popa v 2013 - diagnosticul leucozelor aviare si al micoplasmozelor specifice curcilor prin teste pcr

INTALNIREA TRIMESTRIALA A INTALNIREA TRIMESTRIALA A SOCIETATII MEDICILOR VETERINARI IN PATOLOGIA AVIARA SOCIETATII MEDICILOR VETERINARI IN PATOLOGIA AVIARA

SI A ANIMALELOR MICI DIN ROMANIASI A ANIMALELOR MICI DIN ROMANIA

ACADEMIA DE STIINTE AGRICOLE SI SILVICE ‘GHEORGHE IONESCU SISESTI” ACADEMIA DE STIINTE AGRICOLE SI SILVICE ‘GHEORGHE IONESCU SISESTI” AULA MAGNA AULA MAGNA

BucuBucurresti esti 0303 octombrieoctombrie 201 20133

DIAGNOSTICUL DIAGNOSTICUL LEUCOZELOR AVIARE SI AL MICOPLASMOZELOR LEUCOZELOR AVIARE SI AL MICOPLASMOZELOR

SPECIFICE CURCILOR PRIN TESTE PCRSPECIFICE CURCILOR PRIN TESTE PCR

Virgilia PopaVirgilia Popa11, Daniela Botus, Daniela Botus11, Jenica Bucur, Jenica Bucur22, Vlad Mihai Duma, Vlad Mihai Duma33, ,

Marian CulcescuMarian Culcescu11, Niculai Poparlan, Niculai Poparlan11

11SN Institutul Pasteur SA, SN Institutul Pasteur SA, 22SC Farmavet SA, SC Farmavet SA, 33 CMV BrasovCMV Brasov

COMPLEXUL COMPLEXUL LEUCOZELOR AVIARELEUCOZELOR AVIARE

Leucozele aviare - grup de boli infectioase virale, in general Leucozele aviare - grup de boli infectioase virale, in general enzootice, cu evolutie lenta si simptomatologie polimorfaenzootice, cu evolutie lenta si simptomatologie polimorfa

leucoze leucemiceleucoze leucemice - afecteaza elementele figurate ale sangelui - afecteaza elementele figurate ale sangelui

leucoze aleucemice - leucoze aleucemice - induc formatiuni tumorale in diferite organe induc formatiuni tumorale in diferite organe si tesuturi si tesuturi

produc pierderi prin scaderea productiei de oua sau mortalitate si produc pierderi prin scaderea productiei de oua sau mortalitate si imunosupresieimunosupresie

Agenti cauzali – virusuri ARN anvelopate din genul Agenti cauzali – virusuri ARN anvelopate din genul AlpharetrovirusAlpharetrovirus, familia , familia RetroviridaeRetroviridae

RETROVIRUSURIRETROVIRUSURIFamiliaFamilia GenGen SpeciiSpecii GazdaGazda

sRNA-RT virussRNA-RT virus

RetroviridaeRetroviridae

AlpharetrovirusAlpharetrovirus Avian sarcoma leukosis virus Avian sarcoma leukosis virus Rous sarcoma virusRous sarcoma virus

VertebrateVertebrate

BetaretrovirusBetaretrovirus Mouse mammary tumor virus Jaagsiekte Mouse mammary tumor virus Jaagsiekte sheep retrovirussheep retrovirus


DeltaretrovirusDeltaretrovirus Human T-lymphotropic virus (HTLV-1, HTLV-2) Human T-lymphotropic virus (HTLV-1, HTLV-2) Bovine leukemia virusBovine leukemia virus


EpsilonretrovirusEpsilonretrovirus Walleye epidermal hyperplasia virusWalleye epidermal hyperplasia virus VertebrateVertebrate

GammaretrovirusGammaretrovirus Murine leukemia virus. Abelson murine Murine leukemia virus. Abelson murine leukemia virus. Friend virus. Feline leukemia leukemia virus. Friend virus. Feline leukemia virus. Koala retrovirus. Xenotropic murine virus. Koala retrovirus. Xenotropic murine leukemia virus-related virus. leukemia virus-related virus.


