CURS Nr.14 Biochimia urinei i a materiilor fecale1. Biochimia urineiRecoltarea urinei

Analiza urinei se face nu numai n bolile aparatului urinar ci i n bolile altor organe. Recoltarea urinei se poate face att la nivelul laboratorului ct i la domiciliu. n raport cu analiza solicitat se recolteaz fie urina de diminea, fie urina din 24 de ore.

Persoanele indiferent de sex, care recolteaz urina la domiciliu, n vederea analizelor curente, trebuie s respecte urmtoarele indicaii:

- Recipientul (borcanul sau sticla) n care se recoltaz urina s fie perfect curat, splat cu ap i sod i apoi cltit cu ap mult. Sticlele nesplate n care au fost buturi alcoolice, oet, ulei, sucuri de fructe, ape minerale, siropuri, medicamente, detergeni pot s falsifice rezultatele analizelor. Se nelege c i dopul sticlei trebuie s fie curat, fr urme de substane chimice.

- Se va recolta urina proaspt de diminea, imediat dup deteptare, direct in recipient. Cantitatea minim necesar de urin este de 100 ml. Nu are importan faptul dac o persoan a mai urinat n timpul nopii.

- Pe sticl se va lipi o etichet cu numele bolnavului i vrsta.

- Dac medicul suspecteaz o infecie urinar, recomand bolnavului s fac o urocultur. n aceast situtaie, urina se va recolta tot dimineaa n condiii de sterilitate, ntr-un vas steril procurat de la laborator, iar n lipsa acestuia, ntr-o sticl de 100 ml care a fost dezinfectat mpreun cu dopul su prin fierbere timp de 30 minute. nainte de urinare se va face o toalet a organelor genitale cu ap i spun pentru ndeprtarea eventualilor microbi. Tot n acest scop se recomand ca urina s se recolteze numai dupa ce prima parte a urinei, care a splat canalul urinar, a fost aruncat la closet.

n cazul n care este necesar recoltarea urinei din 24 ore se va proceda astfel: se golete vezica urinar, dimineaa la ora 6. ncepnd de la aceast or, se recolteaz toat urina pn a doua zi la ora 6. Pentru a nu se pierde din cantitatea de urin se recomand s se urineze separat, nainte de scaun. Se msoar apoi volumul urinei din 24 de ore i se noteaz. Apoi se amestec urina (n cazul n care a fost recoltat n mai multe sticle) se agit i pentru laborator se oprete numai o cantitate de 100-200 ml, iar restul se arunc.

- Cnd persoana care colecteaz urina lucreaz, este elev sau student, urina din 24 de ore se poate recolta ntr-o zi de repaus.

- Copii mici care nu pot urina direct n sticl, vor urina numai n olia de noapte sau ntr-un borcan care a fost sterilizat mai nti prin fierbere. Apoi urina va fi pus ntr-o sticl steril care va fi adus la laborator.

- Pe timpul recoltrii urina se va ine la rece iar vara se va pstra la frigider, pentru a nu se altera. Cnd cantitatea de urin este mai mare de un litru, se va recolta n mai multe sticle sau ntr-un borcan mai mare.

- Femeile vor specifica dac urina a fost recoltat n perioada menstrual sau dac au utilizat ovule cu medicamente cu 24 de ore nainte de analiz.

- Se va comunica laboratorului dac bolnavul este sub tratament i ce medicamente a folosit.

- nainte de analize cu circa 24 ore nu se vor consuma cantiti mari de lapte sau derivate din lapte care tulbur urina i produc o cretere a calciului din urin. De asemenea, persoanele care urmeaz un regim fr sare trebuie s comunice laboratorului pentru a se cunoate de ce cantitatea de sare din urin este sczut.

Analiza urinei

Primul produs biologic care s-a analizat n vederea punerii unui diagnostic a fost urina. nc de acum 3000 de ani, medicii din antichtate tiau s examineze urina i pe baza caracterelor sale fizice (cantitate, culoare, limpezime, snge, cheaguri, spum, sediment) stabileau diagnosticul i chiar prognosticul bolilor.

n evul mediu au aprut uroscopitii sau prorocitorii de urin care puneau diagnosticul tuturor bolilor numai pe baza examenului vizual al urinii. Uroscopitii aveau i ajutoare, curieri de urin care transportau urina de la bolnavi n laboratorul uroscopitilor. Urina este produs de rinichi att prin filtrarea sngelui (urina primar) ct i prin reinerea (reabsorbia) din urina primar numai a acelor substane care mai pot fi necesare corpului (ap, zahr, minerale, etc.). Ceea ce mai rmne nereinut din urina primar (o parte din apa mineral, reziduuri toxice rezultate din arderea alimentelor n organism) constituie urina final care se elimin prin cile urinare. n urin se elimin astfel peste 150 de substane chimice, minerale i organice, dar n mod curent pentru diagnosticul bolilor se analizeaz numai cteva componete principale.

