rezumat teza hoteteu mihail.pdf

7/24/2019 Rezumat teza Hoteteu Mihail.pdf

1/21

CERCETRI PRIVIND ADAPTAREA ORGANISMULUI ANIMAL

LA ACIUNEA FACTORILOR SIMULAI DE MEDIUAEROSPAIAL

- REZUMAT -

Coordonator tiinific:

Prof. dr. Clin TESIO

Doctorand Mihail HOTETEU


2/21

2

CUPRINS

I. Influena factorilor de mediu aerospaial asupra organismului viu.3

II. Material i metode.....4

III.

Rezultate i discuii8III.1.

Influena factorilor de mediu aerospaial simulai asupra echilibrului hidroelectrolitical obolanilor albi linia Wistar.....8

III.2.

Influena factorilor de mediu aerospaial simulai asupra sistemului imunitar alobolanilor Wistar ...10

III.3.

Influena factorilor naturali chimici, fizici i de mediu asupra modificrilorechilibrului hidroelectrolitic i al sistemului imunitar induse de ctre factorii de mediuaerospaial simulai ..11

IV.

Concluzii 19

V. Bibliografie 20


3/21

3

I. Influena factorilor demediu aerospaial asupra organismului viu

Una din orientarile actuale in domeniul aerospatial la nivel internationalo reprezinta studiereaactiunii factorilor de mediu spatial / cosmic asupra organismelor vii, ce include directii de cercetareale efectului acestora prin utilizarea satelitilor artificiali, statiilor cosmice si prin simularea unor

factori specifici de mediu in laboratoare de cercetare de pe Pamant. Aceste directii de cercetare suntprezente in proiecte ale The National Aeronautics and Space Agency (NASA, USA), EuropeanSpace Agency (ESA), Centre National dEtudes Spatiales (CNES, lAgence Francaise de lEspace ),Russian Space Agency (RKA) si ale altor agentii nationale. De asemenea, activitati de cercetare indomeniu sunt dezvoltate si in cadrul Committee on Space Research (COSPAR), in EnviromentralResearch in Space-ESA, NASA Microgravity Research Program (NASA MRP), precum si inResearch Plan NASAs Office of Biological and Physical Research (NASA OBPR) prevazute a sedesfasura pe perioada anilor 2003-2017.

Printre tematicile si obiectivele cercetarilor internationale sunt de remarcat:

Studii de adaptare la microgravitatie;

Impactul microgravitatiei asupra ritmurilor circadiene si a metabolismului; Studiul mecanismelor moleculare si celulare de actiune a microgravitatiei- modele animale si om;

Studii de biologie si virulenta a microorganismelor in mediu aerospatial;

Probleme de ecologie pe statiile orbitale cu activitate de lunga durata;

Prevenirea sau corectia modificarilor patologice aparute in urma zborului spatial sau al stationariipe orbita;

Terapie in spatiu in conditii de imponderabilitate;

Studii de actiune a microgravitatiei asupra sistemului imunitar;

Studii de risc biologic al radiatiei cosmice in spatiu si experimental in laboratoarele de cercetare.Problematica actiunii hipergravitatiei si microgravitatiei asupra organismului animal si uman

reprezinta un interes deosebit in domeniul studierii si utilizarii spatiului cosmic. La fel, prezintainteres atat stiintific cat si practic efectul acestora in concordanta cu alti factori fizici si biologici demediu, care pot avea o actiune determinanta asupra organismului viu in conditiile aerospatiale /cosmice.

Date experimentale, indeosebi cele obtinute de NASA (National Aeronautics and Space Agency),RKA (Russian Space Agency) si ESA (European Space Agency), indica posibilitatea supresiei unorcomponente imunologice, stagnarii unor procese biochimice, modificari ale metabolismului, precumsi anumite modificari genetice dar majoritatea acestor studii urmaresc doar actiunea izolata afactorilor specifici de mediu aerospatial, cum ar fi actiunea radiatiilor, microgravitatiei sau ahipergravitatiei asupra organismelor vii.

Dei la numeroase specii de animale au fost studiate efectele biologice ale imponderabilitiii variaiilor gravitaionale aprute n cadrul zborurilor cosmice, au fost efectuate n general puinedeterminri n timpul misiunilor, majoritatea studiilor fiind realizate nainte i dup zborul n spaiu.Astfel, a aprut necesitatea realizrii unor modele de simulare n laborator ale condiiilorgravitaionale din timpul zborurilor spaiale, urmrindu-se efectele acestora asupra fiinelor vii sauasupra anumitor sisteme ale organismului (e.g. utilizarea imobilizrii n vederea simulrii efectelorimponderabilitii asupra sistemului musculo-scheletic).


4/21

4

n acest context, lucrarea i propunestudiul rspunsului organismului animal la aciuneahipergravitaiei sau microgravitaiei simulatesimultancu unii factori potenial patogeni, fizicii biologici de mediu (radiaii, modificri barice i de temperatur, risc microbiologic). n acestscop au fost propuse i realizate urmtoarele obiective specifice:

elaborarea unui nou model experimental de studiu n laborator al efectelor zborului spaial i

al factorilor de mediu aerospaial asupra organismului animal;

obinerea de date biologice referitoare la parametri ai echilibrului hidroelectrolitic isistemului imunitar utiliznd modelul experimental realizat;

testarea unor metode de corecie ale modificrilor aprute n urma aciunii complexului defactori de mediu aerospaial studiat asupra organismului animal (inclusiv factori fizicinaturali de mediu sau compui bioactivi naturali).

II. Material i metode

Studiile experimentale au fost realizate pe un numr de 132 obolani albi linia Wistar masculiaduli, cu o greutate de 160 180 g, distribuii n 16 loturi, prezentate n tabelul1.

Tabel 1. Loturile de animale i condiiile experimentale folosite n cadrul studiului.Nr. crt. Lot Condiii experimentale Nr.

animale

1.

Martor 12

2. Microgravitaie 24h Imersie n ap 24h 8

3.

Hiperexcitabili

(Microgravitaie 24h)

Imersie n ap 24h 8

4.

Microgravitaie 48h Imersie n ap 48h 85.

Hipergravitaie 8G 30 min. +8Gz 86. Hiperexcitabili

(Hipergravitaie 8G)30 min. +8Gz 8

7.

Hipergravitaie 4G 4h +4Gz 88.

Presiune 30 min. 300 mmHg 8

9.

Temperatur -14C 30 min. -14C 8

10.

Temperatur +45C 30 min. +45C 8

11.

Iradiere 1 min. 1,5 Gy 8

12.

Microgravitaie +iradiere

1 min. 1,5 Gy i Imersie n ap 24h 8

13.

Hipergravitaie +iradiere

1 min. 1,5 Gy i 30 min. +8Gz 8

14.

Iradiere + riscmicrobiologic

1 min. 1,5 Gy i autoinfecie cu Staphylococcusaureus

8

15.

Microgravitaie Imersie n ap 24h +1 min. 1,5 Gy + 30 min. 300 8


5/21

5

complex mmHg + 30 min. +45C + autoinfecie cuStaphylococcus aureus

16. Hipergravitaiecomplex

30 min. +8Gz +1 min. 1,5 Gy + 30 min. 300 mmHg

+ 30 min. +45C + autoinfecie cu Staphylococcusaureus

8

Hipergravitaia a fost obinut prin centrifugarea animalelor de laborator 30 de minute la+8Gz sau timp de 4h la +4Gz utiliznd o centrifug special pentru animale mici.

