Dozarea de anticorpi anti Rh la femeia gravid-metodologia si interpretarea rezultatelor-

Materiale necesare: Casete neutral din sistemul BIOVUE Ser de cercetat Eritrocite SCREEN FICIN-capac negru 1 si 2 Pipeta electronic din set BIOVUE Thermostat 37 C Centrifuga Lame bine degresate Ser anti Rh OD Eritrocite de cercetat Ser fiziologic 1.Tehnica de lucru-Se determina Rh-ul pacientei (gravidei)-sangele se recolteaza in eprubete de sticla ,fara anticoagulant -pe o lama bine degresata se 10 ori mai mica de eritrocite de cercetat (eritrocitele de la o gravida)-se omogenizeaza cu un colt de lama bine degresata -se asteapta 2-3 minute si se face citireaInterpretarea rezultatului-In cazul in care nu are loc aglutinarea,este Rh OD-negativ-in cazul in care are loc aglutinarea RhD-pozitiv si nu este nevoie de dozarea de anticorpi -se indica si determinare Rh-ului partener-in cazul in care partenerul are Rh negativ nu mai este nevoie de dozare de anticorpi 2.Dozarea de anticorpi se face in cazul unei femei gravid care are Rh OD negative,iar partenerul are Rh pozitiv-se foloseste serul gravidei obtinut prin centrifugare-se pregateste caseta Neutral BIOVUE-se noteaza pe caseta numele gravidei-cu ajutorul unei pipette normale se extrag 50 l eritrocite SCREEN FICIN 1-capac negru (special pentru caseta neutral)-intr-o eprubeta,respective 50l eritrocite SCREEN FICIN 2-capac negru in aceeasi eprubeta-se agita eprubeta pentru o omogenizare buna-pipete BIOVUE se propacneaza la P1 si se adauga in caseta BIOVUE Neutral serul de cercetat P1=40l-pipete BIOVUE se propacneaza la P2 si se adauga in aceeasi jodeuri ale casetei Neutral ,peste serul de cercetat amestecul de eritrocite SCREEN FICIN(1+2) din eprubete P2=10l -caseta BIOVUE-Neutral se pune la termostat la 37C timp de 15-dupa cele 15 se scoate caseta din thermostat si se centrifugheaza timp de 5-dupa centrifugare se face citirea -absenti- imaginea 1 -prezenti-imaginea 2-in cazul in care anticorpii anti Rh OD sunt prezenti se va face titrarea anticorpilor 3.Tritarea se realizeaza in felul urmator:-se pregatesc 9 eprubete fara anticoagulant-se noteaza de la 1 pana la 9 fiecare eprubeta-in fiecare eprubeta se pun 200l ser de cercetat-se face dilutia,se barboteaza si se extrag 100l din prima eprubeta ,apoi se adauga in eprubeta nr.2 facandu-se aceeasi procedura pana la eprubeta nr.9-la ultima barbotare dilutia de 200 se arunca-dupa terminarea dilutiilor din cele 9 eprubete se pregatesc doua casete de Neutral BIOVUE-se noteaza fiecare godeu al acestei casete de la 1-9(fiecare caseta contine 6 godeuri)-in fiecare godeu se adauga cu ajutorul pipetei BIOVUE fiind setata la programul P1 serul diluat din eprubetele notate 1-9-din eprubeta 1 se adauga serul in godeul 1,din eprubeta 2 se adauga serul cu P1,in godeul 2 si asa mai departe pana la eprubeta 9 ,se adauga serul din P1 in godeul 9-se adauga peste ser,in fiecare godeu cu ajutorul pipetei BIOVUE setata la programul P2 amestecul de eritrocite Screen Ficin preparat la inceputul tehnicii -caseta se pune in thermostat la 37C timp de 30-dupa expirarea timpului caseta se pune la centrifuga timp de 5-dupa centrifugare se face citirea-interpretarea rezultatelor -tipul se face in functie de citirea celor 9 godeuri ,respectiv de prezenta anticorpilor in cele 9 godeuri 1 godeu- 1/22 godeu- 1/4 3 godeu- 1/8 4 godeu- 1/16 5 godeu -1/326 godeu- 1/647 godeu- 1/1288 godeu- 1/2569 godeu- 1/512Se face buletin de analize,medicul stabilind tratamentul gravidei in functie de tipul anticorpilor prezenti.