Culoarea urinei normale este glbuie sau roiatic. Ea este mai nchis la culoare cnd este foarteconcentrat sau dup consumul unor medicamente (piramidon, antinevralgice, tetraciclin, albastru de metilen, etc.). n bolile nsoite de eliminarea sngelui n urin, urina are o culoare roie murdar. Iar n bolile de ficat cu icter, bila trecnd n snge se elimin prin urin producnd o culoare brun-negricioas (ca berea neagr). i o serie de alimente ca: sfecla, varza roie, bomboanele colorate, etc. pot s modifice culoarea normal a urinei.

Mirosul urinei este specific. n infeciile urinare care duc la fermentarea urinei, mirosul este caracteristic de amoniac sau de gunoi de grajd. Unele alimente sau medicamente aromate care se elimin prin urin pot s-i imprime acesteia mirosuri aromate. Urina bolnavilor de diabet poate mirosi a aceton, iar a alcoolicilor a alcool.

Transparena este caracteristica urinei proaspete; dup cteva ore de la urinare se poate tulbura, mai ales dac este inut la rece. Acest lucru se datoreaz precipitrii (solidificrii) srurilor minerale care se gsesc n mod normal dizolvate n urin i nu constituie simptomul vreunei boli aa cum cred unele persoane. Dar dac urina proaspt, cald este tulbure atunci poate fi vorba de o infecie (puroi i mucus) de o hemoragie sau de un consum foarte mare de produse bogate n calciu (lapte, brnz) ori de carne.

n cazul unei urine cu snge, se pot vedea plutind cheaguri cu snge. Pentru a putea aprecia dac urina este clar sau tulbure trebuie s fie examinat ntr-o sticl sau eprubet necolorat.

Cantitatea de urin n 24 de ore la un adult variaz de la 1-1,5 litri. n sezonul cald, dup febr, dup vrsturi, diaree, dup transpiraii intense (deshidratare), dup fumat sau consum redus de lichide, cantitatea de urin este mai mic. n ocul produs de hemoragii mari, arsuri sau traumatisme, n bolile care rein apa n organism (insuficien cardiac, ciroz hepatic) cantitatea de urin scade foarte mult. Sunt unele boli de rinichi (insuficien renal, infecii renale) sau intoxicaii cu substane chimice n care cantitatea de urin scade sub 500 ml (oligurie). n aceste situaii organismul sufer deoarece nu se mai pot elimina prin urin deeurile nesntoase din snge. n bolile care blocheaz cile urinare (calculi urinari, hipertrofie de prostat, etc.) din cauza dificultii de a urina, cantitatea de urin este mai mic. Dup frig, emoii, tratamente cu diuretice, consum mare de lichide, de alimente srate, de alcool, crete i cantitatea de urin peste 2 litri (poliurie). Bolile cronice de rinichi (glomerulonefrita, scleroza renal) care nu mai permit reabsorbia apei filtrate prin rinichi, produc eliminarea unei cantiti foarte mari de urin. Datorit consumului exagerat de lichide, n diabetul zaharat netratat, bolnavii elimin cantiti mari de urin, pn la civa litri pe zi. Exist i un ritm biologic de eliminare a urinei, eliminarea fiind mai mare n timpul zilei i mai mic n timpul nopii. Inversarea acestui ritm indic o tulburare n funcia rinichiului. De asemenea, brbaii elimin mai mult urin dect femeile.

Densitatea (greutatea specifica) urinei este mai mare dact a apei (care este de 1000) i se determin cu urodensimetrul. Valori normale n cazul densitii: 1015-1030.

Cnd se consum mai multe lichide, deci n cazurile n care crete cantitatea de urin, se produce n general o scdere a densitii urinare i invers, cnd urina din 24 de ore este n cantitate mai mic i mai concentrat, atunci densitatea urinar este mai crescut. Numai n diabetul zaharat, n ciuda unei cantiti mari de urin, densitatea urinei nu scade, ci crete datorit zahrului dizolvat n urin. O densitate urinar se consider anormal atunci cnd examenele repetate arat cifr sub 1012. Aceast situaie arat c rinichii bolnavi nu mai au capacitatea de a produce o urin mai concentrat.

Creterea densitii urinare peste cifra 1030 indic fie o deshidratare a organismului, fie un diabet zaharat.

