Download - Imunohematologie - Copy

IMUNOHEMATOLOGIE

SEROLOGIA GRUPELOR

SANGUINE

DR.BÂRSAN TAMARA Centrul Regional de Transfuzie Galați

GRUPEGRUPE SANGUINESANGUINE

ABOABO

RhRheesus standard (RH1)sus standard (RH1)

NOȚIUNI GENERALE

Sângele este unic și salvator de vieți Transfuzia de sânge reprezintă o componentă esențială a serviciilor

de sănătate moderne Securitatea transfuzională implică un ansamblu de măsuri necesare

atât pentru protejarea integrității donatorului de sânge , cât și pentru prevenirea complicațiilor imunologice și infecțioase la primitor

Asigurarea securității , calității și eficienței sângelui total și componentelor sanguine reprezintă o prioritate majoră la nivel internațional

Politica națională în domeniul calității și contextul legislativ existent constituie un cadru adecvat pentru aplicarea în practica transfuzională a Directivelor europene care reglementează normele de calitate și securitate privind colecta , controlul , procesarea , stocarea și distribuția sângelui total și componentelor sanguine

SÂNGE TOTAL:COMPOZIȚIE Și FUNCȚII

Sângele este un fluid complex format din celule sanguine aflate în suspensie în plasmă:

Globule roșii ( eritrocite , hematii ) Globule albe (leucocite) Plachete ( trombocite)

G

Globuleroșii

PlasmăGlobule albe șiplachete

PLASMA SANGUINĂ

Reprezintă 5% din greutatea corporală Conține proteine , substanțe chimice, factori de

coagulare , substanțe metabolice Volumul sanguin total = volumul ocupat de

celule și plasmă în sistemul vascular și reprezintă 7% din greutatea totală(70ml/greutate corporală) la adult și 8% din greutatea corporală la copil

GLOBULE ROȘII. CARACTERISTICI

Sunt produse în măduva osoasă sub controlul hormonului renal numit eritropoietină

Au o durată de viață de aproximativ 120 zile în torentul sanguin înainte de a fi distruse în sistemul reticulo-endotelial

Număr : aprox. 5 milioane /mm cub sânge Conțin hemoglobină , a cărei funcție principală este de a

fixa și transporta oxigenul în țesuturi Reprezintă 45% din volumul total al sângelui Hemoglobina=moleculă constituită din fier(hem) și lanțuri

polipeptidice ( globină)

GLOBULE ALBE. CARACTERISTICI

Reprezintă o familie de celule nucleate formate din: granulocite

limfocite monocite Sunt produse în măduva osoasă și țesutul

limfatic Ocupă sub 1% din volumul sanguin total Au rol în apărarea organismului împotriva

infecțiilor și de a produce anticorpi dirijați împotriva antigenelor străine

PLACHETELE

Sunt mici fragmente de megacariocite produse de măduva osoasă

Conțin enzime și alte substanțe biologic active(mediatori)

Au rol major în inițierea mecanismelor de coagulare

GRUPELE SANGUINE

Au fost descoperite la începutul secolului xx și reprezintă cea mai mare descoperire pentru transfuzia sanguină

În anii 1901-1902 Karl Landsteiner a descris 3 grupe sanguine : O, A și B

În anul 1902 , elevii lui Landsteiner, Decastello și Sturli au descris și grupa AB

În anul 1911 au fost descoperite supgrupele A1 și A2

IMUNOLOGIA GRUPELOR SANGUINE

Clasificarea grupelor sanguine din sistemul OAB se bazează pe prezența sau absența în eritrocite a unuia sau ambelor antigene (aglutinogene) A și B

