TROMBOCITELE

-plachete sanguine

-celule sanguine cu rol în hemostază

TROMBOCITELE

-formare în măduva hematogenă - trombocitopoieză:

• celula stem• megacarioblast• promegacariocit• megacariocit

Trombopoietina, IL1, IL6, IL11, IL3 stimulează proliferarea şi stadiile de dezvoltare din măduva hematogenă.

TROMBOCITELE

Megacariocitul - celulă gigantă (150 m) cu granulaţii-expulzarea granulaţiilor-restul distrus prin fagocitoză-1000-3000 trombocite

TROMBOCITELE

Număr - 150000-300000/mmc

Trombocitopenie insuficientă medulară – chimioterapie, iradierepurpura trombocitopenica idiopaticaciroza hepatică

Trombocitoză

Durata de viaţă 9-11 zile

Distrugere: 15% se distrug în hemostază - distrugere întâmplătoare

trombocitele bătrâne se distrug în splină

TROMBOCITELE

Structură-celule anucleate-diametru de 2-4

-formă discoidală /ovalară

TROMBOCITELE

Membrana•strat bilipidic

•pe faţa internă - enzime (fosfolipaze, fosfodiesteraza, ciclooxigenaza)

•pe faţa externă - funcţionează ca receptori membranari: •GP Ia / IIa si GP VI - receptor pentru colagen,•GP Ib IX – receptor pentru factorul vW •GP IIb/IIIa fixare pe fibrinogen, •GP V- receptor pentru trombină

TROMBOCITELE

Membrana

•pe faţa exterioară - glicocalix. În jurul acestuia, imprecis delimitat, un strat numit “atmosfera periplachetară”, format din factori plasmatici ai coagulării adsorbiţi pe suprafaţa trombocitelor

TROMBOCITELE

Membrana (continuare)Sistemul canalicular deschis - invaginări tubulare care

permit pătrunderea în trombocit a unor constituenţi plasmatici

permit excreţia unor factori stocaţi în granule

Sistemul tubular dens – provenit din RE al trombocitului, sediul sintezei tromboxanului şi sechestrării de Ca

TROMBOCITELE

Citoplasma•sistemul contractil (actina, miozina, trombostenina) - prin contracţia sa sunt permise modificările de formă în timpul activării trombocitului (devin sferice, îşi micşorează volumul, emit pseudopode, etc)•granulaţii care conţin substanţe importante pentru funcţia trombocitară:

-trombospondina - rol în coeziunea intertrombocitară-PGDF (factor de creştere derivat din trombocite) - proliferarea musculaturii netede şi a fibroblastelor - rol în repararea leziunilor vasculare-ADP (iniţiază activitatea plachetară), ATP, serotonină (vasoconstrictor)

TROMBOCITELE

ATPADPCalciuMagnesiuSerotoninăEpinefrină

Proteine cu rol în hemostazăProteine cu rol în hemostază

FibrinogenFibrinogenvWF (factor von Willebrand)vWF (factor von Willebrand)PlasminogenPlasminogenInhibitor al activării Inhibitor al activării

plasminogenului = plasminogenului = Plasminogen activator Plasminogen activator inhibitor (PAI-1)inhibitor (PAI-1)

Granule alfa

Proteine “nehemostatice”

Factor plachetar 4Factor de creştere derivat din trombocite= Platelet derived growth factor (PDGF)Fibronectina

Granule dense

Citoplasma

Factorii trombocitari ai hemostazei

Factori plachetari:

FP1: corespunde proaccelerinei din plasma

FP2: acceleratorul plachetar al trombinei, stimulează acţiunea trombinei asupra fibrinogenului

FP3: fosfatidilserina si fosfatidilinozitolul din membrana Trb

FP4: proteină inhibitoare a heparinei, stimulează acţiunea trombinei asupra fibrinogenului

TROMBOCITELE

Metabolism

•Activarea plachetelor – proces dependent de energie – bazat pe funcţia mitocondriilor

•Energia generată prin glicoliză

•ATP generat e folosit pentru activitatea pompelor ionice şi funcţia trombocitară

Evenimentul primar este descărcarea Evenimentul primar este descărcarea calciucalciului lui dindin sistemul tubular dens – care sistemul tubular dens – care

iniţiază contracţia şi activarea plachetară.iniţiază contracţia şi activarea plachetară.

