80221686 prezentare licenta c

35

Click here to load reader

Upload: krikom

Post on 07-Dec-2015

109 views

Category:

Documents


4 download

DESCRIPTION

usamv

TRANSCRIPT

Page 1: 80221686 Prezentare Licenta c
Page 2: 80221686 Prezentare Licenta c

Scopul cercetărilor a fost obţinerea unor biofungicide pe bază de microorganisme utile în combaterea biologică a fungilor fitopatogeni din genurile Botrytis şi Penicillium care produc boli diferitelor plante de cultură şi depreciază calitatea produselor agroalimentare. Pentru realizarea scopului propus s-au avut în vedere următoarele obiective majore:

Izolarea şi identificarea fungilor fitopatogeni din genurile Botrytis şi Penicillium;

Stabilirea potenţialului antifungic şi a spectrului de acţiune al tulpinilor de microorganisme;

Obţinerea biofungicidelor;

Testarea in vitro şi in vivo a biofungicidelor.

Page 3: 80221686 Prezentare Licenta c

TULPINILE DE FUNGI FILAMENTOŞI UTILIZATE ÎN EXPERIMENTE

Nr.crt.

Tulpina Notaţia de

lab.Povenienţa

1. Botrytis cinerea F37Colectia de culturi a Laboratorului de Microbiologie

U.S.A.M.V. Bucuresti, F.I.F.I.M. (căpşuni)

2. Botrytis cinerea F38 I.C.D.P.P. DR. LILIANA ŞTEFAN (căpşuni)

3. Botrytis cinerea F39 I.C.D.P.P. DR. LILIANA ŞTEFAN (struguri)

4. Botrytis cinerea F47 I.C.D.P.P. DR. LILIANA ŞTEFAN (mere)

5. Penicillium sp. F40Colectia de culturi a Laboratorului de Microbiologie

U.S.A.M.V. Bucuresti, F.I.F.I.M. (mandarine)

6. Penicillium sp. F42Colectia de culturi a Laboratorului de Microbiologie

U.S.A.M.V. Bucuresti, F.I.F.I.M. (castraveţi)

7. Penicillium sp. F43Colectia de culturi a Laboratorului de Microbiologie

U.S.A.M.V. Bucuresti, F.I.F.I.M. (portocale)

8. Penicillium sp. F45Colectia de culturi a Laboratorului de Microbiologie

U.S.A.M.V. Bucuresti, F.I.F.I.M. (lămâi)

9. Penicillium sp. F46Colectia de culturi a Laboratorului de Microbiologie

U.S.A.M.V. Bucuresti, F.I.F.I.M. (lămâi)

Page 4: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 1

Atac de Botrytis cinerea

pe căpşuni

Fig. 2

Caise infectate cu

Monilinia laxa, M. fructigena,

Penicillium sp., Rhizopus sp.

Page 5: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 3

Mandarină infectată

cu Penicillium italicum

Fig. 4

Portocală infectată cu

Penicillium digitatum

Fig. 5

Lămâie infectată cu

Penicillium italicum

Page 6: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 6

Botrytis cinerea

(400 x)

Fig. 7

Penicillium digitatum

(400 x)

Fig. 8

Penicillium expansum

(400 x)

Fig. 9

Penicillium italicum

(400 x)

Page 7: 80221686 Prezentare Licenta c

Nr. Crt.

