propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

28
Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari ramona suharoschi USAMV Cluj 2010

Upload: clea

Post on 15-Feb-2016

55 views

Category:

Documents


3 download

DESCRIPTION

Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari. ramona suharoschi USAMV Cluj 2010. Principii generale Tipuri de studii de toxicitate Determinarea nivelelor de toleranta. Principii generale. Animalele de laborator - modele de evaluare a toxicitatii diferitelor substante - PowerPoint PPT Presentation

TRANSCRIPT

Page 1: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

ramona suharoschiUSAMV Cluj

2010

Page 2: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Principii generale Tipuri de studii de toxicitate Determinarea nivelelor de toleranta

Page 3: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Principii generale Animalele de laborator - modele de evaluare a

toxicitatii diferitelor substante Diferenta de specie cantitatea de aditiv consumata efect cumulativ Un aditiv nu poate fi folosit pt a schimba

caracteristicile alimetelor (i.g. sulfiti in carne – US Department of Agriculture reglementeaza carnea, FDA interzice)

Page 4: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

TIPURI DE STUDII ANIMALE – claslificarea testelor de toxicologice Studii de toxicitate acuta pe cale orala

O singura expunere, sau doze multiple pe 24h Determinarea efectelor adverse in expunerile

acute (pe termen scurt) Animale folosite frecvent: rozatoare (cobai sau

soareci)

Page 5: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

TIPURI DE STUDII ANIMALE – claslificarea testelor de toxicologice Studii de alimentatie pe termen scurt (feeding

study) Durata < 1 luna, frecvent 28 zile Determinarea dozelor testate in studiile pe

termen lung Determinarea organelor tinta ce urmeza a fi

urmarite in testarile chimice

Page 6: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

TIPURI DE STUDII ANIMALE – claslificarea testelor de toxicologice Studii de toxicitate subcronica pe cale orala

Durata 90 zile – 12 luni Cel putin 3 doze

20 cobai/ grup de studiu/doza – din fiecare sex 4 ciini/ grup de studiu/doza – din fiecare sex

informatii legate de efectul toxic asupra organelor tinta din expunerea la doze zilnice pe o anumita perioada

Page 7: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

TIPURI DE STUDII ANIMALE – claslificarea testelor de toxicologice Studii de toxicitate cronica pe cale orala

Durata > 1 an Determinarea celui mai cronic efect si a

legaurii doza-sraspuns Evaluarea potentialului carcinogenetic pt

diferiti aditivi alimentari

Page 8: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

TIPURI DE STUDII ANIMALE – claslificarea testelor de toxicologice Toxicitatea evolutiva si studii de teratogenie (pe cale orala)

Rozatoare Generatii multiple, pt determinarea efectelor asupra

urmasilor si reproducere Efecte asupra sistemului reproducator (functiei gonadelor),

ciclului estrogenilor, comportaentul imperecherii, conceptie si evaluarea perioadei de graviditate

Evaluarea incidentei malformatiilor congenitale (defete la nastere)

Combinate cu studii cronice de alimentatie si bioevaluarea carcinogenezei

Page 9: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

TIPURI DE STUDII ANIMALE – claslificarea testelor de toxicologice Bioevaluarea carcinogenezei

Doua specii animale Observarea anmalelor de experienta pe

durata de viata pentru aparitia cancerelor Cai de administrare: orala, cutanata,

inhalatorie

Page 10: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Determinarea nivelelor de toleranta Nivel de toleranta = nivelul maxim de aditiv admis in

alimente NOEL (No observed effec level) = nivelul la care nu

sunt observate nici un efect advers la animalele studiate in studii de alimentatie NOAEL (no observed adverse effect level) Determinat in studii subcronice = doza cea mai mare in mg/kg bw la care nu se

observa efecte adverse

Page 11: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Terminologie NEL (no-effect level) NOEL (no-observed-effect-level) NOAEL (no-observed-adverse-effect-level) ADI (adequate daily intake) ADI = NOEL / factor de siguranta (10,1000) TL (Tolerance Level) = (ADI x gc)/ FDI FDI = Food Daily Intake

