1

Coloratii speciale

Preparate colorate

Coloratia Ziehl-Neelsen

� - se realizeaza pentru evidentierea bacteriilordin specia Mycobacterium

� Tehnica: - etalarea produsului patologic

� - uscarea

� - fixarea (preparatul este trecut de 2-3x deasupra flacarii becului Bunsen)

Etapele coloratiei:

� - fucsina Ziehl pura ( se acopera lama), 5-10 min., se incalzeste pina la emisia de vapori ( nu se ajunge

la fierbere)

� - se decoloreaza cu acid sulfuric 20% - 30 sec( se spala cu apa)

� - se decoloreaza cu alcool etilic pina la indepartareacolorantului 96% - 30 sec ( se spala cu apa)

� - se recoloreaza cu albastru metilen – 2 min.

� - se spala frotiul cu apa

� - se lasa la uscat in stativ

� Citirea si interpretarea:

� - se foloseste obiectivul de imersie

� - Mycobacteriile (bacilul tuberculos, bacilul

leprei) apar colorate in rosu pe fond albastru = bacili acido-alcoolo rezistenti =

BAAR , ceilalti germeni si elementele

celulare apar colorate in albastru.

2

Proprietatea de acido-alcoolo

rezistenta este caracteristica genului

Mycobacterium, si se datoreaza

structurii particulare a peretelui

celular, cantitatii mari de lipide pe

care acesta le contine si in special

acidului micolic.

� Un frotiu colorat Ziehl-Neelsen

efectuat dintr-un produs patologic, ex.

sputa, in care se pun in evidenta

bacili acido-alcoolo rezistenti, permite

diagnosticul de tuberculoza.

Coloratii speciale

� Coloratia pentru capsula ( metoda Burri modificataGins )- cu tus de China = pe fond negru bacteriileapar colorate in rosu, cu o zona clara, incolora in jur( aceasta zona corespunde capsulei, care nu se coloreaza).

� Coloratia Möller pentru spori (fixare cu alcool etilic, mordansare cu acid cromic, coloratia Ziehl-Neelsen-fara decolorarea cu alcool, se spala se usuca si se examineaza cu imersie)= sporii se coloreaza in rosu, formele vegetative in albastru.

� Coloratii pt. cili: metoda Leifson si impregnareargentica Zettnov.

Coloratie Ziehj-Neelsen ( Mycobacterium

Tuberculosis)

3

Coloratie Ziehl-Neelsen ( bacili acido-alcoolo

rezistenti intra si extracelulari )Coloratia Gimenez ( Rickettsia rickettsii )

Coloratia Giemsa (leptospira) Leptospira ( microscopie electonica)

4

Impregnare argentica = Coloratia Fontana

Tribondeau ( Treponema pallidum)

Preparat imunohistochimic ( Treponema

pallidum)

Borrelia burgdorferi (imunoflorescenta)

5

Pneumococcus ( dispozitie in diplo ) Test Neufeld-Quellung ( pentru umflarea

capsulei )- pneumococi

Pneumococi ( coloratie Gram) Frotiu din sputa ( coloratie Gram -pneumococi)

6

Pneumococi ( imunoflorescenta) Neisseria meningitidis

Neisseria meningitidis (ME) Coloratie Gram ( coci Gram negativi )

7

Neisseria meningitidis

CLOSTRIDIUM BOTULINUMCLOSTRIDIUM BOTULINUM

SPOR SUBTERMINALSPOR SUBTERMINALCLOSTRIDIUM DIFFICILECLOSTRIDIUM DIFFICILE

8

C. difficile endospores Frotiu dintr-un abces ( infectie cu anaerobi)

Stafilococi

9

Streptococi

Escherichia coli ( ME) E.Coli ( microscopie in contrast de faza;

preparat necolorat )

10

Klebsiella pneumoniae ( izolata dintr-un

abces pulmonar)

Klebsiella spp. Klebsiella spp.

11

Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa (bacil piocianic)

Pseudomonas fluorescens ( ME ) Vibrio

12

Vibrio (imunofluorescenta )

Corynebacterium spp. ( coloratie Gram-

dispozitie caracteristica in litere chinezesti

)

13

Corynebacterium spp ( coloratie speciala pt corpusculii

Babes-Ernst = corpusculi metacromatici )Spor ( microscopie electronica)

Fimbrie ( pil)- microscopie electronica