Microorganisme Notaţia de

laboratorProvenienţa

1. Saccharomyces cerevisiae L2 U.S.A.M.V.-Bucureşti, Conf.dr.Mirela Burcea

2. Saccharomyces cerevisiae var. ellipsiodeus L8 U.S.A.M.V.-Bucureşti, Conf.dr.Mirela Burcea

3. Saccharomyces chevalieri L9 U.S.A.M.V.-Bucureşti, Conf.dr.Mirela Burcea

4. Saccharomyces cerevisiae L12 U.S.A.M.V.-Bucureşti, Conf.dr.Mirela Burcea

5. Saccharomyces florentinus L13 U.S.A.M.V.-Bucureşti, Conf.dr.Mirela Burcea

6. Pichia membranaefaciens L16 U.S.A.M.V.-Bucureşti, Conf.dr.Mirela Burcea

7. Kloeckera apiculata L17 U.S.A.M.V.-Bucureşti, Conf.dr.Mirela Burcea

8. Saccharomyces sp. L18 U.S.A.M.V.-Bucureşti, Conf.dr.Mirela Burcea

9. Candida glabrata L20 (182) I.C.C.F.-Bucureşti

10. Candida tropicalis L21 I.C.C.F.-Bucureşti

11. Candida guilliermondii L24 I.C.C.F.-Bucureşti

12. Candida sp. L25 I.C.C.F.-Bucureşti

13. Candida guilliermondii L26 I.C.C.F.-Bucureşti

14. Saccharomyces sp. L27 Izolate proprii (portocală)

15. Metschnikowia pulcherrima L28 (SG2) Izolate proprii (bace de struguri)

16. Metschnikowia pulcherrima L29 (SG1) Izolate proprii (bace de struguri)

17. Saccharomyces chevalieri L30 (Sch) I.C.D.P.P.-Bucureşti,Ing.dr. Liliana Aurora Ştefan

18. S. cerevisiae 17/17Lab. de Genetică al Fac. de Biologie

Prof. dr. Tatiana Vassu19. S. cerevisiae 9744C Prof. dr. Tatiana Vassu20. S. cerevisiae 10701C Prof. dr. Tatiana Vassu21. S. cerevisiae SMR4 Prof. dr. Tatiana Vassu

Page 8: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 10

Metschnikowia pulcherrima

L28 (400 x):

Celule vegetative şi ască cu ascospor

Fig. 11

Metschnikowia pulcherrima

L29 (400 x)

Celule vegetative şi ască cu ascospor

Page 9: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 12

Fermentarea glucidelor:

glucoză, sucroză, maltoză, trehaloză, lactoză

Fig. 13

Dezvoltarea la 4 grade Celsius

Page 10: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 14

YNB fără sursă de carbon

Fig. 15

YNB cu sucroză

Fig. 16

YNB cu glicerol

Fig. 17

YNB cu

galactoză

Fig. 18

YNB cu

manitol

Fig. 19

YNB cu

celobioză

Page 11: 80221686 Prezentare Licenta c

Mediul Saccharomyces chevalieri L30

Saccharomyces chevalieri L9

L28 L29Saccharomyces cerevisiae 208

Pichia anomala

L33

YNB fără glucide - - - - - -

YNB cu sucroză + + + + + +

YNB cu glicerol + + + + - -

YNB cu galactoză

+ + + + + +

YNB cu manitol + + + + + +

YNB cu celobioză

- + + + - -

YNB cu amidon + + - - + -

YNB cu trehaloză

- - + + - -

Acetat de potasiu

+ + + + + +

Page 12: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 20

Rezultatele testului Auxacolor 2:

Tulpina L28

Fig. 21

Rezultatele testului Auxacolor 2:

Tulpina L29

Page 13: 80221686 Prezentare Licenta c

Tulpina Martor GLU MAL SAC GAL LAC RAF INO

L28 - + + + + - - -

L29 - + + + + - - -

Tulpina CEL TRE ADO MEL XYL ARA HEXPOX/PRO

L28 + + + + - - + +

L29 + + + + - - + +

Glu= glucoză, Mal= maltoză, Sac= zaharoză, Gal= galactoză, Lac= lactoză, Raf= rafinoză, Ino= inozitol, Cel= celobioză, Tre= trehaloză, Ado= adonitol, Mel= melezitoză, Xyl= xiloză, Ara= arabinoză, Hex= N-acetil-galactozaminidaza (hexozaminidaza), Pox= fenoloxidaza, Pro= prolin-arilamidaza.

Page 14: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 22

1 zi (faţă; verso)

Fig. 23

5 zi (faţă; verso)

Fig. 24

10 zi (faţă; verso)

Fig. 25

25 zi (faţă; verso)

Fig. 26

30 zi (faţă; verso)

i)

Page 15: 80221686 Prezentare Licenta c

Nr. crt.

Tulpini de levuriTulpini fungice – Penicillium sp.

