numararea hematiilor

NUMARAREA HEMATIILOR

Metode de numarare a hematiilor


• Metoda automata

– citometrie de flux

• Metoda manuala

– microscop optic

– camera de numarare - hemocitometru

– pipeta Potain pentru dilutie

– lichid de dilutie

– pentru prelevarea sangelui: vata, alcool, ace sterile, manusi



• Hemocitometru


• Pipete de dilutie

Numararea hematiilor

• Hematiile

• cel mai frecvent tip de celule

• celule anucleate

• forma: discuri biconcave

• dimensiuni: 7,5 – 8,3 µm

• sinteza: maduva hematogena

• reglarea sintezei: eritropoetina

• durata de viata: 120 de zile

• liza: splina

• rol: transportul gazelor respiratorii


• Valori normale – barbati: 4.500.000 – 5.200.000 / mm3

– femei: 4.000.000 – 4.500.000 / mm3

• Variatii fiziologice – sex: barbati > femei – varsta: nou-nascuti > adulti – altitudinea: > altitudini mari – efort fizic


• Variatii patologice

– cresterea numarului de eritrocite – POLICITEMIE

• cauze – afectiuni ale maduvei hematogene

– afectiuni pulmonare sau cardiace

– scaderea numarului de eritrocite – ANEMIE

• cauze – scaderea productiei de hematii – afectiuni ale maduvei

hematogene, afectiuni renale cronice

– pierdere exagerata de hematii - hemoragie


• Materiale necesare

– microscop optic

– hemocitometru

– Pipeta Potain pentru hematii

– lichid de dilutie – solutie Hayem

– Na2SO4 5 g, NaCl 1 g, sublimat 0,5 g, apa distilata ad 200 g

– vata, alcool, ace sterile, manusi


• PASUL 1 – Pregatirea hemocitometrului

– curatati hemocitometrul si lamela de sticla cu vata cu alcool si lasati sa se usuce

– plasati lamela de sticla deasupra hemocitometrului


• PASUL 2 – Prelevarea sangelui

– curatati pulpa unui deget cu vata cu alcool

– faceti o punctie la varful degetului curatat

– stergeti prima picatura de sange

– cand apare a doua picatura de sange umpleti pipeta

– degetul nu trebuie stors

– plasati varful pipetei in interiorul picaturii de sange

– aspirati o coloana continua de sange pana la diviziunea 0,5 a pipetei Potain


• PASUL 3 – Incarcati hemocitometrul

– umpleti rapid pipeta cu lichid de dilutie pana la diviziunea 101

– obtineti o dilutie de 1 / 200

– inchideti ambele capete ale pietei cu doua degete si agitati timp de 3 minute

– aruncati primele doua picaturi din pipeta

– cu a treia picatura incarcati hemocitometrul


• PASUL 4 – Numararea hematiilor

–plasati hemocitometrul la microscop

– folositi obiectivul de marire mica (10 x) si lumina slaba

–numarati hematiile din 80 de patrate mici luand in considerare celulele din interiorul patratelor si pe cele de pe doua laturi


• Rezultate

– Raportati numarul de hematii / mm3

• calculati numarul mediu de hematii corespunzator unui patrat mic

– N (numarul total de hematii) / 80 (numarul de patrate in care se face numararea)

• raportati aceasta valoare la volumul corespunzator unui patrat mic

– suprafata x inaltimea camerei (1/400 mm2 x 1/10 mm)

• corectati rezultatul cu dilutia sangelui (1/200)

numararea hematiilor

Documents