Microgravitaia a fost simulat prin imersia animalelor in apa (Water immersion)

termostatat (25 0,5C) timp de 24 i 48 de ore.Influena radiaiilor cosmice s-a realizat prin expunererea animalelor la radiaii n doz

unic de 1,5 Gy, utiliznd aparatura i metodologia specific din cadrul Institutului Naional deCercetare-Dezvoltare pentru Fizic i Inginerie Nuclear Horia Hulubei.

Variaiile barice au fost realizate prin introducerea loturilor de obolani timp de 30 minute incamera termobaric la o presiune de 300 mmHg (corespunztor unei altitudini de 7200 de metri).

Variaiile de temperaturs-au realizat prin meninerea animalelor timp de 30 de minute ntr-oincint termostatat la temperaturi de -14C sau de +45C.

Riscul microbiologicpentru animalele de laborator s-a realizat prin autoinfectarea obolanilorcu microflora cilor respiratorii superioare (preponderent Staphylococcus aureus) prin traumareamucoasei nazale n condiii de siguran antiinfecioas.

Efectul gravitaiei asupra animalelor iradiate s-a realizat prin iradierea loturilor de obolanicu radiaii n doz unic de 1,5 Gy urmat, dup 72 de ore, de expunerea acestora lamicrogravitaie timp de 24h sau la hipergravitaie timp de 30 de minute la +8 Gz.

Expunerea animalelor iradiate la risc microbiologic s-a realizat prin iradierea loturilor deobolani cu radiaii n doz unic de 1,5 Gy urmat, dup 72 de ore, de autoinfecia cu

Staphylococcus aureus.Efectul cumulat al factorilor de mediu aerospaial simulai asupra organismului animal afost studiat prin expunerea animalelor consecutiv la microgravitaie 24h (sau hipergravitaie 30 min.

+8Gz), iradiere 1,5 Gy, 30 min. temperatur de +45C, 30 min. presiune de 300 mmHg iautoinfecie cu Staphylococcus aureus .

Stabilirea nivelului excitabilittii cerebralela animalele din loturile de studiu a fost efectuatn funcie de susceptibilitatea la convulsii audiogene prin expunere la stimulare acustic forat (120Db, 1 min.). Stimularea s-a fcut pentru toate animalele utiliznd o sonerie montata in podeaua uneiincinte metalice, timp de un minut, iar la cele la care s- au remarcat convulsii sau o intens agitaiemotorie s-a ntrerupt stimularea in momentul apariiei acestora si au format componenta de obolanihiperexcitabili n cadrul loturilor de studiu.

n vederea realizrii efectului de corecie a modificrilor patologice, n special imunologice,aprute la obolanii albi Wistar din experiment, supui aciunii complexului de factori simulai aimediului aerospaial.au fost propuse i realizate soluii de cur experimental utiliznd produse de

origine vegetal (suspensie Spirulina platensis; ulei de Hippophae rhamnoides ctin;suspensie

a produsului PhitoImun Laboratoarele Medica, Romnia, n tinctur deEchinacea purpurea,produsul natural ImunoFort Laboratoarele Medica, Romnia, suspensie n clorur de sodiu


6/21

6

0,9%), microbian (imunomodulatoarele de origine polibacterian Orostim i Aerodin -INCDMI Cantacuzino, Romnia - suspensie n clorur de sodiu 0,9%), aeroionizrii negative

artificiale de circa 40000/ cm3 (efectuat n cadrul laboratoarelor INRMFB) i speleoterapiei n

Salina Unirea Slnic Prahova factori fizici i de mediu cu efect curativ antiinflamator,hiposensibilizator i imunomodulator.

Studiului au fost supui 74 obolani albi linia Wistar, masculi aduli, cu o greutate de 160 180 g., distribuii n 12 loturi (Tabel 2).

Tabel 2. Loturile de obolani albi Wistar i condiiile experimentaleNr.crt.

Lot Condiii experimentale Animale

1. MARTOR Condiii normale 15

2. Martor factoriaerospaiali

Complex factori simulai aerospaiali 6

3. Spirulina platensis Spirulin (500mg/2ml ser fiziologic/zi timp de 6 zile).

Expunere complex factori simulai

6

4. Orostim Orostim (250 mg/1 ml ser fiziologic/zi timp de 6 zile).Expunere complex factori simulai aerospaiali

6

5. Hippophaerhamnoides

Ulei de ctina (0,5 ml/zi timp de 6 zile). Expunerecomplex factori simulaiaerospaiali

6

6. Aerodin Aerodin suspensie (0,5 ml/zi timp de 6 zile). Expunerecomplex factori simulai

6

7. Echinacea purpurea Expunere complex factori simulai. PhitoImun (1 mlsuspensie / 1 capsul PhytoImun in 2ml TincturaEchinacea/zi timp de 6 zile).

6

8. Imunofort Expunere complex factori simulai aerospaiali.Imunofort (1 ml suspensie / 1 capsul Imunofort in 2ml 0,9% NaCl/zi t imp de 6 zile).

6

9. Aeroionizare negativ Expunere complex factori simulai aerospaiali.Aeroionizare negativ artificial 40000 /cm3, timpde 10 zile

6

10. Martor aeroionizarenegativ

Aeroionizarea negativa - 40000 /cm3, timp de 10 zile 6

11. Speleoterapie salin Expunere complex factori simulai aerospaiali.Speleoterapie n Mina "Unirea"- 24 ore/zi, timp de 8zile

6

12. Martor speleoterapiesalin

Speleoterapie in Mina "Unirea" - 24 ore/zi timp de8zile.

6

Efectul complexului de factori simulai de mediu aerospaial asupra organismului animalafost realizat prin expunerea animalelor consecutiv la microgravitaie 24h, hipergravitaie 30 min.

+8Gz, presiune de 300 mmHg, temperatur de +45C, 30 min., la microgravitaie 24h,iradiere 1,5Gy iautoinfecie cu Staphylococcus aureus .


7/21

7

Aeroionizarea negativ artificial de circa 40000/ cm3, pentru utilizarea n scopul corecieimodificrilor patologice produse experimental la animalele de laborator supuse aciunii complexuluide factori simulai de mediu aerospaial, a fost realizat n cadrul laboratoarelor INRMFB, utilizndun generator de ioni cu posibiliti de generare 15.000-230.000 ioni negativi / pozitivi / cm.

Asupra animalelor de laborator (obolani albi linia Wistar) au fost efectuate urmtoarele testeimunologice:1. Procesul de fagocitoz a granulocitelor polimorfonucleare (PMN)

a. Activitatea fagocitar fa de Staphyloccocus aureus / celule fagocitare (% i nx10*9/lsnge);

b. Numrul de celule microbiene (Staphyloccocus aureus) fagocitate;c. Killing Effect / germeni fagocitain faza de dezintegrare n citoplasma fagocitului (%).

2. Evaluarea funciei bactericide oxigen dependente a granulocitelor PMN (metabolismuluioxidativ al fagocitelor) prin testul NBT (Nitrozo-Blau-Tetrazoliu Test) la baza cruia este procesulde reducere a Blau-Tetrazoliului n celule pn la formazanul insolubil sub aciunea NADF-oxidazei.

Numrul de celule formazanpozitive (% i nx10*9/l snge) a fost citit prin microscopie optic.3. Celulele limfocitare pure n suspensie pentru investigaiile asupra populaiiilor i

subpopulaiilor acestora au fost obinute utiliznd metodologia de centrifugare a sngelui heparinizatn gradientul d.1.077 (Ficoll, Loba Feinchemie, Austria i Omnipac, Nicomed Maging, Norway).

