Profil trombofilie-screening: AnticoagulanProfil trombofilie screening: Anticoagulant lupic, Antitrombina, Proteina C, Proteina S, Rezistenta la proteina C activata, HomocisteinaAnticoagulant lupic154 Lei Informaii generale i recomandri pentru determinarea anticoagulantului lupicAnticoagulanii de tip lupic sunt anticorpi ndreptai mpotriva comple!elor fosfolipide-proteine"Ace#tia interfer$in vitrocu testele de coagulare dependente de fosfolipide, determin%ndprelungirea lor &cel mai frecvent folosit fiind timpul de tromboplastin$ parial$ activat aP''()*+"Invivo,prezenaanticogulanilor detiplupicseasociaz$cuunrisccrescut deevenimentetrombotice &trombofilie(," Prevalena trombozelor la pacienii cu anticoagulani lupici este de +--,./* predomin$trombozeleprofundealemembrelor#i embolismul pulmonar"Pacientelecuavorturi spontane recurente prezint$ anticoagulani lupici n apro!imativ )0/ din cazuri"1atorit$ 2eterogenit$ii intrinseci a anticoagulanilor lupici diagnosticul de laborator este adeseadificil" 'estele folosite trebuie s$ fie capabile s$ disting$ anticorpii cuactivitate de lupusanticoagulantdeanticorpiianti-factoride coagulare,deficitul de factori#i2eparin$, deoarecetoate aceste patru condiii pot cauza prelungirea testului aP''" 3n practic$, plasmele cu deficit defactori de coagulare sunt u#or de identificat, deoarece ad$ugarea plasmei normale normalizeaz$in vitrotimpul de coagulare" Cutoate acestea, testul aP''izolat nupoate diferenia cucertitudine plasmele care conin anticoagulani lupici de cele care conin anticorpi anti-factori decoagulare #i4sau 2eparin$,"3n +005 Societatea 6nternaional$ de Hemostaz$ #i 'romboz$ a revizuit #i modificatrecomand$rile privind detectarea anticoagulantului lupic &7A(" Astfel, s-au mbun$t$it criteriilede selectare a pacienilor la care se indic$ aceast$ investigaie #i de asemenea a fost elaborat unalgoritm de testare n laborator"Selectarea pacienilor'estarea pentru detectarea 7A trebuie s$ fie limitat$ la pacienii care au o probabilitate semnificativ$ de a avea sindrom antifosfolipidic &APS( sau care prezint$ o prelungire nee!plicat$a aP'' la un control de rutin$"'rombozele venoase profunde neprovocate sau trombozele arteriale f$r$ e!plicaie ap$rute la pacieni tineri &890 ani(, trombozele cu localizare neobi#nuit$, pierderile de sarcin$ survenite tardiv, orice episod trombotic sau complicaie a sarcinii la persoane av%nd boli autoimune &lupus eritematos sistemic, artrit$ reumatoid$, trombocitopenie autoimun$, anemie 2emolitic$ autoimun$( indic$ o probabilitate mare de APS* subiecii asimptomatici depistai nt%mpl$tor cu aP'' prelungit, pacientele cu avorturi spontane recurente survenite precoce n sarcin$ #i 1persoanele tinere cu tromboze venoase profunde provocate au o probabilitate medie de APS, n timp ce trombozele venoase profunde sau tromboembolismul arterial survenite la v%rstnici se asociaz$ cu probabilitate redus$ de APS"Algoritmul de testare n laborator pentru detectarea 7A optim$)" recoltarea probei: se recomand$ ca recoltarea probelor s$ fie efectuat$ naintea iniierii tratamentului anticoagulant sau la suficient timp dup$ ntreruperea acestuia* s%ngele va fi recoltat pe citrat de sodiu 0")09: &)45(* proba va fi dublu centrifugat$* dac$ testul nu se efectueaz$ imediat, plasma separat$ va fi rapid congelat$* naintea efectu$rii testului proba va fi decongelat$ prin imersia complet$ ntr-o baie de ap$ la ,;>' testul cel mai robust pentru detectarea 7A( #i un test aP'' ce folose#te silica ca activator #i are un coninut sc$zut de fosfolipide &al doilea test ca sensibilitate dup$ dR>>'(* dac$ se obine un rezultat pozitivla unul din cele dou$ teste se trece la etapele de mai ?os*," amestecul plasm normal + plasm de pacient (mixing test): se efectueaz$ un amestec ):) de plasm$ normal$ @ plasm$ de pacient, f$r$ preincubare, timp de ,0 minute*plasma normal$ poate fi obinut$ in house de la donatori s$n$to#i sau se poate utiliza plasm$ comercial$ liofilizat$ sau congelat$* rezultatul testului este sugestiv pentru 7A dac$ timpul de coagulare al amestecului de plasm$ este mai mare dec%t valoarea cut-off stabilit$ pentru plasma normal$* amestecul corecteaz$ timpii de coagulare n cazul deficitului de factorii plasmatici* ideal se va efectua #i un timp de trombin$ pentru a identifica prezena 2eparinei #i in2ibitorilor specifici ai factorilor coagul$rii* testul nu va putea fi efectuat dac$ plasma este incoagulabil$"-" testele de confirmare utilizeaz$ reactivi cu un coninut ridicat de fosfolipide &fosfolipiden bistrat sau n faz$ 2e!agonal$(* se testeaz$ proba pacientului cu reactivul ce are concentraie ridicat$ de fosfolipide &confirmare( #i se compar$ rezultatul obinut cu cel dela etapa de screening &n prezena unui reactiv cu un coninut sc$zut n fosfolipide(* se calculeaz$ corecia procentual$ A&screen confirm( 4 screenB ! )00, fie raportul 7A &screen4confirm( #i se interpreteaz$ n raport cu valorile cut-off stabilite pentru plasma normal$"9" raportarea rezultatelor se va face cantitativ cu un comentariu care s$ indice dac$ rezultatele sunt compatibile cu un rezultat pozitiv sau negativ-"Pregtire pacient ideal, proba trebuie s$ fie recoltat$ naintea iniierii tratamentului anticoagulant,"Specimen recoltat s%nge venos,"Recipient de recolt vacutainer cu citrat Ca 0")09 : &)45(, capac bleu4verde,"2Cantitate recoltat c%t permite vacuumul,"Cauze de respingere a probei prob$ n cantitate inadecvat$ &sub nivelul indicat pe vacutainer(* specimen 2emolizat* prezen$ de coaguli n prob$,"Prelucrare necesar dup recoltare centrifugare )9 min la +900 g pentru obinerea plasmei &plasma trebuie s$ fie foarte s$rac$ n trombocite, ' 8)00004D7 dubl$ centrifugare(, urmat$ imediat de separarea plasmei #i congelarea acesteia* probele recoltate n afara laboratorului vor fitransportate n recipientul destinat probelor congelate)*,"Stabilitate prob plasma separat$ este stabil$ 4 ore la temperatura camerei* lun la -+0>' screen este pozitiv se va efectua dR>>' confirm"Valori de referin anticoagulant lupic negativ,":eniune: Pentru diagnosticul de sindrom antifosfolipidic sunt semnificative + rezultate pozitive obinute la interval de )+ s$pt$m%ni)*+*,"Limite i interfereneRezultatele obinute pe probe recoltate n cursul unui episod trombotic acut trebuie interpretate cu pruden$ deoarece pacienii se afl$ sub tratament anticoagulant de atac, iar reactanii de faz$ acut$ &de e!emplu, G>666( pot nregistra valori crescute-" 7a pacienii aflai n tratament cu preparate de 2eparin$ cu greutate molecular$ mic$ &7:HH( testul se poate efectua numai din probele recoltate la )+ ore de la ultima doz$ administrat$" 1ac$ testul trebuie efectuat la pacieni sub anticoagulante orale se recomand$ ntreruperea acestora #i administrarea de 7:HH-, deoarece antagoni#tii de vitamin$ I pot induce rezultate