ORTHOMYXOVIRIDAEORTHOMYXOVIRIDAE

Matrice

Nucleocapsida helicoidala(ARNss -, segmentat)

HA - hemaglutinina

transcriptaza

anvelopa

NA - neuraminidaza

tip A, B, C : NP, M subtipuri: HA si NA –16 tipuri de HA si 9 de NA tip/subtip/ loc, an izolare/nr. pasaje- A/H5N1/Guangdong/1996/1

HEMAGLUTININA

Virusul gripal tip A de la specia/organul

Receptorul cu legatura de tip

Uman, trahee umanã SA-2-6-Gal beta

Aviar (trahee sau epiteliu intestinal), ecvin

SA-2-3-Gal beta

Porcin, trahee porcinã; prepelitã

SA-2-3-Gal beta si SA-2-6-Gal beta

REASORTANTI

principalii determinanti antigenici

Endocitoza mediata de receptor– schimbari conformationale cu expunerea peptid de fuziune N-terminal HA2- -complex ribonucleoproteic transportat in nucleu

Proteina M- rol de canal ionic

INHIBITORII DECAPSIDARII- AMANTADINA SI RIMANTADINA

INHIBITORII DE NEURAMINIDAZA- O SELTAMIVIR -75 mg x 2/zi ZANAMIVIR -10 mg (2 inhalatii de 5 mg/zi)PERAMIVIR- injectabil- aprobat in regim de urgenta de FDA pe 23 Octombrie 2009, pt utilizare in cazuri severe, spitalizate in care ceilalti inhibitori de NA sunt neutilizabili (rezistenta la Oseltamivir , imposibilitatea administrarii Zanamivir)

NS1 inhibitor al sintezei de IFN

V. Gripale A: VARIABILITATE• DRIFT ANTIGENIC- mutatii punctiforme- EPIDEMII

VARIABILITATEA VIRUSURILOR GRIPALE A• SHIFT ANTIGENIC- PANDEMII

1. reasortarea genicã între tulpini gripale de la specii diferite

2. transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om- modificãri conformationale in structura hemaglutininei.

3. Re-emergenta unui virus ce a determinat epidemii cu ani inainte

Pãsãri acvatice sãlbatice (rate, gâste, pescãrusi)-rezervorul natural al virusurilor gripale A

La pãsãrile domestice gripa poate evolua în douã forme,-minorã (LPAI) sau asimptomaticã, - afecteazã productia ouã in crescãtorii- majora (HPAI), foarte severã, înalt contagioasã, cu mortalitate 50-100%. (aminoacizi bazici suplimentari la nivelul situs de clivare HA)

Pandemii gripale1918-H1N1 “gripa spaniola” -20-50 milioane decese

Virus aviar

1957- H2N2 “gripa asiatica”-1-2 milioane decesereasortant

1968- H3N2 “gripa Hong Kong ”-700,000 decese-reasortant

1977- H1N1 “gripa ruseasca”-re-emergenta

Influenza A H1N1/2009 – 6Minigene de la tulpinile porcine Nord America (reasortant 1998 suin/aviar/uman) si 2 de la tulpinile porcine izolate in Europa/Asia

Aceste tulpini au coexistat pentru mai mult de 10 ani - Reasortarea actuala probabil la porc- gazda ramane totusi necunoscuta (supraveghere insuficienta; infectie asimptomatica la porc, reasortare recenta?)

A/H1N1/ 2009 pandemic

414,000 cazuri confirmate de laborator

cca 5000 decese raportate la OMS

9

Primul val pandemic (H1N1) 2009

12% din forta de muncaVarf rata de absenteism

0.1% - 0.2% (pana la 0.35%)Rata de fatalitate

2% din cazuri clinic aparenteRata de spitalizare

15% din cazuri clinic aparenteRata Complicatii

6.5% (4.5% - 8%) per saptamanaVarf rata de atac

30%Rata de atac

Courtesy of Department of Health, UK, http://www.dh.gov.uk/en/Publicationsandstatistics/Publications/PublicationsPolicyAndGuidance/DH_102892

Data valabile in Iulie 2009 pt UK

53 State Membre in regiunea Europeana OMS

WHO/Europe influenza surveillance(EuroFlu.org)

45 decese asociate cu cazuri confirmate de laborator de H1N1/pandemic 2009 in 13 tari in perioada 21- 27 Octombrie. Numar total de decese confirmate din Aprilie 2009 in 27 tari EU si 4 EFTA 317. Ukraina a raportat 12 decese cauzate de pneumonii regiunea Ternopol alte 6 decese in regiuni invecinate

2. transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om

• SHIFT ANTIGENIC- Modificãri conformationale în structura hemaglutininei pentru traversarea barierei de specie

– Toate virusurile gripale umane au singur reziduu bazic de argininã la nivelul sitului de clivare a hemaglutininei.