PH-ul urinar sau reacia urinei arat dac urina este acid sau alcalin. Determinarea pH-ului se face cu o hrtie impregnat cu tinctur de turnesol (sau cu alt substan indicatoare). Se introduce hrtia n urin i se observ modificarea culorii benzii de hrtie. Sub pH-ul 7,0 urina este considerat acid i hrtia se nroete, iar peste pH-ul 7,0 urina este considerat alcalin i hrtia se albstrete. n mod normal urina este acid avnd pH-ul cuprins ntre 5,5 i 6,5. Dup o alimentaie bogat n carne i medicamente acide (sare de lmie, vitamina C), se elimin o urin mai acid, iar dup un regim alimentar vegetarian, dup medicamente alcaline (bicarbonat, ape minerale) sau dup infecii ale aparatului urinar, devine alcalin. Urina care este permanent prea acid sau prea alcalin, predispune la formarea de calcului urinari de acid uric, respectiv de fosfat i carbonat de calciu.

2. Biochimia materiilor fecaleRecoltarea materiilor fecale

Analiza materiilor fecale este indicat pentru descoperirea bolilor digestive de natur microbian (febra tifoid, dizenterie, intoxicaie alimentar etc.) sau de natur parazitar (ou de parazii intestinali), precum i pentru stabilirea gradului de digestie a alimentelor. Recoltarea materiilor fecale pentru analiza oulor de parazii se face n recipiente speciale, primite de la laborator. n lipsa acestora, se pot recolta n recipiente sau vase din material plastic, sticl sau material, bine splate i bine nchise cu capace sau dopuri. Sunt bune cutiile din material plastic sau sticlele rmase de la medicamente. Nu se vor recolta materii fecale n cutii de carton, cutii de chibrituri, etc. ntruct exist riscul infectrii persoanelor care transport i prelucreaz aceste materiale.

Vor fi recoltate materii fecale proaspete, emise dimineaa. Dac nu este posibil (mai ales la copii), produsul se va recolta i seara i va fi pstrat la rece pentru a nu fermenta. (Nu se vor pstra materiile fecale n frigider cci exist riscul infectrii alimentelor). Din scaunul proaspt, eliminat la closet pe o hrtie sau pe un carton curat, cu o lopic de lemn sau de material plastic, se recolteaz cteva grame (ct un degetar) de materii fecale i se depun n recipientul pregtit dinainte. La copii mici, materiile fecale se vor recolta din oala de noapte care n prealabil a fost bine splat.

n caz de constipaie, materiile fecale se vor recolta dup luarea unui purgativ uor (laxativ). Se va avea grij ca materialele fecale s nu se amestece cu ap sau urin. Dup ce pe recipient se va nota numele bolnavului i vrsta, se va ambala n hrtie i va fi transportat ct mai repede la laborator. Este indicat ca fiecare persoan, mai ales n caz de boal, s observe i aspectul scaunului: dac este colorat i ce culoare are, sau dac este necolorat, albicios, dac are urme de snge etc.

n cazul n care n scaun se observ viermiori sau fragmente suspecte de viermi intestinali acetia vor fi recoltai cu o pens i introdui ntr-un vas de sticl sau de material plastic prevzut cu capac care se nchide ermetic. Pentru ca aceti parazii s nu se usuce i s se altereze, se va turna peste ei spirt sanitar, ap de colonie sau ap srat i dup aceea vor fi transportai la laborator. Nu se vor transporta paraziii n hrtie, n vat, deoarece exist pericolul de infestare a persoanelor care execut analizele.

Cnd bolnavului i se recomand coprocultura (cercetarea microbilor din scaun) el va solicita un recipient special, sterilizat, de la laborator. Recoltarea materiilor fecale se va face ca i pentru oule de parazii. Nu se va utiliza ns nici un medicament (antibiotice, sulfamide, Mexaform, etc.) nainte de analiz care ar putea distruge microbii din scaun.

La recoltarea materiilor fecale pentru cercetarea sngelui (hemoragii oculte) sau pentru cercetarea digestiei alimentelor bolnavul va urma un regim alimentar special, recomandat de medic i nu se va lua nici un medicament cu 24 de ore nainte de analiz.

Analiza materiilor fecale este obligatorie pentru urmtoarele categorii de persoane: cele care lucreaz n sectorul alimentaiei publice, copii care merg la grdinie, cree, bolnavii care au suferit de boli infecioase digestive (febra tifoid, dizenterie, holer etc.), cltorii care au sosit din rile n care exist boli infecioase digestive.

Coprocultura este o metod de lucru utilizat n laboratoarele de microbiologie clinic n scopul cultivrii i identificrii agenilor patogeni existeni n intestinul omului.