fals-pozitive9"Civelurile de 2eparin$ J) K64m7 pot produce interferene &valori fals pozitive(, nivelurile mai mici fiind contracarate de substanele neutralizante coninute n reactivi)"1e asemenea, dabigatranul &in2ibitor de trombin$( precum #i in2ibitorii direci de factor La &rivaroxaban sau apixaban( pot determina valori fals pozitive pentru anticoagulantul lupic, de aceea nu se recomand$ testarea la pacienii aflai n tratament cu aceste anticoagulante9"Antitrombina (antitrombina III)356 Lei Informaii generaleAntitrombina &antitrombina 666, dup$ denumirea mai vec2e( este un in2ibitor potent al reaciilor din cascada coagul$rii" 1e#i numele Eantitrombin$F ar implica o aciune numai la nivelul trombinei, de fapt acest anticoagulant natural in2ib$ ntr-o oarecare m$sur$ toate enzimele coagul$rii" Principalele enzime in2ibate sunt: factor La, 6La #i trombina &factor 66a(* de asemenea antitrombina e!ercit$ aciuni in2ibitorii asupra factorilor L66a, L6a #i a comple!ului factor >66a #i factor tisular)"Antitrombina a fost descoperit$ n )5,5 ca o substan$ prezent$ n plasm$ ce acioneaz$ mpreun$ cu 2eparina pentru a preveni apariia trombozelor" 1e fapt, aciunea de sine st$t$toare aantitrombinei este relativ ineficient$, dar atunci c%nd se combin$ cu 2eparina viteza reaciei de in2ibare a factorilor de coagulare este puternic accelerat$, ceea ce face din comple!ul antitrombin$-2eparin$ un component vital al mecanismului anticoagulant #i st$ la baza indicaiilor terapeutice ale preparatelor de 2eparin$)"Mena antitrombinei, localizat$ pe cromozomul ), codific$ o glicoprotein$ cu greutatea molecular$ de 9N O1a ce este sintetizat$ n ficat #i este prezent$ n plasm$ ntr-o concentraie relativ ridicat$ &apro!imativ +", Dmol47(+"1eficitul de antitrombin$ a c$rui inciden$ n populaie este raportat$ ca fiind cuprins$ ntre 0"0+/ #i )/ poate fi congenital sau dob%ndit #i se asociaz$ cu un risc crescut de tromboembolism recurent)*," Prevalena deficitului ereditar de antitrombin$ la pacienii cu tromboze venoase este de )-+/" 1intre trombofiliile ereditare, deficitul de antitrombin$ prezint$ cea mai mare penetran$ &riscul cel mai mare de tromboembolism venos(" 'romboza arterial$ &A>C, infarct miocardic( a fost ocazional raportat$ n asociere cu deficitul de antitrombin$+"1in punct de vedere al defectului implicat e!ist$ + tipuri principale de deficit de antitrombin$: tipul 6 &cantitativ( caracterizat printr-o cantitate inadecvat$ de antitrombin$ ce este normal$ din punct de vedere funcional &sunt sc$zute at%t activitatea c%t #i antigenul antitrombinei 666(* tipul 66 &calitativ( asociat cu o cantitate normal$ de antitrombin$ 666, care ns$ nu este capabil$ s$-#i e!ercite funcia de in2ibitor al coagul$rii &antigenul antitrombinei 666 este normal cantitativ dar activitatea este sc$zut$()*,*-"Recomandri pentru determinarea antitrombinei investigarea unor complicaii tromboembolice nee!plicabile, n special la pacieni 890 ani #i cu istoric familial pozitiv de evenimente trombotice9*4 investigarea unor episoade de tromboz$ venoas$ cu localiz$ri neobi#nuite &e!" tromboza venelor mezenterice(,* monitorizarea tratamentului afeciunilor nsoite de deficit de antitrombin$, inclusiv administrarea concentratelor terapeutice de antitrombin$+"Pregtire pacient P ?eun* tratamentul cu 2eparin$ va fi ntrerupt cu + zile naintea recolt$rii-*9"Specimen recoltat s%nge venos9"Recipient de recoltare vacutainer