testarea difuzimetrica

Download Testarea difuzimetrica

Post on 15-Oct-2015

109 views

Category:

Documents

3 download

Embed Size (px)

DESCRIPTION

Testarea difuzimetrica

TRANSCRIPT

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    1/50

    Testarea difuzimetrica

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    2/50

    Testare discuri

    Rezultatenecorespunzatoare

    Mediu CitireInterpretare

    Discuri

    Tulpinabacteriana

    Control intern

    de calitate

    Tehnicade lucru

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    3/50

    Crescuta > 18-20h

    Flora mixta

    Cultura pe mediu inhibant- selectivdiferential

    Alt mediu decat Mueller-Hinton

    urnat in laborator necontrolat

    pH! "rosime! sterilitate

    ulpina bacteriana

    Mediu

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    4/50

    #tili$are discuri fara importanta pentru specia bacteriana%astrare in conditii necorespun$atoare#tili$are peste limita de valabilitate

    &nocul bacterian nestandardi$at'eechilibrarea termica a discurilor'erespectare'umarului de discuri( placaimpilor de lucru) 1* minimpului de incubare

    ehnica de lucru

    +iscuri

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    5/50

    Masurare inexacta mm

    'erespectarea "hidurilor

    'eefectuarea dupa punerea la punct a metodei acontrolului saptamanal

    ,one mai mici pentru discurile care se inactivea$arepede ex. AMC! &%M! /

    Citire &nterpretare

    Controlul intern de calitate

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    6/50

    Posibilitati de detectare amecanismelor de rezistenta

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    7/50

    Determinarea ESBL

    Daca se utilizeaza criteriile interpretativeEUCAST !"# si C$SI !"#

    %u este necesaraTestarea pentru ES&$

    Modificarea rezultatelor pentru 'cefalosporineaztreonam

    peniciline

    Testarea ES&$ se recomanda( este obli)atorieInvesti)atii in scop epidemiolo)ic(control a

    infectiilor

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    8/50

    Suspiciune ESBL e efectueaza testare E BL daca la unul dinpreparatele antimicrobiene din tabel zonele deinhibitie corespundUtilizarea mai multor substanteantimicrobiene creste sensibilitatea detectiei

    Tehnica standard pentru metodadifuzimetricaIncubare 3510! "tmosfera obisnuita

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    9/50

    Control intern de calitate

    test screening ESBL

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    10/50

    Test confirmare fenotipica ESBL CLSI 2013

    Discuri Cefta$idim 0 " Cefta$idim(acid clavulanic 0(10 "

    Cefotaxim 0 " Cefotaxim(acid clavulanic 0(10 "

    Tehnica standard pentru metoda difuzimetrica &ncubare *320C

    Atmosfera obisnuita Citire 14-18 h

    Interpretare) est po$itiv - Cresterea $onei deinhibitie 5 *mm pentru combinatia cu acid clavulanic

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    11/50

    Provizoriu detectare ESBL%rin metoda difu$imetrica standard

    Ase$area discurilor la 2 cm distanta

    +e o parte si cealalta a discului cuamoxicilina(acid clavulanic se plasea$a discurile cu

    cefta$idim si cefotaxim

    Ceftazidim Cefota*im

    Amo*icilina(

    Acid clavulanic

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    12/50

    Se pot utiliza pentru detectarea ESBLDiscuri ceftazidim, cefotaxim, cefepim si aztreonam in jurul

    discului cu amoxicilina/acid clavulanicDaca la ! cm distanta intre discuri nu apare zona de in"i#itie

    intre $%C si cefalosporine se repeta testul la & cm distanta

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    13/50

    ESBL K.pneumoniae

    AMP

    AMC

    SAM

    FEP

    CAZ

    CXM

    TZP

    CRO

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    14/50

    Control intern de calitate

    test de confirmare fenotipica

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    15/50

    Klebsiella pneumoniae

    limita testuluiPot fi identificate rareori tulpini ES&$producatoare fara a se decela marirea zonei deinhibitie la asociatia cefalosporine(acidclavulanic in cazul

    - pre$entei mai mult de un tip de 6/7

    - producerii de alte lactama$e care maschea$a 6/7-

    AmpC- pre$entei 6/7 9 mutatie porine

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    16/50

    ChromID ESBL (bioerieu!"

