BIOLOG PRINCIPALSEVER GOGO1

ORICE PROBA OBTINUTA DE LA UN SUBIECT IN VEDEREA ANALIZARII EI (EXSUDAT, PUROI, URINA, MATERII FECALE s.a)RECOLTATA CORESPUNZATOR BOLII PACIENTULUIRECOLTATA INAINTEA INCEPERII TERAPIEI CU ANTIBIOTICERECOLTATA IN CONDITII ASEPTICE2

RECOLTATA IN CANTITATE CORESPUNZATOARE INSOTITA DE UN BULETIN DE TRIMITERE:Nume, prenume, data nasteriiSolicitarea de examinareData si ora recoltariiEventualul tratament cu antibiotice Diagnosticul clinic prezumtivSemnatura si parafa medicului

Nu se accepta in laborator prelevatele:NemarcateCare nu au respectat conditiile de transportDuble, cu aceeasi solicitareNecorespunzatoare la triajul microscopic

3

Preferabil in decurs de 2 orePentru bacterii sensibile: N. gonorrhoeae N. meningitidis H. influenzae Shigella se face insamantare imediata Pastrarea se face in functie de natura prelevatului : - la temperatura camerei - in mediu de conservareNU se pastreaza la frigider: prelevatele oculare, otice, genitale 4

Superioare

RiniteFaringite(angine)SinuziteOtiteLaringiteInferioare

Traheite BronsitePneumoniiBronho-pneumoniiPleurezii5

majoritatea sunt viralepot apare suprainfectii bacteriene cu germeni conditionat patogeni6

70% sunt viralerestul sunt bacteriene: - frecvent: Streptococcus pyogenes - apoi: - Streptococi grup C,G - C. diphteriae - bacterii anaerobe: - N. gonorrhoeae - N. meningitidis - H. influenzae - C. pneumoniae - T. pallidum7

8Staphylococcus aureus flegmon amigdalian - asociat cu S. pyogenesfara semnificatie: - Enterobacteriaceae - Pseudomonas spp.Candida albicans:- interpretare in functie de: - aspectul clinic - abundenta culturii

Recoltare: - cu apasator de limba - de pe peretele posterior al faringelui - de pe amigdale din zonele inflamate9

Transport:- in mai putin de 2 ore la temperatura camerei - pe mediu de transport in 24 h Pentru N. gonorrhoeae insamantare imediata

Examinare functie de solicitare S.pyogenes cultivare pe geloza-sange - rezultat pozitiv posibil in 24 h - rezultat negativ in 48 de ore - cultura pozitiva: - test la Bacitracina pozitiv pentru S. pyogenes - negativ necesita latexaglutinare pentru celelalte grupe de Streptococi(C, G etc) NU se recomanda frotiu10

C.diphteriae frotiu: coloratie speciala de suspiciune - cultura mediu special(Tinsdale) cu rezultat in 4-7 zileFusospirili diagnostic rapid: frotiu la patul bolnavului. NU se face recoltare pe tampon N. gonorrhoeae, N. meningitidis frotiu pentru diagnostic - cultura conditii de anaerobioza, 72 h11

Arcanobacterium haemolyticum - cultiva pe geloza-sange ca si Streptococul (asemanator cu Streptococul de grup B) - da angina si posibil eruptie asemanatoare scarlatinei - este sensibil la Penicilina 12

- NU da complicatii postinfectioase - NU necesita profilaxie cu Moldamin(Retarpen) Diferentierea pe frotiu: exista bacili Gram pozitivi in loc de coci Gram pozitivi

Recoltare: - tampon inmuiat in SF steril - de obicei cate un tampon pentru fiecare fosa nazala - se introduce tamponul 1-2 cm in fosa nazala - se roteste ferm pe mucoasaTransport: in 2 h la temperatura camerei13

Pastrare: 24 h la temperatura camereiScop: - portajul de S. aureus C. diphteriaeFrotiu optionalCultura

ACUTE

H. influenzaeM. pneumoniae

CRONICES. pneumoniaeH. influenzaeH. parainfluenzaeS. aureusKlebsiella pneumoniaeE.coliEnterobacter spp.P. aeruginosa s.a Proteus spp.Citrobacter spp.14

Streptococcus pneumoniaeHaemophilus influenzaeMoraxella catarrhalisChlamydia pneumoniaeMycoplasma pneumoniae etc.Anaerobi in pneumonii de aspiratie

15

Enterobacteriaceae frecvent Klebsiella spp.S. aureusP. aeruginosa

16

Alti bacili Gram negativi nefermentativi - ex. Acinetobacter spp.

