae rhamnoides L. cultivată in vitroRevista Miron …

    20/20

    @6Eont(etit" D6" Lalonde" E6 4>?@@50In vitro (ro(a%ation and su1seuent .odulation o7 t:e

    a$tinor:ial Hippophae rhamnoides L. lant Cell" Tissue Or%an Culture" >+) >@?-&''

    ?6 Nis:ino" 6 4>??@5-Can$er (revention 1X $arotenoids" Eutat6 Res6 &

    >+6 Janisree" E6" C:en =ue Lee" :u #un% Lo" NalasVode" 6E6" C:ien Zi: Lin" sin TsaX

    4&''