LentivirusLentivirus HIV. Simian immunodeficiency virus. Feline HIV. Simian immunodeficiency virus. Feline immunodeficiency virus. Puma lentivirus immunodeficiency virus. Puma lentivirus Equine infectious anemia. Bovine Equine infectious anemia. Bovine immunodeficiency virus. Caprine arthritis immunodeficiency virus. Caprine arthritis encephalitis virus. Visna virusBovine encephalitis virus. Visna virusBovine immunodeficiency virusimmunodeficiency virus


SpumavirusSpumavirus Simian foamy virus. Human foamy virusSimian foamy virus. Human foamy virus VertebrateVertebrate

MetaviridaeMetaviridae MetavirusMetavirus Saccharomyces cerevisiae Ty3 virusSaccharomyces cerevisiae Ty3 virus FungiFungi

ErrantivirusErrantivirus Drosophila melanogaster gypsy virusDrosophila melanogaster gypsy virus NevertebrateNevertebrate

PseudoviridaePseudoviridae PseudovirusPseudovirus Saccharomyces cerevisiae Ty1 virusSaccharomyces cerevisiae Ty1 virus FungiFungi

HemivirusHemivirus Drosophila melanogaster copia virusDrosophila melanogaster copia virus NevertebrateNevertebrate

DsDNA-RT virusDsDNA-RT virus HepadnaviridaeHepadnaviridae Hepatitis B virusHepatitis B virus

CaulimoviridaeCaulimoviridae

RETROVIRUSURIRETROVIRUSURI

- - noua molecula de ADN este incorporata noua molecula de ADN este incorporata in genomul celulei gazda prin actiunea in genomul celulei gazda prin actiunea integrazei, iar ADN-ul retroviral incorporat integrazei, iar ADN-ul retroviral incorporat este denumit este denumit provirusprovirus

- virusuri transformante / non-virusuri transformante / non-transformantetransformante

- transmitere la progenitransmitere la progeni

- genomgenom ARN mono-catenar, organizat similar unui ARN mesager ARN mono-catenar, organizat similar unui ARN mesager (ARNm) (ARNm)

- replicareplicarere in celula gazda prin revers-transcriptie (transcriere inversa) in celula gazda prin revers-transcriptie (transcriere inversa): : ARN → ADN→ ARN → proteineARN → ADN→ ARN → proteine

- transcrierea ARN catre ADN nu beneficiaza de procesul natural de transcrierea ARN catre ADN nu beneficiaza de procesul natural de corectie care se petrece in timpul transcrierii normale de la ADN la ARN corectie care se petrece in timpul transcrierii normale de la ADN la ARN → aparitia mutantelor→ aparitia mutantelor

ALV ALV (avian leukosis viruses)(avian leukosis viruses)

-diferente antigenice la nivelul anvelopei viralediferente antigenice la nivelul anvelopei virale →→ 10 10 subgrupuri: A, B, C, D, E, F, G, H, I si Jsubgrupuri: A, B, C, D, E, F, G, H, I si J

ssubgrupurile A - E ubgrupurile A - E == virusuri asociate leucozei limfoide si virusuri asociate leucozei limfoide si sarcomului aviarsarcomului aviar subgrupurile F - I subgrupurile F - I == virusuri de la alte specii de pasari virusuri de la alte specii de pasari decat cele crescute industrial decat cele crescute industrial subgrupul J subgrupul J == virusuri asociate leucozei mieloide sau virusuri asociate leucozei mieloide sau asa-numita leucoza Jasa-numita leucoza J

19891989 Marea BritanieMarea Britanie,, efective de gaini rase grele efective de gaini rase grele 1997-981997-98 “ “leucoza leucoza J”, J”, pierderi enormepierderi enorme in industria in industria

avicola mondialaavicola mondiala2002 si in efective de pasari 2002 si in efective de pasari ddestinate productiei de estinate productiei de

ouaoua

COMPLEXUL LEUCOZELOR AVIARECOMPLEXUL LEUCOZELOR AVIARECercetari in RomaniaCercetari in Romania