– Achizitia unor aminoacizi bazici suplimentari la acest nivel, duc la o conformatie asemãnãtoare virusurilor aviare HPAI (situri de clivare multiple) si permit si altor proteaze în afara tripsinei sã cliveze hemaglutinina, ceea ce duce la alterarea tropismului tisular (cu posibilitatea afectãrii tesutului cerebral, miocardic si vaselor de sânge) si la cresterea virulentei.

– O serie de mutatii punctiforme afecteaza legarea la receptori si cresc legarea de reziduri sialozidice specifice mamiferelor

Caracteristica Tulpina H1N1 A/New Caledonia/20/99

A/New Caledonia/20/99 cu HA si N A de la tulpina pandemicã 1918

LD50/Soarece >106 PFU <103 PFU

Pierdere greutate ziua 5 10 % 25 %

Mortalitate ziua 9 0 % 100%

Patologie pulmonara Bronho alveolita medie focalã Bronho alveolita necrotica difuzã

Expresia genelor tisulare Gene proinflamatorii Gene proinflamatorii, gene de activare a functiilor fagocitare, gene induse de stress, radicali de oxigen liberi

SIMILITUDINI GENOMICE INTRE H5N1 - V.GRIPAL 1918

V.GRIPAL 1918

1997- H5N1 - Hong Kong - 1,5 milioane pãsãri; 18 cazuri umane/6 decese

Decembrie 2003- cazuri letale gripa H5N1 la feline mari Thailanda, continua in octombrie 2004 -147/441 tigrii 2004--H5N1- Coreea de Sud, Vietnam, Cambodia, Laos, Japonia, Thailanda, Indonezia, China, Hong Kong

2005-iulie-august Rusia , Kazakstan , Mongolia octombrie- decembrie-Turcia, Romania), Croatia , Kuwait, UkrainaChina, Indonezia, Vietnam, Cambodia, Turcia (cazuri umane)

2006- Iraq, Nigeria, Azerbaijan, Egipt, India,

Franta (februarie-I data in UE), Niger, Albania - pasari domestice Bulgaria, Greece, Italy, Slovenia , Iran, Austria, Germania, Franta,

Ungaria, Slovacia, Bosnia-Herzegovina, Georgia, Suedia, Elvetia , Serbia-Muntenegru, Polonia-– pasari salbatice –lebede, rate

2008-2009 China, Indonezia, VietNam, Egipt, Thailanda, Iraq, Turcia-cazuri umane

1996-H5N1 izolat de la giste din Guangdong China

Transferul tulpinilor înalt patogene H5N1 din Asia cãtre Estul Europei este atribuit rutei pãsãrilor deasupra Eurasiei continentale sau de-a lungul litoralului Mãrii Arctice.

Aprilie 2005- extinderea spectrului de gazda la pasari salbatice - 6,345 pasari din specii diferite mor in citeva saptamini in regiunea marilor lacuri (Qinghai Lake) din China centrala- se extind in în Siberia, Caucaz, Balcani.

2009- 442 cazuri umane/262 fatale

Conditii necesare izbucnirii unor pandemii

• noutatea antigenica a virusului

• lipsa imunitãtii în populatia umanã

• facilitatea transmiterii interumane a noilor tulpini.

• VACCIN INACTIVAT CU VIRUS INTREG SAU SUBUNITAR (1931-izolare in OGE, 1940- vaccin inactivat)

- Virus izolat in OGE, lichid alantoidian imbogatit, particule virale centrifugate in gradient de densitate pentru concentrare si purificare, inactivare cu formaldehida sau ß-propiolactona +/_ tratare cu detergent si purificare HA si NA- vaccin trivalent

- Petrescu si colab., 1980 - NIVGRIP- administrarea intranazalã a vaccinului inactivat preparat cu virusul întreg –prioritate româneascã.

• VACCIN VIU ATENUAT CU TULPINI “RECI”

Tulpina master atenuata, adaptata pentru crestere la 250 C (A /H2N2 /Ann Arbor/6/60 si B/Ann Arbor/1/66) in care se insera genele pentru HA/ NA-mutatii stabile in genele complexului polimerazic PA, PB1, and PB2, propagate în pasaje seriate la temperaturi din ce în ce mai scãzute pe celule renale de pui de gãinã SPF (specific pathogen free)

Fiecare dozã de vaccin contine hemaglutinina corespunzãtoare a 10 bilioane de virioni în cazul cultivãrii virusului pe OGE (15 ug per 0.5 ml) .

Cantitatea de neuraminidazã nu este standardizatã -proteinã labilã în cursul procesului de preparare si stocare a vaccinului.