Anaerobi pneumonii de aspiratie

EXPECTORATA-necesita supraveghere-clatire cu apa-tuse profunda-recipient steril cu capac insurubat-cantitate suficientaTransport: 2 h la temperatura camereiPastrare: 24 h la 4C

INDUSA-curatare limba si gingii-clatire cu apa-inhalare sol. salina izotona 3-10%, aprox. 25ml-recipient steril cu capacTransport:2h la temperatura camereiPastrare: 24h la 4C17

NU se recomanda cultura pentru: - Candida albicans contaminare orala - mobilizare redusa - Aspergillus spp. mobilizare redusa - bacterii anaerobe18

Prelucrare: - spalare de 3 ori in SF steril - 2 frotiuri triaj citologic:

Grupa

12 3* 4 5**6Celule epiteliale scuamoase

>25>25>2510-2525

Alte modalitati de recoltare:

- prin bronhoscopie:Aspirat hipofaringianLavaj bronho-alveolarPeriere bronsica

- aspirat transtraheal

-aspirat pulmonar transtoracic

20

EXTERNA-curatarea conductului cu tampon umezit in SF steril-recoltare prin rotire viguroasa-pe mediu de transportTransport: 2 h la temperatura camereiPastrare: 24 h la 4CMEDIE-medicul ORL-timpan integru: -spalare cu apa/sapun -recoltare cu seringa prin aspirare-timpan perforat: -recoltare cu tampon flexibil prin speculum auricular-pe mediu de transportTransport: 2h la temperatura camereiPastrare: 24h la 4C

21

EXTERNAPatogeni: - P. aeruginosa - ocazional S. aureusFlora normala: -Stafilococi coagulazo-negativi -S. pneumoniae -Enterobacterii -P. aeruginosa daca nu se coreleaza cu frotiul(reactia inflamatorie)INTERNAPatogeni: -S. pneumoniae -S. pyogenes -H. influenzae -mai rar: Enterobacterii, S. aureus

22

Frecvent: - S. pneumoniae - H. influenzae - S. pyogenesRar: - Neisseria spp. - Moraxella catarrhalis - Anaerobi

23

Recoltare: medicul ORL

Transport rapid

Examinare microscopica si cultivare

NU se investigheaza bacteriologic( poate apare spasm laringian la intrarea cu tamponul)Se administreaza terapie oarba

24

Flora normala: -Stafilococi coagulazo-negativi~94%

-hemofili -corinebacterii -neisserii

25

Semnificatie certa: - virusuri, fungi - H. influenzae biovar III (aegyptius) - Chlamydia - N. gonorrhoeae, N. meningitidis - Treponema pallidum - Mycobacterium tuberculosis - Corynebacterium diphteriae

Semnificatie posibila: - S. pneumoniae - S. pyogenes - S. aureus - Enterobacterii - bacili Gram negativi nonfermentativi (Acinetobacter spp, Pseudomonas spp.)

26

Semnificatie exceptionala/absenta: - Stafilococi coagulazo-negativi

- Streptococcus viridans

CONJUNCTIVA

Recoltare cu tampoane umectate in SF steril ambii ochi - pe mediu de transport - cu ansa de platina Frotiu si insamantare imediatTransport: 2 h la temperatura camereiPastrare: 24 h la temperatura camerei 27

RACLAT CORNEAN

Recoltare medicul oftalmologSpatula sterila din ulcere, leziuniFrotiu si insamantare direct pe mediiTransport: 15 min la temperatura camereiPastrare: 24 h la temperatura camerei

JET MIJLOCIU-toaleta locala cu apa/sapun-la femei- indepartarea labiilor-la barbati- retractare preput-recoltare jet mijlociu in flacon cu gura largaTransport: 2h la temperatura camereiPastrare: 24 h la 4C sau cu conservant 24h la temperatura camerei(acid boric)CATETERtoaleta locala cu apa/sapunse insera aseptic cateterul in vezicase lasa sa curga ~ 15mlrecoltare in flacon steril

28

Comunicarea rezultatelor

Un singur izolat in concentratie >105UFC/ml urina semnificativ izolare, identificare, antibiograma

Doua tipuri de izolate, fiecare in concentratie >105UFC/ml urina cel mai frecvent = contaminare

Mai multe bacterii izolate, in concentratie de cca. 105UFC/ml urina fiecare=contaminare grosiera sau multiplicare a germenilor

29

O singura specie izolata, in concentratie de 10 UFC/ml urina posibil semnificativ