4. Testul de evaluare a numrului de celule limfocitare T (E-CLFR) a fost efectuat dupprincipiile metodologice Jondal (1975) n testul de E-rozete / (E-RFC) E-Rosette Forming Cells(celule limfocitare formatoare de rozete cu eritrocite de oaie - testul clasic de evaluare a limfocitelorT) aplicnd metodologii de micrometod. Citirea rezultatelor - prin microscopierea optic cucoloraie dup Giemsa.

5. Testul E-CLFR, 29 C (Concentraia de limfocite T 29 C, % i nx10*9/l snge) . Pentruefectuarea testului a fost utilizat metodologia evalurii limfocitelor T (E-Rosette Forming Cells)

cu incubarea suspensiei de celule i markerilor la +29 C i citirea numrul de celule formatoare derozete de mare i mic afinitate celule limfocitare T-helperi (LT-h).

6. Dup diferena (E-CLFR E-CLFR 29 C) s-a calculat concentraia de celule limfocitare T-supresori (LT-s).

7. Testul E-CLFR, 45 C - concentraia de limfocite T 45 C, % i nx10*9/l snge (Celulelimfocitare T-citotoxice). Pentru efectuarea testului a fost utilizat metodologia (E-rozete) cuincubarea suspensiei de limfocite T i markeri la +45 C i citirea rezultatelor prin microscopieoptic.

n vederea studierii echilibrului hidroelectrolitic animalele au fost inute timp de 24 de ore ncuti metabolice individuale, fr hran i cu acces liber la o soluie salin cu o concentraie de NaCl

de 15 g. Dup 24 de ore s-a msurat volumul apei (ml/24 h) i cantitatea de sodiu (mEq/24 h)ingerate, volumul de urin eliminat (ml/24 h), precum i concentraiile de sodiului i potasiului dinurina eliminat (mEq/24 h) utiliznd un flamfotometru Ciba Corning 480. Din aceste date s-aucalculat valorile raportului Na/K ce reprezint expresia rspunsului mineralocorticoid alorganismului n condiiile experimentale date (Uluitu i colab., 2001)

Prelucrarea statistic a datelor experimentale


8/21

8

Rezultatele au fost prezentate ca medie matematic deviaia standard, mediile obinute lafiecare grup fiind comparate cu lotul martor utiliznd testul t-Student, considerndu-se semnificativo valoare a probabilitii mai mic dect 0.05.

III. Rezultate i discuii

III.1. Influena factorilor de mediu aerospaial simulai asupra echilibrului hidroelectrolitic alobolanilor albilinia Wistar

Imersia n ap timp de 24h determin scderea ingestiei de sodiu i ap, a eliminrii renale aelectroliilor i a funciei mineralocorticoide a glandelor suprarenale, precum i o cretere a diurezeiapoase.

Imersia n ap timp de 48h conduce la o cretere a ingestiei de sodiu i ap cu o cretere adiurezei, concomitent cu scderea eliminrii potasiului i a funciei mineralocorticoide a glandelorsuprarenale.

La animalele hiperexcitabile imersia n ap timp de 24h determin scderea eliminrii renaleasodiului i a ingestiei acestuia i a apei, precum i creterea eliminrii potasiului i a diurezei.Imersia n ap timp de 48h are efecte similare asupra ingestiei sodiului i a apei, producndscdereaeliminrii renale a potasiului cu o reducere a activitii glandelor suprarenale.

Acceleraia de +8Gz timp de 30 de minute la animalele normoexcitabile provoac scdereaaportului de sodiu i ap i a eliminrii renale a potasiului cu reducerea rspunsuluimineralocorticoid. Centrifugarea 4h la 4Gz determin o cretere a ingestiei i eliminrii renale asodiului i a apei, precum i a eliminrii renale a potasiului, rspunsul mineralocorticoid al glandelorsuprarenale nefiind modificat semnificativ.

La animalele susceptibile la convulsii audiogene centrifugarea timp de 30 minute la +8Gzdetermin doar scderea eliminrii urinare a potasiului datorat unei reduceri a rspunsuluimineralocorticoid, ceilali parametri msurai nefiind modificai. Spre deosebire dde centrifugarea la+8Gz timp de 30 minute, acceleraia de +4Gz timp de 4h are ca efect o cretere puternic a ingestieii eliminrii renale electroliilor i a apei, situaie asemntoare cu a animalelor normoexcitabile.

Hipoxia hipobar determin la animalele din experiment o cretere a mertabolismulu ihidrosodic, cu o scdere a eliminrii renale a potasiului i a secreiei de mineralocorticoizi

Radiaiile ionizante provoac o cretere a metabolismului hidrosalin, a eliminrii renale apotasiului, precum i o stimulare a glandelor suprarenale. Este de remarcat faptul c microgravitaiasimulat acionnd asupra animalelor iradiate mrete efectele observate n cazul iradierii simple nceea ce privete echilibrul sodiului i al apei, n timp ce hipergravitaia are efecte opuse, n ambelecazuri constatndu-se o uoar inhibiie a secreiei mineralocorticoide.

Stresul termic realizat prin expunerea animalelor la temperaturile de +45C i -14 C timp de30 de minute are ca efect o cretere a ingestiei i eliminrii renale a apei i sodiului i o scdere aeliminrii potasiului, ceea ce se poate datora unei reduceri a funciei mineralocorticoide a glandelorsuprarenale.

Microgravitaia simulat i hipergravitaia acionnd n complex cu ceilali factori de mediuaerospaial studiai determin creterea aportului i eliminrii renale a apei i electroliilor ca efect alstimulrii secreiei corticosteroizilor la nivelul glandelor suprarenale.


9/21

9

III.2. Influena factorilor de mediu aerospaial simulai asupra sistemului imunitar alobolanilor Wistar

Aciunea microgravitaiei simulate determin o cretere semnificativ a procentului deneutrofile, observndu-se i tendina de cretere a concentraiei de neutrofile segmentate.n cazul hipergravitaiei +8 Gz timp de 30 min s-au observat o cretere a neutrofilelor, n

special a neutrofilelor segmentate. La animalele de laborator supuse simulrii hipergravitaiei la 4 G/ 4 ore modificrile acestor elemente au fost mai rare i de intensitate mai mic.

Concentraia de eozinofile i monocite n snge la obolanii din experiment n general a fostcrescut n urma aciunii variaiilor gravitaionale.

La animalele de laborator supuse microgravitaiei timp de 48 ore s-a constatat o supresiesemnificativ a procesului de fagocitoz, i anume micorarea concentraiei de fagocite PMN, anumrului de celule microbiene fagocitate i a efectului antimicrobian (Killing Effect) alneutrofilelor; semnificativ a crescut numrul de celule formazan pozitive n testul NBT algranulocitelor.

n cazul microgravitaiei simulate timp de 24 ore valorile procesului de fagocitoz alneutrofilelor PMN nu au fost semnificativ modificate, dei sunt diferite n comparaie cu lotulmartor de obolani.

Dup aplicarea experimental a hipergravitaiei n procesul de fagocitoz al neutrofilelor PMNs-a constatat o tendin de scdere a efectului antimicrobian, valorile celulelor fagocitare inumrului de microorganisme fagocitate fiind nemodificate n comparaie cu lotul martor deanimale.

Dup aciunea microgravitaiei simulate s-a constatat o micorare semnificativ a concentraieide limfocite T i a celulelor limfocitare funcional active celulelor blasttransformatoare. n cazul

hipergravitaiei nu au fost constatate modificri semnificative n concentraia de limfocite T iproprietatea de blastogenez a acestora n prezena mitogenului fitohemaglutinin.