cu citrat de Ca 0")09 : &)45( &capac bleu4verde(9"Cantitatea recoltat c%t permite vacuumul9"Cauze de respingere a probei! specimen 2emolizat* specimen coagulat* vacutainer care nu este plin* specimen contaminat cu 2eparin$9"Prelucrare necesar dup recoltare se separ$ plasma prin centrifugare #i se lucreaz$ imediat* dac$ acest lucru nu este posibil, plasma se poate stoca la -+0SH crescut(* 2iperglobulinemie-"3n cazul deficitului 2eterozigot se nregistreaz$ valori ale activit$ii antitrombinei cuprinse ntre -0 #i ;0/+" Riscul de a dezvolta evenimente tromboembolice depinde de subtipul de deficit de antitrombin$" Astfel, n cazul deficitului de tip 6 a fost estimat un risc de tromboz$ de )/ pe an, ncep%nd cu v%rsta de )9 ani #i un risc total de tromboz$ pe durata vieii de 90-N9/" 3n deficitul de tip 66 riscul de tromboz$ variaz$ ntre . #i +0/ n funcie de localizarea defectului genetic, fiind mai mare n cazul afect$rii situsului reactiv al antitrombinei"Se pare c$ deficitul de tip 6 2omozigot este incompatibil cu viaa iar deficitul de tip 66 2omozigot se asociaz$ cu un debut precoce al manifest$rilor trombotice"Cel mai frecvent se dezvolt$ tromboza venelor profunde ale membrelor inferioare complicat$ n unele cazuri cu embolia pulmoar$" :ai pot s$ apar$: tromboze recurente dup$ ntreruperea tratamentului anticogulant, tromboza venelor abdominale, pelvine, retiniene sau a sinusurilor cerebrale" Qvenimentele trombotice pot surveni spontan sau pot fi precipitate de sarcin$, perioadapost-partum, administrarea contraceptivelor orale, traumatisme, intervenii c2irurgicale, etc" Q!ist$ riscul de moarte subit$ n situaiile n care nu se efectueaz$ o profila!ie adecvat$ a episoadelor trombotice"Rareori, se dezvolt$ tromboza arterial$ ca prim$ manifestare a deficitului de antitrombin$"1e asemenea, au fost descrise complicaii obstetricale la gravidele cu deficit de antitrombin$: pierderi recurente de sarcin$, sindrom HQ77P."Limite i interfereneCou-n$scuii prezint$ o activitate sc$zut$ a antitrombinei+"Golosirea contraceptivelor orale, statusul postoperator, imobilizarea prelungit$ la pat si tratamentul cu 7-asparaginaz$ se pot asocia de asemenea cu o reducere a activit$ii antitrombinei" Rezultatele nu sunt concludente n ultimul trimestru de sarcin$ #i imediat post-partum-"7Cu se recomand$ testarea n cursul unui proces trombotic acut deoarece nivelul antitrombinei poate fi sc$zut."Activitatea crescut$ a antitrombinei nu prezint$ o semnificaie clinic$ definit$+"Prezena in2ibitorilor de trombin$ &2irudin sau argatroban( n plasma testat$ poate interfera cu testul,"6nfluena tratamentului anticoagulant asupra determin$rii antitrombinei !eparina ne"rac#ionat influeneaz$ determinarea activit$ii antitrombinei ca urmare a reducerii nvelurilor sale plasmatice* de aceea nu se recomand$ testarea sub aceast$ terapie+*;* !eparinele cu greutate molecular mic nu influeneaz$ testarea, totu#i se recomand$ ca recoltarea probei s$ se efectueze la )+ ore de la ultima administrare sau imediat naintea administr$rii urm$toarei doze9*;* tratamentul cu "ondaparinux nu influeneaz$ testarea;* rezultatele vor trebui interpretate cu pruden$ la pacienii aflai sub anticoagulante orale,in%ndu-se cont de faptul c$ aceste medicamente pot normaliza nivelul de antitrombin$ n unele subtipuri de deficit 2eterozigot.