Laboratorul de virusuri tumorale aviare (LVTA):Laboratorul de virusuri tumorale aviare (LVTA): Dr. Ionel Victor Patrascu Dr. Ionel Victor Patrascu Dr. Petru StiubeDr. Petru Stiube Prof. Dr. Toma Coman Prof. Dr. Toma Coman Prof. Dr. Valer TeusdeaProf. Dr. Valer Teusdea Prof. Dr. Sofia Coman Prof. Dr. Sofia Coman Dr. Dinu Mihailescu Dr. Dinu Mihailescu Dr.Elena TuschakDr.Elena Tuschak Dr. Norbert TuschakDr. Norbert Tuschak

Laboratorul de Patologie Laboratorul de Patologie Aviara (LPA): Aviara (LPA):

Dr. Ovidiu SicoeDr. Ovidiu Sicoe Dr. Eleonora TipuritaDr. Eleonora Tipurita

LaboratorulLaboratorul Central Sanitar Central Sanitar Veterinar de Diagnostic (LCSVD)Veterinar de Diagnostic (LCSVD)::

Dr. Eleonora Micu Dr. Eleonora Micu Dr. Andaluza SachelarieDr. Andaluza Sachelarie Dr. Eugenia AvramDr. Eugenia Avram

FMV FMV BucurestiBucuresti:: Prof. Prof. Dr. Dr. Doina DanesDoina Danes

FMV Cluj NapocaFMV Cluj Napoca:: Dr. Emil OnetDr. Emil Onet

considerata pana de curand strict specifica curcilor considerata pana de curand strict specifica curcilor in ultimii ani a fost izolata si de la pui de gaina si pasari rapitoare (vultur, soim, bufnita)in ultimii ani a fost izolata si de la pui de gaina si pasari rapitoare (vultur, soim, bufnita) epifita a cailor respiratorii si urogenitaleepifita a cailor respiratorii si urogenitale transmiterea verticala prin ou se datoreaza contaminarii pe cale venerica a oviductului prin transmiterea verticala prin ou se datoreaza contaminarii pe cale venerica a oviductului prin

intermediul materialului seminal al masculilorintermediul materialului seminal al masculilor transmiterea orizontala este realizata direct si indirect, pe cale aerogena sau in urma transmiterea orizontala este realizata direct si indirect, pe cale aerogena sau in urma

vaccinarilor, sexarilor, inseminarilor artificiale vaccinarilor, sexarilor, inseminarilor artificiale in crescatoriile traditionale sau de agrement boala este cunoscuta ca „sindromul gatului in crescatoriile traditionale sau de agrement boala este cunoscuta ca „sindromul gatului

rasucit” (torticolis, „crookneck” sau „wryneck”). rasucit” (torticolis, „crookneck” sau „wryneck”).

produce produce imunosupresieimunosupresie la curcile tinere, cu varsta de pana in 2 luni, la curcile tinere, cu varsta de pana in 2 luni,

• aerosaculita infectioasa a curcilor aerosaculita infectioasa a curcilor • pneumoniepneumonie• sinuzitesinuzite• slaba imbracare in peneslaba imbracare in pene• probleme locomotorii, prin perturbarea osteogenezei in urma carentei de biotina si probleme locomotorii, prin perturbarea osteogenezei in urma carentei de biotina si

arginina, consumate de M.meleagridis in timpul dezvoltarii embrionare a curcilor, arginina, consumate de M.meleagridis in timpul dezvoltarii embrionare a curcilor, la adultela adulte

• scaderi importante ale productiei de oua scaderi importante ale productiei de oua • pierderi in incubatie prin mortalitate embrionara. pierderi in incubatie prin mortalitate embrionara.

MYCOPLASMA MELEAGRIDISMYCOPLASMA MELEAGRIDIS

considerata specifica curcilorconsiderata specifica curcilor izolata si de la puii de gaina si pasari salbaticeizolata si de la puii de gaina si pasari salbatice se transmite vertical si orizontal, similar altor micoplasmese transmite vertical si orizontal, similar altor micoplasme diversitate antigenica mai bogata, perioade mai lungi de supravietuire in mediu si rezistente la mai multe substante diversitate antigenica mai bogata, perioade mai lungi de supravietuire in mediu si rezistente la mai multe substante

antimicrobiene decat alte micoplasmeantimicrobiene decat alte micoplasme induce induce

imunosupresieimunosupresie mortalitate embrionara in ultima perioada de incubatiemortalitate embrionara in ultima perioada de incubatie scaderi ale procentului de ecloziunescaderi ale procentului de ecloziune sindroame de malabsorbtie sindroame de malabsorbtie aerosaculiteaerosaculite tenosinovite exudative tenosinovite exudative condrodistrofii si deformari ale vertebrelor si membrelorcondrodistrofii si deformari ale vertebrelor si membrelor