De asemenea, s-a observat i o tendin de redistribuire a celulelor limfocitare T helper i Tsupresor. Aceleai tendine de modificare a elementelor sistemului imunitar limfocitar T au fostobservate i la aplicarea microgravitaiei timp de 24 ore, dar nu aa semnificative.

La lotul de animale de laborator supuse hipergravitaiei de +4 Gz timp de 4 ore a sczutnumrul de celule T helperi i a crescut numrul de limfocite T supresor i citotoxice.

n urma aciunii hipoxiei hipobare asupra organismului animal s-a constatat: tendina spremrirea numrului de neutrofile, tendina de scdere a efectului antimicrobian al neutrofilelor PMNi creterea numrului de granulocite formazan pozitive.

De asemenea s-a mai observat tendina de scdere a numrului de limfocite T, a limfocitelor Thelper, i creterea concentraiei de limfocite T supresor i T citotoxice.

Expunerea animalelor la temperatura de +45C a provocat urmtoarele efecte: cretereanumrului de celule neutrofile; creterea numrului de eozinofile i monocite sangvine; cretereanumrului de fagocite PMN, dar cu tendina spre scdere a proprietilor de Killing Effect aacestora i mrire a numrului de neutrofile formazanpozitive n testul NBT.

n urma aciunii temperaturii de -14 C s-a observat o cretere a numrului de neutrofilesangvine, att segmentate ct i nesegmentate, precum i a numrului de eozinofile i monocite.


10/21

10

Procesul de fagocitoz, inclusiv mecanismul oxigen dependent al fagocitelor, precum isistemul limfocitar T nu a fost afectat n urma expunerii animalelor la temperaturile studiate.

Att dup iradierea gama, ct i dup aplicarea riscului microbiologic la acelai lot de obolanialbi, precum i dup aplicarea riscului microbiologic la alt lot de animale de laborator, s-a constatat oreacie neutrofil caracterizat prin mrirea numrului de celule neutrofile i ndeosebi a celor

nesegmentate; i o cretere a numrului de eozinofile i monocite.Se constat faptul, c prezena riscului microbiologic la animalele de laborator duce laactivarea procesului de fagocitoz, precum i la tendina de activare a sistemului T limfocitar, cucreterea concentraiei de limfocite T citotoxice i de limfocite T supresor. La obolanii din loturileiradiai, iradiai i cu risc microbiologic a fost constatat o supresie considerabil a procesului defagocitoz a neutrofilelor PMN, inclusiv o mrire considerabil a celulelor formazan pozitive ntestul NBT.

La obolanii din loturile iradiai i iradiai + risc microbiologic a fost constatat o scdereconsiderabil a populaiei de limfocite T i a blastogenezei acestora la contactul cu mitogenulfitohemaglutinin, precum i a concentraiei limfocitare T helper, T supresor i T citotoxice .

La ambele loturi de animale supuse complexului de factori de mediu aerospaial este mritconcentraia de neutrofile, preponderent nesegmentate, precum i numrul de eozinofile; la animaleleasupra crora a fost aplicat complexul de factori cu hipergravitaie s-a mai observat i o tendin decretere a numrului de neutrofile segmentate.

De asemenea, s-a observat o scdere a concentraiei de fagocite i a parametrilor procesului defagocitoz a neutrofilelor PMN;

Asuprasistemului limfocitar T,complexul factorilor de mediu aerospaial are ca efect scdereaconcentraiei de limfocite T i proprietatea acestora de blastogenez n prezena mitogenuluifitohemaglutinin; i reducerea subpopulaiilor de limfocite T helper, de limfocite T citotoxice i Tsupresor.

III.3. Influena factorilor naturali chimici, fizici i de mediu asupra modificrilor

echilibrului hidroelectrolitic i al sistemului imunitar induse de ctre factorii de

mediu aerospaial simulai

n cadrul acestui studiu a fost dezvoltat un model experimental ce permite simularea n

laborator a efectelor fiziologice ale zborului spaial asupra echilibrului hidroelectrolitic, cu implicaii

n funcionarea sistemului cardiovascular, precum i asupra sistemului imun al organismului animal.

Modelul experimental al zborului spaial const n expunerea animalelor la aciunea succesiv a

hipergravitaiei, microgravitaiei simulate, radiaiilor, modificrilor barice i de temperatur iriscului microbiologic (imersie 24h, centrifugare 30 min. +8Gz, presiune 300 mmHg, temperatur de

+45C 30 min., iradiere 1,5 Gy i infecie cu Staphylococcus aureus). Principalele modificri

fiziologice induse de ctre noul model experimental n comparaie cu efectele biologice ale zborului

spaial sunt prezentate n tabelul 3.


11/21

11

Tabel 3. Tabel comparativ ale modificrilor induse de ctre modelul experimental studiat i de

ctre zborul spaial la animalele de laborator.

Model experimental

(Microgravitaie 24h, hipergravitaie 30 min.

+8Gz, presiune de 300 mmHg, temperatur de+45C 30 min., iradiere 1,5 Gy i infecie cu

Staphylococcus aureus)

Zbor spaial

La nivel renal: La nivel renal (Graebe, 2004):

Reducerea ingestiei i eliminrii sodiului i

potasiului;

Scderea ingestiei de ap i neafectarea

diurezei apoase;

Reducerea capacitii de concentrare renale

a electroliilor;

Stimulare a funciei mineralocorticoide a

glandelor suprarenale.

Crete reabsorbia sodiului;

Scade ingestia apei;

Nu se modific fluxul renal, rata de

filtrare glomerular i volumul urinar;

Este stimulat secreia aldosteronului i

a corticosteroizilor.

Sistemul imun: Sistemul imun (Fuchs, 1993; Lesnyak,

1996):

Scade concentraia neutrofilelor

limfocitelor T, T-helper, T-supresor i T

citotoxice;

Nu este afectat nivelul neutrofilelor i al

monocitelor;

Reducerea procesului de fagocitoz i

creterea celulelor formazan pozitive;

Scade capacitatea de blastogenez a

limfocitelor n prezena

fitohemaglutininei.

Scade concentraia limfocitelor T, T-

helper i T citotoxice;

Scade capacitatea de blastogenez a

limfocitelor n prezena

fitohemaglutininei .

Astfel, al doilea set de rezultate experimentale se refer la influena factorilor naturali chimici,fizici i de mediu asupra modificrilor echilibrului hidroelectrolitic i al sistemului imunitar indusede ctre factorii de mediu aerospaial simulai, principalele observaii experimentale fiind prezentatesintetic n tabelul 4.


12/21

12

Tabel 4. Efectul soluiilor de corecie ale modificrilor induse de ctre factorii de mediuaerospaial asupra parametrilor biologici studiai

Parametru Spirulinaplatensis

Orostim Hippophaerhamnoides

Aerodin Echinaceapurpurea

Uncaria

tomentosa

Aeroionizarenegativ

Speleoterapiesalin

Na ingerat

Na eliminat -

K eliminat - N N N -

Ap ingerat

Ap eliminat - -

Rspunsmineralocorticoid

- N

Neutrofile N N

Eozinofile Fagocite N

Celule formazanpozitive

- - - - - N N N

Limfocite T

BlastogenezaPHA

T-helper N

T-supressor N

T-citotoxice N

-tendin fa de martor; N normalizarea parametrilor; - - fr efect

ExtractuldeSpirulina platensismodific echilibrul sodiului determinnd reinerea acestuia norganism prin creterea marcant a ingestiei acestui ion corelat cu o cretere moderat a natriurezei.