Levuri in concentratie 10 UFC/ml urina semnificativ

Stafilococi in concentratie de 5 10 UFC/ml urina semnificativ

Escherichia coliProteus mirabilisKlebsiella pneumoniaeEnterococi Enterobacter aerogenesPseudomonas aeruginosaProteus vulgarisSerratia marcescensStafilococi coagulazo-negativiStafilococcus aureus89%3.5%2.5%2%0.5%0.5%0.5%

Culturi de rutinaFecale proaspat emisePortiuni cu mucus, puroi, sangeCantitate ~ 2gTransport: - flacon fara mediu 1h la temperatura camerei - flacon cu mediu 24h la temperatura camereiPastrare: - fara mediu 24h la 4C - cu mediu 48 h la 4C sau la temperatura camerei31

CULTURI SPECIALE

Cu tampon rectal pentru: -N.gonorrhoeae -Shigella - Campylobacter - portajul de32

Streptococ grup B

Recoltare: - se introduce tamponul ~ 2.5 cm in rect - se roteste - necesar materii fecale vizibile pe tamponTransport: 2h la temperatura camereiPastrare: in mediu de transport 24h la temperatura camerei

SECRETIE VAGINALA

-indepartarea secretiei vechi-2 tampoane de pe mucoasa(cu mediu de transport)Transport: 2h la temperatura camereiPastrare: 24 h la temperatura camereiSTERILET :recoltare in flacon steril numai pentru vaginoza (suficient frotiul).SECRETIE CERVICALA-vizualizare cervixspeculum fara lubrifiantiindepartarea mucusului cervical -recoltare cu alt tampon din canalul endocervicalTransport: cu mediu 2h la temperatura camereiPastrare: cu mediu 24h la temperatura camerei N. gonorrhoeae insamantare imediatChlamydia indicatiile din trusa 33

URETRA-se insera un tampon special 2-4 cm pe uretra -se roteste-se lasa ~ 2 sec.-se introduce in mediul de transportTransport: 2 h la temperatura camereiPastrare: 24 h la temperatura camerei

PROSTATA-spalarea meatului urinar cu apa si sapun-efectuarea masajului prostatic-recoltare in tub steril a lichidului prostaticTransport: 2 h la temperatura camereiPastrare: 24 h la temperatura camereiAlternativ : - urina inainte/dupa masaj - sperma

34

IndicatiiOrice diaree sau dizenterieOrice colopatieOrice sindrom dureros abdominalOrice enterita

35

DE EVITAT

Medicamentele opace nonabsorbabile

Alimentele care produc multe reziduuri

Consistenta anormala a materiilor fecale(prea dure sau prea diluate)

36

RECOMANDAT

3 ex. coproparazitologice la cateve zile interval (de preferat 7 zile) din scaun emis spontan - NU 3 zile consecutiv

Pregatirea corecta a pacientului

RECOLTARE

In recipient de plastic, transparent, curat, uscat, cu capac (inchis ermetic)

Etichetat corespunzator37

Materiile fecale nu trebuie sa fie amestecate cu urina, hartie igienica sau alte resturi

Recipientul va fi umplut (se evita astfel riscul exploziei datorita fermentarii)

NU DA INFORMATII

Cand calea de eliminare a parazitului nu este intestinala (ex. Trichomonas vaginalis) sau parazitoza este tisulara (ex. hidatidoza, toxocaroza)

Cand parazitul are ponta in pliurile anale(ex.Enterobius vermicularis)38

Cand parazitul este imatur/steril si nu produce oua: - parazitism cu un mascul de Ascaris lumbricoides - parazitul este prea tanar sa se reproduca - prelevarea s-a facut intr-o faza "muta coprologic", prezenta la majoritatea parazitozelor digestive.

Recoltare corecta = Rezultat corect

3.1.1Metode de laborator de uz curent, vol. II, 1977, pag.1093.1.2Bacteriologie medicala volumul I si II, editia 1985, Balbaie si Pozsgi3.1.3 Pocket guide to Clinical Microbiology 2-nd Edition Patrick R. Murray, ASM-Press, Washington DC19983.1.4Clinical Manual of microbiology Patrick R. Murray, 20073.1.5 Clinical MicrobiologyProcedures Handbook Second Edition, Henry D. Isenberg, vol 1,2 si 3, 20043.1.6 NCCLS/CLSI 2007, Performance Standards for Antimicribial Susceptibility Testing; Clinical and Laboratory Standard Institute3.1.7 Asigurarea calitii microorganismelor Pstrare Procesare ntreinere MICROBIOLOGICS 3.1.8 Human Parasitology, Burton J. Bogitsh, Clint E. Carter, Thomas N. Oeltman, Academic Press 20053.1.9 RAPID REVIEW MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY, 2ND EDITION, KEN ROSENTHAL, MOSBY (PAPERBACK) 2007