F40 F42 F43 F45 F46

1. Saccharomyces cerevisiae (L2) ++ ++ ++ ++ ++

2. S. cerevisiae var. ellipsoideus (L8) ++ ++ ++ ++ ++

3. S. chevalieri (F9) ++ ++ ++ ++ ++

4. S. cerevisiae (L12) ++ ++ ++ ++ ++

5. S.florentinus (L13) - - - - -

6. Pichia membranaefaciens (L16) - - - - -

7. Kloekera apiculata (L17) - - - - -

8. Saccharomyces sp.(Ll8) ++ ++ ++ ++ ++

9. Candida glabrata (L20) + + + + +

10. C. tropicalis (L21) - - - - -

11. C. guilliermondii (L24) - - - - -

12. Candida sp. (L25) - - - - -

13. C. guilliermondii (L26) + + + + +

14. Saccharomyces sp. (L27) - - - - -

15. Metschnikowia pulcherrima (L28) ++++ ++++ ++++ ++++ ++++

16. Metschnikowia pulcherrima (L29) ++++ ++++ ++++ ++++ ++++

17. S. chevalieri (L30) ++ ++ ++ ++ ++

-= nu inhibă deloc; + = inhibă foarte puţin; ++ = inhibă moderat; +++ = inhibă bine; ++++ = inhibă foarte bine

Page 16: 80221686 Prezentare Licenta c

L2

L9

L1

3

L1

7

L2

0

L2

4

L2

6

L2

8

L3

0

F40

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4P

ropr

ieta

ti an

tifun

gice

Tulpinile de levuri testate

F40

F42

F43

F45

F46

Fig. 27 Interacţia dintre diferite tulpinide levuri şi fungii filamentoşi de depozit din genul Penicillium sp.

Page 17: 80221686 Prezentare Licenta c

Nr.crt.

Levuri anta

goniste

Diametrul (mm) coloniilor de Penicillium sp. (10 zile)

E(%)F40 F42 F43 F45 F46 M

1. L2 36 35 36 35 36 60 40,6

2. L8 36 34 35 34 37 60 41,3

3. L9 33 34 37 35 36 60 41,6

4. L12 36 37 35 37 36 60 39,6

5. L18 34 35 36 34 35 60 42

6. L20 46 50 48 48 50 60 19,3

7. L26 50 47 46 50 49 60 20,3

8. L28 12 11 10 12 11 60 81,3

9. L29 10 12 12 10 11 60 82

10. L30 36 34 35 35 36 60 41,3

Page 18: 80221686 Prezentare Licenta c

În privinţa stabilirii eficacităţii in vitro a microorganismelor antagoniste asupra tulpinilor de fungi fitopatogeni s-a folosit formula:

E (%) = ( martor - interacţiune)/ martor x 100

unde: E(%)= eficacitatea (%) martor = diametrul coloniilor martor (mm) interacţiune = diametrul coloniei patogenului

în urma interacţiunii cu antagonistul (mm).

Page 19: 80221686 Prezentare Licenta c

L2 L8 L9 L12 L18 L20 L26 L28 L29 L30

Fungi de depozit

0102030405060

7080

90

Efi

caci

tate

a (%

)

Fungi de depozit

Fig. 28 Eficacitatea tulpinilor de levuri antagoniste

Page 20: 80221686 Prezentare Licenta c

Pentru ca o tulpină de levuri să fie încadrată în categoria agenţilor biologici de combatere, aceasta trebuie să întrunească o serie de condiţii şi anume:

să producă sursa de inocul în cantitate mare;

să supravieţuiască în condiţii de mediu extern;

să fie tolerantă faţă de alţi antagonisti;

să germineze şi să crească rapid pentru ocuparea substratului organic;

să producă substanţe eficace şi stabile chiar dacă se cultivă pe un substrat mai sarac pe care

creşterea este foarte slabă;

să nu afecteze planta prin acţiunea substanţelor produse;

să aibă valorile optime ale temperaturii, pH-ului şi umidităţii diferite de cele ale patogenului;

Page 21: 80221686 Prezentare Licenta c

Biomasa de levuri obţinută pe diferite medii de creştere, după 48 şi 72 ore de la cultivare