Produsul imunomodulator Orostim determin o normalizare a perturbrilor echilibruluisodiului aprute ca urmare a aciunii factorilor simulai de mediu aerospaial prin creterea ingestieide sodiu i a natriurezei.

Extractul deHippophae rhamnoidesadministrat naintea expunerii animalelor de experien lafactorii de mediu aerospaial studiai determin o cretere de 200% i de 400% a ingestiei de sodiui a natriurezei fa de martor i, respectiv, fa de lotul de animale supuse doar aciunii factorilor demediu aerospaial simulai.

Imunomodulatorul Aerodin determin o cretere puternic a ingestiei sodiului i anatriurezei, n timp ce efectul asupra eliminrii renale a potasiului este mai redus.

Echinacea purpureadetermin un bilan negativ major la nivelul echilibrului sodiului ceea ceindic o puternic retenie a acestui cation n organismul animalelor expuse aciunii factorilor demediu aerospaial simulai.


13/21

13

Asupra echilibrului sodiului preparatul Imunofort determin o mrire a ingestiei i aeliminrii renale a sodiului conducnd la un bilan sodic puternic negativ.

Aeroionizarea negativ la animalele expuse aciunii factorilor simulai de mediu aerospaialdetermin o cretere a ingestiei i a eliminrii renale a sodiului, potasiului i a apei ceea ce conducela un bilan al echilibrului hidrosodic puternic negativ.

Cura experimental de speleoterapie n Mina Unirea Slnic Prahova la obolanii albi liniaWistar expui complexului de factori de mediu aerospaial simulai produce o cretere ametabolismului sodiului i potasiului i al apei ceea ce conduce la un echilibru hidrosodic negativ.

De asemenea, inhalarea aerosolului salin determin o normalizare a capacitii de concentrarerenal a sodiului i a concentraiei urinare a potasiului, precum i o scdere a rspunsuluimineralocorticosteroid al glandelor suprarenale.

Eliminarea renal a potasiului nu prezint modificri n urma tratamentului cu extract deSpirulina platensis, meninndu-se sczut fa demartor i uor crescut fa de lotul de animalesupus factorilor de mediu aerospaiali simulai.

De asemenea, eliminarea renal a potasiului n cazul tratamentului cu Orostim crete subaciunea acestui imunomodulator, prezentnd valori crescute fa de lotul martor.

Efectul extractului uleios de ctin (Hippophae rhamnoides) asupra eliminrii renale apotasiului este mai redus dect asupra eliminrii sodiului, aceasta prezentnd o cretere de 200%fa de lotul de animale supuse doar aciunii factorilorde mediu aerospaial simulai i de 25% fade martor.

Spre deosebire de sodiu, eliminarea potasiului apare a fi favorizat de tratamentul cu suspensiede Phytoimun n tinctur deEchinacea purpurea.

De asemenea, eliminarea renal a potasiului este favorizat de administrarea preparatuluinatural Imunofort.

Echilibrul hidric prezint un puternic bilan negativ sub aciunea extractului de Spirulinaplatensis, cantitatea de ap ingerat fiind crescut fa de martor i de lotul de animale supus

factorilor de mediu aerospaiali simulai, n timp ce diureza este redus.Ingestia de ap, diureza apoas i concentraiile urinare ale electroliilor sunt modificate n

urma tratamentului cu produsul imunomodulator Orostim, prezentnd valori intermediare celordeterminate n cazul lotului martor i al lotului de animale supuse complexului factorilor de mediuaerospaiali simulai.

n cazul echilibrului hidric, bilanul acestuia este negativ, pe baza unei creteri de 200% aingestiei de ap i a diurezei fa de martor n urma administrrii extractului de Hippophaerhamnoides.

Prin administrarea imunomodulatorului Aerodin se reface echilibrul hidric negativ observatla animalele din lotul martor, aceasta realizndu-se pe fondul unei creteri marcate a ingestiei de ap

i a diurezei.Echilibrul hidric prezint o variaie similar echilibrului sodiului, cu o cretere a ingestiei de

ap i o scdere a diurezei n urma tratamentului cu extractul deEchinacea purpurea.Echilibrul hidric prezint, similar echilibrului sodiului, un bilan negativ cu o cretere a

aportului de ap i a diurezei apoase n cazul preparatului natural Imunofort.Concentraia urinar a electroliilor la obolanii albi linia Wistar tratai preventiv cu extractul

deSpirulina platensisi expui dup aceea aciunii factorilor de mediu aerospaial simulai prezint


14/21

14

valori similare martorului fiind crescute fa de lotul de animale supus factorilor de mediuaerospaiali simulai dar netratai.

Extractul uleios de ctin (Hippophae rhamnoides), administrat animalelor naintea expuneriila aciunea complexului factorilor de mediu aerospaial studiai, determin o normalizare a capacitiide concentrare renal a electroliilor.

Capacitatea de concentrare renal, precum i concentraia urinar a sodiului revine la valorisimilare cu ale martorului, iar concentraia potasiului din urin se menine redus n urmatratamentului cu imunomodulatorul Aerodin.

Efectul suspensiei de Phytoimun n tinctur de Echinacea purpurea asupra concentraieiurinare a electroliilor se manifest printr-o normalizare a capacitii de concentrare renal a sodiuluii o cretere a concentraiei potasiului eliminat n urin.

n aceste condiii, capacitatea de concentrare renal a sodiului, precum i concentraia urinar apotasiului n urma tratamentului cu Imunofort prezint o tendin de revenire la valorile normaledeterminate la animalele nesupuse aciunii factorilor simulai de mediu aerospaial.

Capacitatea de concentrare renal a sodiului crete fa de lotul martor, n timp ce concentraiaurinar a potasiului prezint o tendin de normalizare n raport cu acesta la animalele tratate cuaeroioni negativi dup aciunea factorilor simulai de mediu aerospaial.

Raportul concentraiilor urinare ale electroliilor prezint o cretere datorat tratamentului cuextractul de Spirulina platensis, ceea ce indic un efect al acesteia de reducere a activiti imineralocorticoide a glandelor suprarenale.

Din datele prezentate referitor la raportul concentraiilor urinare ale sodiului i potasiului seconstat o cretere a activitii mineralocorticoide a glandelor suprarenale, ceea ce indic o aciune a

produsului imunomodulator Orostimasupra echilibrului hidroelectrolitic prin stimularea secreieide aldosteron.

Modificrile echilibrului hidroelectrolitic prezentate sunt datorate, foarte probabil, unei inhibiiia secreiei mineralocorticosteroide a suprarenalelor, aa cum reiese din creterea raportului

electroliilor, n urma administrrii extractului uleios de ctin (Hippophae rhamnoides).Din reprezentarea grafic a raportului concentraiilor urinare ale electroliilor se poate

observa o cretere marcant a acestuia, ceea ce indic o scdere a funcionalitii glandelorcorticosuprarenale i a rspunsului mineralocorticoid la animalele tratate cu imunomodulatorulAerodin n condiiile factorilor de mediu aerospaial simulai.

Raportul concentraiilor urinare ale electroliilor la obolanii albi linia Wistar expui aciuniifactorilor simulai de mediu aerospaial i tratai cu suspensie de Phytoimun n tinctur de

Echinacea purpurea este sczut, fapt determinat de o stimulare a funciei mineralocorticoide aglandelor suprarenale n urma tratamentului.

Raportul concentraiilor urinare ale electroliilor prezint o cretere datorat tratamentului cu

produsul natural Imunofort, ceea ce indic un efect al acestuia de reducere a activitiimineralocorticoide a glandelor suprarenale.