    E! coli rosu&! pneumoniae ' rd(! mirabilis ca niu

    ")ar selecti' cuantibiotice

    inclusi' cefpodo*ime+etectie rapida aenterobacteriilor

    ESBL, in 1%$-. ore+ecelare purtatori

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    17/50

    #mpC beta $actamaza

    1981 lasa / "mbler 1$ Bush

    ene $ parte a unui inte)ron

    Localizata in periplasma

    "cti'a pe cefamicine 24 2T6

    *7imino$cefalosporine "8 T4 96

    :onobactame "8T6"finitatea mai mica

    cefepim cefpirom carbapeneme

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    18/50

    $mpC derepresata/ plasmidica

    testare cu discuriSe suspecteaza':e$istenta la a -a "en cefalosporine

    :e$istenta la cefoxitin ;$ona < 14 mm=

    ipsa siner"ismului cefalosporina(clavulanat

    &(: la Amoxcillin9clavulanate

    Discuri Cefotaxime ;CA,0=

    Cefotaxime 9 Cloxacillin ;CC=Cefta$idime ;CA,0=

    Cefta$idime 9 Cloxacillin ;CA,C=

    Mueller Hinton a"ar ;McFarland 0*=

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    19/50

    'nterpretare test $mpC Cefotaxime9Cloxacillin

    +ona inhibitie , - mm decat la

    Cefotaxime sin"ursi(sau

    Cefta$idime9Cloxacillin

    +ona inhibitie , - mm decat la

    Cefta$idime sin"ur

    indica prezenta unei AmpC

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    20/50

    Teste confirmatoare cu discuri pentru E BL si "mpTulpina "T ;00#03 produce E BL si nu "mp /lactamaseTulpina 915. produce "mp $lactamase si nu E BL!"8

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    21/50

    Etest#mpC

    cefotetan ,?$ clo*acillin cefo*itin ,?$clo*acillin

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    22/50

    (ezistenta la car#apenemeClasificarea Ambler

    Clasa A Clasa & Clasa D Clasa C

    /ensibile la Metalo lactamaze Oxacilinaze AmpC

    inhibitori lactam Cefalosporinaze

    .PC /IM0 IPM 12A345 Hiperexpresie?6/! &M&! /M6 /%M! /&M! ?&M @ariante A 9alte mecanisme 'MC-A '+M-1 impermeabilitate(

    porine sau eflux

    Descresterea sensibilitatii sau rezistenta la carbapeneme

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    23/50

    Car#apeneme E)C$ST !*&+%unctele de ruptura pentru enterobacterii

    deceleaza rezistenta clinica importanta;inclusiv maBoritatea carbapenema$elor=

    #nele tulpini care produc carbapenema$a pot fisensibile cf punctelor de ruptura se raporteazacum s3a obtinut prin testare/! & sau :Prezenta carbapenemazelor nu influentea$a

    includerea in cate"oriile / sau :Decelarea carbapenemazelor se recomanda

    sau este obli)atorie pentru controlulinfectiilor

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    24/50

    Enterobactriaceae suspiciunea de

    producere car#apenemaza&ntermediar sau re$istent la o carbapenema

    Cel mai bun indicator- ertapenemul

    :e$istenta la una sau mai multe cefalosporine"eneratia &&&-a

    Ceftazidim Cefopera$ona

    Cefotaxim Cefti$oximCeftriaxon

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    25/50

    Se suspecteaza

    Carbapenemaza6rtapenem $ona D 22 mm ;Enterobacteriaceae= sau meropenem $ona

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    26/50

    Test confirmator car#apenemaza metoda %-T

    .%odified -odge Test CLS' !*&+

    Mediu 6 a)ar Mueller 7intonInoculE.coliATCC -8 6 suspensie etalonata !0-

    Mc9arland diluata "("! cu ser fiziolo)ic sau bulionInocularea mediuluiMetoda standard difuzimetricaUscarea #3"! minute

    Depunerea unui disc de ertapenem "!:) ( meropenem"!:)Inocularea cu ansa perpendicular pe disc 330- cm

    3 tulpina se studiat

    3 tulpini martor ne)ativ0 martor pozitiv

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    27/50

    MartoriPozitiv 6 Klebsiella pneumoniaeATCC &AA3";!-

    %e)ativ 6 Klebsiella pneumoniaeATCC &AA3";! *0 en$ime

    Confera nivel inalt de re$istenta

    Codificate ) plasmide! transpo$oni

    ri"inea probabilar"anisme care produc amino"lico$ide

    Mutatii "ene care codifica respiratia bacteriana

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    44/50

    enotipuri de rezistenta $a amino'$icozide

    Enterobacteriacae(e!ceptie Klebsiella sppsi Serratia spp.)

    9enotipClasic AAC#FI AAC#FII AAC#FI/ AAC

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    45/50

    estu$D dub$u disc di/uzie

    &ezistenta LS

    Eritromicina 3"- :)Clindamicina 3 :)R"#mmS , "mm

    Stafilococi

    Streptococi

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    46/50

    6ta(ilococisc di((usion test pentru rezistenta inductibila la clindamicina

    a!Eritro"icina re#istent si clin$a"icina sensibil (enotip Mb! Eritro"icina re#istent si clin$a"icina sensibil -#ona % la clin$a"icina 7enotipM-6, inductibil.

    c! &e#istenta la a"bele 're'arate 7enotip M-6,constituti

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    47/50

    Crom ID

    MRSA

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    48/50

    5ene6pert S7stem

    2pert 3 test calitativ real3time PCR 6 detectieautomata a tulpinilor cu )ene de rezistenta

    2pertanA 3 )enaanA !8! min

    2pertMRSA(SA SSTI 6

    2pertMRSA(SA &C 3 -! :l

    2pertMRSA 3 )ena mecA

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    49/50

    Detectare purtatori naza$i &S#2pertMRSA 3 G* min ) re$ultat

    ;2 min pre"atire proba=

    /ensibilitate KI!1 /pecificitate K4!2

    &U?SGn &EAD MRSA cercetare ;'ordia"= ma"netic beads cu afinitate pt M:/A

  • 5/25/2018 Testarea difuzimetrica

    50/50

    Conc$uzii%ece