•Metabolismul fosfolipidelor membranare - important în reglarea funcţiei trombocitare

Acid arahidonic

Prostaciclinavasodilatator, antiagregant

Tromboxanvasoconstrictor, proagregant

CiclooxigenazaCiclooxigenaza

PGG2

PROSTAGLANDINE

PGH2

ENDOPEROXIZI

prostaciclinsintaza

tromboxansintaza

Fosfolipide membranare

Fosfolipaza A2, calciuFosfolipaza A2, calciu

ASPIRINAinhibă

FOSFATIDIL INOZITOL DIFOSFAT

INOZITOL TRIFOSFAT DIACIL GLICEROL (DAG)

Activează protein kinaza C

Fosfolipaza CFosfolipaza C

sub acţiunea căreia se sub acţiunea căreia se fosforileazăfosforilează o o serie de pserie de proteine din trombocit având ca urmare secreţia granulelor trombocitare

Trombocitele se ataşează la Trombocitele se ataşează la fibrele de colagen din fibrele de colagen din subendoteliu subendoteliu

Sunt mobilizate în număr mare la Sunt mobilizate în număr mare la locul leziuniilocul leziunii

Ataşarea la colagen e realizată în Ataşarea la colagen e realizată în prezenţa factorului von Willebrand prezenţa factorului von Willebrand şi al GP Ib IX. Ataşarea iniţiază o şi al GP Ib IX. Ataşarea iniţiază o modificare conformaţională – de modificare conformaţională – de la disc la celulă cu prelungirila disc la celulă cu prelungiri

Activarea plachetelor are ca Activarea plachetelor are ca urmare secreţia substanţelor din urmare secreţia substanţelor din granulaţii şi activarea GP IIb/IIIa granulaţii şi activarea GP IIb/IIIa (receptori pentru fibrinogen)(receptori pentru fibrinogen)

Adeziunea plachetarăAdeziunea plachetară

Agregarea plachetarăAgregarea plachetară

Modificări chimice determină agregarea plachetelor Modificări chimice determină agregarea plachetelor Si alte plachete care ajung la locul leziunii sunt activate de Si alte plachete care ajung la locul leziunii sunt activate de

agonişti agonişti Expunerea receptorilor GPExpunerea receptorilor GPIIb/IIIa IIb/IIIa ajută la legarea ajută la legarea

fibrinogenfibrinogenuluiului CalciuCalciul trebuie să fie l trebuie să fie preprezzentent Activarea membranei plachetare generează TxA2Activarea membranei plachetare generează TxA2 TxA2 activează descărcarea substanţelor din granulaţii – TxA2 activează descărcarea substanţelor din granulaţii –

vasoconstricţievasoconstricţie Activarea Trb necesită ADPActivarea Trb necesită ADP

TROMBOCITELE

Funcţii

•Hemostaza

•Generare ateroscleroză

•Apărare (fixează bacterii, virusuri -- neutralizare)

•Transportor (fixează în granule substanţe pe care le eliberează în alte teritorii)

HEMOSTAZA

1.timpul vascular= hemostaza primară2.timpul trombocitar

3.timpul plasmatic = hemostaza secundară = coagularea

HEMOSTAZA

timpul vascular

HEMOSTAZA

ROLUL ENDOTELIULUI VASCULAR ÎN HEMOSTAZĂ-rol activ: barieră şi activitate secretorie-rol dublu: endoteliul intact previne aderarea trombocitelor şi

declanşarea mecanismelor hemostazeiendoteliul lezat contribuie la activarea trombocitarăşi activarea hemostazei

EFECTUL ANTITROMBOTIC-endoteliul - barieră de separare între singe şi ţesutul subendotelial-sinteza PG I2 (prostaciclinei) - vasodilatator, antiagregant-sinteza NO - vasodilatator, antiagregant (EDRF – factor relaxant derivat din endoteliu)-sinteza de trombomodulină - împiedică ataşarea trombului la endoteliu-antitrombina III – inhibitor al trombinei