Antigen= orice substanță recunoscută ca străină de către organism , care determină un răspuns imun Anticorp= produsul unui răspuns imun la un stimul antigenic Anticorpi naturali= anticorpii prezenți în sânge în absența unui

stimul antigenic cunoscut Printr-o excepție biologică , antigenele A și B nu sunt imonogene ,iar

sângele uman nu conține anticorpi împotriva antigenelor proprii Anticorpii anti-A și anti-B pot fi : naturali= Ac de tip IgM prezenți la toți indivizii la care

aglutinogenul omolog este absent imuni = Ac de tip IgG prezenți în urma unui stimul antigenic Aglutinogenul și aglutinina omologă nu pot coexista în sângele unui

individ Absența unuia din cele 2 aglutinogene implică prezența aglutininei

corespunzătoare

AntigeneAntigene(Ag) de natur(Ag) de naturăă glucidiglucidicăcă locali localizatezate pe fațape fața externexternăă aa membrane membraneii c ciitoplasmtoplasmaticeatice

Caracteristici ale celorCaracteristici ale celor 4 grupe sanguin 4 grupe sanguinee : :

GrupGrupaa AA BB ABAB OO

AglutinogAglutinogeeneneAg AAg A Ag BAg B Ag A și Ag BAg A și Ag B Fără AgFără Ag

AglutinineAglutinineAc anti BAc anti B Ac anti AAc anti A Fără AcFără Ac Ac anti B și Ac anti B și

Ac anti AAc anti A

(ser , plasmă)

(hematii)

AnticorpAnticorpii (Ac) de natur (Ac) de naturăă IgM pr IgM prezezenențiți în sângeîn sânge

SISTEMUL SISTEMUL ABO ABO

NOȚIUNI DE GENETICĂ A GRUPELOR SANGUINE

Grupele sanguine se transmit ereditar Genele responsabile de specificitatea de grupă

sanguină sunt situate pe cromozomii materni și paterni autozomali

Genotip=ansamblu de gene prezente pe cromozomi deținute de fiecare părinte

Fenotip= efectul observabil al genelor moștenite, de exemplu grupa sanguină

SISTEMUL ABO _ Relația genotip –fenotip

Genotip Fenotip

Grupa sanguină

AA

AO

A

BB

BO

B

AB AB

OO O

REGULILE CARE GUVERNEAZĂ TRANSMITEREA EREDITARĂ A GRUPELOR

SANGUINE Aglutinogenele A sau B nu pot fi prezente în

sângele unui copil dacă nu există în sângele unuia sau ambilor părinți

Un persoană cu grupa AB nu poate fi părintele unui copil cu grupa O

O persoană cu grupa O nu poate fi părintele unui copil cu grupa AB

Aglutinogenele A1 sau A2 pot fi prezente la un copil , numai dacă există în sângele unuia dintre părinți

TRANSMITEREA EREDITARĂ ÎN SISTEMUL ABO

Fenotipul

părinților

Fenotipul posibil al copiilor

Fenotipul imposibil al copiilor

O + O

O + A

O + B

A + A

A + B

B + B

O + AB

A + AB

B + AB

AB + AB

O

A , O

B , O

A , O

AB , O , A ,B

B , O

A , B

A , B , AB

A , B , AB

A , B , AB

A , B , AB

B , AB

A , AB

B , AB

Nici unul

A , AB

O , AB

O

O

AB

SISTEMUL RHESUS (RH) În perioada 1937- 1940 , Landsteiner și Wiener

au efectuat cercetări și au descoperit factorul Rh al cărui importanță clinică a fost demonstrată de Levine și Stetson în anul 1939

Din punct de vedere genetic , sistemul Rh prezintă: - 6 gene: Cc , Dd , Ee

- 5 antigene : Cc , D , Ee Gena d nu produce antigen Genele Rh se transmit în grupe de 3 gene ,

fiecare grupă provenind de la un părinte ,diverse combinații:CDe

Cde , cde ,cDe , etc.