* dabigatranul &in2ibitor de trombin$( influeneaz$ determinarea activit$ii antitrombinei prin metoda cromogen$ bazat$ pe G66a prin inducerea unor valori fals crescute* de aceea nu se recomand$ testarea sub aceast$ terapie* in2ibitorii direci de factor La &rivaroxaban sau apixaban( nu influeneaz$ determinareaactivit$ii antitrombinei prin metoda cromogen$ bazat$ pe G66a;"$roteina %6& Lei Informaii generaleProteina C este o glicoprotein$ sintetizat$ n ficat &printr-un mecanism dependent de vitamina I(,care circul$ n plasm$ #i are rol n prevenirea trombozelor" Guncia sa de anticoagulant se e!ercit$prin inactivarea factorilor > #i >666" 1e asemenea, acioneaz$ ca un agent profibrinolitic)"Proteina C este activat$ de trombin$* rata de activare este accelerat$ prin formarea unui comple! ntre trombin$ #i trombomodulinul celulei endoteliale" Proteina C activat$ degradeaz$ factorii >a #i >666a printr-un cliva? proteolitic selectiv, conduc%nd la reducerea activit$ii procoagulante a 8plasmei" Pentru inactivarea factorilor de coagulare este necesar$ prezena unui cofactor-protein$ S- al$turi de ionii de calciu #i o suprafa$ membranar$ fosfolipidic$" Proteina C activat$ este neutralizat$ de un in2ibitor specific, de alfa+-antiplasmin$ #i alfa+-macroglobulin$+*,6ncidena deficitului de protein$ C n populaia general$ este de apro!imativ 0"+/" 1eficitul de protein$ C poate fi ereditar sau dob%ndit* n cazul deficitului ereditar severitatea manifest$rilor clinice este dependent$ de statusul 2omo42eterozigot" Astfel, deficitul 2eterozigot se asociaz$ cu episoade de tromboz$ venoas$ profund$, complicate sau nu cu embolie pulmonar$, survenite la pacieni tineri" 1eficitul 2omozigot se manifest$ imediat dup$ na#tere, prin fenomene tromboembolice masive #i potenial fatale &purpura fulminans neonatal$(,"Pe baza testelor funcionale #i imunologice, deficitul de protein$ C poate fi subdivizat n + tipuri: tipul 6 &cantitativ(, prezent n ma?oritatea cazurilor de deficit de protein$ C, se caracterizeaz$ printr-o funcionalite normal$ a proteinei C, care se g$se#te ns$ ntr-o cantitate insuficient$ pentru a controla cascada coagul$rii &reducere concomitent$ a antigenului proteinei C #i a gradului de activitate(* tipul 66 &calitativ( se caracterizeaz$ printr-o cantitate normal$ de protein$ C care este ns$ incapabil$ s$-#i e!ercite funcia &activitate redus$( ca urmare a unor defecte moleculare+*,*-1eficitul dob%ndit de protein$ C apare la pacienii cu afeciuni 2epatice, coagulare intravascular$diseminat$ &C61(, diabet insulino-dependent, 2ipertensiune esenial$, siclemie, procese maligne #i n cursul terapiei cu anticoagulante orale sau 7-asparaginaz$)"Recomandri pentru determinarea proteinei C: investigarea unor complicaii tromboembolice nee!plicabile, n special la pacieni 890 ani #i cu istoric familial pozitiv de evenimente trombotice* naintea administr$rii contraceptivelor orale la paciente cu episoade trombotice n antecedente sau cu istoric familial pozitiv-"Pregtire pacient ! P ?eun* dac$ pacientul se afl$ sub terapie cu anticoagulante orale, acestea vor fi ntrerupte cu + s$pt$m%ni naintea recolt$rii-*9"Specimen recoltat ! s%nge venos-"Recipient de recoltare ! vacutainer cu citrat de Ca 0")09 : &)45( &capac bleu4verde(-"Cantitatea recoltat c%t permite vacuumul-"Cauze de respingere a probei! specimen 2emolizat9 specimen coagulat vacutainer care nu este plin-"Prelucrare necesar dup recoltare se separ$ plasma prin centrifugare #i se lucreaz$ imediat* dac$ acest lucru nu este posibil, plasma se poate stoca la -+0 anormal&factorul > 7eiden(, caracterizat prin nlocuirea argininei din poziia 90. cu glutamina #imodificarea consecutiv$ a situsului de legare a APC" Klterior a fost identificat #i un altdefect cauzat de mutaia M).5)A #i anume incapacitatea factorului > 7eiden de a acionaca un cofactor n procesul de degradare a G>666 activat de c$tre APC" APCinactiveaz$G>aprinclivarea a,leg$turi de lanivelul lanului greu&amino-terminal(: Arg90., Arg,0., Arg.;5" Clivarea de la nivelul Arg90. este necesar$ pentrue!punerea eficient$ a celorlalte + situsuri de clivare, iar absena sa determin$ rezistena laAPC" Gactorul >7eidenreprezint$principalacauz$de APCR, fiindprezent laapro!imativ50/ dintre pacieni" 3n absena factorului > 7eiden, APCR constituie un factor de riscindependent pentru tromboza venoas$, riscul corel%ndu-se direct proporional cu gradulrezistenei" Printre condiiile asociate cu APCR n absena factorului > 7eiden se num$r$:nivelul crescut de G>666, sarcina, administrarea de contraceptive orale, terapia 2ormonal$de substituie, prezena anticoagulantului lupic" APCR n absena factorului > 7eiden este mult mai frecvent$ la femei dec%t la b$rbaiceea ce indic$ o predispoziie mai mare pentru tromboze post-operatorii la persoanele dese! feminin" Pe de alt$ parte, cea mai mic$ incidena a APCR este nt%lnit$ la indivizii cugrupa sangvin$ U, deoarece ace#tia prezint$ un nivel relativ mai sc$zut de G>666" Gactorul > Cambridge, o condiie rar$ generat$ de o mutaie care determin$ nlocuireaargininei din poziia ,0. cu treonina, este de asemenea asociat cu APCR" P%n$ n prezentnu a fost identificat$ nici o mutaie la nivelul celui de-al treilea situs de clivare al G>a&Arg.;5()*+"12 Recomandri pentru determinarea PCR test screening pentru factorul > 7eiden," Pregtire pacient se va evita recoltarea probei de pe catetere 2eparinizate," Specimen recoltat s%nge venos," Recipient de recolt vacutainer cu citrat Ca 0")09 : &)45(, capac bleu4verde," Cantitate recoltat c%t permite vacuumul," Cauzederespingereaprobeiprob$ncantitateinadecvat$&subnivelul indicat pevacutainer(* specimen 2emolizat* prezen$ de coaguli n prob$," Prelucrare necesar dup recoltare centrifugare )9 min" la +900 g pentru obinereaplasmei &plasma trebuie s$ fie foarte s$rac$ n trombocite, '8)00004D7 dubl$centrifugare(, urmat$ imediat de separarea plasmei #i congelarea acesteia* probelerecoltate n afara laboratorului vor fi transportate n recipientul destinat probelorcongelate)" Stabilitate prob plasma separat$ este stabil$lun la -+0 7eiden #i stabile#te statusul 2omozigot42eterozigot" 3nunelecazuri &la valori degrani$ale raportului( testul poate e#uandistingereaindivizilor 2eterozigoi pentru factorul > 7eiden fa$ de normali" 'estul nu detecteaz$ rezistena la proteina C activat$ de cauz$ dob%ndit$" 1eficitul de fibrinogen, protrombin$, G>666, GL, A'666, protein$ C, protein$ S &p%n$ la)00/(, c%t #i e!cesul de fibrinogen, factor >666, sau A'666 &de p%n$ la 9 ori normalul( nuinflueneaz$ semnificativ valoarea raportului #i sensibilitatea testului," Prezena anticoagulantului lupic nu e!ercit$ influen$ asupra testului" 3n urma unor studiiefectuate s-a constatat c$ de asemenea sarcina, contraceptivele orale #i anticoagulanteleorale nu afecteaz$ performana testului-"13Defcitul important de factor V n plasm !50"# poate conduce la timpi de coa$ulare alun$i%i &i