Page 12: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Determinarea nivelelor de toleranta RfD (Reference dose) = doza maxima zilnica (mg//kg

bw) considerata acceptabila pt consumul uman in timpul vietii (durata medie de viata = 70 ani)

Factor de siguranta aplicat NOEL pt determinarea RfD

Factorul de siguranta variaza intre 100 – 1000 depinzind de specie si susceptibiliatatea individuala la toxicitate

Substante cu potential toxic sever se aplica un factor de siguranta de 1000

Page 13: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Determinarea nivelelor de toleranta RfD = NOEL/Factor de siguranta MPI = maximal permissible intake per day (nivel maxim acceptat a fi

consumat pe zi) MPI (mg/zi) = RfD (mg/kg) x 60 kg (greutate adult)

MPL = maximal permissible level in food (nivel maxim acceptat in alimente) = tolerance level (nivel de toleranta) MPL = MPI/factor alimentar Factorul alimentar = estimarea cantitatii almentului respectiv in dieta

RfD > EDI (Estimated Daily Intake) Doza estimata zilnic EDI = nivel probabil al consumului de aditiv (gr/persoana/zi)

Page 14: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Exemplu: albastru briliant Albastru briliant: aditiv sintetic testat pe doua specii de animale NOAEL = 1000 mg/kg bw RfD = NOEL/factor siguranta = 1000/100 = 10 mg/kg bw Datele anchetei consumului alimentar: 5,4 mg/kg bw MPI/zi = RfD x 60 kg (greutate adult) = 10 mg/kg x 60 kg = 600

mg In cazul adaugarii colorantului in bomboane se estimeaza ca se

consuma 1 gram (gm) / zi, MPL/ toleranta este de 600 mg colorant/gram bomboana

Page 15: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Teste de toxicitate pt aditivi alimentari Aditivi alimentari indirecti:

Expunere (<0,05ppm): A Expunere nesemnificativa (>0,05ppm): A***, C, I*, K**, E,

J*

Expunere semnificativa (>~1ppm): A***, D***, F, G, H, I, J*, K**, L**

------------------------*daca este indicat de data si informatii existente** sugerat***daca necesita studii in continuare

Page 16: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Teste de toxicitate pt aditivi alimentari Aditivi alimentari directi (limitele admise ):

Limite nivel I: B, K Limite nivel II: A***, D, E, I, J*, K Limite nivel III: A***, D***, F, G, H, I, J*, K, L**

------------------------*daca este indicat de data si informatii existente** sugerat***daca necesita studii in continuare

Daca se suspecteaza carcinogeneza studii pt carcinogeneza se efectueaza indiferent de circumstante.

Page 17: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Teste de toxicitate pt aditivi alimentari

Studii de toxicitate:A. Studii acute e cale orala--roaztoareB. Studii de alimentatie pe termen scurt (feeding study) cel putin 28 zile -- rozatoareC. Studii de alimentatie subcronice (90 zile) -- rozatoare cu expunere intra-uterinaD. Studii de alimentatie subcronic (90 zile) -- rozatoareE. Studii de alimentatie subcronic (90 zile) -- nerozatoareF. Studii de alimentatie pe durata vietii (ca 2 ani) -- rozatoare cu expunere intrauterina pt

carcinogeneza si toxicitate cronicaG. Studii de alimentatie pe durata vietii (ca2 ani) – roaztoare pt carcinogenezaH. Studii de almentatie pe termen scurt (cel putin 1 an) – ne-rozatoareI. Studii de alimentatie multigeneratii pt reproducere (min. 2 generatii) cu faza de teratologie

– rozatoareJ. Studii de teratologieK. Studii pe termen scurt pt potentialul carcinogeneticL. Studii de metabolism--------------------------------------------------------Bibliografie: ‘Redbook’