EFECTUL PROTROMBOTIC-colagenul - capabil să declanşeze activarea trombocitelor-sinteza de endoteline – vasoconstrictor-factorul tisular (F III) – sustine generarea trombinei si formarea fibrinei

HEMOSTAZA

timpul trombocitar

Timpul trombocitar

– Activarea trombocitelor prin diverşi stimulatori: trombina

– Adeziunea trombocitelor la subendoteliu prin interacţiunea între GP Ib şi factorul von Willebrand (VWF)

– Eliberare de produşi din granulele plachetare - activarea a noi trombocite la locul leziunii

– Agregarea trombocitelor prin interacţiunea dintre GPIIb/IIIa şi fibrinogen cu formarea trombului plachetar

-Stimulează hemostaza secundară

Activarea plachetară

Implică o creştere a Ca2+ citoplasmatic

Stimularea se realizează sub acţiunea:

•colagenului - de pe suprafaţa subendotelială•trombinei – din cascada coagulării

… şi a:

•ADP/ATP – din plachete şi celule lezate•PGH2/TXA2 – din trombocite•5-HT – din trombocite•adrenaline/NA - hormoni circulanţi

Timpul trombocitar

După activarea plachetară ...

•Aderare la peretele vascular

•Modificare formă - de la disc -- sferă

•Expune receptorii pentru fibrinogen pe suprafaţă

•Expune factorul plachetar 3 pe suprafaţă

•Sintetizează mediatori lipidici: TXA2, PGD2, PAF

•Sintetizează oxid nitric (NO)

•Eliberează conţinutul din granulele dense (ADP, ATP) - sub acţiunea ADP se activează noi trombocite

•Eliberează conţinutul din granulele alfa (proteine, fibrinogen, vWF, PDGF= factor de creştere derivat din trombocite)

Activarea - începe în cîteva secunde, se termină în cîteva minute

Factorul von Willebrand

Proteină prezentă în plasmă şi pe suprafaţa trombocitelor (se leagă pe GP Ib).

Sintetizat de celulele endoteliale

În plasmă circulă complexat în raport 1:1 cu factorul VIII

Serveste la ataşarea trombocitelor la endoteliu (suport al interacţiunii trombocit - colagen)

TROMBINAPROTROMBINA

FIBRINĂFIBRINOGEN

TROMBINA

COMPLEXUL ACTIVATOR AL PROTROMBINEI1

2

3

COMPLEXUL ACTIVATOR AL PROTROMBINEI

COAGULAREA

PROTEINELE PLASMATICE ALE COAGULARII

-COAGULAREA – complex de reacţii enzimatice – in cascadă-factorii coagulării

– proteine care circulă în plasmă ca şi proenzime inactive care sunt activate prin clivare proteolitică a legăturilor peptidice de către factorii coagulării anterior activaţi

-proteine care funcţionează ca şi coenzime pentru reacţiile enzimatice pivot ale procesului de coagulare (modulează acţiunea factorilor de coagulare)

COAGULAREA

FACTORII PLASMATICI AI COAGULARI

I fibrinogenul

II protrombina

III tromboplastina tisulară

IV Ca2+

V proaccelerina

VII proconvertina

VIII antihemofilic A

IX antihemofilic B

X Stuart-Prower

XI antihemofilic C

XII (f de contact) Hageman

XIII stabilizatorul fibrinei

Factorul von Willebrand, prekalicreină, kininogen

PROTEINELE COAGULARII VITAMINA K DEPENDENTE

-FII – protrombina-FVII – convertina-FIX - Christmas-FX – Stuart – Prower-cofactorii proteine S si proteina C

-inactivate în absenţa vitaminei K (in prezenţa antivitaminelor K) deoarece nu se mai activează în hepatocit gama glutamil carboxilaza necesară modificării factorilor de mai sus

-dicumarina şi derivaţii săi = antivitamine K

COAGULAREA

PROTEINELE COFACTORI AI COAGULĂRII

-FV – proaccelerina – produsă de macrofage, component al complexului activator al protrombinei-FVIII – globulina antihemofilică – alfa globulină formată în _F-proteina C – beta globulină formată în hepatocit în prezenţa vitaminei K. E activată de trombină, în prezenţa beta-trombomodulinei. Sub formă activă, în prezenţa unui cofactor (proteina S), proteina C inactivează factorii V si VIII-proteina S – formată în hepatocite în prezenţa vitaminei K, se consumă în coagulare, amplifică activitatea proteolitică a proteinei C asupra cofactorilor FV si FVIII-beta- trombomodulina – beta globulină formată în celulele endoteliale – activează plachetele, cofactorii FV si VIII