astfel se poate pierde performan%a discriminatorie' (re)en%a aprotininei care in*i+ ,(- utili)at n test# sau a protaminei n plasma pacientului poate conduce la scderea timpilor de coa$ulare &i de asemenea la afectarea capacit%ii discriminatorii' .n*i+itorii direc%i ai trom+inei *irudin/ ar$atro+an# in0uen%ea) timpii de coa$ulare &i 1aloarea raportului' Din aceste moti1e/ tre+uie ntrerupt tratamentul cu aprotinin/ protamin sau in*i+itori (roteina 2 acti1itate#+& Lei Informaii generaleProteina S este o glicoprotein$ dependent$ de vitamina I sintetizat$ n ficat, celule endoteliale #imegaOariocite" Apro!imativ .0/ din cantitatea circulant$ de protein$ S este legat$ de proteina delegare a fraciunii C-b a complementului &C-b-binding protein(" Restul cantit$ii de protein$ seg$se#tesubform$liber$, capabil$s$acionezecauncofactor non-enzimatical proteinei Cactivate" Proteina S intensific$ inactivarea factorilor >a #i >666a la nivelul suprafeelorfosfolipidice #i de asemenea e!ercit$ un rol n efectul fibrinolitic al proteinei C activate" Studiilerecente indic$ o posibil$ implicare a fraciunii legate a proteinei S n activitatea anticoagulant$independent$ de proteina C activat$)*+"1eficitul de protein$Sseasociaz$ cutromboz$venoas$recurent$, cusauf$r$ embolismpulmonar, survenit$ la pacieni tineri)*+*," 6ncidena deficitului de protein$ S n populaia general$nu este bine precizat$* n populaia caucazian$ deficitul a fost detectat la )-9/ din pacienii careau prezentat un episod trombotic,"Q!ist$ , tipuri de deficit de protein$ S: tipul 6: proteina S este normal$ funcional, dar se g$se#te ntr-o cantitate insuficient$ pentru acontrola cascada coagul$rii &sunt sc$zute at%t forma liber$ c%t #i cea legat$, iar activitatea esteredus$(*tipul 66: cantitatenormal$deprotein$ S, careestens$incapabil$s$-#i e!ercite funcia&activitate redus$( ca urmare a unor defecte moleculare* tipul 666: cantitate redus$ de protein$ S liber$ asociat$ cu o activitate sc$zut$, n prezena uneicantit$i normale de protein$ S total$,"141eficitul dob%ndit de protein$ S poate fi nt%lnit n sarcin$, administrarea contraceptivelor orale,afeciuni 2epatice, tratament cuanticoagulanteorale, nefropatiediabetic$, trombozavenelorcerebrale, purpura trombotic$ trombocitopenic$ precum#i n alte afeciuni autoimune #iinflamatorii n care se nregistreaz$ o cre#tere a proteinei de legare a fraciunii C-b #iconcomitent o sc$dere a fraciunii libere)"Recomandri pentru determinarea proteinei S investigareaunorcomplicaiitromboembolice nee!plicabile, n special lapacieni 890ani #i cu istoric familial pozitiv de evenimente trombotice* naintea administr$rii contraceptivelor orale la paciente cu episoade trombotice nantecedente sau cu istoric familial pozitiv-"Pregtire pacient ! P ?eun* dac$ pacientul se afla sub terapie cu anticoagulante orale, acestea vor fi ntrerupte cu + s$pt$m%ni naintea recolt$rii* de asemenea, tratamentul cu 2eparin$ va fi ntrerupt cu + zile naintea recolt$rii-*9"Specimen recoltat ! s%nge venos-"Recipient de recoltare ! vacutainer cu citrat de Ca 0")09 : &)45( &capac bleu4verde(-"Cantitatea recoltat c%t permite vacuumul,"Cauze de respingere a probei specimen 2emolizat specimen coagulat vacutainer care nu este plin specimen contaminat cu 2eparin$-"Prelucrare necesar dup recoltare se separ$ plasma prin centrifugare #i se lucreaz$ imediat* dac$ acest lucru nu este posibil, plasma se poate stoca la -+0