Raportul concentraiilor urinare ale electroliilor la obolanii albi linia Wistar expui aciuniifactorilor simulai de mediu aerospaial i tratai cu aeroioni negativi este crescut, fapt determinat deo reducere a funciei mineralocorticoide a glandelor suprarenale.

La obolanii albi Wistar supui complexului de factori simulai de mediu aerospaial, dupcorecia ulterioar a modificrilor patologice prin aplicarea curei experimentale cu unele extracte de


15/21

15

plante, substane bioactive, cu unii factori fizici i de mediu subteran salin cu proprieti curative, ncomparaie cu datele obinute la animalele de laborator din lotul fr aplicarea curei terapeuticeexperimentale (martor cu modificri patologice efect al complexului de factori aerospaialisimulai), au fost constate diferite valori a concentraiei de leucocite n sngele animalelor respective,i anume:

creterea concentraiei de leucocite sangvine dup aplicarea curei cu spirulin iphytoimun suspendat n tinctur deEchinacea Purpurea;

tendin de cretere a concentraiei celulelor sangvine respective dup cura cu imunofort icura de speleoterapie (ST) n Salina Unirea Slnic Prahova.

Concentraia de neutrofile, att relativ (%) ct i absolut (nx109/l), nu s-a modificatsemnificativ, prezentnd doar o tendin de micorare dup cura experimental cu imunofort.

Conform datelor obinute, n comparaie cu lotul Martor supus factorilor simulai de mediuaerospaiali, la animalele din experiment a fost constatat normalizarea / scderea concentraieirelative (%) de neutrofile nesegmentate la animalele din experiment dup aplicarea produsuluiPhitoImun suspendat n tinctur de Echinacea purpurea, ImunoFort, aeroionizrii negative

artificiale de circa 45000 aeroioni/cm3i speleoterapiei n Salina Unirea Slnic Prahova. La fel, afost constatat tendina de normalizare a valorilor neutrofilelor nesegmentate sangvine dup curaexperimental cu produsul Spirulina platensis, imunomodulatorul Orostim, uleiul de ctin iimunomodulatorul Aerodin.

Concentraia absolut (nx1097l) a celulelor sangvine respective a prezentat o tendin sprenormalizare dup aplicarea curei experimentale cu produsee PhitoImun suspendat n tinctur deEchinacea purpurea, ImunoFort i dup aplicarea aeroionizrii negative artificiale de circa 45000/cm3. De remarcat prezena n snge la animalele investigate, preponderent la cele din lotul supusfactorilor simulai de mediu aerospaiali, dar i la animalele din restul loturilor experimentale, aformelor tinere de neutrofile nesegmentate, precum metamielocitele rar i promielocitele,

mielocitele extrem de rar. Nu au fost constatate modificri semnificative n concentraia relativ iabsolut de neutrofile segmentate sangvine la animalele din loturile experimentale, dei a fostobservat o tendin de mrire a valorilor absolute de elemente sangvine respective dup aplicarea

produsului Spirulina platensis, Ulei de ctin i speleoterapie n salina amintit.Datele experimentale indic la obolanii albi Wistar din loturile supuse coreciei modificrilor

patologice, n comparaie cu lotul Martor supus doar factorilor simulai de mediu aerospaiali,normalizarea / scderea concentraiei relative (%) de eozinofile dup aplicarea curei cu produsulSpirulina platensis, imunomodulatorul Orostim, uleiul de ctin, produsul PhitoImunsuspendat n tinctur de Echinacea purpurea, dup aplicarea aeroionizrii negative artificiale decirca 40000/ cm3i dup cura de speleoterapie (ST) n Salina Unirea. La animalele de laborator

supuse preventiv aciunii complexului de factori simulai de mediu aerospaiali, a fost observat itendina de micorare a concentraiei de eozinofile sangvine dup cura experimental cuimunomodulatorul Aerodin.

Datele obinute indic prezena unor modificri n concentraia neutrofilelor i eozinofilelor dinsngele obolanilor albi Wistar supui aciunii complexului de factori simulai de mediu aerospaial,modificri de origine proinflamatorie i la nivelul meutrofilelor tinere (promielocite, mielocite), caren mare msur tind spre normalizare ca efect al unor soluii de corecie a acestora prin utilizarea de

produse vegetale, naturale, de origin microbian, factori fizici i de mediu subteran din salin.


16/21

16

Dintre celulele sangvine imunocompetente un rol deosebit n sistemul imunitar al organismuluianimal i uman l au limfocitele. Scderea concentraiei de aceste celule sangvine reprezint unul dinindicii semnificativi n evaluarea posibilelor disfuncii imunitare.

La animalele din experiment, n comparaie cu lotul Martor supus factorilor simulai de mediuaerospaial fr aplicarea ulterioar a diferitor posibili corectori ai modificrilor patologice, a fost

constatat normalizarea / creterea concentraiei relative (%) i absolute (nx109

7l) de limfocite dupaplicarea curei experimentale cu Spirulina platensis, suspensiei de PhitoImun n tinctur deEchinacea purpurea, ImunoFort, aeroionizrii negative artificiale (AEA) de circa 45000/ cm3 ispeleoterapiei (ST) n Salina Unirea. S-a constatat i tendina de normalizare a valorilorlimfocitare sangvine dup cura experimental cu imunomodulatoarele Orostim i Aerodin,

precum i dup aplicarea uleiului de ctin (Hipophae rhamnoides). Creterea numrului delimfocite i a funciei de fagocitoz a neutrofilelor s-a observat i n cazul tratamentului cu extract de

Echinacea angustifolia administrat la cai (ONeill i colab., 2002).Concentraia relativ i absolut de monocite n snge la obolanii albi Wistar din experiment

nu a variat semnificativ valorile deviaiei standard fiind mari.Astfel, a fost remarcat normalizarea / scderea indicelui hematologic neutrofile nesegmentate

% / neutrofile segmentate % la animalele de laborator supuse complexului de factori simulai demediu aerospaial i coreciei modificrilor patologice sub aciunea curei experimentale cuaeroionizare negativ artificial de circa 40000/ cm i curei de speleoterapie n salina desemnat

pentru experiment. De asemenea, a fost observat i tendina de normalizare a valorii indiceluirespectiv dup cura experimental cu Spirulina platensis, uleiul de Hipophae rhamnoides,imunomodulatorul Aerodin, produsul de plante PhitoImun suspendat n tincturde de Echinacea

purpurea i produsul natural ImunoFort.Valoarea indicelui hematologic neutrofile % / limfocite % s-a normalizat / a sczut dup cura

experimental cu produsul natural ImunoFort, aeroionizarea negativ artificial de circa 40000/cm i dup cura de speleoterapie n salin, iar tendina de normalizare a avut loc sub influena curei

experimentale cu produsele naturale vegetale Spirulina platensis i suspensiei de PhitoImun ntinctur de deEchinacea purpurea.

Un rol important n rezistena organismului animal i uman contra infeciilor l are procesul defagocitoz a neutrofilelor.