MYCOPLASMA IOWAEMYCOPLASMA IOWAE

TESTE PCR ALVTESTE PCR ALVABCDE, A, ABCDE, A, JJ

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AF082080

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AF082080


http://biotools.umassmed.edu/bioapps/primer3_www.cgi

http://biotools.umassmed.edu/bioapps/primer3_www.cgi


http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi

http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi

Complexul virusurilor leucozelor aviare. Complexul virusurilor leucozelor aviare. rPCR Sybr Green pentru virusul ALV-J. rPCR Sybr Green pentru virusul ALV-J. Curba de disociere. Probele de splina si Curba de disociere. Probele de splina si folicul plumifer sunt pozitive (Tm 79.10, folicul plumifer sunt pozitive (Tm 79.10, 79.60, 79.60)79.60, 79.60)

1 2 3 4 5 6

166bpComplexul virusurilor leucozelor aviare. Gel-electroforeza de Complexul virusurilor leucozelor aviare. Gel-electroforeza de confirmare post rPCR ALV-J. Linia 1: martor negativ (NTC) – NFW confirmare post rPCR ALV-J. Linia 1: martor negativ (NTC) – NFW (Promega); linia 2: martor specificitate (SNC), – NDV-cDNA (Promega); linia 2: martor specificitate (SNC), – NDV-cDNA (negativ ALV-J); linia 3: proba 6532/2013 -splina (pozitiv –ALV-J, (negativ ALV-J); linia 3: proba 6532/2013 -splina (pozitiv –ALV-J, amplicon 166bp); linia 4: proba 6532/2013 -folicul plumifer amplicon 166bp); linia 4: proba 6532/2013 -folicul plumifer (pozitiv – ALV-J, amplicon 166bp); linia 5: martor pozitiv - ATCC-(pozitiv – ALV-J, amplicon 166bp); linia 5: martor pozitiv - ATCC-VR335-cDNA (pozitiv –ALV-J, amplicon 166bp); linia 6: standard VR335-cDNA (pozitiv –ALV-J, amplicon 166bp); linia 6: standard ADN – PCR Marker (Sigma)ADN – PCR Marker (Sigma)

TESTE PCR ALVTESTE PCR ALVABCDE, A, JABCDE, A, J

Extracţie ADNExtracţie ADN (probe din teren, produse comerciale non-ALV): QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen). (probe din teren, produse comerciale non-ALV): QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen). Extractie ARNExtractie ARN (tulpini virale de referinta ATCC, produse biologice comerciale non-ALV): (tulpini virale de referinta ATCC, produse biologice comerciale non-ALV):

QIAamp Viral RNA Mini Kit (Qiagen). QIAamp Viral RNA Mini Kit (Qiagen). RT-PCRRT-PCR: in cazul tulpinilor de referinta ATCC si produsele biologice non-ALV, cu amorsa : in cazul tulpinilor de referinta ATCC si produsele biologice non-ALV, cu amorsa

pd(N)6 pd(N)6 -- illustra Ready to Go RT-PCR Beads (GE Healthcare). illustra Ready to Go RT-PCR Beads (GE Healthcare). PCRPCR ALV-ABCDE ALV-ABCDE si A si A pentru gena envpentru gena env (gp85) (gp85) : amorse Mohammadi : amorse Mohammadi et al.et al. 2008; 2008; PCRPCR ALV-JALV-J::

amorse Popa V (amorse Popa V (date nepublicatedate nepublicate));; amestec de amplificare 2x Brilliant II Sybr Green qPCR amestec de amplificare 2x Brilliant II Sybr Green qPCR Master Mix, Agilent; amplificator spectrofotometric Mx3005P, Stratagene. Master Mix, Agilent; amplificator spectrofotometric Mx3005P, Stratagene.