PB2PB1PA

HANANP

MNS

PB2PB1PA

HANANP

MNS

PB2PB1PA

HANANP

MNS

Tulpina matca -PR8 (H1N1 A/PR/8/34) –atenuata, nonpatogena, incapabila de replicare la om

Tulpina antigenic noua

X

Reasortantvirus cu 6 gene PR8, dar HA si NA tulpinii circulante

Vaccinuri Influenza A (H1N1) 2009 monovalente aprobate in US, 6 Octombrie 2009

Vaccin Producator Prezentareμg Hg/0.5

mLGrup varsta

No. doze

Inactivat Sanofi Pasteur SA

0.25 mL siringa 0 6--35 luni 2†

0.5 mL siringa 0 ≥36 luni 1 or 2†

5.0 mL fiola multidoza 25.0 ≥6 luni 1 or 2†

InactivatNovartis Vaccines Diagnostics Ltd

5.0 mL fiola multidoza 25.0 ≥4 ani 1 or 2†

0.5 mL siringa <1.0 ≥4 ani 1 or 2†

Inactivat CSL Behring Ltd0.5 mL siringa 0 ≥18 ani 1

5.0 mL fiola multidoza 24.5 ≥18 ani 1

Viu atenuat¶ MedImmune LLC 0.2--mL spray** 0 2--49 ani 1 or 2††

* O doza de 0.5-mL contine 15 μg hemagglutinin din A/California/7/2009 (H1N1)† 2 doze administrate la interval de aproximativ 4 saptamani (≥21 zile ) recomandat pt copii cu varste 6 luni --9 ani.§ Loc preferential pt nou nascuti si copii mici in coapsa antero-lateral.¶ Vaccin anti gripal viu atenuat ( doza ce contine 106.5--7.5 fluorescent focal units de VVA A/California/7/2009 (H1N1)** Influenza A (H1N1) 2009 0.2 mLin fiecare nara

Virus reasortant A/California/7/2009 NYMC X-179A (New York Medical College), distribuit de CDC

US 22.5 milioane doze Use

VACCINURI LICENTIATE IN UNIUNEA EUROPEANA

• Celvapan (Baxter AG);- virion întreg, A/California/07/2009 (H1N1) inactivat, cultivat pe celule Vero 7,5 micrograme HA per doză de 0,5 ml

.• Focetria (Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l)- Antigene de suprafaţă ale virusului gripal (hemaglutinină şi neuraminidază) din tulpina: A/California/7/2009 (H1N1) v (X-179A) cultivata în OGE 7,5 micrograme HA per doză de 0,5 ml -„adjuvant” (MF59C.1)

• Pandemrix (GlaxoSmithKline Biologicals S.A)- Virus gripal fragmentat, inactivat, conţinând HA din tulpină similară virusului A/California/7/2009 (H1N1) (X-179A) cultivata în OGEechivalent cu: 3,75 micrograme** per doză de 0,5 ml- „adjuvant” AS03

Persoane cu risc înalt de complicatii copii < 2 ani (rate de spitalizare de 2.3 ori > ca cei 2- 4 ani, acesrtia la randul lor sanse de 20% mai frecvente complicatii)adulti > 65 anifemeile gravide în trimestrele II si III de sarcinã, 2 saptamani postpartum inclusiv dupa pierdere sarcinapacienti institutionalizatiadulti si copii cu boli cardiace (cu exceptia HTA) si pulmonare cronice (inclusiv astm), boli metabolice (inclusiv diabet zaharat), disfunctii hepatice, renale, hematologice , imunosupresie (inclusiv cei HIV pozitivi)Obezitate (BMI 30-35), mai ales obezitate morbida (BMI )>40 n

Persoane care pot transmite infectia gripalã celor cu risc de complicatiipersonalul medico-sanitarangajatii institutiilor psihiatrice si cei ce îngrijesc bolnavi cronicimembrii familiilor persoanelor la risc

Persoane la care vaccinarea poate fi recomandatãpersoane care cãlãtoresc în zone cu epidemii de gripãpersoane implicate în servicii comunitare esentialecopiii din gradinite si scoli, studentii, militarii

GRUPE DE RISC

UP TO DATE

• http://ec.europa.eu/health/ph_threats/com/Influenza/h1n1_en.htm• http://ec.europa.eu/health-eu/newsletter/influenza/1/newsletter_en.htm• http://www.emea.europa.eu/influenza/vaccines/home.htm• http://www.euro.who.int/surveillance• http:// www.cdc.gov/flu/weekly• http://www.ecdc.eu.int/• http://www.oie.int Organizatia Mondiala Pentru Sanatatea Animala

• www.virology.ro- INSTITUTUL DE VIRUSOLOGIE “St. S. Nicolau” –date despre debutul pandemiei

• www.who.int/csr/disease/avian-influenza• http://www.efsa.eu.int/science/- The European Food Safety Authority• http://europa.eu.int/comm/food/animal/diseases/controlmeasures/

avian/avain_influenza_22092005.pdf

• Taubenberger et al in Nature ( VOL. 437 October 6th 2005 ) http://www.nature.com/news/2005/051003/full/437794a.html http://www.nature.com/news/2005/051003/full/nature04230.html

• Tumpey et al in Science (2005; 310: 77-80).