Mediul de culturăBiomasa g/l

48 ore 72 oremediul cu decoct de porumb 15,4 15,8

mediul Weindling 12,1 12,3mediul Czapek 0,1 0,2

mediul malţ-agar 10,7 10,8mediul YM Agar 20,8 22,6mediul YM Lichid 22,2 30,4

mediul cu ape glicerinoase din uleiuri vegetale (25%; 50%; 100%)

28,1 33,8

mediul cu ape glicerinoase din grăsime tehnică (25%; 50%; 100%)

28,0 33,8

Randamentele în biomasă ale diferitelor variante experimentale testate

VariantaExperimentală

Biomasa umedă*

levuri (g/l)Biomasa uscată*

levuri (g/l)

Flacoane Erlenmeyer (0,5) 29,92 ± 1,64 7,75 ± 0,74

Bioreactor 3 litri (5 l) 30,15 ± 2,21 7,84 ± 0,93

Bioreactor 15 litri (25 l) 29,64 ± 2,26 7,56 ± 0,87

*media a cel puţin trei determinări

Page 22: 80221686 Prezentare Licenta c

Influenţa temperaturii asupra creşterii levurilor pe mediu lichid, aerat şi agitat

Temperatura (oC) Biomasa umedă* (g/l) Biomasa uscată* (g/l)

25 21,17± 0.84 4,62±0,57

28 28,72 ± 1,66 6,67 ± 0,61

30 24,47 ± 1,04 5,74 ± 0,69

* media a cel puţin trei determinări

Efectul ratei de aerare asupra randamentului de biosinteză în biomasa de levuri

Rata de aerare(l aer/l mediu/min)

Biomasaumedă* (g/l)

Biomasauscată* (g/l)

0,50 10,23 ± 1,37 3,42 ± 0,42

0,75 11,35 ± 1,08 3,94 ± 0,37

1,00 12,41 ± 1,67 4,42 ± 0,54

1,25 12,67 ± 1,22 4,58 ± 0,48

1,50 11,88 ± 1,16 3,87 ± 0,35

* media a cel puţin trei determinări

Page 23: 80221686 Prezentare Licenta c

Ingredient Părţi

Biomasă 1,0

Alcool polivinilic 0,2

Carboximetilceluloză sodică 0,2

Lecitină 0,2

Dispersil 0,2

Acid citric 0,2

Dextroză 1,5

Celuloză 0,3

Page 24: 80221686 Prezentare Licenta c

Caracteristicile biopreparatelor realizate la scară pilot cu biomasă uscată în prezenţă de antioxidanţi şi

formulat ca pulbere umectabilă

Nr. crt.

Varianta experimentală

Număr levuri viabile (ufc/g)

Suspenda-bilitate (%)

Umectabi-litate (min)

Azot aminic (%)

1.staţie pilot iniţial (imediat după amestecare)

1,22x108 93 <1 4,3

2.staţie pilot 30 zile de

la producere1,20x108 94 <1 4,5

3.staţie pilot 60 zile de

la producere1,17x108 93 <1 4,6

4.biopreparat realizat la

nivel de laborator1,7x108 92 <1 4,7

Suspendabilitate = 5-(m2-m1)/5*111în care:

m1 - masa (tara) capsulei de cântărire;m2 - masa capsulei şi a suspensiei adăugate;

5 - masa de produs luată iniţial în lucru

Page 25: 80221686 Prezentare Licenta c

Nr. crt. Caracteristici Metoda de analiză Condiţii de admisibilitate

1.1. Conţinut ingredient activ Tehnică originală Min. 25% din masa totală

1.2. Impurităţi Tehnică originală Max.2% din conţinutul pct.1.1.

1.3. Umiditate SR ISO 760:1994 Max.5% din masa totală

1.4. Suspendabilitate CIPAC MT 15.1. Min. 90%, în apă dură AOAC

1.5. Spumă persistentă CIPAC MT 42.2. Max. 3 ml după un minut

1.6. Umectabilitate CIPAC Completă - 1 min, fără agitare

1.7. Reziduu pe sită CIPAC MT 59.1. Max. 2% pe sită test de 75 m

1.8.Stabilitate la păstrare la

temperatura camereiCIPAC MT 46.1.