COAGULAREA

COMPLEXUL ACTIVATOR AL PROTROMBINEI

Complex compus din:Fosfolipide plachetareFosfatidilinozitolFosfatidilserinaCalciu, factor Va şi Xa

COAGULAREA

PROTROMBINA

-alfa 2 globulină formată în ficat şi utilizată pentru formarea cheagului sanguin

-proteină instabilă care se “desface” in compuşi mai mici (trombina)

-vitamina K - necesară pentru formarea protrombinei

-afectarea hepatică sau lipsa vitaminei K -- scăderea nivelului protrombinei -- tendinţă la sîngerare

COAGULAREA

FIBRINOGENUL

-proteină plasmatică cu GM 340000 alcătuită din 3 perechi lanţuri polipeptidice legate prin legături disulfhidril

-trombina acţionează asupra fibrinogenului formând o moleculă de monomer de fibrină care poate polimeriza cu alţi monomeri de fibrină

-- formare de fibre lungi de fibrină din care rezulta “reţeaua” cheagului

COAGULAREA

Poate fi iniţiată pe calePoate fi iniţiată pe cale INTRINSECĂ INTRINSECĂ sau sau EXTRINSECĂEXTRINSECĂ Iniţiată de leziunea tisularăIniţiată de leziunea tisulară Sub acţiunea unor factori plasmatici ai Sub acţiunea unor factori plasmatici ai

coagulăriicoagulării Fiecare “cale” constă într-o “cascadă” de Fiecare “cale” constă într-o “cascadă” de

reacţii enzimatice care conduce spre reacţii enzimatice care conduce spre factorul Xfactorul X

Odată ce factorul X a fost activat, Odată ce factorul X a fost activat, împreună cu Ca, factorul plachetarîmpreună cu Ca, factorul plachetar33, , and factorul V formează and factorul V formează activatorul activatorul protrombineiprotrombinei

COAGULAREA

CoagulareaCoagularea

MECANISM INTRINSEC-declanşat prin expunerea plasmei la suprafeţele străine încărcate negativ

MECANISM EXTRINSEC-declanşat de tromboplastina tisulară (F III) provenită din ţesuturile distruse

MECANISM INTRINSECMECANISM INTRINSEC

suprafeţe străine (colagen)

XIIXII

MECANISM EXTRINSECMECANISM EXTRINSEC

XIIaXIIa

XIXI XIaXIa

IXIX IXaIXa

VIIIVIII

IV (Ca2+)IV (Ca2+)

COMPLEX ACTIVATOR INTRINSEC AL F XCOMPLEX ACTIVATOR INTRINSEC AL F X

VIIaVIIa VIIVII

IV (Ca2*)IV (Ca2*)

IIIIII

leziune tisulară

COMPLEX ACTIVATOR EXTRINSEC AL F XCOMPLEX ACTIVATOR EXTRINSEC AL F X

XX

Xa, fosfolipide, IV (Ca2+) V

COMPLEXUL ACTIVATOR AL PROTROMBINEI(protrombinaza)

protrombina trombinatrombina

fibrinogen fibrina

fibrina solubilă

fibrina insolubilăXIIIaXIIIa XIIIXIII

IV (Ca2+)IV (Ca2+)

fosfolipidefosfolipide

RETRACŢIA CHEAGULUI

-sinereza - eliminare apă

-retracţia propriu-zisă - rol important îl au trombocitele - se fixează în ochiurile reţelei şi le strîng ataşându-le unele de altele prin intermediul trombosteninei

-reducerea volumului cheagului la 1/6 din cel iniţial

REPARAREA LEZIUNILOR

Platelet-derived growth factor (PDGF) stimulează refacerea peretelui vascular

Fibroblastele formează un “plasture” de ţesut conjunctiv

Stimulate de vascular endothelial growth factor (VEGF), celulele endoteliale se multiplică şi se reface ţesutul endotelial