Martor pozitivMartor pozitiv: : Avian retrovirusAvian retrovirus A, B, C (ATCC-VR-335, ATCC-VR-658, ATCC-VR-772). A, B, C (ATCC-VR-335, ATCC-VR-658, ATCC-VR-772). Martor Martor negativnegativ: apa ultrapura PCR sterila (Promega). : apa ultrapura PCR sterila (Promega). Martori specificitate amorseMartori specificitate amorse: ILT: ILT, , IBV si NDV IBV si NDV (produs(produsee comercial comercialee).).

Program de amplificare Program de amplificare -- ABCDE si A: 94oC, 5min. - 1x; 94oC, 30sec.+60oC,1mim. ABCDE si A: 94oC, 5min. - 1x; 94oC, 30sec.+60oC,1mim.+68oC,2mim. - 40x; 68oC, 10mim.+25oC,1mim., 1x+68oC,2mim. - 40x; 68oC, 10mim.+25oC,1mim., 1x; ; curba de disociere curba de disociere -- MxPro v01/2007 (95oC, MxPro v01/2007 (95oC, 1 min, 55oC, 30 sec. si rampa la 95oC, cu date colectate in toate punctele acesteia). Program 1 min, 55oC, 30 sec. si rampa la 95oC, cu date colectate in toate punctele acesteia). Program de amplificare de amplificare –– J J: : 94oC,10min.- 1x; 94oC, 30sec.+52oC,1min.+72oC,2mim., 40x; 72oC,10mim.94oC,10min.- 1x; 94oC, 30sec.+52oC,1min.+72oC,2mim., 40x; 72oC,10mim.+25oC-1mim., 1x, urmat de gel-elctroforeza si curba de disociere de confirmare a reactiilor si +25oC-1mim., 1x, urmat de gel-elctroforeza si curba de disociere de confirmare a reactiilor si implicit, a ampliconilor obtinuti. implicit, a ampliconilor obtinuti.

1 2 3 4 5 6 7

424bp

216bp189bp

427bp

TESTE PCR TESTE PCR MYCOPLASMA MELEAGRIDIS / M.IOWAEMYCOPLASMA MELEAGRIDIS / M.IOWAE

Extracţie ADN : lizat termic, din culturi de 1 ora pentru probele din teren si tulpinile de referinta (Ramirez Extracţie ADN : lizat termic, din culturi de 1 ora pentru probele din teren si tulpinile de referinta (Ramirez et alet al. . 20062006; ;

EEtapa de preimbogatire, 1h, la 37oCtapa de preimbogatire, 1h, la 37oC ((Mycoplasma Synoviae Medium Base (Mycoplasma Synoviae Medium Base (HimediaHimedia), suplimentat cu 10% ser ), suplimentat cu 10% ser de porc inactivat la 56de porc inactivat la 56ooC, 100000 UI% penicilina G si 0.025% acetat de taliu, filtrat succesiv prin filtru Millipore C, 100000 UI% penicilina G si 0.025% acetat de taliu, filtrat succesiv prin filtru Millipore de 0.22 um si 0.1 umde 0.22 um si 0.1 um)). .

Amorse Amorse -- secventa 16s ARNr: Boyle secventa 16s ARNr: Boyle et alet al. 1995 (amplicon . 1995 (amplicon M. meleagridisM. meleagridis 424 bp; amplicon 424 bp; amplicon M. iowaeM. iowae 427 bp) 427 bp); ; secventa P34 – 75 a secventa P34 – 75 a M. meleagridisM. meleagridis, Popa V (, Popa V (date nepublicatdate nepublicate;e; amplicon 189 bp) amplicon 189 bp) ; ; spi1 a spi1 a M. iowaeM. iowae, Popa V (, Popa V (date date nepublicate; nepublicate; amplicon 216 bp). amplicon 216 bp).

Amestec de amplificare: illustra PuReTaqTM Ready-To-Go PCR Beads (Amestec de amplificare: illustra PuReTaqTM Ready-To-Go PCR Beads (GE HealthcareGE Healthcare), suplimentat cu 0.5mM ), suplimentat cu 0.5mM MgCl2. MgCl2.