SISTEMUL RHESUS (RH)

0 persoană cu RhD pozitiv moștenește o genăD,

dar nu se poate preciza dacă persoana respectivă este heterozigotă pentru această genă(D/d) sau homozigotă(D/D)

O persoană cu Rh negativ are fenotipul d/d Arbore genealogic: Genotip: D/d D/d

Genotip: D/D D/d d/d Fenotip: Dpoz Dpoz Dneg

AntigAntigeene (Ag) de naturne (Ag) de naturăă protproteeiicăcă locali localizate pe fațazate pe fața

externexternăă a membrane a membraneii c ciitoplastoplasmaticematice

Caracteristici aleCaracteristici ale sistemuluisistemului Rhésus Rhésus (Rh) (Rh) standard : standard :

GrupGrupaa Rhésus +Rhésus +

(RH : 1)(RH : 1)

Rhésus –Rhésus –

(RH : -1)(RH : -1)

AglutinogAglutinogeenene(hematii)

Ag D Fără Ag D

Nu există Nu există anticorpanticorpii (Ac) natur (Ac) naturaallii p prezenți în sângerezenți în sânge

Anticorpii imuni (IgG) apar la persoane Rh negativ ca urmare Anticorpii imuni (IgG) apar la persoane Rh negativ ca urmare a imunizării anti- D (transfuzii de sânge Rh + , a imunizării anti- D (transfuzii de sânge Rh + , incompatibilitate feto-maternă)incompatibilitate feto-maternă)

SISTEMUL SISTEMUL RRhehesussus(RH)(RH) standard standard

PrincipPrincipiuiu

AgAg : natur : naturaliali

AcAc : aglutinan : aglutinanțiți

AglutinaAglutinarere activ activăă direct directăă

IMPORTANȚA CLINICĂA SISTEMULUI ABO ȘI RH

Efectuarea testărilor imunohematologice are rolul de a asigura o securitate transfuzională optimă prin prevenirea complicațiilor imunologice la pacienții care beneficiază de o transfuzie sanguină

Nu poate fi tolerată nici o eroare în determinarea grupelor sanguine. Efectuarea grupei sanguine trebuie realizată pentru

fiecare unitate de sânge de către 2 tehnicieni diferiți , cu 2 seruri diferite , prin 2 tehnici:

proba globulară(metoda Beth-Vincent):detectează Ag AB prezenți pe eritrocite

proba serică (metoda Simonin):detectează Ac specifici prezenți în ser

CONDIȚII ESENȚIALE PENTRUDETERMINAREA CORECTĂ A TESTELOR

IMUNOHEMATOLOGICE

Personal calificat Materiale și echipamente adaptate la condițiile

operatorii Reactivi validați(control de calitate, instrucțiuni

producător) Manipularea eșantioanelor de sânge respectând

măsurile de igienă și securitate Respectarea bunelor practici de laborator Proceduri operatorii scrise (SOP)

ERORI ÎN DETERMINAREA GRUPELOR SANGUINE-REACȚII FALS POZITIVE SAU

NEGATIVE

Reactivi nestandardizați și incorect depozitați Formarea de rulouri(pseudo-aglutinare) Probe contaminate Prezența gelatinei Warton Autoanticorpi și anticorpi la rece Tehnică de lucru incorectă

PREPARAREA COMPONENTELOR SANGUINE PENTRU A FI TESTATE

Centrifugare

10 minute 500g

Separarea supernatantului (plasmă conținând anticorpi)