Page 18: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Limite ale expunerii si structurii pt aditivii directi

LIMITE luate in considerareRIDICAT

SCAZUT

STRUCTURA CC.L.* III

0.25ppm***--------------------

C.L. II

0.0125ppm----------------------

C.L. I

STRUCTURA BC.L. III

0.5ppm--------------------

C.L. II0.025ppm

----------------------C.L. I

STRUCTURA AC.L. III1.0ppm

---------------------C.L. II

0.05ppm----------------------

C.L. I

*C.L. = CONCERN LEVEL**ppm = parti per million din alimentatie

Page 19: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Metode de Testare

I. SpectrofotometrieII. Chromatografie - tehnici de separeIII. Electroforeza capilara IV. Mass SpectrometrieV. Teste Imune (Immunoassay)

Page 20: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Metode de Testare

I. Spectrophotometrie

A. UV-visibilB. FluorescentaC. Chemiluminescenta

Page 21: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Metode de Testare

I. SpectrophotometrieA. UV-visibil

1. Descrierea tehnicii/ aparaturii2. Avantaje/dezavantaje: teste colorimetrice – cu specificitate si sensibilitate mare. Folosite pentru cromatografie lichida si tehnic imune 3. inca folosite pt salicilati si testari in medicina legala

Page 22: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Metode de Testare I. SpectrophotometrieB. Fluorescenta

1. Descrierea tehnicii/aparaturii2. Avantaje/dezavantaje: sensibilitate si specificitate mai mare decit UV-vis dar interefrenta mai mare. Folosit a detector pentru LC si tehnici imune.

Page 23: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Metode de Testare I. SpectrophotometrieC. Chemiluminescenta

1. Descrierea tehnicii/ aparaturii2. Avantaje/ dezavantaje: sensibilitate mare. Folosita ca detector al tehnicilor imune.

Page 24: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Metode de TestareII. Cromatografie – tehnici de separare

1. Cromatografie intr-un singur planA. Cromatografie in strat subtire (TLC)B. Cromatografie pe hirtie

2. Gas chromatograpfie (GC)

3. High performance liquid chromatography (HPLC)

Page 25: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Metode de Testare III. Electroforeza capilara

1. Descrierea tehnicii2. Avantaje/dezavantaje

Page 26: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Metode de Testare IV. Mass Spectrometrie

1. Descrierea tehnicii/ aparaturii2. GC-MS, LC-MS

Page 27: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

Metode de Testare V. Teste imune (Immunoassay)

1. Principii generale a reactiilor anticorpi-antigen, antiser policlonal si monoclonal 2. Principii generale/ descrierea tehnicilor imune3. Tipuri de teste

A. Radioimmunoassay (RIA)B. Enzyme-Multiplied Immunoassay Technique (EMIT)

C. Fluorescence Polarization Immunoassay (FPIA)D. Kinetic Interaction of Microparticles in Solution (KIMS)E. Cloned Enzyme Donor Immunoassay (CEDIA)F. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

1. Sandwich assays

Page 28: Propunere – testarea toxicitatii aditivilor alimentari

FISA DE EVALUARE TOXICOLOGICA denumirea substantei analizate formula chimica, structura, masa moleculara utilizare surse de provenienta cai de contaminare a produselor alimentare testarea sigurantei

studii TA studii toxicitate subacuta studii TC si carcinogeneza studii legate de reproducere studii de teratogenitate = NOAEL studii de antigenicitate studii de mutagenitate studii farmacologice generale alte studii de toxicitate-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- absorbtia, distributie, metabolism, eliminare determinarea dozei zilnice admise (ADI); NOAEL estimarea ingestiei zilnice standard de utilizare observatii caracteristici fizico-chimice evaluare, identificare, proprietati specifice, metode analitice de determinare stabilitatea in alimente toxigenicitatea