Amplificator iCyler (Amplificator iCyler (BioradBiorad). ). Program de amplficare Program de amplficare : : 95oC, 5 min – 1x; 95oC, 45 sec + 60oC, 45 sec + 72oC, 15 min – 35 x; 72oC, 10 min – 95oC, 5 min – 1x; 95oC, 45 sec + 60oC, 45 sec + 72oC, 15 min – 35 x; 72oC, 10 min –

1x; 4oC, 10 min – 1x, utilizat pentru testari pe amestecuri din tulpinile martor si 1x; 4oC, 10 min – 1x, utilizat pentru testari pe amestecuri din tulpinile martor si pe pe probe din teren cu amestec probe din teren cu amestec de amorsede amorse, format multiplex PCR, format multiplex PCR (amorse pentru 16s rRNA MM + amorse pentru spi1 MI sau amorse pentru 16s (amorse pentru 16s rRNA MM + amorse pentru spi1 MI sau amorse pentru 16s rRNA MI + amorse pentru secventa P34-75 MM). rRNA MI + amorse pentru secventa P34-75 MM).

Martori pozitiviMartori pozitivi: : Mycoplasma meleagridisMycoplasma meleagridis (NCTC (NCTC 1015310153), ), Mycoplasma iowaeMycoplasma iowae (NCTC (NCTC 10185). 10185). Martor negativMartor negativ: apa ultrapura PCR sterila (Promega). : apa ultrapura PCR sterila (Promega). Martor specificitate amorse Martor specificitate amorse M. gallisepticumM. gallisepticum A5969. A5969.

Mycoplasma meleagridisMycoplasma meleagridis NCTC 10153 si NCTC 10153 si M. iowae M. iowae NCTC 10185. Gel-NCTC 10185. Gel-electroforeza post amplificare multiplex PCR – testari variante electroforeza post amplificare multiplex PCR – testari variante tehnice: MM+Mi-spi1 (liniile 1-3) si MI+Mm-P34-75 (liniile 5-7). Liniile 1 tehnice: MM+Mi-spi1 (liniile 1-3) si MI+Mm-P34-75 (liniile 5-7). Liniile 1 si 5: si 5: Mycoplasma meleagridisMycoplasma meleagridis (pozitiv MM-amplicon 424bp, negativ (pozitiv MM-amplicon 424bp, negativ Mi-spi1, pozitiv Mm-P34-75-amplicon 189bp, negativ MI); liniile 2 si 6: Mi-spi1, pozitiv Mm-P34-75-amplicon 189bp, negativ MI); liniile 2 si 6: Mycoplasma iowaeMycoplasma iowae (negativ MM, pozitiv Mi-spi1-amplicon 216bp, (negativ MM, pozitiv Mi-spi1-amplicon 216bp, negativ Mm-P34-75, pozitiv MI-amplicon 427bp); liniile 3 si 7: mix negativ Mm-P34-75, pozitiv MI-amplicon 427bp); liniile 3 si 7: mix Mycoplasma meleagridisMycoplasma meleagridis++ Mycoplasma iowae Mycoplasma iowae (negativ MM, pozitiv Mi- (negativ MM, pozitiv Mi-spi1- amplicon 216bp, pozitiv Mm-P34-75- amplicon 189bp, pozitiv MI-spi1- amplicon 216bp, pozitiv Mm-P34-75- amplicon 189bp, pozitiv MI-amplicon 427bp); linia 4: standard ADN – PCR Marker (Sigma).amplicon 427bp); linia 4: standard ADN – PCR Marker (Sigma).

REZULTATEREZULTATE

Categoria zootehnica / Categoria zootehnica / alte specificatiialte specificatii

VarstaVarstaProba Proba

Cod / tipCod / tip

ALVALV

AA A,B,C,D,EA,B,C,D,E JJ

RRGRRG 28 saptamani28 saptamani 868/2012 - folicul plumifer, MDV+868/2012 - folicul plumifer, MDV+ ++ ++ ++

RRGRRG 28 saptamani28 saptamani 870/2012 - folicul plumifer , MDV+870/2012 - folicul plumifer , MDV+ -- -- ++

Rasa rustica - masculRasa rustica - mascul adultadult 6532/2013 – splina, MDV-6532/2013 – splina, MDV- ++ ++ ++