1 an de zile, în locuri ferite de temperaturi, umiditate şi lumină

excesive

1.9. pH-ul suspensiei CIPAC MT 59.1. 7,0 0,5 pH

1.10. Caracteristici microbiologice

1.10.1 Număr total de bacterii Metodă originală Max. 104 ufc/g produs

1.10.2Microorganisme

fitopatogeneMetodă originală Lipsă

Page 26: 80221686 Prezentare Licenta c

Prevenirea atacului produs de Botrytis cinerea prin mijloace biologice în plantaţ.ia de căpşun S.C.D.P. Bucureşti

Varianta

Concentraţia

spori/ml%

Soiul

Favette Hood Cardinal Pandora

GA% E% GA% E% GA% E% GA% E%

Biofungicid (suspensie levuri L28)

2 x 106 3,6 81,0 4,2 82,2 5,1 76,8 6,9 85,3

6 x 106 3,1 83,7 3,4 85,6 4,7 78,6 6,5 86,1

Biofungicid (suspensie levuri L29)

2 x 106 4,1 78,4 4,9 79,2 8,3 62,3 13,7 69,5

6 x 106 3,9 79,5 4,5 80,9 4,6 79,1 7,1 84,9

Biofungicid (suspensie levuri L30)

2 x 106 3,8 80,0 5,3 77,5 6,8 69,1 12,8 72,8

6 x 106 3,3 82,6 2,6 88,5 5,9 73,1 10,2 78,3

Biofungicid (suspensie levuri L28

şi L29)

2 x 106 2,9 84,7 3,1 86,9 3,1 85,9 8,2 82,5

6 x 106 2,5 86,8 2,3 90,2 2,4 89,1 6,5 86,2

Topsin M70 0,07 2,4 89,1 2,1 91,1 1,4 93,6 2,3 95,7

Plante netratate - 19,0 - 23,6 - 22,0 - 47,0 -

DL 5% = 0,9 1,6 2,3 3,1

DL 1% = 1,2 2,3 3,2 4,2

DL 0,5% = 1,6 3,5 4,3 5,7

*suspensiile de drojdii aplicate în câmp au fost îmbogăţite cu 1% glucoză

Page 27: 80221686 Prezentare Licenta c

Experienţele care au vizat demonstrarea eficacităţii biofungicidelor obţinute pe baza tulpinilor de levuri antagoniste faţă de putregaiul cenuşiu al căpşunului produs de Botrytis cinerea şi monilioza caiselor produsă de Monilinia fructigena, M. Laxa au fost efectuate pe fructe care au fost recoltate din câmpul experimental al Staţiunii de Cercetări Pomicole Băneasa Bucureşti :

căpşun - soiurile Favette, Cardinal, Hood, Pandora şi hibridul H 91-2-72;

caise - soiul Dacia.

Variantele experimentale au fost:

fructe netratate sănătoase;

fructe tratate cu biofungicide obţinute pe baza levurilor antagoniste L28, L29, L28+L29 în

concentraţie de 2 x 106 spori/ml, comparativ cu varinatele V1, V2 şi V3;

V1 a fost varianta stropită cu apă distilată (martor);

V2 - varianta stropită cu Topsin;

V3 - varianta stropită cu suspensie de levuri

Page 28: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 29

Fructe tratate depozitate

Fig. 30

Fructe netratate depozitate

48 ore

Fig. 31

Fructe tratate depozitate

10 zile

Page 29: 80221686 Prezentare Licenta c

Fig. 32

Caise netratate depozitate la 4 ºC după 7 zile

Fig. 33

Caise tratate după depozitare la 4 ºC 20 de zile

Page 30: 80221686 Prezentare Licenta c

Rezultatele experimentelor realizate ne-au permis enunţarea mai multor concluzii generale.