Conform datelor obinute este important de remarcat faptul, c dup cura experimental att cuproduse vegetale, naturale bioactive, imunomodulatori de origine microbian ct i a factorilor fiziciprecum aeroionizarea negativ artificial (40000 particule/cm) sau de mediu subteran SalinaUnirea cu proprieti terapeutice, a avut loc stimularea / creterea concentraiei relative i absolutede celule sangvine PMN cu proprieti de fagocitare a microorganismelor la animalele de laboratorsupuse anterior aciunii unor factori simulai de mediu aerospaiali i cu diferite modificri

patologice, inclusiv ale procesului de fagocitoz.Din datele obinute s-a constatat c, la fel ca n testul de evideniere a numrului de fagocite,

dup cura experimental cu produsele vegetale utilizate n experiment, cele naturale bioactive,imunomodulatori de origin microbian, aeroionizarea negativ artificial (40000particule/cm) icura n mediul subteran din Salina Unirea cu proprieti terapeutice, a crescut considerabil numrulde celule microbiene (celule de Staphyloccocus aureus) fagocitate de celulele fagocitare PMNsangvine (fig. 87) i Killing Effect- efectul de dezintegrare a acestor microoorganisme intracelular nfagocitele animalelor de laborator supuse anterior aciunii unor factori simulai de mediu aerospaial


17/21

17

i cu diferite modificri patologice, inclusiv ale procesului de fagocitoz (fig. 88). Din datele deliteratur se constat un efect pozitiv asupra procesului de fagocitoz celular a celulelor macrofageasupra hematiilor de oaie i a celulelor viabile de Escherichia coliprin activare direct, in vitro, cuextract apos de Spirulina platensis (Qureshi i Ali, 1996). Creterea funciei de fagocitoz aneutrofilelor s-a observat i n cazul tratamentului cu extract deEchinacea angustifoliaadministrat la

cai (ONeill i colab., 2002).n procesul de fagocitoz, un rol marcant l are activarea funciei bactericide oxigen dependentea granulocitelor PMN (metabolismului oxidativ al fagocitelor) prin testul NBT (Nitrozo-Blau-Tetrazoliu Test) la baza cruia este procesul de reducere a substanei Blau -Tetrazoliu n celule pnla formazanul insolubil sub aciunea NADF-oxidazei. n figurile 89 i 90 sunt prezentate rezultateleexperimentale privind influena extractelor naturale de Spirulina platensis, Hippophae rhamnoides,

Echinacea purpurea i Uncaria tomentosa (Imunofort), a compuilor polibacterieni Orostim iAerodin, aeroionizrii negative (40000 aeroioni/cm3) i a mediului salin din mina Unirea SlnicPrahova asupra modificrilor concentraiei relative (%) i absolute (nx109/l) de de celule formazan

pozitive PMN din snge induse de ctre complexul de factori aerospaiali simulai.Astfel, concentraia relativ de celule formazan pozitive PMN a sczut considerabil la

animalele din experiment dup aplicarea curei cu produsul natural ImunoFort, curei cuaeroionizare negativ artificial (circa 40000 ioni/ cm) i de speleoterapie n salin. A mai fostobservat i tendina de normalizare a concentraiei de celule sangvine respective dup cura cuextractul de Spirulina platensis i Echinacea purpurea, precum i n cazul imunomodulatoareleOrostim i Aerodin, Numrul absolut de celule formazan pozitive PMN s-a micorat dup curade aeroionizare negativ artificial (circa 40000 particule/ cm), iar tendina de normalizare a

parametrilor respectivi dup cura experimental cu produsul natural Imunofort i speleoterapia nsalin.

Dup cum s-a menionat, modificrile n cadrul sistemului imunitar, sunt clasificate ca foarteimportante n studierea mecanismului de adaptare la condiiile specifice i noi de spaiu i n

elaborarea metodologiei de adaptare a organismului viu la aceste condiii de mediu specific.Rezultatele obinute confirm faptul normalizrii / creterii concentraiei relative i absolute de

Limfocite T la animalele de laborator din loturile experimentale dup cura cu produsu l vegetalPhitoImun n suspensie de Echinacea purpurea, produsul natural ImunoFort, aeroionizareanegativ artificial (circa 40000 aeroioni/ cm) i speleoterapie n salina desemnat, precum i faptulcreterii concentraiei absolute de Limfocite T dup aplicarea tratamentului cu Spirulina platensis.Prezint interes de remarcat i faptul tendinei de cretere a numrului relativ de celule sangvinelimfocitare T dup cura experimental cu Spirulina platensis, precum i a valorii absolute deLimfocite T dup aplicarea uleiului de Hipophae rhamnoides i imunomodulatorului Aerodin.Efectele pozitive ale extractului de Echinacea purpurea fiind posibile datorit proprietilor

radioprotective a compuilor polifenolici care se cunoate c au capacitatea de a reduce aberaiilecromozomiale induse de ctre radiaii la nivelul limfocitelor i creterea numrului de monocite dinsngele uman (Joksi i colab, 2009). De asemenea, Spirulina platensisn doze de 5000-10000 ppmcrete numrul de celule limfocitare formatoare de rozete la puii de gin (Qureshi i colab., 1996) icrete concentraia relativ de limfocite din sngele periferic la oarecii linia BALB/c (Zhai i colab.,2007).

Astfel, concentraia relativ i absolut de limfocite T-helper (LT-h), micorat considerabil carezultat al efectului factorilor simulai de mediu aerospaial, s-a mrit semnificativ dup aplicarea


18/21

18

curei experimentale de speleoterapie n Salina Unirea. S-a observat i tendina de normalizare /cretere relativ a numrului de celule sangvine imunocompetente respective dup curaexperimental a animalelor de laborator cu produsul vegetal PhitoImun n suspensie de Echinacea

purpurea, produsul natural ImunoFort i aeroionizarea negativ artificial.Valoarea absolut a LT-h a mai fost constatat normalizat / mrit dup cura experimental a

animalelor de laborator din loturile supuse coreciei modificrilor patologice cu produsul vegetal deSpirulina platensis, produsele PhitoImun n suspensie de Echinacea purpurea i ImunoFort,precum i sub aciunea curei experimentale de aeroionizare negativ artificial, iar tendina denormalizare dup aplicarea curei experimentale cu produsul vegetal Ulei de ctin (Hipophaerhamnoides) i imunomodulatorul de origine microbian Aerodin. Creterea concentraiei delimfocite T-helper a fost constatat i n cazul tratamentului cu extract de Echinacea purpurea laoarecii normali sau iradiai cu doze de 2Gy de radiaii ionizante (Mishima i colab., 2004).

De remarcat c concentraia de Limfocite T-supresori (LT-s) / LT-LT-h), dup curaexperimental cu unii din factorii terapeutici utilizai, la animalele de laborator supuse preventivaciunii complexului de factori simulai de mediu aerospaial, a avut o evoluie pozitiv i tendinspre normalizare a valorilor de celule respective imunocompetente.

A avut loc o cretere semnificativ a numrului relativ i absolut de celule sangvine Tlimfocitare- supresori (LT-LT-h) / LT-s la animalele de laborator din experiment supuse curei cu

produsul natural ImunoFort, dup cura experimental de aeroionizare negativ artificial (circa40000 particule/ cm) i speleoterapia n salina desemnat pentru experiment, precum i tendina denormalizare a numrului relativ de celulesangvine respective dup aplicarea curei experimentale cususpensiei de PhitoImun n tinctur deEchinacea purpurea.

S-a mai constatat i creterea semnificativ a valorilor absolute ale concentraiei de celule LT-sn snge la animalele de laborator supuse curei experimentale cu produsele vegetale Spirulina

platensis i suspensiei de PhitoImun n tinctur de Echinacea purpurea. Creterea concentraieide limfocite T-supresor a fost constatat i n cazul tratamentului cu extract deEchinacea purpurea

la oarecii normali dar iradierea cu doze de 2Gy de radiaii ionizante a produs o scdere alimfocitelor T-supresor (Mishima i colab., 2004).