Rasa rustica - masculRasa rustica - mascul adultadult 6532/2013 - folicul plumifer, MDV-6532/2013 - folicul plumifer, MDV- ++ ++ ++

RURU 23 saptamani23 saptamani 15293-1 /2004 - splina MDV+15293-1 /2004 - splina MDV+ -- -- ++

ATCC-VR-335ATCC-VR-335 // Martor pozitiv AMartor pozitiv A ++ ++ ++

ATCC-VR-658ATCC-VR-658 // Martor pozitiv BMartor pozitiv B ?? ++ ++

ATCC-VR-772ATCC-VR-772 // Martor pozitiv CMartor pozitiv C ?? ++ ++

Originea probelor si rezultatele examenelor rPCR Originea probelor si rezultatele examenelor rPCR

pentru detectia virusurilor leucozelor aviare (ALV)pentru detectia virusurilor leucozelor aviare (ALV)

REZULTATEREZULTATEOriginea probelor si rezultatele examenelor PCR pentru detectia Originea probelor si rezultatele examenelor PCR pentru detectia

Mycoplasma meleagridisMycoplasma meleagridis (MM) si (MM) si Mycoplasma iowaeMycoplasma iowae (MI) (MI)

Categoria Categoria zootehnica / alte zootehnica / alte

specificatiispecificatii

VarstaVarsta(zile)(zile)

Proba Proba Cod / tipCod / tip

Mycoplasma Mycoplasma meleagridismeleagridis

Mycoplasma Mycoplasma iowaeiowae

MMMM424bp424bp

Mm-Mm-P34-75P34-75189bp189bp

MIMI427bp427bp

Mi-spi1Mi-spi1216bp216bp

CurcaCurca 1414 6533 / 2013 - tampon traheal 6533 / 2013 - tampon traheal // ++ ++ //

CurcaCurca 1414 6533 / 2013 - tampon pulmon 6533 / 2013 - tampon pulmon // ++ -- //

CurcaCurca 1414 6534 / 2013 - tampon traheal 6534 / 2013 - tampon traheal // ++ ++ //

CurcaCurca 1414 6534 / 2013 - tampon pulmon 6534 / 2013 - tampon pulmon // ++ ++ //

CurcaCurca 1414 6535 / 2013 - tampon traheal 6535 / 2013 - tampon traheal // -- ++ //

CurcaCurca 1414 6535 / 2013 - tampon pulmon 6535 / 2013 - tampon pulmon // -- -- //

CurcaCurca 7070 6689 (1)/2013 – tampon traheal6689 (1)/2013 – tampon traheal // -- ++ //


CurcaCurca 7070 6691 (3)/2013 – tampon traheal6691 (3)/2013 – tampon traheal // -- -- //



Mycoplasma meleagridisMycoplasma meleagridis NCTC 10.153 NCTC 10.153 Martor pozitivMartor pozitiv ++ ++ ++ ++

Mycoplasma iowaeMycoplasma iowae NCTC 10.185 NCTC 10.185 Martor pozitivMartor pozitiv ++ ++ ++ ++

Mycoplasma gallisepticumMycoplasma gallisepticum A5969 A5969 Martor specificitateMartor specificitate -- -- -- --

ConcluzieConcluzie

Testele PCR s-au dovedit fiabile si adecvate in diagnosticul Testele PCR s-au dovedit fiabile si adecvate in diagnosticul

complexului leucozelor la pasari si al micoplasmozelor complexului leucozelor la pasari si al micoplasmozelor

specifice curcilor, semnaland prezenta tulpinilor de specifice curcilor, semnaland prezenta tulpinilor de

virus leucozic din subgrupurile ABCDE, A si J virus leucozic din subgrupurile ABCDE, A si J

Mycoplasma meleagridisMycoplasma meleagridis

M. iowae M. iowae

in efective de pasari crescute si exploatate industrial in in efective de pasari crescute si exploatate industrial in

Romania.Romania.

Multumiri colaboratorilor medici veterinari si fermierilor care au contribuit la aceste rezultate, atat material cat si financiar

popa v 2013 - diagnosticul leucozelor aviare si al micoplasmozelor specifice curcilor prin teste pcr

Documents