testele auxanografice şi kitul Auxacolor2 au relevat faptul că tulpinile L28 şi L29 pot creşte pe glucoză, galactoză, sucroză, maltoză, trehaloză, glicerol, manitol, citrat, celobioză, adonitol, melezitoză şi nu pot creşte lactoză, rafinoză amidon rafinoză, abinoză, au activitate N-acetil-galactozaminidazică (hexozaminidazică), fenoloxidazică şi prolin-arilamidazică;

testele de fermentaţie au evidenţiat doar fermentarea glucozei şi cresc slab la concentraţii mari de glucoză;

tulpinile L28 şi L29 cresc în intervalul de temperatură 4oC-30oC, sunt sensibile la cicloheximidă;

tulpinile de levuri L28 şi L29 aparţin speciei Metschnikowia pulcherrima, iar pigmentul este pulcherrimin;

Page 31: 80221686 Prezentare Licenta c

Rezultatele experienţelor realizate în capitolul de antagonism microbian permit formularea următoarelor concluzii:

evaluarea antagonismului levuri-fungi filamentoşi de depozit a evidenţiat faptul că tulpinile de levuri izolate de pe bace de struguri L28, L29 au manifestat un efect antifungic puternic faţă de fungii de depozit din genul Penicillium sp. şi Botrytis cinerea;

sporularea fungilor din genul Penicillium sp. a fost inhibată în timpul interacţiunii cu levurile;

capacitatea tulpinilor de levuri L28 şi L29 de-a inhiba creşterea şi dezvoltarea fungilor fitopatogeni de depozit a fost mai mare pe mediile complexe decât pe mediile minimale;

Page 32: 80221686 Prezentare Licenta c

Experimentele realizate în capitolul de tehnologie de obţinere a biofungicidelor ne permit formularea următoarelor concluzii:

mediul cel mai favorabil selectat pentru obţinerea de biomasă este mediul cu ape glicerinoase;

randamentele de biomasă ale mediului folosit se păstrează în cazul ridicării la scară, în bioreactoare de mici dimensiuni cu mediu lichid, aerat şi agitat;

rata de aerare superioară nu fa vorizează în mod semnificativ acumularea de biomasă în mediile lichide utilizate, rata de aerare optimă determinată fiind cuprinsă între 0,75 şi 1,25 l aer/l mediu/min;

studiul de viabilitate a arătat că bioprodusele obţinute sunt stabile un an în locuri ferite de temperaturi, umiditate şi lumină excesive;

biofungicidele realizate cu biomasă de levuri tulpinile L28, L29 şi L28+L29, închisă în gel de alginat de calciu, uscată în curent de aer şi condiţionată ca pulbere umectabilă, prezintă o stabilitate bună în condiţiile testului de stabilitate efectuat;

biofungicidele destinate tratamentelor în timpul vegetaţiei sau în depozit, condiţionate ca pulbere umectabilă s-au realizat prin amestecarea biomasei uscate (1 parte), alcool polivinilic (0,2 părţi), carboximetilceluloză sodică (0,2 părţi), lecitină (0,2 părţi), dispersil (0,2 părţi), acid citric (0,2 părţi), dextroză (1,5 părţi), celuloză microcristalină 0,3 părţi);

biopreparatele obţinute pe baza tulpinilor de levuri Metschnikowia pulcherrima L28, L29 şi L28+L29 au fost condiţionate sub formă de pulbere umectabilă în două formulări: F1 = 2x106 CFU/ml şi F2 = 6x106 CFU/ml.

Page 33: 80221686 Prezentare Licenta c

Analiza şi interpretarea rezultatelor experimentelor realizate în capitolul de testare in vitro şi in vivo în condiţii de câmp a biofungicidelor ne permit să formulăm următoarele concluzii:

în vederea prevenirii atacului de putregai cenuşiu, produs de ciuperca Botrytis cinerea, în câmpul experimental de la Staţiunea de Cercetare Dezvoltare Pomicolă Bucureşti s-au aplicat biofungicide pe bază de suspensii de levuri antagoniste la căpşun, utilizând: tulpina L28 Metschnikowia pulcherrima, tulpina L29 Metschnikowia pulcherrima şi amestecul de tulpini L28 şi L29;