Limitndu-ne doar la infeciile bacteriene putem ntlni urmtoarele situaii n care coprocultura este indicat:

infecii cu localizare primar enteral i invazie ulterioar (aspect septicemic)

infecii cu localizare exclusiv enteral sub form clinica de enterocolite, boal diareic, toxiinfecii alimentare, evolund sub form acut, subacut, cronic, clinic inaparent sau simplu portaj.

infecii bacteriene ale altor sisteme n care localizarea enteral este accidental (tuberculoza, antrax)

Schimbarea structurii florei bacteriene specifice intestinului care poate aprea n unele situaii patologice (colit pseudomembranoas) sau ca o consecin a seleciei unui grup de germeni, consecutiv antibioterapiei.

n etiologia acestora, trebuie avute n vedere, n primul rnd enterobacteriile patogene pentru care diagnosticul etiologic este obligatoriu i anume:

infecii cu germeni din grupul Shigella

infecii cu germeni din grupul Salmonella

infecii cu germeni din grupul Escherichia, serotipuri enteropatogene

n toxiinfeciile alimentare pot fi avute n vedere i alte grupe de enteropatogeni: Staphylococus, Yersinia, Vibrio, Aeromonas, Pseudomonas, Bacillus, Clostridium etc.

Datorit faptului c o mare varietate de microorganisme folosesc calea enteral pentru ptrunderea n organism cu consecine patogenice i clinice, coprocultura este unul din cele mai solicitate examene de laborator. n mod normal n materiile fecale ale omului nu se gsete snge. Numai n unele boli ale tubului digestiv care produc sngerri (hemoragii) cum sunt ulcerul gastric, ulcerul duodenal, enterita, colita, sngele apare n materiile fecale. Cnd hemoragia este mare i provine din partea superioar a tubului digestiv (stomac, intestin) scaunul are un aspect negricios din cauza digerrii sngelui respectiv. Daca hemoragia provine din partea inferioar a intestinului (hemoroizi) atunci sngele nu este digerat i scaunul apare colorat n rou. n cazurile n care hemoragia este mic (hemoragie ocult), chiar dac este permanent, scaunul nu pare colorat i n aceast situaie numai laboratorul poate preciza dac este snge n scaun. n vederea acestei analize persoana suspect de hemoragie trebuie s urmeze ntocmai, timp de 3 zile regimul alimentar prescris de medic, compus din lapte, brnz, finoase i cartofi. Se vor scoate din alimentatie carnea de orice fel, oule, legumele verzi i nu se va lua nici un medicament. Dup acest timp se va recolta o cantitate de materii fecale ct o nuc, care se va transporta la laborator ntr-un recipient de material plastic. Materiile fecale nu trebuie s fie n contact cu vase sau recipiente din fier. Este bine ca persoanele care au hemoroizi ce sngereaz, s informeze de acest lucru pe medic, pentru c n acest caz rezultatul analizei nu are nici o valoare. De asemenea, persoanele crora le sngereaz gingiile vor evita s se spele pe dini nainte de analiz, cci sngele nghiit poate modifica rezultatul analizei.

Parazii intestinali

De regul, paraziii intestinali se prezint sub form de viermi intestinali: limbrici (ascaris lumbricoides), oxiuri (enterobius vermicularis), panglic (taenia), tricocefal i alii. Paraziii aduli (viermii intestinali) se elimin prin materiile fecale i pot fi observai chiar de ctre bolnavi, dac se inspecteaz atent materiile fecale. Se recomand ca prinii s observe din cnd n cnd scaunul copiilor lor pentru a putea descoperi din timp prezena viermilor intestinali.

Dac s-au descoperit n materiile fecale parazii aduli i acetia sunt recunoscui, nu mai este necesar aducerea de materii fecale la laborator pentru analiz. n cazul n care parazitul nu poate fi identificat sau recunoscut, atunci acesta se introduce cu o pens ntr-o sticl cu spirt sanitar i se aduce la laborator pentru analiz. Nu se vor aduce la analiz paraziti sau fragmente de parazii n stare uscat. n majoritatea cazurilor de parazitism intestinal, nu se pot pune n eviden paraziii aduli. De aceea, se caut n materiile fecale oule de parazii. Aceste ou sunt foarte mici, de civa microni i nu se vd cu ochiul liber ci numai la microscop. Dar n materiile fecale nu se gsesc totdeauna oule paraziilor, deoarece acetia nu produc ou n fiecare zi, ci la diferite intervale de timp. Ca urmare a acestui fenomen, analiza pentru oule paraziilor trebuie repetat de 2-3 ori la intervale de cte o sptmn, pentru a putea surprinde faza cnd paraziii depun ou.

Depistarea oulor de parazii intestinali, impune un tratament de urgen pentru omorrea i eliminarea paraziilor aduli din intestin, deoarece acetia hrnindu-se cu snge i cu substanele hrnitoare destinate organismului omului produc slbirea i anemierea acestuia. Dup dou sptmni de la terminarea tratamentului se repet analiza pentru ou de paraziti. Dac dup trei analize efectuate la interval de dou sptmni rezultatele sunt negative, bolnavul se poate considera vindecat.

6