Diluție 3 % în apă distilată a hematiilor purtătoare de antigen

Sânge total recoltatcu anticoagulant

Reactivi

Eritrocite test et controlSeruri test

PREPARAREA MATERIALELOR ȘI REACTIVILOR

REF

Martor auto Anti A Anti B Anti A + Anti B

GR A GR B Martor Allo Anti D CQ +

Martor reactivi

Placă

Anti A +

Anti B

Anti D GRA GRB GRO+Anti BAnti AMartor GRO-

CC + CC -

Diluant

REF


GR A GR B Martor Allo Anti D CC+

Martor reactivi

CC-

REACTIVI Și ERITROCITE TEST

Anti A +

Anti B

Anti BAnti AAnti D GRA GRB GRO+ GRO-Martor

REF

Témoin auto Anti A Anti B Anti A + Anti B

GR A GR B Témoin Allo Anti D CQ -

Témoin réactif

CQ +

REF


GR A GR B Martor Allo Anti D CC -

Martor réactivi

CC +

ADĂUGAREA COMPONENTELOR SANGUINE DE TESTAT

Plasmă sau serHematii test 3%

REF


GR A GR B GRO/Martor Allo Anti D CC+

Martor reactivi

CC -

AGITAREA BLÂNDĂ A PLĂCII PENTRU FAVORIZAREA AGLUTINĂRII SPONTANE

CITIREA AGLUTINĂRII

REF

Absența aglutinării

Nu se constată formarea de rețele aglutinante

Prezența aglutinării

Formarea de rețele aglutinante de complexe imune

Cuantificarea aglutinării poate fi efectuată în funcție de numărul și mărimea conglomeratelor de hematii

+ ++ +++

28

INTERPRETAREA MARTORILOR

CompoCompozițieziție

Aspect Aspect așteptatașteptat

Aspect non Aspect non conformconform

Martor Martor AutoAuto Martor Martor RReeactiactivivi Martor Martor AlloAllo

serul subiectului +

hematiile subiectului

hematiilesubiectului +

seruri test

serul subiectului +

hematii fără Ag ABO/Rh

Prezența Ac reci în serul subiectului

Aglutinează propriile sale hematii

Imagine de aglutinare dată de hematiile subiectului diluate în reactiv în condiții normale

Prezența de anticorpi în serul subiectului, indică existența altor structuri pe hematii decât Ag ABO/ Rh



Martor reactiv

CQ -

EXEMPLEMartori non aglutinați

Hematiile subiectului sunt aglutinate de toate serurile = Prezența Ag eritrocitare A și B

Serul subiectului nu aglutinează hematiile test = Fără anticorpi în ser

Controale de calitate : aglutinare CC+ și non aglutinare CC-

Hematiile subiectului sunt aglutinate de serul antiD = Prezența Ag eritrocitare D

Martorii și controalele de calitate sunt conforme : validarea reactivilor și a tehnicilor Proba globulară (Beth Vincent) și serică (Simonin) sunt concordante : nu există anticorpi dirijați

contra propriilor antigene și prezența anticorpilor contra altor antigene prezența aglutinogenelor A și B et absența aglutininelor : Grupa AB

Punerea în evidență a antigenului D : Rh pozitiv



Martor reactiv

CQ -

Martori non aglutinați Hematiile subiectului sunt aglutinate de serul anti A (și antiA+B) = Prezența Ag eritrocitare A

Serul subiectului aglutinează hematiile test B = Prezența anticorpilor anti B Hematiile subiectului sunt aglutinate de serul

antiD = Prezența Ag eritrocitare D

Controale de calitate : aglutinare CC+ et non aglutinare CC-

EXEMPLE

Martorii și controalele de calitate sunt conforme : validarea reactivilor și tehnicii Proba globulară (Beth Vincent) și serică (Simonin) sunt concordante : nu există anticorpi dirijați

contra propriilor antigene și prezența anticorpilor contra altor antigene prezența aglutinogenelor A și prezența aglutininelor anti B : Grupe A

Punerea în evidență a antigenului D : Rh pozitiv

6985



Martor reactiv

CQ -

Martori non aglutinați Hematiile subiectului nu sunt aglutinate de nici un ser = Absența Ag eritrocitare A sau B

Serul subiectului aglutinează hematiile test A et B = Prezența anticorps anti A et anti B

Hematiile subiectului nu sunt aglutinate de serul antiD = Absența Ag eritrocitare D

Controale de calitate : aglutinare CC+ și non aglutinare CC-

EXEMPLE

Martorii și controalele de calitate sunt conforme : validarea reactivilor și tehnicii Proba globulară (Beth Vincent) et serică (Simonin) sunt concordante : prezența anticorpilor anti A et

anti B la un subiect care nu posedă antigenele A sau BAbsența aglutinogenelor A și B et prezența aglutininelor anti A et anti B : Grupa O

Absența antigenului D : Rh negativConcluzie : Subiectul are grupa O-

Download - Imunohematologie - Copy

Top Related