în experimentare s-au utilizat 2 concentraţii de bioprodus: 2 x 106 spori/ ml şi 6 x 106 spori/ ml;

biofungicidul obţinut pe baza tulpinii L28 Metschnikowia pulcherrima, a înregistrat cea mai ridicată eficacitate pentru soiul cu coacere târzie Pandora E = 85,3% (pentru concentraţia de 2 x 106 spori/ ml), respectiv E = 86,1% (pentru concentraţia de 6 x 106 spori/ ml);

biofungicidul obţinut pe baza tulpinii L29 Metschnikowia pulcherrima a prezentat eficacităţi mai mici, comparativ cu tulpina L28, valoarea maximă obţinută E = 79,2% (pentru concentraţia de 2 x 106 spori/ ml) şi respectiv E = 84,9% (pentru concentraţia de 6 x 106 spori/ ml);

biofungicidul obţinut pe baza amestecului de levuri L28 şi L29 (tulpini de Metschnikowia pulcherrima) a înregistrat cele mai ridicate eficacităţi în controlul patogenului Botrytis cinerea E= 86,8 - 90,2%, atunci când s-a utilizat o concentraţie în spori de 6 x 106 spori/ ml;

s-a constatat efectul de sinergism dintre tulpinile L28 şi L29 ale speciei Metschnikowia pulcherrima, eficacităţile obţinute în amestec depăşindu-le pe cele obţinute atunci când tulpinile au fost utilizate separat;

ciuperca Botrytis cinerea – agentul etiologic al putregaiului cenuşiu a fost analizată în condiţii de câmp, ca o etapă premergătoare studiilor în condiţii de depozitare a fructelor, deoarece reprezintă patogenul care produce pierderi importante cantitative şi calitative de producţie prin alterări ale fructelor atât în perioada de vegetaţie, cât şi în special la fructele păstrate şi comercializate fără refrigerare.

tratamentele antifungice (cu suspensiile de levuri) nu afectează în mod negativ calitatea fructelor de căpşun, parametrii fizico-chimice ai fructelor depinzând de soi.

Page 34: 80221686 Prezentare Licenta c

Rezultatele obţinute în experimentele in vivo realizate pentru testarea biofungicidelor în condiţii de depozitare ne permit formularea următoarelor concluzii:

tratamentele biologice au vizat combaterea fungilor fitopatogeni de depozit, care determină deprecierea calitativă şi cantitativă a fructelor de căpşun: Botrytis cinerea, Penicillium expansum şi Rhizopus stolonifer;

fructele de căpşun încadrate în grupa excesiv de perisabile netratate postrecoltare s-au depreciat cantitativ şi calitativ după 48 ore de păstrare la temperatura de 4ºC;

tratamentele postrecoltare cu biofungicide pe bază de levuri (tulpinile Metschnikowia pulcherrima L28, L29, L28+L29 şi Saccharomyces chevalieri L30) au permis ca durata perioadei de depozitare la 4oC să fie de cel puţin 10 zile în condiţii optime de calitate a fructelor;

eficacitatea medie în controlul biologic postrecoltare a fost de 95 % fructe sănătoase, după 10 zile, comparativ cu varianta netratată la care gradul de depreciere a fructelor a fost de 60 % după 2 zile de depozitare;

la caise tratamentele biologice au vizat combaterea fungilor fitopatogeni de depozit, care determină deprecierea calitativă şi cantitativă a acestora: Monilinia fructigena, Botrytis cinerea, Penicillium expansum, Rhizopus stolonifer, Alternaria alternata;

eficacitatea medie în controlul biologic postrecoltare cu biofungicide pe bază de levuri (tulpinile Metschnikowia pulcherrima L28, L29, L28+L29 şi Saccharomyces chevalieri L30) a fost de 100% fructe sănătoase, după 20 zile de depozitare la 4ºC, comparativ cu fructele de caise netratate la care gradul de depreciere a fost de 80% după 7 zile de depozitare în aceleaşi condiţii;

după o depozitate de 20 zile, fructele de caise tratate cu suspensii de drojdii (Metschnikowia pulcherrima şi Saccharomyces chevalieri), nu au prezentat modificări ale caracteristicilor de calitate (miros, gust şi culoare);

tratamentele efectuate după recoltare fructelor de căpşun şi caise nu influenţează negativ evoluţia parametrilor fizico-chimici ai calităţii acestora.

Page 35: 80221686 Prezentare Licenta c