Valoarea indicelui imunologic LT29/ (LT - LT29) sau LT-h/LT-s la animalele de laborator dinexperiment s-a normalizat / a sczut dup cura speleoterapeutic n salina respectiv i a prezentattendin spre normalizare dup aplicarea curei experimentale cu suspensia produsului vegetalPhitoImun n tinctur de Echinacea purpurea, produsului natural ImunoFort i dupaeroionizarea negativ artificial (circa 40000 ioni/ cm).

De remarcat, c la animalele de laborator investigate, supuse anterior aciunii complexului defactori simulai de mediu aerospaial, dup cura experimental cu extracte de plante i substane

bioactive,precum i cu unii factori fizici i de mediu subteran cu proprieti curative, numrul relativ

de celule limfocitare rezistente la temperatura de 45C (Limfocite T-citotoxice) a avut tendin decretere doar dup aplicarea curei de aeroionizare negativ artificial.

n ceea ce privete concentraia absolut a celulelor limfocitare respective, s-a constatat ocretere substanial dup cura experimental cu produsul natural ImunoFort, de aeroionizarenegativ artificial i speleoterapie n salin, iar tendina de cretere dup aplicarea produselorvegetale Spirulina platensis, ulei de ctin (Hipophae rhamnoides) i suspensia produsului vegetalPhitoImun n tinctur deEchinacea purpurea.


19/21

19

Unul din testele de evaluare a statusului sistemului limfocitar imunitar este Testul detransformare a limfocitelor n blati (TTLB) la activarea cu fitohemaglutinin sau ali mitogeni.Procesul de blastogenez a limfocitelor reprezint proprietatea funcional a limfocitelor T idetermin capacitatea de proliferare a acestora.

Conform datelor obinute s-a constatat, c produsele vegetale Spirulina platensisi suspensia

de PhitoImun n tinctur de Echinacea purpurea, produsul natural ImunoFort, aeroionizareanegativ artificial i speleoterapie n Salina Unirea au un efect semnificativ i activeazblastogeneza limfocitar, mrind concentraia relativ i absolut de celule limfocitare cu proprietiblasttransformatoare. Aceste observaii sunt n corelaie cu capacitatea extractului de Spirulinaplatensis n doze de 5000-10000 ppm de a crete rspunsul limfoproliferativ mediat de ctrefitohemaglutinin la puii de gin (Qureshi i colab., 1996).

Cura experimental cu ulei de Hipophae rhamnoides i imunomodulatorul Aerodin la felduce la creterea concentraiei de limfocite blasttransformatoare n sngele animalelor de laboratordin loturile experimentale, dar ntr-o msur mai mic, reprezentnd doar tendina de activare a

blastogenezei limfocitelor sangvine.Rezultatele obinute indic faptul, c produsul vegetal Spirulina platensis, aeroionizarea

negativ artificial de circa 40000 aeroioni/cm, precum i speleoterapia specific n mediul subterandin Salina Unirea Slnic Prahova au posedat efecte semnificative de corecie a modificrilor

patologice imunologice. Printre altele, de menionat i efectele izolate, dar semnificative, aleprodusului natural ImunoFort, celui vegetal PhitoImun i imunomodulatorului Orostim.

De remarcat c, n majoritatea loturilor de animale din experiment, dup utilizarea diferitorproduse de plante, imunomodulatoare, a unor factori fizici i de mediu subteran salin cu proprieticurative pentru corecia modificrilor patologice aprute ca rezultat al efectului factorilor simulai demediu aerospaial, valorile concentraiei de diferite elemente sangvine, a procesului de fagocitoz isistemului imunitar limfocitar, dei n mare parte sau normalizat sub aciunea curei experimentale cuunii din factorii terapeutici respectivi (P0,05


20/21

20

i funciei mineralocorticoide, dar i izolat a echilibrului sodiului, eliminrii renale a

potasiului i a echilibrului hidric. Dei n mare parte valorile testelor hematologice,

imunologice i ale metabolismului hidroelectrolitic s-au normalizat sub aciunea curei

experimentale i soluiilor aplicate, n special speleoterapiei experimentale, curei cu Spirulina

platensis, aeroionizare negativ 40000/cm, ImunoFort, Orostim,Echinacea purpurea, acestevalori au fost asemntoare sau apropiate celor ale lotului martor de referin mai rar, ceea ce

se datoreaz efectului prelungit negativ al unor factori simulai de mediu aerospaial, precum

radiaia gama i microgravitaia simulat.

3.

Modelul propus pentru simularea zborului spaial, constnd n aciunea simultan a

hipergravitaiei i microgravitaiei mpreun cu ali factori de mediu aerospaiali (radiaii,

hipoxie hipobar, temperatur i risc microbiologic) produce efecte biologice asemntoare

zborului real i este un model ce poate fi utilizat pentru testarea n laborator a metodelor de

prevenie i de corecie ale modificrilor fiziologice aprute n timpul misiunilor spaiale de

scurt durat, cu posibilitatea de extindere la misiunile spaiale de lung durat.

V.

Bibliografie

1.

Fuchs BB, Medvedev AE. Countermeasures for ameliorating in-flight immune dysfunction. J

Leukoc Biol 1993;54:245;2.

Graebe A, Schuck EL, Lensing P, Putcha L, Derendorf H.Physiological, pharmacokinetic, and

pharmacodynamic changes in space. J Clin Pharmacol. 2004 Aug;44(8):837-53.

3.

Joksi G, Petrovi S, Joksi I, Leskovac A. Biological effects of Echinacea purpurea on human

blood cells. Arh Hig Rada Toksikol. 2009 Jun;60(2):165-72.

4.

Jondal M, Klein E, Yefenof E. Surface markers on human B and T lymphocytes. VII. Rosette

formation between peripheral T lymphocytes and lymphoblastoid B-cell lines. Scand J

Immunol. 1975; 4(3):259-66.

5.

Lesnyak A, Sonnenfeld G, Avery L, Konstantinova I, Rykova M, Meshkov D, Orlova T.Effectof SLS-2 spaceflight on immunologic parameters of rats. J Appl Physiol. 1996 Jul;81(1):178-

82.

6.

Mishima S, Saito K, Maruyama H, Inoue M, Yamashita T, Ishida T, Gu Y. Antioxidant and

immuno-enhancing effects of Echinacea purpurea. Biol Pharm Bull. 2004 Jul;27(7):1004-9.

7.

Nastoiu I. Bazele metabolice ale medicinii aerospaiale, Ed. Medical, Bucureti, 1983, 303 p.


21/21

8.

O'Neill W, McKee S, Clarke AF. Immunological and haematinic consequences of feeding a

standardised Echinacea (Echinacea angustifolia) extract to healthy horses. Equine Vet J. 2002

May;34(3):222-7.

9.

Qureshi MA, Ali RA. Spirulina platensis exposure enhances macrophage phagocytic function

in cats. Immunopharmacol Immunotoxicol. 1996 Aug;18(3):457-63.10.

Qureshi MA, Garlich JD, Kidd MT. Dietary Spirulina platensis enhances humoral and cell-

mediated immune functions in chickens. Immunopharmacol Immunotoxicol. 1996

Aug;18(3):465-76.

11.

Uluitu M., Chis R., Iftinca M. (1999) Influence of acceleration over the hydroelectrolytic

homeostasis in audiogenic seizure-prone rats compared to normoexcitable rats. Rom J Physiol.

Jan-Jun; 36(1-2):11-27.

12.

Zhai Z, Liu Y, Wu L, Senchina DS, Wurtele ES, Murphy PA, Kohut ML, Cunnick JE.

Enhancement of innate and adaptive immune functions by multiple Echinacea species. J Med

Food. 2007 Sep;10(3):423-34.

rezumat teza hoteteu mihail.pdf

Documents